專(zhuān)利名稱(chēng)：Salinosporamide A及其類(lèi)似物的不對(duì)稱(chēng)全合成的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種Salinosporamide A及其類(lèi)似物的不對(duì)稱(chēng)全合成，它是靈活高效的全合成方法。
背景技術(shù)：
天然產(chǎn)物直接成藥或者作為先導(dǎo)化合物通過(guò)構(gòu)效關(guān)系研究尋找到合適的藥物分 子在藥物研究中具有重要意義。由于天然產(chǎn)物來(lái)源的有限性，常導(dǎo)致成藥成本過(guò)高或者結(jié) 構(gòu)改造困難很難進(jìn)行構(gòu)效關(guān)系研究，因此發(fā)展高效實(shí)用、并且具有很好的靈活性可用于合 成不同位置類(lèi)似物的全合成路線(xiàn)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。蛋白酶體的主要作用是降解細(xì)胞不需要的或受到損傷的蛋白質(zhì)，蛋白酶體降解途 徑對(duì)于許多細(xì)胞進(jìn)程，包括細(xì)胞的增殖和凋亡都是必不可少的。因此，蛋白酶體成為藥物研 發(fā)中重要的生物靶點(diǎn)，蛋白酶體抑制劑作為潛在的抗癌藥物被廣泛研究。Salinosporamide A(I) ^ 2003 ^ Fenical /]、砠 $ · # 雙 _ 胃 Salinospora 中分離得到的高效蛋白酶體抑制劑(Feling et al，Angew. Chem. Int. Ed. 2003，42， 355-357)，其結(jié)構(gòu)與同是蛋白酶體抑制劑的Lactacystin (3)和Omuralide (2) (Omura et al, J. Antibiot. 1991,44,113-116 ；Omura et al, J.Antibiot. 1991,44,117-118 ； Groll et al, Nature 1997,386,463-471 ；Bogyoetal, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997， 94,6629-6634 ；Corey et al, Chem. Pharm. Bull. 1999,47,1-10 ；Masse et al, Eur. J. Org. Chem. 2000,2513-2528)具有很大的相似性。更多的Salinosporamide A類(lèi)似物被分離到 (Williams et al, J. Org. Chem. 2005,70,6169-6203 ；Stadler et al, J. Nat. Prod. 2007, 70,246-252 ；Reed et al, J. Nat. Prod. 2007，70，269-276)，并且很多都具有蛋白酶體抑制 活性，如 Cinnabaramide A(4)。
OOO H02C、Q
ci^jyi 8 -ΛΝΗ ,少
1^o OH飛 OHHOr y飛 bH
Salinosporamide A (1)Omuralide (2)Lactacystin (3)Cinnabaramides A (4)Salinosporamide A對(duì)于很多腫瘤細(xì)胞具有非常強(qiáng)的體外細(xì)胞毒性(IC5tl為IOnM 或更低)，其作用靶點(diǎn)為20S蛋白酶體通過(guò)β -內(nèi)酯開(kāi)環(huán)將20S蛋白酶體活性部位的蘇氨 酸殘端羥基酰化實(shí)現(xiàn)不可逆地抑制(Groll et al，J. Am. Chem. Soc. 2006，128，5136-5141)。 氯的存在使得Salinosporamide A對(duì)20S蛋白酶體的抑制活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其脫氯類(lèi)似物 SalinosporamideB (Williams et al, J. Org. Chem. 2005, 70,6196-6203)。Salinosporamide A對(duì)于20S蛋白酶體的抑制作用(IC5tl為1. 3nM)是Omuralide的約35倍，作為治療固體 瘤、難治性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、非小細(xì)胞肺癌、瘧疾、阿爾茨海默病的藥物已進(jìn)入I期 臨床研究(Chauhan et al, Cancer Cell 2005,8,407-419 ；Williams et al, Trends inBiotechnology 2009，27，45-52)。Moore /Jn ^ ^ ff 7 Salinosporamide A ^ ^ ill ^ (Beer et al, Org. Lett.2007,9,845-848 ；Eustaquio et al, Nature Chemical Biology 2008,4,69-74 ； Eustaquio et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2009，106，12295-12300 ;Liu et al, J.Am. Chem.Soc. 2009，131，10376-10377)。其中最關(guān)鍵的在于a.由氯代酶SalL通過(guò)親核取代 過(guò)程構(gòu)建氯乙基；b.通過(guò)分子內(nèi)Aldol反應(yīng)形成C3-C4鍵，實(shí)現(xiàn)Y-內(nèi)酰胺骨架及兩個(gè)季碳 中心的構(gòu)筑；c.通過(guò)羧基的活化實(shí)現(xiàn)分子內(nèi)內(nèi)酯化。
