專利名稱：一種番瀉苷a的提純方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種番瀉苷A的提純方法。
背景技術(shù)：
番瀉葉為豆科植物狹葉番瀉Cassia angustifolia Vahl或尖葉番瀉Cassia acutifolia Delile的干燥小葉，性甘、苦、寒，歸大腸經(jīng)；瀉熱行滯、通便利水，用于治療熱結(jié)積滯、便秘腹痛、水腫脹滿等。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，主含番瀉苷A、B、C(sennosideA、B、C)及大黃酸、蘆薈大黃素和大黃酚等蒽苷類成分，其中番瀉苷A、B為番瀉葉瀉下作用的主要有效成分，其瀉下作用及刺激性較其它含蒽醌類的瀉藥更強(qiáng)，臨床常用于急性便秘。番瀉苷A 淡黃色結(jié)晶分子式=C42H38O20分子量826.74物理性質(zhì)熔點(diǎn)200 240 °C，旋光度-164 ° (c = 0. 1，60 %丙酮)，旋光度-24° (c = 0.2，70% 二氧六環(huán))。不溶于水、苯、乙醚、氯仿，微溶于甲醇、二苷醇-乙醚、 丙酮、二氧六環(huán)，溶于碳酸氫鈉水溶液。現(xiàn)有技術(shù)中對番瀉總苷的提取研究較多，對番瀉苷A的分離研究則不多見。因此提供一種高含量的番瀉苷A的制備方法，可以對其進(jìn)一步研究以及含量測定提供對照依據(jù)。高速逆流色譜技術(shù)已被廣泛用于天然產(chǎn)物的分離，該技術(shù)不需要固態(tài)的吸附劑， 而且不會(huì)對樣品產(chǎn)生不可逆吸附，并得到非常高的樣品回收率。目前還沒有將高速逆流色譜技術(shù)應(yīng)用于分離番瀉苷A的相關(guān)研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種番瀉苷A的提純方法，該方法操作簡便，樣品無損失，且制得的番瀉苷A的純度較高。一種番瀉苷A的提純方法，其特征在于包含以下步驟取番瀉葉藥材，加入石油醚回流脫脂1 3次，脫脂物加入乙醇進(jìn)行保溫滲漉提取，提取液濃縮至浸膏狀，加入碳酸氫鈉溶液溶解，濾除不溶物，加入二氯甲烷進(jìn)行萃取2 5次，萃余液加鹽酸調(diào)至中性，濾出沉淀采用高速逆流色譜法分離得到番瀉苷A。 所述的保溫提取溫度為50 80°C。所述的碳酸氫鈉溶液為1 5%碳酸氫鈉溶液。所述的高速逆流色譜法采用的溶劑系統(tǒng)是乙酸乙酯-甲醇-水，比例為QO 1 3 20)。所述的高速逆流色譜法操作步驟為將上述試劑按上述比例量取，混勻，取上相作為固定相，下相為流動(dòng)相，將沉淀物溶于上相得樣品溶液，經(jīng)分離得到高純度的番瀉苷A。本發(fā)明的優(yōu)勢在于1、本發(fā)明采用高速逆流色譜分離制備技術(shù)，被分離對象在兩相液體中進(jìn)行分配，不需要固相載體，克服了固相載體對樣品吸附、損失、污染等缺點(diǎn)，具有回收率高、快速、分離純化與制備同步完成的特點(diǎn)，因而有利于番瀉苷A的分離制備；2、本發(fā)明可節(jié)省大量有機(jī)溶劑，產(chǎn)品純度高，可直接制備對照品、用于藥理實(shí)驗(yàn)或商業(yè)用途。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:取番瀉葉藥材1kg，加入5L石油醚回流脫脂30min，濾出脫脂物烘干，加入IOL乙
醇進(jìn)行滲漉提取池，提取溫度保溫控制在50°C，提取液濃縮至浸膏狀，用適量碳酸氫鈉溶液溶解，濾除不溶物，加入等量二氯甲烷萃取2次，萃余液加稀鹽酸調(diào)至中性，靜置沉淀， 濾出沉淀干燥得番瀉苷粗品；將乙酸乙酯-甲醇-水按20 3 20比例量取，混勻取上相作為固定相，下相為流動(dòng)相，將番瀉苷粗品溶于上相中制成樣品溶液，以lOml/min的流速向色譜柱中泵入固定相，待固定相充滿管道后，打開主機(jī)設(shè)定螺旋柱線圈的旋轉(zhuǎn)速度為850r/min，使螺線管順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，當(dāng)達(dá)到設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí)，以;3ml/min的流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相從主機(jī)口流出時(shí)，開始進(jìn)樣品溶液，進(jìn)樣量為10ml，在尾端采用紫外檢測器監(jiān)視收集洗脫液，波長為214nm，洗脫液濃縮，低溫干燥即得番瀉苷A3. 7g。