專利名稱：用于治療增殖性疾病的用作raf激酶抑制劑的1,4－二取代的異喹啉衍生物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及可以抑制B-RAF激酶--一種在MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑中起作用的絲氨酸/蘇氨酸激酶的新化合物、該化合物在治療其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的疾病例如增殖性疾病如某些癌癥中的用途。
發(fā)明概述細(xì)胞利用各種信號(hào)傳導(dǎo)途徑使細(xì)胞外環(huán)境的各個(gè)方面與細(xì)胞核之間建立起聯(lián)系。許多信號(hào)都是通過蛋白激酶傳導(dǎo)的，這些蛋白激酶通過轉(zhuǎn)移磷酸根基團(tuán)激活各種因子。通過抑制適當(dāng)?shù)募っ富钚詠砥茐男盘?hào)傳導(dǎo)可能會(huì)產(chǎn)生臨床上的益處，這已經(jīng)通過伊馬替尼--一種bcr-abl激酶抑制劑得到證實(shí)，伊馬替尼在市場上以其甲磺酸鹽的形式以商品名GLEEVECTM(在美國)或GLIVEC銷售。
許多生長因子通過MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑將來自細(xì)胞外環(huán)境的增殖信號(hào)傳遞到細(xì)胞核。生長因子激活位于細(xì)胞表面的跨膜受體，該受體隨后引發(fā)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，從而激活RAS并使RAF激酶募集到膜中并在此被激活，其隨后激活MEK激酶，MEK激酶隨后又激活ERK激酶。激活的ERK激酶可移動(dòng)至核并在核內(nèi)激活各種基因轉(zhuǎn)錄因子。該途徑的異?？蓪?dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄和細(xì)胞生長發(fā)生改變，并通過反向調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡以及傳遞增殖和血管生成信號(hào)引起腫瘤生成。已證實(shí)RAF激酶的抑制劑可以在細(xì)胞培養(yǎng)物中通過MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑來阻斷信號(hào)傳導(dǎo)。
已知RAF激酶家族具有三個(gè)成員，即C-RAF(也被稱作RAF-1)、B-RAF和A-RAF。據(jù)報(bào)道，在人類癌癥、包括59％所試驗(yàn)的黑素瘤細(xì)胞系中，B-RAF激酶一般通過多個(gè)體細(xì)胞點(diǎn)突變之一而激活。參見Davies等，Nature，Vol.417，pp.949-954(2002)。本文中所述的化合物是RAF激酶、尤其是C-RAF激酶以及野生型和突變型B-RAF激酶、特別是V599E突變型B-RAF激酶的有效抑制劑。
本發(fā)明化合物的RAF激酶抑制性能使其可用作用于治療特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的增殖性疾病的治療劑，尤其是黑素瘤和具有突變的B-RAF，尤其是其中突變的B-RAF是V599E突變體的其它癌癥。本發(fā)明還提供了用異喹啉化合物治療其特征在于突變型B-RAF的其它病癥例如具有突變的B-RAF的良性Nevi痣的方法。
發(fā)明描述本發(fā)明涉及式(I)化合物 其中n是0-2；r是0-2m是0-4；J是未取代的或者被Q取代一次或兩次，其中J是芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基，其中芳基是含有6-14個(gè)碳原子的芳香族基團(tuán)，諸如苯基、萘基、芴基和菲基；雜芳基是含有4-14個(gè)、特別是5-7個(gè)環(huán)原子、其中1、2或3個(gè)環(huán)原子彼此獨(dú)立地選自N、S和O的芳香族基團(tuán)，諸如呋喃基、吡喃基、吡啶基、1，2-、1，3-和1，4-嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、三唑基、唑基、喹唑啉基、咪唑基、吡咯基、異唑基、異噻唑基、吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、異喹啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、異苯并呋喃基、色烯基、嘌呤基、噻蒽基、呫噸基、吖啶基、咔唑基和吩嗪基；環(huán)烷基是含有3-8個(gè)、優(yōu)選5-6個(gè)環(huán)原子的飽和環(huán)狀基團(tuán)，諸如環(huán)丙基、環(huán)戊基和環(huán)己基；雜環(huán)烷基是含有3-8個(gè)、優(yōu)選5-6個(gè)環(huán)原子、其中1、2或3個(gè)環(huán)原子彼此獨(dú)立地選自N、S和O的飽和環(huán)狀基團(tuán)，諸如哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、吡咯烷基和吡唑烷基；Q是選自下列的在1或2個(gè)碳原子上的取代基鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-N(R)R、-NRS(O)2N(R)R、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)R2、-S(O)2N(R2)R2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基，諸如取代或未取代的咪唑基和取代或未取代的吡啶基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基，諸如取代或未取代的哌啶基、取代或未取代的piperazolyl、取代或未取代的四氫吡喃基和取代或未取代的氮雜環(huán)丁烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)基、氨基、單-或二-取代的氨基、雜芳基-芳基；R是H、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基-烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；X是鍵、Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基，優(yōu)選-NH-、-NHC(O)-、-NHC(O)NH-；Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環(huán)烷基或取代或未取代的雜環(huán)烷基；并且Z是氨基、單-或二-取代的氨基、鹵素、烷基、取代的烷基、羥基、醚化的或酯化的羥基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯基-低級(jí)烷硫基、烷基苯硫基、苯基亞磺酰基、苯基-低級(jí)烷基亞磺酰基、烷基苯基亞磺?；?、苯基磺酰基、苯基-低級(jí)烷基磺酰基或烷基苯基磺?；⑶移渲?，如果存在一個(gè)以上的基團(tuán)Z(m≥2)，則取代基Z相同或不同；或者其中一個(gè)或多個(gè)N原子帶有氧原子的上述化合物的N-氧化物；或其可藥用鹽。
式(I)化合物可以抑制RAF激酶并且具有基于該性質(zhì)的藥物用途。
在本說明書的上下文內(nèi)，上下文所用的一般術(shù)語優(yōu)選具有以下含義，除非另有說明。
本文所用的術(shù)語“低級(jí)”表示含有最多7個(gè)(包括7個(gè))、特別是含有最多4個(gè)(包括4個(gè))碳原子的基團(tuán)，所述的基團(tuán)是直鏈的或者分支一次或多次。
復(fù)數(shù)形式的化合物、鹽等也包括一種化合物、一種鹽等。
存在于例如其中n＝1且R是低級(jí)烷基的式(I)化合物(或其N-氧化物)中的不對稱碳原子可具有(R)、(S)或(R，S)構(gòu)型，優(yōu)選(R)或(S)構(gòu)型。在雙鍵或環(huán)上的取代基可以是順式(＝Z)或反式(＝E)形式。因此本發(fā)明的化合物可以是異構(gòu)體混合物的形式或者是純異構(gòu)體的形式，優(yōu)選是對映體純的非對映異構(gòu)體的形式。
下標(biāo)r優(yōu)選是0或1。它還可以是2。
下標(biāo)n優(yōu)選是0或1，特別是0。它還可以是2。
下標(biāo)m優(yōu)選是0、1或2，特別是0，或者還可以是1。
優(yōu)選J是含有至少一個(gè)、但不超過3個(gè)N的雜芳基。
低級(jí)烷基尤其是C1-4烷基，例如正丁基、仲丁基、叔丁基、正丙基、異丙基，或者尤其是甲基或乙基，或者在Y是低級(jí)烷基的情況下，它尤其是異戊基。低級(jí)烷基是未取代的或者被羥基或鹵素例如Br、Cl或F、優(yōu)選F所取代。
芳基優(yōu)選是含有6-14個(gè)碳原子的芳香族基團(tuán)，特別是苯基、萘基、芴基或菲基，上述基團(tuán)是未取代的或者被一個(gè)或多個(gè)取代基、優(yōu)選最多三個(gè)、尤其是一個(gè)或兩個(gè)取代基、特別是選自下列的取代基所取代氨基、單-或二-取代的氨基、鹵素、烷基、取代的烷基、羥基、醚化的或酯化的羥基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲?；-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；㈦呋?、胍、巰基、磺基、苯硫基、苯基-低級(jí)烷硫基、烷基苯硫基、苯基亞磺酰基、苯基-低級(jí)烷基亞磺?；?、烷基苯基亞磺?；⒈交酋；⒈交?低級(jí)烷基磺?；⑼榛交酋；⒌图?jí)鏈烯基諸如乙烯基和苯基、低級(jí)烷硫基諸如甲硫基、低級(jí)烷?；T如乙?；?、低級(jí)烷基巰基諸如甲基巰基(-S-CH3)、鹵代-低級(jí)烷基巰基諸如三氟甲基巰基(-S-CF3)、低級(jí)烷基磺?；?、鹵代-低級(jí)烷基磺?；T如特別是三氟甲磺?；?、二羥基硼(-B(OH)2)和雜環(huán)基，和連接到環(huán)的相鄰碳原子上的低級(jí)亞烷基二氧基諸如亞甲基二氧基；芳基優(yōu)選是未取代的或者被一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的選自下列的取代基所取代的苯基氨基；低級(jí)烷?；被?，尤其是乙酰基氨基；鹵素，尤其是氟、氯或溴；低級(jí)烷基，尤其是甲基或乙基或丙基；鹵代-低級(jí)烷基，尤其是三氟甲基；羥基；低級(jí)烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基；苯基-低級(jí)烷氧基，尤其是芐氧基；和氰基，或(與前述取代基二者擇一地或額外地)C8-12烷氧基，尤其是正癸氧基；氨基甲酰基；低級(jí)烷基氨基甲?；T如N-甲基-或N-叔丁基-氨基甲?；?；低級(jí)烷酰基，諸如乙?；虮交趸?；鹵代-低級(jí)烷氧基，諸如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基；低級(jí)烷氧基羰基，諸如乙氧基羰基；低級(jí)烷基巰基諸如甲基巰基；鹵代-低級(jí)烷基巰基諸如三氟甲基巰基；羥基-低級(jí)烷基諸如羥基甲基或1-羥基甲基；低級(jí)烷基磺?；T如甲磺?；?；鹵代-低級(jí)烷基磺?；T如三氟甲磺酰基、苯基磺酰基、二羥基硼(-B(OH)2)、2-甲基-嘧啶-4-基、唑-5-基、2-甲基-1，3-二氧戊環(huán)-2-基、1H-吡唑-3-基或1-甲基-吡唑-3-基；和連接到兩個(gè)相鄰碳原子上的低級(jí)亞烷基二氧基諸如亞甲基二氧基，特別是被一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的選自下列的取代基所取代低級(jí)烷基，尤其是甲基；鹵素，尤其是氯或溴；和鹵代-低級(jí)烷基，尤其是三氟甲基。芳基還優(yōu)選是萘基。
雜芳基優(yōu)選是連接環(huán)中的不飽和雜環(huán)基團(tuán)，優(yōu)選單-或二-或三環(huán)；其中至少在與式(I)分子的基團(tuán)相連接的環(huán)中有一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選1-4個(gè)、尤其是1或2個(gè)相應(yīng)芳基的碳原子被選自氮、氧和硫的雜原子所代替，連接環(huán)優(yōu)選含有4-14個(gè)、尤其是5-7個(gè)環(huán)原子；其中雜芳基是未取代的或者被一個(gè)或多個(gè)、尤其是1-3個(gè)相同或不同的選自以上關(guān)于芳基所述的取代基所取代；尤其優(yōu)選選自下列的雜芳基咪唑基、噻吩基、呋喃基、吡喃基、噻蒽基、異苯并呋喃基、苯并呋喃基、色烯基、2H-吡咯基、吡咯基、低級(jí)烷基取代的咪唑基、苯并咪唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、唑基、異唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲嗪基、異吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、三唑基、四唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、異喹啉基、喹啉基、2，3-二氮雜萘基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔唑基、菲啶基、吖啶基、perimidinyl、菲咯啉基和呋咱基，所有這些基團(tuán)通過含有至少一個(gè)雜原子的環(huán)連接到式(I-)分子的基團(tuán)上；吡啶基是特別優(yōu)選的。還特別優(yōu)選被鹵素、尤其是被氟取代的吲哚基，尤其是6-氟吲哚-3-基。
雜芳基尤其是含有1或2個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-或6-元的芳香族雜環(huán)，所述的雜環(huán)是未取代的或者尤其被低級(jí)烷基諸如甲基所取代；此外還優(yōu)選選自2-甲基-嘧啶-4-基、1H-吡唑-3-基和1-甲基-吡唑-3-基的基團(tuán)。
雜環(huán)烷基尤其是含有1或2個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的飽和的5-或6-元雜環(huán)，所述的雜環(huán)是未取代的或者尤其被低級(jí)烷基諸如甲基所取代；優(yōu)選選自唑-5-基和2-甲基-1，3-二氧戊環(huán)-2-基的基團(tuán)。
單-或二-取代的氨基尤其是被一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的選自下列的基團(tuán)所取代的氨基低級(jí)烷基諸如甲基；羥基-低級(jí)烷基諸如2-羥基乙基；苯基-低級(jí)烷基；低級(jí)烷?；T如乙?；?；苯甲酰基；取代的苯甲?；?，其中苯基是未取代的或者尤其被一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)選自硝基和氨基或者選自下列的取代基所取代鹵素、氨基、N-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷酰基和氨基甲?；?；和苯基-低級(jí)烷氧基羰基，其中苯基是未取代的或者尤其被一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)選自硝基和氨基或者選自下列的取代基所取代鹵素、氨基、N-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷?；桶被柞；?；并且優(yōu)選是N-低級(jí)烷基氨基，諸如N-甲基氨基或羥基-低級(jí)烷基氨基，諸如2-羥基乙基氨基；苯基-低級(jí)烷基氨基，諸如芐基氨基；N，N-二-低級(jí)烷基氨基、N-苯基-低級(jí)烷基-N-低級(jí)烷基氨基或N，N-二-低級(jí)烷基苯基氨基；低級(jí)烷酰基氨基，諸如乙酰基氨基；或者是選自苯甲?；被捅交?低級(jí)烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情況下苯基是未取代的或者尤其被硝基或氨基或者被鹵素、氨基、N-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷?；蛘弑话被柞；〈?，或者與前述基團(tuán)二者擇一地或額外地被氨基羰基氨基所取代。
