一種銀杏內(nèi)酯k的制備方法
【技術領域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種銀杏內(nèi)酯K的制備方法。
【背景技術】
[0002] 銀杏內(nèi)酯類化合物是銀杏葉中主要的活性成分，經(jīng)證實它們具有廣泛的藥理作用 和藥學價值。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的銀杏內(nèi)酯類化合物包括銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C、 白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯J、銀杏內(nèi)酯M、銀杏內(nèi)酯L、銀杏內(nèi)酯K等。其中銀杏內(nèi)酯K(英文名 GinkgolideK，縮寫為GK)，經(jīng)樓鳳昌等人通過制備液相等手段獲得了微量樣品并經(jīng)核磁和 紅外手段進行結(jié)構(gòu)表征以來，受到廣泛關注。銀杏內(nèi)酯K(GK)結(jié)構(gòu)如下：
[0003]
[0004] 目前，已有多篇文獻報道了銀杏內(nèi)酯K的藥理作用，其不僅是一種強血小板活化 因子（PAF)受體拮抗劑，還能有效改善腦缺血再灌注造成的小鼠神經(jīng)細胞的損傷，減少組 織壞死?？梢姡y杏內(nèi)酯K對腦缺血具有明顯的保護功能，有著良好的藥用前景。但銀杏內(nèi) 酯K在天然產(chǎn)物中含量極其稀少，且分離十分困難，阻礙了該化合物在實際中的應用。
[0005] 由于銀杏內(nèi)酯B(英文名GinkgoIideB，縮寫為GB)，在天然產(chǎn)物中含量較高，且結(jié) 構(gòu)與銀杏內(nèi)酯K類似，目前有許多報道以其為初始原料制備銀杏內(nèi)酯K。
[0006]
[0007] 其中，專利CN1919848A、CN102002052A報道了在堿性水溶液或在堿性水-醇混合 液中加入銀杏內(nèi)酯B加熱反應，然后酸化后靜置析晶、過濾或濃縮析晶，最后重結(jié)晶得到銀 杏內(nèi)酯K的方、法。而Zekri等報道（IonizationconstantsofGinkgolideBinaqueous solution，AnalyticalChemistry，1996, 68 (15) : 2598-2604)銀杏內(nèi)酯B在喊性條件下不 穩(wěn)定極易開環(huán)，造成副產(chǎn)物的增多。因此，以銀杏內(nèi)酯B為原料，令其在堿性條件下脫水的 方法，由于副產(chǎn)物較多，難于分離純化銀杏內(nèi)酯K，不適合于工業(yè)應用。
[0008] 專利CN101824041A報道了一種銀杏內(nèi)酯B在鹽酸、硫酸等無機酸條件下在有機溶 劑中高溫反應制備銀杏內(nèi)酯K的方法，其反應溫度較高，且收率不詳，難以放大生產(chǎn)。
[0009] 因此，目前亟需一種操作簡單、收率較高、純度較高，且便于工業(yè)化放大生產(chǎn)的銀 杏內(nèi)酯K制備方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種銀杏內(nèi)酯K的制備方法，包括以下步驟：
[0011] (1)將銀杏內(nèi)酯B溶于有機溶劑，得溶液；
[0012] (2)向步驟（1)所得溶液中加入氟化劑進行脫水反應，經(jīng)分離純化得到銀杏內(nèi)酯 K，合成路線如下：
[0014] 所述氟化劑是指可以與羥基發(fā)生氟化反應的試劑，使羥基被氟原子所取代，包括 親核型氟化劑和親電型氟化劑（氟化劑的研究進展，楊燕等，中國科技信息2010年第21 期，第 144-145 頁）。
[0015] 在本發(fā)明中，優(yōu)選親核型氟化劑，包括SF4W及二烷胺基三氟化硫化合物。其中， 二烷胺基三氟化硫化合物優(yōu)選二乙胺基三氟化硫、雙（2-甲氧基乙基）胺三氟化硫、4-嗎啉 三氟化硫、吡咯烷酮三氟化硫、氮雜環(huán)己烷三氟化硫等。
[0016] 進一步優(yōu)選地，所述有機溶劑為經(jīng)過無水處理的有機溶劑。
[0017] 進一步優(yōu)選地，所述有機溶劑選自二氯甲烷、四氫呋喃、乙腈或三氯甲烷中的任一 種。
[0018] 進一步優(yōu)選地，所述氟化劑選自二乙胺基三氟化硫或雙（2-甲氧基乙基）胺三氟 化硫。
[0019] 進一步優(yōu)選地，所述氟化劑與銀杏內(nèi)酯B的體積重量比為2mL/g~10mL/g。
[0020] 進一步優(yōu)選地，所述脫水反應是在惰性氣體環(huán)境下進行的。
[0021 ] 進一步優(yōu)選地，所述惰性氣體選自氮氣或氬氣或氖氣。
