專利名稱：：放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑、由其制備的²¹¹At標(biāo)記物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及惡性腫瘤放射治療標(biāo)記物
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別是涉及211At標(biāo)記物及其制備用偶聯(lián)劑技術(shù)。
背景技術(shù)：
：-用放射性核素標(biāo)記偶聯(lián)對腫瘤有高特異性和親和力的載體,如蛋白質(zhì)、單克隆抗體、多肽類配體及一些化合物等，以對腫瘤進(jìn)行體內(nèi)靶向放射治療，被認(rèn)為是很有希望的一種途徑，已日益受到各國重視，并已在臨床上取得相當(dāng)進(jìn)展。選擇優(yōu)良的靶向載體和與之匹配的理想核素，是核素靶向治療研究中的首要問題。而采用適宜的標(biāo)記方法以獲得體內(nèi)外穩(wěn)定并保持載體靶向特性的放射性藥物，則是核素靶向治療研究的基礎(chǔ)和關(guān)鍵。愈來愈多的研究表明，加速器制備的a核素211At是最適宜于靶向內(nèi)放射治療的理想核素之一。211At半衰期7.2小時，平均每衰變一次發(fā)射一個a粒子和6.3個俄歇電子。就放射治療而言，211At是除硼中子俘獲治療(BNCT)外，僅有的高傳能線密度(LET)體系。它的a粒子在組織中射程短(55-8(Hun)，僅相當(dāng)于6-8個細(xì)胞范圍，其98.84KeV/的LET值與內(nèi)放射治療效應(yīng)最佳LET值(100KeV/pm)非常接近，具有極強的細(xì)胞毒性；產(chǎn)生的DNA鏈斷裂是不可修復(fù)的，而且它的輻射毒性幾乎和劑量率、細(xì)胞分裂周期和氧濃度無關(guān)。同時其亞細(xì)胞射程(30nm)的俄歇電子，在細(xì)胞內(nèi)有非常高的LET效應(yīng)，也能打斷DNA鏈，致死癌細(xì)胞。顯然，將^At標(biāo)記偶聯(lián)到理想的靶向載體上，并通過適宜的給藥途徑，使^At特異性地濃聚在癌組織或進(jìn)入癌細(xì)胞，其兩種輻射產(chǎn)生的極強細(xì)胞毒性均能集中殺死癌細(xì)胞，而對周圍正常組織損傷很小，從而達(dá)到降低毒副作用，提高療效的目的，這也正是腫瘤放射治療需要解決的核心問題。這種藥物將對微小癌、微轉(zhuǎn)移癌和散在性癌的治療開辟有效的新途徑。對于^At標(biāo)記蛋白質(zhì)或多肽的方法，國內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量的研究，花費了相當(dāng)?shù)木Α２捎弥苯訕?biāo)記法進(jìn)行放射性砹標(biāo)記蛋白質(zhì)、單克隆抗體及一些生物分子最大的問題在于所獲得的標(biāo)記物在體內(nèi)不穩(wěn)定，具有明顯的脫砹現(xiàn)象。為了提高標(biāo)記物的體內(nèi)穩(wěn)定性，以一系列的芳環(huán)化合物，如苯環(huán)或吡啶環(huán)等為雙功能偶聯(lián)劑的間接標(biāo)記法應(yīng)運而生，并取得了一些可喜的進(jìn)展。不過，研究也表明，以芳環(huán)化合物為中間體所獲得的標(biāo)記物雖然比直接標(biāo)記法獲得的標(biāo)記物在體內(nèi)具有較高的穩(wěn)定性，但依然存在不同程度的脫砹現(xiàn)象。即使對芳環(huán)進(jìn)行一些基團(tuán)修飾，也不能使標(biāo)記物的穩(wěn)定性有顯著提高。鑒于硼-鹵鍵比碳-鹵鍵具有更高的鍵能，鹵素原子與硼原子結(jié)合時具有較高的穩(wěn)定性，近期一些研究開始由芳環(huán)化合物轉(zhuǎn)向硼烷及碳硼垸系列的一些衍生物。