鹵素尤其是氟、氯、溴或碘，特別是氟、氯或溴，特別是氟和氯。
烷基優(yōu)選具有最多12個(gè)碳原子，尤其是低級(jí)烷基，特別是甲基或乙基、正丙基、異丙基或叔丁基。
取代的烷基是上一段中所定義的烷基，尤其是低級(jí)烷基，優(yōu)選甲基，其可含有一個(gè)或多個(gè)、尤其是最多3個(gè)選自下列的取代基鹵素，尤其是氟；以及氨基、N-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、N-低級(jí)烷?；被⒘u基、烷氧基、氰基、羧基、低級(jí)烷氧基羰基和苯基-低級(jí)烷氧基羰基。三氟甲基是重要的取代的烷基。
醚化的羥基尤其是C8-20烷氧基，諸如正癸氧基；低級(jí)烷氧基(優(yōu)選的)，諸如甲氧基、乙氧基、異丙氧基或正戊基氧基；苯基-低級(jí)烷氧基，諸如芐氧基或苯基氧基；或者與前述基團(tuán)二者擇一地或額外地，C8-20烷氧基，諸如正癸氧基；鹵代-低級(jí)烷氧基，諸如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基。
酯化的羥基尤其是低級(jí)烷酰基氧基、苯甲?；趸⒌图?jí)烷氧基羰基氧基，諸如叔丁氧基羰基氧基，或苯基-低級(jí)烷氧基羰基氧基，諸如芐氧基羰基氧基。
酯化的羧基尤其是低級(jí)烷氧基羰基，諸如叔丁氧基羰基或乙氧基羰基、苯基-低級(jí)烷氧基羰基或苯基氧基羰基。
烷?；绕涫峭榛?羰基，特別是低級(jí)烷?；缫阴；?。
N-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；绕湓谀┒说媳灰粋€(gè)或兩個(gè)取代基低級(jí)烷基、苯基-低級(jí)烷基或羥基-低級(jí)烷基所取代。
烷基苯硫基尤其是低級(jí)烷基苯硫基。
烷基苯基亞磺?；绕涫堑图?jí)烷基苯基亞磺酰基。
烷基苯基磺酰基尤其是低級(jí)烷基苯基磺?；?br> 吡啶基Y優(yōu)選是3-或4-吡啶基。
未取代的或取代的環(huán)烷基優(yōu)選是C3-8環(huán)烷基，它是未取代的或者按照與芳基相同的方式、尤其是按照關(guān)于苯基的定義進(jìn)行取代。優(yōu)選環(huán)己基或環(huán)戊基或環(huán)丙基。還優(yōu)選4-低級(jí)烷基-環(huán)己基，諸如4-叔丁基環(huán)己基。
如果存在的話，Z優(yōu)選是氨基；羥基-低級(jí)烷基氨基，諸如2-羥基乙基氨基；低級(jí)烷?；被?，諸如乙酰基氨基；硝基苯甲?；被T如3-硝基苯甲酰基氨基；氨基苯甲酰基氨基，諸如4-氨基苯甲?；被?；苯基-低級(jí)烷氧基羰基氨基，諸如芐氧基羰基氨基；或鹵素，諸如溴；優(yōu)選只存在一個(gè)取代基(m＝1)，尤其是剛剛提到的取代基之一，尤其是鹵素。非常優(yōu)選其中Z不存在(m＝0)的式(I)化合物或其N-氧化物。
被連接到兩個(gè)相鄰碳原子上的低級(jí)亞烷基二氧基諸如亞甲基二氧基所取代的苯基形式的芳基優(yōu)選是3，4-亞甲基二氧基苯基。
式(I)化合物的N-氧化物優(yōu)選是其中的異喹啉環(huán)氮或J部分的氮帶有氧原子或有一個(gè)以上的上述氮原子帶有氧原子的N-氧化物。
鹽尤其是式(I)化合物或其N-氧化物的可藥用鹽。
所述的鹽為例如具有堿性氮原子的式(I)化合物或其N-氧化物與有機(jī)或無機(jī)酸形成的酸加成鹽，尤其是可藥用鹽。適當(dāng)?shù)臒o機(jī)酸是例如氫鹵酸諸如鹽酸(HCl)；硫酸或磷酸。適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)酸是例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸；丙酸；辛酸；癸酸；月桂酸；乙醇酸；乳酸；2-羥基丁酸；葡糖酸；葡萄糖一元羧酸；富馬酸；琥珀酸；己二酸；庚二酸；辛二酸；壬二酸；蘋果酸；酒石酸；檸檬酸；葡糖二酸；半乳糖二酸；氨基酸，諸如谷氨酸、天冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙?；被宜帷-乙?；於０?、N-乙?；腚装彼帷⒈?、乙酰乙酸、磷酸絲氨酸、2-或3-甘油磷酸、馬來酸、羥基馬來酸、甲基馬來酸、環(huán)己烷甲酸、苯甲酸、水揚(yáng)酸、1-或3-羥基萘基-2-甲酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、4-氨基水楊酸、鄰苯二甲酸、苯基乙酸、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、甲-或乙-磺酸、2-羥基乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘二磺酸、N-環(huán)己基氨基磺酸或N-甲基-、N-乙基-或N-丙基-氨基磺酸或其它有機(jī)質(zhì)子酸諸如抗壞血酸。
當(dāng)帶有負(fù)電荷的基團(tuán)諸如羧基或磺基存在時(shí)，還可以與堿形成鹽，例如金屬或銨鹽諸如堿金屬、堿土金屬鹽例如鈉、鉀、鎂或鈣鹽；與氨或適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)胺諸如一元叔胺例如三乙基胺或三(2-羥基乙基)胺或雜環(huán)堿例如N-乙基哌啶或N，N′-二甲基-哌嗪形成的鹽。
當(dāng)堿性基團(tuán)和酸性基團(tuán)存在于相同分子中時(shí)，式(I)化合物或其N-氧化物還可以形成內(nèi)鹽。
對于分離或純化，還可以使用不可藥用鹽例如苦味酸鹽或高氯酸鹽。僅有可藥用鹽或游離化合物、任選地以藥物組合物的形式可以在治療上使用，因此它們是優(yōu)選的。
鑒于游離形式與其鹽、包括例如那些可在新化合物的純化過程中用作中間體的鹽或者用于對它們進(jìn)行鑒定的鹽形式的新化合物之間的密切關(guān)系，所以，如果適當(dāng)?shù)脑?，上下文中所指的游離化合物也應(yīng)該理解成包括相應(yīng)的鹽。
在本發(fā)明的一種重要實(shí)施方案中，J是如上所定義的芳基，優(yōu)選雜芳基。因此，本發(fā)明的一種重要實(shí)施方案涉及式(Ia)的異喹啉化合物 其中可變?nèi)〈蛥?shù)選擇與以上關(guān)于式(I)化合物所描述的相同。
優(yōu)選環(huán)成員A、B、D和E均為CH或CQ，并且環(huán)成員T是N。
Q與碳連接，優(yōu)選與A或者與D(r＝1)或者與兩者(r＝2)連接，從而當(dāng)連接有Q時(shí)A和/或D是C(-Q)。
本發(fā)明的一種令人感興趣的實(shí)施方案是式(Ia)化合物，其中環(huán)成員A、B、E和T均為CH或CQ且D是N，或者其中環(huán)成員A、B、D和T均為CH或CQ且E是N，或者尤其是其中環(huán)成員B、D、E和T均為CH或CQ且A是N。
本發(fā)明的另一種尤其令人感興趣的實(shí)施方案是式(Ia)化合物，其中環(huán)成員A、B和D均為CH或CQ，并且E和T均為N，或者其中環(huán)成員B、E和T均為CH或CQ且A和D均為N，或者其中環(huán)成員A、D和T均為CH或CQ且B和E均為N。
本發(fā)明的另一種尤其令人感興趣的實(shí)施方案是式(Ia)化合物，其中環(huán)成員A和D均為CH或CQ且B、T和E均為N。
本發(fā)明的另一種尤其令人感興趣的實(shí)施方案是下列化合物其中J是二環(huán)雜芳族環(huán)系，諸如吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、異苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、色烯基和嘌呤基。二環(huán)雜芳族環(huán)系可包含Q作為取代基，其可存在于二環(huán)環(huán)系的任一個(gè)或兩個(gè)環(huán)上并且在二環(huán)環(huán)系的任一個(gè)或兩個(gè)環(huán)的一個(gè)或兩個(gè)碳原子上。
本發(fā)明化合物可抑制RAF激酶，因此可用于治療其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的病癥和疾病。因此，本發(fā)明還涉及治療其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的病癥或疾病的方法，該方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的式(I)化合物 其中n是0-2；
r是0-2；m是0-4；J是未取代的或者被Q取代一次或兩次，其中J是芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基，其中芳基是含有6-14個(gè)碳原子的芳香族基團(tuán)，諸如苯基、萘基、芴基和菲基；雜芳基是含有4-14個(gè)、尤其是5-7個(gè)環(huán)原子、其中1、2或3個(gè)環(huán)原子彼此獨(dú)立地選自N、S和O的芳香族基團(tuán)，諸如呋喃基、吡喃基、吡啶基、1，2-、1，3-和1，4-嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、三唑基、唑基、喹唑啉基、咪唑基、吡咯基、異唑基、異噻唑基、吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、異喹啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、異苯并呋喃基、色烯基、嘌呤基、噻蒽基、呫噸基、吖啶基、咔唑基和吩嗪基；環(huán)烷基是含有3-8個(gè)、優(yōu)選5-6個(gè)環(huán)原子的環(huán)狀基團(tuán)，諸如環(huán)己基和環(huán)戊基；雜環(huán)烷基是含有3-8個(gè)、優(yōu)選5-6個(gè)環(huán)原子、其中1、2或3個(gè)環(huán)原子彼此獨(dú)立地選自N、S和O的環(huán)狀基團(tuán)，諸如哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、吡咯烷基和吡唑烷基；Q是選自下列的在1或2個(gè)碳原子上的取代基鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-N(R)R、-NRS(O)2N(R)R、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)R2、-S(O)2N(R2)R2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)烷基、-C1-4烷基-環(huán)烷基氨基、單-或二-取代的氨基；R是H或低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；
X是Y、-N(R)-、-O-、-S-；砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基，優(yōu)選-NH-；并且Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或取代或未取代的環(huán)烷基；Z是氨基、單-或二-取代的氨基、鹵素、烷基、取代的烷基、羥基、醚化的或酯化的羥基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷?；被柞；?、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；?、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯基-低級(jí)烷硫基、烷基苯硫基、苯基亞磺?；?、苯基-低級(jí)烷基亞磺?；?、烷基苯基亞磺?；?、苯基磺酰基、苯基-低級(jí)烷基磺?；蛲榛交酋；?，并且其中，如果存在一個(gè)以上的基團(tuán)Z(m≥2)，則取代基Z相同或不同；或者其中一個(gè)或多個(gè)N原子帶有氧原子的上述化合物的N-氧化物；或其可藥用鹽。
患者是患有其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的疾病的哺乳動(dòng)物、通常是人，其中，異常是指通過MAP激酶途徑的信號(hào)傳導(dǎo)相對于正常細(xì)胞而言是過度的。這可通過將特定的抗體活化成信號(hào)傳導(dǎo)途徑的成員，用例如蛋白質(zhì)印跡分析法或免疫組織化學(xué)法測定。
一般地，其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的疾病是增殖性疾病，尤其是表達(dá)突變型B-RAF激酶或過度表達(dá)野生型B-或C-RAF激酶的癌癥。其中可發(fā)現(xiàn)突變的B-RAF的癌癥包括黑素瘤、結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、前列腺癌、腎癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌和肝癌，優(yōu)選黑素瘤、結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌和肝癌。B-RAF激酶的突變在黑素瘤中尤其普遍。
按照本發(fā)明，從患者獲取疾病組織的樣本，例如作為活組織檢查或切除的結(jié)果，然后進(jìn)行試驗(yàn)以確定是否該組織產(chǎn)生了突變型B-RAF激酶或過度產(chǎn)生了野生型B-或C-RAF激酶。如果試驗(yàn)表明在疾病組織中產(chǎn)生了突變型B-RAF或者過度產(chǎn)生了野生型B-或C-RAF激酶，則通過施用抑制RAF有效量的本文所述的異喹啉化合物對患者進(jìn)行治療。然而，如果級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的另一種激酶是傳導(dǎo)途徑異常的原因的話，也可以用RAF激酶抑制化合物下調(diào)MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑。
將組織樣本通過本領(lǐng)域通常已知的方法進(jìn)行試驗(yàn)。例如，B-RAF突變通過等位基因特異性PCR、DHPLC、質(zhì)譜進(jìn)行檢測，野生型B-或C-RAF的過度表達(dá)通過免疫組織化學(xué)、免疫熒光法或蛋白質(zhì)印跡分析法進(jìn)行檢測。檢測B-RAF突變的特別有用的方法是實(shí)施例A中所述的基于聚合酶鏈反應(yīng)的方法?？捎妙愃频姆椒ù_定是否級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的其它激酶也發(fā)生了突變或過度表達(dá)。
本發(fā)明的尤其重要的方面涉及治療黑素瘤的方法，該方法包括(a)對患者的黑素瘤組織進(jìn)行檢測以確定黑素瘤組織是否表達(dá)突變型B-RAF；和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織表達(dá)突變型B-RAF，則用抑制RAF激酶有效量的本文所述的異喹啉化合物對患者進(jìn)行治療。
一般地，B-RAF突變是記載于以上所引用的Davies等人的文章中的所述的突變之一并且列于表1中。
表1.
