專利名稱：具有抗腫瘤活性的取代硫脲基磷酰胺酯類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種有關(guān)新型廣譜抗腫瘤藥物的合成方法。
氮芥磷酸衍生物作為抗癌藥物早在五十年代就開始了研究，有些因具有良好的抗癌活性已用于臨床，如Endoxan，Holoxan等，但它們具有損害骨髓細(xì)胞及泌尿系統(tǒng)等副作用[Arnold，H.；Bourseaux，F(xiàn).，Angew.Chem.，1958，70，539]。因此，進(jìn)一步對(duì)氮芥磷酸衍生物作結(jié)構(gòu)修飾，尋找高效、低毒的抗腫瘤藥物，對(duì)促進(jìn)腫瘤的化療作用具有十分重要的意義。
有些磷酰硫脲類化合物對(duì)人畜十分安全，甚至無毒，在醫(yī)藥上還可用作殺線蟲劑、抗腫瘤劑及體內(nèi)驅(qū)蟲劑。此外，將α-氨基酸引入藥物，可以作為藥物的有效載體，增強(qiáng)藥物的脂溶性，降低藥物的毒性，提高藥物的活性，增強(qiáng)藥物的化療作用[Szekerke M.，Cancer Treatment Rept.，l976，60，347；Cox P，J.，Biochem.Pharmacol.，1979，28，2045；Deyine，K.G.，etal.，Kinchington，D.AIDS 1990，4，371]。
本發(fā)明將取代硫脲基及生命體內(nèi)源物質(zhì)α-氨基酸引入氮芥磷酸衍生物，目的是尋求一種高效低毒的抗腫瘤藥物。所合成化合物具有廣譜抗腫瘤活性，尤其對(duì)人乳腺癌(BCAP)、人胃癌(MGC)及人白血病(HL-60)等瘤株有很好抑制作用。
本發(fā)明的抗腫藥物是通過親核取代反應(yīng)和親核加成反應(yīng)而得到的一類新型氮芥磷酸衍生物，其合成方法如下
Y1＝Y(jié)2＝o-Me，m-Me，p-Me，o-Cl，m-Cl ，p-Cl，H，m-NO2，p-NO2，p-Br；R＝H，o-Cl，m-Cl，p-Cl，p-Br，o-Me，m-Me，p-Me，m-NO2，p-NO2，2，4-Cl2，2，4-Me2，2，3，4，5，6-Cl5；Y3與R相同；R1＝H，Me，i-Pr，PhCH2，i-Bu，CH2CH2SCH3，s-Bu上述產(chǎn)物(I)和(II)用作抗腫瘤藥物具有較好的廣譜的抗腫瘤活性(見實(shí)例1-實(shí)例12)；本發(fā)明的抗腫瘤藥物的合成路線簡(jiǎn)單，工藝操作簡(jiǎn)便，原料易得，產(chǎn)物易于分離和純化，合成周期短。
實(shí)例1 o-對(duì)氯苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-鄰氯苯基硫脲基磷酰胺酯的制備及應(yīng)用在100ml反應(yīng)瓶中，加入4mmol o-對(duì)氯苯基-N，N-二-(2-氯乙基)氯代磷酰胺酯和30ml無水乙腈。室溫?cái)嚢柘路謩e加入8.2mmol硫氰酸鉀。在12-20℃攪拌反應(yīng)8-12小時(shí)。在低于60℃下減壓蒸干溶劑，剩余物用50ml(25ml×2)無水苯分兩次提取，并用10ml(5ml×2)無水苯洗濾渣兩次。合并濾液與洗液，減壓蒸去溶劑，以20ml無水乙腈作反應(yīng)溶劑，室溫下滴加4mmol鄰氯苯胺和10ml乙腈的混合液，攪拌反應(yīng)4-6小時(shí)，濾出所得固體產(chǎn)物，濾液濃縮，加適量無水乙醚，冷凍放置，又析出部分產(chǎn)品，合并所得固體，用丙酮-乙醚重結(jié)晶，得產(chǎn)品1.28g，產(chǎn)率63.7％，m.p.131-2℃，分子式C17H18Cl4N3O2PS。元素分析計(jì)算值(％)C，40.72；H，3.59；N，8.38；實(shí)測(cè)值(％)C，40.48；H，3.47；N，8.45；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)3.36-3.82(m，8H，2ClCH2CH2)，7.1-7.92(m，8H，8Ph-H)，8.16(d，1H，NH)，10.34(s，1H，NH)。
