專利名稱：纖維蛋白原受體拮抗劑的制作方法
本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為1991年6月25日的美國申請(qǐng)No.720，357的繼續(xù)部分，也是申請(qǐng)日為1991年5月7日的美國申請(qǐng)No.696，893的繼續(xù)部分。
本發(fā)明涉及揭示式Ⅰ纖維蛋白原受體拮抗劑，當(dāng)該藥施用于哺乳動(dòng)物，特別是人體時(shí)，可用于抑制纖維蛋白原與血小板的結(jié)合和抑制血小板的聚集。
在保持止血時(shí)，血小板與凝結(jié)的互相作用及溶解纖維蛋白系統(tǒng)可能引起疾病，需要加以預(yù)防和治療。式Ⅰ纖維蛋白原受體拮抗劑在治療與血小板聚集和纖維蛋白的形成有關(guān)的各種疾病中是有用的。
對(duì)血小板抑制劑的興趣再次產(chǎn)生，是由于對(duì)血管疾病的發(fā)病機(jī)理中，對(duì)血小板的作用和血栓的形成有了更好的了解，這些血管疾病包括不穩(wěn)定的絞痛、急性心肌梗塞和發(fā)作。
血小板是與細(xì)胞相像的失核碎片，存在于所有哺乳動(dòng)物的血中，并參與血的凝固。纖維蛋白原是糖蛋白，作為血漿的一個(gè)普通成分存在。在血凝固機(jī)理中，纖維蛋白原參與血小板聚集和纖維蛋白的形成。血小板沉積在血管損傷位置上，在此，多數(shù)生理促效藥起的作用是使血小板聚集，導(dǎo)致血小板栓形成，使失血量最少。如果血小板栓出現(xiàn)在血管腔中，正常血流就受損害。
在血小板粘連和聚集過程中，血小板膜受體是必需的。已知在血小板膜復(fù)合體Ⅱb/Ⅲa上的纖維蛋白原與受體的相互作用，對(duì)正常血小板功能是必需的。
Zimmerman等人在美國專利No.4，683，291中，描述了在纖維蛋白原-血小板、血小板-血小板和細(xì)胞-細(xì)胞的相互作用的研究領(lǐng)域中有用的肽類。所描述的肽類可用于希望在血中推遲或預(yù)防血栓或血塊的形成之處。
Pierschbacher等人在美國專利No.4，589，881中描述了(纖)粘連蛋白的一個(gè)11.5KDal多肽碎片的序列，這個(gè)序列具體化了(纖)粘連蛋白的細(xì)胞-接合(attachment)-促進(jìn)活性。
Ruoslahti等在美國專利No.4，614，517中描述了四肽改變了細(xì)胞到各種底質(zhì)的細(xì)胞-接合活性。

圖1列出多肽，這些多肽可以用Ruoslahti等人在“測(cè)定顯示細(xì)胞接合活性的最小肽”中的方法合成，Ruoslahti等人在美國專利No.4，578，079中描述了類似的四肽。
Pierschbacher等人在美國Proc.Natl.Acad.Sci.Vol81 pp.5985-5988，1984年10月，描述了保持接合-促進(jìn)活性的粘連蛋白的細(xì)胞識(shí)別位置的變異體。Pierschbacher等人進(jìn)一步測(cè)定與Arg-Gly-Asp-Ser肽相類似的許多結(jié)構(gòu)細(xì)胞接合-促進(jìn)活性，并且發(fā)現(xiàn)“精氨酸、甘氨酸和天冬氨酸酯殘基，即使用十分有關(guān)的氨基酸也不能替代，但有幾個(gè)氨基酸可以代替絲氨酸，而不致喪失活性”。
Ruoslahti等人在1987年10月23日第238卷p491-497的科學(xué)雜志中討論細(xì)胞粘連蛋白質(zhì)的問題。他們具體說明“在粘連蛋白(fibronectin)中細(xì)胞-接合范圍的氨基酸序列及其與合成肽的重迭的解釋，確立了Arg-Gly-Asp(RGD)序列為在粘連蛋白中被細(xì)胞識(shí)別的基本結(jié)構(gòu)”。
Cheresh 1987年9月在美國Proc.Natl.Acad.Sci雜志第84卷P6471-6475中描述了涉及連結(jié)在纖維蛋白原和Von Willebrand因子上的Arg-Gly-Asp-導(dǎo)向(directed)粘連受體。
Adams等人在美國專利No.4，857，508中描述了四肽，這些四肽抑制血小板聚集和血栓的形成。
因此，本發(fā)明目的之一是提供纖維蛋白原受體拮抗劑，用于抑制纖維蛋白原與血小板的接合和抑制血小板的聚集。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供新穎的纖維蛋白原受體拮抗劑化合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供抑制纖維蛋白原與血小板結(jié)合以及抑制血小板聚集的方法，途徑是施用新穎的纖維蛋白原受體拮抗劑化合物。以上提到的以及其它目的將在本發(fā)明下述描述中加以說明。
本發(fā)明提供下式化合物的纖維蛋白原受體拮抗劑
可以用于抑制纖維蛋白原與血小板的結(jié)合和抑制血小板的聚集。上面所提的化合物被用于對(duì)纖維蛋白原受體起作用的方法中，包括施入治療有效而無毒量的化合物到哺乳動(dòng)物身上，特別是人體上。包含藥學(xué)上可接受的載體和分散于其中的有效但無毒量的這些化合物的藥物組合物，也是本發(fā)明的另一個(gè)特點(diǎn)。
式Ⅰ的纖維蛋白原受體拮抗劑化合物，在抑制纖維蛋白原與血小板的結(jié)合和抑制血小板聚集的方法中是有用的。本發(fā)明的纖維蛋白原受體拮抗劑由下式化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，或其旋光異構(gòu)體說明。
這里A＝N和B＝-CH2-，或A＝-CH-和B＝NR7;
Y是
這里R10是C1-8烷基，芳基，芳基C1-8烷基;
u是-CH-，-C-，或-N-;
v是-CH-，-C-，或-N-;
R和R1各自為氫，芳基，其中芳基定義的單或多環(huán)芳香系，包括5元或6元環(huán)，并具有選自氮、氧和硫的0、1、2、3或4個(gè)雜原子;和未取代或被選自一個(gè)或一個(gè)以上下述基團(tuán)取代的亞苯基羥基、氟、氯、溴、碘、氰基、三氟甲基、C1-3烷氧基、C1-5烷基羰氧基、C1-5烷氧基羰基、C1-5烷基、氨基C1-5烷基、羥基羰基C0-5烷基或羥基羰基C1-5烷氧基，C0-6烷基，它未被取代或被選自下面基團(tuán)中的一個(gè)或一個(gè)以上基團(tuán)所取代氟、氯、溴、碘、羥基、C1-5烷基羰基(C0-8烷基)氨基、芳基C1-5烷基羰基(C0-8烷基)氨基、芳氧基、C1-10烷氧基、C1-5烷氧基羰基、C0-5烷基氨基羰基、C1-5烷基羰氧基、C3-8環(huán)烷基、芳基、氧代、氨基、C1-6烷基、C1-3烷基氨基、氨基C1-3烷基、芳基C0-5烷基氨基羰基、苯基C1-3烷基氨基、氨基羰基C0-4烷基、C1-8烷基磺?；?C0-8烷基)氨基、芳基C0-10烷基磺?；?C0-8烷基)-烷基磺酰基、C0-8烷基磺?；?、羥基羰基C0-5烷基、C1-8烷氧基羰基(C0-8烷基)氨基、芳基C0-10烷氧基羰基(C0-8烷基)氨基、C0-8烷基氨基羰基(C0-8烷基)氨基、芳基C0-8烷基氨基羰基(C0-8烷基)氨基、C0-8烷基氨基羰氧基、芳基C0-10烷基氨基羰氧基、C0-8烷基氨基磺?；?C0-8烷基)氨基、芳基C0-8烷基氨基磺酰基(C0-8烷基)氨基、C0-8烷基氨基磺酰基或芳基C0-8烷基氨基磺?；?
條件是與R或R1相連的碳原子只帶有一個(gè)雜原子，R2是氫未取代或取代的C1-12烷基，取代基為一個(gè)或一個(gè)以上如下基團(tuán)C1-6烷基、
其中R9是支鏈或直鏈C1-6烷基，或苯基，當(dāng)出現(xiàn)多于一個(gè)基團(tuán)時(shí)，R9可以相同或不同;
R7、R3和R4各自為氫，未取代或取代的C1-12烷基，取代基為一個(gè)或一個(gè)以上的C1-6烷基基團(tuán)，芳基C0-4烷基，或氰基，條件是當(dāng)R7和R3各自為氰基時(shí)X是
K是 1-4;
m是 1-4;
p是 1-6;
q是 0-2。
本發(fā)明較優(yōu)選如下式的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽，或其旋光異構(gòu)體。
Ⅰ
其中X是-NR7R3，
Z是CO2R2Y是
其中n是1、2或3;
R和R1各選自苯基、噻吩、咪唑、萘基、吲哚、吡唑、硫茚，上面這些基或者未取代或者被下述基團(tuán)取代羥基、鹵素、羥基羰基C0-5烷基、C1-3烷基，或者未取代或者被一個(gè)或一個(gè)以上下述基團(tuán)取代芳基、芳氧基、C1-10烷氧基、C0-5烷基氨基羰基、芳基C0-5烷基氨基羰基，氫，未取代或取代的C0-6烷基，取代基是一個(gè)或一個(gè)以上的基團(tuán)，選自鹵素、羥基、C1-6烷基磺酰基氨基、芳基C0-6烷基磺?；被?、C1-6烷基磺?；蓟鵆0-6烷基磺酰基、C1-5烷基羰基氨基、芳基C1-5烷基羰基氨基、芳氧基、C1-10烷氧基、C1-5烷氧基羰基、C0-5烷基氨基羰基、C1-5烷基羰氧基、C3-8環(huán)烷基、芳基、氧代、氨基、C1-6烷基、C1-3烷基氨基、氨基C1-3烷基、芳基C0-5烷基氨基羰基、苯基C1-3烷基氨基、氨基羰基C0-4烷基或羥基羰基C0-5烷基，條件是與R或R1相連的碳原子只帶有一個(gè)雜原子，R2是氫，未取代或取代的C1-12烷基，取代基是一個(gè)或一個(gè)以上C1－6烷基、
或
，其中R9=支鏈或直鏈C1-6烷基或苯基，當(dāng)取代基多于一個(gè)基團(tuán)時(shí)，則R9可以相同或不同;
R7、R3和R4各自為
氫，或未取代或取代的C1-3烷基、取代基是一個(gè)或一個(gè)以上C1-6烷基;
K是1-4;
m是1-4;
q是0或2;
p是1-3。
本發(fā)明最優(yōu)選的化合物是下式化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其旋光異構(gòu)體。
X是
-NR7R3;
這里D＝-O-，-S-，或
，Z是CO2R2
Y是
其中n是1、2或3;
R和R1各選自苯基、噻吩、咪唑、萘基、吲哚、吡唑、硫茚，這些基團(tuán)或者未取代或者被下述基團(tuán)取代羥基、鹵素、羥基羰基C0-5烷基、C1-3烷基，或者未取代或者被一個(gè)或一個(gè)以上如下基團(tuán)取代芳基、芳氧基、C1-10烷氧基、C0-5烷基氨基羰基、芳基C0-5烷基氨基羰基，氫，未取代或取代的C0-6烷基，取代基選自下面的一個(gè)或一個(gè)以上基團(tuán)鹵素、羥基、C1-5烷基羰基氨基、芳基C1-5烷基羰基氨基、芳氧基、C1-10烷氧基、C1-5烷氧基羰基、C0-5烷基氨基羰基、C1-5烷基羰氧基、C3-8環(huán)烷基、芳基、氧代、氨基、C1-6烷基、C1-3烷基氨基、氨基C1-3烷基、芳基C0-5烷氧氨基羰基、苯基C1-3烷基氨基、氨基羰基C0-4烷基或羥基羰基C0-5烷基，條件是與R或R1相連的碳原子只帶有一個(gè)雜原子;
R2是氫;
R7、R3和R4是氫;
m是1-4;
p是2-4。
本發(fā)明包括下列縮寫符號(hào)Bn，芐基;NMM，N-甲基嗎啉;HOBt，1-羥基苯并三唑;EDC，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基羰化二亞胺鹽酸化物;DMF，二甲基甲酰胺;BOC，叔-丁氧基羰基;pTSA，對(duì)-甲苯磺酸;DMS，二甲硫;TFA，三氟乙酸;THF，四氫呋喃;TBDMS，叔-丁基二甲基甲硅烷基。
式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括所生成的式Ⅰ化合物的常用無毒鹽或季銨鹽，即從無毒無機(jī)酸或有機(jī)酸生成的鹽。如這些常用無毒鹽包括從無機(jī)酸中衍生出來的，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等;從有機(jī)酸制備的鹽，有機(jī)酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、2，2′-二羥基-1，1′-二萘基-甲烷-3，3′-二羧酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、磺胺酸、2-乙氧基苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羥乙磺酸等。
通過常規(guī)化學(xué)方法，從含有堿性或酸性部分的式Ⅰ化合物中可以合成本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的鹽。一般來說，在合適溶劑或溶劑的各種結(jié)合中，通過游離堿或酸與等當(dāng)量或過量的成鹽所需的無機(jī)酸或有機(jī)酸或堿反應(yīng)制得鹽。
用常規(guī)方法如式Ⅰ的酸用適量堿(如堿金屬或堿土金屬氫氧化物如鈉、鉀、鋰、鈣或鎂)或有機(jī)堿(如胺二芐基亞乙基二胺、三甲基胺、哌啶、吡咯烷、芐胺等)或氫氧化季胺(氫氧化四甲胺)等處理很易制得藥學(xué)上可接受的式Ⅰ酸的鹽。
式Ⅰ化合物可用于抑制纖維蛋白原與血小板的結(jié)合、抑制血小板的聚集、治療血栓形成或栓子形成，預(yù)防血栓形成或栓子形成，和調(diào)節(jié)細(xì)胞-細(xì)胞融合過程，如精子-卵子融合，導(dǎo)致哺乳動(dòng)物受精的抑制。這些化合物可用作哺乳動(dòng)物，特別是人的藥劑。本發(fā)明化合物可施于病人，在病體內(nèi)可望通過抑制纖維蛋白原與血小板膜糖蛋白復(fù)合Ⅱb/Ⅲa受體的結(jié)合而預(yù)防血栓的形成。本發(fā)明化合物也用于預(yù)防或調(diào)節(jié)急性或慢性的心肌梗塞、不穩(wěn)定的絞痛和血栓的發(fā)作。此外，這些化合物還可用于在周圍動(dòng)脈(動(dòng)脈移植、頸動(dòng)脈動(dòng)脈內(nèi)膜切除術(shù))外科手術(shù)，和心血管外科手術(shù)，其中對(duì)動(dòng)脈和器官的操作法，和/或血小板與人工表面互相作用，導(dǎo)致血小板聚集和消耗。聚集的血小板可以形成血栓和血栓栓塞。本發(fā)明的化合物可以施于外科病人，預(yù)防血栓或血栓栓塞的形成。
通常體外循環(huán)用于心血管外科手術(shù)，以給血充氧。血小板粘附于體外回路的表面。粘連取決于在血小板膜上的GPⅡb/Ⅲa和吸附到回路表面纖維蛋白原之間的相互作用(Gluszko等，Amer.J.Physiol.，1987，252H，pp615-621)。從人工表面釋放出的血小板表明受損傷的止血作用。可施用本發(fā)明化合物以預(yù)防粘連。
這些化合物的其它用途，包括在溶解血栓治療期間或之后的時(shí)期，預(yù)防血小板血栓形成、血栓栓塞、再閉塞和再狹窄，在冠狀的或其它動(dòng)脈血管成形術(shù)之后和冠狀動(dòng)脈分路迂回(bypass)過程之后，防止血小板血栓形成、血栓栓塞、再閉塞和再狹窄。
式Ⅰ化合物可以施用于哺乳動(dòng)物上，最好與藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑結(jié)合施用，比較好的是與已知輔劑如明礬一起施用，所用的藥物組合物是無毒的，按照標(biāo)準(zhǔn)藥物上的實(shí)踐，以治療上有效量配置?；衔锟梢钥诜蛭改c外施用，包括靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)皮、皮下和局部施用。
按照本發(fā)明作為口服用的纖維蛋白原受體拮抗劑，已選出的化合物可采用藥片或膠囊形式，或作水溶液或懸浮液施用。藥片用于口服的情況時(shí)，通常所用的載體包括乳糖和玉米淀粉，一般加入潤滑劑，如硬脂酸鎂。對(duì)口服膠囊形式，有用的稀釋劑包括乳糖和干玉米淀粉。當(dāng)需要口服用水懸浮液時(shí)，活性成分與乳化劑和懸浮劑結(jié)合使用。如需要，可以加入甜味劑和/或香味劑。
為肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi)施用，通常要制備成活性成分的無菌溶液。溶液的pH值應(yīng)適當(dāng)調(diào)節(jié)和緩沖。用于靜脈，溶液的總濃度應(yīng)該加以控制，以使制劑等滲。
