專利名稱：一種頭孢類藥物通用人工抗原的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種頭孢類藥物通用人工抗原的合成方法，屬于生物化工技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
7_氨基去乙酸氧基頭抱燒酸，英文名:7-Aminodesacetoxycephalosporanicacid (7-ADCA)，CAS號(hào):151767-02-1,分子式為C8HltlN2O3S15頭孢菌素類抗生素是分子中含有頭孢烯的半合成抗生素，屬于內(nèi)酰胺類抗生素。7-ADCA是β-內(nèi)酰胺類抗生素中的7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)的衍生物，因此它們具有相似的殺菌機(jī)制。本類藥可破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁，并在繁殖期殺菌。對(duì)細(xì)菌的選擇作用強(qiáng)，而對(duì)人幾乎沒有毒性，具有抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)、耐頭孢酶、過敏反應(yīng)較頭孢類少見等優(yōu)點(diǎn)。所以是一類高效、低毒、臨床廣泛應(yīng)用的重要抗生素。但由于其使用方法不當(dāng)或不遵守休藥期規(guī)定等原因，均可造成它在畜產(chǎn)品中的殘留，給人類健康帶來嚴(yán)重危害，如產(chǎn)生過敏反應(yīng)、破壞胃腸道菌群平衡和增強(qiáng)細(xì)菌耐藥性導(dǎo)致免疫力下降及給動(dòng)物源性食品生產(chǎn)加工帶來不可估計(jì)的損失。尤其該類抗生素在乳制品中的殘留引起了國(guó)內(nèi)外的高度重視。頭孢類抗生素種類繁多，現(xiàn)有的微生物檢測(cè)法和儀器檢測(cè)法很難實(shí)現(xiàn)對(duì)所有頭孢類抗生素進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)，有必要研究快速、便攜的免疫檢測(cè)技術(shù)一膠體金免疫技術(shù)。這就需要合成能產(chǎn)生簇特異性抗體的免疫原。目前為止，國(guó)內(nèi)尚沒有針對(duì)頭孢類抗生素的免疫檢測(cè)方法的報(bào)道，為了彌補(bǔ)這一空白，設(shè)計(jì)合成了以頭孢類抗生素的中間體7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸為半抗原的用于頭孢類抗生素檢測(cè)的人工抗原。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種頭孢類藥物通用人工抗原的合成方法。所制備的產(chǎn)品用于頭孢類抗生素的免疫分析方法研究，為今后人們的研究提供了必需的人工抗原。本發(fā)明的技術(shù)方案 :一種頭孢類藥物通用人工抗原的合成方法，以頭孢類抗生素的中間體7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸(7-ADCA)為半抗原，用二琥珀酰亞胺基辛二酸鹽(DSS)將其與載體蛋白血藍(lán)蛋白KLH偶聯(lián)，透析，經(jīng)紫外鑒定偶聯(lián)成功，用紫外分光光度法測(cè)定偶聯(lián)物的偶聯(lián)比，制得頭孢類藥物通用人工抗原7-ADCA-DSS-KLH。其反應(yīng)方程式為:
權(quán)利要求
1.一種頭孢類藥物通用人工抗原的合成方法，其特征在于以頭孢類抗生素的中間體7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸，縮寫為7-ADCA，為半抗原，用二琥珀酰亞胺基辛二酸鹽DSS法將其與載體蛋白血藍(lán)蛋白KLH偶聯(lián)，透析，用紫外分光光度法測(cè)定偶聯(lián)物的偶聯(lián)比，制得頭孢類藥物通用人工抗原7-ADCA-DSS-KLH ;步驟為: (1)偶聯(lián) 按KLH: 7-ADCA: DSS=1: 3000:4500的摩爾比稱取相應(yīng)的藥品，DSS預(yù)先溶解在無水DMF中得到A液；將7-ADCA和KLH用0.01M4-羥乙基哌嗪乙磺酸HEPES溶解，攪拌5min使兩者充分溶解得到B液；然后將A液逐滴滴入B液中，4°C下反應(yīng)1.5h，得人工抗原混合液； (2)透析 透析袋前處理:取15cm的透析袋，于沸水中煮沸5min,再用60°C的去離子水沖洗3min，保存在4°C去離子水中備用； 將人工抗原混合液移入透析袋中，用每次2L的生理鹽水溶液透析2次，再用每次2L的去離子水透析2次，共透析3天；最后使用凍干法將透析袋中的液體制成粉末，得到頭孢類藥物通用人工抗原7-ADCA-DSS-KLH ； (3)頭孢類藥物通用 人工抗原7-ADCA-DSS-KLH的鑒定。
全文摘要
一種頭孢類藥物通用人工抗原的合成方法，屬于生物化工技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明以頭孢類抗生素的中間體7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸為半抗原，用二琥珀酰亞胺基辛二酸鹽DSS法將其與載體蛋白血藍(lán)蛋白KLH偶聯(lián)，透析，用紫外分光光度法測(cè)定偶聯(lián)物的偶聯(lián)比。本發(fā)明成功合成了頭孢類藥物通用人工抗原7-ADCA-DSS-KLH，本發(fā)明通過紫外光譜掃描和免疫動(dòng)物的方法，證實(shí)了人工抗原的成功合成。合成步驟簡(jiǎn)潔，有效，完全可用于免疫分析當(dāng)中，為以后人們的研究提供了必需的頭孢類藥物通用人工抗原，可以滿足國(guó)內(nèi)對(duì)其研究的需要。
文檔編號(hào)C07K14/795GK103145832SQ201310091769
公開日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2013年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月21日
發(fā)明者匡華, 郭靖男, 胥傳來, 徐利廣, 劉麗強(qiáng), 馬偉, 王利兵, 丁利, 宋姍姍 申請(qǐng)人:江南大學(xué)