專利名稱:用于多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化的試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型屬于生物實(shí)驗(yàn)器材技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種用于多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化的試劑盒，其包括盒體和盒蓋，盒蓋蓋合于盒體上；該試劑盒還包括：用于盛放細(xì)胞培養(yǎng)液的第一試劑瓶、用于盛放細(xì)胞培養(yǎng)液添加劑的第二試劑瓶、用于盛放細(xì)胞分化液添加劑的第三試劑瓶、用于盛放細(xì)胞分選液添加劑的第四試劑瓶以及用于將上述試劑瓶固定安置于盒體內(nèi)的固定件；固定件上設(shè)有與上述試劑瓶對(duì)應(yīng)的安裝槽；固定件設(shè)于盒體內(nèi)，試劑瓶設(shè)于安裝槽內(nèi)。本實(shí)用新型將多個(gè)裝有不同試劑的試劑瓶集中放置于一個(gè)試劑盒內(nèi)，試劑盒用于將多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化為間充質(zhì)干細(xì)胞，其具有簡(jiǎn)單可行、省時(shí)省力、低價(jià)高效、產(chǎn)量高等的優(yōu)點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】
用于多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化的試劑盒
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本實(shí)用新型屬于生物實(shí)驗(yàn)器材技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種用于多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化的試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal Stem Cells，簡(jiǎn)稱MSC)是一類具有自我更新能力和多向分化潛能的未分化細(xì)胞，最早在骨髓中被發(fā)現(xiàn)，目前已成功在骨髓、臍帶、胎盤(pán)、脂肪、牙髓等多種組織中分離獲得。MSC由于來(lái)源廣泛且具有良好的體外增殖能力和低免疫原性，被認(rèn)為是細(xì)胞治療和組織工程研究的良好資源，但它們?cè)诔墒旖M織中的含量低、增殖次數(shù)有限且增殖能力隨著供者年齡的增長(zhǎng)而下降，這些都限制了它們?cè)谂R床中的應(yīng)用，因此尋找一種新的MSC細(xì)胞來(lái)源非常重要。
[0003]多能干細(xì)胞(Pluripotent Stem Cells，PSC)包括胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，具有無(wú)限增殖能力和分化全能性，能分化成內(nèi)、中、外三個(gè)胚層的細(xì)胞，在細(xì)胞治療和再生醫(yī)學(xué)中有巨大的應(yīng)用前景。從PSC分化獲得MSC是一種新的MSC細(xì)胞來(lái)源途徑，也是PSC安全和有效的使用方法，目前已通過(guò)共培養(yǎng)和擬胚體培養(yǎng)等方式獲得MSC，但存在耗時(shí)費(fèi)力、效率低和產(chǎn)量不足等問(wèn)題，因此開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單可行、低價(jià)高效的PSC體外培養(yǎng)和分化試劑盒，獲得足夠數(shù)量的MSC十分重要。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0004]本實(shí)用新型的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，提供了一種簡(jiǎn)單可行的可用于多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化的試劑盒。
[0005]本實(shí)用新型是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種用于多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化的試劑盒，包括盒體和盒蓋，所述盒蓋蓋合于所述盒體上，該試劑盒還包括:
