專利名稱：一種肽、一種支氣管擴張劑，和一種血流促進劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新肽、一種支氣管擴張劑和一種血流促進劑。
背景技術(shù)：
VIP(血管活性腸肽)是一類稱為腦-腸肽的生理活性物質(zhì)，其活性為促進血流和降低血壓。VIP是1970年從豬的小腸提取的，它由28個氨基酸殘基構(gòu)成(S.I.Said，V.Mutt科學(xué)(Science)，169，1217(1970))。
PACAP(垂體腺苷酸環(huán)化酶激活多肽)是1989年在一套用作培養(yǎng)的垂體細(xì)胞的腺苷酸環(huán)化酶激活指標(biāo)的生物測定系統(tǒng)中從綿羊的下丘腦分離的，它是一種由38個氨基酸殘基組成的結(jié)構(gòu)上已確定的肽(A.Miyata，A.Arimura等，生物化學(xué)生物物理學(xué)研究通訊(BiochemBiophys.Res.Commun)，164，567(1989))。PACAP N末端的27個氨基酸殘基具有PACAP活性，并且所述27個氨基酸的氨基酸序列與VIP的具有相當(dāng)?shù)南嗨平Y(jié)構(gòu)。
VIP和PACAP在氨基酸序列上與腸促胰液肽，胰高糖素類似，因而被歸類入屬于胰高糖素族的肽。依靠它們對血管擴張和血流促進的強烈作用，VIP和PACAP有希望用于治療潰瘍、凍傷、褥瘡、陽萎等以及用于頭發(fā)的恢復(fù)和生長。此外，VIP和PACAP對呼吸系統(tǒng)中的支氣管平滑肌具有相當(dāng)強的松弛作用，從而減輕由刺激因子如乙酰膽堿、組胺、血清素等引起的平滑肌收縮。VIP和PACAP的這種松弛作用與通過腎上腺素β2受體引起的松弛作用不同在于普遍支氣管擴張，所以VIP和PACAP可望對于β2受體刺激素不能有效起作用的難治性哮喘性痙攣具有治療效果。
除VIP和PACAP以外，還已知道一種含28至31個氨基酸殘基的肽具有支氣管擴張作用，降低血壓作用和恢復(fù)頭發(fā)作用(見日本專利申請公開出版物(Japanese Patent Application Laid-OpenPublication)第246595/87、83012/89和297498/92號)。
然而，還希望發(fā)展一種在支氣管擴張作用和血流增加作用的持久性方面優(yōu)于VIP、PACAP和其它肽的支氣管擴張劑和血流促進劑。
本發(fā)明的內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種在支氣管擴張的持久性方面優(yōu)異并且在血流提高作用方面優(yōu)異的一種新的肽，包含該肽作為活性成分的支氣管擴張劑和血流促進劑。
本發(fā)明提供由下列通式(I)代表的一種肽H-His-Ser-Asp-A-B-Phe-Thr-Asp-C-Tyr-D-Arg-E-Arg-F-Gln-G-Ala-Val-I-J-Tyr-Leu-K-L-M-Leu-N(1)其中A是Ala或Gly；B是Ile或Val；C是Asn或Ser；D是Thr或Ser；E是Leu或Tyr；F、I和J之每一個是Lys或Arg，至少F、I和J是Arg；G是Met，Leu或nLeu；K是Asn或Ala；L是Ser或Ala；M是Ile或Val；和N是-NH2或Asn-NH2，排除以下組合其中A是Ala，B是Val，C是Asn，D是Thr，E是Leu，K是Asn，L是Ser，M是Ile，和N是Asn-NH2，或通式(2)H-His-Ser-Asp-A-B-Phe-Thr-Asp-C-Tyr-D-Arg-E-Arg-F-Gln-G-Ala-Val-I-J-Tyr-Leu-K-L-M-Leu-P-Gly-Q-R(2)其中A、B、C、D、E、F、G、I、J、K、L和M具有同上相同定義；至少F、I和J之一是Arg；P是Asn或一個化學(xué)鍵；Q是Lys，Arg，Lys-Arg，Arg-Arg或一個化學(xué)鍵；且R是-OH或-NH2，或其可藥用鹽。
進一步，本發(fā)明提供一種包含所述肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的支氣管擴張劑。
另外，本發(fā)明還提供一種包含所述肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的血流促進劑。
另外，本發(fā)明提供包含所述肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽和一種藥物學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。
另外，本發(fā)明提供一種擴張支氣管的方法，它包含在人類中施用有效量的所述肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
另外，本發(fā)明還提供一種促進血流的方法，它包含在人類中施用有效量的所述肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
另外，本發(fā)明提供所述肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽在擴張支氣管方面的用途。
另外，本發(fā)明提供所述肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽在促進血流方面的用途。
本發(fā)明的肽或其鹽在平滑肌的松弛作用所導(dǎo)致的支氣管擴張作用的持續(xù)性方面是優(yōu)越的。因此，本發(fā)明的肽和其鹽可用作支氣管擴張劑。
此外，本發(fā)明的肽或其鹽在血流促進作用和其持久性方面是優(yōu)越的。因此，本發(fā)明的肽或其鹽也可用作血流促進劑并且它能在低濃度對血流表現(xiàn)促進作用。