因此，本發(fā)明尤其涉及治療其特征在于突變型B-RAF激酶的疾病的方法，該方法包括檢測患者的組織樣本中的B-RAF激酶基因或蛋白質(zhì)的突變，然后用有效的B-RAF激酶抑制化合物、尤其是本文所述的異喹啉化合物對患者進(jìn)行治療。
本發(fā)明的一個(gè)重要方面包括其中的突變型B-RAF激酶表現(xiàn)出表1所述的突變、尤其是V599E突變的那些情況。
本發(fā)明的一個(gè)尤其重要的方面包括其中的疾病是黑素瘤并且突變型B-RAF激酶表現(xiàn)出表1所述的突變、尤其是V599E突變的那些情況。
本發(fā)明方法所用的RAF激酶抑制化合物包括具有有價(jià)值的藥理學(xué)性質(zhì)的上述式(I)化合物或其N-氧化物。
另一方面，本發(fā)明提供了式I化合物作為藥物的用途。
在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供了式I化合物在制備用于治療其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的疾病的藥物中的用途，所述的疾病是增殖性疾病，尤其是表達(dá)突變型B-RAF激酶或過度表達(dá)野生型B-或C-RAF激酶的癌癥。
式(I)化合物或其N-氧化物可單獨(dú)給藥或者與一種或多種其它治療劑一起組合給藥，可以使用固定的組合，或者將本發(fā)明的化合物與待給藥的一種或多種其它治療劑以時(shí)間上交錯(cuò)的方式給藥或者彼此獨(dú)立地給藥，或者可以將固定的組合和一種或多種其它治療劑組合給藥。具體地講，用式(I)化合物或其N-氧化物治療腫瘤可以與化學(xué)療法(與一種或多種其它化學(xué)治療劑、尤其是細(xì)胞抑制劑相組合，或者與激素或具有激素樣活性的化合物相組合)、放射療法、免疫療法、手術(shù)治療或其組合同時(shí)或額外地進(jìn)行。還可以進(jìn)行長期治療，作為輔助治療與諸如剛才提到的其它治療方法結(jié)合進(jìn)行。也可用于在切除腫瘤或化學(xué)預(yù)防性治療(例如在有風(fēng)險(xiǎn)的患者中)之后維持患者的狀況。
可與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的治療劑尤其是一種或多種抗增殖的、抑制細(xì)胞或細(xì)胞毒性的化合物，例如一種或多種選自下列的化學(xué)治療劑多胺生物合成的抑制劑；不同蛋白激酶、尤其是蛋白激酶C或酪氨酸蛋白激酶諸如表皮生長因子受體蛋白酪氨酸激酶的抑制劑；生長因子諸如血管內(nèi)皮生長因子的抑制劑；細(xì)胞因子；負(fù)生長調(diào)節(jié)劑諸如TGF-β或IFN-β、芳香酶抑制劑；激素或激素類似物；和常規(guī)細(xì)胞抑制劑。
本發(fā)明的化合物不僅可用于人類的(預(yù)防性的，優(yōu)選治療性的)治療，而且可用于其它溫血?jiǎng)游锢缟逃脛?dòng)物例如嚙齒類動(dòng)物諸如小鼠、兔子或大鼠；或豚鼠。
本發(fā)明還涉及式(I)化合物或其N-氧化物在抑制RAF激酶活性中的用途。
式(I)化合物或其N-氧化物還可用于診斷的目的，例如，首先從作為原始“宿主”的溫血?jiǎng)游?、尤其是人獲取腫瘤并將其移植到小鼠中，在加入化合物后測定生長的減弱情況以研究這些腫瘤對所述化合物的敏感性，從而使得在原始宿主中治療腫瘤疾病的方法可以得到更好的確定。
在以下所述的優(yōu)選的式(I)化合物組中，可方便地使用源自上述一般定義中的取代基的定義，例如，將一般的定義用更具體的定義或者尤其是被指定為優(yōu)選的定義所代替；在所有情況中，均優(yōu)選以上指定為優(yōu)選的定義或作為例子所提到定義。
優(yōu)選式(Ia)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽 其中n是0-2；r是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T均為CH或CQ或者A、B、D和E均為CH或CQ且T是N或者B、D、E和T均為CH或CQ且A是N或者A、B、T和E均為CH或CQ且D是N或者A、B、D和T均為CH或CQ且E是N或者A、B和D均為CH或CQ且E和T為N或者B、E和T均為CH或CQ且A和D均為N或者A、D和T均為CH或CQ且B和E均為N或者A和D均為CH或CQ且B、E和T均為N；Q是選自下列的在1或2個(gè)碳原子上的取代基鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)基、氨基、單-或二-取代的氨基；R是H或低級(jí)烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基；Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環(huán)烷基或取代或未取代的雜環(huán)烷基；并且Z是氨基、單-或二-取代的氨基、鹵素、烷基、取代的烷基、羥基、醚化的或酯化的羥基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷?；?、氨基甲?；?、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯基-低級(jí)烷硫基、烷基苯硫基、苯基亞磺?；?、苯基-低級(jí)烷基亞磺酰基、烷基苯基亞磺?；⒈交酋；?、苯基-低級(jí)烷基磺酰基或烷基苯基磺?；⑶移渲?，如果存在一個(gè)以上的基團(tuán)Z(m≥2)，則取代基Z相同或不同。
還優(yōu)選如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是0-2；n是0或1；m是0或1；A、B、D和E均為CH或CQ且T是N或者A、B、T和E均為CH或CQ且D是N或者A、B和D均為CH或CQ且E和T均為N；
Q是選自下列的在1或2個(gè)碳原子上的取代基鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)基、氨基、單-或二-取代的氨基；R是H或低級(jí)烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；X是-NR-、-O-或-S-；Y是未取代的或者被選自下列的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的取代基所取代的苯基氨基；低級(jí)烷?；被Ⅺu素、低級(jí)烷基、鹵代-低級(jí)烷基、羥基；低級(jí)烷氧基、苯基-低級(jí)烷氧基和氰基，或者與前述取代基二者擇一地或額外地，低級(jí)鏈烯基、C8-12烷氧基、低級(jí)烷氧基羰基、氨基甲酰基、低級(jí)烷基氨基甲酰基、低級(jí)烷?；Ⅺu代-低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷基巰基、鹵代-低級(jí)烷基巰基、羥基-低級(jí)烷基、低級(jí)烷基磺?；?、鹵代-低級(jí)烷基磺酰基、苯基磺?；?、二羥基硼(-B(OH)2)和低級(jí)亞烷基二氧基，或者Y是吡啶基；并且Z是鹵素；氨基；N-低級(jí)烷基氨基；羥基-低級(jí)烷基氨基；苯基-低級(jí)烷基氨基；N，N-二-低級(jí)烷基氨基；N-苯基-低級(jí)烷基-N-低級(jí)烷基氨基；N，N-二-低級(jí)烷基苯基氨基；低級(jí)烷?；被T如乙?；被?；或選自苯甲?；被捅交?低級(jí)烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情況下的苯基均是未取代的或者被硝基或者氨基取代，或者還被鹵素、氨基、N-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷?；蛘弑话被柞；〈?。
還特別優(yōu)選如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是0-2，優(yōu)選1；n是0或1；m是1或者特別是0；A、B、D和E均為CH或CQ且T是N或者A、B、T和E均為CH或CQ且D是N或者A、B和D均為CH或CQ且E和T均為N；Q優(yōu)選與A、與D或者與A和D連接，并且選自鹵素、尤其是氟、氯或溴；低級(jí)烷基、尤其是甲基或乙基或丙基；羥基；低級(jí)烷氧基、尤其是甲氧基或乙氧基；2-羥基乙氧基；2-甲氧基乙氧基；(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基或羥基亞氨基甲基；低級(jí)烷?；?，諸如乙?；蚣柞；?；低級(jí)烷基巰基，諸如甲基巰基或氨基；N-低級(jí)烷基氨基，諸如N-甲基氨基或N-乙基氨基、N-正丙基-或N-異丙基氨基；2-氰基乙基氨基；3-(甲氧基苯基)氨基；3-(4-嗎啉基)丙基氨基；3-(吡啶基)甲基氨基；2-(2-吡啶基)乙基氨基；4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基；4-(三氟甲氧基苯基)氨基)；(甲基氨基磺?；?氨基；(甲基磺酰基)氨基；(四氫-2H-吡喃-4-基)氨基；(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基氨基；(四氫-3-呋喃基)氨基；(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基或羥基-低級(jí)烷基氨基，諸如2-羥基乙基氨基或(2-甲氧基乙基)甲基氨基；2-(2-羥基乙氧基)乙基氨基；螺烷，包括1，4-二氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸-8-基；取代或未取代的雜環(huán)基，諸如1-氮雜環(huán)丁烷基、3-乙氧基羰基-1-氮雜環(huán)丁烷基或3-羧基-1-氮雜環(huán)丁烷基；或者四氫-2H-1，3-嗪基；二氫-1，2，5-噻嗪-5(6H)-基；四氫-1(2H)-嘧啶基)；3-(乙?；臍?-1(2H)-嘧啶基；哌嗪基；4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪基；4-(乙氧基羰基)-1-哌嗪基；4-乙酰基-1-哌嗪基；或者尤其是哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羥基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺?；?1-哌啶基、(四氫-2H-吡喃-4-基)氧基或者尤其是4-嗎啉基、3，5-二甲基嗎啉基或2-苯基-4-嗎啉基；R是H或低級(jí)烷基，尤其是H或甲基；X是-NR-、-O-或-S-，尤其是-NH-；Y是未取代的或者被選自下列的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的取代基所取代的苯基氨基；低級(jí)烷酰基氨基、尤其是乙酰基氨基；鹵素、尤其是氟、氯或溴；低級(jí)烷基、尤其是叔丁基或甲基、乙基或丙基；鹵代-低級(jí)烷基、尤其是三氟甲基；羥基；低級(jí)烷氧基、尤其是甲氧基或乙氧基；苯基-低級(jí)烷氧基、尤其是芐氧基；和氰基或者(與前述取代基二者擇一地或額外地)低級(jí)鏈烯基，諸如乙烯基、C8-12烷氧基、尤其是N-癸氧基；低級(jí)烷氧基羰基，諸如叔丁氧基羰基；氨基甲?；坏图?jí)烷基氨基甲?；?，諸如N-甲基-或N-叔丁基-氨基甲酰基；低級(jí)烷?；T如乙?；槐交趸?；鹵代-低級(jí)烷氧基，諸如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙基氧基；低級(jí)烷氧基羰基，諸如乙氧基羰基；低級(jí)烷基巰基，諸如甲基巰基；鹵代-低級(jí)烷基巰基，諸如三氟甲基巰基；羥基-低級(jí)烷基，諸如羥基甲基或1-羥基甲基；低級(jí)烷基磺?；?，諸如甲磺酰基；鹵代-低級(jí)烷基磺?；T如三氟甲磺?；?；苯基磺?；欢u基硼(-B(OH)2)；2-甲基-嘧啶-4-基；唑-5-基；2-甲基-1，3-二氧戊環(huán)-2-基；1H-吡唑-3-基；1-甲基-吡唑-3-基；和連接到兩個(gè)相鄰碳原子上的低級(jí)亞烷基二氧基，諸如亞甲基二氧基，尤其是被一個(gè)或兩個(gè)選自下列的取代基所取代鹵素、諸如氯或溴；低級(jí)烷基，諸如甲基；和鹵代-低級(jí)烷基，諸如三氟甲基或Y是吡啶基，尤其是3-吡啶基或Y尤其是苯基；2-、3-或4-氨基苯基；2-、3-或4-乙?；被交?；2-、3-或4-氟苯基；2-、3-或4-氯苯基；2-、3-或4-溴苯基；2，3-、2，4-、2，5-或3，4-二氯苯基；氯-氟-苯基，諸如3-氯-4-氟-苯基；或4-氯-2-氟苯氨基；2-、3-或4-甲基苯基；2-、3-或4-乙基苯基；2-、3-或4-丙基苯基；甲基-氟-苯基，諸如3-氟-4-甲基苯基；2-、3-或4-三氟甲基苯基；2-、3-或4-羥基苯基；2-、3-或4-甲氧基苯基；2-、3-或4-乙氧基苯基；甲氧基-氯-苯基，諸如3-氯-4-甲氧基羰基；2-、3-或4-芐氧基苯基；2-、3-或4-氰基苯基；或2-、3-或4-吡啶基或者Y特別是4-氯苯基；2-、3-或4-甲基苯基；4-氯-5-三氟甲基苯基；3-溴-5-三氟甲基苯基或者Y尤其是3，5-二甲基苯基；或者尤其是4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基、3-溴-4-乙基-苯基或3-氯芐基苯基；Z是氨基；N-低級(jí)烷基氨基，諸如N-甲基氨基；羥基-低級(jí)烷基氨基，諸如2-羥基乙基氨基；苯基-低級(jí)烷基氨基，諸如芐基氨基；N，N-二-低級(jí)烷基氨基；N-苯基-低級(jí)烷基-N-低級(jí)烷基氨基；N，N-二-低級(jí)烷基苯基氨基；低級(jí)烷?；被?，諸如乙?；被?；或選自苯甲?；被捅交?低級(jí)烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情況下的苯基均是未取代的或者尤其被硝基或者被氨基取代，或者還被鹵素、氨基、N-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷酰基或者被氨基甲?；〈蛘遉是鹵素，尤其是溴；特別是氨基、乙?；被?、硝基苯甲?；被?、氨基苯甲?；被?-羥基乙基氨基、芐氧基羰基氨基或溴。
特別優(yōu)選如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是1；n是0；m是0；B、D、E和T是CH或CQ且A是N(3-吡啶基)，或者尤其是A、B、D和E均為CH或CQ且T是N(4-吡啶基)；Q是選自下列的優(yōu)選在一個(gè)、或者也可以是兩個(gè)碳原子上的取代基鹵素、尤其是氟或氯；低級(jí)烷基、尤其是甲基或乙基或丙基；氨基、N-低級(jí)烷基氨基，諸如N-甲基氨基或N-乙基氨基、N-正丙基-或N-異丙基氨基；或2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基或3-(4-嗎啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺?；?氨基、(甲基磺?；?氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氫-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基；或羥基-低級(jí)烷基氨基，諸如2-羥基乙基氨基、2-(2-羥基乙氧基)乙基氨基、取代或未取代的雜環(huán)基、尤其是四氫-1(2H)-嘧啶基)；或3-(乙酰基四氫)-1(2H)-嘧啶基；或哌嗪基、4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪基、4-(乙氧基羰基)-1-哌嗪基、4-乙?；?1-哌嗪基；或尤其是哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羥基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺?；?1-哌啶基；或者尤其是4-嗎啉基、3，5-二甲基嗎啉基或2-苯基-4-嗎啉基；R是H或低級(jí)烷基、尤其是H或甲基；X是-NR-、尤其是-NH-；Y是未取代的或者被選自下列的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的取代基所取代的苯基鹵素、尤其是氟，特別是氯或溴；低級(jí)烷基、尤其是甲基；異丙基和叔丁基；和鹵代-低級(jí)烷基、尤其是三氟甲基、4-氯苯基、2-、3-或4-甲基苯基、4-氯-5-三氟甲基苯基、3-溴-5-三氟甲基苯基，或者特別是3，5-二甲基苯基；或4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基或3-溴-4-乙基-苯基。
還特別優(yōu)選如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是1；n是0-2；m是0；