抗腫瘤活性測(cè)試方法[Journal of Immunological methods89，271-277(1986)]，取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞，加入96孔培養(yǎng)板。待貼壁后加入受試化合物，培養(yǎng)72h，加入MTT，4h后除去培養(yǎng)液，加入酸化異丙醇，振蕩后測(cè)定量570nm處光密度值。
把實(shí)例1得到的產(chǎn)物用上述方法測(cè)試得到體外抗腫瘤活性結(jié)果如下 實(shí)例2 o-鄰甲苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-對(duì)氯苯基硫脲基磷酰胺酯的制備及應(yīng)用操作同實(shí)例1，用o-鄰甲苯基-N，N-二-(2-氯乙基)氯代磷酰胺酯中間體及用對(duì)氯苯胺代替鄰氯苯胺進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)品為白色固體，從丙酮-乙醚重結(jié)晶，m. p.143-4℃，收率68.4％。分子式C18H21Cl3N3O2PS。元素分析計(jì)算值(％)C，44.95；H，4.37；N，8.74；實(shí)測(cè)值(％)C，44.71；H，4.34；N，8.70；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)2.40(s，3H，CH3)，3.44-3.92(m，8H，2ClCH2CH2)，7.12-7.58m，8H，8Ph-H)，8.48(d，1H，NH)，10.5(s，1H，NH)。
生測(cè)結(jié)果如下 實(shí)例3 o-2，4-二甲苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-對(duì)氯苯基硫脲基磷酰胺酯的制備及應(yīng)用操作同實(shí)例2，用o-2，4-二甲苯基-N，N-二-(2-氯乙基)氯代磷酰胺酯中間體進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)品為白色固體，從丙酮-乙醚重結(jié)晶，m.p.126-7℃，收率61.1％。分子式C19H23Cl3N3O2PS。元素分析計(jì)算值(％)C，46.11；H，4.65；N，8.49；實(shí)測(cè)值(％)C，46.13；H，4.48；N，8.26；1HNMR(CD3C(O)CD3)，δ(ppm)2.32-2.40(ds，6H，2CH3)，3.44-3.90(m，8H，2ClCH2CH2)，7.12-7.92(m，8H，7Ph-H，NH)，10.5(s，1H，NH)。
生測(cè)結(jié)果如下 實(shí)例4 o-鄰甲苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-對(duì)溴苯基硫脲基磷酰胺酯的制備及應(yīng)用操作同實(shí)例2，用對(duì)溴苯胺代替對(duì)氯苯胺進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)品為白色固體，從丙酮-乙醚重結(jié)晶，m.p.148-9℃，收率67.7％。分子式C18H21Cl2BrN3O2PS。元素分析計(jì)算值(％)C，41.14；H，4.00；N，8.00；實(shí)測(cè)值(％)C，41.06；H，3.68；N，8.08；1HNMR(CD3C(O)CD3)，δ(ppm)2.40(s，3H，CH3)，3.44-3.90(m，8H，2ClCH2CH2)，7.04-7.68(m，8H，8Ph-H)，9.52(d，1H，NH)，10.5(s，1H，NH)。