目前，用于硼中子俘獲治療及作為側(cè)基用于放射性砹標(biāo)記生物分子的富硼化合物主要包括c/(WO-B12H122-、c/(WO-C2B,oH,2和"Wo-C2B9Hu-及其異構(gòu)體。由于在硼垸上引入碳原子更易于砹標(biāo)記，并方便對其進(jìn)行基團(tuán)修飾以獲得能夠與蛋白質(zhì)偶聯(lián)的碳硼垸衍生物，且巢狀碳硼烷具有良好的親水性，有利于標(biāo)記物的動物實驗研究，許多關(guān)于硼垸的研究就涉及到巢狀碳硼烷。Hawthorne等研究了硼垸的苯異硫氰衍生物，并將其用于生長因子的標(biāo)記，并認(rèn)為對巢狀碳硼烷結(jié)構(gòu)做一些適當(dāng)修飾，可能獲得用于放射性核素標(biāo)記蛋白質(zhì)的雙功能偶聯(lián)劑。Wilbur小組研究了巢狀碳硼垸作為親水性側(cè)基用于放射性砹標(biāo)記生物素及其衍生物，發(fā)現(xiàn)它們在體內(nèi)的穩(wěn)定性高于通過C-At健制得的標(biāo)記物。目前，擬用于放射性砹標(biāo)記蛋白質(zhì)或單克隆抗體(Mabs)的巢狀碳硼垸中間體主要為硼烷的異硫氰衍生物或苯異硫氰衍生物。硼烷異硫氰衍生物可通過以2,3,5,6-四氟苯酚3-(巢狀碳硼垸)丙酸酯(TCP)為母體經(jīng)基團(tuán)修飾獲得，但反應(yīng)復(fù)雜、產(chǎn)率低且難于分離。
發(fā)明內(nèi)容鑒于目前擬用于放射性砹標(biāo)記蛋白質(zhì)、單克隆抗體(Mabs)和多肽的巢狀碳硼垸中間體主要為硼烷的異硫氰衍生物或苯異硫氰衍生物，硼垸的異硫氰衍生物或苯異硫氰6衍生物通過2,3,5，6-四氟苯酚3-(巢狀碳硼垸)丙酸酯(TCP)為母體經(jīng)基團(tuán)修飾獲得，其反應(yīng)復(fù)雜、產(chǎn)率低且難于分離的現(xiàn)狀，本發(fā)明的目的是提供一種新的放射治療標(biāo)記物技術(shù),直接利用^At通過2，3,5,6-四氟苯酚3-(巢狀碳硼烷)丙酸酯(TCP)標(biāo)記偶聯(lián)蛋白質(zhì)，或單克隆抗體或多肽，以避免硼烷異硫氰衍生物或苯異硫氰衍生物的復(fù)雜反應(yīng)和分離，簡化操作程序和提高產(chǎn)率。本發(fā)明的內(nèi)容包括，提供制備放射治療標(biāo)記物的偶聯(lián)劑和由該偶聯(lián)劑制備的放射治療標(biāo)記物，以及偶聯(lián)劑和標(biāo)記物的制備方法。本發(fā)明提供的放射治療標(biāo)記物用偶聯(lián)劑，其分子結(jié)構(gòu)為其中參代表C或C-H,e代表負(fù)離子。上述制備放射治療標(biāo)記物用的偶聯(lián)劑，其制備方法主要包括以下步驟(1)1質(zhì)量份的4-戊炔酸用50-55質(zhì)量份的無水四氫呋喃溶解后加入1.2—1.5質(zhì)量份的二環(huán)己基碳二亞胺和1.2—1.5質(zhì)量份的2，3,5,6-四氟苯酚，于5—3(TC攪拌反應(yīng)12—15h加入0.1—0.2份冰醋酸，繼續(xù)攪拌反應(yīng)l一2h分離除去沉淀；(2)分離所得液相經(jīng)減壓蒸餾，所得產(chǎn)物用5865質(zhì)量份的正己烷溶解，將不溶物分離除去，所得液相減壓蒸餾去除溶劑后溶于15~25質(zhì)量份的乙酸乙酯質(zhì)量濃度為4~5%的正己烷乙酸乙酯溶液中，用15-20質(zhì)量份的飽和碳酸氫鈉溶液洗滌除去醋酸，分離所得有機相再用無水硫酸鎂干燥12—15h，再分離所得液相經(jīng)減壓蒸餾除去溶劑，干燥5—8h，得到所需初級中間產(chǎn)物；(3)將1質(zhì)量份的癸硼垸溶于18~22份的無水乙氰中，加熱回流反應(yīng)30—60min后加入1.