本說明書中氨基酸，肽，保護基團，溶劑等的縮略語依從根據(jù)純理論和應(yīng)用化學(xué)國際聯(lián)合會(International Union of Pure andApplied Chemistry)(IUPAC)或生物化學(xué)國際聯(lián)合會(InternationalUnion of Biochemistry)(IUB)的縮略語或本領(lǐng)域的常規(guī)縮略語。實例顯示如下。如果氨基酸等可有光學(xué)異構(gòu)體，則除非特別指出均指左旋異構(gòu)體。His組氨酸殘基Ser絲氨酸殘基Asp天冬氨酸殘基Ala丙氨酸殘基Val纈氨酸殘基Phe苯丙氨酸殘基Thr蘇氨酸殘基Tyr酪氨酸殘基Asn天冬酰胺殘基Leu亮氨酸殘基Arg精氨酸殘基Lys賴氨酸殘基Gln谷氨酰胺殘基Met蛋氨酸殘基Ile異亮氨酸殘基Gly甘氨酸殘基Nle正亮氨酸殘基Boc叔-丁基氧羰基 Aoct-戊基氧羰基Bzl芐基基團 z 芐氧基羰基Tos對-甲苯磺酰基團 OBut叔-丁酯OMe甲酯 OBz芐基酯ONP對-硝基苯酯 Bom芐氧甲基基團TFA三氟乙酸 THF四氫呋喃DCM二氯甲烷 DMF二甲基甲酰胺DDC二環(huán)己基碳二亞胺WSCN-乙基-N′-二甲基氨基丙基-碳化二亞胺OSuN-羥基琥珀酰亞氨酯HOSuN-羥基琥珀酰亞氨HOBt1-羥基苯并三唑DIEA二異丙基乙胺上面通式(1)或(2)代表的肽可通過用于合成已知肽的常規(guī)方法生產(chǎn)。例如，這些肽可以按如下方法生產(chǎn)，如疊氮化物方法、酰基氯方法、酸酐方法、混合酸酐方法、DCC方法、活性酯方法(對-硝基苯酯方法，N-羥基琥珀酰亞胺酯方法，氰甲基酯方法等)，一種使用Woodward試劑K的方法，羰基咪唑方法，氧化-還原方法，DCC-加成(HONB，HOBt，HOSu)方法等，按照如下列書中描述的方法“肽”(The Peptides)Vol.1(1966)〔Schreder和Luhke學(xué)術(shù)出版社，(Academic Press)，紐約，美國〕或“Peputido Gosei”(肽合成)〔Izumiya等，Maruzen K.K.(1975)，日本〕。這些方法可應(yīng)用于固相合成和液相合成方法。按照用于合成常規(guī)多肽的上述方法，目標(biāo)肽可以逐步延長方法生產(chǎn)，即所述肽中的每個氨基酸順次連接于C-末端氨基酸，或以片段縮合方法生產(chǎn)，即先合成所述肽中的部分片段然后再將它們互相連接。
例如，逐步延長方法中的固相合成可采用Merrifield，R.B.的方法(固相肽合成，美國化學(xué)會志(Solid Phase Peptide Syntbesis，J.AmerChem.Soc.，)85，2149-2159(1963))如下目標(biāo)肽(即，在本發(fā)明中，上述通式(1)或(2)的氨基酸序列)的C-末端氨基酸在其氨基基團被保護并隨后連接于具有能與羧基基團結(jié)合的功能性基團的不溶性樹脂。氨基基團隨后被去保護，下一個氨基酸在其氨基基團被保護下連接于此游離氨基基團。這些步驟被重復(fù)許多次，從而延長氨基酸鏈直至通式(1)或(2)的1-位的組氨酸殘基。然后將如此獲得的肽從樹脂上裂解下來。
上述方法需要參與氨基酸之間的肽鍵的氨基基團的保護(即，在氨基基團上連接保護性基團)和去保護(即，從氨基基團釋放保護性基團，以及參與氨基酸之間的肽鍵的羧基基團的激活。如果需要，還將保護性基團連接于氨基酸側(cè)鏈中的功能基團。
用于保護氨基基團的保護性基團包括常規(guī)使用的保護性基團。實例為芐氧基羰基(z)，叔-丁基氧羰基(Boc)，t-戊氧羰基(Aoc)，異冰片基氧羰基，對甲氧芐基氧羰基，2-氯-芐氧基羰基，amadantyloxy carbonyl，三氟乙酰基，鄰苯二亞甲基，甲酰基，鄰-硝基苯磺苯基，和二苯基硫膦基。
用于保護羧基基團的保護性基團包括常規(guī)使用的保護性基團。實例為烷基酯如甲酯、乙酯、丙酯、丁酯和叔丁酯、芐基酯、對-硝基芐基酯、甲基芐基酯、對-氯芐基酯、二苯甲基酯、芐氧基羰基肼、叔-丁基氧羰基肼和三苯甲游基酰肼。
參予肽鍵合的羧基基團的激活可按上述任何常規(guī)已知方法進行，并且，在激活中使用的試劑等可選自公知者。羧基基團的激活涉及用各種試劑與所述羧基基團反應(yīng)以形成，例如，它們相應(yīng)的?；?，酸酐或混合酸酐，疊氮化物，和活性酯(例如，酯類如五氯苯酚，對-硝基苯酚，N-羥基琥珀酰亞胺，N-羥基苯并三唑，N-羥基-5-降冰片烯-2，3-聯(lián)羧基酰亞胺等)。
對于在側(cè)鏈中帶有功能性基團的氨基酸優(yōu)選在形成肽鍵的反應(yīng)中該功能性基團被保護。特別地，組氨酸，酪氨酸，蘇氨酸，賴氨酸，天冬氨酸，精氨酸和絲氨酸優(yōu)選在它們的側(cè)鏈中的功能性基團被保護。功能性基團的保護是通過以常規(guī)方法將保護性基團與其連接實現(xiàn)的。在肽合成完成后，保護性基團被釋放。
用于保護組氨酸中亞氨基團的保護性基團包括，例如，芐氧甲基(Bom)，甲苯磺?；?Tos)，芐基(Bzl)，芐氧基羰基(z)和三苯甲游基。
絲氨酸和蘇氨酸中的羥基基團可通過酯化作用或醚化作用被保護，但其保護不是必需的。通過酯化作用引入的保護性基團包括，如，較低的烷?；鶊F如乙酰基等，芳?；鶊F如苯甲酰基等，如碳酸衍生基團如苯甲酰氧基羰基，乙基氧羰基等。通過醚化作用引入的保護性基團的優(yōu)選實例為芐基(Bzl)，四氫吡喃基和叔-丁基。
用于保護酪氨酸中羥基基團的保護性基團包括，如芐基(Bzl)，溴芐氧基羰基(Brz)，二氯芐基(Cl2-Bzl)，芐氧基羰基(z)，乙?；?，和甲苯磺酰(Tos)基。
用于賴氨酸中保護氨基基團的保護性基團包括如芐氧基羰基(z)，氯芐氧基羰基(Cl-z)，二氯芐基(Cl2-Bzl)，叔-丁基氧羰基(Boc)，和甲苯磺酰(Tos)。
用于保護精氨酸中胍基基團的保護性基團包括如甲苯磺酰(Tos)，硝基，芐氧基羰基(z)，和t-戊基氧羰基(Aoc)。
天冬氨酸中羰基基團的保護是通過酯化實現(xiàn)的，使用如，苯甲醇，甲醇，乙醇或叔-丁醇。
肽鍵形成的反應(yīng)完成中有時可有縮合劑存在，如碳化二亞胺試劑如二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，碳二咪唑等，或四乙基焦磷酸酯，苯并三唑-N-羥基三二甲胺鏻六氟磷酸鹽(Bop試劑)。