A、B、D和E均為CH或CQ且T是N；Q是選自下列的在一個(gè)碳原子上的取代基氨基、N-低級(jí)烷基氨基，諸如N-甲基氨基或N-乙基氨基、N-正丙基-或N-異丙基氨基；或2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基、3-(4-嗎啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺?；?氨基、(甲基磺?；?氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氫-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基；或羥基-低級(jí)烷基氨基，諸如2-羥基乙基氨基、2-(2-羥基乙氧基)乙基氨基、取代或未取代的雜環(huán)基、尤其是哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羥基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺?；?1-哌啶基；或者最優(yōu)選嗎啉基；R是H；X是-NR-、尤其是-NH-；并且Y是未取代的或者被下列基團(tuán)所取代的苯基鹵素、尤其是氯、或低級(jí)烷基，諸如甲基或三氟甲基或異丙基；或尤其是叔丁基；低級(jí)烷氧基、尤其是甲氧基，諸如4-氯苯基、4-甲氧基苯基或4-三氟甲氧基苯基；萘基；未取代的或者被低級(jí)烷基、尤其是被叔丁基取代的環(huán)己基，諸如4-叔丁基-環(huán)己基；未取代的或者被鹵素、尤其是被氟取代的吲哚基，尤其是6-氟吲哚-3-基；或低級(jí)烷基、尤其是異戊基。
特別是還優(yōu)選如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是1；n是0；m是0；
A、B、D和E均為CH且T是N；R是H；X是-NH-；Y是被一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的選自鹵素和低級(jí)烷基的取代基所取代的苯基。特別優(yōu)選其中的Y是在4-位上被叔丁基或三氟甲基取代的苯基的化合物；并且Q是選自嗎啉基的在一個(gè)碳原子上的取代基。
本發(fā)明的另一種令人感興趣的實(shí)施方案是式(I)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽 其中n是0-2；r是0-2；m是0-4；J是二環(huán)雜芳族環(huán)系，諸如吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、異苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、色烯基和嘌呤基；Q是在二環(huán)環(huán)系的任一個(gè)或兩個(gè)環(huán)上并且在二環(huán)環(huán)系的任一個(gè)或兩個(gè)環(huán)上的一個(gè)或兩個(gè)碳原子上的取代基，其選自鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)基、氨基、單-或二-取代的氨基；R是H或低級(jí)烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基；Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環(huán)烷基或取代或未取代的雜環(huán)烷基；并且Z是氨基、單-或二-取代的氨基、鹵素、烷基、取代的烷基、羥基、醚化的或酯化的羥基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷?；?、氨基甲?；?、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯基-低級(jí)烷硫基、烷基苯硫基、苯基亞磺?；⒈交?低級(jí)烷基亞磺?；?、烷基苯基亞磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低級(jí)烷基磺?；蛲榛交酋；?，并且其中，如果存在一個(gè)以上的基團(tuán)Z(m≥2)，則取代基Z相同或不同。
本發(fā)明的另一種令人感興趣的實(shí)施方案是式(I)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中n是0；r是0；m是0；J是二環(huán)雜芳族環(huán)系，諸如吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、異苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、色烯基和嘌呤基；R是H或低級(jí)烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基；并且
Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環(huán)烷基或取代或未取代的雜環(huán)烷基。
本發(fā)明的另一種令人感興趣的實(shí)施方案是式(I)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中n是0；r是0；m是0；J是異喹啉基；X是NH；并且Y是取代或未取代的芳基、尤其是叔丁基苯基、尤其是4-叔丁基苯基。
本發(fā)明的化合物可通過本領(lǐng)域已知的關(guān)于其它化合物的制備方法來制得，尤其可通過下列方法制得a)將式(II)化合物 其中r、m、A、B、D、E、T、Q和Z如式(Ia)化合物所定義；并且M是離核的離去基團(tuán)，與式(III)化合物反應(yīng) 其中n、R、X和Y如式(I)化合物所定義，式(II)和式(III)化合物中不參與反應(yīng)的官能團(tuán)是被保護(hù)的形式，如果需要的話，將存在的任何保護(hù)基團(tuán)除去，其中，如果存在成鹽基團(tuán)并且能夠以鹽的形式反應(yīng)的話，在方法a)中提到的起始化合物還可以是鹽的形式；并且，如果需要的話，將式(I)化合物或其N-氧化物轉(zhuǎn)化成不同的式(I)化合物或其N-氧化物，將游離的式(I)化合物或其N-氧化物轉(zhuǎn)化成鹽，將所形成的式(I)化合物或其N-氧化物的鹽轉(zhuǎn)化成游離化合物或者轉(zhuǎn)化成不同的鹽，和/或?qū)⑹?I)化合物或其N-氧化物的異構(gòu)體混合物轉(zhuǎn)化成單獨(dú)的異構(gòu)體。
方法的詳細(xì)描述下面更詳細(xì)地描述了制備方法，其中r、n、m、A、B、D、E、T、Q、R、X、Y和Z如式(Ia)化合物所定義，除非另有說明。
方法a)在式(II)化合物中，離核的離去基團(tuán)M尤其是鹵素，特別是溴、碘，或者特別是氯。
式II化合物和式(III)化合物之間的反應(yīng)在適當(dāng)?shù)亩栊詷O性溶劑、尤其是醇例如低級(jí)醇、諸如甲醇、丙醇或者特別是乙醇或正丁醇中進(jìn)行；或者在沒有加入溶劑的熔化物中進(jìn)行，尤其是當(dāng)反應(yīng)物之一是液體形式時(shí)。反應(yīng)在升高的溫度下、優(yōu)選在約60℃至回流溫度的溫度下、例如在回流條件下或者在約90℃至約110℃的溫度下進(jìn)行。還可以將式(III)化合物以鹽的形式、例如以與強(qiáng)酸諸如氫鹵酸所形成的酸加成鹽的形式、例如以鹽酸鹽的形式使用；或者可在適當(dāng)?shù)娜軇?、例如醚諸如二烷中加入相應(yīng)的酸例如HCl。
或者，式(II)化合物和式(III)化合物之間的反應(yīng)還可以在適當(dāng)?shù)亩栊詷O性溶劑、尤其是醚例如四氫呋喃(THF)中進(jìn)行；或者在沒有加入溶劑的熔化物中進(jìn)行，尤其是如果反應(yīng)物之一是以液體形式存在的話。反應(yīng)在升高的溫度下、優(yōu)選在約80℃至140℃在加壓試管中進(jìn)行。可將式(III)化合物以鹽的形式、例如以與強(qiáng)堿、諸如氫氧化鉀或氫化鈉所形成的堿加成鹽的形式使用。
當(dāng)式(II)和/或(III)化合物中的一種或多種其它官能團(tuán)例如羧基、羥基、氨基或巰基以被保護(hù)的形式存在或者必須以被保護(hù)的形式存在(因?yàn)椴恍枰鼈儏⑴c反應(yīng))時(shí)，所述保護(hù)基是在肽化合物的合成中常用的那些基團(tuán)，但也可以是頭孢菌素和青霉素以及核酸衍生物和糖類的合成中通常使用的基團(tuán)。保護(hù)基可早已存在于前體中，以保護(hù)所述的官能團(tuán)不發(fā)生不需要的副反應(yīng)諸如?；⒚鸦?、酯化、氧化、溶劑分解等。存在于原料中的應(yīng)避免其發(fā)生反應(yīng)的官能團(tuán)、尤其是羧基、氨基、羥基和巰基的保護(hù)基尤其包括在肽化合物、頭孢菌素、青霉素或核酸衍生物和糖類的合成中通常使用的那些保護(hù)基(常規(guī)保護(hù)基)。保護(hù)基可早已存在于前體中，以保護(hù)所述的官能團(tuán)不發(fā)生不需要的副反應(yīng)諸如?；⒚鸦?、酯化、氧化、溶劑分解等。在某些情況下，保護(hù)基可使反應(yīng)選擇性地、例如立體選擇性地進(jìn)行。保護(hù)基的特征在于它們可以很容易地通過例如溶劑分解、通過還原、通過光解或酶化作用、例如在類似于生理?xiàng)l件的條件下除去，也就是說沒有不需要的副反應(yīng)，并且它們不存在于終產(chǎn)物中。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道或者可容易地找到適于上下文提到的反應(yīng)的保護(hù)基。
利用保護(hù)基對官能團(tuán)進(jìn)行保護(hù)、保護(hù)基本身和除去它們的反應(yīng)記載于例如標(biāo)準(zhǔn)著作，諸如Protective Groups in Organic Chemistry，McOmie，Ed.，Plenum Press，London & NY(1973)；Protective Groups in OrganicSynthesis，第3版，Greene，Ed.，Wiley，NY(1999)；The Peptides；第3卷，Gross和Meienhofer，Eds.，Academic Press，London & NY(1981)；Methoden der organischen Chemie，Houben Wely，第4版，15/I卷，GeorgThieme Verlag，Ed.，Stuttgart(1974)；Aminosuren，Peptide，Proteine，Jakubke和Jescheit，Eds.，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach和Basle(1982)；和Chemie der KohlenhydrateMonosaccharide undDerivate，Jochen Lehmann，Ed.，Georg Thieme Verlag，Stuttgart(1974)。
實(shí)施例中所提到的保護(hù)基優(yōu)選按照類似于上述方法的方法引入并在需要時(shí)除去。
其它方法步驟在如果需要的條件下所進(jìn)行的附加反應(yīng)步驟中，起始化合物中的不參與反應(yīng)的官能團(tuán)以未保護(hù)的形式存在，或者以被保護(hù)的形式存在，例如通過方法a)中提到的一種或多種保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)。然后將所有的或某些保護(hù)基通過方法a)提到的方法之一除去。
含有成鹽基團(tuán)的式(I)化合物或其N-氧化物的鹽類可通過本領(lǐng)域已知的方法制得。例如式(I)化合物或其N-氧化物的酸加成鹽例如可通過用酸或適當(dāng)?shù)年庪x子交換試劑處理來得到。還可以將含有兩個(gè)酸分子的鹽類、例如式(I)化合物或其N-氧化物的二鹵化物轉(zhuǎn)化成每個(gè)式(I)化合物或其N-氧化物含有一個(gè)酸分子的鹽類、例如轉(zhuǎn)化成一鹵化物；這可以例如通過加熱至熔融態(tài)或者例如通過在高真空及升高的溫度例如130-170℃下以固體形式加熱從而使每分子的式(I)化合物或其N-氧化物排出一分子的酸來實(shí)現(xiàn)。
可將鹽類按照常規(guī)方式例如通過用適當(dāng)?shù)膲A性試劑、例如用堿金屬碳酸鹽、碳酸氫鹽或氫氧化物例如碳酸鉀或氫氧化鈉處理而轉(zhuǎn)化成游離化合物。
可將立體異構(gòu)體混合物例如非對映體的混合物按照本領(lǐng)域已知的方式通過適當(dāng)?shù)姆蛛x方法分離成相應(yīng)的異構(gòu)體。例如，可將非對映異構(gòu)體混合物通過分步結(jié)晶、色譜、溶劑分配等分離成單獨(dú)的非對映異構(gòu)體。分離可以在原料之一的階段進(jìn)行，或者在式(I)化合物的階段進(jìn)行。可將對映體通過非對映異構(gòu)體鹽的形成來進(jìn)行分離，例如通過與對映體純手性酸形成鹽，或者通過色譜法例如通過色譜、例如HPLC在帶有手性配體的色譜載體物料上進(jìn)行分離。
式(I)化合物可轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的N-氧化物。反應(yīng)用適當(dāng)?shù)难趸瘎?yōu)選過氧化物例如間氯過苯甲酸在適當(dāng)?shù)娜軇├琨u代烴諸如氯仿或二氯甲烷中或者在低級(jí)烷烴羧酸諸如乙酸中、優(yōu)選在0℃至反應(yīng)混合物的沸騰溫度下、尤其是大約在室溫下進(jìn)行。
式(I)化合物或其N-氧化物(其中Z是低級(jí)烷酰基氨基)可水解成相應(yīng)的氨基化合物(Z＝氨基)，例如通過用無機(jī)酸、尤其是HCl在水溶液(還可以加入另外的溶劑)中優(yōu)選在升高的溫度下例如在回流下進(jìn)行水解。
其中Z是被一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的選自低級(jí)烷基、羥基-低級(jí)烷基和苯基-低級(jí)烷基的基團(tuán)所取代的氨基的式(I)化合物或其N-氧化物可例如通過與低級(jí)烷基鹵化物、羥基-低級(jí)烷基鹵化物(如果需要的話其羥基被保護(hù)，參見方法a)或苯基-低級(jí)烷基鹵化物在類似于方法a)提到的反應(yīng)條件下進(jìn)行反應(yīng)而轉(zhuǎn)化成在氨基上被相應(yīng)取代的化合物。對于氨基Z上的2-羥基-低級(jí)烷基取代基的引入，還可以進(jìn)行從環(huán)氧化物例如環(huán)氧乙烷開始的加成。加成尤其在水溶液中和/或在極性溶劑諸如醇類例如甲醇、乙醇、異丙醇或乙二醇；醚類諸如二烷；酰胺諸如二甲基甲酰胺；或酚類諸如苯酚的存在下進(jìn)行；還可以在無水條件下在非極性溶劑諸如苯和甲苯中或者在苯/水乳液中任選地在酸或堿催化劑的存在下例如在堿性溶液諸如氫氧化鈉溶液的存在下或者在摻雜肼的固相催化劑諸如氧化鋁的存在下、在醚例如二乙醚中通常在約0℃至所述反應(yīng)混合物的沸騰溫度下、優(yōu)選在20℃至回流溫度下、適當(dāng)時(shí)在升高的壓力下例如在高壓試管中進(jìn)行，從而可以超過沸騰溫度，和/或在惰性氣體諸如氮?dú)饣驓鍤庀逻M(jìn)行。還可以用低級(jí)烷烴醛、苯基-低級(jí)烷烴醛或羥基-低級(jí)烷烴醛(如果需要的話，將其羥基進(jìn)行保護(hù))還原烷基化氨基Z。還原烷基化優(yōu)選與氫化一起在催化劑、尤其是貴金屬催化劑諸如鉑或者尤其是鈀(其優(yōu)選與載體物質(zhì)諸如碳相結(jié)合)或重金屬催化劑諸如阮內(nèi)鎳的存在下在常壓下或者在0.1-10兆帕(MPa)的壓力下進(jìn)行；或者通過復(fù)合氫化物諸如硼氫化物、尤其是堿金屬氰基硼氫化物例如氰基硼氫化鈉在適宜的酸、優(yōu)選相對弱的酸諸如低級(jí)烷烴羧酸或者尤其是磺酸諸如對甲苯磺酸的存在下、在常規(guī)溶劑例如醇諸如甲醇或乙醇或醚例如環(huán)狀醚諸如THF中在不存在或存在水的條件下進(jìn)行還原。
