專(zhuān)利名稱(chēng)：一種具有高效抗癌活性的黃姜盾葉新苷的制備方法及其用途的制作方法
一種具有高效抗癌活性的黃姜盾葉新苷的制備方法及其用途技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明以藥用植物-盾葉薯蕷(Dioscorea zingiberensis C. H. Wright.)即黃姜 為原料，采用溶劑提取總皂苷，柱色譜等方法分離疏水性皂苷組分。黃姜盾葉新苷進(jìn)行了 體內(nèi)外抗腫瘤活性研究，對(duì)結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌、宮頸癌、卵巢癌等腫瘤具有明顯地抑制活 性。
背景技術(shù)：
腫瘤是危害人類(lèi)健康和生命的主要疾病。全世界每年約有500萬(wàn)人死于惡性腫 瘤。近年來(lái)，由于環(huán)境的惡化，以及現(xiàn)代人的工作壓力，疾病的傳播，惡性腫瘤的發(fā)病率呈上 升趨勢(shì)，并成為繼心血管疾病之后的第二大致死病因。因此，全球每年投入大量的人力物力 用于研究開(kāi)發(fā)防治癌癥的新藥物。近年來(lái)，藥物學(xué)專(zhuān)家除了研究西藥以外，也對(duì)中藥進(jìn)行了 很多研究，對(duì)惡性腫瘤形成的機(jī)理也進(jìn)行探討，組合化學(xué)、基因工程等先進(jìn)技術(shù)的發(fā)明和應(yīng) 用加速了對(duì)惡性腫瘤藥物開(kāi)發(fā)進(jìn)程。特別是目前以天然活性成分為先導(dǎo)化合物尋找新藥有 廣闊的發(fā)展前景。迄今為止已評(píng)估了 4萬(wàn)余種高等植物的抗腫瘤活性。據(jù)國(guó)外資料介紹， 全世界已經(jīng)開(kāi)發(fā)了幾百種抗癌新藥，其中有很多屬于天然植物提取物，近年來(lái)，研究人員從 傳統(tǒng)中藥進(jìn)行的廣泛的篩選，發(fā)現(xiàn)了大量的抗腫瘤植物，如紅豆杉、銀杏、喜樹(shù)、靈芝等。但 上述植物中，人們對(duì)紅豆杉、喜樹(shù)堿的研究較多，很多植物由于生長(zhǎng)緩慢，資源貧乏，很難滿(mǎn) 足市場(chǎng)需求。
近年來(lái)人們發(fā)現(xiàn)留體皂苷具有廣泛的抗腫瘤活性，是一種高效，低毒的較理想的 抗癌藥物。留體皂苷(Steroidal saponins)是一類(lèi)螺留烷(spirosanes)化合物衍生物的 寡糖苷。主要分布在薯蕷科、百合科、玄參科、菝葜科、龍舌蘭科等植物中，其他科如石蒜科、 豆科以及鼠李科的一些植物中也含有留體皂苷。常用中藥知母、天門(mén)冬、麥門(mén)冬、七葉一枝 花等都均有大量留體皂苷。留體皂苷經(jīng)水解脫糖而得的苷元，除因作為天然人工半合成甾 體激素類(lèi)藥物和避孕用藥的基礎(chǔ)而著名外，其皂苷本身的藥用價(jià)值近十幾年來(lái)也得到較快 發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)，某些皂苷具有降血脂、降血糖、抗癌、抗病毒、抗菌抗感染、治療冠心病及調(diào) 節(jié)生理機(jī)能等活性。菝葜(parillin)具有顯著的抗霉菌作用。蒺藜(Tribulus terresris) 總皂苷不但用于治療冠心病，還可以防止肺心病、降血壓、增強(qiáng)性功能與抗衰老等作用。以 黃山藥(Dioscorea panthaiapraia etBurkill)為原料提取而得的甾體總皂苷制成的地奧 心血康，用于治療冠心病、心絞痛、氣短、心悸、胸悶、胸痛等癥狀，總有效率達(dá)90%以上?？?見(jiàn)，隨著現(xiàn)代分離技術(shù)的進(jìn)步，研究手段的發(fā)展，使得極性較大，糖鏈復(fù)雜的皂苷也有突破 性發(fā)展，這將促進(jìn)留體皂苷自身藥用價(jià)值的發(fā)展和利用。
薯蕷皂苷(dioscin)是留體皂苷中的重要成分，薯蕷皂苷具有較好的生物活 性。前蘇聯(lián)的科研人員發(fā)現(xiàn)高加索薯蕷中的皂苷提取物有降膽固醇的作用，臨床實(shí)驗(yàn)也 有證明。80年代Ravikumer等發(fā)現(xiàn)云南白藥中的薯蕷皂苷有抗癌活性。另外薯蕷皂苷 元(diosgenin)及其苷還有抗關(guān)節(jié)炎作用。從重樓、穿龍薯蕷(D. nipponica)中分離得到的薯蕷皂苷具有明顯的心血管、抗腫瘤和抗真菌的活性。最近幾年的研究發(fā)現(xiàn)薯蕷皂苷 (dioscin)對(duì)肺癌、乳癌、胃癌、白血病、結(jié)腸癌、宮頸癌、黑色素等腫瘤細(xì)胞都有很好的細(xì)胞 毒性。目前，國(guó)內(nèi)以不同種的薯蕷屬植物為原料，提取其總甾體皂苷作為臨床上的降血脂藥 已有數(shù)家工廠生產(chǎn)，其中用盾葉薯蕷(D. zingibernsis)為原料研制成功的新藥“盾葉冠心 寧”，臨床治療冠心病、心絞痛有一定療效。
