專(zhuān)利名稱(chēng)：一種何首烏多糖的提取純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以何首烏為原料提取純化何首烏多糖的方法。
背景技術(shù)：
何首烏多糖是從何首烏中提取而得的一種水溶性多糖，具有抗衰老、免疫調(diào)節(jié)等作用，是何首烏延緩腎組織衰老重要功效成分，何首烏具有補(bǔ)肝腎等作用，是成藥尿毒清膠囊重要味藥之一，何首烏多糖在慢性腎功能衰竭等疾病治療方面具有廣闊的前景。市售何首烏多糖因含色素等雜質(zhì)致何首烏多糖色澤較深且不穩(wěn)定。常規(guī)活性碳吸附方法無(wú)法除盡色素，過(guò)氧化氫法易致何首烏多糖氧化而影響何首烏多糖功效，何首烏多糖成分提取純化脫色方法的研究顯得尤為重要
發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種能夠提高何首烏多糖提取物中何首烏多糖純度，有效脫去色素的方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為一種能夠提高何首烏多糖提取物中何首烏多糖純度，有效脫去色素的方法，其包括將經(jīng)脫脂、乙醇溶液預(yù)處理的何首烏原料加水進(jìn)行水浴回流提取，然后將提取液濃縮，醇沉得何首烏多糖粗提物，再用大孔吸附樹(shù)脂脫色純化。所述的加水進(jìn)行水浴回流提取，所加的水的質(zhì)量為經(jīng)過(guò)預(yù)處理的何首烏原料的6 10倍。所述的加水進(jìn)行水浴回流提取的次數(shù)為2 5次，提取時(shí)間為每次I 3小時(shí)，每次提取完后將提取液趁熱過(guò)濾。所述的預(yù)處理的何首烏原料可由下列方法制得將何首烏藥材用石油醚(60 900C )按質(zhì)量體積比為I : 8，在70 90°C恒溫下水浴回流提取0. 5 2小時(shí)，重復(fù)2 4次進(jìn)行脫脂；將脫脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按質(zhì)量體積比為I : 8，在75 90°C恒溫下水浴回流提取I 3小時(shí)，重復(fù)3 6次，過(guò)濾，濾液棄之，減壓干燥，揮干原料表面的溶劑。所述的將提取液濃縮，醇沉得何首烏多糖粗提物包括下列步驟將提取液減壓濃縮至原體積的1/3，冷卻后加入6倍體積的無(wú)水乙醇，4 8°C靜置過(guò)夜，以轉(zhuǎn)速為3000 5000r/min離心10 30分鐘，取沉淀即得何首烏多糖粗取物。所述的用大孔樹(shù)脂脫色純化包括下列步驟將何首烏多糖粗取物配制成5 15g/I的水溶液，以何首烏多糖粗取物和HP20大孔吸附樹(shù)脂質(zhì)量比按0. I I 0. 3 I的比例混勻，置于往復(fù)振蕩器上振搖4 8小時(shí)后過(guò)濾得多糖水溶液再以HP20大孔吸附樹(shù)脂4 8倍干重的水沖洗大孔樹(shù)脂，過(guò)濾。合并濾液和多糖水溶液，濃縮，減壓干燥。本發(fā)明提供的何首烏多糖提取方法是以經(jīng)石油醚進(jìn)行脫脂，乙醇溶液預(yù)處理的何首烏原料用水提醇沉法來(lái)提取何首烏多糖，并利用HP20大孔吸附樹(shù)脂將何首烏多糖脫色純化。該方法能夠在不損害何首烏多糖的結(jié)構(gòu)和活性的前提下，除去何首烏多糖中存在的大部分色素，提高何首烏多糖的純度。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一本發(fā)明提供的以何首烏為原料提取純化何首烏多糖的方法可按照下列步驟順序進(jìn)行將除去雜質(zhì)的何首烏粉碎，用石油醚(60 90°C )按質(zhì)量體積比為I : 8，在90°C恒溫下水浴回流提取0. 5小時(shí)，重復(fù)2次進(jìn)行脫脂；將脫脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按質(zhì)量體積比為I : 8，在90°C恒溫下水浴回流提取I小時(shí)，重復(fù)4次，過(guò)濾，濾液棄之，減壓干燥，揮干原料表面的溶劑得到經(jīng)預(yù)處理的何首烏原料；在上述經(jīng)預(yù)處理的何首烏原料中加入6倍質(zhì)量的水，水浴回流提取4次，每次2. 5小時(shí)并趁熱過(guò)濾提取液；將提取液減壓