在式(I)化合物或其N-氧化物中，氨基Z可通過?；D(zhuǎn)化成被低級(jí)烷酰基、苯甲?；?、取代的苯甲?；蛘弑槐交?低級(jí)烷氧基羰基取代的氨基，其中的苯基是未取代的或取代的。相應(yīng)的酸含有游離的羧基，或者是其反應(yīng)性酸衍生物的形式、例如衍生的活化酯或反應(yīng)性酸酐的形式，或者是反應(yīng)性環(huán)狀酰胺。反應(yīng)性酸衍生物還可原位形成。活化酯尤其是在待酯化的基團(tuán)的連接碳原子部位呈不飽和的酯，例如乙烯基酯類型，諸如乙烯基酯，例如它可通過相應(yīng)酯與乙酸乙烯酯的酯交換或活化乙烯基酯的方法得到；氨基甲?；?，例如它可通過用異唑試劑、1，2-唑處理相應(yīng)的酸得到或者通過Woodward方法得到；或1-低級(jí)烷氧基乙烯基酯，例如它可通過用低級(jí)烷氧基乙炔處理相應(yīng)的酸得到或者通過乙氧基乙炔方法得到；或者脒基類型的酯，諸如N，N′-二取代的脒基酯，例如它可通過用適當(dāng)?shù)腘，N′-二取代的碳二亞胺、例如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺或者尤其是N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺處理相應(yīng)的酸得到，或者通過碳二亞胺方法得到；或者N，N-二取代的脒基酯，例如它可通過用N，N-二取代的氰酰胺處理相應(yīng)的酸得到，或者通過氰酰胺方法得到；適當(dāng)?shù)姆蓟?、尤其是被親電取代基適當(dāng)取代的苯基酯，例如它可通過用適當(dāng)取代的苯酚例如4-硝基苯酚、4-甲基磺?；椒?、2，4，5-三氯苯酚、2，3，4，5，6-五氯苯酚或4-苯基重氮基苯酚在縮合劑諸如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺的存在下處理相應(yīng)的酸得到，或者通過活化芳基酯的方法得到；氰基甲酯，例如它可通過用氯乙腈在堿的存在下處理相應(yīng)的酸得到，或者通過氰基甲酯方法得到；硫代酸酯、尤其是未取代或取代的，例如硝基-取代的苯硫基酯，例如它可通過用未取代的或取代的、例如硝基取代的苯硫酚處理相應(yīng)的酸得到，或者通過酸酐或碳二亞胺方法或活化硫醇酯的方法得到；或者尤其是氨基或酰氨基酯，例如它可通過用N-羥基氨基或N-羥基酰氨基化合物例如N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基哌啶、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺、1-羥基苯并三唑或3-羥基-3，4-二氫-1，2，3-苯并三嗪-4-酮處理相應(yīng)的酸得到，例如通過酸酐或碳二亞胺方法得到，或者通過活化的N-羥基酯的方法得到。還可使用內(nèi)酯例如γ-內(nèi)酯。酸的酸酐可以是對稱的，或者優(yōu)選這些酸的混合型酸酐，例如與無機(jī)酸所形成的酸酐，諸如酰鹵、尤其是酰氯，例如它可通過用亞硫酰氯、五氯化磷、光氣或草酰氯處理相應(yīng)的酸得到，或者通過酰氯法得到；疊氮化物，例如它可以從相應(yīng)的酸酯通過相應(yīng)的酰肼并且用亞硝酸對其進(jìn)行處理來得到，或者通過疊氮化物法得到；與碳酸半酯，例如碳酸低級(jí)烷基半酯、尤其是氯甲酸甲酯所形成的酸酐，例如它可通過用氯甲酸低級(jí)烷基酯或者用1-低級(jí)烷氧基羰基-2-低級(jí)烷氧基-1，2-二氫喹啉處理相應(yīng)的酸得到，或者通過混合型O-烷基碳酸酐方法得到；或者與二鹵代的、尤其是二氯化的磷酸所形成的酸酐，例如它可通過用三氯氧化磷處理相應(yīng)的酸得到，或者通過三氯氧化磷方法得到；與其它磷酸衍生物所形成的酸酐，例如可通過用N-苯基氨基氯代磷酸苯酯得到的酸酐，或者通過將烷基磷酰胺在磺酸酐和/或減少外消旋的添加劑諸如N-羥基苯并三唑的存在下或者在氰基磷酸二乙酯的存在下反應(yīng)來得到；或者與磷酸衍生物或有機(jī)酸所形成的酸酐，諸如與有機(jī)羧酸所形成的混合型酸酐，例如它可通過用未取代的或取代的低級(jí)烷烴-或苯基-低級(jí)烷烴-羧酸鹵化物例如苯基乙酸、新戊酸或三氟乙酰氯處理相應(yīng)的酸得到，或者通過混合型羧酸酐方法得到；或者與有機(jī)磺酸所形成的酸酐，例如它可通過用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)磺酰鹵諸如低級(jí)烷烴-或芳基-磺酰氯、例如甲磺酰氯或?qū)妆交酋Ｂ忍幚硐鄳?yīng)酸的鹽諸如堿金屬鹽來得到，或者通過混合型磺酸酐方法得到；以及對稱酸酐，例如它可通過在碳二亞胺或1-二乙基氨基丙炔的存在下縮合相應(yīng)的酸來得到，或者通過對稱酸酐方法得到。適當(dāng)?shù)沫h(huán)狀酰胺尤其是帶有芳香性的5-元二氮雜環(huán)的酰胺，諸如帶有咪唑的酰胺，例如咪唑，例如它可通過用N，N′-羰基二咪唑處理相應(yīng)的酸得到，或者通過咪唑法得到；或者吡唑，例如3，5-二甲基吡唑，例如它可經(jīng)酰基肼通過用乙?；幚淼玫剑蛘咄ㄟ^吡唑酰胺法得到。如上所述，用作?；瘎┑聂人嵫苌镞€可原位形成。例如，N，N′-二取代的脒基酯可通過將式(I)的原料與用作?；瘎┑乃岬幕旌衔镌谶m當(dāng)?shù)腘，N′-二取代的碳二亞胺例如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺或者尤其是N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺的存在下反應(yīng)來原位得到。此外，用作?；瘎┑乃岬陌被蝓０被タ梢栽诖；氖?I)的原料的存在下通過將相應(yīng)酸和氨基原料的混合物在N，N′-二取代的碳二亞胺例如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺和N-羥基胺或N-羥基酰胺例如N-羥基琥珀酰亞胺的存在下、任選地在適宜堿例如4-二甲基氨基吡啶的存在下反應(yīng)來得到。此外，活化可通過與N，N，N′，N′-四烷基脲化合物諸如O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽、O-(1，2-二氫-2-氧代-1-吡啶基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸鹽(在不存在或存在1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯-(1，5，5)的條件下)或O-(3，4-二氫-4-氧代-1，2，3-苯并三唑啉-3-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸鹽反應(yīng)而原位完成。最后，羧酸的磷酸酐可以通過將烷基磷酸酰胺諸如六甲基磷酸三酰胺在磺酸酐諸如4-甲苯磺酸酐的存在下與鹽諸如四氟硼酸鹽例如四氟硼酸鈉反應(yīng)，或者與六甲基磷酸三酰胺的不同的衍生物諸如苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲基氨基)六氟化、優(yōu)選在減少外消旋的添加劑諸如N-羥基苯并三唑的存在下反應(yīng)而原位制得。如果需要的話，加入有機(jī)堿、優(yōu)選叔胺例如三-低級(jí)烷基胺，尤其是乙基二異丙基胺，或者更優(yōu)選三乙基胺和/或雜環(huán)堿例如4-二甲基氨基吡啶，或者優(yōu)選N-甲基嗎啉或吡啶?？s合反應(yīng)優(yōu)選在惰性、非質(zhì)子、優(yōu)選無水溶劑或溶劑混合物中進(jìn)行，例如在羧酸酰胺例如甲酰胺或二甲基甲酰胺；鹵代烴例如二氨甲烷、四氯化碳或氯苯；酮例如丙酮；環(huán)狀醚例如THF或二烷；酯例如乙酸乙酯或腈例如乙腈或其混合物中，適當(dāng)時(shí)在降低或升高的溫度下，例如在約-40℃至約+100℃、優(yōu)選約-10℃至約+70℃的溫度范圍內(nèi)(在使用芳基磺酰基酯的情況下，還可以在約+100-200℃的溫度下)、尤其是在10-30℃的溫度下，適當(dāng)時(shí)在惰性氣氛例如氮或氬氣氛下進(jìn)行。還可以使用含水溶劑例如醇溶劑例如乙醇；或芳烴溶劑例如苯或甲苯。
式(I)化合物中的硝基Z可還原成氨基，例如通過用金屬還原或選擇性氫化還原；例如通過與硫酸鎂/硫酸銨在水/醇混合物諸如甲醇/水中在升高的溫度下、例如在30-60℃下反應(yīng)(參見Synth Commun，Vol.25，No.2，pp.4025-4028(1995))；通過與鋅/硼氫化物在酰胺諸如二甲基甲酰胺中、在低于室溫的溫度下例如在約0℃下反應(yīng)；通過與1，1′-二辛基-4，4′-聯(lián)吡啶二溴化物/連四硫酸鈉/碳酸鉀在水/鹵代烴混合物例如水/二氯甲烷混合物中、在升高的溫度下、例如在25-35℃下反應(yīng)(參見Tetrahedron Lett，Vol.34，No.46，pp.7445-7446(1993))；與硼氫化鈉在氯化物形式的AmberlyteIRA-400離子交換劑上在醇諸如甲醇/水中、在0-40℃的優(yōu)選溫度下反應(yīng)(參見Synth Commun，Vol.19，Nos.5/6，pp.805-811(1989))；與硼氫化鉀在鹵代烴/醇混合物例如二氯甲烷/甲醇中在10-35℃的優(yōu)選溫度下反應(yīng)(參見Synth Commun，Vol.19，No.17，pp.3047-3050(1989))；與硼氫化鈉在二烷中反應(yīng)；與硼烷在THF中反應(yīng)；通過在Pd/C的存在下在醇中在0-35℃的優(yōu)選溫度下并且在甲酸銨的存在下氫化(參見Tetrahedron Lett，Vol.25，No.32，pp.3415-3418(1989))；與四氯化鈦/氫化鋁鋰或四氯化鈦/鎂在醚諸如THF中反應(yīng)(參見Bull Chem Soc Belg，Vol.97，No.1，pp.51-53(1988))；或者與氯化鐵銨/水在升高的溫度下、優(yōu)選在回流下反應(yīng)。參見Synth.Commun，Vol.22，pp.3189-3195(1992)。
一般方法的條件本文中提到的所有的方法步驟均可以在本領(lǐng)域已知的反應(yīng)條件、優(yōu)選在具體提到的反應(yīng)條件下、在不存在或者通常是存在溶劑或稀釋劑、優(yōu)選對于所用的試劑呈惰性并且是該試劑的溶劑的溶劑或稀釋劑的條件下、在不存在或者存在催化劑、縮合劑或中和劑例如離子交換劑諸如陽離子交換劑(例如以H+的形式)的條件下，并且根據(jù)反應(yīng)和/或反應(yīng)物的性質(zhì)，在降低的溫度、常溫或升高的溫度下、例如在約-100℃至約190℃、優(yōu)選約-80℃至約150℃的溫度下、例如在-80℃至-60℃、在室溫下、在-20℃至40℃或者在所用的溶劑的沸點(diǎn)下、在常壓下或者在封閉容器中、適當(dāng)時(shí)在加壓下和/或在惰性氣氛例如氬氣或氮?dú)夥障逻M(jìn)行。
在存在成鹽基團(tuán)的情況下，在所有的原料和中間體化合物中都可以存在鹽。在所述化合物的反應(yīng)過程中也可存在鹽，條件是不會(huì)因此而影響反應(yīng)。
在反應(yīng)的所有階段，所形成的異構(gòu)體混合物均可分離成單獨(dú)的異構(gòu)體例如非對映體或?qū)τ丑w，或者分離成任何所需的異構(gòu)體的混合物例如外消旋體或非對映異構(gòu)體混合物，例如采用類似于在“附加的反應(yīng)步驟”中所述的方法進(jìn)行分離。
在某些情況下，例如在氫化反應(yīng)的情況下，可以進(jìn)行立體選擇性反應(yīng)，從而例如更易于得到單獨(dú)的異構(gòu)體。
適于進(jìn)行特定反應(yīng)的溶劑包括例如水；酯諸如低級(jí)鏈烷酸低級(jí)烷基酯例如乙酸乙酯；醚諸如脂肪醚例如二乙醚或環(huán)狀醚例如THF；液態(tài)芳烴諸如苯或甲苯；醇諸如甲醇、乙醇或1-或2-丙醇；腈諸如乙腈；鹵代烴諸如二氯甲烷；酰胺諸如二甲基甲酰胺；堿諸如氮雜環(huán)堿例如吡啶；羧酸諸如低級(jí)烷烴羧酸例如乙酸；羧酸酐諸如低級(jí)鏈烷酸酐例如乙酸酐；環(huán)狀、直鏈或支鏈烴諸如環(huán)己烷、己烷或異戊烷或這些溶劑的混合物例如水溶液，除非在方法的描述中另有說明。所述的溶劑混合物還可用于后處理，例如色譜或分配。
本發(fā)明還涉及其中將在任何階段以中間體形式得到的化合物用作原料并且進(jìn)行剩余步驟的方法的那些形式，或者該方法在任何階段被中斷，或者原料在反應(yīng)條件下形成或以反應(yīng)性衍生物或鹽的形式使用，或者將可通過本發(fā)明的方法得到的化合物在所述方法條件下制得并且原位進(jìn)一步加工處理。優(yōu)選使用可產(chǎn)生上述優(yōu)選的、尤其是特別優(yōu)選的、更優(yōu)選的和/或非常優(yōu)選的化合物的那些原料。
式(I)化合物或其N-氧化物的制備優(yōu)選按照與實(shí)施例中所述的方法和工藝步驟相類似的方法進(jìn)行。
式(I)化合物或其N-氧化物、包括其鹽還可以以水合物的形式得到，或者它們的晶體可包含例如用于結(jié)晶的溶劑(以溶劑化物的形式存在)。
藥物組合物、方法和用途本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包含作為活性成分的式(I)化合物或其N-氧化物并且尤其可用于治療開始所提到的疾病。特別優(yōu)選可用于腸內(nèi)諸如鼻內(nèi)、口腔、直腸或者尤其是口服和非腸道、諸如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下給藥于溫血?jiǎng)游?、尤其是人的組合物。所述的組合物包含活性成分本身，或者優(yōu)選還含有可藥用載體?；钚猿煞值膭┝咳Q于待治療的疾病和物種、其年齡、重量和個(gè)體條件、個(gè)體藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)和給藥方式。
本發(fā)明還涉及用于預(yù)防性地或者尤其是治療性地治療人或動(dòng)物體的方法的藥物組合物、其制備方法(尤其是以用于治療腫瘤的組合物的形式)以及治療上述疾病、尤其是腫瘤疾病、特別是上述的那些疾病的方法。
本發(fā)明還涉及式(I)化合物或其N-氧化物用于制備藥物組合物的方法和用途，所述藥物組合物包含作為活性組分(活性成分)的式(I)化合物或N-氧化物。
優(yōu)選適宜給藥于患有其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的疾病、尤其是腫瘤疾病、特別是黑素瘤的溫血?jiǎng)游?、尤其是人或商用哺乳?dòng)物的藥物組合物，該組合物以有效抑制RAF激酶、特別是突變型RAF激酶的量包含式(I)化合物或其N-氧化物或其可藥用鹽(當(dāng)存在成鹽基團(tuán)時(shí))和至少一種可藥用載體。
還優(yōu)選用于預(yù)防性地或者尤其是治療性地治療需要進(jìn)行治療、尤其是患有所述疾病的溫血?jiǎng)游铩⒂绕涫侨嘶蛏逃貌溉閯?dòng)物的腫瘤疾病和其它增殖性疾病的藥物組合物，該組合物以有效地預(yù)防或者尤其是治療上述疾病的量包含作為活性成分的新的式(I)化合物或其N-氧化物或其可藥用鹽。
藥物組合物包含約1％至約95％的活性成分，單一劑量形式的劑型優(yōu)選包含約20％至約90％活性成分，非單一劑量形式的劑型優(yōu)選包含約5％至約20％的活性成分。單位劑型是例如糖衣丸、片劑、安瓿、小瓶、栓劑或膠囊。其它劑型是例如軟膏劑、乳膏、糊劑、泡沫、酊劑、唇膏劑、滴劑、噴霧劑、分散劑等。例子是包含約0.05g至約1.0g活性成分的膠囊。
本發(fā)明的藥物組合物按照本領(lǐng)域已知的方式例如通過常規(guī)混合、造粒、調(diào)味、溶解或冷凍干燥方法制得。
優(yōu)選使用活性成分的溶液，但也可以使用混懸液或分散液，尤其是等滲的水溶液、分散液或混懸液，其中，例如在單獨(dú)含有活性物質(zhì)或者還含有載體例如甘露糖醇的冷凍干燥的組合物的情況下，可以在臨用前制備這些制劑。藥物組合物可以是滅菌的和/或包含賦形劑例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑和/或乳化劑、增溶劑、用于調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑，并且按照本領(lǐng)域已知的方式制得，例如通過常規(guī)的溶解或冷凍干燥過程制得。所提到的溶液或混懸液可包含增加粘度的物質(zhì)諸如羧基甲基纖維素鈉、羧基甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮或明膠或增溶劑例如Tween 80[聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇一油酸酯；美國ICI Americas，Inc.的商標(biāo)]。
油懸浮液包括通常用于注射目的植物油、合成或半合成油作為油成分?？商岬接绕涫且簯B(tài)脂肪酸酯，它包含作為酸成分的帶有8-22個(gè)碳原子、尤其是12-22個(gè)碳原子的長鏈脂肪酸，例如月桂酸、十三酸、豆蔻酸、十五酸、棕櫚酸、十七酸、硬脂酸、花生酸、二十二酸或相應(yīng)的不飽和酸例如油酸、反油酸、芥酸、巴西烯酸或亞油酸，任選地加入抗氧化劑例如維生素E、β-胡蘿卜素或3，5-二-叔丁基-4-羥基甲苯。這些脂肪酸酯的醇成分具有最多6個(gè)碳原子，并且是單羥基或多羥基例如單羥基、二羥基或三羥基醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇或它們的異構(gòu)體，但尤其是乙二醇和甘油?？商岬降闹舅狨サ睦右虼耸怯退嵋阴?、豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、″Labrafil M 2375″(聚氧化乙烯甘油三油酸酯，Gattefossé，Paris)、″Labrafil M 1944 CS″(通過杏仁油的醇解制得的不飽和的聚乙二醇化的甘油酯，并且由甘油酯和聚乙二醇酯所組成；Gattefossé，F(xiàn)rance)、″Labrasol″(通過TCM的醇解制得的飽和的聚乙二醇化的甘油酯，并且由甘油酯和聚乙二醇酯所組成；Gattefossé，F(xiàn)rance)和/或″Miglyol 812″(鏈長度為C8-12的飽和脂肪酸的甘油三酯，Hüls AG，Germany)，但尤其是植物油諸如棉子油、杏仁油、橄欖油、蓖麻油、芝麻油、大豆油，更優(yōu)選花生油。
注射組合物的制備按照常規(guī)方式在無菌條件下進(jìn)行，也可以將其引入例如安瓿或小瓶中，然后將容器密封。
用于口服給藥的藥物組合物可以例如通過以下方法得到將活性成分與一種或多種固體載體相混合、將所形成的混合物造粒，適當(dāng)時(shí)加工處理該混合物或顆粒，如果需要的話，適當(dāng)時(shí)將其它賦形劑加入到片劑或糖衣丸的核芯中。
適當(dāng)?shù)妮d體尤其是填料諸如糖類例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；纖維素制品和/或磷酸鈣例如磷酸三鈣或磷酸氫鈣；以及粘合劑諸如淀粉，例如玉米、小麥、水稻或馬鈴薯淀粉、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮；和/或，如果需要的話，崩解劑諸如以上提到的淀粉和羧甲基淀粉；交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、藻酸或其鹽諸如藻酸鈉。另外的賦形劑尤其是流動(dòng)調(diào)節(jié)劑和潤滑劑例如硅酸、滑石、硬脂酸或其鹽諸如硬脂酸鎂或鈣和/或聚乙二醇或其衍生物。