上述固相合成中使用的不溶性樹脂可為具有能與羰基基團結(jié)合的功能基團的任何樹脂。實例為二苯甲基胺樹脂(BHA樹脂)，氯甲基樹脂，氧甲基樹脂，氨甲基樹脂，對-甲基二苯甲基胺樹脂(MBHA樹脂)，4-氨基甲基苯氧基甲基樹脂，4-羥基甲基苯氧基甲基樹脂，4-氧甲基苯乙酰胺(oxymethylphenylacetamidem)乙基樹脂(PAM樹脂)等。氨基酸向樹脂上的連接和合成肽從樹脂上的裂解可以任何常規(guī)公知方法進行。
上述固相合成中使用的溶劑可為任何已知可用于形成肽鍵的溶劑，實例為無水的或含水的二甲基甲酰胺(DMF)，二甲亞砜(DMSO)，吡啶，氯仿，二噁烷，二氯甲烷(DCM)，四氫呋喃(THF)，乙酸乙酯，N-甲基吡咯烷酮，和六甲基磷酸酰三胺(HMPA)。這些溶劑可單獨或聯(lián)合使用。
如此制備的肽可按常規(guī)方法脫鹽和提純。例如，其脫鹽和提純可通過DEAE-纖維素等上的離子交換色譜法，Sephadex LH-20，Sephadex G-25等上的分離色譜法(Partition Chromatography)，硅膠等上的正相色譜法，ODS-硅凝膠等上的逆相色譜法，或高效液相色譜法(HPLC)等。
上述通式(1)或(2)所代表的肽的藥物學(xué)上可接受的鹽包括如乙酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽等。
本發(fā)明的肽及其鹽由于它們的支氣管擴張作用而可用作支氣管擴張劑。因此，含有本發(fā)明的肽或其鹽作為活性成分的支氣管擴張劑可用于抑制和改善哮喘等。
作為支氣管擴張劑，本發(fā)明的肽或其鹽可直接施用，但通常將它以常規(guī)方式與各種藥物學(xué)上可接受的載體混合以形成供口服或胃腸道外施用的液體，凝膠或固體形式的制劑。施用方法包括吸入(例如，與氣霧劑一起)，注射，敷貼等。
當(dāng)用作支氣管擴張劑時，本發(fā)明的肽或其鹽的劑量優(yōu)選在約1ng/kg至1mg/kg(體重)/日/人范圍內(nèi)。雖然劑量依賴于使用目的，病人的癥狀，年齡和體重等，施用方法等而確定。
另外，本發(fā)明的肽和其鹽在血流促進作用方面出色，優(yōu)越性在于持續(xù)時間。因此，包含本發(fā)明的肽或其鹽的血流促進劑在治療潰瘍、凍瘡、褥瘡、陽萎等，以及頭發(fā)的恢復(fù)和生長方面有效。
當(dāng)用作血流促進劑時，本發(fā)明的肽或其鹽與常規(guī)的藥物學(xué)上可接受的載體混合以形成藥物學(xué)制劑，優(yōu)選注射形式。
對于這種注射制劑，所產(chǎn)生的制劑優(yōu)選被滅菌并與血液等張。任何常規(guī)使用的稀釋劑可用于注射形式制劑的制造。稀釋劑的實例為水、生理鹽水等。在這種情況，在注射形式制劑中可含有足夠量的食鹽或甘油以制備等張溶液。這種制劑可含有常規(guī)緩沖液，潤滑劑(soothingagent)，防腐劑等，并且，如果需要的話，可含著色劑，防腐劑，增香劑，甜味劑等，以及其它藥物。上述供注射目的的活性成分可在使用前溶于蒸餾水。所產(chǎn)生的藥物學(xué)制劑的施用方法根據(jù)制劑形式的不同而不同。例如，注射形式的制劑可單獨或在與常規(guī)補充物如氨基酸等混合后經(jīng)靜脈施用。
本發(fā)明的肽或其鹽當(dāng)用作血流促進劑時優(yōu)選以每日2至4次在約1ng/lg至1mg/kg(體重)范圍內(nèi)用藥，雖然劑量的確定依賴于使用目的，癥狀等。
附圖簡述

圖1顯示在施用PACAP情況下支氣管平滑肌松弛程度隨時間的改變。圖2顯示在施用SEQ ID NO5的肽5時支氣管平滑肌松弛程度隨時間的改變。圖3顯示在施用VIP情況下支氣管平滑肌松弛程度隨時間的改變。圖4顯示在施用SEQ ID NO11的肽11時支氣管平滑肌松弛程度隨時間的改變。
實施本發(fā)明的最佳實施方案在下文中，通過參照實施例詳細(xì)描述本發(fā)明，然而這無意于限制本發(fā)明的范圍。
在下列實施例中，所產(chǎn)生的純化的肽的鑒定通過高效液相色譜法(HPLC)中保留時間的測定，旋光度的測定，和氨基酸分析進行，如下所示?！じ咝б合嗌V法(HPLC)為高效液相色譜法測定，使用LC-Module-1(Waters有限公司，日本)。(HPLC中的測定條件)柱TSK凝膠ODS-120T(4.6×250mm)溶液0.1％TFA-乙腈(從20％至50％乙腈線性梯度，30分鐘)。流速1ml/分測定波長220nm?！ば舛葹樾舛鹊臏y定，使用DIC-370(Nippon Bunko Kogyo K.K.，Japan)。(旋光度測定條件)光源鈉燈， 589nm。溫度20℃層長度100mm。濃度1％(0.1M，于乙酸中)?！ぐ被岱治霭被岱治鐾ㄟ^在含0.1％酚的6N鹽酸中在110℃水解20小時并在日立(Hitachi)氨基酸分析儀L-8500(日立有限公司，日本)中分析水解產(chǎn)物而進行。實施例1肽1的生產(chǎn)固相合成使用肽合成儀9600(Milligen生物研究所)(MilligenBioresearch)。SEQ ID NO1中顯示的C-末端被酰胺化的肽1通過下列固相合成和提純。
首先，694mg MBHA樹脂(0.72mmol/g氨基基團，肽類Kenkynzyo K.K.，日本，制造)被引入肽固相合成反應(yīng)器并用下列物質(zhì)以下述次序在氬氣流中攪拌處理，這些物質(zhì)包括8ml DCM(4次，每次1分鐘)，8ml含60％ TFA的DCM(20分鐘)，4ml DCM(3次，每次15秒)，3mL含1ml DIEA的DMF溶液(2次，每次1分鐘)和8ml DMF(6次，每次40秒)。每次處理后，進行濾過。
分開地，將2mmol對應(yīng)于SEQ ID NO1中27位氨基酸殘基的氨基-基團-保護的氨基酸Boc-亮氨酸-OH溶于4ml DCM。該溶液被導(dǎo)入供氨基酸激活的器皿，隨后向其中加入3ml DCC(0.5M，于DCM中)和4ml HOBt(0.5M，于DCM中)并使它們反應(yīng)30分鐘。隨后，該反應(yīng)溶液被濾過并將濾過液轉(zhuǎn)至濃縮器皿。向其中加入3mlDMF，并將DCM在氬氣流中蒸餾去除。然后，將3ml DMF加至濃縮物中，并將它轉(zhuǎn)至上述供肽類固相合成的反應(yīng)器并反應(yīng)30分鐘。然后，將反應(yīng)物用8ml DCM洗滌(6次，每次20秒)。分開地，將2mmol Boc-亮氨酸-OH溶于4ml DCM中并將溶液導(dǎo)入供氨基酸活化的反應(yīng)器，并重復(fù)上述相同步驟(雙偶聯(lián)double-coupling)和濾過。從而獲得Boc-亮氨酸-MBHA樹脂。