(M.4質(zhì)量份的步驟(2)所得的初級中間產(chǎn)物，攪拌反應(yīng)25—30h，停止加熱，待反應(yīng)混合物降至5—3(TC加入1-1.2質(zhì)量份的硅膠并繼續(xù)反應(yīng)l一2h，即得到閉環(huán)狀7(4)將所得到的1質(zhì)量份的閉環(huán)狀碳硼垸化合物與2-2.5質(zhì)量份的四氫吡咯于5一30。C下反應(yīng)30—60min，即得到可用作制備放射治療標(biāo)記物的偶聯(lián)劑巢狀碳硼垸化合物(TCP)。為了提高作為偶聯(lián)劑的TCP的產(chǎn)率，取得更好的效果，在上述放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑的制備方法中，本發(fā)明還可進(jìn)一步采取以下技術(shù)措施將步驟(1)分離得到的沉淀用20-25質(zhì)量份的無水THF洗滌，洗滌后的洗滌液加入到該沉淀分離過程的分離液中。將步驟(2)分離得到的不溶沉淀用10-15質(zhì)量份的正己垸洗滌沉淀，洗滌后的洗滌液加入到該沉淀分離過程的分離液中。閉環(huán)狀碳硼烷化合物與四氫吡咯反應(yīng)得到的偶聯(lián)劑在165—175'C下進(jìn)行升華處理。所說的液相減壓蒸餾在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行完成。由上述放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑所制備的放射治療標(biāo)記物，其分子結(jié)構(gòu)為其中X可以是蛋白質(zhì)、單克隆抗體或多肽等。制備上述放射治療標(biāo)記物的方法，主要包括以下步驟(1)用1質(zhì)量份的偶聯(lián)劑巢狀碳硼垸化合物TCP溶于10-15質(zhì)量份的甲醇溶液中，然后加入0.05-0.15質(zhì)量份的74MBq的Na211At、0.05~0.15質(zhì)量份的醋酸和0.15~0.25質(zhì)量份的濃度為13.0~13.6mg/mL氯代琥珀酰亞胺的甲醇溶液，于5—3(TC反應(yīng)2—5min，用0.2~0.6質(zhì)量份的濃度為35~45mg/mL的偏重亞硫酸鈉溶液終止反應(yīng)；(2)步驟(1)所得到的反應(yīng)混合溶液用N2吹干；(3)經(jīng)步驟(2)吹干的反應(yīng)產(chǎn)物加入1.5.25質(zhì)量份濃度為15~25mg/mL的靶向物X硼酸溶液，于5—30。C反應(yīng)30—60min，采用SephadexG-50柱對偶聯(lián)混合物進(jìn)行分離，即得到所要制備的放射治療標(biāo)記物。在上述放射治療標(biāo)記物的制備方法中，所說的靶向物X可以是蛋白質(zhì)、單克隆抗體或多肽等;所說的靶向物X硼酸溶液是由靶向物X溶于pH為8.8-9.2的0.1-0.2mol/L硼酸緩沖溶液所形成的溶液。放射治療標(biāo)記物的制備，除了上述以偶聯(lián)劑巢狀碳硼垸化合物TCP為原料進(jìn)行制備外，還可以采取將上述偶聯(lián)劑巢狀碳硼烷化合物TCP的制備與放射治療標(biāo)記物的制備合二為一，即緊接著上述偶聯(lián)劑巢狀碳硼垸化合物TCP的制備過程進(jìn)行標(biāo)記物的制備。當(dāng)巢狀碳硼烷化合物TCP不能從市場上購買取得，通常是采取后一種方法制備本發(fā)明提供的放射治療標(biāo)記物。本發(fā)明在合成了偶聯(lián)劑2,3，5,6-四氟苯酚3-(巢狀碳硼烷)丙酸酯(TCP)后，以其作為中間體研究了^At標(biāo)記偶聯(lián)蛋白質(zhì)、單克隆抗體或多肽的標(biāo)記偶聯(lián)條件，在此基礎(chǔ)上對標(biāo)記物^At-TCP-BSA的體內(nèi)、外穩(wěn)定性進(jìn)行了評估，并將其與游離^At和芳環(huán)化合物為中間體所獲得的標(biāo)記物^At-ATE-BSA(ATE為3-正丁基錫-N-琥珀酰亞胺苯甲酸脂)在體內(nèi)、外的穩(wěn)定性進(jìn)行了比較。