許多課題組對(duì)Salinosporamide A及其類(lèi)似物進(jìn)行了全合成工作(Reddy et al, J.Am. Chem. Soc. 2004，126，6230-6231 ；Endo et al，J. Am. Chem. Soc. 2005，127，8298-8299 ； Mulholland et al, Org. Biomol. Chem. 2006,4,2845-2846 ；Ma et al, Org. Lett. 2007,9, 2143-2146 ；Ling et al, Org.Lett. 2007,9,2289-2292 ；Caubert et al, Tetrahedron. Lett.2007,48,381-384 ；Margalef et al, Tetrahedron 2008,64,7896-7901 ；Takahashi et al, Angew. Chem. Int. Ed. 2008，47，1-4 ；Fukuda et al, Org. Lett. 2008，10，4239-4242 ； Struble et al,Tetrahedron2009,65,4957-4967 ；Mosey et al,Tetrahedron Lett. 2009, 50,295-297 ；Momose et al, Synthesis 2009，17，2983-2991。專(zhuān)利文獻(xiàn)報(bào)道Corey et al, US 2005/0228186A1 ；Danishefskyet al, WO 2006/124902A2 ；Myers et al, WO 2007/021897A1 ；Ling et al, WO 2007/117591A2(CN 101460457A) ；Romo et al, US 2009/0062547A1)。鑒于Salinosporamide A作為新穎的蛋白酶體抑制劑的重要性以及針對(duì)多種重要 疾病的成藥前景，迫切需要對(duì)于Salinosporamide A高效、低成本地大量制備(克級(jí)以上) 以及可靈活的用于不同位置類(lèi)似物合成的全合成方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種Salinosporamide A及其類(lèi)似物的不對(duì)稱(chēng)全合成方法。以合 適保護(hù)的光學(xué)活性的絲氨酸為原料，反應(yīng)得到多取代的中間體酰胺，然后通過(guò)異構(gòu)化轉(zhuǎn)化、 脫保護(hù)、氧化_分子內(nèi)Aldol串聯(lián)反應(yīng)得到環(huán)化產(chǎn)物環(huán)化中間體，再通過(guò)1，2_加成得到二 醇以及脫保護(hù)、內(nèi)酯化過(guò)程實(shí)現(xiàn)Salinosporamide A及其類(lèi)似物的全合成。該合成路線(xiàn)原 料易得、反應(yīng)步驟少、操作簡(jiǎn)便，適用于大量制備，同時(shí)該路線(xiàn)具有很好的靈活性，可方便地 制備不同位置的類(lèi)似物。本發(fā)明提供的Salinosporamide A及其類(lèi)似物的結(jié)構(gòu)如式5和6所示
OO
0Λ 0Η Η0 J.',0
°R3
56 其合成步驟為通過(guò)化合物7或化合物8與化合物9反應(yīng)得到酰胺11，酰胺11通 過(guò)脫保護(hù)、氧化得到醛12和13，再與R3負(fù)離子反應(yīng)生成二醇14和15，二醇14和15分別 通過(guò)脫保護(hù)，內(nèi)酯化得到化合物5和6。 其中X獨(dú)立地為鹵素、-OC( = O)Ra、-OS ( = 0)2Ra以及其它羧酸活化基團(tuán)，當(dāng)Ra 出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為C1-C6取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基、 C1-C6取代或非取代的烷氧基；R1獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、C2-C8取代或非取代的烯基、C2-C8取代 或非取代的炔基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烷基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烯基、取代或非取 代的苯基、取代或非取代的芐基；R2獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、C2-C8取代或非取代的烯基、C2-C8取代 或非取代的炔基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烷基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烯基、取代或非取 代的苯基、取代或非取代的芐基；R3獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、C2-C8取代或非取代的烯基、C2-C8取代 或非取代的炔基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烷基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烯基、取代或非取 代的苯基、取代或非取代的芐基；R4獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的 芐基、-c( = 0) Rb，當(dāng)Rb出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為C1-C6取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、 取代或非取代的芐基、C1-C6取代或非取代的烷氧基；R5獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的
芐基；R6獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的 芐基、-Si (Rc) 3> -C( = 0)RC,當(dāng)Rc出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為C1-C6取代或非取代的烷基、取代或非取 代的苯基、取代或非取代的芐基、C1-C6取代或非取代的烷氧基。本發(fā)明的另一方面化合物9的可選結(jié)構(gòu)如下所示，構(gòu)型為R或S 化合物9-1 =R5 = CH2CCl3, R6 = TBS ；化合物 9-2 =R5 = Me, R6 = TBS ；化合物 9-3 R5 = tBu, R6 = TBS ；化合物 9-4 =R5 = Bn, R6 = TBS ；化合物 9-5 =R5 = CH2CCl3, R6 = TBDPS ； 化合物 9-6 =R5 = CH2CCl3, R6 = TMS.