濃縮至原體積的1/3,冷卻后加入6倍體積的無(wú)水乙醇，8°C靜置過(guò)夜，以轉(zhuǎn)速為5000r/min離心10分鐘，取沉淀即得何首烏多糖粗取物；將何首烏多糖粗取物配制成15g/l的水溶液，以何首烏多糖粗取物和HP20大孔吸附樹(shù)脂質(zhì)量比按0.1 I比例混勻，置于往復(fù)振蕩器上振搖4小時(shí)后過(guò)濾得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附樹(shù)脂4倍干重的水沖洗大孔樹(shù)脂，過(guò)濾。合并濾液和多糖水溶液，濃縮，減壓干燥，得何首烏多糖提取物。實(shí)施例二本發(fā)明提供的以何首烏為原料提取純化何首烏多糖的方法可按照下列步驟順序進(jìn)行將除去雜質(zhì)的何首烏粉碎，用石油醚(60 90°C )按質(zhì)量體積比為I : 8，在70°C恒溫下水浴回流提取2小時(shí)，重復(fù)4次進(jìn)行脫脂；將脫脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按質(zhì)量體積比為I : 8，在75°C恒溫下水浴回流提取3小時(shí)，重復(fù)6次，過(guò)濾，濾液棄之，減壓干燥，揮干原料表面的溶劑得到經(jīng)預(yù)處理的何首烏原料；在上述經(jīng)預(yù)處理的何首烏原料中加入10倍質(zhì)量的水，水浴回流提取2次，每次3小時(shí)并趁熱過(guò)濾提取液；將提取液減壓濃縮至原體積的1/3，冷卻后加入6倍體積的無(wú)水乙醇，4°C靜置過(guò)夜，以轉(zhuǎn)速為3000r/min離心30分鐘，取沉淀即得何首烏多糖粗取物；將何首烏多糖粗取物配制成5g/l的水溶液，以何首烏多糖粗取物和HP20大孔吸附樹(shù)脂質(zhì)量比按0.3 I比例混勻，置于往復(fù)振蕩器上振搖8小時(shí)后過(guò)濾得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附樹(shù)脂8倍干重的水沖洗大孔樹(shù)脂，過(guò)濾。合并濾液和多糖水溶液，濃縮，減壓干燥，得何首烏多糖提取物。實(shí)施例三本發(fā)明提供的以何首烏為原料提取純化何首烏多糖的方法可按照下列步驟順序進(jìn)行將除去雜質(zhì)的何首烏粉碎，用石油醚(60 90°C )按質(zhì)量體積比為I : 8，在80°C恒溫下水浴回流提取I小時(shí)，重復(fù)3次進(jìn)行脫脂；將脫脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按質(zhì)量體積比為I : 8，在80°C恒溫下水浴回流提取2小時(shí)，重復(fù)5次，過(guò)濾，濾液棄之，減壓干燥，揮干原料表面的溶劑得到經(jīng)預(yù)處理的何首烏原料；在上述經(jīng)預(yù)處理的何首烏原料中加入7倍質(zhì)量的水，水浴回流提取5次，每次I小時(shí)并趁熱過(guò)濾提取液；將提取液減壓濃縮至原體積的1/3，冷卻后加入6倍體積的無(wú)水乙醇，5°C靜置過(guò)夜，以轉(zhuǎn)速為4000r/min離心20分鐘，取沉淀即得何首烏多糖粗取物；將何首烏多糖粗取物配制成10g/l的水溶液，以何首烏多糖粗取物和HP20大孔吸附樹(shù)脂質(zhì)量比按0.2 I比例混勻，置于往復(fù)振蕩器上振搖6小時(shí)后過(guò)濾得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附樹(shù)脂6倍干重的水沖洗大孔樹(shù)脂，過(guò)濾。合并濾液和多糖水溶液，濃縮，減壓干燥，得何首烏多糖提取物。實(shí)施例四本發(fā)明提供的以何首烏為原料提取純化何首烏多糖的方法可按照下列步驟順序進(jìn)行將除去雜質(zhì)的何首烏粉碎，用石油醚(60 90°C )按質(zhì)量體積比為I : 8，在85°C恒溫下水浴回流提取I. 5小時(shí)，重復(fù)2次進(jìn)行脫脂；將脫脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按質(zhì)量體積比為I : 8，在85°C恒溫下 水浴回流提取2. 