本發(fā)明也包括藥物組合物，用于治療和預(yù)防與血小板聚集、纖維蛋白形成、血栓和栓子的形成有關(guān)的疾病，包括施用治療有效而無毒量的式Ⅰ化合物，用或不用藥物上可接受的載體或稀釋劑。
本發(fā)明組合物包括本發(fā)明的纖維蛋白原受體拮抗劑化合物與藥物上可接受的載體(如鹽水，pH在7.4)的結(jié)合，適宜于達(dá)到抑制血小板聚集的目的。組合物也可以與抗凝結(jié)劑(如肝素或丙酮芐羥香豆素)結(jié)合使用。組合物也可與溶解血栓劑(如纖維蛋白溶酶原活性劑或鏈激酶)結(jié)合使用，以達(dá)到在急性情況下抑制血小板聚集。組合物還可進(jìn)一步與抗血小板劑(如阿斯匹林)結(jié)合使用。組合物可溶于水介質(zhì)中，因此可以有效地以溶液的形式施用。
當(dāng)式Ⅰ化合物在人的受試者上用作纖維蛋白原受體拮抗劑時(shí)，每日劑量通常是由開處方的內(nèi)科醫(yī)生決定，劑量通常隨每個(gè)病人的年齡、體重、反應(yīng)以及病人癥狀的嚴(yán)重程度而變動(dòng)。
在一個(gè)應(yīng)用實(shí)施例中，適宜量的化合物以口服方式施用于在血管成形術(shù)之前或之后的心臟病發(fā)作受害者上。在血管成形術(shù)之前或之后進(jìn)行施藥，用量要足以抑制血小板聚集，例如用量所可以達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)血漿濃度，大約在0.01-100μM，最好在大約0.01-10μM之間。
本發(fā)明也包括一種藥物上的組合物，此組合物包括本發(fā)明的化合物，與組織類型纖維蛋白溶酶原活性劑或鏈激酶結(jié)合使用。本發(fā)明也包括一種促進(jìn)血栓溶解和預(yù)防病人體內(nèi)的再閉塞的方法，包括對(duì)病人施用一種本發(fā)明有效量的組合物。
本發(fā)明提供一個(gè)方法抑制纖維蛋白原與血小板結(jié)合，抑制血小板聚集、治療血栓的形成或栓塞的形成，預(yù)防哺乳動(dòng)物血栓形成或栓塞形成，包括施用治療上有效而無毒性量的本發(fā)明化合物，用或不用藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
本發(fā)明仍可進(jìn)一步提供一種方法，以抑制纖維蛋白原與血小板結(jié)合、抑制血小板聚集、治療血栓形成或栓子形成，在哺乳動(dòng)物體內(nèi)預(yù)防血栓形成或栓子形成，包括施用治療上有效而無毒量的本發(fā)明化合物，與溶解血栓劑(如組織纖維蛋白溶酶原活性劑或鏈激酶)、抗凝結(jié)劑(如肝素或丙酮芐羥香豆素)或抗血小板劑(如阿斯匹林)相結(jié)合使用，可用或不用藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
下面化合物和相關(guān)的IC50值(濃度，此濃度與沒有這種化合的對(duì)照物相對(duì)的抑制聚集達(dá)50%)是本發(fā)明的示例。
化合物 IC50
根據(jù)下面一般方法中的一個(gè)，可以制得本發(fā)明化合物反應(yīng)流程1如果需要，保護(hù)芳基或烷基醇通過草酰氯/DMSO、氯鉻酸吡啶鎓或類似試劑氧化成相應(yīng)的醛。這些氧化作用典型的在-78℃至室溫，在鹵化碳溶劑如CH2Cl2中反應(yīng)0.5-6小時(shí)進(jìn)行。所得的醛與烷氧羰基亞甲基正膦的烯化作用得所希望的不飽和酯。這個(gè)反應(yīng)典型的在0-60℃，在鹵化碳溶劑(如CH2Cl2)進(jìn)行1-18小時(shí)。這個(gè)酯與手性胺(如R-(+)-α-甲基芐胺)處理得到非對(duì)映異構(gòu)的胺混合物，并通過典型的柱色譜法分離。
反應(yīng)流程2用BOC或類似的合適基團(tuán)(如CBZ、FMOC等)在N上保護(hù)氨基鏈烷醇，并且轉(zhuǎn)化成烷基鹵，典型的是碘化物。Ph3p和碘通常用于此目的，該反應(yīng)在芳香溶劑(如苯或甲苯)，在鹵化碳(如CH2Cl2)中，于0-50°進(jìn)行5分鐘到10小時(shí)。用NaN3或類似疊氮轉(zhuǎn)移劑處理完成烷基疊氮生成，在醇溶劑(EtOH、CH3OH)中，室溫下，0.5-10小時(shí)把這個(gè)疊氮化物催化還原成相應(yīng)的胺。
反應(yīng)流程3在合適堿(如LiN(TMS)2)或類似胺(如EtN(i-Pr)2)和合適烷基化劑(如烷基)存在下在烷基碘或烷基溴(如溴乙酸乙酯)中，產(chǎn)生環(huán)酰胺或脲中間體的烷基化。通過脫質(zhì)子化作用/烷基化過程的重復(fù)，產(chǎn)生在中間體中的雙取代。當(dāng)烯丙基試劑用于烷基化時(shí)，接著用RuCl3/NaIO4或KMnO4或其它合適試劑氧化得末端羧酸。然后通過酰胺鍵與末端碳手性或非手性的胺鍵合使此酸偶合得另一個(gè)中間體。通常偶合反應(yīng)在DMF或鹵化碳溶劑(如CH2Cl2)中，用標(biāo)準(zhǔn)試劑(如DCC、EDC、氯甲酸異丁酯等)進(jìn)行。中間體最終脫保護(hù)，通常包括催化酯水解的堿和催化N-脫保護(hù)的酸。
根據(jù)下面所列反應(yīng)方案制備式Ⅰ化合物?；衔?，3-吲哚丙醇從商業(yè)Aldrich Chemical中很易得到。
反應(yīng)流程1
反應(yīng)流程Ⅰ 繼續(xù)
化合物8 商業(yè)上從American Tokyo Kansei Inc很易得到反應(yīng)流程2
反應(yīng)流程3
反應(yīng)流程3 繼續(xù)
反應(yīng)流程4
反應(yīng)流程4 繼續(xù)
反應(yīng)流程4 繼續(xù)
反應(yīng)流程5
反應(yīng)流程5 繼續(xù)
反應(yīng)流程6
反應(yīng)流程6 繼續(xù)
反應(yīng)流程6 繼續(xù)
反應(yīng)流程6 繼續(xù)
反應(yīng)流程9
反應(yīng)流程9 繼續(xù)
反應(yīng)流程10
反應(yīng)流程10 繼續(xù)
反應(yīng)流程11
反應(yīng)流程11繼續(xù)
反應(yīng)流程13
反應(yīng)流程13繼續(xù)
反應(yīng)流程14
反應(yīng)流程14 繼續(xù)
反應(yīng)流程15
反應(yīng)流程15 繼續(xù)
反應(yīng)流程15繼續(xù)
制備3-(吲哚-3-基)丙醇-叔-丁基-二甲基甲硅烷基醚(2)在0℃向3-吲哚丙醇1(15g，86mmol)、DMF(200ml)和咪唑(12.8g，0.19mol)的攪拌著的溶液中，加入氯代叔-丁基二甲基甲硅烷基(14.2g，95mmol)，接著移走冷浴。20小時(shí)后，用乙醚稀釋反應(yīng)混合物，用水(2次)和鹽水洗滌、干燥(MgSO4)，濃縮得琥珀色油狀甲硅烷基醚2(29g)。
TLC Rf＝0.54(20% 乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(CDCl3)δ8.07(bs，1H)，7.77(d，J＝7Hz，1H)，7.49(d，J＝7Hz，1H)，7.33(t，J＝7Hz，1H)，7.26(t，J＝7Hz，1H)，7.12(s，1H)，3.84(t，J＝6Hz，2H)，2.95(t，J＝7Hz，2H)，2.08(m，2H)，1.08(s，9H)，0.25(s，3H)，0.22(s，3H).
制備N-乙?；?3-(吲哚-3-基)丙醇-叔-丁基二甲基甲硅烷基醚(3)在室溫，將吲哚2(29g，86mmol)、CH2Cl2(450ml)，1，8-重氮二環(huán)〔5.4.0〕十一碳-7-烯(38ml，0.26ml)，4-二甲基氨基吡啶(1.0g，8.5mmol)和乙酸酐(32ml，0.34mol)的溶液攪拌一周。濃縮反應(yīng)混合物，然后用醚稀釋。該醚用H2O，5% KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠，5%乙酸乙酯/己烷)得黃色油狀酰化了的產(chǎn)品3(27g)。
TLC Rf＝0.56(20% 乙酸乙酯/己烷)。
制備N-乙?；?3-(吲哚-3-基)丙醇(4)把予先混合的n-Bu4NF(1M在THF中244ml，0.24mol)和ACOH(14ml，0.24mmol)1∶1的溶液，于室溫下，加到攪拌著的甲硅烷基醚3(27g，81mmol)的THF(270ml)溶液中。20小時(shí)后，用乙醚稀釋反應(yīng)混合物，然后用水(2次)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮得黃色結(jié)晶固體的醇4(19g);
TLC Rf＝0.35(60% 乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(CDCl3)δ8.42(m，1H)，7.55(d，J＝7Hz，1H)，7.36(t，J＝7Hz，1H)，7.29(t，J＝7Hz，1H)，7.27(7d，J＝7Hz，1H)，7.22(s，1H)，3.76(t，J＝7Hz，2H)，2.82(t，J＝7Hz，2H)2.61(s，3H)，2.00(m，2H).
制備5-(N-乙酰基-吲哚-3-基)戊-2-烯酸乙酯(5)在-78℃，把無水DMSO(12.4ml，0.17mol)滴加到攪拌著的草酰氯(11.4ml，0.13mol)的CH2Cl2(440ml)溶液中。5分鐘后氣體停止放出，加入醇4(19g，87mmol)的CH2Cl2(40ml)溶液。30分鐘后，將NEt3(73ml，0.52mol)加入以產(chǎn)生濃漿。移走冷浴，反應(yīng)物再攪拌15分鐘，然后加入(乙酯基亞甲基)三苯基正膦(33.5g，96mmol)。2.0小時(shí)后，用醚稀釋反應(yīng)混合物，然后用水(2次)，5%KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(20%乙酸乙酯/己烷)得白色固體的烯烴5(14g)。
TLC Rf＝0.54(60% 乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(CDCl3)8.42(bd，1H)，7.50(d，J＝7Hz，1H)，7.34(t，J＝7Hz，1H)，7.28(t，J＝7Hz，1H)，7.19(bs，1H)，7.03(dt，J＝18 and 7Hz，1H)，5.88(d，J＝18Hz，1H)，4.19(q，J＝7Hz，2H)，2.87(t，J＝7Hz，2H)，2.63(m，2H)，2.61(s，3H)，1.28(t，J＝7Hz，3H).
制備N-(R)-α-甲基芐基-3(R)-〔2-(吲哚-3-基)乙基〕β-氨基丙酸乙酯(6a)和N-(R)-α-甲基芐基-3(S)-〔2-(吲哚-3-基)乙基〕β-氨基丙酸乙酯(6b)在指形冷凍器中把烯烴5(2.77g，9.7mmol)和R-(+)-α-甲基芐胺(5.03ml，39mmol)的混合溶液在110℃加熱40小時(shí)。冷的反應(yīng)混合物直接用于快速色譜(硅膠，40∶2∶1，己烷∶乙酸乙酯∶2-丙醇)。(R，R)異構(gòu)體6a首先洗脫(1.19g)為粘稠黃色油狀物，靜置固化。用己烷/乙酸乙酯重結(jié)晶得結(jié)晶物質(zhì)。然后洗脫(R，S)異構(gòu)體(6B)(1.55g)為粘稠黃色油狀物，其中含大約10%(R，R)異構(gòu)體。
6aRf＝0.52(60% EtoAc/己烷);
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.84(br s，1H)，7.52(dd，J＝7.9，0.7Hz，1H)，7.20-7.35(m，6H)，7.16(tm，J＝7.1，1.3Hz，1H)，7.08(tm，J＝7.3，1.1Hz，1H)，6.70(br d，J＝2.4Hz，1H)，4.10(q，J＝7.1Hz，2H)，3.90(q，J＝6.6Hz，1H)，2.80-2.90(m，2H)，2.68(ABXdt，J＝16，7.9Hz，1H)，2.53(ABX dd，J＝14.5，5.9Hz，1H)，2.42(ABX dd，J＝14.6，5.3Hz，1H)，1.79(q，J＝7.5Hz，2H)，1.33(d，J＝6.4Hz，3H)，1.22(t，J＝7.1Hz，3H).
6bRf＝0.42(60% EtOAc/己烷)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.95(br s，1H)，7.57(dd，J＝7.5，0.7Hz，1H)，7.34(dm，J＝8.1，0.7Hz，1H)，7.17-7.30(m)，7.11(tm，J＝7.9，0.9Hz，1H)，6.89(br d，J＝2.2Hz，1H)，4.02-4.15(ABX m，2H)，3.89(q，J＝6.6Hz，1H)，2.95(m，1H)，2.82(ABX ddd，J＝15，9.7，5.9Hz，1H)，2.69(ABX ddd，J＝15，9.7，6.0Hz，1H)，2.47(ABX dd，J＝15.0，5.1Hz，1H)，2.40(ABX dd，J＝15.0，7.7Hz，1H)，1.96(m，1H)，1.83(m，1H)，1.30(d，J＝6.6Hz，3H)，1.21(td，J＝7.1，0.7Hz，3H).
制備3(R)-〔2-(吲哚-3-基)乙基〕β-氨基丙酸乙酯(7a)將胺6a(996mg，2.74mmol)溶于10ml EtOH中。加Pearlman′s催化劑(20%pd(OH)2/C，128mg)后，將燒瓶充氫氣，并保存球壓，16小時(shí)后，將新鮮H2和另外一份催化劑(122mg)加入，4小時(shí)后，樣品在硅藻土上過濾、濃縮得胺7a(707mg，99%，大約95%純度)。
Rf＝0.22(10∶1，NH3飽和，CHCl3∶EtOAc);
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.01(br s，1H)，7.60(dt，J＝8.9，0.4Hz，1H)，7.35(dt，J＝8.1，0.9Hz，1H)，7.19(td，J＝7.1，1.3Hz，1H)，7.11(td，J＝7.1，1.2Hz，1H)，6.99(br d，J＝2.2Hz，1H)，4.15(q，J＝7.1Hz，2H)，3.72(q，J＝7.0Hz，1H)，3.29(m，1H)，2.92-2.78(m，2H)，2.53(ABX dd，J＝15.6，4.0Hz，1H)，2.33(ABX dd，J＝15.6，8.8Hz，1H)，1.92-1.73(m，2H)，1.25(q，J＝7.1Hz，3H).
制備N-BOC-4-哌啶乙醇(9)在0℃，把N-叔-丁氧基羰基酐(31g，0.14mol)加到攪拌著的4-哌啶乙醇8(18.7g，0.14mol)和DMF(200ml)溶液中。1小時(shí)后，移去冷浴，將反應(yīng)混合物攪拌20小時(shí)。用醚稀釋反應(yīng)混合物，然后用水(2次)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，得無色油狀物9(26g，62%)。
TLC Rf＝0.25(40% 乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.09(bs，2H)，3.72(t，J＝7Hz，2H)，2.70(m，2H)，1.75-1.10(m，7H)，1.46(s，9H).
制備N-BOC-4-哌啶乙基碘化物(10)室溫下，把碘(22.0g，85mmol)加到攪拌著的9(18.0g，77mmol)、三苯基膦(22.2g，85mmol)，咪唑(7.9g，115mmol)和苯(800ml)的溶液中。5分鐘后，過濾非均相的反應(yīng)混合物，濃縮過濾物。快速色譜(硅膠，10%乙酸乙酯/己烷)得油狀物10(20g，59%)。
TLC Rf＝0.95(50%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.11(m，2H)，3.24(t，J＝6Hz，2H)，2.72(m，2H)，1.82(dt，J＝7，7Hz，2H)，1.75，-1.55(m，5H)，1.48(s，9H)，1.12(m，2H).