實(shí)施例2 取番瀉葉藥材1kg，加入7L石油醚回流脫脂3次，每次20min，濾出脫脂物烘干，加入20L乙醇進(jìn)行滲漉提取池，提取溫度保溫控制在80°C，提取液濃縮至浸膏狀，用適量5% 碳酸氫鈉溶液溶解，濾除不溶物，加入等量二氯甲烷萃取5次，萃余液加稀鹽酸調(diào)至中性， 靜置沉淀，濾出沉淀干燥得番瀉苷粗品；將乙酸乙酯-甲醇-水按20 1 20比例量取，混勻取上相作為固定相，下相為流動(dòng)相，將番瀉苷粗品溶于上相中制成樣品溶液，以lOml/min的流速向色譜柱中泵入固定相，待固定相充滿管道后，打開主機(jī)設(shè)定螺旋柱線圈的旋轉(zhuǎn)速度為800r/min，使螺線管順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，當(dāng)達(dá)到設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí)，以2. 5ml/min的流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相從主機(jī)口流出時(shí)， 開始進(jìn)樣品溶液，進(jìn)樣量為10ml，在尾端采用紫外檢測器監(jiān)視收集洗脫液，波長為214nm， 洗脫液濃縮，低溫干燥即得番瀉苷A4. 2g。實(shí)施例3 取番瀉葉藥材^g，加入30L石油醚回流脫脂40min，濾出脫脂物烘干，加入60L乙
醇進(jìn)行滲漉提取池，提取溫度保溫控制在70°C，提取液濃縮至浸膏狀，用適量3%碳酸氫鈉溶液溶解，濾除不溶物，加入等量二氯甲烷萃取3次，萃余液加稀鹽酸調(diào)至中性，靜置沉淀， 濾出沉淀干燥得番瀉苷粗品；將乙酸乙酯-甲醇-水按20 2 20比例量取，混勻取上相作為固定相，下相為流動(dòng)相，將番瀉苷粗品溶于上相中制成樣品溶液，以lOml/min的流速向色譜柱中泵入固定相，待固定相充滿管道后，打開主機(jī)設(shè)定螺旋柱線圈的旋轉(zhuǎn)速度為900r/min，使螺線管順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，當(dāng)達(dá)到設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí)，以3. 5ml/min的流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相從主機(jī)口流出時(shí)， 開始進(jìn)樣品溶液，進(jìn)樣量為10ml，在尾端采用紫外檢測器監(jiān)視收集洗脫液，波長為214nm，洗脫液濃縮，低溫干燥即得番瀉苷A15. 5g。實(shí)施例4 取番瀉葉藥材10kg，加入65L石油醚回流脫脂3次，每次20min，濾出脫脂物烘干， 加入200L乙醇進(jìn)行滲漉提取4h，提取溫度保溫控制在65°C，提取液濃縮至浸膏狀，用適量 4%碳酸氫鈉溶液溶解，濾除不溶物，加入等量二氯甲烷萃取4次，萃余液加稀鹽酸調(diào)至中性，靜置沉淀，濾出沉淀干燥得番瀉苷粗品；將乙酸乙酯-甲醇-水按20 3 20比例量取，混勻取上相作為固定相，下相為流動(dòng)相，將番瀉苷粗品溶于上相中制成樣品溶液，以lOml/min的流速向色譜柱中泵入固定相，待固定相充滿管道后，打開主機(jī)設(shè)定螺旋柱線圈的旋轉(zhuǎn)速度為950r/min，使螺線管順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，當(dāng)達(dá)到設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí)，以—1/min的流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相從主機(jī)口流出時(shí)，開始進(jìn)樣品溶液，進(jìn)樣量為10ml，在尾端采用紫外檢測器監(jiān)視收集洗脫液，波長為214nm，洗脫液濃縮，低溫干燥即得番瀉苷A36. 3g。
權(quán)利要求
1.一種番瀉苷A的提純方法，其特征在于包含以下步驟取番瀉葉藥材，加入石油醚回流脫脂，脫脂物加入乙醇進(jìn)行保溫滲漉提取，提取液濃縮至浸膏狀，加入碳酸氫鈉溶液溶解，濾除不溶物，加入二氯甲烷進(jìn)行萃取，萃余液加酸調(diào)至中性，濾出沉淀采用高速逆流色譜法分離得到番瀉苷A。
2.如權(quán)利要求1所述的一種番瀉苷A的提純方法，其特征在于所述的高速逆流色譜法采用的流動(dòng)相是乙酸乙酯-甲醇-水，比例為OO 1 3 20)。
全文摘要
本發(fā)明提供一種番瀉苷A的提純方法，方法是取番瀉葉藥材，加入石油醚回流脫脂，脫脂物加入乙醇進(jìn)行保溫滲漉提取，提取液濃縮至浸膏狀，加入碳酸氫鈉溶液溶解，濾除不溶物，加入二氯甲烷進(jìn)行萃取，萃余液加酸調(diào)至中性，濾出沉淀采用高速逆流色譜法分離得到番瀉苷A。本發(fā)明生產(chǎn)周期短，產(chǎn)品純度高，可直接用于色譜標(biāo)樣或商業(yè)用途等。
文檔編號C07H15/244GK102241713SQ20111011786
公開日2011年11月16日 申請日期2011年5月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月6日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司