專利名稱：從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從植物中提取有效成份的方法，具體涉及從銀杏葉中提取 分離白果內(nèi)酯的方法。
(二)
背景技術(shù)：
銀杏樹又稱白果樹，屬裸子植物，是銀杏科銀杏屬的唯一生存的老樹 種之一，其葉和果具有重要的藥用價值。目前研究最多的是銀杏葉提取物， 它包括黃酮類化合物和銀杏內(nèi)酯類化合物。黃酮類化合物約有38種，總 含量為22-27%;銀杏內(nèi)酯類化合物包括銀杏內(nèi)酯和白果內(nèi)酯，總含量為 5.4-6.6%。銀杏內(nèi)酯主要對治療心腦血管疾病具有顯著療效；而白果內(nèi)酯 對治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病則藥效獨特，為了提高其藥用治療效果，有時必須將 各單體分離純化；由于白果內(nèi)酯是倍半萜物質(zhì)，而銀杏內(nèi)酯是二萜類物質(zhì)， 它們的分子結(jié)構(gòu)較為相似，極性差異也很小，致使銀杏內(nèi)酯類化合物中的 各單體的提取與分離比較困難，只有少許企業(yè)將它們單獨分離出來，如申 請?zhí)枮?00410061284. 1,名稱為《銀杏葉中銀杏內(nèi)酯B和白果內(nèi)酯的提取 方法》的中國發(fā)明專利，公開了一種銀杏葉中銀杏內(nèi)酯B和白果內(nèi)酯的提 取方法，先將銀杏葉烘干、去雜、粉碎，用乙醇水溶液提取，上吸附柱去 雜質(zhì)，然后用乙酸乙酯萃取出銀杏內(nèi)酯，上氧化鋁柱純化，分步結(jié)晶及重 結(jié)晶，獲得較純的銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B，再將結(jié)晶后的母液加入l-2 倍水后在75-8(TC回收乙醇，冷卻后析出的結(jié)晶為銀杏內(nèi)酯C，分離出結(jié) 晶后的母液減壓蒸干后得到白果內(nèi)酯，其純度可達(dá)95%。但該發(fā)明得到白 果內(nèi)酯的工藝較復(fù)雜。
(三)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明將公開一種提取所得率高、所得各單體純度高的從銀杏葉中提 取分離白果內(nèi)酯單體的方法。
本發(fā)明從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯單體的方法，其步驟如下
l)取銀杏葉，用由高到低不同濃度的乙醇進行提取，合并提取液，回 收乙醇，得到濃縮后的提取液；
稱取一定量的銀杏葉，可先用體積濃度為60-80%的乙醇在50-70'C時 對銀杏葉提取l-3個小時，其中，銀杏葉與乙醇的配比按銀杏葉的重量 乙醇的體積=1: 8-10;將銀杏葉分離出來，再用體積濃度為30-55%的乙醇 在50-7(TC時對銀杏葉提取1-3個小時，其中，銀杏葉與乙醇的配比按銀
杏葉的重量乙醇的體積=1: 6-8;再將銀杏葉分離出來，用體積濃度為10-25%的乙醇在50-70"時對銀杏葉提取l-3個小時，其中，銀杏葉與乙
醇的配比按銀杏葉的重量乙醇的體積=1: 5-7;合并提取液，回收乙醇，將提取液濃縮至銀杏葉重量的8-10倍體積；
2) 向濃縮后的提取液中加入乙酸乙酯萃取，回收有機相后濃縮至浸
膏；
可向濃縮液中加入等體積的乙酸乙酯萃取， 一般來說，萃取3次所達(dá)到的效果較好；
3) 將步驟2)所得浸膏稀釋后上選擇性極性無孔吸附樹脂柱，用乙醇洗脫，所得洗脫液回收乙醇后，再用乙醇結(jié)晶得到銀杏內(nèi)酯類化合物；
所述選擇性極性無孔吸附樹脂柱的型號可為ADS-15,或ADS-17，或ADS-F8;將步驟2)所得浸膏用50-200倍于其重量的水稀釋后上柱，可先用水洗，直至流出液無色；然后再用體積濃度為50-70%的乙醇洗脫，所述洗脫劑的體積用量可為上述浸膏重量的30-60倍；將收集得到的洗脫液回收乙醇，濃縮至浸膏，再用體積濃度為50-80%的乙醇為溶劑結(jié)晶，所得結(jié)晶即為銀杏內(nèi)酯類化合物；
4) 將銀杏內(nèi)酯類化合物結(jié)晶上硅膠柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液洗脫，收集洗脫液，得到富集白果內(nèi)酯的洗脫液；
所述正己垸和乙酸乙酯的混合液中正己垸和乙酸乙酯的體積比最好為9: 1-2: 8;在洗脫的過程中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，待
溶劑峰出完后的第二個峰處開始收集洗脫液，得到富集白果內(nèi)酯的洗脫液；
5) 回收洗脫液中的溶劑，再用乙醇結(jié)晶，得到白果內(nèi)酯?；厥障疵撘褐械娜軇儆皿w積濃度為20-40%的乙醇結(jié)晶，所得結(jié)晶
即為白果內(nèi)酯單體。本發(fā)明的優(yōu)點
