從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法。本發(fā)明以菊芋葉為原料，經(jīng)加熱回流或超聲提取，固液分離，減壓濃縮，得綠原酸粗提濃縮液，濃縮液通過大孔樹脂柱A除雜后，直接上大孔樹脂柱B，動態(tài)吸附飽和后，流加洗雜液洗雜至流出液無色，用洗脫液洗脫大孔樹脂B至高效液相色譜（HPLC）檢測無綠原酸流出，并收集洗脫液，洗脫液減壓濃縮，上聚酰胺柱，吸附分離洗脫精制后，噴霧干燥，得綠原酸純度為98%以上的高純度綠原酸。該方法工藝簡單，操作方便，溶劑可回收利用，大孔樹脂和聚酰胺均可重復(fù)使用，綜合成本較低，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及制備高純度綠原酸的方法，具體地說是一種從菊芋葉片中制備高純度 綠原酸的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 新鮮菊芋葉片中含有大量的生物活性物質(zhì)，中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所袁曉 燕等（2008)報導(dǎo)稱綠原酸是該植物重要的生物活性成分。新鮮菊芋葉片中綠原酸的含量約 為0. 5%-5. 0%，與金銀花（I. 0%-5. 9%)、杜仲（2. 0%-5. 0%)等高價藥用資源中綠原酸的含量 相差不大，且菊芋種植管理簡便，環(huán)境適應(yīng)性強，對自然環(huán)境的改善具有積極地促進作用。 因此，從菊芋葉中提取綠原酸具有更高的經(jīng)濟效益和環(huán)境效益。
[0003] 原料，經(jīng)酒精逆流浸提，固液分離，再經(jīng)噴霧干燥后得綠原酸粉末產(chǎn)品。但是，相對 國內(nèi)從金銀花等傳統(tǒng)高價藥用資源中提取綠原酸的研究而言，從菊芋中提取純化綠原酸的 研究深度還較低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法。
[0005] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：
[0006] -種從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法：以菊芋葉為原料，將原料與溶劑按 質(zhì)量體積1:5-1:20的比例混合，40-KKTC下加熱回流或超聲提取進行固液分離、減壓濃 縮，得綠原酸粗提濃縮液；濃縮液通過大孔樹脂柱A除雜，除雜后直接通過大孔樹脂柱B， 動態(tài)吸附飽和后，流加洗雜液洗雜至流出液無色，再用乙醇水溶液進行洗脫，收集乙醇洗脫 液，洗脫液減壓濃縮，濃縮后經(jīng)聚酰胺柱吸附分離洗脫精制后，得綠原酸純度為98%以上的 高純度綠原酸。
[0007] 進一步的說，將原料與溶劑按質(zhì)量體積1:5-1:20的比例混合，40-KKTC下加熱回 流或超聲提取2-3次，每次1-6小時，冷卻至室溫，經(jīng)固液分離后得綠原酸粗提液，將粗提液 減壓濃縮至原體積分?jǐn)?shù)的10%后，得綠原酸粗提濃縮液；所述溶劑為濃度為1〇%-1〇〇% (V/ V)的甲醇或乙醇水溶液。
[0008] 所述原料為新鮮菊芋葉經(jīng)陰干、粉碎處理后，過10-200目標(biāo)準(zhǔn)篩所得的粗粉。
[0009] 進一步的說，將綠原酸粗提濃縮液以l-5BV/h的流速通過大孔樹脂柱A，進行吸附 雜質(zhì)，流出液直接再以l_5BV/h的流速通過大孔樹脂柱B，動態(tài)吸附飽和后，用去離子水以 l-10BV/h的流速淋洗大孔樹脂柱B至流出液無色，再用體積分?jǐn)?shù)為20%-100%的乙醇水溶液 以5-10BV/h的流速進行洗脫，收集乙醇洗脫液直至無綠原酸流出，再將收集的洗脫液減壓 濃縮至膏狀，待用。
[0010] 所述大孔樹脂A為符合藥用要求的非極性大孔樹脂。所述大孔樹脂A為DlOl型、 AB-8型、HPD-100型、HPD-200A型或X-5型大孔樹脂中的一種。優(yōu)選DlOl型、AB-8型或 HPD-100型大孔樹脂。
[0011] 所述大孔樹脂B為符合藥用要求的極性或中極性大孔樹脂。所述大孔樹脂B為 ADS-17型、NKA-2型、ADS-7型、S-8型或HPD-600型大孔樹脂中的一種。優(yōu)選ADS-17型、 NKA-2型、ADS-7型大孔樹脂。
[0012] 進一步的說，將經(jīng)大孔樹脂柱的洗脫液濃縮后以l_5BV/h的流速通過聚酰胺柱， 動態(tài)吸附飽和后，用3-8BV去離子水以l-10BV/h的流速淋洗上述聚酰胺柱，再用體積分?jǐn)?shù) 為10%-80%的乙醇水溶液以5-10BV/h的流速進行洗脫，收集乙醇洗脫液直至無綠原酸流 出，噴霧干燥即得綠原酸純度為98%以上的高純度綠原酸。
[0013] 所述大孔樹脂A、大孔樹脂B和聚酰胺均可經(jīng)再生液再生后重復(fù)使用，進而達到連 續(xù)操作的目的。
[0014] 所述再生液為無水乙醇。
[0015] 本發(fā)明有益效果在于：
[0016] 1.本發(fā)明采用自然界中資源豐富的非藥用資源菊芋代替中國傳統(tǒng)高價藥用資源 作為提取綠原酸的原料，促進了菊芋資源的合理利用，降低了綠原酸的生產(chǎn)成本。
[0017] 2.本發(fā)明采用大孔樹脂除雜與大孔樹脂吸附洗脫聯(lián)用技術(shù)，處理量大，操作連續(xù) 簡便，有效的提高了洗脫過程中綠原酸的純度，降低了后續(xù)聚酰胺精制的難度。