[0022] 進一步優(yōu)選地，所述脫水反應在_25°C~25°C溫度下進行。
[0023] 進一步優(yōu)選地，所述步驟（2)為：
[0024] 將步驟（1)所得溶液降溫至_25°C-0°C，加入氟化劑，保溫反應0. 5h后，升溫至常 溫繼續(xù)反應，分離純化得到銀杏內(nèi)酯K。
[0025] 進一步優(yōu)選地，所述分離純化的方法為：
[0026] 向反應液中加水，除去有機溶劑，乙酸乙酯萃取，取有機層，依次用飽和碳酸氫鈉 和氯化鈉洗滌，干燥，除去有機溶劑，柱層析。
[0027] 進一步優(yōu)選地，所述的柱層析的洗脫液為石油醚/乙酸乙酯=2:1~1:1。
[0028] 本發(fā)明銀杏內(nèi)酯K的制備方法操作簡單、同時具有較高的收率和純度，便于工業(yè) 化放大生產(chǎn)。
[0029] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0030] 以下通過實施例形式的【具體實施方式】，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說 明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0031 ] 圖1為銀杏內(nèi)酯K(GK)的液質(zhì)聯(lián)用圖譜（LC-MS)。
[0032] 圖2為銀杏內(nèi)酯K(GK)的核磁氫譜（1H-NMR)。
【具體實施方式】
[0033] 本發(fā)明中所用原料均來自市售的商品。
[0034] 試劑的來源如下：
[0035] 銀杏內(nèi)酯B(GB):南京紫曦生物制品有限公司，批號：lxg0406。
[0036] 二乙胺基三氟化硫（DAST):薩恩化學技術有限公司，批號：DC050009。
[0037] 雙（2-甲氧基乙基）胺三氟化硫（BAST):薩恩化學技術有限公司，批號： BC150117。
[0038] 實施例1
[0039] 將5g銀杏內(nèi)酯B(GB)溶于干燥的二氯甲烷IOOmL中，攪拌混合均勻后，氮氣保護 條件下降溫冷卻至_25°C。滴加IOmLDAST(即與銀杏內(nèi)酯B體積重量比為2mL/g)，保溫 反應〇.5h;然后升溫至常溫，攪拌反應至銀杏內(nèi)酯B(GB)原料反應完全。向反應液中加入 50mL純化水，淬滅反應后旋蒸除去有機溶液，用乙酸乙酯萃取水層，有機層經(jīng)碳酸氫鈉飽和 溶液、氯化鈉溶液洗滌后干燥，旋蒸除去有機溶液得油狀物。柱層析純化（石油醚/乙酸乙 酯=2:1)得白色固體銀杏內(nèi)酯K共1.2g，收率25%，HPLC純度為99.24%。
[0040] 銀杏內(nèi)酯K的液質(zhì)（LC-MS)和氫譜（1H-NMR)圖譜分別如圖1和圖2所示，分析如 下：
[0041] LC-MS：407, 0 [M+H+], 835. 2 [2M+Na+]
[0042] 1H-NMR(DMSO, 400MHz) :I. 04 (s，9H，t-Bu)，2. 16-2. 20 (dd，1H，8-H)，I. 86-1. 88(m ,5H, -CH3；7-H), 3. 82-3. 85 (dd, 1H, 1-H), 4. 99-5. 01 (d, 1H, 2-H), 5. 16-5. 17 (d, 1H,l-〇H), 5. 46-5. 47 (d, 1H, 10-H)，5. 05-5. 53 (dd, 1H, 6-H)，6. 05 (d, 1H, 12-H)，7. 17-7. 18 (d, 1H, 10-0H) 〇
[0043] 產(chǎn)物的核磁1H-NMR及LC-Ms鑒定結(jié)果與專利CN1424315A報道相符。
[0044] 實施例2
[0045] 將5g銀杏內(nèi)酯B溶于干燥的二氯甲烷IOOmL中，攪拌混合均勻后，氮氣保護條件 下降溫冷卻至-25°C。滴加50mLDAST(即與銀杏內(nèi)酯B體積重量比為lOmL/g)，保溫反應 〇. 5h;然后升溫至常溫，攪拌反應至銀杏內(nèi)酯B原料反應完全。向反應液中加入50mL純化 水，淬滅反應后旋蒸除去有機溶液，用乙酸乙酯萃取水層，有機層經(jīng)碳酸氫鈉飽和溶液、氯 化鈉溶液洗滌后干燥，旋蒸除去有機溶液得油狀物。柱層析純化（石油醚/乙酸乙酯=2:1) 得白色固體銀杏內(nèi)酯K共I. 08g，收率23%，HPLC純度為99. 51%。
[0046] 實施例3