制備N-BOC-4-哌啶乙基疊氮化物(11)將10(5.0g，14.7mmol)，DMSO(75ml)和NaN3(1.9g，29.4mmol)的溶液在70℃加熱2小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋冷的反應(yīng)混合物，用水(2次)和鹽水洗滌、干燥(MgSO4)，濃縮，得無色油狀物11(3.6g，96%)。
TLC Rf＝0.75(30%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.11(m，2H)，3.36(t，J＝7Hz，2H)，2.73(m，2H)，1.70(m，3H)，1.49(s，9H)，1.15(m，2H).
制備N-BOC-4-哌啶乙胺(12)將11(1.1g，4.3mmol)，10%Pd/C(0.16g)和乙醇的混合物于氫氣(1大氣壓)下攪拌1.5小時(shí)。在硅藻土填料上過濾反應(yīng)混合物，濃縮過濾物，得粗油狀物12(1.0g)。
TLC Rf＝0.18(9∶1∶1 CH2Cl2/CH3OH/HOAC);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.10(m，2H)，2.78(t，J＝7Hz，2H)，2.70(m，2H)，1.80(m，2H)，1.67(m，2H)，1.52(m，1H)，1.47(s，9H)，1.17(m，2H).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-丙烯-2-基-(2-咪唑啉酮)(14)
在室溫下，把LiN(TMS)2(1M在己烷中，17ml)加到攪拌著的13(1.5g，17mmol)的DMF(75ml)溶液中以產(chǎn)生沉淀。然后將烯丙基溴(1.6ml，19mmol)加到反應(yīng)混合物中。15分鐘后，又用LiN(TMS)2(14ml)處理均相混合物，5分鐘后接著加碘化物10(5.9g，17mmol)，將反應(yīng)物攪拌20小時(shí)，然后用醚稀釋。用水(2次)，5%KHSO4和鹽水洗滌醚的部分，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(40%乙酸乙酯/己烷)得無色油狀物14(0.8g，15%)。
TLC Rf＝0.46(70%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ5.80(m，1H)，5.23(m，2H)，4.10(m，2H)，3.82(m，2H)，3.30(m，6H)，2.72(m，2H)，1.70(m，3H)，1.50(m，2H)，1.46(s，9H)，1.15(m，2H).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基)-3-乙酸-(2-咪唑啉酮)(15)在室溫下，把RuCl3(12mg，4.4mol%)和過量NaIO4加到激烈攪拌的14(450mg，1.4mmol)，CCl4、乙腈和水的溶液中。60小時(shí)后，反應(yīng)混合物在硅藻填料上過濾，用乙酸乙酯洗滌。濾液用飽和NaHCO3萃取，接著用5%KHSO4酸化該水相為pH3。然后用乙酸乙酯(2次)萃取酸性水相，干燥(MgSO4)有機(jī)相部分，濃縮?？焖偕V(硅膠，9∶0.2∶0.2 CH2Cl2/CH3OH/HOAC)得無色油狀物15(60mg，12%)。
TLC Rf＝0.29(9.5∶0.5∶0.5CH2Cl2/CH3OH/HOAC).
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.05(m，2H)，3.90(m，2H)，3.45(m，2H)，3.40(m，2H)，3.24(m，2H)，2.69(m，2H)，1.72(m，2H)，1.46(m，3H)，1.46(s，9H)，1.15(m，2H).
制備〔1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-(2-咪唑啉酮)-3〕-乙酰基-3(R)-〔2-(吲哚-3-基)-乙基〕β-氨基丙酸乙酯(16)在0℃用EDC(42mg，0.22mmol)處理攪拌著的15(60mg，0.17mmol)、7a(66mg，0.25mmol)、HOBT(30mg，0.22mmol)、三乙胺(31uL，0.22mmol)和DMF(1.1ml)的溶液，接著移去冷浴。20小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)液，然后用水、5%KHSO4和鹽水洗滌、干燥(MgSO4)，濃縮，快速色譜(硅膠、乙酸乙酯)得無色油狀物16(35mg，35%)。
TLC Rf＝0.20(乙酸乙酯);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.07(bs，1H)，7.57(d，J＝8Hz，1H)，7.37(d，J＝8Hz，1H)，7.18(t，J＝8Hz，1H)，7.11(t，J＝8Hz，1H)，7.05(bs，1H)，6.89(d，J＝9Hz，1H)，4.37(m，1H)，4.13(q，J＝7Hz，2H)，4.07(m，2H)，3.83(dd，J＝18Hz，2H)，3.43-3.20(m，6H)，2.80(m，2H)，2.56(d，J＝5Hz，2H)，2.00-1.05(m，9H)，1.47(s，9H)，1.25(t，J＝7Hz，3H).
制備〔1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-(2-咪唑啉酮(imidazolidinone))-3〕-乙?；?3(R)-〔2-(吲哚-3-基)乙基〕-β-氨基丙酸(17)在室溫下，把16(30mg，50μmol)、1N NaOH(0.2ml)和乙醇的混合物攪拌1小時(shí)。用乙酸乙酯和5% KHSO4稀釋反應(yīng)混合物，用水和鹽水洗滌有機(jī)相部分，接著干燥(MgSO4)，濃縮，得無色油狀物17(30mg，100%)。
TLC Rf＝0.74(9∶1∶1 CH2Cl2/CH3OH/HOAC)制備〔1-〔2-哌啶-4-基)乙基〕-(2-咪唑啉酮)-3〕-乙?；?3(R)-〔2-(吲哚-3-基)乙基〕β-氨基丙酸(18)在-15℃，把TFA(0.3ml)加到攪拌著的17(30mg，50μmol)，二氯甲烷(300μL)和苯甲醚(15μl，100μmol)溶液中。20分鐘后，濃縮反應(yīng)混合物。與甲苯共沸除去剩余物TFA?？焖偕V(硅膠，10∶0.8∶0.8甲醇/NH4OH/水)得白色固體18(15mg，66%)。
TLC Rf＝0.16(10∶1∶1甲醇/NH4OH/水);
1H NMR(300 MHz，CD3OD)δ7.44(d，J＝Hz，1H)，7.20(d，J＝8Hz，1H)，6.95(t，＝J＝8Hz，1H)，6.94(s，1H)，6.88(t，J＝8Hz，1H)，4.17(m，1H)，3.71(s，2H)，3.40)3.10(m，8H)，2.86(m，2H)，2.70(t，J＝6Hz，2H)，2.32(m，2H)，1.90(m，4H)，1.55(m，1H)，1.43(m，2H)，1.28(m，2H).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-(2-吡咯烷酮(pyrrolidinone))(19)在0℃把4-氯丁酰氯(2.6ml，23.6mmol)加到攪拌著的12(2.7g，11.8mmol)、乙腈(60ml)和二異丙基乙胺(4.1ml，23.6mmol)溶液中，接著移去冷浴。5小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用水(2次)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，在0℃將粗酰胺溶于DMF(60ml)中，然后用NaN(TMS)2(1M在THF中，11.8mL)處理。5分鐘后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，然后用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、濃縮?？焖偕V(硅膠，70%乙酸乙酯/己烷)，得無色油狀物19(0.4g，12%)。
TLC Rf＝0.27(70%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.10(m，2H)，3.39(t，J＝7Hz，2H)，3.34(t，J＝7Hz，2H)，2.70(m，2H)，2.40(m，2H)，2.05(m，2H)，1.72(m，2H)，1.46(m，3H)，1.45(s，9H)，1.13(m，2H).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-丙烯-2-基-(2-吡咯烷酮)(20)在-78℃，把LDA(0.5M在THF中，2.4ml)滴加到攪拌著的19(325mg，1.1mmol)的THF(5ml)溶液中。15分鐘后將烯丙基溴(0.16ml，2.2mmol)加入，在-78℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，接著用HOAC(0.1ml)驟冷。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用水和鹽水洗滌、干燥(MgSO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠，50%乙酸乙酯/己烷)，得油狀物20(160mg，45%)。
TLC Rf＝0.23(50%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ5.80(m，1H)，5.10(m，2H)，4.10(m，2H)，3.32(m，4H)，2.70(m，2H)，2.56(m，2H)，2.20(m，2H)，1.73(m，3H)，1.48(s，9H)，1.13(m，2H).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-乙酸-2-吡咯烷酮(21)用14轉(zhuǎn)化為15的方法、20(130mg，0.4mmol)轉(zhuǎn)為21(80mg，48%)，快速色譜(硅膠，9∶0.2∶0.2CH2Cl2/CH3OH/HOAc)后為油狀物。
TLC Rf＝0.25(9∶0.2∶0.2 CH2Cl2/CH3OH/HOAc);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.05(m，2H)，3.40(m，4H)，2.96(m，1H)，2.83(m，1H)，2.70(m，2H)，2.55(m，1H)，2.40(m，1H)，1.90-1.10(m，7H)，1.48(s，9H).
制備〔1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-3〕-乙?；?〔2-(吲哚-3-基)-乙基〕β-氨基丙酸乙酯(22)用15轉(zhuǎn)化成16的方法，21(120mg，0.35mmol)快速色譜(硅膠，乙酸乙酯)后得22(90mg，48%)。
TLC Rf＝0.40(乙酸乙酯);
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.09(bd，1H)，7.58(d，J＝8Hz，1H)，7.36(d，J＝8Hz，1H)，7.17(t，J＝8Hz，1H)，7.10(t，J＝8Hz，1H)，7.07(bs，1H)，4.39(m，1H)，4.12(q，J＝7Hz，2H)，4.05(m，2H)，3.30(m，4H)，2.90-2.25(m，8H)，2.00-1.00(m，8H)，1.48(s，9H)，1.23(t，J＝7Hz，3H).
制備〔1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-3〕乙?；?〔2-(吲哚-3-基)-乙基〕β-氨基丙酸(23)用16轉(zhuǎn)化成17的方法，22(80mg，0.14mmol)處理后得23(80mg)，直接用于下步反應(yīng)。
TLC Rf＝0.50(9∶1∶1CH2Cl2/CH3OH/HOAc)制備〔1-〔2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-3〕乙?；?〔2-(吲哚-3-基)-乙基〕β-氨基丙酸(24)用17轉(zhuǎn)成18的方法，23(80mg，0.14mmol)生成24(15mg，23%)，24經(jīng)快速色譜(硅膠，10∶0.65∶0.65甲醇/NH4OH/水)處理。
TLC Rf＝0.53(10∶1∶1甲醇/NH4OH/水)1H NMR(300 MHz，CD3OD)δ7.47(t，J＝7Hz，1H)，7.25(d，J＝7Hz，1H)，6.99(m，2H)，6.88(t，J＝7Hz，1H)，4.19(m，1H)，3.49(m，0.5H)，3.40(m，0.5H)，3.34-2.95(m，6H)，2.90-2.60(m，4H)，2.48(m，1H)，2.40-2.20(m，4H)，2.13(m，1H)，2.00-1.05(m，11H).
制備5-氯-戊酰基-氨基-2-丙烯(26)
在室溫，把4-氯丁酰氯(3.4ml，27mmol)加到攪拌著的烯丙胺25(2.0g，27mmol)、NMM(8.9ml，81mmol)和乙腈(140ml)的混合物中、20小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物。剩余物溶于乙酸乙酯中，然后用水、5% KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，得黃色油狀物26(4.1g，87%)。
TLC Rf＝0.17(40%乙酸乙酯/己烷)。
制備1-(丙烯-2-基)-2-哌啶酮(27)在-78℃，氣流中把NaN(TMS)2(1.0M在THF中，11ml)加到攪拌著的26(2.0g，11mmol)的THF(110ml)溶液中，接著移去冷浴。1.5小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用水、5%KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、濃縮，快速色譜(硅膠，60%乙酸乙酯/己烷)得油狀物27(1.1g，72%)。
TLC Rf＝0.15(60%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ5.78(m，1H)，5.15，4.00(d，J＝7Hz，2H)，3.24(m，2H)，2.41(m，2H)，2.07(m，2H)，1.80(m，4H).
制備3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-1-乙酸-2-哌啶酮(28)在-78℃，把LDA(0.5M在THF中，15.8ml)滴加到攪拌著的27(1.0g，7.2mmol)和THF(70ml)的溶液中。15分鐘后，將在THF(5ml)中的碘化物10(2.7g，7.9mmol)加入，接著緩慢溫?zé)岬?30℃1小時(shí)。反應(yīng)物用乙酸(0.2ml)驟冷，然后濃縮。快速色譜(硅膠，40%乙酸乙酯/己烷)得油狀物28(1.5g，59%)。
TLC Rf＝0.58(乙酸乙酯);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ5.77(m，1H)，5.15(m，1H)，4.06(m，2H)，4.00(m，2H)，3.23(m，2H)，2.59(m，2H)，2.19(m，1H)，2.05-1.25(m，11H)，1.48(s，9H)，1.10(m，2H).
制備3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-乙酸-2-哌啶酮(29)在室溫，用RuCl3(50mg，0.24mmol)處理激烈攪拌的28(0.84g，2.4mmol)，CCl4(5ml)、乙腈(5ml)，NaIO4(2.1g，9.8mmol)和水(7.5ml)的混合物。20小時(shí)后再加入RuCl3(50mg)。4小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和半飽和NaHCO3稀釋。搖動(dòng)和分離后，用5%KHSO4酸化水相部分，用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機(jī)提取液，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(硅膠，9∶0.2∶0.2CH2Cl2/甲醇/HOAc)得油狀物29(280mg，30%)。
TLC Rf＝0.36(9∶0.5∶0.5CH2Cl2/甲醇/HOAc)。
制備〔3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-咪唑啉酮-1〕乙?；?〔3(R)-〔2-(吲哚-3-基)乙基〕-β-氨基丙酸乙酯(30)用15轉(zhuǎn)成16的方法，29(280mg，0.76mmol)生成30(300mg，64%)，快速色譜(硅膠，85%乙酸乙酯/己烷)后為油狀物。
TLC Rf＝0.18(85%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.14(m，1H)，7.60(d，J＝8Hz，1H)，7.39(d，J＝8Hz，1H)，7.20(t，J＝8Hz，1H)，7.13(t，J＝8Hz，1H)，7.05(bs，1H)，6.90(d，J＝9Hz，1H)，4.35(m，1H)，4.11(q，J＝7Hz，2H)，4.05(m，2H)，3.98(s，2H)，3.40(m，2H)，2.90-2.50(m，6H)，2.33(m，1H)，2.00-1.00(m，15H)，1.48(s，9H)，1.279t，J＝7Hz，3H).
制備[3-[2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基]-2-哌啶酮-1]乙酰基-[3(R)-[2-吲哚-3-基)乙基]β-氨基丙酸(31)用16轉(zhuǎn)成17的方法，30(160mg，0.26mmol)生成31(140mg，92%)，處理后為白色固體。
TLC Rf＝0.59(9∶1∶1CH2Cl2/甲醇/HOAc)制備〔3-〔2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-1〕乙?；?〔3(R)-〔2-吲哚-3-基)乙基〕β-氨基丙酸(32)用17轉(zhuǎn)成18的方法，31(140mg，0。24mmol)生成32(55mg，47%)，快速色譜后為白色固體(硅膠，10∶0.4∶0.4甲醇/NH4OH/水)。
TLC Rf＝0.46(10∶1∶1甲醇/NH4OH/水);
1H NMR(300 MHz，CD3OD)δ7.54(d，J＝8Hz，1H)，7.30(d，J＝8Hz，1H)，7.03(t，J＝8Hz，1H)，7.02(bs，1H)，6.97(m，1H)，4.28(m，1H)，4.20(d，J＝16Hz，0.5H)，3.75(d，J＝16Hz，0.5H)，3.50-3.15(m，4H)，2.80(m，4h)，2.50-2.30(m，3H)，2.00-1.20(m，15H).
制備3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮(36a)在-78℃，向芐基酰胺35a(0.8g，2.2mmol)(在THF(20ml)中)分兩次加入新制得的二-叔-丁基二苯基鋰(0.5M的THF，10.8ml)。反應(yīng)1小時(shí)后用HOAC(0.1ml)驟冷并接著濃縮反應(yīng)混合物。快速色譜(5%甲醇/乙酸乙酯)得白色固體36a(470mg，72%)。
TLC Rf＝0.27(10%甲醇/乙酸乙酯);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ6.03(m，1H)，4.10(m，2H)，3.35(m，2H)，2.70(m，2H)，2.33(m，2H)，1.92(m，1H)，1.80(m，1H)，1.70(m，2H)，1.50-1.30(m，4H)，1.48(s，9H)，1.12(m，2H).