生測(cè)結(jié)果如下 實(shí)例5 o-對(duì)氯苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-乙氧羰基異丙基取代亞甲基硫脲基磷酰胺酯的制備及應(yīng)用在100ml反應(yīng)瓶中，加入4mmol o-對(duì)氯苯基-N，N-二-(2-氯乙基)氯代磷酰胺酯和30ml無水乙腈。室溫?cái)嚢柘路峙尤?.2mmol硫氰酸鉀，攪拌反應(yīng)8-10小時(shí)，在不超過60℃下減壓蒸去溶劑，剩余物用50ml(25ml×2)無水苯分兩次提取，并用10ml(5ml×2)苯洗濾渣兩次，合并濾液與洗液，減壓蒸去溶劑，以20ml無水乙腈作反應(yīng)溶劑，將4mmol dl-α-纈氨酸乙酯的10ml無水乙腈溶液室溫下滴入，并反應(yīng)6-15h。減壓濃縮，加適量乙醚，冷凍放置，析出白色固體，抽濾，用氯仿-乙醚重結(jié)晶。m.p.125℃，收率61.9％。分子式C18H27Cl3N3O4PS。元素分析計(jì)算值(％)C，41.66；H，5.21；N，8.10；實(shí)測(cè)值(％)C，41.42；H，5.38；N，7.96；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)0.82-0.99(m，6H，2CH3)，1.21(m，3H，CH3)，2.4(m，1H，CH)，3.4-3.68(m，8H，2ClCH2CH2)，4.18(m，2H，CH2)，4.82(m，1H，CH)，7.10-7.36(m，4H，4Ph-H)，7.8(w，1H，NH)，9.2(q，1H，NH，J＝7.11Hz)；31PNMR(CDCl3)，δ(ppm)1.091及0.916。
生測(cè)結(jié)果如下 實(shí)例6 o-對(duì)氯苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-乙氧羰基(2-甲硫基)乙基取代亞甲基硫脲基磷酰胺酯的制備及應(yīng)用操作同實(shí)例5，用d1-α-蛋氨酸乙酯代替d1-α-纈氨酸乙酯進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)品為白色固體，從氯仿-乙醚重結(jié)晶，m.p.139℃，收率54.7％。分子式C13H27Cl3N3O4PS2。元素分析計(jì)算值(％)C，39.24；H，4.90；N，7.63；實(shí)測(cè)值(％)C，39.23；H，4.90；N，7.63；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)1.24-1.29(m，3H，CH3)，2.05-2.10(ds，3H，CH3)，1.8-2.6(m，4H，2CH3)，3.36-3.72(m，8H，2ClCH2CH2)，4.19-4.25(m，2H，CH2)，4.90(q，1H，CH)，7.21-7.32(m，4H，4Ph-H)，7.6(w，1H，NH)，9.3(q，1H，NH，J＝7.2Hz)；31PNMR(CDCl3)，δ(ppm)0.952及0.901。
生測(cè)結(jié)果如下 實(shí)例7 o-對(duì)氯苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-乙氧羰基仲丁基取代亞甲基硫脲基磷酰胺酯的制備及應(yīng)用操作同實(shí)例5，用d1-α-異亮氨酸乙酯代替d1-α-纈氨酸乙酯進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)品為白色固體，從氯仿-乙醚重結(jié)晶，m.p.134℃，收率60.2％。分子式C19H29Cl3N3O4PS。元素分析計(jì)算值(％)C，42.82；H，5.45；N，7.89；實(shí)測(cè)值(％)C，42.93；H，5.48；N，7.87；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)0.7-0.96(m，6H，2CH3)，1.2-1.31(m，3H，CH3)，1.0-1.6(m，2H，CH2)，1.9-2.1(m，1H，CH)，3.52-3.63(m，8H，2ClCH2CH2)，4.17-4.22(m，2H，CH2)，4.85(m，1H，CH)，7.22-7.34(m，4H，4Ph-H)，7.76-7.9(w，1H，NH)，9.2(q，1H，NH，J＝7.64Hz)。