本發(fā)明的另一方面是反應(yīng)步驟優(yōu)選為步驟一化合物7或化合物8在惰性溶劑中_50°C到100°C范圍內(nèi)堿存在下與光學(xué) 活性的化合物9反應(yīng)生成非對(duì)映異構(gòu)體10和11。所說(shuō)的化合物7可以是現(xiàn)場(chǎng)制備的；所 說(shuō)的惰性溶劑包括鹵代烴、醚類(lèi)、酯類(lèi)、芳烴、非質(zhì)子極性溶劑，其優(yōu)選為鹵代烴，如二氯甲 烷、1，2-二氯乙烷和氯仿等；所說(shuō)的堿包括有機(jī)堿和無(wú)機(jī)堿，其優(yōu)選為親核性的有機(jī)堿，如 吡啶、4- 二甲氨基吡啶(DMAP)、1，4_ 二氮雜二環(huán)[2. 2. 2]辛烷(DABCO)等。步驟二 化合物11在惰性溶劑中-50°C到100°C范圍內(nèi)脫去羥基保護(hù)基團(tuán)后得到 伯醇化合物11a，然后在惰性溶劑中-80°C到100°C范圍內(nèi)在氧化劑作用下生成內(nèi)酰胺醛12 和13。所說(shuō)的惰性溶劑包括鹵代烴、醚類(lèi)、酯類(lèi)、芳烴、非質(zhì)子極性溶劑，其優(yōu)選為二氯甲烷、 四氫呋喃、乙酸乙酯、甲苯、乙腈等(把兩個(gè)反應(yīng)的惰性溶劑一起定義的，下面也一樣)；所 說(shuō)的氧化劑其優(yōu)選為戴斯-馬丁試劑(Dess-Martin periodinane)、柯林斯試劑(Collins reagent)和吡啶鉻酐鹽酸鹽(PCC)等。步驟三醛12和13 (分離或未經(jīng)分離)在惰性溶劑中_80°C到100°C范圍內(nèi)與R3 負(fù)離子反應(yīng)分別生成二醇14和15。所說(shuō)的惰性溶劑指醚類(lèi)溶劑，其優(yōu)選為四氫呋喃；所說(shuō) 的R3負(fù)離子來(lái)源于有機(jī)鋅試劑、有機(jī)鎂試劑、有機(jī)鋰試劑、有機(jī)銅試劑、有機(jī)錫試劑、有機(jī)硼 試劑、有機(jī)鈀試劑、有機(jī)硅試劑，其優(yōu)選為有機(jī)鋅試劑和有機(jī)鎂試劑。步驟四化合物14或15在惰性溶劑中-80°C到100°C范圍內(nèi)與脫保護(hù)試劑反應(yīng)， 脫去R4、R5保護(hù)基，然后在惰性溶劑中-80°c到100°C范圍內(nèi)活化試劑存在下進(jìn)行內(nèi)酯化，分 別得到化合物5或6。所說(shuō)的惰性溶劑包括鹵代烴、醚類(lèi)、酯類(lèi)、芳烴、非質(zhì)子極性溶劑、質(zhì)子 性溶劑，其優(yōu)選為二氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲苯、乙腈、乙酸或水。所說(shuō)的脫去R5保 護(hù)基的脫保護(hù)試劑當(dāng)R5 = CH2CCl3時(shí)為鋅粉、二碘化釤(SmI2)、鎘粉、硒粉/硼氫化鈉等， 其優(yōu)選為鋅粉；當(dāng)R5 = Me時(shí)為氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋇、三氯化硼、三溴化 硼、三氯化鋁、二甲基甲碲基鋁(Me2AlTeMe)、二甲基甲硒基鋁(Me2AlSeMe)、二甲基甲硫基 鋁(Me2AlSMe),其優(yōu)選為二甲基甲碲基鋁(Me2AlTeMe)、二甲基甲硒基鋁(Me2AlSeMe)、二甲 基甲硫基鋁(Me2AlSMe)；當(dāng)R5 = tBu時(shí)其優(yōu)選為三氯化硼；當(dāng)R5 = Bn時(shí)其優(yōu)選為三氯化 硼、三氯化鋁。本發(fā)明的另一方面X其優(yōu)選為鹵素，如氯氓其優(yōu)選為烷基，如甲基、氯乙基、正己 基等；R2其優(yōu)選為氫、甲基、三氟甲基、苯基等；R3其優(yōu)選為2-環(huán)己烯基、異丙基、環(huán)戊基等。本發(fā)明中的術(shù)語(yǔ)Salinosporamide A，其結(jié)構(gòu)為化合物1所示。Iso-salinosporamide A，其結(jié)構(gòu)為化合物 6—1 所示。Salinosporamide A類(lèi)似物，其結(jié)構(gòu)通式為化合物5和化合物6所示。
本發(fā)明提供了結(jié)構(gòu)為5和6的Salinosporamide A類(lèi)似物以及不對(duì)稱(chēng)全合成方 法。合成路線(xiàn)原料易得、反應(yīng)步驟少、操作簡(jiǎn)便，適用于大量制備，同時(shí)該路線(xiàn)具有很好 的靈活性，可方便地制備不同位置的類(lèi)似物，有助于其臨床研究以及進(jìn)一步的構(gòu)效關(guān)系 研究。Salinosporamide A作為高效的蛋白酶體抑制劑已用于癌癥治療的臨床試驗(yàn)，對(duì) Salinosporamide A及其類(lèi)似物高效方便地制備必將有助于其臨床研究以及進(jìn)一步的構(gòu)效 關(guān)系研究。


圖1是化合物1的單晶結(jié)構(gòu)圖。圖2是化合物6a_l的單晶結(jié)構(gòu)圖。
具體實(shí)施例方式以下再通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本 發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本 發(fā)明的范圍。下述實(shí)施例中，熔點(diǎn)未經(jīng)校正，收率未經(jīng)優(yōu)化。實(shí)施例1化合物11-1的制備 新鮮制備的7a-l (42mmol)溶于二氯甲烷(84mL)中，室溫加入吡啶(3. 4mL, 42mmol)后升溫回流1小時(shí)。然后加入9_1 (42mmol)的二氯甲烷溶液，反應(yīng)完成后加入二氯 甲烷稀釋?zhuān)来斡肐M鹽酸、飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后旋除溶劑，柱純化得 到兩個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體10-1和11-1(33. 6mmol,80%, dr = 2 3)。10-1和11-1的絕對(duì)立 體化學(xué)由最終產(chǎn)物Salinosporamide A確定?；衔?0-1 :mp. 67-68 °C ； [ α ]D20 = -44. 6 ° (c 1. 09，CHCl3) ；1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7. 34(d，2H，J = 8. 4Hz) ,6. 89(d,2H, J = 8. 