結(jié)果表明，^At-TCP-BSA的標(biāo)記率達(dá)60M,放化純度大于98%，室溫下放置24h,放化純度無明顯變化。與游離211At和"At-ATE-BSA相比，標(biāo)記物^At-TCP-BSA在體內(nèi)、外均具有較高的穩(wěn)定性，表明TCP是放射性砹標(biāo)記蛋白質(zhì)、單克隆抗體或多肽的良好的中間體，這為下一步21IAt的腫瘤靶向放射治療研究奠定了基礎(chǔ)。本發(fā)明的偶聯(lián)劑和由其制備的放射治療標(biāo)記物的合成工藝，與現(xiàn)有技術(shù)的偶聯(lián)劑和放射治療標(biāo)記物合成工藝相比，本發(fā)明的合成工藝路線，反應(yīng)步驟少，反應(yīng)較為簡單、易操作，產(chǎn)率較高，且易于分離，實現(xiàn)了^At通過TCP直接標(biāo)記偶聯(lián)蛋白質(zhì)、單克隆抗體或多肽。附圖1是已有技術(shù)的一種標(biāo)記物合成工藝路線示意圖。附圖2是已有技術(shù)的另一種標(biāo)記物合成工藝路線示意圖。附圖3是本發(fā)明提供的偶聯(lián)劑TCP的合成路線示意圖。附圖4是本發(fā)明提供的以TCP為偶聯(lián)劑^At標(biāo)記靶向物的路線示意圖。具體實施例方式下面通過實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。在下面實施例中，所提到的組分份數(shù)如無特別說明，均為質(zhì)量份數(shù)。(l)TCP的合成實施例TCP的合成路線如附圖3所示。稱取4-戊炔酸2.0g(20.4mmol)于150mL的三頸燒瓶，用60mL的無水THF溶解，隨后緊接著往燒瓶中加入6.45g(31mmol)DCC和6.83g(41mmol)TFP，混合物立即變淺黃色并產(chǎn)生白色沉淀?；旌衔镌谑覝叵聰嚢璺磻?yīng)過夜后加入0.1mL冰醋酸，繼續(xù)攪拌lh。過濾，用無水THF洗滌沉淀，濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾，所得旋干物用80mL正己垸溶解，將不溶物過濾除去并用lOmL正己烷洗滌沉淀，濾液經(jīng)旋干溶劑后溶于24mL正己烷/1mL乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌(5x20mL)。有機相經(jīng)無水硫酸鎂干燥過夜，過濾，經(jīng)減壓蒸餾，真空干燥5h，得2.9g白色固體2，產(chǎn)率為58.0%。測其熔點(未矯正)49.4-49.9°C(文獻(xiàn)值為47-49°C)。在50mL的三頸燒瓶中，稱取1.25g(9.75mmol)的癸硼垸溶于20mL的無水乙氰中，回流反應(yīng)30min后加入2.5g(10.65mmol)上述產(chǎn)物2，混合物回流攪拌反應(yīng)25h。停止加熱，待反應(yīng)混合物降至室溫后加入0.5g硅膠并繼續(xù)反應(yīng)lh。過濾，減壓蒸餾，真空干燥過夜，得含3的初產(chǎn)物。初產(chǎn)物經(jīng)自行設(shè)計的簡易升華裝置在170'C下升華得到380mg白色固體3，產(chǎn)率為25%。測其熔點(未矯正)132.1-132.6°C(文獻(xiàn)值為135-136°C)?；衔?的^NMR、MS與其結(jié)構(gòu)相符。&NMR:(CDC13，400MHz)S:1.23~2.25(m,10H);2.72(t,2H);2.93(t,2H);7.02~7.05(m，1H),MS(ESI).:(M+C1)-，399。閉狀碳硼垸化合物3與四氫吡咯在室溫下反應(yīng)30min,每個碳硼環(huán)上脫掉一個硼原子，就將其轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的巢狀碳硼垸化合物TCP，一種黃色高度粘稠狀物。