本發(fā)明采用由高到低不同濃度的乙醇對銀杏葉進行提取，使銀杏內(nèi)酯類化合物的提取率提高了 10%以上，特別是白果內(nèi)酯的提取率較現(xiàn)有技術(shù)提高了 15%;本發(fā)明中還采用了特殊的選擇性極性無孔吸附樹脂進行除雜，可除掉大部分影響硅膠柱分離的雜質(zhì)，實現(xiàn)了一次上柱即可得到白果內(nèi)酯單體，且其純度達(dá)到99%以上；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的方法工藝簡單、生產(chǎn)成本低，所得單體純度高，更易于產(chǎn)業(yè)化的生產(chǎn)。
具體實施例方式實施例1
l)取10千克銀杏葉，用100升體積濃度為80%的乙醇在5CTC時對銀杏葉提取1小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；再用60升體積濃度為55%的乙醇在7(TC時對銀杏葉提取1小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；再用50升體積濃度為25%的乙醇在50。C時對銀杏葉提取1小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；合并三次提取所得的提取液，回收乙醇，將提取液濃縮至100升濃縮液；
2) 向濃縮液中加入100升乙酸乙酯萃取3次，合并萃取分離出的有機
相，回收有機相后濃縮得到500克浸膏；
3) 將步驟2)中所得浸膏加50倍體積水稀釋后上ADS-15柱，先用水洗，直至流出液無色，再用15升體積濃度為50%的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮至浸膏，再用體積濃度為50%的乙醇結(jié)晶，得到70克銀杏內(nèi)酯類化合物晶體；
4) 將銀杏內(nèi)酯類化合物結(jié)晶上硅膠柱，用正己垸和乙酸乙酯的混合液
進行梯度洗脫，其中，正己烷和乙酸乙酯的體積比為9: 1-2: 8;在洗脫
過程中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，待溶劑峰出完后的第二個峰
處開始收集洗脫液，得到富集白果內(nèi)酯的洗脫液；
5) 回收洗脫液中的溶劑，然后用體積濃度為20%的乙醇對白果內(nèi)酯洗脫液進行結(jié)晶，得到12.01克的白果內(nèi)酯單體。
實施例2
1) 取50千克銀杏葉，用400升體積濃度為60%的乙醇在70'C時對銀杏葉提取2小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；再用400升體積濃度為30%的乙醇在70。C時對銀杏葉提取3小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；再用300升體積濃度為10%的乙醇在7CTC時對銀杏葉提取3小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；合并三次提取所得的提取液，回收乙醇，將提取液濃縮至500升濃縮液；
2) 向濃縮液中加入500升乙酸乙酯萃取3次，合并萃取分離出的有機相，回收有機相后濃縮得到1. 5千克浸膏；
3) 將步驟2)中所得浸膏加200倍體積水稀釋后上ADS-17柱，先用水洗，直至流出液無色，再用60升體積濃度為70%的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮至浸膏，再用體積濃度為70%的乙醇結(jié)晶，得到233克銀杏內(nèi)酯類化合物晶體；
4) 將銀杏內(nèi)酯類化合物結(jié)晶上硅膠柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液
進行梯度洗脫，其中，正己垸和乙酸乙酯的體積比為9: 1-2: 8;在洗脫
過程中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，待溶劑峰出完后的第二個峰處開始收集洗脫液，得到富集白果內(nèi)酯的洗脫液；
5) 回收洗脫液中的溶劑，然后用體積濃度為30%的乙醇對白果內(nèi)酯洗脫液進行結(jié)晶，得到5.17克的白果內(nèi)酯單體。
實施例3
l)取40千克銀杏葉，用280升體積濃度為70%的乙醇在70'C時對銀杏葉提取1小時，用200目的濾布將鋃杏葉分離出來；再用280升體積濃度為50%的乙醇在6(TC時對銀杏葉提取2小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；再用280升體積濃度為20%的乙醇在70"C時對銀杏葉提取2小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；合并三次提取所得的提取液，回收乙醇，將提取液濃縮至400升濃縮液；
2) 向濃縮液中加入400升乙酸乙酯萃取3次，合并萃取分離出的有機相，回收有機相后濃縮得到1. 2千克浸膏；
3) 將步驟2)中所得浸膏加100倍體積水稀釋后上ADS-F8柱，先用水洗，直至流出液無色，再用70升體積濃度為60%的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮至浸膏，再用體積濃度為80%的乙醇結(jié)晶，得到225克銀杏內(nèi)酯類化合物晶體；