0Hz) ,4. 95 (d, 1H, J = 16. 4Hz)， 4. 80 (d, 1H, J = 12. 0Hz)，4. 66 (d, 1H, J = 16. 8Hz)，4. 62 (d, 1H, J = 12. 0Hz)，4. 30-4. 17 (m, 3H)，3. 98 (t, 1H, J = 6. 8Hz)，3. 80 (s,3H)，3. 58-3. 44 (m, 2H)，2. 40 (m, 1H)，2. 22 (m, 1H) ,2. 19(m,3H) ,0. 89 (s,9H) ,0. 05(s,3H) ,0. 04(s，3H) ；HRMS (ESI)m/z calcd. for C25H38Cl4N06SiNa640. 1010，found for [M+Na]+ 640. 1000?；衔?1-1 :mp. 89-91 °C ； [ α ]D20 = -26. 9 ° (c 1. 23，CHCl3) ；1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7. 40(d,2H, J = 8. 4Hz), 6. 91 (d, 2H, J = 8. 8Hz) ,4. 97 (d, 1H, J = 16. 8Hz)， 4. 87 (d, 1H, J = 12. 0Hz) ,4. 73 (d, 1H, J = 16. 8Hz) ,4. 67 (d, 1H, J = 12. 0Hz)，4. 59 (m， 1H)，4. 27-4. 18 (m, 2H)，3. 96 (t, 1H, J = 6. 4Hz)，3. 81 (s，3H)，3. 61 (m, 2H)，2. 42 (m, 1H)， 2. 19 (m, 1H)，1. 96(m，3H)，0. 88(s，9H)，0· 06(s，3H)，0· 03(s，3H) ；HRMS (ESI) m/z calcd. forC25H38Cl4N06SiNa 640. 1010，found for [M+Na]+640. 1000。
實(shí)施例2化合物11-2的制備 使用同實(shí)施例1相同的操作，不同的是使用絲氨酸衍生物9-2，制備得到化合物 11-2?；衔?0-2 :[a ]D20 = -72. 4 ° (c 0. 50, MeOH) ；1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7. 19(d,2H, J = 7. 6Hz)，6. 77 (d，2H，J = 7. 2Hz)，4. 78 (d，1H，J = 16. 4Hz)，4. 57 (d， 1H, J = 16. 8Hz)，4. 32-4. 31 (m, 1H)，4. 12-4. 08 (m, 1H)，4. 00-3. 97 (m, 1H)，3. 79 (t, 1H, J = 6. 0Hz)，3. 66(s，3H)，3. 56(s，3H)，3. 43-3. 27(m，2H)，2. 29-2. 21 (m, 1H)，2. 04 (bs, 4H)，0. 75(s，9H)，-0. 09(s，3H)，-0. 11 (s，3H) ；HRMS (ESI) m/z calcd. for C24H39ClNO6Si 500. 2230, found for [M+H]+500. 2222.化合物ll-2:[a]D20 = -22. 8 ° (c 0. 50, MeOH) ；1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7. 32(d,2H, J = 8. 8Hz)，6. 85 (d，2H，J = 8. 4Hz) ,4. 86 (d, 1H, J = 16. 8Hz)，4. 66 (d， 1H, J = 17. 2Hz)，4. 53-4. 51 (m, 1H)，4. 17-4. 06 (m, 2H)，3. 86 (t, 1H, J = 8. 4Hz)，3. 74 (s, 3H) ,3. 65(s，3H)，3· 56-3. 52 (m，2H)，2· 32 (m, 1H)，2· 14 (m, 1H)，1. 88(s，3H)，0· 81 (s, 9Η)，-0. 02(s，3H)，-0. 05(s，3H) ；HRMS (ESI)m/z calcd. for C24H39ClNO6Si 500. 2230, found for [M+H]+500. 2225.實(shí)施例3化合物10-3和11-3的制備 使用同實(shí)施例1相同的操作，不同的是使用絲氨酸衍生物9-3，制備得到化合物 10-3和11-3。10-3和11-3的絕對(duì)立體化學(xué)未進(jìn)一步確定?；衔?0-3 (或 11-3) =Rf = 0. 55 (PET AcOEt = 4 1) ；1H 匪R(300MHz，CDCl3) δ 7. 30 (d, 2H, J = 8. 7Hz)，6. 88 (d, 2H, J = 8. 7Hz)，4. 86 (d, 1H, J = 16. 8Hz)，4. 62 (d, 1H, J =16. 8Hz)，4. 22-4. 05 (m, 3H)，3. 86 (m, 1H)，3. 80 (s, 3H)，3. 51 (m, 2H)，2. 37 (m, 1H)，2. 17 (s, 3H)，2. 15 (m, 1H)，1. 43 (s,9H)，0. 86 (s,9H)，0. 01 (s，3H)，0. 00 (s, 3H)。化合物11-3 (或 10-3) =Rf = 0. 50 (PET AcOEt = 4 1) ；1H 匪R(300MHz，CDCl3) δ 7. 41 (d, 2H, J = 8. 4Hz)，6. 91 (d, 2H, J = 8. 7Hz)，4. 90 (d, 1H, J = 16. 8Hz)，4. 67 (d, 1H, J =17. 1Hz)，4. 45 (m, 1H)，4. 14 (m, 2H)，3. 89 (m, 1H)，3. 82 (s, 3H)，3. 60 (m, 2H)，2. 38 (m, 1H)， 2. 21 (m, 1H)，1. 94 (s, 3H)，1. 46 (s,9H)，0. 86 (s,9H)，0. 04 (s, 3H)，0. 01 (s，3H)。實(shí)施例4化合物10-4和11-4的制備 使用同實(shí)施例1相同的操作，不同的是使用7a_2與絲氨酸衍生物9_1反應(yīng)得到化 合物10-4和11-4。10-4和11-4的絕對(duì)立體化學(xué)未進(jìn)一步確定。化合物10-4 (或 11-4) =Rf = 0. 50 (PET AcOEt = 4 1) ；1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7. 