[0047] 將5g銀杏內(nèi)酯B溶于干燥的乙腈IOOmL中，攪拌混合均勻后，氮氣保護條件下降 溫冷卻至-25°C。滴加15mLDAST(即與銀杏內(nèi)酯B體積重量比為3mL/g)，保溫反應0. 5h; 然后升溫至常溫，攪拌反應至銀杏內(nèi)酯B原料反應完全。向反應液中加入50mL的純化水， 淬滅反應后旋蒸除去有機溶液，用乙酸乙酯萃取水層，有機層經(jīng)碳酸氫鈉飽和溶液、氯化鈉 溶液洗滌后干燥，旋蒸除去有機溶液得油狀物。柱層析純化（石油醚/乙酸乙酯=2:1)得 白色固體銀杏內(nèi)酯K共I. 3g，收率27%，HPLC純度為99. 38%。
[0048] 實施例4
[0049] 將5g銀杏內(nèi)酯B溶于干燥的四氫呋喃IOOmL中，攪拌溶清后，氮氣保護條件下降 溫冷卻至-25°C。滴加15mLBAST，保溫反應0. 5h;然后升溫至常溫，攪拌反應至銀杏內(nèi)酯B 原料反應完全。向反應液中加入50mL的純化水，淬滅反應后旋蒸除去有機溶液，用乙酸乙 酯萃取水層，有機層經(jīng)碳酸氫鈉飽和溶液、氯化鈉溶液洗滌后干燥，旋蒸除去有機溶液得油 狀物。柱層析純化（石油醚/乙酸乙酯=2:1)得白色固體銀杏內(nèi)酯K共I. 5g，收率31 %， HPLC純度為 99. 30%。
[0050] 可以看出，在本實施例的條件下，產(chǎn)物收率較高。
[0051] 實施例5
[0052] 將5g銀杏內(nèi)酯B溶于干燥的二氯甲烷IOOmL中，攪拌混合均勻后，氮氣保護條件 下降溫冷卻至-25°C。滴加50mLBAST，保溫反應0.5h;然后升溫至常溫，攪拌反應至銀杏 內(nèi)酯B原料反應完全。向反應液中加入50mL純化水，淬滅反應后旋蒸除去有機溶液，用乙 酸乙酯萃取水層，有機層經(jīng)碳酸氫鈉飽和溶液、氯化鈉溶液洗滌后干燥，旋蒸除去有機溶液 得油狀物。柱層析純化（石油醚/乙酸乙酯=2:1)得白色固體銀杏內(nèi)酯K共I. 15g，收率 24%，HPLC純度為 99. 28 %。
[0053] 綜上，本發(fā)明銀杏內(nèi)酯K的制備方法操作簡單、同時具有較高的收率和純度，便于 工業(yè)化放大生產(chǎn)。
【主權項】
1. 一種銀杏內(nèi)酯K的制備方法，包括以下步驟： (1)將銀杏內(nèi)酯B溶于有機溶劑，得溶液； ⑵向步驟⑴所得溶液中加入氟化劑進行脫水反應，經(jīng)分離純化得到銀杏內(nèi)酯K。2. 根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述有機溶劑為經(jīng)過無水處理的有 機溶劑。3. 根據(jù)權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于：所述有機溶劑選自二氯甲烷、四 氫呋喃、乙腈或三氯甲烷中的任一種。4. 根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述氟化劑選自二乙胺基三氟化硫 或雙（2-甲氧基乙基）胺三氟化硫。5. 根據(jù)權利要求1或4所述的制備方法，其特征在于：所述氟化劑與銀杏內(nèi)酯B的體 積重量比為2mL/g~10mL/g。6. 根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述脫水反應是在惰性氣體環(huán)境下 進行的。7. 根據(jù)權利要求1或6所述的制備方法，其特征在于：所述惰性氣體選自氮氣或氬氣 或氖氣。8. 根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述脫水反應在_25°C~25°C溫度 下進行。9. 根據(jù)權利要求1、2、4、6、8任一一項所述的制備方法，其特征在于：所述步驟（2)為： 將步驟（1)所得溶液降溫至_25°C -(TC，加入氟化劑，保溫反應0. 5h后，升溫至常溫繼 續(xù)反應，分離純化得到銀杏內(nèi)酯K。10. 根據(jù)權利要求1、2、4、6、8任一一項所述的制備方法，其特征在于：所述分離純化的 方法為： 向反應液中加水，除去有機溶劑，乙酸乙酯萃取，取有機層，依次用飽和碳酸氫鈉和氯 化鈉洗滌，干燥，除去有機溶劑，柱層析。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種銀杏內(nèi)酯K的制備方法，包括以下步驟：(1)將銀杏內(nèi)酯B溶于有機溶劑，得溶液；(2)向步驟(1)所得溶液中加入氟化劑進行脫水反應，經(jīng)分離純化得到銀杏內(nèi)酯K。本發(fā)明銀杏內(nèi)酯K的制備方法操作簡單、同時具有較高的收率和純度，便于工業(yè)化放大生產(chǎn)。
【IPC分類】C07D493/22
【公開號】CN105001231
【申請?zhí)枴緾N201510296205
【發(fā)明人】李大雄, 柯鴻, 樊小波, 孫毅
【申請人】成都百裕科技制藥有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年6月2日