開環(huán)所得巢狀碳硼烷化合物未經(jīng)進(jìn)一步分離直接進(jìn)入下一步標(biāo)記實驗。TCP的合成過程中，每一步反應(yīng)都經(jīng)HPLC進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控?；衔?，3及TCP在HPLC上的保留時間分別為4.0min，7.6min，2.1min。(2)靶向物的^At標(biāo)記實施例211At標(biāo)記TCP的流程如附圖4所示.。在含有0.5mgTCP(四氫吡咯鹽)的甲醇溶液的微型反應(yīng)管中加入4pL(74MBq)211At、3pL醋酸和13.3mg/mLNCS的甲醇溶液5pL，室溫下反應(yīng)2min后，用15^1(40mg/mL)的偏重亞硫酸鈉終止反應(yīng)。反應(yīng)混合溶液在N2下吹至近干(作TLC分析，TLC條件H20:CH3CN:MeOH:HOAc，60:30:10:2)，備用。在上述N2吹至近干的反應(yīng)管中加入50pL(20mg/mL)BSA(0.1mol/L硼酸緩沖溶液，pH=9.0)，室溫下反應(yīng)30min。采用SephadexG-50柱(15cmxl0mm)進(jìn)行偶聯(lián)物211At-TCP-BSA的分離，以pl^7.0，O.lmol/LPBS作淋洗液，收集淋洗液，lmL/管，測定每管的放射性，繪出淋洗曲線。用TLC分析計算標(biāo)記率和標(biāo)記產(chǎn)物的放化純度。淋洗液經(jīng)HPLC分析(帶放射性檢測器)。HPLC分析條件反相色譜柱Dikma,diamonsilTM-C18，(5Hm,250mmx4.6mm)，流動相O.lmol/LPBSpH=7.0的磷酸緩沖溶液，紫外檢測波長=278nm，流速=1ml/min，t=20°C。TLC條件H20:CH3CN:MeOH:HOAc，60:30:10:2。其標(biāo)記率為60%,放化純度達(dá)98%，含標(biāo)記物211At-TCP-BSA的PBS淋洗液可直接用于體內(nèi)動物實驗。BSA通過ATE的^At標(biāo)記與上述標(biāo)記方法相同，分離條件及分析方法如211At-TCP-BSA。(3)標(biāo)記偶聯(lián)物211At-TCP-BSA、2UAt-ATE-BSA的體外穩(wěn)定性評價將含有211At-TCP-BSA和211At-ATE-BSA的O.lmol/LPBS淋洗液室溫放置3天，11分別于不同時間取樣，以H20:CH3CN:MeOH:HOAc,60:30:10:2為展開劑，用TLC分析211At-TCP-BSA和211At-ATE-BSA的放化純度。211At-TCP-BSA在室溫下放置24h后，放化純度無明顯變化，仍然在97%以上，表明以TCP為雙功能偶聯(lián)劑的標(biāo)記物具有較高的體外穩(wěn)定性；211At-ATE-BSA在室溫下放置24h后，放化純度略有降低，從96%降為93%。(4)標(biāo)記物在小鼠體內(nèi)分布實驗將28只小鼠(雌雄各半)隨機分為7組，經(jīng)腹腔注射0.1mL(20kBq)標(biāo)記物^At-TCP-BSA，注射后分別于0.5、1、4、8、12、24、48h處死小鼠。取血、心臟、肝、脾、腎、肺、胃、小腸、肌肉、甲狀腺(含頸部)等組織器官，稱重并測其放射性計數(shù)，計算組織攝取率。放射性攝取率用0.1mL^At-TCP-BSA的放射性計數(shù)作為標(biāo)準(zhǔn)，以每克組織攝取放射性占總放射量的百分比n/。ID/g表示(甲狀腺的攝取率以。/。ID表示)。用游離2UAt和211At-ATE-BSA分別代替211At-TCP-BSA進(jìn)行小鼠體內(nèi)分布實驗可獲得游離211At和211At-ATE-BSA在鼠體內(nèi)的分布實驗結(jié)果。