92 (d, 1H, J = 7. 6Hz)，7. 59 (m, 1H)，7. 48 (m, 2H)，7. 37 (d, 2H, J = 8. 4Hz)，7. 31 (d, 1H, J = 8. OHz)，6. 89 (d, 2H, J = 8. OHz)，4. 93-4. 13 (m, 8H)，3. 80 (s, 3H)，3. 77 (m, 1H)，3. 66 (m, 1H)，2. 59 (m, 1H)，2. 56 (m, 1H)，0. 86 (s,9H)，0. 07 (s, 3H)，0. 04 (s, 3H).化合物11-4 (或 10-4) =Rf = 0. 45 (PET AcOEt = 4 1) ；1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7. 59 (d, 2H, J = 8. OHz)，7. 49 (m, 1H)，7. 39 (d, 2H, J = 8. 4Hz)，7. 30 (m, 2H)，6. 84 (d, 2H, J = 8. 4Hz)，4. 97 (d, 1H, J = 16. 8Hz)，4. 85 (d, 1H, J = 12. OHz)，4. 84 (m, 1H)，4. 75 (d, 1H, J =16. 8Hz)，4. 52 (m, 1H)，4. 35 (d, 1H, J = 12. OHz)，4. 19 (m, 2H)，3. 77 (s, 3H)，3. 74 (m, 1H)， 3. 60 (m, 1H)，2. 60 (m, 1H)，2. 39 (m, 1H)，0. 86 (s,9H)，0. 05 (s, 3H)，0. 02 (s, 3H)。實(shí)施例5化合物14-1和15-1的制備 化合物11-1(12. 34g,20mmol)與40%氫氟酸水溶液(5mL)在乙腈(IOOmL)中反 應(yīng)，反應(yīng)完成后旋除大部分乙腈后加二氯甲烷稀釋?zhuān)来斡盟柡褪雏}水洗，無(wú)水硫酸鈉 干燥，過(guò)濾后旋除溶劑得伯醇lla_l(9.96g，99% )為白色固體。伯醇lla_l(7. 55g，15讓ol)溶于二氯甲烷(I5OmL)中，加入 Dess-Martin 試劑 (7. 62g，18mmol)，反應(yīng)完成后加乙醚(150mL)稀釋?zhuān)缓蠹尤腼柡吞妓釟溻c溶液與IM硫代 硫酸鈉溶液混合溶液(1 l，150mL)淬滅。乙醚萃取，萃取液用飽和食鹽水洗，無(wú)水硫酸鈉 干燥。過(guò)濾后旋除溶劑，柱層析得到醛12-1和13-1混合物(6. 54g,87% )。該混合物直接 用于下一步反應(yīng)。向_78°C下新鮮制備的2-環(huán)己烯基溴化鋅四氫呋喃溶液(14. 4mmol)，滴加醛12_1 和13-1混合物(6. 54g，13. lmmol)的四氫呋喃(15mL)溶液，反應(yīng)完成后加入酒石酸鈉鉀淬 滅反應(yīng)，加乙酸乙酯稀釋?zhuān)^(guò)濾，濃縮后柱層析得到二醇14-1和15-1。
化合物14-1 白色固體(2. 51g，33%，95. 5% ee)。使用乙酸乙酯/正己烷重結(jié)晶，消旋體析出，母液中為高光學(xué)純度的14-1(2. 38g，> 99. 9% ee)。HPLC條件=Chiralpak AD-Hcolumn ；Hexane i-PrOH = 70 30,1. OmL/min, 225nm UV detector ;tR (major)=
5.80min, tE(minor) = 11.87min。mp. 187-189 "C ；[a ]D20 = +11. 1 ° (c 0. 56, CHCl3)； 1H NMR (600MHz, CDCl3) δ :7.28(d，2H，J = 9. 0Hz)，6. 85 (d，2H，J = 8. 4Hz)，5. 97 (d， 1H, J = 9. 6Hz) ,5. 63 (d, 1H, J = 10. 2Hz) ,4. 99 (d, 1H, J = 12. 0Hz) ,4. 77 (d, 1H, J = 15. 6Hz)，4. 61 (d, 1H, J = 15. 6Hz)，4. 60 (d, 1H, J = 12. 0Hz)，4. 22 (m, 1H)，3. 89 (m, 2H)， 3. 79(s，3H)，3· 12 (m, 1H)，2· 38(m，2H)，2. 14(m，2H)，2. 02 (m, 2Η)，1. 94 (m, 1Η)，1. 80 (s， 3Η)，1· 77(m，2H)，l. 51(m，2H) ；HRMS (ESI)m/z calcd. for C25H31Cl4NO6Na 606. 0770, found for [M+Na]+606. 0758.化合物15-1 白色固體(2.05g，27% )。mp. 191-193 °C ; [a ]D2CI = +29.8° (c 0.52，CHCl3) ；1H NMR(400MHz, CDCl3) δ :7. 36 (d，2H，J = 8. 4Hz)，6. 83 (d，2H，J = 8. 4Hz)，
6.02(d，lH，J = 10. 0Hz) ,5. 93 (d, 1H, J = 10. 4Hz)，4. 81 (d，1H，J = 12. 0Hz)，4. 78 (d，
IH,J = 14. 8Hz) ,4. 59 (d, 1H, J = 15. 2Hz)，4. 06 (d，1H，J = 7. 2Hz) ,3. 94 (d, 1H, J =
II.6Hz)，3. 92(m，2H)，3. 79(s，3H)，2. 95 (m, 1H)，2. 87 (m, 1H)，2. 59 (m, 1H)，2. 28 (m, 1H)，
2.03(m，2H)，1. 95 (m, 1H)，1. 76 (m, 2H)，1. 58 (m, 2H)，1. 52(s，3H) ；HRMS (ESI)m/z calcd. for C25H31Cl4N06Na606. 0769，found for [M+Na]+606. 0758.實(shí)施例6化合物14-2的制備 使用同實(shí)施例5相同的操作，不同的是單一的醛12-2用于加成反應(yīng)。二醇14-2 使用乙酸乙酯/正己烷重結(jié)晶，析出消旋體，母液中二醇14-2ee >99.9%。HPLC條件 Chiralpak AD-H column ；Hexane EtOH = 75 25,1. 000mL/min,225nm UV detector ； tE (major) = 9. 85min，tE (minor) = 18. 20min. mp. 171 172 "C ；[α ]D20 = +21. 2 ° (c 0.50，Me0H) ；1H NMR(600MHz，CDCl3) δ :7· 29 (d，2H，J = 6. 6Hz)，6. 84 (d，2H，J = 6. 6Hz)， 5. 84 (m, 1H)，5. 67 (m, 1H)，4. 71 (d, 1H, J = 15. OHz)，4. 51 (d, 1H, J = 15. OHz)，4. 09 (m, 1H)，