可以在糖衣丸的核芯上提供適當(dāng)?shù)摹⑷芜x為腸溶的包衣，可以使用濃的糖溶液，其可含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈦，或者使用在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑或溶劑混合物中的包衣溶液，或者為了制備腸溶包衣，可以使用適當(dāng)?shù)睦w維素制劑諸如乙?；w維素鄰苯二甲酸酯或羥丙甲基纖維素鄰苯二甲酸酯的溶液?？蓪⒅珓┗蝾伭霞尤氲狡瑒┗蛱且峦璋轮?，例如為了鑒別的目的或者為了表示活性成分的不同劑量。
用于口服給藥的藥物組合物還可以是硬明膠膠囊和軟密封膠囊，軟密封膠囊由明膠和增塑劑諸如甘油或山梨糖醇組成。硬明膠膠囊可含有顆粒形式的活性成分，例如與填料諸如玉米淀粉、粘合劑和/或助流劑諸如滑石或硬脂酸鎂以及任選的穩(wěn)定劑的混合物。在軟膠囊中，將活性成分優(yōu)選溶解或者懸浮在適當(dāng)?shù)囊后w賦形劑諸如脂肪油、石蠟油或液態(tài)聚乙二醇或乙二醇或丙二醇的脂肪酸酯中，其中還可加入穩(wěn)定劑和洗滌劑例如聚氧化乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯類型的洗滌劑。
適當(dāng)?shù)闹蹦c給藥的藥物組合物是例如由活性成分和栓劑基質(zhì)的混合物組成的栓劑。適宜的栓劑基質(zhì)是例如天然的或合成的甘油三酸酯、石蠟烴、聚乙二醇或高級(jí)醇。
對于非腸道給藥，可以是適當(dāng)?shù)挠绕涫撬苄孕问嚼缢苄喳}形式的活性成分的水溶液，或者是含水的注射混懸液，其包含增加粘度的物質(zhì)例如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇和/或葡聚糖；以及，如果需要的話，穩(wěn)定劑。活性成分、任選地與賦形劑一起，還可以是冷凍干燥物的形式，并且可以在非腸道給藥之前通過加入適宜的溶劑而制成溶液。
所用的溶液例如用于非腸道給藥的溶液還可用作輸液制劑。
優(yōu)選的防腐劑是例如抗氧化劑諸如抗壞血酸或殺微生物劑諸如山梨酸或苯甲酸。
本發(fā)明尤其涉及治療其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的病理學(xué)狀態(tài)、尤其是對RAF激酶的抑制有響應(yīng)的疾病、尤其是相應(yīng)的腫瘤疾病的方法?？蓪⑹?I)化合物或其N-氧化物本身或者以藥物組合物的形式、優(yōu)選以有效治療上述疾病的量預(yù)防性地或治療性地施用于需要所述治療的溫血?jiǎng)游锢缛?，所述化合物尤其是以藥物組合物的形式使用。在體重約為70kg的情況下，給藥的日劑量是約0.1g至約5g、優(yōu)選約0.5g至約2g本發(fā)明的化合物。
用于各個(gè)具體病例的優(yōu)選劑量、藥物制劑(藥物)的組成和制備如上所述。
原料所用的原料和所選擇的反應(yīng)條件優(yōu)選是得到優(yōu)選的上述化合物的原料和反應(yīng)條件。
式(II)和(III)的原料是已知的，可以通過本領(lǐng)域已知的方法制得，或者是可購買的；它們尤其可通過與實(shí)施例所述的相類似的方法制得。
在原料的制備中，如果需要的話，所存在的不參與反應(yīng)的任何官能團(tuán)均可以是被保護(hù)的形式。優(yōu)選的保護(hù)基、它們的引入及其除去記載于方法a)或?qū)嵤├?。除所述的原料和中間體外，如果存在成鹽基團(tuán)并且所述的反應(yīng)能夠用鹽來進(jìn)行的話，還可以將其鹽進(jìn)行反應(yīng)。因此，如果適當(dāng)并且可能的情況下，上下文所指的原料還包括它們的鹽。
Negishi反應(yīng)方案 Negishi，King和Okukado，J Org Chem，Vol.42，pp.1821-1823(1977)和Stanforth，Tetrahedron Lett，Vol.54，Nos.3/4，pp.263-303(1998)。
關(guān)于上述方案的各個(gè)步驟，步驟1涉及將式(IV)化合物在鈀介導(dǎo)的兩種適宜的偶聯(lián)試劑的交叉偶聯(lián)反應(yīng)中、優(yōu)選在Negishi條件下進(jìn)行反應(yīng)。式(IV)化合物的鈀介導(dǎo)的偶聯(lián)在下列物質(zhì)的存在下進(jìn)行1)有機(jī)金屬試劑，優(yōu)選有機(jī)鋰試劑諸如正丁基鋰；2)鹵化鋅諸如溴化鋅；3)鈀試劑諸如四(三苯基膦)-鈀(0)；4)適當(dāng)?shù)呐悸?lián)試劑，諸如表2中定義的J-Q的溴化物、氯化物、碘化物或三氟甲磺酸酯；和5)有機(jī)溶劑，優(yōu)選醚，更優(yōu)選環(huán)狀醚諸如THF，在-78℃至25℃的溫度下，優(yōu)選在-78℃下反應(yīng)10分鐘至48小時(shí)。
步驟2涉及式(II)化合物與式(III)化合物的反應(yīng) 其中n、R、X和Y如式(I)化合物中所定義，如果需要的話，式(II)和式(III)化合物中未參與反應(yīng)的官能團(tuán)是被保護(hù)的形式，然后將存在的任何保護(hù)基團(tuán)除去，其中如果存在成鹽基團(tuán)并且能夠以鹽的形式進(jìn)行反應(yīng)的話，在方法a)中提到的起始化合物還可以是鹽的形式；
并且，如果需要的話，將所形成的式(Ia)化合物或其N-氧化物轉(zhuǎn)化成不同的式(Ia)化合物或其N-氧化物，將游離的式(Ia)化合物或其N-氧化物轉(zhuǎn)化成鹽，將所形成的式(Ia)化合物或其N-氧化物的鹽轉(zhuǎn)化成游離化合物或者轉(zhuǎn)化成不同的鹽，和/或?qū)⑹?Ia)的異構(gòu)體化合物或其N-氧化物的混合物轉(zhuǎn)化成單獨(dú)的異構(gòu)體。
式(II)化合物和式(III)化合物之間的反應(yīng)在適當(dāng)?shù)亩栊詷O性溶劑、尤其是醇例如低級(jí)醇、諸如甲醇、丙醇或者特別是乙醇或正丁醇中進(jìn)行；或者在沒有加入溶劑的熔化物中進(jìn)行，尤其是當(dāng)反應(yīng)物之一是液體形式時(shí)。反應(yīng)在升高的溫度下、優(yōu)選在約60℃至回流溫度的溫度下、例如在回流條件下或者在約60℃-110℃的溫度下進(jìn)行。還可以將式(III)化合物以鹽的形式、例如以與強(qiáng)酸諸如鹵化氫所形成的酸加成鹽的形式、例如以鹽酸鹽的形式使用；或者在適當(dāng)?shù)娜軇?、例如醚諸如二烷中加入相應(yīng)的酸例如HCl。
或者，式(II)化合物和式(III)化合物之間的反應(yīng)還可以在適當(dāng)?shù)亩栊詷O性溶劑、尤其是醚例如四氫呋喃(THF)中進(jìn)行；或者在沒有加入溶劑的熔化物中進(jìn)行，尤其是如果反應(yīng)物之一以液體形式存在的話。反應(yīng)在升高的溫度下、優(yōu)選在約80℃至140℃下在加壓試管中進(jìn)行?？蓪⑹?III)化合物以鹽的形式、例如以與強(qiáng)堿、諸如氫氧化鉀或氫化鈉所形成的堿加成鹽的形式使用。
Suzuki反應(yīng)方案 步驟1涉及式(V)化合物與式(III)化合物的反應(yīng) 其中n、R、X和Y如式(I)化合物所定義，如果需要的話，式(V)和式(III)化合物中未參與反應(yīng)的官能團(tuán)是被保護(hù)的形式，然后將存在的任何保護(hù)基團(tuán)除去，其中如果存在成鹽基團(tuán)并且能夠以鹽的形式進(jìn)行反應(yīng)的話，在方法a)中提到的起始化合物還可以是鹽的形式。
式(V)化合物和式(III)化合物之間的反應(yīng)在適當(dāng)?shù)亩栊詷O性溶劑、尤其是醇例如低級(jí)醇、諸如甲醇、丙醇或者特別是乙醇或正丁醇中進(jìn)行；或者在沒有加入溶劑的熔化物中進(jìn)行，尤其是當(dāng)反應(yīng)物之一是液體形式時(shí)。反應(yīng)在升高的溫度下、優(yōu)選在約60℃至回流溫度的溫度下、例如在回流條件下或者在約60℃-110℃的溫度下進(jìn)行。還可以將式(III)化合物以鹽的形式、例如以與強(qiáng)酸諸如鹵化氫所形成的酸加成鹽的形式、例如以鹽酸鹽的形式使用；或者在適當(dāng)?shù)娜軇⒗缑阎T如二烷中加入相應(yīng)的酸例如HCl。
或者，式(V)化合物和式(III)化合物之間的反應(yīng)還可以在適當(dāng)?shù)亩栊詷O性溶劑、尤其是醚例如四氫呋喃(THF)中進(jìn)行；或者在沒有加入溶劑的熔化物中進(jìn)行，尤其是如果反應(yīng)物之一以液體形式存在的話。反應(yīng)在升高的溫度下、優(yōu)選在約80℃至140℃下在加壓試管中進(jìn)行?？蓪⑹?III)化合物以鹽的形式、例如以與強(qiáng)堿、諸如氫氧化鉀或氫化鈉所形成的堿加成鹽的形式使用。
步驟2涉及在親電鹵化劑、優(yōu)選苯基三甲基三溴化銨的存在下在惰性極性溶劑、優(yōu)選THF中、在0℃至溶劑的回流溫度的溫度下、優(yōu)選在室溫下將式(VI)化合物的異喹啉基母核鹵化、尤其是溴化1小時(shí)至24小時(shí)、優(yōu)選12小時(shí)以得到式(VII)化合物。
步驟3涉及硼酸中間體的制備。反應(yīng)在下述物質(zhì)的存在下進(jìn)行1)有機(jī)金屬試劑，優(yōu)選有機(jī)鋰試劑諸如正丁基鋰；2)親電硼源，諸如二(頻那醇)二硼或者諸如硼酸三烷基酯諸如硼酸三異丙酯；和3)極性有機(jī)溶劑，優(yōu)選醚，更優(yōu)選環(huán)狀醚諸如THF，在-78℃至25℃的溫度下，優(yōu)選在-78℃下反應(yīng)10分鐘至48小時(shí)、優(yōu)選4.5小時(shí)以得到式(VIII)化合物。
步驟4涉及鈀介導(dǎo)的兩種適當(dāng)?shù)呐悸?lián)試劑的交叉偶聯(lián)反應(yīng)，優(yōu)選在Suzuki條件下進(jìn)行。鈀介導(dǎo)的偶聯(lián)在下述物質(zhì)的存在下進(jìn)行1)適當(dāng)?shù)腟uzuki交叉偶聯(lián)試劑，諸如表2中所定義的J-Q的溴化物、氯化物、碘化物或三氟甲磺酸酯；2)鈀試劑，諸如四(三苯基膦)-鈀(0)或二氯化二(三苯基膦)-鈀(II)；3)堿，諸如碳酸鉀；和4)極性有機(jī)溶劑，諸如醚或二甲基甲酰胺，優(yōu)選在60℃下偶聯(lián)10分鐘至48小時(shí)以得到式(Ia)化合物，該化合物可以是終產(chǎn)物或中間體化合物。
如果A、B、E、D或T帶有離去基團(tuán)的話，式(Ia)化合物可充當(dāng)中間體化合物。在這種情況下，可與胺、氧或硫親核試劑反應(yīng)以置換離去基團(tuán)，形成式(Ia)的另一種最終化合物。該合成包括式(Ia)化合物(其中Q包含反應(yīng)基團(tuán))與式(Q-H)化合物(其中Q選自O(shè)R2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R)在適當(dāng)?shù)亩栊詷O性溶劑、尤其是醇例如低級(jí)醇諸如甲醇、丙醇或者尤其是乙醇或正丁醇中或者在沒有加入溶劑的熔化物中發(fā)生反應(yīng)，尤其是如果反應(yīng)物之一以液體形式存在的話。反應(yīng)在升高的溫度下、優(yōu)選在約60℃至回流溫度的溫度下、例如在回流條件下或者在約90℃至約110℃的溫度下進(jìn)行?？蓪⑹?Q)化合物以鹽的形式、例如以與強(qiáng)酸諸如鹵化氫所形成的酸加成鹽的形式、例如以鹽酸鹽的形式使用。
或者，以上所定義的式(Ia)化合物和式(Q-H)化合物之間的反應(yīng)還可以在適當(dāng)?shù)亩栊詷O性溶劑、尤其是醚例如THF中進(jìn)行，或者在沒有加入溶劑的熔化物中進(jìn)行，尤其是如果反應(yīng)物之一以液體形式存在的話。反應(yīng)在升高的溫度下、優(yōu)選在約80℃至140℃下在加壓試管中進(jìn)行?？蓪⑹?III)化合物以鹽的形式、例如以與強(qiáng)堿、諸如氫氧化鉀或氫化鈉所形成的堿加成鹽的形式使用。
其它原料是已知的，可以通過本領(lǐng)域已知的方法制得，或者是可購買的，或者尤其可通過與實(shí)施例所述的相類似的方法制得。
以下實(shí)施例用于解釋本發(fā)明但并不限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺將(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-異喹啉-1-基]-胺溶于二乙醚(3mL)和2，4-二氯嘧啶(117mg，0.785mmol)，然后加入K2CO3(291mg，2.141mmol)并將溶液脫氣10分鐘。加入約10mg Pd(PPh3)4并將混合物于60℃在攪拌下加熱過夜。向混合物中加入水，然后用二乙醚萃取。將溶液通過硅膠墊，然后通過蒸發(fā)濃縮。向濃縮液中加入1mL嗎啉，然后在80℃下加熱過夜。將混合物旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)并通過制備型TLC和制備型HPLC純化(35-65％CH3CN/水，含0.1％TFA)。將殘余物溶于乙酸乙酯，用飽和NaHCO3、鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥。除去溶劑得到棕色固體(6mg)。M+H+＝458.25。
1H NMR(300MHz)(DMSO)；δ1.31(s，9H)，3.70(m，4H)，3.77(m，4H)，7.02(d，1H，J＝5.14Hz)，7.38(d，2H，J＝8.44Hz)，7.59(m，1H)，7.72(d，2H，J＝8.80Hz)，8.30(m，2H)，8.47(d，1H，J＝5.14Hz)，8.72(dd，1H，J＝5.87，9.17Hz)，9.51(s，1H)。
原料按照以下方法制得1a)1-氯-6-氟-異喹啉將6-氟-2H-異喹啉-1-酮(1.3g，7.97mmol)(其制備可參見PCT/GB02/00514和WO 02/062816)在CH3CN(20mL)和POCl3(3.7g，23.9mmol)中形成懸浮液。滴加4N HCl(2mL)的二烷(2mL)溶液。將形成的混合物于50℃在攪拌下加熱過夜。將反應(yīng)混合物倒入飽和NaHCO3溶液中并用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層濃縮得到橙色固體(1.1g，78％)。M+H+＝181.8。
1H NMR(300MHz)(CDCl3)；δ7.42(m，2H)，8.26(m，3H)。
1b)(4-叔丁基-苯基)-(6-氟-異喹啉-1-基)-胺將1-氯-6-氟-異喹啉(1g，6.13mmol)溶于n-BuOH(20mL)和4-叔丁基-苯胺(1.1g，6.74mmol)。滴加4N HCl(1mL)的二烷(1mL)溶液。將形成的混合物在80℃下加熱過夜。將混合物旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將殘余物溶于乙酸乙酯，用飽和NaHCO3、鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥。除去溶質(zhì)，真空濃縮后將有機(jī)層進(jìn)一步通過硅膠柱純化(己烷90％至10％乙酸乙酯/己烷)得到黃色固體(900mg，56％)。M+H+＝295.3。
1H NMR(300MHz)(DMSO)；δ1.29(s，9H)，7.13(d，1H，J＝6Hz)，7.34(d，2H，J＝8.67Hz)，7.50(m，1H)，7.60(dd，1H，J＝2.64，9.8Hz)，7.72(d，2H，8.67Hz)，7.96(d，1H，5.65Hz)，8.61(dd，1H，J＝5.46，9.23Hz)，9.16(s，1H)。
1c)(4-溴-6-氟-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺將(4-叔丁基-苯基)-(6-氟-異喹啉-1-基)-胺(2.17g，7.37mmol)溶于THF(30mL)。在0℃下分批加入PhMe3NBr3(2.93g，7.81mmol)。蒸發(fā)THF并將形成的固體溶于二氯甲烷和水(均為200mL)。將有機(jī)層用水(50mL，兩次)和鹽水(50mL，一次)洗滌。分離出有機(jī)相，用Na2SO4干燥，真空濃縮得到淺棕色固體(2.75g，99％)。M+H+＝375.2。
1H NMR(300MHz)(DMSO)；δ1.29(s，9H)，7.36(d，2H，J＝8.67Hz)，7.65(dd，4H，J＝7.35，8.85Hz)，8.17(s，1H)，8.70(dd，1H，J＝5.27，9.42Hz)，9.38(s，1H)。
1d)(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-異喹啉-1-基]-胺將(4-溴-6-氟-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(500mg，1.34mmol)溶于DMF(10mL)。加入二(頻那醇)二硼(748mg，2.93mmol)和KOAc(391mg，4.019mmol)。將溶液用N2脫氣10分鐘。加入[(CH5H4P(C6H5)2)2Fe]PdCl2然后于80℃在攪拌下加熱過夜。將水(10mL)加入到混合物中，然后用乙醚萃取。將乙醚層通過硅膠墊，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到棕色固體。M+H+＝421.3。該固體不經(jīng)進(jìn)一步純化即可用于制備實(shí)施例1。