經(jīng)文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，在臨床上，留體皂苷主要運(yùn)用于降血脂，治療心血管疾病等。工 業(yè)上，盾葉薯蕷作為原料主要用于生產(chǎn)皂素，作為合成留體激素類(lèi)藥物和避孕藥的原料。同 時(shí)，在臨床上主要應(yīng)用于治療心血管疾病，但其留體皂苷的成分并不十分清楚，且目前的研 究并未涉及抗腫瘤活性研究。目前，在留體皂苷抗腫瘤活性研究中，薯蕷皂苷(dioscin)，甾 體皂苷元(diosgenin)等報(bào)道較多，盾葉新苷(zingiberensis saponin)并沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備黃姜盾葉新苷的方法。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供黃姜盾葉新苷在制備用于治療或預(yù)防癌癥的藥物 中的用途。
黃姜盾葉新苷(zingiberensis saponin)，其結(jié)構(gòu)特征為
權(quán)利要求
1.一種制備下式結(jié)構(gòu)的黃姜盾葉新苷的方法
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，包括以下步驟(1)將藥用植物黃姜塊莖烘干，粉碎，按藥用植物粉末重量的2-3倍加入70-100%(體 積比)乙醇浸提IO-M小時(shí)，固液分離；(2)過(guò)濾分離的固相按藥用植物重量的3-5倍加入70-100%(體積比)乙醇回流2-5 小時(shí)，趁熱過(guò)濾，重復(fù)回流3-5次；(3)將浸泡的液相與熱回流提取的液相合并后，減壓蒸餾回收乙醇，得褐色浸膏；(4)將褐色浸膏按重量的6-10倍加水超聲波溶解；(5)將⑷得到的混合物離心，分離水相與固相；(6)將( 得到的固相得到的固相冷凍干燥得到黃姜留體總皂苷組分；(7)采用正相硅膠柱色譜、凝膠色譜、重結(jié)晶分離純化，得到黃姜盾葉新苷。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中溶劑提取在室溫至78°C的溫度下浸潤(rùn)提取，或回流提取。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述正相硅膠柱色譜為常壓或加壓硅膠柱色譜，采用 選自苯/丙酮、二氯甲烷/丙酮、三氯甲烷/丙酮、苯/甲醇、二氯甲烷/甲醇、三氯甲烷/ 甲醇、乙酸乙酯/甲醇、苯/丙酮/水、三氯甲烷/甲醇/水、二氯甲烷/甲醇/水或乙酸乙 酯/甲醇/水中的一種或多種洗脫劑等度洗脫或梯度洗脫。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述凝膠色譜的洗脫劑選自甲醇/水，乙醇/水的一種 或多種洗脫劑等度洗脫或梯度洗脫。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述重結(jié)晶步驟是將產(chǎn)物溶解在甲醇中重結(jié)晶。
7.具有下式結(jié)構(gòu)的黃姜盾葉新苷在制備用于治療或預(yù)防癌癥的藥物中的用途
8.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，其中癌癥選自結(jié)腸癌、肺癌、乳癌、宮頸癌和卵巢癌。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種制備具有下式結(jié)構(gòu)的黃姜盾葉新苷的方法，包括以下步驟以黃姜的塊莖為原料，采用一種或多種選自水和C1-4-脂肪醇的溶劑提取，減壓濃縮、冷凍干燥得到黃姜甾體總皂苷組分，采用正相硅膠柱色譜、凝膠色譜、重結(jié)晶分離純化，得到黃姜盾葉新苷。本發(fā)明還涉及具有下式結(jié)構(gòu)的黃姜盾葉新苷在制備用于治療或預(yù)防癌癥的藥物中的用途，其中所述癌癥選自結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌、宮頸癌和卵巢癌。
文檔編號(hào)C07J71/00GK102030813SQ20101054106
公開(kāi)日2011年4月27日 申請(qǐng)日期2010年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月10日
發(fā)明者倪晉仁, 吳曉華, 黃文 申請(qǐng)人:北京大學(xué)