生測(cè)結(jié)果如下 實(shí)例8 o-對(duì)氯苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-乙氧羰基芐基取代亞甲基硫脲基磷酰胺酯的制備及應(yīng)用操作同實(shí)例5，用1-α-苯丙氨酸乙酯代替d1-α-纈氨酸乙酯進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)品為白色固體，從乙醚-石油醚中重結(jié)晶，m.p.132-3℃，收率51.4％。分子式C22H27Cl3N3O4PS。元素分析計(jì)算值(％)C，46.60；H，4.77；N，7.41；實(shí)測(cè)值(％)C，46.28；H，4.57；N，7.44；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)1.23(t，3H，CH3)，3.16(t，2H，CH2)，3.48-3.66(m，8H，2ClCH2CH2)，4.17(q，2H，CH2)，5.12(q，1H，CH)，7.07-7.31(m，5H，4Ph-H，NH)，8.98(d，1H，NH，J＝7.40Hz)；31PNMR(CDCl3)，δ(ppm)1.837；IR(cm-1)3392(m，NH)，1733(s，C＝O)，1513，1537，1482(s，苯環(huán))，1328(m，C＝S)，1228(s，P＝O)。
生測(cè)結(jié)果如下 實(shí)例9 2-氮芥-4，6-二硫代-5-對(duì)甲苯基-1，3，5，2-磷雜三氮六元環(huán)-2-氧化物的制備將2g(7.7mmol)原料(a)置于100ml三口瓶中，加入40ml無水乙腈，0-10℃下分批加入1.9g(19.6mmol)原料(c)[過量23％]。0-25℃下攪拌3h，TLC跟蹤證實(shí)為一個(gè)產(chǎn)物點(diǎn)時(shí)，停止攪拌，減壓除去溶劑，重結(jié)晶得無色晶體(G)1.13g，產(chǎn)率為91.16％，m.p.64-65℃，1HNMR(δ，ppm)3.4-3.8(m，8H，2ClCH2CH2)；31PNMR(δ，ppm)28.8，IR(cm-1)2997(w)，1966(s，-N＝C＝S)，1265(m，P＝O)，1096，1024，982；MS(EI，m/e)303(M+)，305(m+＋2)，254(基峰)192。
將2g(6.6mmol)中間體(G)置于250ml反應(yīng)瓶中，加入80ml無水甲苯，-30～-20℃下慢慢滴入含等摩爾對(duì)甲苯胺的50ml無水甲苯溶液，40min滴完?？刂拼藴囟葦嚢?-2.5hr.升至-5～0℃攪拌約2hr直至固體析出量不再變化。脫去溶劑，得一無定形白色粉末，用丙酮∶乙醚＝2∶3混合溶劑重結(jié)晶，得2.38g白色固體，產(chǎn)率87.74％，m.p.114-116℃，1HNMR(δ，ppm)2.3(s，3H，CH3)，3.5-3.9(mb，8H，2ClCH2CH2)，7，1-7.3(mb，2H，C3H5)；IR(cm-1)3090(w，C6H4)，2977，2820(s，CH2，CH3)，1985(wb，-N＝C-SH)，1601，1590，1536，1504(s，N＝C，C＝C)1426，1380(m，CH3，CH2彎曲振動(dòng))，1320(m，P＝O)，1190，1160，10000，980，元素分析計(jì)算值(％)C，37.96；H4.01；N，13.76；實(shí)測(cè)值(％)C，37.84；H，4.16；N，13.62。