3.92 (m, 2H)，3. 79 (s, 3H)，3. 69 (s, 3H)，3. 12 (m, 1H)，2. 98 (m, 1H)，2. 30 (m, 1H)，2. 26 (m, 1H)， 2. 11 (m, 1H)，1. 99 (m, 2H)，1. 92 (m, 1H)，1. 71 (m, 1H)，1. 66 (s, 3H)，1. 48 (m, 1H)，1. 36 (m, 1H)； HRMS (ESI)m/z calcd. for C24H33C1N06466. 1991，found for [M+H]+466. 1995。
實(shí)施例7化合物12-2和13-2的制備 吡啶(10. 5mL, 130. 8mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中降至0°C，分批加入干燥的三 氧化鉻(6. 54g，65. 4mmol)，加完升至室溫，20min 后滴加 lla-2 (4. 20g, 10. 9mmol)的 IOmL 二氯甲烷溶液，反應(yīng)完成后將上層反應(yīng)液倒出，二氯甲烷充分洗滌后濃縮，粗品溶于乙醚后 過(guò)濾濃縮，得到醛12-2和13-2混合物(1. 909g,45% )·實(shí)施例8化合物12-2和13-2的制備 室溫下向11￡1-2(3.858，10讓01)、活化的4人分子篩(5g)、二氯甲烷(50mL)的混 合物中分批加入PCC(12. 93g，60mmol)，反應(yīng)完成后加入乙醚洗滌，抽濾，濃縮柱層析得到醛 12-2 和 13-2 混合物(2. 37g,62% )。實(shí)施例9Salinosporamide A(I)的制備 將二醇14-1(2. lg，3. 60mmol，> 99. 9% ee)溶于乙腈(90mL)中，0°C 下滴加硝 酸鈰銨(5. 92g，10. Smmol)水溶液(23mL)。反應(yīng)完成后加入乙酸乙酯稀釋?zhuān)蔑柡褪雏} 水洗，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后旋除溶劑，柱層析得到脫P(yáng)MB產(chǎn)物14a-l (1. 40g，84 % ) 為白色固體。mp. 186 187 °C ； [ α ]D20 = -42. O ° (c 1. 29，CHCl3) ；1H NMR(400MHz, CDCl3) δ :8.01(s，lH)，6. 15(d，lH，J = 10. 4Hz)，5· 71 (d，1H，J = 10. 4Hz), 5. 46 (brs, 1H)，5. 00 (d, 1H, J = 12. OHz)，4. 69 (d，1H，J = 11. 6Hz)，4. 28 (d, 1H, J = 9. 6Hz)，3. 83 (m, 2H)，2. 95 (m, 1H)，2. 35 (m, 1H)，2. 18 (m, 1H)，2. 03 (m, 2H)，1. 98-1. 89 (m, 2H)，1. 83-1. 70 (m, 2H)，1. 66(s，3H)，1. 57(m，1H) ；HRMS(ESI)m/z calcd. for C17H23Cl4NO5Na 486. 0102, found for [M+Na]+486. 0108.14a-1 (1. 40g, 3. 02mmol)、鋅粉(7. 91g，120. Snmol)和醋酸(30mL)混合攪拌，反應(yīng) 完成后加乙酸乙酯稀釋?zhuān)闉V，殘留物用乙酸乙酯洗滌。濾液依次用水、飽和食鹽水洗滌， 無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后旋除溶劑。粗產(chǎn)物分散于二氯甲烷中(30mL)，然后依次加入吡啶 (3. 8mL)和雙(2-氧代-3-惡唑烷基)次磷酰氯(B0PC1，1. 54g，6. (Mmmol)。反應(yīng)完成后加乙 實(shí)施例IOSalinosporamide A(I)的制備 將二醇14-2(1. 86g，4. Ommo 1, > 99% ee)溶于乙腈(20mL)中，0°C下滴加硝酸鈰 銨(6. 6g，12mmol)水溶液(7mL)。反應(yīng)完成后加入乙酸乙酯稀釋?zhuān)蔑柡褪雏}水洗，無(wú)水 硫酸鈉干燥，過(guò)濾后旋除溶劑，柱層析得到脫P(yáng)MB產(chǎn)物14a-2 (1. 03g, 75% )為白色固體。 mp. 182-183°C ；[α ]D20 = +1. 0° (c 0.50，Me0H) ；1H 匪 R(600MHz，CDCl3) δ :8.42(s，lH)，
6.08 (d, 1H, J = 9. 6Hz)，5. 75 (d, 1H, J = 9. OHz)，5. 63 (s, 1H)，4. 13 (d, 1H, J = 9. 6Hz)， 3. 83 (s，3H)，3. 80 (m, 2H)，2. 90 (m, 1H)，2. 19 (m, 2H)，2. 00 (m, 2H)，1. 92 (m, 2H)，1. 79 (m, 1H)， 1. 72(m，lH)，1.61(m，lH)，1.56(s，3H) ；HRMS (ESI)m/z calcd. for C16H24ClN05Na368. 1235， found for [M+Na]+368. 1239。14a-2(194mg,0. 56mmol)用 Me2AlTeMe (1. 8mL，2. 52mmol，1. 4M 甲苯溶液)處理， 反應(yīng)完后加乙酸乙酯稀釋?zhuān)}酸淬滅，乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水 硫酸鈉干燥，過(guò)濾濃縮所得粗產(chǎn)品分散于二氯甲烷中(4mL)，然后依次加入吡啶(ImL)和 雙(2-氧代-3-惡唑烷基)次磷酰氯(B0PCl，286mg，l. 12mmol)。反應(yīng)完成后加乙酸乙 酯稀釋?zhuān)来斡?. IM鹽酸、飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后旋除溶劑，柱層析得 SalinosporamideA l(137mg,78% )為白色固體。實(shí)施例IlSalinosporamide A(I)的制備
