專利名稱：一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域，具體涉及一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法。
背景技術(shù)：
柄果脂素(Adenostemmoic acid B),分子式為C25H28O6,分子量為424. 49，是一種木脂素類化合物，為白色顆粒狀結(jié)晶，mp. 102°C (甲醇)。藥理研究表明，柄果脂素具有中樞神經(jīng)抑制作用。刺花椒，別名野花椒、巖椒，來(lái)源于蕓香科刺花椒(Janthoxylum acanthopodium DC.)，以根、果入藥。主要分布于云南，性味辛、麻，溫。功能主治溫中散寒，止痛，殺蟲，避孕；主治胃痛，風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛，避孕，蟲積腹痛。但刺花椒化學(xué)成分研究較少，現(xiàn)有文獻(xiàn)中還沒有檢索到從刺花椒中提取制備高純度柄果脂素的工藝報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法，以填補(bǔ)目前高純度柄果脂素提取制備技術(shù)的空白。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
1)乙醇提取將刺花椒根莖粉碎，投入提取罐，加入含有0.5 5%表面活性劑的60%-95% 的乙醇，采用回流提取2-4小時(shí)，收集提取液濃縮至無(wú)醇味；
2)大孔樹脂吸附將所得濃縮液通過大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至流出液無(wú)色，再用水醇梯度洗脫，洗脫梯度依次為10%-20%乙醇、55%-80%乙醇，收集洗脫液減壓回收乙醇，得到提取物；
3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進(jìn)一步純化，采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，得到純度95%以上的柄果脂素。步驟1)中表面活性劑親水親油平衡值(HLB)在14. (Tl8. O之間。步驟2)所述大孔吸附樹脂可選AB-8、DlOU HPD100等極性或非極性大孔吸附樹脂。步驟3)所述洗脫系統(tǒng)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，其體積比為(12-17) (15-25)(8-15):(7-15)。本發(fā)明的有益效果是
本發(fā)明加入表明活性劑參與提取，能夠增加提取率，減少提取次數(shù)，工業(yè)操作可采用一次或最多兩次提取，以價(jià)格便宜的大孔吸附樹脂為載體，以乙醇為溶劑梯度洗脫，再通過高速逆流色譜進(jìn)一步分離純化，得到純度大于95%的柄果脂素產(chǎn)品，本發(fā)明方法工序簡(jiǎn)單、快速、綠色環(huán)保，產(chǎn)品純度高。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
將刺花椒根莖粉碎，取5kg加入30L80%乙醇溶液(含0. 5%Tween 20)加熱回流提取2 次，每次4小時(shí)，過濾，合并兩次提取液，減壓濃縮至無(wú)醇味，將濃縮液通過預(yù)處理好的DlOl 大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再依次用20%乙醇、55%乙醇洗脫，收集 55%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物采用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(12:18:8:15)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為95. 4%。實(shí)施例2:
將刺花椒根莖粉碎，取5kg加入50L65%乙醇溶液(含P/oTween 80)加熱回流提取2次， 每次3小時(shí)，合并兩次提取液，減壓濃縮至無(wú)醇味，將濃縮液通過預(yù)處理好的AB-8大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再依次用10%乙醇、80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物采用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15:20:15:7)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為94. 6%。實(shí)施例3:
將刺花椒根莖粉碎，取IOkg加入80L7^)乙醇溶液(含2%Tween 80)加熱回流提取2 次，每次提取3小時(shí)，收集提取液，減壓濃縮至無(wú)醇味，將濃縮液通過預(yù)處理好的HPD100大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再依次用15%乙醇、75%乙醇洗脫，收集 75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物采用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(14:23:12:10)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為96. 8%。實(shí)施例4:
將刺花椒根莖粉碎，取20kg加入100L95%乙醇溶液(含3%Tween 20)加熱回流提取 4小時(shí)，過濾，濾渣再加入8L95%乙醇溶液回流提取2小時(shí)，過濾，合并兩次提取液，減壓濃縮至無(wú)醇味，將濃縮液通過預(yù)處理好的AB-8大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再依次用20%乙醇、80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物采用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水 (17:25:13:9)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為95. m。實(shí)施例5:
將刺花椒根莖粉碎，取50kg加入300L60%乙醇溶液(含0. 8%Tween 20)索氏提取4小時(shí)，收集提取液，減壓濃縮至無(wú)醇味，將濃縮液通過預(yù)處理好的DlOl大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再依次用15%乙醇、75%乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物采用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(13:15:10:15)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為96. 1%。
權(quán)利要求
1.一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法，其特征在于包括以下步驟1)乙醇提取將刺花椒根莖粉碎，投入提取罐，加入含有0.5 5%表面活性劑的60%-95% 的乙醇，采用回流提取2-4小時(shí)，收集提取液濃縮至無(wú)醇味；2)大孔樹脂吸附將所得濃縮液通過大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至流出液無(wú)色，再用水醇梯度洗脫，洗脫梯度依次為10%-20%乙醇、55%-80%乙醇，收集洗脫液減壓回收乙醇，得到提取物；3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進(jìn)一步純化，采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，得到純度95%以上的柄果脂素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取高純度柄果脂素的方法，其特征在于步驟1)中表面活性劑親水親油平衡值(HLB)在14. (Γ18. 0之間。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取高純度柄果脂素的方法，其特征在于步驟2)所述大孔吸附樹脂可選AB-8、DlOU HPD100等極性或非極性大孔吸附樹脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取高純度柄果脂素的方法，其特征在于步驟3)所述洗脫系統(tǒng)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，其體積比為(12-17) :(15-25) :(8-15) (7-15)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法，包括以下三個(gè)步驟1)乙醇提取將刺花椒根莖粉碎，加入0.5~5%表面活性劑，采用乙醇回流提取，提取液濃縮至無(wú)醇味；2)大孔樹脂吸附將所得濃縮液通過大孔吸附樹脂分離，水醇梯度洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，得到提取物；3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進(jìn)一步純化，得到純度95%以上的柄果脂素。本發(fā)明與傳統(tǒng)提取工藝相比，加入表面活性劑后能提高提取率，減少提取次數(shù)，還可以得到澄清的溶液，上柱不會(huì)存在堵塞吸附柱的現(xiàn)象，具有簡(jiǎn)便、快速、制備量大、產(chǎn)品純度高等優(yōu)點(diǎn)，易于推廣使用。
文檔編號(hào)C07D493/04GK102391276SQ20111030360
公開日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月10日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司