實(shí)例102-氮芥-4，6-二硫代-5-間硝基苯基-1，3，5，2-磷雜三氮六元環(huán)-2-氧化物的制備按實(shí)例9的合成方法，取2g(6.6mmol)中間體G置于250ml反應(yīng)瓶中，加入80ml無水甲苯，在-20～-10℃下慢慢滴入含等摩爾間硝基苯胺的80ml無水甲苯溶液，約45min滴完。保持-10℃反應(yīng)2hr，0℃繼續(xù)攪拌3hr，升溫30℃攪拌約1hr直至析出固體量不再增多。脫去溶劑，得一淺黃色固體化合物，用丙酮∶乙醚＝1∶1混合溶劑重結(jié)晶得1.87g淺黃色粉末，產(chǎn)品產(chǎn)率64.11％m.p.109-110℃，1HNMR(δ，ppm)3.4-4(mb，8H，2ClCH2CH2)，7.2-7.9(tmb，4H，取代硝基苯基)，IR(cm-1)3156(w)，2984，2810(m，CH2)，2030(wb，-N＝C-SH)，1597，1576，1517(s，N＝C)，1354，1427(s，CH2)，1205(m，P＝O)，1196，1096，999。元素分析計(jì)算值(％)C，33.38；H3.26；N，12.97；實(shí)測(cè)值(％)C，33.64；H，3.25；N，12.88。
實(shí)例11 2-氮芥-2，6-二氧代-4-硫代-5-對(duì)甲苯基-1，3，5，2-磷雜三氮六元環(huán)化合物的制備將2g(7.72mmol)原料(a)溶于40ml無水乙腈中，-10℃下，分批加入0.5g(7.7mmol)原料(b)，攪拌1-1.5hr后，升溫0～5℃，攪拌24hr，經(jīng)TLC跟蹤示原料a基本消失，將溫度降至0℃以下。攪拌下分批加入0.7g(7.2mmol)原料(c)，保持此溫度反應(yīng)約50min，升至室溫?cái)嚢?hr。減壓除去溶劑，用無水苯將中間體(H)萃取出來，純化得無色粘稠物(H) 1.68g，產(chǎn)率75.56％。1HNMR(δ，ppm)3.3-3.9(mb，8H，2ClCH2CH2)，IR(cm-1)2900(w)，2090(m，N＝C＝O)，1965(s，N＝C＝S)，1264(m，P＝O)，1115，1042，981(m)；MS(CI，m/e)287(M+)，238(M+-ClCH2，基峰)，252，147，163，176，42，63，49。
將新制備的中間體(H)2g(6.94mmol)置于250ml反應(yīng)瓶中，迅速使其溶于80ml無水甲苯中。在-25～-20℃下，慢慢滴入等摩爾對(duì)甲苯胺的50ml無水甲苯溶液中，約30min滴完。保持此溫度攪拌約1hr，升溫-10～0℃攪拌4-6hr.直至析出固體量不再增多，脫去溶劑，得白色粉末，用丙酮∶乙醚＝1∶3混合溶劑重結(jié)晶，得白色固體2.26g，產(chǎn)品產(chǎn)率82.44％。m.p.108～109℃；1HNMR(δ，ppm)；2.34(s，3H，CH3)，3.2～3.9(mb，8H，2ClCH2CH2)，7.1～7.7(dmb，-C6H4)；IR(cm-1)3205(w，NH)，3090(w)2977，2819(s，CH3，CH2)，1975(wb，-N＝C-SH)，1610，1590(s，C＝O，N＝C)，1536，1504(m，-C＝C-)，1426，1382，1320(m，P＝O)，1191，1162，1000，980；MS(EI，m/e)376(M+-H2O)，349，300，254(基峰)，227，163，107。元素分析計(jì)算值(％)C，39.50；H，4.33；N，14.17；實(shí)測(cè)值(％5)C，39.72；H，4.24；N，14.22。