OO
1. Me2AISeMe1 PhMe
2. BOPCI, Py-CH2CI2.
Me )^^ ^ 92%(two steps)
HO I^hJΛ oh
14a_2Salinosporamide A (1)使用同實(shí)施例10相同的操作，不同的是使用Me2AlSeMe水解甲酯。實(shí)施例12Salinosporamide A(I)的制備 使用同實(shí)施例10相同的操作，不同的是使用Me2AlSMe水解甲酯。實(shí)施例13Iso-Salinosporamide A(6-1)的制備 二醇 15-l(292mg，0. 50mmol)、鋅粉(1. 31g,20. Ommol)和醋酸(5mL)混合攪拌， 反應(yīng)完成后加乙酸乙酯稀釋?zhuān)闉V，殘留物用乙酸乙酯洗滌。濾液依次用水、飽和食鹽水洗 滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后旋除溶劑。粗產(chǎn)物分散于二氯甲烷中(5mL)，然后依次加入吡 啶(0. 6mL)和雙(2-氧代-3-惡唑烷基)次磷酰氯(B0PC1，256mg，1. Ommol)。反應(yīng)完成 后加乙酸乙酯稀釋?zhuān)来斡?. IM鹽酸、飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后旋除溶 齊U，柱層析得3-內(nèi)酯63-1(-朋為-呢1^，16911^，78%兩步，96.2%66)為白色固體。使 用乙酸乙酯/正己烷重結(jié)晶，消旋體析出，母液中為高光學(xué)純度的6a-l (158mg, >99.9% ee)。HPLC 條件Chiralpak AD-H column ；Hexane i-PrOH = 85 15，1. OOOmL/min， 225nm UV detector ;tK (major) = 7. 17min, tE (minor) = 14. 78min. mp. 99-101 °C ；[a ]D20 =+158. 6° (c 0.59，CHCl3) ；1H WR(600MHz，CDC13) δ :7. 15 (d，2H，J = 7. 2Hz)，6. 85 (d， 2H, J = 7. 2Hz)，5. 85 (m, 1H)，5. 63 (d, 1H, J = 9. 6Hz)，4. 97 (d, 1H, J = 15. 6Hz)，4. 51 (d, 1H, J=Il. 4Hz)，4. 10 (d, 1H, J = 15. 6Hz)，3. 95 (m，2H)，3. 78(s，3H)，2. 92 (m, 1H)，2. 82 (m, 1H)， 2. 31 (m, 1H)，1. 95 (m, 1H)，1. 86 (m, 3H)，1. 57 (s, 3H)，1. 22 (m, 1H)，1. 00 (m, 1H)，0. 85 (m, 1H)； HRMS (ESI)m/z calcd. for C23H29C1N05434. 1729，found for [M+H]+434. 1724。將β -內(nèi)酉旨 6a_ 1 (85mg，0. 20mmol, > 99. 9% ee)溶于乙腈(0. 65mL)中，滴加硝酸 鈰銨(329mg，0.60mmol)的水溶液(0. 65mL)。反應(yīng)完成后加入乙酸乙酯稀釋?zhuān)蔑柡褪雏} 水洗，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后旋除溶劑，柱層析得到Iso-Salinosporamide A 6-1 (49mg， 78% )為白色固體。mp. 183-185°C ；[α ]D20 = +180. 5° (c 0. 87, CHCl3) ；1H NMR(600MHz, Pyridine-D5) δ 10. 23 (s，1Η)，7· 69 (s，1Η)，5· 97 (d，1Η，J = 10. 2Hz)，5. 84 (d，1H，J =9. 6Hz)，4. 85 (d, 1H, J = 10. 2Hz)，4. 12 (t, 2H, J = 6. 6Hz)，3. 43 (m, 1H)，3. 17 (m, 1H)， 2. 62 (m, 1H)，2. 28 (m, 2H)，1. 86 (s, 3H)，1. 82 (m, 2H)，1. 57 (m, 1H)，1. 48 (m, 1H)，1. 37 (m, 1H)； HRMS (ESI)m/zcalcd. for C15H20ClNO4Na 336. 0973, found for [M+Na]+336. 0979。
權(quán)利要求
一種Salinosporamide A及其類(lèi)似物的不對(duì)稱(chēng)全合成方法，其特征在于它為式5和6所示的結(jié)構(gòu)包括以下步驟通過(guò)化合物7或化合物8與化合物9反應(yīng)得到酰胺11，酰胺11通過(guò)脫保護(hù)、氧化得到醛12和13，再與R3負(fù)離子反應(yīng)生成二醇14和15，二醇14和15分別通過(guò)脫保護(hù)、內(nèi)酯化得到化合物5和6。其中X獨(dú)立地為鹵素、-OC(＝O)RA、-OS(＝O)2RA以及其它羧酸活化基團(tuán)，當(dāng)RA出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為C1-C6取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基、C1-C6取代或非取代的烷氧基；R1獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、C2-C8取代或非取代的烯基、C2-C8取代或非取代的炔基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烷基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烯基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基；R2獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、C2-C8取代或非取代的烯基、C2-C8取代或非取代的炔基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烷基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烯基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基；R3獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、C2-C8取代或非取代的烯基、C2-C8取代或非取代的炔基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烷基、C3-C8取代或非取代的環(huán)烯基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基；R4獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基、-C(＝O)RB，當(dāng)RB出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為C1-C6取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基、C1-C6取代或非取代的烷氧基；R5獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基；R6獨(dú)立地為氫、C1-C8取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基、-Si(RC)3、-C(＝O)RC，當(dāng)RC出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為C1-C6取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的芐基、C1-C6取代或非取代的烷氧基。FSA00000147900700011.tif,FSA00000147900700012.tif