制備1-乙酸甲酯-3-[2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基]-2-吡咯烷酮(37a)把NaN(TMS)2(1.0M的THF，1.1ml)加到-78℃攪拌著的36a(340mg，1.1mmol)的THF(10ml)溶液中。15分鐘后，加入溴乙酸乙酯(250μl，2.2mmol)，將反應(yīng)混合物溫?zé)岬?20℃。2小時(shí)后，把反應(yīng)物用HOAc(0.1ml)驟冷、濃縮、快速色譜(硅膠，50%乙酸乙酯/己烷)，得油狀37a(380mg，90%)。
TLC Rf＝0.66(10%甲醇/乙酸乙酯);
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.22(q，J＝7Hz，2H)，4.10(m，2H)，4.08(s，2H)，3.24(m，2H)，2.70(m，2H)，2.44(m，1H)，2.26(m，1H)，2.00-1.65(m，4H)，1.48(s，9H)，1.50-1.30(m，4H)，1.31(t，J＝7Hz，3H)，1.12(m，2H).
制備[3-[2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基]-2-吡咯烷酮-1-乙酸(38a)用16轉(zhuǎn)成17的方法，37a(390mg，1.1mmol)轉(zhuǎn)成38a，處理后為白色泡沫狀38a(340mg，91%)。TLC Rf＝0.39(9∶0.5∶0.5CH2Cl2/甲醇/HOAc)。
制備〔3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-1〕乙?；?〔3(R)-(吲哚-3-基)-乙基〕β-氨基丙酸乙酯(39a)用把15轉(zhuǎn)成16的方法，38a(310mg，0.92mmol)轉(zhuǎn)成39a(460mg，86%)，在快速色譜處理后39a為黃色油狀物(硅膠，85%乙酸乙酯/己烷)。
TLC Rf＝0.16(85%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.21(bs，1H)，7.58(d，J＝8Hz，1H)，7.38(d，J＝8Hz，1H)，7.20(t，J＝8Hz，1H)，7.13(t，J＝8Hz，1H)，7.05(bs，1H)，6.72(d，J-10Hz，1H)，4.35(m，1H)，4.13(q，J＝7Hz，2H)，4.09(m，2H)，3.97(d，J＝15Hz，1H)，3.86(d，J＝15Hz，1H)，3.41(m，2H)，2.80(m，2H)，2.65(m，2H)，2.55(dd，J＝1.5Hz，2H)，2.45(m，1H)，2.24(m，1H)，2.00-1.20(m，10H)，1.48(s，9H)，1.26(t，J＝7Hz，3H)，1.04(m，2H).
制備〔3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基-1〕-乙?；?〔3(R)-〔2-(吲哚-3-基)乙基)β-氨基丙酸(40a)用16轉(zhuǎn)成17的方法，則39a(460mg，0.79mmol)生成40a(360mg，86%)，處理后為泡沫狀。
TLC Rf＝0.57(9∶1∶1CH2Cl2/甲醇/HOAC)。
制備〔3-〔2-(哌啶-4-基)乙基-1〕乙?；?〔3(R)-〔2-(吲哚-3-基)乙基〕β-氨基丙酸(41a)用17轉(zhuǎn)成18的方法，40a(360mg，0.65mmol)生成41a(180mg，59%)，快速色譜處理后為白色固體(硅膠，10∶0.4∶0.4甲醇/NH4OH/水)。
TLC Rf＝0.21(10∶0.4∶0.4甲醇/NH4OH/水。
1H NMR(300 MHz，CD3OD)δ7.36(d，J＝8Hz，1H)，7.13(d，J＝8Hz，1H)，6.87(t，J＝8Hz，1H)，6.86(s，1H)，6.78(t，J＝8Hz，1H)，4.09(m，1H)，3.82(d，J＝16Hz，1H)，3.70(d，J＝16Hz，1H)，3.33(m，2H)，3.07(m，2H)，2.63(m，4H)，2.30(m，1H)，2.25(m，2H)，2.05(m，1H)，1.90-1.50(m，6H)，1.40-1.05(m，6H).
制備3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮(36b)用35a轉(zhuǎn)成36a的方法，35b(0.7g，1.7mmol)生成36b(260mg，62%)，快速色譜(硅膠，5%甲醇/乙酸乙酯)處理后為白色固體。
TLC Rf＝0.27(10%甲醇/乙酸乙酯)。
制備3-〔2-N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-1-乙酸乙酯(37b)用36a轉(zhuǎn)成37a的方法，36b(260mg，0.88mmol)生成37b(300mg，89%)，快速色譜(硅膠，50%乙酸乙酯/己烷)處理后為油狀物。
TLC Rf＝0.66(10%甲醇/乙酸乙酯)制備3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-1-乙酸(38b)用16轉(zhuǎn)成17的方法，37b(300mg，0.78mmol)生成38b(260mg，98%)、為結(jié)晶固體。
TLC Rf＝0.38(9∶0.5∶0.5CH2Cl2/甲醇/HOAc)。
制備〔3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-1〕乙?；?〔3(R)-〔2-(吲哚-3-基)-乙基〕β-氨基丙酸乙酯(39b)用15轉(zhuǎn)成16的方法，38b(260mg，0.73mmol)生成39b(360mg，83%)，快速色譜后為油狀物(硅膠，85%乙酸乙酯/己烷)。
TLC Rf＝0.16(85%甲醇/乙酸乙酯);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.29(bs，1H)，7.57(d，J＝8Hz，1H)，7.38(d，J＝8Hz，1H)，7.19(t，J＝8Hz，1H)，7.12(t，J＝8Hz，1H)，7.04(d，J＝1Hz，1H)，6.67(d，J＝10Hz，1H)，4.33(m，1H)，4.13(q，J＝7Hz，2H)，4.07(m，2H)，3.99(d，J＝16Hz，1H)，3.82(d，J＝16Hz，1H)，3.40(m，2H)，2.80(m，2H)，2.68(m，3H)，2.55(dd，J＝5，2Hz，2H)，2.43(m，1H)，2.22(m，1H)，2.00-1.00(m，11H)，1.47(s，9H)，1.28(t，J＝7Hz，3H).
制備〔3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-1〕乙?；?〔3(R)-〔2-吲哚-3-基)-乙基〕β-氨基丙酸(40b)用16轉(zhuǎn)成17的方法，39b(280mg，0.47mmol)生成40b(250mg，94%)，快速色譜(硅膠，9∶1∶1CH2Cl2/甲醇/HOAc)后為白色固體。
TLC Rf＝0.21(9∶1∶1CH2Cl2/甲醇/HOAc)制備〔3-〔2-(N-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-1〕乙酰基-〔3(R)-〔2-(吲哚-3-基)乙基〕β-氨基丙酸(41b)用17轉(zhuǎn)成18的方法，40b(250mg，0.44mmol)生成41b(100mg，49%)，快速色譜處理后為白色固體(硅膠，10∶0.4∶0.4甲醇/NH4OH/水)。
TLC Rf＝0.46(10∶0.4∶0.4甲醇/NH4OH/水);
1H NMR(300 MHz，CD3OD)δ7.52(d，J＝8Hz，1H)，7.29(d，J＝8Hz，1H)，7.03(t，J＝8Hz，1H)，7.02(s，1H)，6.95(t，J＝8Hz，1H)，4.27(m，1H)，4.05(d，J＝16Hz，1H)，3.81(d，J＝16Hz，1H)，3.42(m，2H)，3.26(m，2H)，2.90-2.70(m，4H)，2.49(m，1H)，2.40(d，J＝6Hz，2H)，2.22(m，1H)，2.05-1.70(m，5H)，1.60-1.25(m，5H).
4-(N-BOC-哌啶-4-基)丁烯酸乙酯(42)在-78℃把DMSO(0.52ml，7.0mmol)滴加到攪拌著的草酰氯(0.43ml，5.0mmol)的CH2Cl2(20ml)溶液中。氣體釋放減少之后(5分鐘)在氣流中加入醇9(0.8g，3.5mmol)(在CH2Cl2(20ml)中)。20分鐘后，滴加入三乙胺(1.7ml，12mmol)，然后移去冷浴。20分鐘后，將乙氧基羰基亞甲基三苯正膦(1.4g，4.0mmol)以一份加入。2.0小時(shí)后，用石油醚稀釋反應(yīng)混合物，然后依次用H2O、5%KHSO4和鹽水洗滌、干燥(MgSO4)、濃縮?？焖偕V(硅膠，15%乙酸乙酯/己烷)處理后得無色油狀物酯(42)。
TLC Rf＝0.79(50%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ6.91(dt，J＝16和7Hz，1H)，5.81(bd，J＝17Hz，1H)，4.18(q，J＝7Hz，2H)，4.08(m，2H)，2.67(m，2H)，2.14(t，J＝7Hz，2H)，1.70-1.05(m，5H)，1.44(s，9H)，1.28(t，J＝7H，3H).
制備4-(N-BOC-哌啶-4-基)-丁酸乙酯(43)在10%Pd/c(5.0g)存在下，于室溫，在氫氣氛(1大氣壓)下，氫化一夜烯烴42(26g，87mmol)(在乙酸乙酯(500ml)中)。然后用氬通到反應(yīng)混合物中，通過硅藻填料過濾。用快速色譜處理濃縮過濾物(硅膠，10%乙酸乙酯/己烷)生成結(jié)晶狀固體酯43。
TLC Rf＝0.42(20%乙酸乙酯/己烷);1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.16(q，J＝7Hz，2H)，4.10(m，2H)，2.69(m，2H)，2.31(t，J＝7Hz，2H)，1.68(m，4H)，1.38(s，9H)，1.40(m，1H)，1.11(m，2H).
制備4-(N-BOC-哌啶-4-基)丁酸(44)在室溫下，把酯43(19g，63mmol)、乙醇(300ml)和1N NaOH(100ml，100mmol)的溶液攪拌2.5小時(shí)，然后濃縮。剩余物用5%KHSO4和乙酸乙酯稀釋，并轉(zhuǎn)移到分液漏斗中。搖動(dòng)多相并分離，用鹽水洗滌有機(jī)相、干燥(MgSO4)、濃縮，得無色油狀酸44，靜置結(jié)晶。
mp＝80-81℃;TLC Rf＝0.68(乙酸乙酯);1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.10(m，2H)，2.71(m，2H)，2.38(t，J＝7Hz，2H)，1.70(m，4H)，1.60-1.30(m，3H)，1.48(s，9H)，1.12(m，2H).
制備4(S)-芐基-2-噁唑烷酮-4-(BOC-哌啶-4-基)-丁酸酯(45)在-78℃，氣流中，把三甲基乙酰氯(7.6ml，61mmol)加到攪拌著的44(15.3g，56mmol)，NEt3(9.4ml，67mmol)和無水THF(240ml)的溶液中。10分鐘后，移去冷浴，改用冰浴。1.0小時(shí)后，非均相混合物再冷至-78℃，接著通過套管在-78℃加入(S)-(-)-4-芐基-2-噁唑烷酮鋰(62mmol)(在無水THF(150ml)中)和正-BuLi(38.8ml，62mmol，1.6M/己烷)。反應(yīng)完成后，反應(yīng)混合物溫?zé)岬?℃1小時(shí)，然后用乙酸乙酯稀釋，用水，飽和NaHCO3，5%KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(硅膠，30%乙酸乙酯/己烷)處理得無色油狀物45
TLC Rf＝0.45(30% 乙酸乙酯/己烷);1H NMR(400MHz，CDCl3)7.36-7.20(m，5H)，4.67(m，1H)，4.18(m，2H)，4.08(m，2H)，3.30(dd，J＝13 and 3Hz，1H)，2.93(m，2H)，2.77(dd，J＝13 and 10Hz，1H)，2.69(m，2H)，1.70(m，4H)，1.50-1.30(m，3H)，1.45(s，9H)，1.11(m，2H).
制備4(S)-芐基-1-噁唑烷酮-4-(BOC-哌啶-4-基)-2(R)-(2-氰基乙基)丁酸酯(46)在0℃，把異丙氧基鈦(Ⅳ)(4.2ml，14mmol)加到攪拌著的TiCl4(42ml，42mmol，1M/CH2Cl2)和CH2Cl2(250ml)的溶液中。15分鐘后，將二異丙基乙胺(11.0ml)(在CH2Cl2(75ml)中)加入，接著在0℃繼續(xù)攪拌至深紅色溶液。10分鐘后，加入45(21.8g，51mmol)(在CH2Cl2(75ml)中)接著0℃繼續(xù)攪拌1.0小時(shí)。在0℃加入丙烯腈(33.4ml，0.50mol)至呈深紅色溶液。4.0小時(shí)后，在0℃用飽和NH4Cl(150ml)把反應(yīng)物驟冷，然后用CH2Cl2(3×250ml)提取。用飽和NaHCO3和鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(硅膠，25%乙酸乙酯/己烷)處理，得黃色油狀粗產(chǎn)品46。粗產(chǎn)品46經(jīng)色譜(硅膠，2.5%丙酮/CH2Cl2)分離得油狀物46，除去混合餾分(1.6g)外，用HPLC分離純度為97%。
TLC Rf＝0.35(2.5%丙酮/CH2Cl2);1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.50-7.30(m，5H)，4.68(m，1H)，4.21(m，2H)，4.07(m，2H)，3.80(m，1H)，3.33(dd，J＝13 and 4Hz，1H)，2.77(dd，J＝13 and 10Hz，1H)，2.65(m，2H)，2.38(m，2H)，2.13(m，1H)，1.89(m，1H)，1.75(m，1H)，1.63(m，2H)，1.50(m，2H)，1.45(s，9H)，1.35(m，1H)，1.25(m，2H)，1.08(m，2H).
制備4(S)-環(huán)己基甲基-2-噁唑烷酮-4-(BOC-哌啶-4-基)-2(R)-(2-氨基丙基)丁酸酯·HCl(47)室溫下，在Parr儀器中，氫氣氛下(60PSI)，搖動(dòng)46(19.2g，40mmol)，PtO2(2.0g)，CH3OH(70ml)和CHCl3(7.0ml)的混合物3小時(shí)。反應(yīng)混合物通過硅藻土填料過濾，然后濃縮得白色固體粗胺·HCl47。該物直接用于下一步反應(yīng)
TLC Rf＝0.50(10∶1∶1 CH2Cl2/CH3OH/HOAc);1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.28(bs，2H)，4.50(m，1H)，4.35(m，1H)，4.14(m，1H)，4.03(m，2H)，3.63(m，1H)，3.02(m，2H)，2.63(m，2H)，2.00-1.00(m，24H)，1.45(s，9H).
制備3-(R)-〔N-BOC-2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮(48)室溫下，攪拌粗胺·HCl47(16.6g，31mmol)、乙腈(750ml)和NaHCO3(10.0g)20小時(shí)。非均相混合物用二-叔-丁基二碳酸酯(3.0g)處理，接著繼續(xù)攪拌1.0小時(shí)，再保護(hù)在先前反應(yīng)中生成的少量游離哌啶。過濾除去NaHCO3，濃縮過濾物?？焖偕V(硅膠，5% CH3OH/乙酸乙酯)處理得無色結(jié)晶固體的內(nèi)酰胺48mp＝110-111℃;TLC Rf＝0.65(20%甲醇/乙酸乙酯);1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ6.31(bs，1H)，4.06(m，2H)，3.31(m，2H)，2.67(m，3H)，2.28(m，1H)，2.00-1.20(m，11H)，1.45(s，9H)，1.10(m，2H).
制備〔3(R)-〔N-BOC-2-(哌啶-4-基)-乙基〕-2-哌啶酮-1〕乙酸乙酯(49)在-78℃，把NaN(TMS)2(24.5ml，24.5mmol，1M/己烷滴加入攪拌著的48(6.7g，22mmol)和無水THF(150ml)的溶液中。15分鐘后，加入溴代乙酸乙酯(5.2ml，45mmol)，反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃ 1.0小時(shí)。用AcOH(1.0ml)驟冷，用乙酸乙酯稀釋，用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠，40%乙酸乙酯/己烷)處理，得黃色油狀的酯49。
TLC Rf＝0.26(40% 乙醚乙酯/己烷);1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.20(q，J＝7Hz，2H)，4.17(d，J＝18Hz，1H)，4.08(m，2H)，3.98(d，J＝18Hz，1H)，3.37(m，2H)，2.68(m，2H)，2.32(m，1H)，2.00-1.25(m，11H)，1.45(s，9H)，1.30(t，J＝7Hz，3H)，1.11(m，2H).