隨后，將Boc-亮氨酸-MHBA樹脂用8ml DCM洗滌(4次，每次1分鐘)并濾過。該樹脂在氬氣流中在攪拌下順次用8ml含60％ TFA的DCM(20分鐘)，4ml DCM(3次，每次15秒)，3ml含1ml DIEA的DMF溶液(2次，每次1分鐘)，和8ml DMF(6次，每次40秒)處理。在每次處理后，進行濾過。
分開地，將對應(yīng)于SEQ ID NO1的26位氨基酸殘基的2mmol氨基基團保護的氨基酸Boc-纈氨酸-OH溶于4ml DCM并導(dǎo)入用于氨基酸活化的器皿，隨后加入1.5ml DCC(0.5M，于DCM中)，并讓它們反應(yīng)7分鐘。隨后，將反應(yīng)溶液濾過并將濾過物轉(zhuǎn)至濃縮器皿。加入3ml DMF并在氬氣流中蒸餾去除DCM。隨后，將3ml DMF加入濃縮物中，并將它轉(zhuǎn)移至上述供肽類固相合成的反應(yīng)器并讓反應(yīng)進行30分鐘。隨后，將反應(yīng)混合物用8ml DCM洗滌(6次，每次20分鐘)并過濾。從而獲得Boc-纈氨酸-亮氨酸-MBHA樹脂。
隨后，將對應(yīng)于序列ID NO1的第25至1位的下列氨基被保護的氨基酸分別成功地與之偶聯(lián)。
氨基酸被保護的氨基酸量序號 (mmol)25Boc-Ala-OH224Boc-Ala-OH2×223Boc-Leu-OH222Boc-Tyr(Bzl)-OH 221Boc-Arg(Tos)-OH 2×220Boc-Arg(Tos)-OH 2×2
氨基酸被保護的氨基酸 量序號 (mmol)19 Boc-Val-OH 218 Boc-Ala-OH 217 Boc-Leu-OH 216 Boc-Gln-OH 2×215 Boc-Arg(Tos)-OH2×214 Boc-Arg(Tos)-OH2×213 Boc-Tyr(Bzl)-OH212 Boc-Arg(Tos)-OH2×211 Boc-Ser(Bzl)OH 210 Boc-Tyr(Bzl)-OH29 Boc-Ser(Bzl)-OH28 Boc-Asp(OBz)-OH27 Boc-Thr(Bzl)-OH26 Boc-Phe-OH 25 Boc-Ile-OH 24 Boc-Gly-OH 23 Boc-Asp(OBz)-OH22 Boc-Ser(Bzl)-OH21 Boc-His(Bom)-OH2×2在上述固相合成中，對于天冬酰胺、精氨酸、谷氨酰胺和組氨酸需進行雙偶聯(lián)。
如此，獲得2.76g下述被保護的肽-HBHA樹脂Boc-His(Bom)-Ser(Bzl)-Asp(OBz)-Gly-Ile-Phe-Thr(Bzl)-Asp(OBz)-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-Ser(Bzl)-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-Arg(Tos)-Arg(Tos)-Gln-Leu-Ala-Val-Arg(Tos)-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-Leu-Ala-Ala-Val-Leu-MBHA樹脂。
將5ml茴香醚加至上述被保護的2.76g肽-MBHA樹脂，并加入25ml無水氟化氫于其中，將混合物在攪拌中在0℃反應(yīng)1小時。隨后，在減壓下將無水氟化氫蒸餾去除。殘留物用乙醚洗滌并隨后用100ml 0.1M乙酸從它提取肽。
提取物與20ml陰離子交換樹脂Amberlite IR-410一起攪拌15分鐘并通過濾過將不溶性樹脂去除。如此獲得的懸液通過0.22μ微孔濾器濾過并將濾過物冷凍干燥。如此獲得823mg白色粉末。然后，將此樣本上樣于CM-纖維素柱(2.5×30cm)并用0.05M至0.5M AcONH4(pH7.0)的線性梯度洗脫，合并級分69-82(10ml/級分)并產(chǎn)生382mg部分純化形式的所期望的肽。該肽以制備型高效液相色譜法進一步提純。柱TSK凝膠ODS-120T(21.5×300mm)。溶劑0.1％三氟乙酸-乙腈(線性梯度從20％至40％乙腈)。流速10ml/分。
對應(yīng)于肽1的峰的洗脫物作為期望的物質(zhì)被冷凍干燥。從所述高效液相色譜法獲得的經(jīng)提純形式的肽的量為每100mg部分提純的肽可得到63mg。經(jīng)提純的肽1在HPLC中測定保留時間和旋光度，并測定其氨基酸。結(jié)果顯示如下·HPLC中保留時間27.2分鐘?！α]D-55.8°·氨基酸分析Asp(2)2.17，Thr(1)0.98，Ser(3)2.45，Glu(1)1.09，Gly(1)1.03，Ala(3)3.18，Val(2)2.14，Ile(1)0.96，Leu(3)3.07，Tyr(3)2.73，Phe(1)0.92，His(1)1.12，Arg(5)5.16.實施例2SEQ ID NO2中顯示的C-末端羧基基團被酰胺化的肽2按照與實施例1中相同的方式以純化形式獲得。這種純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。確定了在HPLC中它的保留時間和它的旋光度，并分析了其氨基酸。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量73mg·在HPLC中的保留時間 27.6分鐘。·[α]D-53.2°·氨基酸分析