211At-TCP-BSA、"At-ATE-BSA和游離"At的小鼠體內(nèi)分布結(jié)果列于表l。由于游離^At—般主要分布在胃、肺、脾及甲狀腺中，特別是甲狀腺是游離^At的特征指標(biāo)，因此，觀察^At-TCP-BSA和^At-ATE-BSA在胃、肺、脾特別是甲狀腺中的放射性，就能判斷標(biāo)記物的體內(nèi)穩(wěn)定性。從表1可以看出，"At-TCP-BSA和^At-ATE-BSA在注入小鼠體內(nèi)后，在胃、肺、脾中的放射性在所考察的時間內(nèi)都低于游離211八1的；在甲狀腺中的放射性也都低于游離211At的，說明21IAt-TCP-BSA和211At-ATE-BSA在小鼠體內(nèi)具有較高的穩(wěn)定性。從表1還發(fā)現(xiàn)，211At-TCP-BSA與211At-ATE-BSA兩者相比，"At-TCP-BSA在胃、肺、脾特別是甲狀腺中的放射性攝取都低于"At-ATE-BSA的，表明211At-TCP-BSA的體內(nèi)穩(wěn)定性更勝于2UAt-ATE-BSA的穩(wěn)定性。12表12llAt-TCP-BSA、2UAt-ATE-BSA和游離211At的小鼠體內(nèi)分布實驗(X士S.D.%，n=4)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>權(quán)利要求1、一種放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑，其特征在于偶聯(lián)劑的分子結(jié)構(gòu)為其中●代表C或C-H，θ代表負(fù)離子。2、權(quán)利要求1所述放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑的制備方法，其特征包括以下步驟(1)1質(zhì)量份的4-戊炔酸用50~55質(zhì)量份的無水四氫呋喃溶解后加入1.2—1.5質(zhì)量份的二環(huán)己基碳二亞胺和1.2—1.5質(zhì)量份的2,3,5，6-四氟苯酚，于5—30'C攪拌反應(yīng)12—15h加入0.1—0.2份冰醋酸，繼續(xù)攪拌反應(yīng)l一2h分離除去沉淀；(2)分離所得液相經(jīng)減壓蒸餾，所得產(chǎn)物用5865質(zhì)量份的正己烷溶解，將不溶物分離除去，所得液相減壓蒸餾去除溶劑后溶于15~25質(zhì)量份的乙酸乙酯質(zhì)量濃度為4~5%的正己垸乙酸乙酯混合溶液中，用15-20質(zhì)量份的飽和碳酸氫鈉溶液洗滌除去醋酸，分離所得有機相再用無水硫酸鎂干燥12—15h，再分離所得液相經(jīng)減壓蒸餾除去溶劑，干燥5—8h，得到所需初級中間產(chǎn)物；(3)將1質(zhì)量份的癸硼烷溶于18~22份的無水乙氰中，加熱回流反應(yīng)30—60min后加入1.01.4質(zhì)量份的步驟(2)所得的初級中間產(chǎn)物，攪拌反應(yīng)25—30h，停止加熱，待反應(yīng)混合物降至5—3(TC加入1-1.2質(zhì)量份的硅膠并繼續(xù)反應(yīng)l一2h，即得到閉環(huán)狀碳硼烷化合物3;(4)將所得到的1質(zhì)量份的閉環(huán)狀碳硼烷化合物與2-2.5質(zhì)量份的四氫吡咯于5一3(TC下反應(yīng)30—60min，即得到可用作制備放射治療標(biāo)記物的偶聯(lián)劑2，3，5，6-四氟苯酚3-丙酸酯。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑的制備方法，其特征在于步驟(1)分離得到的沉淀用20-25質(zhì)量份的無水THF洗滌，洗滌液加入到該沉淀分離過程的分離液中。