5小時(shí)，重復(fù)3次，過(guò)濾，濾液棄之，減壓干燥，揮干原料表面的溶劑得到經(jīng)預(yù)處理的何首烏原料；在上述經(jīng)預(yù)處理的何首烏原料中加入8倍質(zhì)量的水，水浴回流提取3次，每次2小時(shí)并趁熱過(guò)濾提取液；將提取液減壓濃縮至原體積的1/3,冷卻后加入6倍體積的無(wú)水乙醇，6°C靜置過(guò)夜，以轉(zhuǎn)速為4000r/min離心25分鐘，取沉淀即得何首烏多糖粗取物；將何首烏多糖粗取物配制成12g/l的水溶液，以何首烏多糖粗取物和HP20大孔吸附樹(shù)脂質(zhì)量比按0.15 I比例混勻，置于往復(fù)振蕩器上振搖5小時(shí)后過(guò)濾得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附樹(shù)脂5倍干重的水沖洗大孔樹(shù)脂，過(guò)濾。合并濾液和多糖水溶液，濃縮，減壓干燥，得何首烏多糖提取物。
權(quán)利要求
1.一種能夠提高何首烏多糖提取物申何首烏多糖純度，有效脫去色素的方法，其包括將經(jīng)脫脂、乙醇溶液預(yù)處理的何首烏原料加水進(jìn)行水浴回流提取，然后將提取液濃縮，醇沉得何首烏多糖粗提物，再用大孔吸附樹(shù)脂脫色純化。
2.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的加水進(jìn)行水浴回流提取，所加的水質(zhì)量為經(jīng)過(guò)預(yù)處理的何首烏原料的6 10倍。
3.如權(quán)利要求I所述的的制備方法，其特征在于所述的加水進(jìn)行水浴回流提取的次數(shù)為2 5次，提取時(shí)間為每次I 3小時(shí)，每次提取完后將提取液趁熱過(guò)濾。
4.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的預(yù)處理的何首烏原料可由下列方法制得將何首烏藥材用石油醚(60 90°C )按質(zhì)量體積比為I : 8，在70 90°C恒溫下水浴回流提取0. 5 2小時(shí)，重復(fù)2 4次進(jìn)行脫脂；將脫脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按質(zhì)量體積比為I : 8，在75 90°C恒溫下水浴回流提取I 3小時(shí)，重復(fù)3 6次，過(guò)濾，濾液棄之，減壓干燥，揮干原料表面的溶劑。
5.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的將提取液濃縮，醇沉得何首烏多糖粗提物包括下列步驟將提取液減壓濃縮至原體積的1/3，冷卻后加入6倍體積的無(wú)水乙醇，4 8°C靜置過(guò)夜，以轉(zhuǎn)速為4000 6000r/min離心10 30分鐘，取沉淀即得何首烏多糖粗取物。
6.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的用大孔樹(shù)脂脫色純化包括下列步驟將何首烏多糖粗取物配制成5 15g/l的水溶液，以何首烏多糖粗取物和HP20大孔吸附樹(shù)脂質(zhì)量比按0.1 I 0.3 I的比例混勻，置于往復(fù)振蕩器上振搖4 8小時(shí)后過(guò)濾得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附樹(shù)脂4 8倍干重的水沖洗大孔樹(shù)脂，過(guò)濾。合并濾液和多糖水溶液，濃縮，減壓干燥。
7.如權(quán)利要求I 6任一項(xiàng)所述的制備方法制得的何首烏多糖提取物。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種何首烏多糖提取純化方法，該制備方法包括將經(jīng)脫脂、乙醇溶液預(yù)處理的何首烏原料加水進(jìn)行水浴回流提取，然后將提取液濃縮，醇沉得何首烏多糖粗提物，再用大孔吸附樹(shù)脂脫色純化得何首烏多糖提取物。本發(fā)明能夠在不損害何首烏多糖的結(jié)構(gòu)和活性的前提下，除去何首烏多糖申存在的大部分色素等雜質(zhì)，提高何首烏多糖的純度。
文檔編號(hào)C08B37/00GK102731667SQ20111009265
公開(kāi)日2012年10月17日 申請(qǐng)日期2011年4月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月12日
發(fā)明者楊大瑋, 譚智麗, 馬麟 申請(qǐng)人:楊大瑋, 譚智麗, 馬麟