Asp(2)2.10，Thr(1)0.97，Ser(3)2.46，Glu(1)0.97，Gly(2)1.97，Ala(3)3.15，Val(2)2.13，Ile(1)1.00，Leu(3)3.08，Tyr(3)2.75，Phe(1)0.98，His(1)0.99，Arg(5)4.54.實施例3SEQ ID NO3中所示C末端羧基基團被酰胺化的肽3按照與實施例1中相同方法以純化形式獲得。這種經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量如下所示。它在HPLC中的保留時間以及其 旋光度被測定，并且其氨基酸序列被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量88mg·在HPLC中保留時間27.0分鐘。·[α]D-52.8°·氨基酸分析Asp(2)2.11，Thr(1)0.95，Ser(3)2.56，Glu(1)0.97，Gly(2)2.00，Ala(3)3.15，Val(2)2.10，Ile(1)1.00，Leu(3)3.08，Tyr(3)2.75，Phe(1)0.98，His(1)1.03，Arg(5)5.14，Lys(1)1.01.實施例4SEQ ID NO4中所示C-末端羧基基團被酰胺化的肽4按照與實施例1中相同方式以純化形式獲得。這種經(jīng)提純的肽的產(chǎn)量顯示如下。在HPLC中其保留時間和其旋光度被測定，并分析了其氨基酸。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量84mg·在HPLC中的保留時間25.1分鐘?！α]D-54.3°·氨基酸分析Asp(2)2.09，Thr(1)0.96，Ser(3)2.44，Glu(1)0.97，Gly(2)2.01，Ala(3)3.11，Val(2)2.03，Ile(1)1.02，Leu(3)3.08，Tyr(3)2.74，Phe(1)0.97，His(1)1.05，Arg(6)6.10實施例5SEQ ID NO5中所示C-末端羧基基團被酰胺化的肽5按照與實施例1中相同方式以純化形式獲得。該經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和旋光度被測定，其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量76mg·在HPLC中的保留時間24.4分鐘?！α]D-52.2°·氨基酸分析Asp(2)2.11，Thr(1)0.96，Ser(3)2.47，Glu(1)1.01，Gly(2)2.00，Ala(3)3.03，Val(2)2.03，Ile(1)1.02，Leu(3)3.03，Tyr(3)2.70，Phe(1)0.97，His(1)1.07，Arg(6)6.15，Lys(1)1.02.實施例6SEQ ID NO6中所示C-末端羧基基團被酰胺化的肽6按照與權(quán)利要求1中相同方式以純化形式獲得。這種經(jīng)提純的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，并且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量85mg·在HPLC中的保留時間23.6分鐘?！α]D-53.7°·氨基酸分析Asp(2)2.09，Thr(1)0.94，Ser(3)2.51，Glu(1)1.05，Gly(2)2.00，Ala(3)3.03，Val(2)2.01，Ile(1)1.02，Leu(3)33.03，Tyr(3)2.77，Phe(1)0.97，His(1)1.07，Arg(7)7.11.實施例7SEQ ID NO7中顯示的肽7按照與實施例1中除下述一點外基本相同的方法以經(jīng)純化形式獲得。不同處在于使用704mg Boc-精氨酸(Tos)PAM樹脂(0.68mmol/g氨基基團，Peptide kenkyuzyo KK.出品)，即，具有目標(biāo)肽的C-末端氨基酸殘基的一種樹脂。該經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和旋光度被測定，并且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量84mg·在HPLC中的保留時間23.8分鐘?！α]D-56.7°·氨基酸分析Asp(2)2.12，Thr(1)0.96，Ser(3)2.47，Glu(1)1.01，Gly(2)2.00，Ala(3)3.03，Val(2)2.03，Ile(1)1.02，Leu(3)3.03，Tyr(3)2.70，Phe(1)0.97，His(1)1.03，Arg(6)6.10，Lys(1)1.02.實施例8SEQ ID NO8中顯示的C-末端羧基基團被酰胺化的肽8按照與實施例1中的相同方法以純化形式獲得。這種經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，并且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量68mg·在HPLC中的保留時間26.9分鐘?！α]D-58.7°·氨基酸分析Asp(5)5.11，Thr(2)1.72，Ser(2)1.61，Glu(1)1.10，Ala(2)2.00，Val(2)2.00，Ile(1)1.02，Leu(4)4.15，Tyr(2)1.86，Phe(1)0.99，His(1)0.95，Arg(5)4.75.實施例9SEQ ID NO9中顯示的C末端羧基基團被酰胺化的肽9按照與實施例1中相同方法以純化形式獲得。該被純化肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量76mg·在HPLC中的保留時間25.4分鐘。·[α]D-52.9°·氨基酸分析Asp(5)5.11，Thr(2)1.83，Ser(2)1.49，Glu(1)1.09，Gly(1)1.04，Ala(2)2.01，Val(2)2.01，Ile(1)0.96，Leu(4)4.19，Tyr(2)2.03，Phe(1)1.01，His(1)1.07，Arg(6)6.10，Lys(1)1.05.實施例10SEQ ID NO10中顯示的C-末端羧基基團被酰胺化的肽10按照與實施例1中相同方式以純化形式獲得。該純化肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量77mg·在HPLC中的保留時間24.9分鐘?！α]D-52.5°·氨基酸分析Asp(5)5.12，Thr(2)1.83，Ser(2)1.55，Glu(1)1.08，Gly(1)1.03，Ala(2)2.01，Val(2)2.01，Ile(1)0.96，Leu(4)4.17，Tyr(2)2.03，Phe(1)1.01，His(1)1.03，Arg(6)6.15.