[0006]用于盛放細(xì)胞培養(yǎng)液的第一試劑瓶；
[0007]用于盛放細(xì)胞培養(yǎng)液添加劑的第二試劑瓶；
[0008]用于盛放細(xì)胞分化液添加劑的第三試劑瓶；
[0009]用于盛放細(xì)胞分選液添加劑的第四試劑瓶；以及
[0010]用于將所述第一試劑瓶、所述第二試劑瓶、所述第三試劑瓶和所述第四試劑瓶固定安置于所述盒體內(nèi)的固定件；
[0011]所述固定件上設(shè)有分別與所述第一試劑瓶、所述第二試劑瓶、所述第三試劑瓶和所述第四試劑瓶對(duì)應(yīng)的第一安裝槽、第二安裝槽、第三安裝槽和第四安裝槽；
[0012]所述固定件設(shè)于所述盒體內(nèi)，所述第一試劑瓶、所述第二試劑瓶、所述第三試劑瓶和所述第四試劑瓶分別設(shè)于所述第一安裝槽、所述第二安裝槽、所述第三安裝槽和所述第四安裝槽內(nèi)。
[0013]進(jìn)一步地，所述第一試劑瓶裝有D-MEM/F12液體培養(yǎng)基、knockout D-MEM/F12液體培養(yǎng)基、胎牛血清、小牛血清或knockout血清替代物。
[0014]優(yōu)選地，該試劑盒包括兩個(gè)所述第一試劑瓶，兩個(gè)所述第一試劑瓶分別裝有D-MEM/F12液體培養(yǎng)基和knockout血清替代物。
[0015]更進(jìn)一步地，該試劑盒包括兩個(gè)所述第二試劑瓶，兩個(gè)所述第二試劑瓶分別裝有含NEAA的無(wú)菌蒸餾水溶液和含bFGF的無(wú)菌蒸餾水溶液。
[0016]具體地，該試劑盒包括兩個(gè)所述第三試劑瓶，兩個(gè)所述第三試劑瓶分別裝有含PDGF AB的無(wú)菌蒸餾水溶液和含EGF的無(wú)菌蒸餾水溶液。
[0017]進(jìn)一步地，所述第四試劑瓶裝有含結(jié)合抗⑶105磁珠的生理鹽水，其中磁珠濃度為I X 107-4 X 107個(gè)磁珠/mL。
[0018]更進(jìn)一步地，所述固定件四周設(shè)有折邊。
[0019]具體地，所述第一試劑瓶、所述第二試劑瓶、所述第三試劑瓶和所述第四試劑瓶均包括瓶體和瓶蓋，所述瓶蓋蓋合于所述瓶體上。
[0020]進(jìn)一步地，所述盒蓋鉸接于所述盒體上。
[0021]更進(jìn)一步地，所述盒體的開(kāi)口處設(shè)有凸緣，所述盒蓋上設(shè)有與所述凸緣互補(bǔ)的凹槽。
[0022]本實(shí)用新型將多個(gè)裝有不同試劑的試劑瓶集中放置于一個(gè)試劑盒內(nèi)，只需要一個(gè)這樣的試劑盒就能夠完成體外培養(yǎng)、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(PSC)分化為間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的操作并能快速獲得需要的MSC。本實(shí)用新型的試劑盒用于將多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化為間充質(zhì)干細(xì)胞，其具有簡(jiǎn)單可行、省時(shí)省力、低價(jià)高效、產(chǎn)量高等的優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說(shuō)明】

[0023]圖1為本實(shí)用新型實(shí)施例中試劑盒的立體示意圖，其盒蓋處于開(kāi)啟狀態(tài)；
[0024]圖2為本實(shí)用新型實(shí)施例中試劑盒的立體示意圖，其盒蓋處于閉合狀態(tài)；
[0025]圖3為本實(shí)用新型實(shí)施例中試劑盒的爆炸圖；
[0026]圖4為本實(shí)用新型實(shí)施例中試劑盒另一視角的爆炸圖；
[0027]圖5為本實(shí)用新型中試劑瓶的第一種實(shí)施方式；
[0028]圖6為本實(shí)用新型中試劑瓶的第二種實(shí)施方式；
[0029]圖7為本實(shí)用新型中試劑瓶的第三種實(shí)施方式。
【具體實(shí)施方式】
[0030]為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本實(shí)用新型，并不用于限定本實(shí)用新型。
[0031]參見(jiàn)圖1-4，本實(shí)用新型實(shí)施例提供了一種用于多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化的試劑盒I，包括盒體2和盒蓋3，盒蓋3蓋合于盒體2上;該試劑盒I還包括:
[0032]用于盛放細(xì)胞培養(yǎng)液的第一試劑瓶；
[0033]用于盛放細(xì)胞培養(yǎng)液添加劑的第二試劑瓶；