制備3-(R)-〔N-BOC-2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-1〕乙酸(50)室溫?cái)嚢?9(6.0g，15mmol)，1N NaOH(50ml，50mmol)和CH3OH(75ml)的溶液1.0小時(shí)。反應(yīng)混合物用5%KHSO4水溶液酸化，然后用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機(jī)相部分，干燥(MgSO4)，濃縮得黃色油狀羧酸。用己烷研制油狀物得松軟的白色固體。
TLC Rf＝0.31(9∶0.5∶0.5 CH2Cl2/CH3OH/AcOH);1H NMR(400MHz，CDCl)δ4.13(d，J＝17Hz，1H)，4.07(m，2H)，4.06(d，J＝17Hz，1H)，3.39(m，2H)，2.33(m，1H)，1.95(m，3H)，1.81(m，1H)，1.70-1.25(m，7H)，1.45(s，9H)，1.08(m，2H).
制備3(R)-BOC-氨基-1-偶氮丁-2-酮(52)在-15℃把氯代甲酸異丁酯(2.6ml，20mmol)加入到攪拌著的51(3.8g，20mmol)、4-甲基嗎啉(2.2ml，20mmol)和乙酸乙酯(200ml)的溶液中。1.0小時(shí)后，用水和鹽水洗滌反應(yīng)混合物，干燥(MgSO4)，過濾入園底燒瓶中。冷至0℃后，混合酐用重氮甲烷(80ml，40mmol，δ0.5M溶液)的醚溶液分批處理。2.0小時(shí)后移去冷浴，用氬氣通到溶液中30分鐘除去過量重氮甲烷。濃縮得粗重氮甲酮52，并直接用于下一步反應(yīng)。
TLC Rf＝0.37(30%乙酸乙酯/己烷)。
制備乙基-N-BOC-3(R)-甲基-β-氨基丙酸(53)粗產(chǎn)品重氮甲酮52(4.3g，～20.0mmol)溶于乙醇(250ml)，接著用NEt3(3.4ml，24mmol)和苯甲酸銀(1.4g，6.0mmol)處理，激烈放出氣體和產(chǎn)生黑色沉淀。1.0小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物，用快速色譜法純化剩余物(硅膠，10%乙酸乙酯/己烷)，得無色油狀乙酯53。
TLC Rf＝0.42(30% 乙酸乙酯/己烷);1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.96(m，1H)，4.19(q，J＝7Hz，2H)，4.04(m，1H)，2.52(dd，J＝15 and 6Hz，1H)，2.46(dd，J＝15 and 6Hz，1H)，1.44(s，9H)，1.26(t，J＝7Hz，3H)，1.21(d，J＝7Hz，3H).
制備乙基3(R)-甲基-β-氨基丙酸·HCl(54)在-15℃，機(jī)械攪拌53(2.2g，9.7mmol)的乙酸乙酯(180ml)溶液，激烈鼓泡通入HCl氣體30分鐘。除去冷浴(乙醇/冰)。用氬氣通到溶液中1.0小時(shí)以除去過量HCl。濃縮得黃色油狀胺·HCl54。
1H NMR(400 MHz，D2O)δ4.23(q，J＝7Hz，2H)，3.78(m，1H)，2.79(m，2H)，1.38(d，J＝7Hz，3H)，1.29(t，J＝Hz，3H).
制備〔3(R)-〔N-BOC-2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-1〕乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸乙酯(55)向攪拌著的50(1.0g，2.7mmol)54(0.48g，2.8mmol)，HOBT(0.39g，2.8mmol)，N(i-pr)2Et(1.5ml，8.5mmol)和無水DMF(100ml)的溶液于-15℃加入EDC(0.95g，2.8mmol)，接著移去冷浴。20小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用水、飽和NaHCO3，5%KHSO4水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(硅膠，乙酸乙酯)得無色油狀物55。
TLC Rf＝0.35(乙酸乙酯);1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.82(bd，1H)，4.32(m，1H)，4.13(q，J＝7Hz，2H)，4.10(d，J＝15Hz，1H)，4.08(m，2H)，4.82(d，J＝15Hz，1H)，3.36(m，2H)，2.67(m，2H)，2.48(dd，J＝5 and 1Hz，2H)，2.33(m，1H)，2.00-1.20(m，11H)，1.45(s，9H)，1.27(t，J＝7Hz，3H)，1.21(d，J＝7Hz，3H)，1.10(m，2H).
制備〔3(R)-〔N-BOC-2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-1〕乙酰基-3(R)-甲基-β-氨基丙酸(56)
室溫?cái)嚢?5(1.2g，2.5mmol)，1N NaOH(10ml，10mmol)和CH3OH(18ml)的溶液1.0小時(shí)。用5%KHSO4水溶液酸化反應(yīng)混合物，然后用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機(jī)相部分，干燥(MgSO4)，濃縮。與甲苯共沸除去殘余HOAc后，經(jīng)快速色譜(硅膠10∶0.5∶0.5 CH2Cl2/CH3OH/HOAc)得無色油狀羧酸56。
TLC Rf＝0.40(10∶0.5∶0.5 CH2Cl2/CH3OH/HOAc);1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.02(bd，1H)，4.35(m，1H)，4.12(d，J＝16Hz，1H)，4.08(m，2H)，3.87(d，J＝16Hz，1H)，3.32(m，2H)，2.69(m，2H)，2.56(m，2H)，2.36(m，1H)，2.00-1.25(m，11H)，1.45(s，9H)，1.03(m，2H).
制備〔3(R)-〔2-哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-1〕乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸(57)室溫?cái)嚢?6(0.74g，1.6mmol)，三氟乙酸(10ml)和CH2Cl2(10ml)的溶液1.0小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物。與甲苯共沸除去剩余的三氟乙酸?？焖偕V(硅膠10∶1∶1CH3OH/NH4OH/H2O)得白色無定形固體57(100mg)。從熱乙醇(4.0ml)中結(jié)晶57(100mg)，室溫過濾后得57(45mg)晶體。
mp＝240°(D);TLC Rf＝0.48(10∶1∶1 CH3OH/NH4OH/H2O);1H NMR(400 MHz，D2O)δ4.18(m，1H)，4.06(d，J＝16Hz，1H)，3.95(d，J＝16Hz，1H)，3.41(m，4H)，2.99(m，ml)的溶液中。10分鐘后，移去冷浴，用冰浴代替。1.0小時(shí)后，將非均相混合物再冷至-78℃，并通過導(dǎo)管加(R)-(+)-4-芐基-2-噁唑烷酮鋰(28.2mmol)的無水THF(43ml)溶液進(jìn)行處理，(R)-(+)-4-芐基-2-噁唑烷酮鋰是在-78℃用正-BuLi(17.8ml，28.2mmol，1.6M/己烷)處理(R)-(+)-4-芐基-2-噁唑烷酮(5.0g，28.2mmol)(在無水THF(43ml)中)制得。加完之后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝剡^夜。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用水、飽和NaHCO3，5%KHSO4水溶液和鹽水洗滌，在MgSO4上干燥和濃縮，快速色譜(硅膠，20%乙酸乙酯/己烷)得白色晶形固體70。
TLC Rf＝0.48(30%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.30(m，5H)，4.68(m，1H)，4.21(m，2H)，3.72(s，3H)，3.28(m，3H)，2.80(dd，J＝13 and 4Hz，1H)，2.73(m，2H).
制備4(R)-芐基-2-噁唑烷酮(oxazolidinone)-2(R)-(2-氰基乙基)琥珀酸甲酯(71)0℃下把異丙氧基鈦(Ⅳ)(1.2ml，4.1mmol)加到攪拌著的TiCl4(12.3ml，12.3mmol，1M/CH2Cl2)和無水CH2Cl2(83ml)的溶液中。15分鐘后，將二異丙基乙胺(3.0ml，17.3mmol)滴加到形成深褐色溶液。10分鐘后，接著加70(4.8mg，16.5mmol)，0℃繼續(xù)攪拌1小時(shí)。滴加入丙烯腈(4.3ml，66mmol)至呈深色溶液，在0℃接著攪拌72小時(shí)。0℃用飽2H)，2.45(m，1H)，3.41(m，4H)，2.99(m，2H)，2.45(m，1H)，2.42(dd，J＝18 and 6Hz，1H)，2.33(dd，J＝18 and 7Hz，1H)，1.97(m，4H)，1.90-1.55(m，5H)，1.38(m，4H)，1.19(d，J＝7Hz，3H).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-丙烯-2-基-(1H-四氫嘧啶-2-酮)(59)把1.0摩爾濃度雙(三甲基甲硅烷基)氨基化鋰(10ml，10mM)溶液，加到攪拌著的1H-四氫嘧啶2-酮(1.0g，10mM)的DMF(50ml)懸浮液中，半小時(shí)后，加入烯丙基溴(1.0ml，1.17mM)，繼續(xù)攪拌1小時(shí)。第二次加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基化鋰(10ml，10mM)，接著半小時(shí)后加(N-BOC-哌啶-4-基)乙基碘(10)。于25℃攪拌反應(yīng)物一夜。把反應(yīng)混合物傾入冰和15%KHSO4(50ml)中，用醚(2×100ml)提取，用水(2×100ml)鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，真空蒸發(fā)。在SiO2上快速色譜(乙酸乙酯-己烷1∶1)，得純59。
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ1.14(2H，m)，1.46(9H，s)，1.74(3H，m)，1.95(2H，m)2.68(2H，t)，3.22(4H，m)，3.38(2H，m)，3.95(2H，m)，4.06(2H，m)，5.13(2H，dd).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-乙醛-(1H-四氫嘧啶-2-酮)(60)2.5%四氧化鋨的2-甲基-丙醇(413μl，1.28mM)的溶液，加到攪拌著的59(430mg，1.27mM)
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ1.14(2H，m)，1.45(9H，s)，1.70(2H，m)，1.86(2H，m)，2.02(2H，m)，2.58(2H，d)，2.66(3H，m)，3.36(5H，m)，3.68(2H，m)，3.93(1H，d)，4.07(2H，m)，7.02(1H，m)，7.20(2H，m)，7.29(2H，m).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-〔1H-四氫嘧啶-2-酮)-3〕-乙酰基-3(R)-(2-苯基乙基)β-氨基丙酸(64)將63(168mg，0.31mM)的THF(15ml)和水(15ml)的溶液冷到0℃，用1N LiOH(1.2ml)處理，然后在25℃攪拌過夜。減壓蒸發(fā)除去THF，剩余物用10%檸檬酸酸化，用乙酸乙酯(2×50ml)提取，用鹽水洗滌，在Na2SO4上干燥，真空蒸發(fā)得64。
制備〔1-(2-哌啶-4-基)乙基〕-〔(1H-四氫嘧啶-2-酮)-3〕-乙?；?3(R)-(2-苯基乙基)β-氨基丙酸(65)把64(128mg)的二氯甲烷(8ml)和苯甲醚(1.5ml)的溶液冷到-20℃，然后用三氟乙酸(8ml)處理5分鐘。在-5℃下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后真空蒸發(fā)。剩余物在SiO2(乙醇-H2O-NH4OH，10∶1∶1)進(jìn)行色譜分離得65。
元素分析C24H36N4O4·2.5H2O計(jì)算值C，57.84;H，8.65;N，11.73。
實(shí)測(cè)值C，57.94;H，8.39;N，11.47。
制備〔1-(2-哌啶-4-基)乙基〕-〔1H-四氫嘧啶-的THF(7ml)溶液，水(5ml)和高碘酸鈉(0.68g，3.19mM)中。攪拌4小時(shí)后，加入乙酸乙酯(70ml)，用50%鹽水/10%硫酸鈉(1∶1)，然后用鹽水洗滌混合物。此溶液用Na2SO4干燥，真空蒸發(fā)得60。
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-乙酸-(1H-四氫嘧啶-2-酮)(61)將60(374mg)的丙酮(7ml)溶液冷至-15℃，然后滴入Jones試劑進(jìn)行處理，直到橙色持續(xù)5分鐘。將乙酸乙酯(60ml)加入，用水、鹽水洗滌溶液，干燥(Na2SO4)，真空蒸發(fā)得61。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.12(2H，m)，1.45(9H，s)，1.70(2H，bd)，2.03(2H，m)，2.70(2H，bt)，3.37(4H，m)，3.95(2H，m)，4.05(2H，m).
制備〔1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-(1H-四氫嘧啶-2-酮)-3〕-乙?；?3(R)-(2-苯基乙基)β-氨基丙酸甲基酯(63)25℃攪拌61(125mg，0.34mM)，(R)-3-(2-苯基乙基)β-氨基丙酸甲酯鹽酸化物(83mg，0.34mM)(62)，1-羥基苯并三唑水合物(48.3mg，0.35mM)，1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸化物(70mg，0.37mM)和三乙胺(107μl，0.77mM)的無水DMF(1.6ml)的混合物18小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入冰水中，用乙酸乙酯(2×50ml)提取，用10%檸檬酸、鹽水洗滌，在Na2SO4上干燥，真空蒸發(fā)得63。
2-酮)-3-〕-乙?；?3(R)-(2-吲哚-3-基)-乙基〕β-氨基丙酸(66)用制備63所敘述基本方法，但用等當(dāng)量的3R-〔2-(吲哚-3-乙基〕β-氨基丙酸乙酯代替3(R)-(2-苯基乙基)β-氨基丙酸甲酯鹽酸化物，接著用制備64和65所述的方法，制得66。
元素分析C26H37N5O4計(jì)算值C，56.3;H，8.0;N，12.6。
實(shí)測(cè)值C，56.3;H，7.9;N，12.2。
制備〔1-(2-哌啶-4-基)乙基-(1H-四氫嘧啶-2-酮)-3〕-乙?；?3(R)-甲基β-氨基丙酸(67)用制備63所述的基本方法，但用等當(dāng)量3(R)甲基β-氨基丙酸乙基酯鹽酸化物代替(R)-3-(2-苯基乙基)β-氨基丙酸甲酯鹽酸化物，接著用64和65所述的方法，制得67。
制備〔1-(2-哌啶-4-基)乙基〕-〔(1H-四氫嘧啶-2-酮)-3〕-乙?；?2(R)-〔丁基磺酰基氨基〕β-氨基丙酸(68)。
用制備63所述的基本方法，但用等當(dāng)量的2(S)-丁基磺?；被?氨基丙酸乙酯鹽酸化物代替(R)-3-(2-苯基乙基)β-氨基丙酸甲酯，并接著用制備64和65的方法制得68。
制備4(R)-芐基-2-噁唑烷酮琥珀酸甲酯(70)在-78℃把三甲基乙酰氯(3.6ml，28.2mmol)滴加到攪拌著的琥珀酸單甲酯69(3.7g，28.2mmol)，NEt3(4.0ml，28.2mmol)和無水THF(160和NH4Cl驟冷反應(yīng)混合物，然后用CH2Cl2提取。用飽和NaHCO3和鹽水洗滌合并的有機(jī)相提取物，MgSO4干燥，濃縮?？焖偕V(硅膠 25%乙酸乙酯/己烷)得晶形固體71。
TLC Rf＝0.22(30%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.40-7.20(m，5H)，4.70(m，1H)，4.25(m，2H)，4.13(m，1H)，3.67(s，3H)，3.30(dd，J＝13 and 4Hz，1H)，2.93(dd，J＝17 and 10Hz，1H)，2.80(dd，J＝17 and 10Hz，1H)，2.55(dd，J＝13 and 4Hz，1H)，2.43(t，J＝7Hz，2H)，2.10(m，1H)，1.90(m，1H).
制備4(R)-芐基-2-噁唑烷酮-2(R)-(3-氨基丙基)琥珀酸甲酯(72)室溫在氫氣(60PSI)下于parr儀器上振蕩71(2.0g，5.8mmol)PtO2(0.8g)，CH3OH(50ml)和CHCl3(5ml)的混合物3小時(shí)。反應(yīng)混合物在硅藻填料上過濾，濃縮得黃色油狀物粗胺·HCl72。
TLC Rf＝0.50(CH2Cl2/CH3OH/ACOH9∶1∶1)。
制備〔2-哌啶酮-3(R)〕乙酸甲酯(73)室溫?cái)嚢璐职贰Cl72(2.0g，～5.8mmol)、乙腈(250ml)和NaHCO3(5g)過夜。過濾反應(yīng)混合物，濃縮過濾物?？焖偕V(硅膠，乙酸乙酯)，得無色晶形固體內(nèi)酰胺73。
TLC Rf＝0.22(乙酸乙酯);
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.82(bs，1H)，3.70(s，3H)，3.33(m，2H)，2.88(dd，J＝16 and 4Hz，1H)，2.75(m，1H)，2.58(dd，J＝16 and 7Hz，1H)，2.10-1.60(m，4H).