實施例11SEQ ID NO11中顯示的C-末端羧基基團被酰胺化的肽11按照與實施例1中相同的方法以純化形式獲得。該經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，并且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量87mg·在HPLC中的保留時間23.5分鐘。·[α]D-55.5°·氨基酸分析Asp(5)5.11，Thr(2)1.83，Ser(2)1.49，Glu(1)1.09，Gly(1)1.04，Ala(2)2.01，Val(2)2.01，Ile(1)0.96，Leu(4)4.19，Tyr(2)2.03，Phe(1)1.01，His(1)1.07，Arg(6)6.10，Lys(1)1.05.實施例12SEQ ID NO12中顯示的C-末端羧基基團被酰胺化的肽12按照與實施例1中相同的方法以純化形式獲得。該經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，并且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量78mg·在HPLC中的保留時間23.0分鐘?！α]D-56.2°·氨基酸分析Asp(5)5.13，Thr(2)1.84，Ser(2)1.49，Glu(1)1.08，Gly(1)1.03，Ala(2)2.01，Val(2)2.01，Ile(1)0.96，Leu(4)4.19，Tyr(2)2.03，Phe(1)1.01，His(1)1.02，Arg(7)7.11.實施例13SEQ ID NO13中顯示的肽13，除使用704mg Boc-精氨酸(Tos)-PAM樹脂即具有目標(biāo)肽的C-末端氨基酸殘基的樹脂外，按照與實施例1中相同方法以純化形式獲得。該經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，并且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量83mg·在HPLC中的保留時間22.8分鐘?！α]D-58.6°·氨基酸分析Asp(5)5.15，Thr(2)1.83，Ser(2)1.53，Glu(1)1.09，Gly(1)1.01，Ala(2)2.01，Val(2)2.01，Ile(1)1.02，Leu(4)4.10，Tyr(2)1.86，Phe(1)1.00，His(1)0.95，Arg(6)6.15.實施例14SEQ ID NO14中顯示的C-末端羧基基團被酰胺化的肽14按照與實施例1中相同的方法以經(jīng)純化形式獲得。這種經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，并且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量64mg·在HPLC中的保留時間25.1分鐘。·[α]D-52.7°·氨基酸分析
Asp(2)2.17，Thr(1)0.98，Ser(3)2.55，Glu(1)1.03，Gly(1)1.03，Ala(3)3.18，Met(1)0.96，Val(2)2.14，Ile(1)0.96，Leu(2)2.07，Tyr(3)2.73，Phe(1)1.00，His(1)1.01，Arg(5)5.15.實施例15序列ID NO15中顯示的C-末端羧基基團被酰胺化的肽15按照與實施例1中相同的方法以純化形式獲得。該經(jīng)純化的肽的產(chǎn)量顯示如下。其在HPLC中的保留時間和其旋光度被測定，并且其氨基酸被分析。結(jié)果顯示如下·產(chǎn)量62mg·在HPLC中的保留時間26.2分鐘。·[α]D-52.5°·氨基酸分析Asp(2)2.11，Thr(1)0.95，Ser(3)2.45，Glu(1)1.04，Gly(1)1.03，Ala(3)3.18，Val(2)2.14，Ile(1)0.96，Leu(2)2.10，Tyr(3)2.73，Phe(1)0.96，His(1)1.02，Arg(5)5.16，nLeu(1)1.02.實施例16在實施例1至15中獲得的經(jīng)提純的肽以下列方式檢測它們的支氣管擴張作用并與VIP和PACAP的作用相比較。
重450-500g的雄豚鼠在頸靜脈處切開，打開胸腔，并立即取出支氣管。將它們的氣管立即置于Krebs溶液中并切成環(huán)，隨后通過將軟骨部分經(jīng)一條鋼絲互相連接而形成一條鏈。然后，在平滑肌部分對面的軟骨部分被切除，從而使平滑肌部分互相連接。所產(chǎn)生的樣本置于約10ml等熱器官浴中并垂直懸掛。下部被固定，而上部與負(fù)荷1.4g的粗力學(xué)換能器(grass force transducer)相連。將足夠的94％氧氣和6％二氧化碳的氣體吹入此樣本，同時用含0.1μmol/L羰基膽堿的Krebs溶液以0.33ml/分的速度向其滴入以測定舒張作用。由于舒張反應(yīng)的發(fā)生依賴于測定樣本在此滴入溶液中的含量，這可用去比較VIP和PACAP和本發(fā)明的肽對支氣管平滑肌的舒張作用。
VIA，PACAP和本發(fā)明的肽的每一種的溶液以高于終濃度100倍的濃度制備，從而使其在器官浴中的濃度可被調(diào)節(jié)。滴入含羰基膽堿的Krebs溶液30分鐘后，滴入100μl的樣本溶液。
假定在無羰基膽堿存在時平滑肌收縮程度為0，而在羰基膽堿存在下為100。在樣本存在下最小收縮程度A(即最大舒張值)被測定，并按如下計算最大舒張程度B最大舒張程度B(％)＝100-A。
在加入樣本后達到最大舒張值的一半所需的時間(以后稱為“半值時間T”)被測定。
使用每種肽分別為0.3μM，1μM，和3μM的三個劑量測量支氣管平滑肌舒張程度的改變。結(jié)果顯示于附圖中PACAP于圖1中；得自實施例5的肽5，于圖2中；VIP于圖3中，而得自實施例11的肽11于圖4中。對于肽5在劑量為3μM時最大舒張程度B為75％而對于肽11為80％，而在兩種情況下半值時間T為360分鐘或更長。從這些結(jié)果，在具有與VIP和PACAP的相似的舒張效果的同時，本發(fā)明的肽表現(xiàn)更優(yōu)的持久性，即，比VIP和PACAP的作用時間更長。
表1顯示對于每種肽在各個劑量下的最大舒張程度B和半值時間T。