實(shí)施例2[4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-(3-三氟甲基氧基-苯基)-胺向1-氯-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉(0.06g，1.84×10-4m)的正丁醇(30mL)溶液中加入間三氟甲氧基苯胺(0.10g，5.65×10-4m)和一滴濃HCl。將混合物在100℃下加熱7小時(shí)，然后冷卻至室溫。將混合物真空濃縮，然后溶于二氯甲烷(75mL)。將有機(jī)相用碳酸氫鈉的飽和溶液、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，然后濃縮得到淺橙色油。將該油通過快速色譜純化(SiO2己烷/乙酸乙酯)。收集淺黃色油并用己烷結(jié)晶，m.p.105-106℃。CHN分析計(jì)算值％C61.67；％H4.31；％N14.98。實(shí)測值％C61.70；％H4.04；％N14.93。
原料按照以下方法制得
2a)2-甲硫基-尿嘧啶向冷卻至0-5℃的2-巰基尿嘧啶(78.00g，0.609mol)的水(160mL)和異丙醇(80mL)懸浮液中滴加30％氫氧化鈉溶液(48.7g，1.22mol水溶液，160mL)。在2小時(shí)內(nèi)滴加碘甲烷(41.7mL，0.669mol)的異丙醇(150mL)溶液。將混合物升溫至室溫并攪拌1小時(shí)。將混合物真空濃縮至一半的體積，冷卻至5℃，然后用濃HCl酸化至pH 6.5。將固體沉淀物通過過濾收集，用冷水洗滌，真空干燥得到70g白色固體(81％)。M+H1＝142。
1H NMR(DMSO)；δ12.8(bs，1H)，7.90(d，1H)，6.07(d，1H)，2.37(s，3H)。
2b)2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-醇向2-甲硫基尿嘧啶(4.0g，0.0281mol)中加入嗎啉(3.05g，0.035mol)。將混合物在145℃下加熱2小時(shí)，然后冷卻至室溫。將固體用乙醇結(jié)晶。收集白色的針狀物(2.0g)。第二批結(jié)晶約重0.50g(49％)。M+H1＝181。
1H NMR(CDCl3)；δ12.1(bs，1H)，7.85(d，1H)，5.79(d，1H)，3.75(m，8H)。
2c)4-(4-溴-嘧啶-2-基)-嗎啉將2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-醇(6.08g，33.6mmol)和三溴氧化磷(12.5g，43.7mmol)在330mL MeCN中的混合物加熱回流1小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫，濃縮至一半的體積，然后倒在冰上。將形成的混合物用飽和NaHCO3溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相用飽和NaCl(水溶液)洗滌，用無水MgSO4干燥，過濾，濃縮，然后干燥得到米白色固體(7.11g，87％)。M+H1＝245.97。
1H NMR(CDCl3)；δ8.05(d，1H)，6.70(d，1H)，3.75(m，8H)。
2d)4-溴-1-氯-異喹啉向4-溴異喹啉(52.08g，0.250mol)的二氯甲烷(600mL)溶液中加入間氯過苯甲酸(64.47g，0.250mol)。將混合物攪拌2.5小時(shí)。向混合物中加入1.5g間氯過苯甲酸并將混合物攪拌30分鐘。將溶液用1N NaOH、鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥。除去溶劑得到白色固體。將固體用熱丙酮結(jié)晶得到32.22g(57.6％)白色固體。1H，13C NMR與結(jié)構(gòu)一致。將N-氧化物(15.75g，0.0703mol)溶于氯仿(50mL)并在冰浴中冷卻。滴加三氯氧化磷(20mL)，然后將混合物升溫至室溫，然后加熱回流1.5小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，然后倒在冰上。將含水混合物用NaHCO3中和至pH 7-8，然后用氯仿萃取。將有機(jī)相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并除去溶劑。將殘余物通過快速色譜純化(SiO2/5％乙酸乙酯/己烷)。收集得到12.22g(72％)。M+H1＝389。
1H NMR；δ8.50(s，1H)，8.40(d，1H)，8.20(d，1H)，7.92(t，1H)，7.79(t，1H)。
2e)4-硼酸-1-氯-異喹啉向-74℃的4-溴-1-氯-異喹啉(1.25g，5.2mmol)的無水THF(30mL)溶液中在45分鐘內(nèi)滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液，2.3mL，5.7mmol)。滴加硼酸三異丙酯(1.4mL，6.1mmol)，然后將混合物在-74℃下攪拌2小時(shí)。升溫至室溫后，通過注射器用水終止反應(yīng)。濃縮含水混合物后，將反應(yīng)液用1NHCl(水溶液)酸化至pH約為1，得到白色固體。將固體產(chǎn)物通過過濾收集并干燥(760mg，71％)。M+H1＝207.9。
1H NMR(DMSO-d6)；δ8.72(bs，2H)，8.53(d，1H)，8.47(s，1H)，8.31(d，1H)，7.90(t，1H)，7.80(t，1H)。
2f)1-氯-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉在一個(gè)大的密封試管中將4-(4-溴-嘧啶-2-基)-嗎啉(3.7g，15.0mmol)(參見實(shí)施例2c)和4-硼酸-1-氯-異喹啉(6.2g，29.9mmol)溶于含有3mL EtOH的60mL乙二醇二甲基醚(DME)。加入Na2CO3(6.1g，57.8mmol)的20mL水溶液，然后將N2通入紅色的溶液中5分鐘。加入PdCl2(PPh3)2催化劑(2.1g，3.0mmol)，將混合物在95℃下加熱4.5小時(shí)。冷卻后，加入水，將產(chǎn)物用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層用飽和NaCl(水溶液)洗滌，用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。利用Biotage快速硅膠柱色譜純化，用10-20％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫得到白色固體狀產(chǎn)物(1.8g，37％)，m.p.180.5-180.6℃。M+H1＝327.1。
1H NMR(CDCl3)δ8.48(t，2H)，8.43(s，1H)，8.36(d，1H)，7.77(m，2H)，6.83(d，1H)，3.89(t，4H)，3.80(t，4H)。CHN分析計(jì)算值％C62.48，％H4.63，％N17.15，％Cl10.85。實(shí)測值％C62.32，％H4.58，％N16.99，％Cl10.81。將該固體用于制備實(shí)施例2。
實(shí)施例3(4-叔丁基-苯基)-{4-[2-(4-三氟甲基-哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-異喹啉-1-基}-胺向(4-叔丁基苯基)-[4-(2-氯嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]胺(0.07g，1.80×10-4m)的正丁醇(30mL)溶液中加入4-三氟甲基哌啶(0.07g，4.57×10-4m)和三乙基胺(0.50mL)。將混合物在100℃下加熱16小時(shí)，然后冷卻至室溫。將混合物真空濃縮，然后溶于二氯甲烷(75mL)。將有機(jī)相用碳酸氫鈉的飽和溶液、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，然后濃縮得到油狀物。將該油狀物通過快速色譜純化(SiO275％己烷/25％乙酸乙酯)。將淺黃色油狀物收集并用乙醚結(jié)晶，m.p.179-180℃。CHN分析計(jì)算值％C68.89；％H5.98；％N13.85。實(shí)測值％C68.91；％H5.73；％N13.73。
3a)(4-叔丁基-苯基)-異喹啉-1-基-胺向帶有磁力攪拌器的1L圓底燒瓶中加入100mL正丁醇和9.5mL(110.2mmol)濃HCl。向其中加入2-氯異喹啉(15.01g；91.74mmol)和16.6mL4-叔丁基苯胺(14.94g，100.1mmol)。將混合物在70℃下加熱3小時(shí)。真空蒸發(fā)正丁醇，然后將形成的糖漿狀混合物與戊烷混合。濾出所形成的白色固體并干燥。將該固體溶于乙酸乙酯和二氯甲烷，然后用碳酸氫鈉調(diào)至弱堿性。將有機(jī)層干燥并濃縮得到20g(78.9％)白色固體狀的(4-叔丁基-苯基)-異喹啉-1-基-胺。MS 277.2m+1(100％)。
1H NMR(DMSO)；δ8.08(d，1H)，7.90(d，3H)，7.72(d，1H)，7.57(m，4H)，7.37(d，2H)，1.32(s，9H)。
3b)(4-溴-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺在1L圓底燒瓶中將(4-叔丁基-苯基)-異喹啉-1-基-胺(18.7g，67.7mmol)與100mL THF混合，然后在冰浴中冷卻。在2小時(shí)內(nèi)向其中滴加溶于200mL THF的苯基三甲基三溴化銨(25.12g，66.47mmol)。將反應(yīng)液升溫至室溫過夜。將反應(yīng)混合物在攪拌下倒入2L己烷中。將該固體過濾，干燥并溶于二氯甲烷。將溶液用2×250mL飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，然后用1×250mL水洗滌。將有機(jī)溶液干燥并濃縮。將該固體與己烷混合，過濾，干燥得到近黃色固體狀的19.8g(82.3％)(4-溴-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺。MS 355M+(100％)。
1H NMR(DMSO)；δ8.23(s，1H)，8.08(d，1H)，7.73(t，1H)，7.56(m，3H)，7.38(d，2H)，7.07(bs，1H)，1.33(s，9H)。
3c)(4-硼酸-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基苯基)-胺向-74℃的(4-溴-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(10.3g，29.0mmol)的無水THF(130mL)溶液中在1小時(shí)內(nèi)滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液，30.0mL，75.0mmol)。滴加硼酸三異丙酯(8.0mL，34.7mmol)，然后將混合物在-74℃下攪拌4.5小時(shí)。升溫至室溫后，通過注射器用20mL水終止反應(yīng)。濃縮至含水混合物后，將反應(yīng)液用1N HC1(水溶液)酸化至pH約為1，得到白色固體。將固體產(chǎn)物通過過濾收集并干燥(6.74g，73％)。
1H NMR(DMSO-d6)；δ11.59(s，1H)，8.95(d，1H)，8.72(d，1H)，8.61(寬s)，8.01(t，1H)，7.82(t，1H)，7.76(s，1H)，7.62(d，2H)，7.50(d，2H)，1.36(s，9H)；MS 321.3m/z(M+H)。
3d)(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺在一個(gè)大的密封試管中將2，4-二氯嘧啶(1.54g，10.3mmol)和(4-硼酸-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(3.00g，9.37mmol)在45mL乙二醇DME中混合。加入PdCl2(PPh3)2催化劑(0.66g，0.94mmol)和3.0M Na2CO3水溶液(12.5mL，37.5mmol)，然后向溶液中通入N2氣泡5分鐘。然后將反應(yīng)混合物在85-90℃下加熱2.5小時(shí)。冷卻后，除去溶劑并將水(15mL)加入到該混合物中。將產(chǎn)物用CH2Cl2(3×200mL)萃取，用飽和NaCl(水溶液)(3×200mL)洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。將粗產(chǎn)物通過快速柱色譜純化(15-20％乙酸乙酯的己烷溶液)，然后用EtOAc/己烷重結(jié)晶得到純凈的綠色產(chǎn)物(1.81g，4.66mmol)，收率為50％。m.p.257.3-258.4℃。CHN分析計(jì)算值％C71.04，％H5.44，％N14.41，％Cl9.12。實(shí)測值％C70.80，％H5.60，％N14.35，％Cl8.99。
1H NMR(DMSO-d6)；δ9.58(s，1H)，8.80(d，1H)，8.64(d，1H)，8.50(d，1H)，8.35(s，1H)，7.90(d，1H)，7.82(t，1H)，7.76(d，2H)，7.71(t，1H)，7.39(d，2H)，1.31(s，9H)；MS 389.2，387.3m/z(M+H，M-H)。
實(shí)施例4[4，7’]聯(lián)異喹啉-1-基-(4-叔丁基-苯基)-胺將1-氯-[4，7′]聯(lián)異喹啉(5.0g，17.2mmol)、4-叔丁基苯胺(4.0mL，1.5當(dāng)量)和4.0M HCl/二烷(6.45mL/1.5當(dāng)量)的EtOH(100mL)懸浮液在80℃下在密封試管中攪拌20小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻，濃縮得到黃色油。向該油中加入EtOAc并用3N NaOH中和。分離出有機(jī)相，干燥(MgSO4)，然后濃縮得到粗產(chǎn)物。將該粗產(chǎn)物通過硅膠純化。依次用9∶1己烷/EtOAc和4∶1己烷/EtOAc洗脫。分離得到黃色固體狀純產(chǎn)物4.5g(65％)；m.p.217-219℃。
1H NMR(DMSO-d6)δ9.40(s，1H)，9.31(s，1H)，8.67(d，1H)，8.57(d，1H)，8.24(s，1H)，8.09(d，1H)，8.04(s，1H)，7.92(m，2H)，7.80(m，2H)，7.73(m，2H)，7.37(d，2H)，1.31(s，9H)；MS 404.21m/z(M+H)。
4a)1-氯-[4，7′]聯(lián)異喹啉將4-溴-1-氯異喹啉(參見實(shí)施例2d)(5.0g，20.7mmol)的150mL THF溶液冷卻至-78℃。滴加n-BuLi(1.6M的己烷溶液)(15mL，24mmol)并將反應(yīng)溫度維持在-78℃～-68℃。將反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌30分鐘。將ZnBr2(在80℃下真空干燥)(6.5g，24.9mmol)溶于50mL THF，然后在-78℃下將其緩慢轉(zhuǎn)移到上述混合物中。將溶液在-78℃下攪拌40分鐘，然后通過移去冷卻浴升溫至室溫。加入Pd(PPh3)4(2.4g，2.1mmol)，然后加入三氟甲磺酸異喹啉-7-基酯(5.7g，20.7mmol)的50mL THF溶液。將反應(yīng)混合物在60℃下加熱30分鐘，然后濃縮。將形成的油狀物溶于二氯甲烷，用飽和NaHCO3洗滌。分離出有機(jī)相，干燥(MgSO4)，濃縮得到黃色固體。將固體通過過濾收集，依次用乙醚和己烷洗滌，然后真空干燥。得到5.68g(94％)黃色固體。m.p.169.0-169.6℃。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.44(s，1H)；8.61(d，1H，J＝5.6Hz)；8.45-8.43(m，1H)；8.40(s，1H)；8.34(s，1H)；8.18(d，1H，J＝8.1Hz)；7.97-7.90(m，5H)ppm。API-MS，m/z 291.14([M+H]+，計(jì)算值291.06)。
實(shí)施例52-{4-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-異喹啉-4-基]-嘧啶-2-基氨基}-乙醇將(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺9(參見化合物3d)(20mg，0.0515mmol)和2-羥基乙基胺(50mg)溶于正丁醇，然后在80℃下在密封試管中加熱16小時(shí)。加入10mL DCM并將溶液用NH4Cl(10mL)、水和鹽水洗滌。進(jìn)行有機(jī)色譜(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到產(chǎn)物(21mg，99％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)；δ8.31(d，J＝9.0Hz，1H)，8.21(d，J＝6.0Hz，1H)，7.98(s，1H)，7.62(t，J＝6.0Hz，1H)，7.53(t，J＝6.0Hz，1H)，7.45(d，J＝9.0Hz，2H)，7.31(d，J＝9.0Hz，2H)，6.77(d，J＝6.0Hz，1H)，3.64(t，J＝6.0Hz，1H)，3.47(t，J＝6.0Hz，1H)，1.24(s，9H)。HRMS ESI m/z 414.2277(M+H+，C25H27ON5要求414.2294).HPLC，C18反相柱，梯度10-90％MeCN-H2O UV-250nM，保留時(shí)間9.41分鐘。