2.按照權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于所述的式9化合物的結(jié)構(gòu)如下所示，構(gòu) 型為R或S: 化合物 9-1 =R5 = CH2CCl3, R6 = TBS ；化合物 9-2 =R5 = Me，R6 = TBS ；化合物 9-3 =R5 = tBu, R6 = TBS ；化合物 9-4 =R5 = Bn, R6 = TBS ；化合物 9-5 =R5 = CH2CCl3, R6 = TBDPS ；化合 物 9-6 =R5 = CH2CCl3, R6 = TMS。
3.按照權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于所述的化合物10和11的制備步驟是 化合物7或化合物8在惰性溶劑中-50°C到100°C范圍內(nèi)堿存在下與光學(xué)活性的化合物9 反應(yīng)生成非對(duì)映異構(gòu)體10和11 ；所說(shuō)的化合物7可以是原位生成的；所說(shuō)的惰性溶劑為二 氯甲烷、1，2_二氯乙烷或氯仿；所說(shuō)的堿為吡啶、4-二甲氨基吡啶(DMAP)或1，4_二氮雜二 環(huán)[2. 2. 2]辛烷(DABCO) 其中X、Rp R2、R4、R5、R6的定義與權(quán)利要求1中的定義相同。
4.按照權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于所述的化合物12和13的制備步驟 化合物11在惰性溶劑中-50°C到100°C范圍內(nèi)脫去R6后得到伯醇化合物11a，然后在惰性 溶劑中-80°C到100°C范圍內(nèi)在氧化劑作用下生成內(nèi)酰胺醛12和13 ；所說(shuō)的惰性溶劑為二 氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲苯或乙腈；所說(shuō)的氧化劑為戴斯_馬丁試劑(Dess-Martin periodinane)、柯林斯試劑(Collins reagent)和吡啶鉻酐鹽酸鹽(PCC) 其中HHR6的定義與權(quán)利要求1中的定義相同。
5.按照權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于化合物14和15的制備步驟醛12和 13在惰性溶劑中-80°C到100°C范圍內(nèi)與R3負(fù)離子反應(yīng)分別生成二醇14和15 ；所說(shuō)的惰性 溶劑為四氫呋喃；所說(shuō)的R3負(fù)離子來(lái)源于有機(jī)鋅試劑、有機(jī)鎂試劑、有機(jī)鋰試劑、有機(jī)銅試 劑、有機(jī)錫試劑、有機(jī)硼試劑、有機(jī)鈀試劑、有機(jī)硅試劑，優(yōu)選為有機(jī)鋅試劑或有機(jī)鎂試劑 其中HHR5的定義與權(quán)利要求1中的定義相同。
6.按照權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于化合物5和6的制備步驟化合物14 和15在惰性溶劑中-80°C到100°C范圍內(nèi)與脫保護(hù)試劑反應(yīng)脫去&、1 5保護(hù)基，然后在惰性 溶劑中-80°C到100°C范圍內(nèi)活化試劑存在下進(jìn)行內(nèi)酯化，分別得到化合物5和6 ； 其中HHR5的定義與權(quán)利要求1中的定義相同。
7.按照權(quán)利要求6所述的合成方法，其特征在于所說(shuō)的惰性溶劑為二氯甲烷、四氫呋 喃、乙酸乙酯、甲苯、乙腈、乙酸或水。所說(shuō)的脫去R5保護(hù)基的脫保護(hù)試劑當(dāng)R5 = CH2CCl3 時(shí)為鋅粉、二碘化釤(SmI2)、鎘粉、硒粉/硼氫化鈉等，其優(yōu)選為鋅粉；當(dāng)R5 = Me時(shí)為氫 氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋇、三氯化硼、三溴化硼、三氯化鋁、二甲基甲碲基鋁 (Me2AlTeMe)、二甲基甲硒基鋁(Me2AlSeMe)、二甲基甲硫基鋁(Me2AlSMe)，其優(yōu)選為二甲基 甲碲基鋁(Me2AlTeMe)、二甲基甲硒基鋁(Me2AlSeMe)、二甲基甲硫基鋁(Me2AlSMe)；當(dāng)R5 = tBu時(shí)其優(yōu)選為三氯化硼；當(dāng)R5 = Bn時(shí)其優(yōu)選為三氯化硼、三氯化鋁。
8.按照權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于X為氯氓為甲基、氯乙基或正己基；R2為氫、甲基、三氟甲基或苯基；R3為2-環(huán)己烯基、異丙基或環(huán)戊基。
9.按照權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于式5結(jié)構(gòu)的化合物 OOO
10.按照權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于式6結(jié)構(gòu)的化合物
全文摘要
本發(fā)明涉及Salinosporamide A及其類(lèi)似物不對(duì)稱(chēng)全合成。本發(fā)明以合適保護(hù)的光學(xué)活性的絲氨酸為原料，反應(yīng)得到多取代的中間體酰胺，然后通過(guò)異構(gòu)化轉(zhuǎn)化、脫保護(hù)、氧化-分子內(nèi)A1dol串聯(lián)反應(yīng)得到環(huán)化產(chǎn)物環(huán)化中間體，再通過(guò)1，2-加成得到二醇以及脫保護(hù)、內(nèi)酯化過(guò)程實(shí)現(xiàn)SalinosporamideA及其類(lèi)似物的全合成。該合成路線(xiàn)原料易得、反應(yīng)步驟少、操作簡(jiǎn)便，適用于大量制備，同時(shí)該路線(xiàn)具有很好的靈活性，可方便地制備不同位置的類(lèi)似物。SalinosporamideA作為高效的蛋白酶體抑制劑已用于癌癥治療的臨床試驗(yàn)，對(duì)Salinosporamide A及其類(lèi)似物高效方便地制備必將有助于其臨床研究以及進(jìn)一步的構(gòu)效關(guān)系研究。
文檔編號(hào)C07D491/107GK101863893SQ20101020396
公開(kāi)日2010年10月20日 申請(qǐng)日期2010年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月21日
發(fā)明者李衛(wèi)東, 白迎軍, 陳莉 申請(qǐng)人:南開(kāi)大學(xué)