制備〔1-〔N-BOC-2-(哌啶-4-基)-乙基〕-2-哌啶酮-3(R)〕乙酸甲酯(74)在-15℃把NaN(TMS)2(6.4ml，6.4mmol，1M/己烷)滴加入攪拌著的73(1.1g，6.4mmol)的無水DMF(60ml)溶液中，接著移去冷浴。10分鐘后，加碘化物10(2.3g，7.0mmol)接著室溫?cái)嚢?小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用水(2X)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠，40%乙酸乙酯/己烷)處理，得油狀物74。
TLC Rf＝0.29(40%乙酸乙酯/己烷)。
制備〔1-〔N-BOC-2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-3(R)〕乙酸(75)用49轉(zhuǎn)成50的方法，74(0.44g，1.1mmol)生成油狀物75。
TLC Rf＝0.52(CH2Cl2/CH3OH/ACOH9∶0.5∶0.5)。
制備〔1-〔N-BOC-2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-3(R)〕乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸乙酯(76)用50轉(zhuǎn)化成55的方法，75(0.40g，1.1mmol)偶合54(0.27g，1.6mmol)得76，快速色譜(硅膠，乙酸乙酯)處理后為油狀物。
TLC Rf＝0.20(乙酸乙酯)。
制備〔1-〔N-(BOC-2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-3(R)〕乙酰基-3(R)-甲基-β-氨基丙酸(77)用55轉(zhuǎn)化成56的方法，76(0.30g，0.64mmol)生成油狀物77。
TLC Rf＝0.24(CH2Cl2/CH3OH/AcOH 9∶0.5∶0.5);
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.93(m，1H)，4.32(m，1H)，4.06(m，2H)，3.35(m，2H)，3.29(m，2H)，2.70-2.50(m，6H)，2.38(m，1H)，2.00-1.20(m，9H)，1.45(s，9H)，1.27(d，J＝6Hz，3H)，1.06(m，2H).
制備〔1-〔2-哌啶-4-基)乙基〕-2-哌啶酮-3(R)-甲基-β-氨基丙酸(78)用56轉(zhuǎn)成57的方法，77(0.24g，0.53mmol)生成78，快速色譜(硅膠，10∶1∶1乙醇/水/NH4OH)處理后為無定形固體。
1H NMR(400MHz，D2O)δ4.19(m，1H)，3.40(m，6H)，3.00(m，2H)，2.70(m，1H)，2.64(m，1H)，2.47(m，2H)，2.30(dd，J＝14 and 8Hz，1H)，2.00(m，2H)，1.92(m，2H)，1.79(m，1H)，1.61(m，4H)，1.45(m，2H)，1.18(d，J＝7Hz，3H).
制備N-Cbz-Gly-3(R)-甲基-β-氨基丙酸乙酯(79)
在-15℃，用氯代甲酸異丁酯(0.61ml，4.7mmol)一份處理攪拌著的Cbz-Gly(0.94g，4.5mmol)、4-甲基嗎啉(1.1ml，4.9mmol)和乙酸乙酯(50ml)的溶液。15分鐘后，將54(0.75g，4.5mmol)的乙酸乙酯(1ml)溶液加入，接著溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)混合物用1M NaHSO4，鹽水，飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，得黃色油狀物79。
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.48(m，5H)，6.73(m，1H)，5.58(m，1H)，5.13(s，2H)，4.48(m，1H)，4.30(q，J＝7Hz，2H)，3.95(m，2H)，2.62(m，2H)，1.37(t，J＝7Hz，3H).
制備Gly-3(R)-甲基-β-氨基丙酸乙酯乙酸鹽(80)在氫氣(60PSI)下于parr儀器上振蕩79(1.4g，4.5mmol)，10%ACOH/CH3OH(50ml)和20%Pd(OH)2(0.14g)的混合物過夜。24小時(shí)后，使反應(yīng)混合物通過硅藻填料過濾，過濾物濃縮?？焖偕V(硅膠，5∶3∶1CH2Cl2/乙醇/ACOH)處理，得無定形固體80。
TLC Rf＝0.41(5∶3∶1CH2Cl2/乙醇/ACOH)。
制備4(S)-芐基-2-噁唑烷酮-4-(N-BOC-哌啶-4-基)-2(R)-(丙-2-烯)丁酸酯(81)-78℃把雙(三甲基甲硅烷基)氨基化鋰(7.0ml，7.0mmol 1M/己烷)加到攪拌著的45(2.5g，5.8mmol)的THF(50ml)溶液中，接著加入烯丙基溴(2.5ml，29mmol)。移去冷浴，0℃下攪拌反應(yīng)物1.5小時(shí)。用飽和NH4Cl驟冷反應(yīng)物，用EtOAC稀釋，接著用飽和NaHCO3，5%KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(硅膠，15%EtOAC/己烷)處理得無色油狀物81。
TLC Rf＝0.53(30%EtOAC/己烷);
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.40-7.20(m，5H)，5.82(m，1H)，5.10(m，2H)，4.80(m，1H)，4.20(m，2H)，4.07(m，2H)，3.90(m，1H)，3.31(dd，J＝13 and 3Hz，1H)，2.68(m，2H)，2.48(m，1H)，2.35(m，1H)，1.90-1.20(m，7H)，1.47(s，9H)，1.10(m，2H).
制備4-(N-BOC-哌啶-4-基)-2(R)-(丙-2-烯)丁酸(82)室溫下把LiOH(14ml，14mmol，1N)加到攪拌著的81(1.8g，3.8mmol)，30%H2O2(8.5ml，83mmol)，THF(41ml)和水(12ml)的溶液中。2小時(shí)后，0℃用滴狀10%NaHSO4驟冷過量的LiOH。用5%KHSO4酸化反應(yīng)物，用EtOAC提取。用鹽水洗滌EtOAC部分，干燥(MgSO4)，濃縮，得無色油狀物82。
TLC Rf＝0.79(10%甲醇/EtOAC);
制備〔4-(N-BOC-哌啶-4-基)-2(R)-(丙-2-烯)丁酸酯〕-Gly-3(R)-甲基-β-氨基丙酸乙酯(83)用50轉(zhuǎn)化成為55的方法，使82(1.3g，2.5mmol)和80(0.62g，2.5mmol)偶合，快速色譜得83(硅膠，10%異丙醇/己烷)。
TLC Rf＝0.50(20%異丙醇/己烷);
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.67(bd，J＝8Hz，1H)，6.37(m，1H)，5.72(m，1H)，5.02(m，1H)，4.35(m，1H)，4.13(q，J＝7Hz，2H)，4.03(m，1H)，3.88(m，2H)，2.63(m，2H)，2.51(m，2H)，2.35(m，1H)，2.20(m，2H)，1.70-1.20(m，7H)，1.44(s，9H)，1.26(t，J＝7Hz，3H)，1.07(m，2H).
制備〔3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-5-羥基-2-吡咯烷酮-1〕乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸乙酯(84)室溫下把OSO4(0.96ml，80μmol;2.5%叔-丁醇)加到83(0.74g，1.5mmol)，THF(12.2ml)，水(9.2ml)和NaIO4(0.82g，3.8mmol)的溶液中。2.0小時(shí)后，用醚稀釋反應(yīng)混合物，然后用水，10%Na2S2O3水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，得黃色油狀物84。
TLC Rf＝0.26(20%異丙醇/己烷)。
制備〔3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-5-羥基-2-吡咯烷酮-1〕乙酰基-3(R)-甲基-β-氨基丙酸(85)用55轉(zhuǎn)為56的方法，84(0.73g，1.5mmol)生成淺黃色泡沫物85。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.23(d，J＝5Hz，1H)，4.58(d，J＝16Hz，1H)，4.32(m，1H)，4.05(m，2H)，3.70(d，J＝16Hz，1H)，2.80-2.40(m，6H)，2.22(m，1H)，2.00-1.00(m，9H)，1.45(s，9H)，1.27(d，J＝7Hz，3H).
制備〔3-〔2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-1〕乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸(86)室溫下用CF3CO2H(5.8ml)和三乙基硅烷(0.8ml，5.2mmol)的溶液處理攪拌著的85(0.61g，1.3mmol)的CH2Cl2(50ml)溶液。2小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混物，接著用甲苯共沸除去剩余的CF3COaH。快速色譜(硅膠，10∶1∶1乙醇/水/NH4OH)生成無色固體86。
TLC Rf＝0.17(9∶1∶1 乙醇 /H2O/NH4OH);
1H NMR(300 MHz，CD3OD)δ4.20(m，1H)，3.97(d，J＝17Hz，1H)，3.85(d，J＝17Hz，1H)，3.40(m，4H)，2.95(m，2H)，2.52(m，1H)，2.30(m，2H)，2.00-1.30(m，11H)，1.20(d，J＝7Hz，3H).
制備2-(2，3，4，5，6-四氫-1，1-二氧代-2H-1，2-噻嗪-2-基)丙-2-烯(88)0℃下用NaN(TMS)2(3.9ml，3.9mmol，1M/己烷)滴加到87(J。O。C，52，P。2162(1987)。E.H.White.H.M.Lim)(0.35g，2.6mmol)的DMF的溶液中。30分鐘后，將烯丙基溴(0.45ml，5.2mmol)一份加入，接著繼續(xù)攪拌30分鐘。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用飽和NH4Cl和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠，30%乙酸乙酯/己烷)處理;得無色油狀物88。
TLC Rf＝0.29(30%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.80(m，1H)，5.25(m，2H)，3.78(m，2H)，3.30(m，2H)，3.02(m，2H)，2.21(m，2H)，1.68(m，2H).
制備2-〔6-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-(3，4，5，6-四氫-1，1-二氧代-2H-1，2-噻嗪-2-基)〕-丙-2-烯(89)在-78℃，用正-BuLi(1.45ml，2.3mmol;1.6M/己烷)滴加處理攪拌著的88(0.34g，1.93mmol)的THF(10ml)溶液。30分鐘后，反應(yīng)混合物用1-甲基-2-吡咯烷酮(1ml)和10(0.86g，2.7mmol)在THF(10ml)中)順序處理，接著溫?zé)岬?23℃。2小時(shí)后，在-23℃將反應(yīng)物用飽和NH4Cl驟冷，然后用乙酸乙酯稀釋，用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮、快速色譜(硅膠，30%乙酸乙酯/己烷)處理后，得晶形固體89。
TLC Rf＝0.27(30%乙酸乙酯/己烷);
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.80(m，1H)，5.25(m，2H)，4.07(m，2H)，3.78(m，2H)，3.34(m，2H)，3.17(m，1H)，3.02(m，1H)，2.82(m，2H)，2.66(m，2H)，2.24-2.04(m，3H)，1.89(m，1H)，1.70-1.35(m，7H)，1.08(m，2H).
制備2-〔6-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-(3，4，5，6-四氫-1，1-二氧代-2H-1，2-噻嗪-2-基)〕-乙醛(90)把OsO4(1ml，0.1mmol;2.5%/叔-丁醇)加到89(0.50g，1.29mmol)，THF(16ml)，H2O(12ml)和NaIO4(0.69g，3.2mmol)的攪拌著的溶液中至產(chǎn)生白色沉淀。3.0小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用水，5%KHSO4和飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮得油狀物醛90。
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ9.64(s，1H)，4.08(m，2H)，4.00(d，J＝17Hz，1H)，3.89(d，J＝17Hz，1H)，3.62(m，1H)，3.14(m，1H)，2.96(m，1H)，2.66(m，2H)，2.20(m，1H)，2.08(m，1H)，2.00-1.35(m，9H)，1.10(m，2H).
制備2-〔6-〔2-(N-BOC-哌啶-2-基)乙基〕-(3，4，5，6-四氫-1，1-二氧代-2H-1，2-噻嗪-2-基)〕-乙酸(91)0℃用瓊斯試劑(1.0ml)三份處理攪拌著的90(0.44g，1.13mmol)的丙酮(10ml)溶液。5分鐘后，用異丙醇驟冷過量的瓊斯試劑，用水稀釋。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機(jī)提取液，干燥(MgSO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠，20∶1∶1CH2Cl2/CH3OH/ACOH)，得淺黃色油狀91。
TLC Rf＝0.45(20∶1∶1CH2Cl2/CH3OH/ACOH)。
制備2-〔6-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-(3，4，5，6-四氫1，1-二氧代-2H-1，2-噻嗪-2-基)〕-乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸乙酯(92)用50轉(zhuǎn)化為55的方法，使91(98mg，0.24mmol)和54(120mg，0.71mmol)偶合，得92，快速色譜處理后為黃色油狀物(硅膠，乙酸乙酯)。
TLC Rf＝0.28(乙酸乙酯);
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.08(m，1H)，4.37(m，1H)，4.08(m，2H)，3.89(d，J＝17Hz，1H)，3.77(d，J＝17Hz，1H)，3.60(m，1H)，3.15(m，1H)，2.88(m，1H)，2.68(m，2H)，2.52(m，2H)，2.20-1.00(m，13H)，1.27(t，J＝7Hz，3H)，1.25(t，J＝7Hz，3H).
制備2-〔6-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-(3，4，5，6-四氫-1，1-二氧代-2H-1，2-噻嗪-2-基)〕-乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸(93)用55轉(zhuǎn)成56的方法，使92(76mg，0.15mmol)生成油狀93。
TLC Rf＝0.42(20∶1∶1 CH2Cl2/CH3OH/AcOH);
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.20(m，1H)，4.39(m，1H)，4.10(q，J＝7Hz，2H)，4.08(m，2H)，3.92(d，J＝17Hz，1H)，3.74(m，1H)，3.53(m，1H)，3.15(m，1H)，2.90(m，1H)，2.77(m，2H)，2.59(m，2H)，2.10(m，1H)，2.10-1.10(m，12H)，1.27(t，J＝7Hz，3H)，1.25(t，J＝7Hz，3H).
制備2-〔6-〔2-(哌啶-4-基)乙基〕-(3，4，5，6-四氫-1，1-二氧代-2H-1，2-噻嗪-2-基〕乙?；?3-(R)-甲基-β-氨基丙酸(94)用56生57的方法，使93(61mg，0.12mmol)生成94，快速色譜(硅膠，10∶1∶1乙醇/NH4OH/H2O)處理后為灰白色固體94。
TLC Rf＝0.26(10∶1∶1 乙醇/NH4OH/H2O);
1H NMR(300MHz，D2O)δ4.08(m，1H)，3.71(m，2H)，3.40(m，1H)，3.29(m，2H)，3.14(m，2H)，2.83(m，2H)，2.25(m，2H)，2.12(m，1H)，1.90-1.20(m，12H)，1.05(d，J＝7Hz，3H).
制備1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-丙醇-2-吡咯烷酮(95)在0℃把20(1.20g，3。6mmol)的THF(3ml)溶液加到甲硼烷-二甲硫(3.6mmol)的THF(3ml)溶液中，于0℃攪拌2.5小時(shí)。在0℃把H2O(0.15ml)，10N NaOH水溶液(0.65ml)、THF(1ml)和C2H5OH(0.36ml)加入并攪拌，反應(yīng)混合物溫?zé)岬?3℃，用30%H2O2(0.36ml)處理。把該溶液加熱到55℃，然后攪拌2小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻，用K2CO3飽和，分離有機(jī)相，干燥(MgSO4)并除去溶劑。所得剩余物在硅膠上用快速色譜純化，洗脫劑為10%MeOH/EtOAC，得95。
Rf＝0.3(硅膠，10%MeOH/EtOAC)。
1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-3-丙酸-2-吡咯烷酮(96)將95(1.14mmol)的丙酮(5ml)溶液冷到-15℃，然后用瓊斯試劑處理直到顏色保持琥珀色/褐色。反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3溶液稀釋到pH為9，用EtOAC提取。用KHSO4溶液酸化水相pH為3，并用幾份EtOAC提取。合并有機(jī)提取物在MgSO4上干燥，除去溶劑得96。
Rf＝0.3(硅膠，9/1/1 CH2Cl2/MeOH/HOAC)。
〔1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-3〕丙?；?β-氨基丙酸乙酯(97)于23℃用BOP(0.825mmol)處理96(0.55mmol)，β-氨基丙酸乙酯·HCl(0.825mmol)，N-甲基嗎啉(1.65mmol)的CH3CN(5ml)溶液，將所得溶液攪拌48小時(shí)。用EtOAC稀釋反應(yīng)混合物，用10%KHSO4，鹽水、水、鹽水洗滌，用MgSO4干燥，除去溶劑。剩余物在硅膠上用快速色譜純化，洗脫劑為30%丙酮/己烷，得清亮油狀物97。
Rf＝0.25(硅膠，30%丙酮/己烷)。
〔1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-3〕丙?；?β-氨基丙酸(98)將97(0.29mmol)、LiOH·H2O(1.45mmol)，THF/MeOH/H2O(1∶1∶1，3ml)的溶液攪拌2小時(shí)。用EtOAC稀釋，用10%KHSO4、H2O，鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。除去溶劑得油狀98。
Rf＝0.5(硅膠，9/1/1 CH2Cl2/MeOH/HOAC)。
〔1-〔2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-3〕丙?；?β-氨基丙酸·HCl(99)使98(0.18mmol)的EtOAC(2ml)溶液冷到-78℃，用HCl氣體處理。0.5小時(shí)后，除去溶劑，得白色固體99。
Rf＝0.22(硅膠，10/1/1 EtOH，NH4OH，H2O)。
制備N-BOC-4-哌啶甲基碘(101)用9生成10的方法，100(12.3g，57mmol)(Carr.等EP317997，1989年5月31日)快速色譜處理后生成101(硅膠，15%EtOAC/己烷)。
Rf＝0.38(硅膠，10%EtOAC/己烷)。
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ1.15(2H，m)，1.48(9H，s)，1.62(1H，m)，1.84(2H，m)，2.70(2H，m)，3.11(2H，m)，4.12(2H，m).