4) 將銀杏內(nèi)酯類化合物結(jié)晶上硅膠柱，用正己垸和乙酸乙酯的混合液進行梯度洗脫，其中，正己烷和乙酸乙酯的體積比為9: 1-2: 8;在洗脫過程中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，待溶劑峰出完后的第二個峰處開始收集洗脫液，得到富集白果內(nèi)酯的洗脫液；
5) 回收洗脫液中的溶劑，然后用體積濃度為25%的乙醇對白果內(nèi)酯洗脫液進行結(jié)晶，得44.51克的白果內(nèi)酯單體。
權(quán)利要求
1、從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法，其步驟如下1)取銀杏葉，用由高到低不同濃度的乙醇進行提取，合并提取液，回收乙醇，得到濃縮后的提取液；2)向濃縮后的提取液中加入乙酸乙酯萃取，回收有機相后濃縮至浸膏；3)將步驟2)所得浸膏稀釋后上選擇性極性無孔吸附樹脂柱，用乙醇洗脫，所得洗脫液回收乙醇后，再用乙醇結(jié)晶得到銀杏內(nèi)酯類化合物；4)將銀杏內(nèi)酯類化合物結(jié)晶上硅膠柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液洗脫，收集洗脫液，得到富集白果內(nèi)酯的洗脫液；5)回收洗脫液中的溶劑，再用乙醇結(jié)晶，得到白果內(nèi)酯。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法，其 特征在于步驟1)中，先用體積濃度為60-80%的乙醇對銀杏葉進行提??； 然后用體積濃度為30-55%的乙醇對銀杏葉進行提??；再用體積濃度為 10-25%的乙醇對銀杏葉進行提取。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法， 其特征在于步驟1)中，所述提取的溫度為50-7(TC。
4、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法，其特征在于步驟1)中，第一次提取時銀杏葉與乙醇的配比按銀杏葉的重量 乙醇的體積=1: 8-10;第二次提取時銀杏葉與乙醇的配比按銀杏葉的重量 乙醇的體積=1: 6-8;第三次提取時銀杏葉與乙醇的配比按銀杏葉的重量 乙醇的體積=1: 5-7。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法， 其特征在于步驟2)中，所述加入的乙酸乙酯的體積與濃縮后的提取液的 體積比為h 1，萃取的次數(shù)為3次。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法， 其特征在于步驟3)中，所述選擇性極性無孔吸附樹脂型號為ADS-15，或 ADS-17，或ADS-F8。
7、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法， 其特征在于步驟3)中，所述洗脫用乙醇的體積濃度為50-70%。
8、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法， 其特征在于步驟3)中，所述結(jié)晶用乙醇的體積濃度為50-80%。
9、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法， 其特征在于步驟4)中，所述正己垸和乙酸乙酯混合液中，正己烷和乙酸 乙酯的體積比為9: 1-2: 8。
10、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法， 其特征在于步驟4)中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，收集洗脫液。
全文摘要
本發(fā)明將公開一種從銀杏葉中提取分離白果內(nèi)酯的方法，其步驟為1)取銀杏葉，用由高到低不同濃度的乙醇進行提取，合并提取液，回收乙醇，得到濃縮后的提取液；2)向濃縮后的提取液中加入乙酸乙酯萃取，回收有機相后濃縮至浸膏；3)將浸膏稀釋后上選擇性極性無孔吸附樹脂柱，用乙醇洗脫，所得洗脫液回收乙醇后，用乙醇結(jié)晶得銀杏內(nèi)酯類化合物；4)將銀杏內(nèi)酯類化合物結(jié)晶上硅膠柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液洗脫，收集洗脫液，得到富集白果內(nèi)酯的洗脫液；5)回收洗脫液中的溶劑，再用乙醇結(jié)晶，得到白果內(nèi)酯。本發(fā)明提供的方法工藝簡單、生產(chǎn)成本低，所得單體純度高，更易于產(chǎn)業(yè)化的生產(chǎn)。
文檔編號C07D493/00GK101468997SQ20071005024
公開日2009年7月1日 申請日期2007年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月15日
發(fā)明者唐江明, 孫莉莉, 李振志, 羅增桂 申請人:桂林市振達(dá)生物科技有限責(zé)任公司