實(shí)例12 2-氮芥-2，6-二氧代-4-硫代-5-間硝基苯基-1，3，5，2-磷雜三氮六元環(huán)化合物(PS)的制備及應(yīng)用中間體(H)的合成方法同實(shí)例11。取新制備的2g中間體H，迅速溶于80ml無水甲苯中，在-25～-20℃下慢慢滴入等摩爾間硝基苯胺30ml無水甲苯20ml無水丙酮溶液，30～45min滴畢。保持-20℃下反應(yīng)約2-3hr.，升至-5～0℃反應(yīng)約2hr，10～20℃再繼續(xù)反應(yīng)1～2hr直到固體析出量不再增多。脫去溶劑，得淺黃色固體，用丙酮∶乙醚＝1∶1混合溶劑重結(jié)晶，得淺黃色粉末2.36g，產(chǎn)品產(chǎn)率79.83％m.p.117～118℃；1HNMR(δ，ppm)；3.48～4(mb，8H，2ClCH2CH2)，7.61～9(tmb，4H，C6H3)；IR(cm-1)3284(w，NH)，3053(m)2991，2820(m)，1983(w，-N＝C-SH)，1619(m，C＝O)，1587，1519，1478(m，N＝C，C＝C)，1342(s)，1203(m，P＝O)，1180，1112，998。元素分析計(jì)算值(％)C，33.81；H，3.46；N，16.68；實(shí)測(cè)值(％)C，33.81；H，3.31；N，16.42。PS毒性試驗(yàn)小白鼠經(jīng)口試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法首先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，確定劑量范圍，然后將小白鼠隨機(jī)分為四組，每組五只，給藥前隔夜禁食，將配成不同劑量的藥液經(jīng)口一次給藥，投藥后小白鼠自由攝食、飲水于室溫下觀察一周。隨時(shí)觀察記錄出現(xiàn)的癥狀和死亡情況。試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)算LD50(mg/Kg)，取95％可信限。
PS小白鼠經(jīng)口毒性試驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)化學(xué)物質(zhì)急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，雄、雌小白鼠急性經(jīng)口毒性屬于低毒。PS對(duì)小鼠S-180腫瘤生長抑制試驗(yàn)試驗(yàn)方法給小鼠接種腫瘤，24h后稱體，隨機(jī)分成4組，每組10只，分設(shè)1個(gè)對(duì)照組和3個(gè)PS給藥組(I、II、和III)，給藥組I、II、和III組分別腹腔注射0.03，0.1和0.3mg/Kg·d-1的PS，對(duì)照組腹腔注射等體積二甲亞砜生理鹽水溶液。連續(xù)給藥10天，停藥24h后解剖出腫瘤，稱瘤重，計(jì)算出各給藥組的抑瘤率。
試驗(yàn)結(jié)果PS對(duì)小鼠S-180腫瘤生長的抑制作用
從以上試驗(yàn)結(jié)果可以看出，PS對(duì)小鼠S-180移植性腫瘤有一定程度的抑制作用。
PS抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)方法(美國測(cè))細(xì)胞系檢測(cè)取12×8的微試孔板，每孔加入瘤細(xì)胞懸液，含瘤細(xì)胞數(shù)為2×105個(gè)，然后于每孔加入0.2ml含10％FBS和2mM L-谷酰胺的RPMI培養(yǎng)基，進(jìn)行培養(yǎng)。藥物用少量DMSO溶解(DMSO的終濃度為0.025％)。微試孔板前二排為對(duì)照組，其余各排則加用培養(yǎng)液稀釋的藥物，受試藥物的濃度為10μg/ml，在CO2孵箱中培養(yǎng)48小時(shí)。
取100μl細(xì)胞樣品用庫爾特計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)、取20μl細(xì)胞樣品加入20μl0.5％臺(tái)盼藍(lán)染料染色30秒，用血球計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)死細(xì)胞數(shù)，微試孔板12排均用臺(tái)盼藍(lán)染料檢測(cè)死細(xì)胞數(shù)，前二排對(duì)照組用庫爾特計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)。
