一種海洋微生物來(lái)源的萘醌類化合物、制備方法及其用途
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種海洋微生物來(lái)源的萘醌類化合物、制備方法及其用途。該化合物系統(tǒng)命名為1,2,3,4-四氫-1,2,5-三羥基-6,7-二甲氧基-3-甲基-9,10-蒽酮，結(jié)構(gòu)如式(I)所示?？赏ㄟ^(guò)發(fā)酵持續(xù)獲得。該化合物抗腫瘤活性高，能用于制備抗腫瘤藥物，制備的環(huán)境友好，應(yīng)用成本低。微生物來(lái)源的活性萘醌類化合物較少，而且該化合物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，可以作為抗腫瘤藥物的前體，在現(xiàn)有的基礎(chǔ)上進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和改造，提高其抗腫瘤的靶向性和高效性，用于開(kāi)發(fā)治療人胃癌、人肺癌、小鼠黑色素瘤、人乳腺癌、人胰腺癌、人宮頸癌、人成骨肉瘤、人肝癌、人結(jié)腸癌、人喉癌的藥物，應(yīng)用前景十分廣闊。
【專利說(shuō)明】-種海洋微生物來(lái)源的寨醒類化合物、制備方法及其用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化合物領(lǐng)域，尤其涉及一種海洋微生物來(lái)源的蔡釀?lì)惢衔?、制備?法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 長(zhǎng)期W來(lái)，惡性腫瘤一直嚴(yán)重威脅著人類的健康和生命。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全 世界每年約有600萬(wàn)人被癌癥奪去生命，估計(jì)到2020年將升至1000萬(wàn)人。但是，目前仍然 沒(méi)有很好的藥物可W用于臨床來(lái)消除癌癥。很多抗腫瘤藥物在臨床使用的過(guò)程中，逐漸發(fā) 現(xiàn)它們的選擇性低，在抑制腫瘤增長(zhǎng)的同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞也有很大的殺傷力，導(dǎo)致很強(qiáng)的毒 副作用。弱的表現(xiàn)為嘔吐、乏力、厭食、頭暈，嚴(yán)重的則發(fā)現(xiàn)對(duì)也臟有損傷。因此，尋求結(jié)構(gòu) 新穎且毒副作用小的新型抗腫瘤藥物迫在眉睫。
[0003] 海洋微生物具有極為豐富的生物多樣性及功能多樣性，由于其特殊的生存環(huán)境， 在適應(yīng)環(huán)境的進(jìn)化過(guò)程中形成了獨(dú)特的遺傳代謝機(jī)制和化學(xué)防御機(jī)制，是目前新結(jié)構(gòu)或新 活性天然產(chǎn)物的主要來(lái)源。海洋抗癌藥物研究在海洋藥物研究中一直起著主導(dǎo)作用，現(xiàn)已 發(fā)現(xiàn)海洋生物提取物中至少有10%具有抗腫瘤活性。美國(guó)每年有1500個(gè)海洋產(chǎn)物被分離 出來(lái)，1%具有抗癌活性，目前至少已有10個(gè)W上海洋抗癌藥物進(jìn)入臨床或臨床前研究階 段。近年來(lái)，加強(qiáng)海洋微生物的活性篩選，尋找高效低毒的抗癌藥物，直接用于臨床或作為 先導(dǎo)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，已經(jīng)成為海洋抗癌藥物研究的發(fā)展趨勢(shì)。另外，海洋微生物容易 采集和培養(yǎng)，具有可規(guī)模化獲取、環(huán)境友好、應(yīng)用成本低等特點(diǎn)，其開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景已獲得國(guó) 際共識(shí)。
[0004] 蔡釀?lì)惢衔锸且活悘V泛存在于自然界中的小分子化合物，具有多種生物活性。 許多化合物顯示出獨(dú)特的抗腫瘤作用，如紫草素、胡桃釀、蘭雪釀、維生素K3、沙爾威辛 (salvicine)等。人們合成大量的蔡釀衍生物，發(fā)現(xiàn)了一些有開(kāi)發(fā)前途的抗腫瘤藥，有的已 經(jīng)進(jìn)入臨床研究階段。但是此類藥物仍然存在較大的毒副作用，如骨髓抑制性、也臟毒性問(wèn) 題，大大限制了其劑量提高和臨床治療效果。因此，有必要尋找更好的結(jié)構(gòu)新穎的同類化療 替代藥物。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種新的具有抗腫瘤作用的化合物。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種蔡釀?lì)惢衔顲WL-168,其特征在于，系統(tǒng)命名 為1，2, 3, 4-四氨-1，2, 5- H輕基-6, 7-二甲氧基-3-甲基-9, 10-意麗，結(jié)構(gòu)如下式所示，