制備碘化N-BOC-哌啶亞甲基三苯基鏻(102)將101(5.1g，15.7mmol)，CH3CN(75ml)和三苯基膦(4.5g，17.3mmol)的溶液加熱至80℃60小時(shí)。濃縮冷卻的反應(yīng)混合物，用醚研制剩余油狀物，放在真空下，得黃色泡狀102。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.31(m，15H)，4.10(m，2H)，3.97(m，2H)，2.69(m，2H)，2.00-1.10(m，5H)，1.48(s，9H).
制備3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)亞乙基〕-2-(甲氧基)吡啶(104)0℃，將NaN(TMS)2(9.4ml，9.4mmol，1M/己烷)滴加到102(5.0g，8.5mmol)的無水THF懸浮液中。15分鐘后，將103溶液(0.97g，7.0mmol)(TeTrahedron Letters(1988)29，773)的THF(3ml)滴加入，以生成黃色/橙色均相反應(yīng)混合物。1小時(shí)后，移去冷浴，接著攪拌30分鐘。用水和醚驟冷溶液。用醚再提取水相，合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠，15%乙酸乙酯/己烷)處理后得無色油狀104。
TLC Rf＝0.15(10% 乙酸乙酯/己烷1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09(dd，J＝5 and 2 Hz，1H)，7.42(dd，J＝7 and 2Hz，1H)，6.87(dd，J＝7 and 5 Hz，1H)，6.37(d，J＝12Hz，1H)，5.58(dd，J＝12 and 10Hz，1H)，4.10(m，2H)，3.95(s，3H)，2.70(m，2H)，2.50(m，1H)，1.80-1.20(m，4H)，1.47(s，9H).
制備3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-甲氧基吡啶(105)室溫，氫氣(1大氣壓)下，攪拌104(1.4g，4.3mmol)，乙酸乙酯(22ml)和10%Pd/C(0.27g，20%重量)4小時(shí)。反應(yīng)混合物通過硅藻填料過濾，濃縮過濾物，得混濁的無色油狀物105。
TLC Rf＝0.17(10% 乙酸乙酯/己烷);1H NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.02(dd，J＝5 and 2 Hz，1H)，7.36(dd，J＝7 and 2 Hz，1H)，6.80(dd，J＝7 and 5Hz，1H)，4.10(m，2H)，3.94(s，3H)，2.69(m，2H)，2.58(m，2H)，1.72(m，2H)，1.55-1.35(m，3H)，1.48(s，9H)，1.13(m，2H).
制備3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡啶酮-1基(106)將NaI(0.94g，6.3mmol)加到105(0.81g，2.5mmol)的無水CH3CN(13ml)溶液中，接著用氯代三甲基硅烷(0.80ml，6.3mmol)處理。將所得不透明黃色溶液加熱至60℃2小時(shí)，冷的反應(yīng)混合物用甲醇(50ml)驟冷，攪拌10分鐘，濃縮。剩余物溶于二噁烷/水(6.7ml/3.3ml)，然后用1N NaOH(5.0ml，5.0mmol)處理。將溶液冷至0℃，用BOC2O(1.1g，5.0mmol)處理，接著移去冷浴。攪拌過夜后，蒸發(fā)二噁烷，用水(10ml)和乙酸乙酯(50ml)稀釋殘余物，接著用20%KHSO4酸化至pH～1.0。分離有機(jī)相，用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(硅膠，2∶1CH2Cl2/丙酮)處理后得淺黃色固體106。
TLC Rf＝0.19(2∶1 CH2Cl2/丙酮)1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.30(m，3H)，6.23(t，J＝7Hz，1H)，4.04(m，2H)，2.69(m，2H)，2.57(m，2H)，1.74(m，2H)，1.56(m，2H)，1.48(m，1H)，1.47(s，9H)，1.16(m，2H).
制備｛3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)-乙基〕-2-吡啶酮-1-基｝乙酸乙酯(107)0℃把NaN(TMS)2(2.1ml，2.1mmol，1M/己烷)滴加入106(0.44g，1.4mmol)的無水DMF(7.2ml)的攪拌著的溶液中。30分鐘后，將溴代乙酸乙酯(0.79ml，7.2mmol)滴加到反應(yīng)混合物中。加入1小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)物，用水，5%KHSO4，飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。快速色譜(硅膠，45%乙酸乙酯/己烷)處理后，得無色油狀物107。
TLC Rf＝0.33(60% 乙酸乙酯 /己烷);7.20(dd，J＝6 and 1 Hz，1H)，7.11(dd，J＝7 and 2 Hz，1H)，6.15(t，J＝7 Hz，1H)，4.62(s，2H)，4.24(q，J＝7Hz，2H)，4.04(m，2H)，2.69(m，2H)，2.55(m，2H)，1.72(m，2H)，1.52(m，2H)，1.78(m，1H)，1.48(s，9H)，1.13(m，2H).
制備｛3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡啶酮-1-基｝乙酸(108)用55生成56的方法，107(0.51g，1.3mmol)生成無色泡狀108。
TLC Rf＝0.58(9∶1∶1 CH2Cl2/CH3OH/HOAC)。
制備｛3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡啶酮1-基｝乙?；?3(R)-甲基-β-氨基甲酸乙酯(109)用15轉(zhuǎn)成16的方法，108(0.15g，0.41mmol)生成109，快速色譜(硅膠，乙酸乙酯)處理后為蠟狀固體。
TLC Rf＝0.38(乙酸乙酯)1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.24(dd，J＝7 and 2Hz，1H)，7.21(dd，J＝7 and 2Hz，1H)，7.07(bd，J＝8Hz，1H)，6.19(t，J＝7Hz，1H)，4.51(s，2H)，4.30(m，1H)，4.08(q，J＝7Hz，2H)，4.08(m，2H)，2.69(m，2H)，2.55(m，2H)，1.72(m，2H)，1.51(m，2H)，1.45(s，9H)，1.43(m，1H)，1.23(t，J＝7Hz，3H)，1.22(d，J＝7Hz，3H)，1.13(m，2H).
制備｛3-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡啶酮-1-基｝乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸(110)用55生成56的方法，109(0.19g，0.41mmol)生成無色油狀110。
TLC＝0.59(9.5/0.5/0.5 CH2Cl2/CH3OH/HOAC)。
制備｛3-〔2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-吡啶酮-1｝乙?；?3(R)-甲基-β-氨基丙酸(11l)將103(0.18g，0.40mmol)，CH2Cl2(2.0ml)，苯甲醚(86μl，0.80mmol)和三氟乙酸(2.0ml)的溶液于-15℃攪拌15分鐘。濃縮黃色反應(yīng)混合物，用甲苯共沸除去剩余的三氟乙酸?？焖偕V(硅膠，10/1.3/1.3乙醇/NH4OH/水)處理后，得白色無定形固體111。
TLC Rf＝0.17(10∶1∶1 乙醇/NH4OH/H2O);1H NMR(D2O，400 MHz)δ7.57(dd，J＝7 and 1 Hz，1H)，7.49(dd，J＝7 and 1Hz，1H)，6.51(t，J＝7Hz，1H)，4.66(m，2H)，4.20(m，1H)，3.42(m，2H)，2.97(m，2H)，2.59(m，2H)，2.46(dd，j＝14 and 6Hz，1H)，2.32(dd，J＝14 and 7Hz，1H)，2.00(m，2H)，1.60(m，3H)，1.42(m，2H).
制備N-Cbz-4-哌啶乙醇(112)0℃把氯代甲酸芐酯(16.5ml，0.12mmol)加到4-哌啶乙醇8(15g，0.12mol)，THF(500ml)和二異丙基乙胺(40.5ml，0.23mol)的攪拌著的溶液中。0℃下，1小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用H2O(2X)，10%KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，得無色油狀物112。
TLC Rf＝0.60(乙酸乙酯);1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35(m，5H)，5.13(s，2H)，4.18(m，2H)，3.70(q，J＝7Hz，2H)，2.80(m，2H)，1.80-1.50(m，5H)，1.19(m，2H).
制備N-Cbz-4-哌啶乙基碘(113)用9制成10的方法，112(30.6g，0.12mol)生成113。快速色譜(硅膠，10%乙酸乙酯/己烷)處理后為無色油狀物。
制備1-〔2-(N-Cbz-哌啶-4-基)乙基〕-(2-吡咯烷酮)(114)
室溫把NaN(TMS)2(129ml，129mmol，1M/THF)滴加入2-吡咯烷酮(11.0g，0.13mol)的無水DMF(500ml)的攪拌著的溶液中。10分鐘后，將碘化物113(24.1g，64.6mmol)的DMF(50ml)溶液加到反應(yīng)容器中。1小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用水飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠、乙酸乙酯)處理后得無色油狀物114。
TLC Rf＝0.16(乙酸乙酯);1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.40-7.20(m，5H)，5.12(s，2H)，4.19(m，2H)，3.34(m，2H)，2.77(m，2H)，2.40(m，2H)，2.04(m，2H)，1.74(m，2H)，1.47(m，3H)，1.15(m，2H).
制備1-〔2-(N-Cbz-哌啶-4-基)乙基〕-3-丙烯-2-基-(2-吡咯烷酮)(115)在-78℃把LDA(50ml，25mmol，0.5M/THF)滴加到114(8.0g，24.2mmol)和THF(180ml)的攪拌著的溶液中，15分鐘后加入烯丙基溴(2.3ml，26.6mmol)。1.0小時(shí)后，反應(yīng)混合物溫?zé)岬?℃10分鐘。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用5%KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，快速色譜(硅膠，50%乙酸乙酯/己烷)處理后得115。
TLC Rf＝0.65(乙酸乙酯);1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.35(m，5H)，5.80(m，1H)，5.12(m，2H)，4.18(m，2H)，3.33(m，4H)，2.80(m，2H)，2.56(m，2H)，2.20(m，2H)，1.78(m，2H)，1.48(m，3H)，1.20(m，2H).
制備1-〔2-(N-Cbz-哌啶-4-基)-乙基〕-3-乙酸-2-吡咯烷酮(116)用14生成15的方法，115(4.7g，12.7mmol)生成116，快速色譜(硅膠，CH2Cl2/CH3OH/HOAC 9.5∶0.5∶0.5)處理后為淺褐色油狀物。
TLC Rf＝0.63(CH2Cl2/CH3OH/HOAc 9.0∶0.5∶0.5);1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.37(m，5H)，5.15(s，2H)，4.18(m，2H)，3.37(m，4H)，3.00-2.30(m，5H)，1.77(m，2H)，1.46(m，3H)，1.18(m，2H).
制備〔1-〔2-(N-Cbz-哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-3〕乙?；?2-氨基乙基膦酸(117)0℃用氯代甲酸異丁酯(0.13ml，1.0mmol)處理116(388mg，1.0mmol)，Et3N(0.14ml，1.0mmol)和無水二噁烷(5ml)的溶液。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂钡蕉f烷熔化。室溫下將2-氨基乙基膦酸(125mg，1.0mmol)，Na2CO3(106mg)和水(2ml)溶液加到反應(yīng)容器中。4小時(shí)后，蒸發(fā)二噁烷。用1N HCl酸化剩余物。用乙酸乙酯(3X)洗滌混合物。濃縮水相部分至干得粗117。
TLC Rf＝0.15(9∶1.0∶1.0 CH2CL2/CH3OH/HOAC)。
制備〔1-〔2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-吡咯烷酮-3〕乙酰基-2-氨基乙基膦酸(118)將粗磷酸117(464mg)溶于10%HOAc/CH3OH(20ml)中，然后加入Pd(OH)2(50mg)，使混合物于Parr儀器(50PSI)上氫化過夜。20小時(shí)后，反應(yīng)混合物在硅藻填料上過濾，濃縮過濾物。快速色譜(硅膠，8∶1∶1CH3OH/水/NH4OH)處理后，得無定形固體118。
TLC Rf＝0.14(8∶1∶1 CH3OH/H2O/NH4OH);1H NMR(300 MHz，H2O)δ3.40(m，8H)，3.18(m，1H)，2.92(m，3H)，2.60(m，1H)，2.38(m，1H)，2.26(m，1H)，1.97(m，2H)，1.79(m，3H)，1.56(m，2H)，1.40(m，2H).
制備(4-N-Cbz-氨基)環(huán)己基羧酸甲酯(121)在-10℃把亞硫酰氯(13.4ml，0.18mol)在5分鐘內(nèi)分批加入120(17.5g，0.12mol)的CH3OH(150ml)的懸浮液中，接著移去冷浴。16小時(shí)后，濃縮所得溶液，剩余物溶于DMF(150ml)，冷至0℃，然后順序地用N(i-pr)2Et(52ml，0.3mol)和氯代甲酸芐酯(18.6ml，0.13mol)處理。移去冷浴，24小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物。用乙酸乙酯洗滌剩余物，用飽和NaHCO3，5%KHSO4和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮?？焖偕V(硅膠，20%乙酸乙酯/己烷)處理后得蠟狀晶形固體121。
TLC Rf＝0.34，0.39(30%乙酸乙酯/己烷);1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(m，5H)，5.09(bs，2H)，4.68(m，0.5H)，4.59(m，0.5H)，3.72(m，0.5H)，3.68(s，1.5H)，3.67(s，1.5H)，3.50(m，0.5H)2.45(m，1H)，2.13-1.50(m，8H).
制備(4-N-Cbz-氨基)〔1-(丙烯-3-基)〕環(huán)己基羧酸甲酯(122)在-78℃，將LDA(4.3ml，8.6mmol，2.0M)滴加入攪拌著的121(1.0g，3.4mmol)的無水THF(17.2ml)溶液中。冷浴溫?zé)岬?40℃。-40℃攪拌15分鐘后，將反應(yīng)混合物再冷至-78℃，然后用1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2-(1H-嘧啶酮)(2.0ml，17mmol)和烯丙基溴(0.44ml，5.1mmol)順序進(jìn)行處理。2小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)物，然后用水，飽和NH4Cl，飽和NaHCO3和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)，濃縮得黃色油狀物。經(jīng)快速色譜(硅膠，20%乙酸乙酯/己烷)處理后，得蠟狀晶形固體122。
TLC Rf＝0.31(20% 乙酸乙酯/己烷);1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34(m，5H)，5.67(m，1H)，5.10(s，2H)，5.05(m，2H)，4.54(m，1H)，3.67(s，3H)，3.48(m，1H)，2.21(m，2H)，2.00-1.00(m，8H).
制備4-氨基，1-(丙烯-3基)環(huán)己烷羧酸甲酯(123)0℃，把三氟乙酸(19ml)加到122(0.63g，1.9mmol)和苯甲醚(0.41g，3.8mmol)的混合物中。5分鐘后，反應(yīng)混合物變成均相，移去冷浴，接著攪拌過夜。濃縮、快速色譜(硅膠，17∶1∶1乙醇/NH4OH/水)處理后得黃色油狀123。
TLC Rf＝0.53(30%乙酸乙酯/己烷)。
制備〔2-氮雜-3-氧代-〔2，2，2〕二環(huán)辛-4-基〕-丙-3烯(124)123(0.39g，1.97mmol)的甲苯(10ml)溶液在封管中加熱至170℃過夜。冷的黑色反應(yīng)混合物用快速色譜(硅膠，85%乙酸乙酯/己烷)純化，得褐色油狀物124。
TLC Rf＝0.30(85% 乙酸乙酯/己烷);1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.08(m，1H)，5.88(m，1H)，5.04(m，2H)，3.61(m，1H)，2.35(d，J＝7Hz，2H)，1.80-1.50(m，8H).