[0034]用于盛放細(xì)胞分化液添加劑的第三試劑瓶；
[0035]用于盛放細(xì)胞分選液添加劑的第四試劑瓶；以及
[0036]用于將第一試劑瓶、第二試劑瓶、第三試劑瓶和第四試劑瓶固定安置于盒體3內(nèi)的固定件12;
[0037]標(biāo)號(hào)4、5、6、7、8、9、10、11所指的均為試劑瓶，參見(jiàn)圖5_圖7，本實(shí)施例為試劑瓶提供了三種實(shí)施方式，其中標(biāo)號(hào)25、27、29所指的均為瓶體，標(biāo)號(hào)26、28、30所指的均為瓶蓋，瓶蓋蓋合于瓶體上。在本實(shí)施例中，試劑瓶4、5選用了第三種實(shí)施方式(圖7)，試劑瓶6、7、8選用了第一種實(shí)施方式(圖5)，試劑瓶9、10、11選用了第二種實(shí)施方式(圖6)。這些試劑瓶可以根據(jù)需要分別界定為上述的第一試劑瓶、第二試劑瓶、第三試劑瓶和第四試劑瓶。作為本實(shí)用新型的一種【具體實(shí)施方式】，本實(shí)施例中的試劑瓶4、5、6界定為第一試劑瓶，試劑瓶7、8界定為第二試劑瓶，試劑瓶9、10界定為第三試劑瓶，試劑瓶11界定為第四試劑瓶。
[0038]本實(shí)用新型的固定件12上設(shè)有分別與第一試劑瓶、第二試劑瓶、第三試劑瓶和第四試劑瓶對(duì)應(yīng)的第一安裝槽、第二安裝槽、第三安裝槽和第四安裝槽。標(biāo)號(hào)13、14、15、16、17、18、19、20所指的均為安裝槽，為了能夠與上述【具體實(shí)施方式】的試劑瓶對(duì)應(yīng)，安裝槽13、14、15界定為第一安裝槽，安裝槽16、17界定為第二安裝槽，安裝槽18、19界定為第三安裝槽，安裝槽20界定為第四安裝槽。
[0039]固定件12設(shè)于盒體2內(nèi)，第一試劑瓶、第二試劑瓶、第三試劑瓶和第四試劑瓶分別設(shè)于第一安裝槽、第二安裝槽、第三安裝槽和第四安裝槽內(nèi)。
[0040]本實(shí)用新型將多個(gè)裝有不同試劑的試劑瓶集中放置于一個(gè)試劑盒I內(nèi)，只需要一個(gè)這樣的試劑盒就能夠完成體外培養(yǎng)、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(PSC)分化為間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的操作并能快速獲得需要的MSC。本實(shí)用新型的試劑盒用于將多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化為間充質(zhì)干細(xì)胞，其具有簡(jiǎn)單可行、省時(shí)省力、低價(jià)高效、產(chǎn)量高等的優(yōu)點(diǎn)。
[0041 ] 具體地，第一試劑瓶可以裝(盛放)有D-MEM/F12液體培養(yǎng)基、knockout D-MEM/F12液體培養(yǎng)基、胎牛血清、小牛血清或knockout血清替代物，這些試劑都屬于細(xì)胞培養(yǎng)液。作為一種優(yōu)選實(shí)施方式，該試劑盒包括至少兩個(gè)第一試劑瓶，兩個(gè)第一試劑瓶分別裝有D-MEM/F12液體培養(yǎng)基和knockout血清替代物。在本實(shí)施例中，試劑盒I包括三個(gè)第一試劑瓶(4、5、6 )，其中試劑瓶4和5裝有D-MEM/F12液體培養(yǎng)基，試劑瓶6裝有knockout血清替代物。
[0042]在本實(shí)施例中，該試劑盒包括兩個(gè)第二試劑瓶(7、8)，兩個(gè)第二試劑瓶分別裝有含NEAA的無(wú)菌蒸餾水溶液和含bFGF的無(wú)菌蒸餾水溶液，這兩種溶液都屬于細(xì)胞培養(yǎng)液添加劑。
[0043]該試劑盒包括兩個(gè)第三試劑瓶(9、10)，兩個(gè)第三試劑瓶分別裝有含PDGFAB的無(wú)菌蒸餾水溶液和含EGF的無(wú)菌蒸餾水溶液，這兩種溶液屬于細(xì)胞分化液添加劑。
[0044]第四試劑瓶11裝有含結(jié)合抗CD105磁珠的生理鹽水，其屬于細(xì)胞分選液添加劑，其中磁珠濃度為I X 107-4 X 107個(gè)磁珠/mL。
[0045]進(jìn)一步地，固定件12四周設(shè)有折邊21、22、23，由于視角的關(guān)系，圖3和圖4未標(biāo)出位于固定件12背后的那個(gè)折邊。折邊起到支撐整個(gè)固定件12的作用，這種結(jié)構(gòu)的固定件可以節(jié)省制造材料。
[0046]附圖所示的盒蓋3鉸接于盒體2上，當(dāng)然，盒蓋3與盒體2之間可以分體設(shè)置。