[0018] 3.本發(fā)明采用聚酰胺精制技術(shù)，實現(xiàn)了綠原酸與其結(jié)構(gòu)類似物的高效分離。
[0019] 4.本發(fā)明提取過程操作方法簡單，控制參數(shù)少，效率高，易于工業(yè)放大。
[0020] 5.本發(fā)明采用的洗脫劑和再生劑均可重復(fù)利用，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0021] 圖1為從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的工藝流程圖。

【具體實施方式】
[0022] 以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，但本發(fā)明不限于此。
[0023] 本發(fā)明所述菊芋葉粗粉為將新鮮菊芋葉片置于陰涼通風(fēng)處，陰干，粉碎至可通過 10-200目標(biāo)準(zhǔn)篩，待用。
[0024] 本發(fā)明所述實施例中，綠原酸的純度采用高效液相色譜法進行檢測，所用色譜柱 為辦口618丨1805 018(4.6_\250_，5 4 111)，檢測波長為32711111，流動相六為0.1%三氟乙 酸水溶液，B為乙腈，流速為lmL/min，進樣量為10 μ L，梯度洗脫程序如表1。
[0025] 表IHPLC梯度洗脫程序

【權(quán)利要求】
1. 一種從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：以菊芋葉為原料，將原 料與溶劑按質(zhì)量體積1:5-1:20的比例混合，40-KKTC下加熱回流或超聲提取進行固液分 離、減壓濃縮，得綠原酸粗提濃縮液；濃縮液通過大孔樹脂柱A除雜，除雜后直接通過大孔 樹脂柱B，動態(tài)吸附飽和后，流加洗雜液洗雜至流出液無色，再用乙醇水溶液進行洗脫，收 集乙醇洗脫液，洗脫液減壓濃縮，濃縮后經(jīng)聚酰胺柱吸附分離洗脫精制后，得綠原酸純度為 98%以上的高純度綠原酸。
2. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：將原料 與溶劑按質(zhì)量體積1:5-1:20的比例混合，40-100°C下加熱回流或超聲提取2-3次，每次1-6 小時，冷卻至室溫，經(jīng)固液分離后得綠原酸粗提液，將粗提液減壓濃縮至原體積分?jǐn)?shù)的10% 后，得綠原酸粗提濃縮液；所述溶劑為濃度為1〇%_1〇〇% (v/v)的甲醇或乙醇水溶液。
3. 按權(quán)利要求2所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所述原 料為新鮮菊芋葉經(jīng)陰干、粉碎處理后，過10-200目標(biāo)準(zhǔn)篩所得的粗粉。
4. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：將綠原 酸粗提濃縮液以l-5BV/h的流速通過大孔樹脂柱A，進行吸附雜質(zhì)，流出液直接再以1-5BV/ h的流速通過大孔樹脂柱B，動態(tài)吸附飽和后，用去離子水以l-10BV/h的流速淋洗大孔樹脂 柱B至流出液無色，再用體積分?jǐn)?shù)為20%-100%的乙醇水溶液以5-10BV/h的流速進行洗脫， 收集乙醇洗脫液直至無綠原酸流出，再將收集的洗脫液減壓濃縮至膏狀，待用。
5. 按權(quán)利要求1或4所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所 述大孔樹脂A為符合藥用要求的非極性大孔樹脂。
6. 按權(quán)利要求5所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所述大 孔樹脂A為D101型、AB-8型、HPD-100型、HPD-200A型或X-5型大孔樹脂中的一種。
7. 按權(quán)利要求1或4所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所 述大孔樹脂B為符合藥用要求的極性或中極性大孔樹脂。
8. 按權(quán)利要求7所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所述大 孔樹脂B為ADS-17型、NKA-2型、ADS-7型、S-8型或HPD-600型大孔樹脂中的一種。
9. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：將流經(jīng) 大孔樹脂柱的洗脫液濃縮后以l-5BV/h的流速通過聚酰胺柱，動態(tài)吸附飽和后，用3-8BV去 離子水以l-l〇BV/h的流速淋洗上述聚酰胺柱，再用體積分?jǐn)?shù)為10%-80%的乙醇水溶液以 5-10BV/h的流速進行洗脫，收集乙醇洗脫液直至無綠原酸流出，噴霧干燥即得綠原酸純度 為98%以上的高純度綠原酸。
10. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所述大 孔樹脂A、大孔樹脂B和聚酰胺均可經(jīng)再生液再生后重復(fù)使用，進而達到連續(xù)操作的目的。
【文檔編號】C07C69/732GK104418740SQ201310390094
【公開日】2015年3月18日 申請日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月30日
【發(fā)明者】夏傳海, 孫鵬程, 方圣濤 申請人:中國科學(xué)院煙臺海岸帶研究所