制備(〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-氮雜-3-氧代-〔2，2，2〕二環(huán)辛-4-基)丙-3-烯(125)用36a生成37a的方法，124(0.18g，1.1mmol)經(jīng)快速色譜(硅膠，40%乙酸乙酯/己烷)處理后得125(0.45g，100%)。
TLC Rf＝0.36(40% 乙酸乙酯/己烷);1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.87(m，1H)，5.05(m，2H)，4.08(m，2H)，3.51(m，1H)，3.40(t，J＝8Hz，2H)，2.67(m，2H)，2.34(d，J＝7Hz，2H)，1.75-1.35(m，13H)，1.47(s，9H)，1.12(m，2H).
制備3-(1-〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-氮雜-3-氧代-〔2，2，2〕二環(huán)辛-4-基)乙酸(126)用14生成15的方法，125(0.42g，1.1mmol)生成白色粘稠泡狀物126(0.34g，76%)。
TLC Rf＝0.58(9.5∶0.5∶0.5 CH2Cl2/CH3OH/AcOH)。
制備(〔2-(N-BOC-哌啶-4-基)乙基〕-2-氮雜-3-氧代-〔2，2，2〕二環(huán)辛-4-基)乙?；?β-氨基丙酸-叔-丁酯(127)用15生成16的方法，126(0.14g，0.35mmol)生成127(0.10g，55%)，經(jīng)快速色譜(硅膠，6∶1 CH2Cl2/丙酮)處理后為無色油狀物。
TLC Rf＝0.52(2∶1 CH2Cl2/丙酮);1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.90(m，1H)，4.04(m，2H)，3.56(m，1H)，3.42(m，4H)，2.67(m，2H)，2.42(t，J＝7Hz，2H)，1.76-1.34(m，13H)，1.46(s，18H)，1.12(m，2H).
制備(〔2-(哌啶-4-基)乙基〕-2-氮雜-3-氧代-〔2，2，2〕二環(huán)辛-4-基)乙?；?β-氨基丙酸(128)用40a生成41a的方法，127(0.10g，0.19mmol)生成128(29mg，39%)，經(jīng)快速色譜(硅膠，10∶1.2∶1.2乙醇/水/NH4OH)處理后為松散的固體。
TLC Rf＝0.17(10∶1∶1 乙醇/NH4OH/H2O);1H NMR(400 MHz，D2O)δ3.78(m，1H)，3.50-3.35(m，6H)，2.97(m，2H)，2.48(s，2H)，2.38(t，J＝7Hz，2H)，2.02(m，2H)，1.78(m，6H)，1.58(m，5H)，1.42(m，2H).
這里申請(qǐng)人結(jié)合參考文獻(xiàn)方法制備本發(fā)明化合物，其中胍從胺制得，脒從相應(yīng)的腈制得。本專業(yè)技術(shù)領(lǐng)域的熟練人員從胺制備胍是基于3，5-二甲基吡唑1-甲脒硝酸鹽的反應(yīng)(MethodsEnzymol.，25b，558，1972)。本技術(shù)領(lǐng)域熟悉的技術(shù)人員從相應(yīng)的腈制備脒是使用了Boere，R.T.，et.al.J.Organomet.Chem.，331(2)，161-7，1987;and Fuks，R.，Tetrahedron，29(14)，2147-51，1973。所述的方法。
用本發(fā)明所說明的方法，包括下列表Ⅰ中的所述化合物，是根據(jù)本發(fā)明可以制得化合物的實(shí)施例。
表Ⅰ
表Ⅰ續(xù)
體內(nèi)活性用下列的方法(protocols)來測(cè)定在狗體內(nèi)的本發(fā)明纖維蛋白原受體拮抗劑的體內(nèi)活性。
將雌性或雄性雜種狗(重7.5-11.5公斤)比較舒適地捆綁在尼龍吊繩上，把腿露出，使狗靜止不動(dòng)。用通過19度量級(jí)活動(dòng)目標(biāo)探測(cè)器(butterfly)，將含0.5毫升的3.8%檸檬酸鹽的塑料注射器，從隱靜脈或頭(側(cè))靜脈抽出5ml血。再抽出1毫升的檸檬酸鹽的血以測(cè)定全部血小板數(shù)，用促效藥ADP(10μM)和膠原(10μg/ml)(兩者皆注以腎上腺素)進(jìn)行體外血小板聚集。血小板-富集的血漿(PRP)通過以150Xg離心血液5分鐘獲得。血小板數(shù)用血小板-貧的血漿調(diào)節(jié)到200，000/mm3。
口服施藥用明膠膠囊或胃的灌注進(jìn)行。對(duì)胃的灌注的方法，通過輸食管將5毫升藥的溶液施入狗體中，在下列時(shí)間內(nèi)采體外血小板聚集的血樣0，20，40，70，90，150，200，250，300，350，480分鐘，24小時(shí)，30小時(shí)和48小時(shí)。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，把保持的血小板-貧的血漿貯存并冷凍起來，供藥物級(jí)別用。用藥物血漿級(jí)別給藥之后，在30，55和110分鐘再取三次血樣。
作靜脈注射用，體外血小板聚集的血樣采集在下列的時(shí)間點(diǎn)上，注射時(shí)在0，30，45，60，90和120分鐘，和注射停止后2，5，15，30，60，90，120，180，240，300，360和420分鐘。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，余下的血小板-貧血漿貯存和冷凍供藥物級(jí)別用，藥物以0.1ml/分鐘的不變速度注射120分鐘。
為靜脈速注，很快地施用5毫升的藥物溶液。體外血小板聚集的血樣采集時(shí)間在速注之后的0，1，5，10，15，30，45，60，90，120，180和240分鐘。在所有這里時(shí)間點(diǎn)上，余下的血小板-貧血漿貯存和冷凍供藥物級(jí)別用。
在口服和靜脈組中，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)上記錄血的收集次數(shù)以測(cè)定藥物血漿的級(jí)別。
下列化合物
以上述的方法進(jìn)行評(píng)估。
以速率為10μg/kg/分和25μg/kg/分用靜脈注射引起血小板聚集(對(duì)照組%)的抑制于以測(cè)定。在注射期間抑制接近完成。部分抑制在注射停止后數(shù)小時(shí)內(nèi)還存在。
對(duì)單用口服施藥的2mg/kg引起的血小板聚集(對(duì)照組%)抑制也進(jìn)行測(cè)定。在八小時(shí)的期間內(nèi)，血小板聚集的抑制百分率大于50%。
權(quán)利要求
1.式Ⅰ纖維蛋白原受體拮抗劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或其旋光異構(gòu)體。
其中X是
這里A=N和B=-CH2-，或A=-CH-和B=N-R7；Y是
Z是-CO2R2；
這里R10是C1-8烷基，芳基，芳基C1-8烷基u是-CH-，-C-，或-N-；v是-CH-，-C-，或-N-；R和R1各自是氫，芳基，其中芳基定義為單或多環(huán)芳香系，包括5元或6元環(huán)，含有選自氮，氧和硫的0，1，2，3或4個(gè)雜原子；未取代或取代的亞苯基，其取代基為一個(gè)或一個(gè)以上基團(tuán)，選自羥基、氟、氯、溴、碘、氰基、三氟甲基、C1-3烷氧基，C1-5烷基羰氧基，C1-5烷氧基羰基，C1-5烷基，氨基C1-5烷基，羥基羰基C0-5烷基或羥基羰基C1-5烷氧基，未取代或取代C0－6烷基，其取代基為一個(gè)或一個(gè)以上基團(tuán)，選自氟、氯、溴、碘、羥基、C1-5烷基羰基(C0-8烷基)氨基、芳基C1-5烷基羰基(C0-8烷基)氨基、芳氧基，C1-10烷氧基、C1-5烷氧基羰基、C0-5烷基氨基羰基、C1-5烷基羰氧基、C3-8環(huán)烷基、芳基、氧代、氨基、C1-6烷基，C1-3烷基氨基、氨基C1-3烷基、芳基C0-5烷基氨基羰基、苯基C1-3烷基氨基、氨基羰基C0-4烷基、C1-8烷基磺?；?C0-8烷基)氨基、芳基C0-10烷基磺?；?C0-8烷基)氨基、芳基C0-8烷基磺?；珻0-8烷基磺?；?、羥基羰基C0-5烷基，C1-8烷氧基羰基(C0-8烷基)氨基、芳基C0-10烷氧基羰基(C0-8烷基)氨基、C0-8烷基氨基羰基(C0-8烷基)氨基、芳基C0-8烷基氨基羰基(C0-8烷基)氨基、C0-8烷基氨基羰氧基、芳基C0-10烷基氨基羰氧基、C0-8烷基氨基磺?；?C0-8烷基)氨基、芳基C0-8烷基氨基磺?；?C0-8烷基)氨基、C0-8烷基氨基磺?；?、或芳基C0-8烷基氨基磺?；?；條件是與R或R1相連的碳原子只帶有一個(gè)雜原子；R2是氫，未取代或取代C1-11烷基，其取代基為一個(gè)或一個(gè)以上的如下基團(tuán)
這里R9是C1-6支鏈或直鏈烷基，或苯基，其中當(dāng)出現(xiàn)多于一個(gè)基團(tuán)時(shí)，R9可以相同或不同；R7、R3和R4各自為氫，未取代或取代C1-11烷基，其取代基為一個(gè)或一個(gè)以上C1-6烷基基團(tuán)，或芳基C0-4烷基，或氰基，Z是CO2R2Y是
其中n是1，2或3；R和R1各選自苯基、噻吩、咪唑、萘基、吲哚、吲唑、硫茚，這些基團(tuán)或者未取代或者被取代，其取代基是羥基、鹵素、羥基羰基C0-5烷基、C1-3烷基，它們或者未取代或者被一個(gè)或一個(gè)以上下述基團(tuán)取代芳基、芳氧基、C1-10烷氧基、C0-5烷基氨基羰基、芳基C0-5烷基氨基羰基，氫，未取代或取代的C0-6烷基，其取代基為一個(gè)或一個(gè)以上下述基團(tuán)鹵素、羥基、C1-5烷基羰基氨基、芳基C1-5烷基羰基氨基、芳氧基、C1-10烷氧基、C1-5烷氧基羰基、C0-5烷基氨基羰基、C1-5烷基羰氧基、C3-8環(huán)烷基、芳基、氧代、條件是當(dāng)R7和R3各自為氰基時(shí)，X是
K是1-4；m是1-4；p是1-6；q是0-2。
2.權(quán)利要求1的式Ⅰ纖維蛋白原受體拮抗劑或藥學(xué)上可接受的鹽或其旋光異構(gòu)體其中
R和R1各自獨(dú)立地選自苯基、噻吩、咪唑、萘基、吲哚、吡唑、硫茚，以上這些基團(tuán)或者未取代或被取代，其取代基是羥基，鹵素，羥基羰基C0-5烷基，C1-3烷基，它們或者未取代或者被一個(gè)或一個(gè)以上下述基團(tuán)取代芳基、芳氧基、C1-10烷氧基、C0-5烷基氨基羰基、芳基C0-5烷基氨基羰基，氫，未取代或取代的C0-6烷基，其取代基選自一個(gè)或一個(gè)以上下列基團(tuán)鹵素、羥基、C1-6烷基磺酰基氨基、芳基C0-6烷基磺?；被?、C1-6烷基磺?；?、芳基C0-6烷基磺?；1-5烷基羰基氨基、芳基C1-5烷基羰基氨基、芳氧基、C1-10烷氧基、C1-5烷氧基羰基、C0-5烷基氨基羰基、C1-5烷基羰氧基、C3-8環(huán)烷基、芳基、氧代、氨基、C1-6烷基、C1-3烷基氨基、氨基C1-3烷基、芳基C0-5烷基氨基羰基、苯基C1-3烷基氨基、氨基羰基C0-4烷基，或羥基羰基C0-5烷基、條件是與R或R1相連碳原子只帶有一個(gè)雜原子，R2是氫，未取代或取代的C1-12烷基，其取代基是一個(gè)或一個(gè)以上
其中R9是支鏈或直鏈C1-6烷基或苯基;R7、R3和R4各自為氨基、C1-6烷基，C1-3烷基氨基、氨基C1-3烷基、芳基C0-5烷基氨基羰基，苯基C1-3烷基氨基、氨基羰基C0-4烷基或羥基羰基C0-5烷基，條件是與R或R1相連的碳原子只帶有一個(gè)雜原子;R2是氫;R7、R3和R4是氫;K是1-2;m是1-4;p是2-4。
3.權(quán)利要求1的化合物用于在哺乳動(dòng)物體內(nèi)抑制纖維蛋白原與血小板的結(jié)合，抑制血小板的聚集，治療血栓形成或栓子形成，或予防血栓或栓子形成。
4.權(quán)利要求1的化合物選自下面化合物所組成的組或其藥學(xué)上可接受的鹽
這里 n是1，2或3，Z是CO2R2氫，未取代的或取代的C1-3烷基，其取代基是一個(gè)或一個(gè)以上的C1-6烷基;K是1-4;m是1-4;p是1-3;q是0或2。
5.權(quán)利要求1的式Ⅰ纖維蛋白原受體拮抗劑或其藥學(xué)上可接受鹽或其旋光異構(gòu)體其中X是
這里 D＝-O-，-S-，或
6.權(quán)利要求5的化合物是下述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
7.權(quán)利要求5的化合物是下述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
8.權(quán)利要求5的化合物是下述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
9.權(quán)利要求5的化合物是下述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
10.權(quán)利要求5的化合物是下述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
11.權(quán)利要求1的化合物是下列化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
12.抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)纖維蛋白原與血小板結(jié)合的組合物，含有權(quán)利要求1的一種化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
13.抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)血小板聚集的組合物，含有權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
14.抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)血小板聚集的組合物，含有與一種溶解血栓劑和一種藥物上可接受的載體結(jié)合的權(quán)利要求1的一種化合物。
15.權(quán)利要求14的組合物，其中溶解血栓劑是纖維蛋白溶酶原活性劑或鏈激酶。
16.抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)血小板聚集的組合物，含與一種抗凝結(jié)劑和藥學(xué)上可接受的載體結(jié)合的權(quán)利要求1化合物。
17.權(quán)利要求16的組合物，其中抗凝結(jié)劑是肝素或丙酮芐羥香豆素。
18.予防哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的組合物，包括權(quán)利要求1的一種化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
19.予防哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的組合物，包括與溶解血栓劑和藥學(xué)上可接受的載體結(jié)合權(quán)利要求1的一種化合物。
20.權(quán)利要求18的組合物，其中溶解血栓劑是纖維蛋白溶酶原活性劑或鏈激酶。
21.予防哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的組合物，包括權(quán)利要求1的一種化合物，與一種抗凝結(jié)劑和藥學(xué)上可接受的載體。
22.權(quán)利要求21的組合物，其中抗凝結(jié)劑是肝素或丙酮芐羥香豆素。
23.治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的組合物，包括權(quán)利要求1的一種化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
24.治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的組合物，包括權(quán)利要求1的一種化合物，與溶解血栓劑和藥學(xué)上可接受的載體。
25.權(quán)利要求24的組合物，其中溶解血栓劑是纖維蛋白溶酶原活性劑或鏈激酶。
26.治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的組合物，包括權(quán)利要求1的一種化合物與一種抗凝結(jié)劑和藥學(xué)上可接受的載體。
27.權(quán)利要求26的組合物，其中抗凝結(jié)劑是肝素或丙酮芐羥香豆素。
28.治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的一種組合物，包括權(quán)利要求1的化合物與抗血小板劑和藥學(xué)上可接受的載體。
29.權(quán)利要求28的組合物，其中抗血小板劑是阿斯匹林。
30.抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)纖維蛋白原與血小板結(jié)合的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求13的組合物。
31.抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)血小板聚集的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求13的組合物。
32.抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)血小板聚集的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求14的組合物。
33.抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)血小板聚集的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求16的組合物。
34.予防哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求18的組合物。
35.予防哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求19的組合物。
36.予防哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求21的組合物。
37.治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求23的組合物。
38.治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求24的組合物。
39.治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求26的組合物。
40.治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)血栓或栓子形成的一種方法，包括向哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求28的組合物。
全文摘要
揭示通式如上的纖維蛋白原受體拮抗劑。用于抑制纖維蛋白原與血小板的結(jié)合和抑制血小板的聚集。
文檔編號(hào)C07D417/06GK1067883SQ9210454
公開日1993年1月13日 申請(qǐng)日期1992年5月6日 優(yōu)先權(quán)日1991年5月7日
發(fā)明者M·E·達(dá)根, G·哈特曼, M·S·埃格貝森, N·伊勒, L·M·圖爾奇, W·F·霍夫曼 申請(qǐng)人:麥克公司