[0047]為使盒蓋3與盒體2之間能夠緊密結(jié)合，盒體2的開(kāi)口處設(shè)有凸緣31，盒蓋3上設(shè)有與凸緣31互補(bǔ)的凹槽32。
[0048]在進(jìn)行多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化時(shí)，從試劑盒中取出所需的試劑瓶，配合使用即可。
[0049]本實(shí)用新型中術(shù)語(yǔ)“第一”、“第二”等詞僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對(duì)重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此，限定有“第一”、“第二”等詞的特征可以明示或者隱含地包括一個(gè)或者更多個(gè)該特征。
[0050]以上所述僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本實(shí)用新型，凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換或改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)和分化的試劑盒，包括盒體和盒蓋，所述盒蓋蓋合于所述盒體上，其特征在于，該試劑盒還包括: 用于盛放細(xì)胞培養(yǎng)液的第一試劑瓶； 用于盛放細(xì)胞培養(yǎng)液添加劑的第二試劑瓶； 用于盛放細(xì)胞分化液添加劑的第三試劑瓶； 用于盛放細(xì)胞分選液添加劑的第四試劑瓶；以及 用于將所述第一試劑瓶、所述第二試劑瓶、所述第三試劑瓶和所述第四試劑瓶固定安置于所述盒體內(nèi)的固定件； 所述固定件上設(shè)有分別與所述第一試劑瓶、所述第二試劑瓶、所述第三試劑瓶和所述第四試劑瓶對(duì)應(yīng)的第一安裝槽、第二安裝槽、第三安裝槽和第四安裝槽； 所述固定件設(shè)于所述盒體內(nèi)，所述第一試劑瓶、所述第二試劑瓶、所述第三試劑瓶和所述第四試劑瓶分別設(shè)于所述第一安裝槽、所述第二安裝槽、所述第三安裝槽和所述第四安裝槽內(nèi)。2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于:所述第一試劑瓶裝有D-MEM/F12液體培養(yǎng)基、knockout D-MEM/F12液體培養(yǎng)基、胎牛血清、小牛血清或knockout血清替代物。3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于:包括兩個(gè)所述第一試劑瓶，兩個(gè)所述第一試劑瓶分別裝有D-MEM/F12液體培養(yǎng)基和knockout血清替代物。4.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于:包括兩個(gè)所述第二試劑瓶，兩個(gè)所述第二試劑瓶分別裝有含NEAA的無(wú)菌蒸餾水溶液和含bFGF的無(wú)菌蒸餾水溶液。5.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于:包括兩個(gè)所述第三試劑瓶，兩個(gè)所述第三試劑瓶分別裝有含PDGF AB的無(wú)菌蒸餾水溶液和含EGF的無(wú)菌蒸餾水溶液。6.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于:所述第四試劑瓶裝有含結(jié)合抗CD105磁珠的生理鹽水，其中磁珠濃度為I X 107-4X 17個(gè)磁珠/mL。7.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于:所述固定件四周設(shè)有折邊。8.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于:所述第一試劑瓶、所述第二試劑瓶、所述第三試劑瓶和所述第四試劑瓶均包括瓶體和瓶蓋，所述瓶蓋蓋合于所述瓶體上。9.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于:所述盒蓋鉸接于所述盒體上。10.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于:所述盒體的開(kāi)口處設(shè)有凸緣，所述盒蓋上設(shè)有與所述凸緣互補(bǔ)的凹槽。
【文檔編號(hào)】C12M3/00GK205710772SQ201620371853
【公開(kāi)日】2016年11月23日
【申請(qǐng)日】2016年4月28日
【發(fā)明人】張家文, 張曦, 孫長(zhǎng)斌, 賈佳, 李啟沅
【申請(qǐng)人】深圳華大基因研究院