3H-胸腺嘧啶摻入試驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)的條件同上述細(xì)胞系檢測(cè)，有些細(xì)胞瘤株則需加入10-7MPMA或5μg/ml PHA(植物血壞凝集系)，在數(shù)活細(xì)胞前16小時(shí)，這些細(xì)胞在PBS中用10μl含0.5μCi的3H-胸腺嘧啶脈動(dòng)，然后用真空器吸入濾紙中，用蒸餾水沖洗3遍，濾紙干燥過夜，然后用液體閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。
權(quán)利要求
1.具有抗癌活性的取代硫脲基磷酰胺酯類化合物，其特征在于它的化學(xué)結(jié)構(gòu)為(ClCH2CH2)2NP(O)AA1，其中 X＝S(I1)，O(I2)Y＝o-Me，m-Me，p-Me，o-Cl，m-Cl，p-Cl，H，m-NO2，p-NO2，p-Br； R＝H，o-Cl，m-Cl，p-Cl，p-Br，o-Me，m-Me，p-Me，m-NO2，p-NO2，2，4-Cl2，2，4-Me2，2，3，4，5，6-Cl5；Y3與R相同；R1＝H，Me，i-Pr，PhCH2，i-Bu，CH2CH2SCHz3，s-Bu
2.以(ClH2CH2)2NP(O)Cl2(a)為原料，將其與NaOCN(b)，KSCN(c)以及 (d)分別進(jìn)行壹步或兩步親核取代反應(yīng)，得中間體化合物(ClCH2CH2)2NP(O)(NCS)2(G)，(ClCH2CH2)2NP(O)(NCO)(NCS)(H)及(ClCH2CH2)2NP(O)(OR)(NCS)(P)，分別將其與取代苯胺(e)或H2NC(R1)HCO2Et(f)進(jìn)行親核加成反應(yīng)，制備(I1)、(I2)、(II1)、(II2)的方法，其主要特征在于制備(I2)時(shí)，原料(a)(b)(c)的摩爾比為1～1.4∶1.0～0.95∶0.95～0.6，無水乙腈為溶劑，反應(yīng)溫度為-15-40℃得到中間體H，然后再與取代苯胺(e)反應(yīng)，溶劑為無水甲苯，反應(yīng)溫度為-30-45℃，時(shí)間為25min～8h；由中間體(q)制備(P)時(shí)，q和b的摩爾比為1∶2.0～2.1，用q 4mmol、b 8.2mmol，溶劑為30ml無水乙腈，反應(yīng)溫度12-20℃，反應(yīng)時(shí)間8-12小時(shí)，反應(yīng)完畢后，在不超過60℃下減壓蒸去溶劑，用無水苯提取，提取液經(jīng)濃縮后得到(P)；用q與e各4mmol，溶劑為無水乙腈30ml，反應(yīng)溫度是室溫，反應(yīng)時(shí)間為4～6小時(shí)，制備II1；用(q)、(f)各4mmol，所用溶劑為無水乙腈30ml，反應(yīng)溫度是室溫，反應(yīng)時(shí)間為6-15小時(shí)，制備II2。
3.按照權(quán)利要求1所述的化合物(I1)、(I2)，其特征在于它們有較高的抗癌活性及較低的毒性。
全文摘要
利用各種取代苯胺及α-氨基酸酯與氮芥雙異硫氰酸酯、氮芥異氰異硫氰酸二酯及單異硫氰酸酯氯化物進(jìn)行加成反應(yīng)，得到了四個(gè)系列取代硫脲基及脲基氮芥磷酰胺類衍生物。該類化合物具有廣譜的抗癌活性，對(duì)人胸癌、白血病、乳腺癌(BCAP)、胃癌(MGC)及結(jié)腸癌(HCT)等均有很好的抑制作用。小鼠毒性試驗(yàn)表明，此類化合物均屬于低毒。其合成工藝簡(jiǎn)單，原料易得，因此是一類具有很好發(fā)展前景的新型高效、低毒的抗腫瘤化合物。
文檔編號(hào)C07F9/00GK1123285SQ94117518
公開日1996年5月29日 申請(qǐng)日期1994年10月25日 優(yōu)先權(quán)日1994年10月25日
發(fā)明者陳茹玉, 毛麗娟, 王惠林, 周嘉 申請(qǐng)人:南開大學(xué)