表10.3μM 1μM 3μMB T BTB T(％) (分) (％) (分) (％) (分)PACAP 4060 9060 90100VIP 4513080150 85240實施例1中的肽15010080240 85＞360實施例2中的肽25512080240 85＞360實施例3中的肽35512080240 85＞360實施例4中的肽45512080240 85＞360實施例5中的肽56012080＞36075＞360實施例6中的肽66515080＞36075＞360實施例7中的肽76012080＞36075＞360實施例8中的肽85015080300 80＞360實施例9中的肽95518080300 80＞360實施例10中的肽10 5520080300 80＞360實施例11中的肽11 6530085＞36085＞360實施例12中的肽12 6530090＞36085＞360實施例13中的肽13 6530090＞36085＞360實施例14中的肽14 4010080240 85＞360實施例15中的肽15 4010080240 85＞360實施例17在實施例1至15中獲得的純化肽1至15被檢測它們的血流增加作用并與VIP和PACAP的作用比較。
將體重220至250g的Wistar雄性大鼠通過腹膜內(nèi)施用戊巴比妥(25mg/kg)麻醉并在仰臥固定。在頸動脈中插入動脈導(dǎo)管并通過裝有含肝素生理鹽水(10μ/ml)的doom kit(SCK-512，NipponKoden)與一個血壓換能器(DX-300，Nippon Koden，日本)相連，以通過張力血壓放大器(AP-601G，Nippon Koden)測定血壓。進一步，將一個血流測定探頭(FR-030T，Nippon Koden)連接于右股動脈并隨后連接于電磁放大血流計(MFV-3200，NipponKoden)以測定血流。每種肽的靜脈內(nèi)劑量為100pmol/kg。
表2顯示在給予各種肽的大鼠中血流的增加。
表2血流(ml/min)PACAP 16.04±5.92VIP 10.18±3.38實施例1中的肽150.02±42.34實施例2中的肽252.63±39.58實施例3中的肽352.13±37.85實施例4中的肽451.87±37.24實施例5中的肽554.60±41.05實施例6中的肽653.71±46.46實施例7中的肽755.05±46.71實施例8中的肽853.75±37.31實施例9中的肽954.26±35.95實施例10中的肽11 55.86±34.69實施例11中的肽11 57.04±38.67實施例12中的肽12 57.34±41.88實施例13中的肽13 56.76±36.15實施例14中的肽14 52.92±32.12實施例15中的肽15 52.63±31.05在給予100pmol/kg肽1至15的每一種的大鼠中未觀察到明顯的血壓改變。實施例18急性毒性測定實施例1至15中獲得的肽1至15被溶于生理鹽水并以10mg/kg的劑量經(jīng)靜脈施用于小鼠。結(jié)果表明每一只小鼠均存活。
序列表SEQ ID NO1長度27個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO1His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu20 25SEQ ID NO2長度28個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO2His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu Gly20 25SEQ ID NO3長度29個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO3His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu Gly Lsy20 25SEQ ID NO4長度29個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO4His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu Gly Arg20 25SEQ ID NO5長度30個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO5His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu Gly Lys Arg20 25 30SEQ ID NO6長度30個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ D NO6His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu Gly Arg Arg20 25 30SEQ ID NO7長度30個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO7His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu Gly Lys Arg20 25 30SEQ ID NO8長度29個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO8His Ser Asp Ala Val Phe Thr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn Gly20 25SEQ ID NO9長度30個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO9His Ser Asp Ala Val Phe Thr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn Gly Lys20 25 30SEQ ID NO10長度30個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO10His