[0007]
【權(quán)利要求】
1. 一種萘醌類化合物CWL-168,其特征在于，系統(tǒng)命名為1，2, 3, 4-四氫-1，2, 5-三羥 基-6, 7-二甲氧基-3-甲基-9, 10-蒽酮，結(jié)構(gòu)如下式所示，
2. 權(quán)利要求1所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 菌種的準(zhǔn)備：使用海水PDA培養(yǎng)基，高溫滅菌，制成平板，置于常溫狀態(tài)下，接種產(chǎn)黃青 霉Penicillium chrysogenum菌絲體培養(yǎng)，作為菌種；所述海水PDA培養(yǎng)基成分為馬鈴薯 200g，葡萄糖20g，瓊脂15-20g，IL海水； 發(fā)酵種子液制備：在多個(gè)錐形瓶中分別裝入海水PDA液體培養(yǎng)基，高溫滅菌后，接種上 述菌種培養(yǎng)，將該培養(yǎng)物作為種子液； 接種：采用固體發(fā)酵方式，準(zhǔn)備發(fā)酵瓶，加入大米固體發(fā)酵培養(yǎng)基，高溫滅菌，接種上述 種子液，培養(yǎng)；所述大米固體發(fā)酵培養(yǎng)基為每IL的三角錐瓶裝大米105g，小黃米45g ; 萃?。捍婢l(fā)酵成熟后，加入乙醇溶液500mL/瓶浸泡發(fā)酵產(chǎn)物，發(fā)酵產(chǎn)物溶入乙醇 溶液中，浸泡后，將上層乙醇溶液倒出，下層為固體發(fā)酵產(chǎn)物；加入新的乙醇溶液500mL/ 瓶，此步驟反復(fù)3次，每次浸泡常溫過(guò)夜，如此制備得到乙醇初提液；以乙醇溶液為溶劑，采 用高壓乳化切割機(jī)分散提取下層的固體發(fā)酵產(chǎn)物，得到胞內(nèi)提取物，然后與所得的乙醇初 提液合并，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至固態(tài)，即得到初級(jí)浸膏； 分離：將所得初級(jí)浸膏懸浮于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，再將萃取液濃縮后， 經(jīng)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇為洗脫劑，從體積比95:5-10:90進(jìn)行梯度洗脫，其中梯度洗脫 下來(lái)的組分在薄層層析中能用氯仿-丙酮-冰醋酸體積比為30:10:1溶液系統(tǒng)展開(kāi)，再經(jīng) Sephadex LH-20柱子純化，用氯仿-丙酮體積比為5:2的溶液體系洗脫，洗脫液以15ml為 一管，收集20管，挑取其中第9-12管合并，并濃縮至干后得到黃色粉末狀化合物CWL-168。
3. 權(quán)利要求2所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，所述萃取中的乙 醇溶液為體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇水溶液。
4. 權(quán)利要求2所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，所述菌種的準(zhǔn)備 中，培養(yǎng)條件為28 °C下靜置培養(yǎng)4-5天。
5. 權(quán)利要求2所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵種子液 制備步驟中培養(yǎng)條件為28°C下以180rpm/min振蕩培養(yǎng)2-3天。
6. 權(quán)利要求2所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，所述接種步驟中 培養(yǎng)條件為28 °C培養(yǎng)箱放置28天。
7. 權(quán)利要求1所述的萘醌類化合物CWL-168或權(quán)利要求2-6任一所述方法制備得到的 萘醌類化合物CWL-168在制備抗腫瘤藥物中的用途。
8. 權(quán)利要求7所述的在制備抗腫瘤藥物中的用途，其特征在于，所述的腫瘤為人胃癌、 人肺癌、小鼠黑色素瘤、人乳腺癌、人胰腺癌、人宮頸癌、人成骨肉瘤、人肝癌、人結(jié)腸癌、人 喉癌。
【文檔編號(hào)】C07C50/34GK104262130SQ201410451707
【公開(kāi)日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年9月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月5日
【發(fā)明者】王偉毅, 李增鵬, 陳建明, 馮世秀, 蘇洋 申請(qǐng)人:大豐海洋生物醫(yī)藥研究所, 王偉毅, 李增鵬, 馮世秀