4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑的制備方法，其特征在于步驟(2)分離得到的不溶沉淀用10-15質(zhì)量份的正己垸洗滌沉淀，洗滌液加入到該沉淀分離過程的分離液中。5、根據(jù)權(quán)利要求2所述的放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑的制備方法，其特征在于閉環(huán)狀碳硼垸化合物與四氫吡咯反應(yīng)得到的偶聯(lián)劑在165—175C下進(jìn)行升華處理。6、根據(jù)權(quán)利要求2所述的放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑的制備方法，其特征在于所說的液相減壓蒸餾在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行完成。7、由權(quán)利要求1所述放射治療標(biāo)記物制備用偶聯(lián)劑所制備的放射治療標(biāo)記物，其特征在于放射治療標(biāo)記物的分子結(jié)構(gòu)為其中X代表蛋白質(zhì)、單克隆抗體或多肽等。8、權(quán)利要求7所述放射治療標(biāo)記物的制備方法，其特征包括以下步驟(1)1質(zhì)量份的偶聯(lián)劑2，3,5,6-四氟苯酚3-丙酸酯溶于10-15質(zhì)量份的甲醇溶液中，然后加入0.05~0.15質(zhì)量份的74MBq的Na211At、0.05~0.15質(zhì)量份的醋酸和0.15-0.25質(zhì)量份的濃度為13.0~13.6mg/mL氯代琥珀酰亞胺的甲醇溶液，于5—3(TC反應(yīng)2—5min,用0.2~0.6質(zhì)量份的濃度為35~45mg/mL的偏重亞硫酸鈉溶液終止反應(yīng)；(2)步驟(1)所得到的反應(yīng)混合溶液用N2吹干；(3)經(jīng)步驟(2)吹干的反應(yīng)產(chǎn)物加入1.5.25質(zhì)量份濃度為1525mg/mL的靶向物X硼酸溶液，于5—30'C反應(yīng)30"60min，采用SephadexTMG-50柱對偶聯(lián)混合物進(jìn)行分離，即得到所要制備的放射治療標(biāo)記物。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的放射治療標(biāo)記物的制備方法，其特征在于所說的靶向物X為蛋白質(zhì)、單克隆抗體或多肽等。10、根據(jù)權(quán)利要求8所述放射治療標(biāo)記物的制備方法，其特征在于所說的靶向物X硼酸溶液是由靶向物X溶于pH為8.8-9.2的0.1-0.2mol/L硼酸緩沖溶液所形成的溶液。全文摘要本發(fā)明公開了一種可用作制備放射治療標(biāo)記物的偶聯(lián)劑2，3，5，6-四氟苯酚3-丙酸酯TCP，由偶聯(lián)劑2，3，5，6-四氟苯酚3-丙酸酯TCP制備的放射治療標(biāo)記物²¹¹At-TCP-BSA，以及偶聯(lián)劑TCP和標(biāo)記物²¹¹At-TCP-BSA的制備方法。采用本發(fā)明制備得到的標(biāo)記物²¹¹At-TCP-BSA用于放射治療，標(biāo)記率達(dá)60％，放化純度大于98％，室溫下放置24h，放化純度無明顯變化。與游離²¹¹At和²¹¹At-ATE-BSA相比(ATE為3-正丁基錫N-琥珀酰亞胺苯甲酸脂)，標(biāo)記物²¹¹At-TCP-BSA在體內(nèi)、外均具有較高的穩(wěn)定性，表明TCP是放射性砹標(biāo)記蛋白質(zhì)的良好的中間體，為下一步²¹¹At的腫瘤靶向放射治療研究奠定了基礎(chǔ)。文檔編號C07F5/00GK101486726SQ20091005844公開日2009年7月22日申請日期2009年2月27日優(yōu)先權(quán)日2009年2月27日發(fā)明者寧劉,廖家莉,楊遠(yuǎn)友申請人:四川大學(xué)