Ser Asp Ala Val Phe Thr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn Gly Arg20 25 30SEQ ID NO11長度31個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO11His Ser Asp Ala Val Phe Thr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn Gly Lys Arg20 25 30SEQ ID NO12長度31個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO12His Ser Asp Ala Val Phe Thr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn Gly Arg Arg20 25 30SEQ ID NO13長度31個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO13His Ser Asp Ala Val Phe Thr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Arg Gln1 5 10 15Leu Ala Val Arg Arg Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn Gly Lys Arg20 25 30SEQ ID NO14長度27個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO14His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Met Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu20 25SEQ ID NO15長度27個氨基酸類型氨基酸拓?fù)鋵W(xué)線性分子類型肽序列描述SEQ ID NO15His Ser Asp Gly Ile Phe Thr Asp Ser Tyr Ser Arg Tyr Arg Arg Gln1 5 10 15Nle Ala Val Arg Arg Tyr Leu Ala Ala Val Leu20 2權(quán)利要求
1.一種由通式(1)或通式(2)代表的肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽H-His-Ser-Asp-A-B-Phe-Thr-Asp-C-Tyr-D-Arg-E-Arg-F-Gln-G-Ala-Val-I-J-Tyr-Leu-K-L-M-Leu-N(1)其中A是Ala或Gly；B是Ile或Val；C是Asn或Ser；D是Thr或Ser；E是Leu或Tyr；F、I和J之每一個是Lys或Arg，至少F、I和J是Arg；G是Met，Leu或nLeu；K是Asn或Ala；L是Ser或Ala；M是Ile或Val；和N是-NH2或Asn-NH2，排除以下組合其中A是Ala，B是Val，C是Asn，D是Thr，E是Leu，K是Asn，L是Ser，M是Ile，和N是Asn-NH2，或通式(2)H-His-Ser-Asp-A-B-Phe-Thr-Asp-C-Tyr-D-Arg-E-Arg-F-Gln-G-Ala-Val-I-J-Tyr-Leu-K-L-M-Leu-P-Gly-Q-R(2)其中A、B、C、D、E、F、G、I、J、K、L和M具有同上相同定義；至少F、I和J之一是Arg；P是Asn或一個化學(xué)鍵；Q是Lys，Arg，Lys-Arg，Arg-Arg或一個化學(xué)鍵；且R是-OH或-NH2，或其可藥用鹽。
2.一種支氣管擴張劑，它包含權(quán)利要求1的肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽作為活性成分。
3.一種血流促進劑，它包含權(quán)利要求1的肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽作為活性成分。
4.一種藥物組合物，它包含權(quán)利要求1的肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽和一種藥物學(xué)上可接受的載體。
5.一種擴張支氣管的方法，它包含向人類施用有效量的權(quán)利要求1的肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
6.一種促進血流的方法，它包含向人類施用有效量的權(quán)利要求1的肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
7.權(quán)利要求1的肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽的在擴張支氣管中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1的肽或其藥物學(xué)上可接受的鹽的在促進血流中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(1)代表的肽H-His-Ser-Asp-A-B-Phe-Thr-Asp-C-Tyr-D-Arg-E-Arg-F-Gln-G-Ala-Val-I-J-Tyr-Leu-K-L-M-Leu-N (1)。其中A是Ala或Gly；B是Ile或Val；C是Asn或Ser；D是Thr或Ser；E是Leu或Tyr；F、I和J之每一個是Lys或Arg，至少F、I和J是Arg；G是Met，Leu或nLeu；K是Asn或Ala；L是Ser或Ala；M是Ile或Val；和N是-NH
文檔編號C07K14/575GK1161043SQ96190882
公開日1997年10月1日 申請日期1996年6月6日 優(yōu)先權(quán)日1995年6月9日
發(fā)明者本和久, 長野由美子 申請人:伊藤火腿株式會社