實(shí)施例6(4-叔丁基-苯基)-(4-喹唑啉-6-基-異喹啉-1-基)-胺在密封試管中將NaH(60％)(0.62g，15.52mmol)加入到4-叔丁基-苯胺(1.16g，7.76mmol)的75mL THF溶液中，然后在室溫下攪拌30分鐘。加入6-(1-氯-異喹啉-4-基)-喹唑啉(1.5g，5.18mmol)。將反應(yīng)混合物在80℃下加熱4小時(shí)。然后用水終止反應(yīng)。將反應(yīng)混合物用DCM萃取。將合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物用DCM和EtOAc重結(jié)晶得到0.8g黃色固體。將母液進(jìn)一步通過色譜純化(25-50％EA/H)得到0.5g黃色固體。通過NMR證明這兩種固體均為所需產(chǎn)物。收率是62％。將產(chǎn)物用NMR、MS、m.p進(jìn)行表征。
1H NMR(DMSO，500MHz)；δ9.68(s，1H)，9.35(s，1H)，9.32(s，1H)，8.66(d，J＝8.4771Hz，1H)，8.28(s，1H)，8.18-8.13(m，2H)，9.05(s，1H)，7.82-7.18(m，3H)，7.38(s，2H)，1.31(s，9H)；m.p.213-214.5℃。API-MS m/z405.15([M+H]+，計(jì)算值405.20)。
6a)6-碘喹唑啉向喹唑啉(2.1g，16.13mmol)的濃H2SO4(16mL)溶液中在0℃下加入NIS(5.4g，24mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌10分鐘，然后升溫至室溫并攪拌15小時(shí)。補(bǔ)加NIS(2.0g.8.9mmol)并將混合物繼續(xù)攪拌5小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒在碎冰(80g)上，然后攪拌1小時(shí)。將溶液過濾，用濃NH3水將pH調(diào)節(jié)至7，然后在0℃下繼續(xù)攪拌1小時(shí)，然后將其過濾，用冰冷的水洗滌。將固體風(fēng)干得到3.4g(87％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，DMSO)；δ9.57(s，1H)，9.43(s，1H)，8.65(s，1H)，8.29(d，J＝8.0Hz，1H)，7.81(d，J＝8.0Hz，1H)，MS ESI m/z 256M+H+，C6H3IN4。
6b)6-(1-氯-異喹啉-4-基)-喹唑啉將4-溴-1-氯-異喹啉(參見化合物2d)(4.74g，19.52mmol)的300mLTHF溶液冷卻至-72℃。滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液)(9.37mL，23.42mmol)并將反應(yīng)溫度在-70℃～-68℃下維持30分鐘。將ZnBr2(4.84mg，21.47mmol)溶于50mL THF，然后在-70℃下將其緩慢轉(zhuǎn)移到上述混合物中。將溶液在-70℃下攪拌20分鐘，然后升溫至室溫。將Pd(PPh3)4(2.25g，1.95mmol)和6-碘喹唑啉(5g，19.52mmol)的4mL THF溶液按順序滴加到反應(yīng)混合物中。然后將反應(yīng)混合物在60℃下加熱30分鐘，然后在室溫下保持過夜。將反應(yīng)混合物用NH4Cl終止反應(yīng)，然后用乙酸乙酯萃取。通過過濾收集白色固體(4.0g)。將有機(jī)溶液用飽和NH4Cl、鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥。將溶液濃縮至有白色固體從溶液中析出。將該固體通過過濾收集，用乙醚洗滌并真空干燥。得到1.53g固體。收率是97.6％。
1H NMR(DMSO，400MHz)；δ9.73(s，1H)，9.40(s，1H)，8.48-8.44(m，1H)，8.42(s，1H)，8.40(s，1H)，8.21(s，3H)，7.96-7.9(m，3H)。API-MS m/z292.02([M+H]+，計(jì)算值292.06)。
實(shí)施例7[4，7′]聯(lián)異喹啉-1-基-(2-叔丁基-嘧啶-5-基)-胺在密封試管中將NaH(60％的油狀液)(0.60g，15.2mmol)加入到5-氨基-2-叔丁基嘧啶(1.14g，7.6mmol)的75mL THF溶液中，然后在室溫下攪拌30分鐘。然后一次性加入1-氯-[4，7′]聯(lián)異喹啉(參見化合物4a)(2.0g，6.9mmol)。將反應(yīng)液在110℃下加熱18小時(shí)，冷卻，用水終止反應(yīng)，然后真空除去揮發(fā)物。將殘余物溶于DCM，用水和鹽水洗滌。將有機(jī)相用硫酸鈉干燥，真空除去揮發(fā)物。將殘余物通過硅膠色譜純化(25-50％EtOAc的己烷溶液)得到1.53g(55％)淺黃色固體；m.p.231.1-232.0℃。
1H NMR(300MHz，CDCl3)；δ9.34(s，1H)；9.19(s，2H)；8.60(d，1H，J＝5.7Hz)；8.09-8.13(m，3H)；7.98(d，1H，J＝8.3Hz)；7.83-7.91(m，2H)；7.77(d，1H，J＝5.7Hz)；7.68-7.71(m，2H)；7.15(s，1H)；1.48(s，9H)ppm。API-MS，m/z 406.15([M+H]+，計(jì)算值406.19)。
實(shí)施例8(4-叔丁基-2-氟-苯基)-[4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺按照實(shí)施例2所述的方法將4-叔丁基-2-氟-苯基胺偶聯(lián)到1-氯-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉上API-MS，m/z 458.50([M+H]+，計(jì)算值458.22)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.51(d，1H，J＝7.54Hz)，8.42(m，2H)，8.36(s，1H)，8.02(d，1H，J＝7.91Hz)，7.70(m，1H)，7.63(m，1H)，7.46(d，1H，J＝3.01Hz)，7.21(m，2H)，6.84(d，1H，J＝5.27Hz)，3.89(m，4H)，3.80(t，4H，J＝4.71Hz)1.33(s，9H)。
8a)N-(4-叔丁基-2-氟-苯基)-乙酰胺將N-(4-叔丁基-苯基)-乙酰胺(191mg，1mmol)和1-氯甲基-4-氟-1，4-二氮雜二環(huán)[2.2.2]辛烷二-(四氟硼酸鹽)(355mg，1mmol)的乙腈(10mL)溶液在N2氣氛下回流16小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻并真空除去揮發(fā)物。將殘余物用CH2Cl2(20mL)稀釋，用H2O(10mL)、飽和NaHSO4(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，然后用Na2SO4干燥。將干燥劑過濾并真空除去揮發(fā)物。將殘余物通過硅膠色譜純化(5％EtOAc的己烷溶液)得到白色結(jié)晶狀的70mg N-(4-叔丁基-2-氟-苯基)-乙酰胺；mp 163.5-164.7℃。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.02(t，1H，J＝8.02Hz)，7.46(br s，1H)，7.05-6.97(m，2H)，2.12(s，3H)，1.20(s，9H)。
8b)4-叔丁基-2-氟-苯基胺將N-(4-叔丁基-2-氟-苯基)-乙酰胺(70mg，0.33mmol)溶于EtOH(2mL)和1N HCl(10mL，0.01mmol)，然后加熱回流72小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫并真空除去揮發(fā)物。將留下的水溶液用1×5mL Et2O洗滌，用飽和NaHCO3堿化，用3×5mL CH2Cl2萃取。將有機(jī)萃取液合并，然后用Na2SO4干燥。除去揮發(fā)物得到30mg(54％)黃色油狀產(chǎn)物4-叔丁基-2-氟-苯基胺。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.00(m，1H)，6.94(m，1H)，6.71(m，1H)，3.59(br s，2H)，1.26(s，9H)。
實(shí)施例9(6-叔丁基-吡啶-3-基)-[4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺按照實(shí)施例2所述的方法將6-叔丁基-吡啶-3-基胺偶聯(lián)到1-氯-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉上API-MS，m/z 441.44([M+H]+，計(jì)算值441.23)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.72(d，1H，J＝2.64Hz)，8.51(d，1H，J＝7.91Hz)，8.43(d，1H，J＝4.90Hz)，8.32(s，1H)，8.24(dd，1H，J＝8.48，2.83Hz)，8.03(d，1H，J＝8.29Hz)，7.72(t，1H，J＝7.16Hz)，7.63(t，1H，J＝6.97Hz)，7.39(d，1H，J＝8.67Hz)，7.28(s，1H)，6.83(d，1H，J＝4.90Hz)，3.84(m，8H)，1.40(s，9H)。
9a)N′-(6-叔丁基-吡啶-3-基)-肼鹽酸鹽將N′-(6-叔丁基-吡啶-3-基)-肼二甲酸叔丁酯(Tet.Lett.2000，41，3025-3028)(2.45g，6.7mmol)的異丙醇(100mL)和4.0M HCl/二烷(16.7mL，67mmol)溶液加熱回流18小時(shí)，然后冷卻并用乙醚(200mL)研制。將沉淀出的產(chǎn)物過濾，用25mL無水乙醚洗滌，然后干燥得到淺黃色固體狀的1.2g(88％)標(biāo)題化合物；mp 210.1-212.6℃。API-MS，m/z 166.18([M+H]+，計(jì)算值166.13)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.45(d，1H，J＝2.53Hz)，8.08(dd，1H，J＝9.10，2.53Hz)，7.93(d，1H，J＝9.1Hz)，1.44(s，9H)。
9b)6-叔丁基-吡啶-3-基胺將鋅粉(3.13g，48mmol)一次性加入到N′-(6-叔丁基-吡啶-3-基)-肼鹽酸鹽(1.2g，6.0mmol)的甲醇(30mL)和4M HCl/二烷(12mL，48mmol)溶液中，然后將該溶液在室溫下攪拌2天，直至消耗盡原料肼。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)物，然后將殘余物用40mL 28％氨水處理。然后將產(chǎn)物用乙醚(3×30mL)萃取，與鹽水一起振蕩，用Mg2SO4干燥并過濾。除去揮發(fā)物得到橙色固體狀的0.802g(89％)產(chǎn)物；mp 61.5-62.7℃。API-MS，m/z 151.16([M+H]+，計(jì)算值151.11)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.07(d，1H，J＝2.64Hz)，7.12(d，1H，J＝8.29Hz)，6.94(dd，1H，J＝8.48，2.83Hz)，3.55(s，2H)，1.32(s，9H)。
實(shí)施例10[4，7′]聯(lián)異喹啉-1-基-(6-叔丁基-吡啶-3-基)-胺按照實(shí)施例7所述的方法將6-叔丁基-吡啶-3-基胺偶聯(lián)到1-氯-[4，7′]聯(lián)異喹啉上。API-MS，m/z 405.17([M+H]+，計(jì)算值405.20)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.32(s，1H)，8.80(s，1H)，8.59(d，1H，J＝5.65Hz)，8.33(d，1H，J＝5.63Hz)，8.13(s，2H)，8.08(s，1H)，7.96(d，1H，J＝8.69)，7.85(m，2H)，7.75(d，1H，J＝5.65Hz)，7.67(m，2H)，7.41(d，1H，J＝8.67)，1.41(s，9H)。
實(shí)施例11[4，7′]聯(lián)異喹啉-1-基-(5-異丙烯基-吡啶-2-基)-胺將5-異丙烯基-吡啶-2-基胺與1-氯-[4，7′]聯(lián)異喹啉按照實(shí)施例7所述的方法反應(yīng)。
11a)2-(6-氟-吡啶-3-基)-丙-2-醇將5-溴-2-氟-吡啶(5.0g，28.4mmol)的乙醚(300mL)溶液冷卻至-78℃，然后在攪拌下滴加2.5M n-BuLi的己烷溶液(11.9mL，29.8mmol)。將反應(yīng)繼續(xù)攪拌15分鐘，然后滴加丙酮(10.4mL，142mmol)。將反應(yīng)液升溫至室溫，然后用飽和NH4Cl(5mL)終止反應(yīng)。將反應(yīng)液用飽和NH4Cl(50mL)、H2O(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，然后用MgSO4干燥。將干燥劑過濾，真空除去揮發(fā)物得到澄清油狀的4.1g(93％)產(chǎn)物2-(6-氟-吡啶-3-基)-丙-2-醇。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.32(d，1H，J＝2.26)，7.93(m，1H)，6.89(dd，1H，J＝8.85，2.83)，1.26(s，6H)。
11b)2-氟-5-異丙烯基-吡啶將2-(6-氟-吡啶-3-基)-丙-2-醇(8.3g，53.5mmol)和p-TSA一水合物(0.46g，2.7mmol)的甲苯(500mL)溶液用Dean-Stark分離器和冷凝器回流至收集到理論量的水。然后將反應(yīng)液冷卻，用飽和NaHCO3(3×50mL)萃取。除去揮發(fā)物得到淡黃色油狀的7.30g(99％)產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.21(d，1H，J＝2.53)，7.77(m，1H)，6.81(dd，1H，J＝8.34，2.78)，5.28(s，1H)，5.09(s，1H)，2.08(s，3H)。
11c)5-異丙烯基-吡啶-2-基胺將2-氟-5-異丙烯基-吡啶(6.3g，45.9mmol)的二烷(30mL)溶液和濃氫氧化銨(178mL，1.37mol)一起在玻璃壓力瓶中于150℃下加熱48小時(shí)。然后將反應(yīng)液冷卻，用Et2O(3×100mL)萃取。將萃取液合并，用鹽水洗滌(100mL)，用MgSO4干燥并過濾。除去揮發(fā)物，將殘余物通過硅膠色譜純化(50％EtOAc的己烷溶液)。將含有產(chǎn)物的級(jí)分合并，真空除去揮發(fā)物得到無色油狀的3.6g(58％)產(chǎn)物。API-MS，m/z 135.14([M+H]+，計(jì)算值135.08)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.19(d，1H，J＝1.88)，7.58(dd，1H，J＝8.67，2.26)，6.47(d，1H，J＝8.67)，5.25(s，1H)，4.46(br s，2H)，2.10(s，3H)。
實(shí)施例12[4，7′]聯(lián)異喹啉-1-基-(5-異丙基-吡啶-2-基)-胺將5-異丙基-吡啶-2-基胺與1-氯-[4，7′]聯(lián)異喹啉按照實(shí)施例7所述的方法反應(yīng)。
12a)5-異丙基-吡啶-2-基胺向5-異丙烯基-吡啶-2-基胺(1.2g，8.9mmol)的乙醇(30mL)溶液中加入100mg 10％Pd/C，然后將形成的懸浮液在氫氣氛下(1atm)劇烈攪拌18小時(shí)。然后將反應(yīng)液通過硅藻土過濾，除去揮發(fā)物得到無色油狀的1.0g(82％)產(chǎn)物。API-MS，m/z 137.14([M+H]+，計(jì)算值137.10)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.94(d，1H，J＝2.26)；7.32(dd，1H，J＝8.48，2.45)；6.47(d，1H，J＝7.91)；4.27(br s，2H)；4.46(br s，2H)；2.81(m，1H)；1.21(d，6H，J＝6.78)。
實(shí)施例134-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基胺向壓力瓶中加入1-氯-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉(658mg，2.0mmol)、濃NH4OH(10mL)和二烷(10mL)。將壓力瓶密封，然后在120℃下加熱24小時(shí)。冷卻后，將反應(yīng)混合物濃縮然后與水混合，過濾，將固體在高真空下干燥。收率541mg(88％)；mp 254.8-255.8℃。
13C NMR(100MHz，CDCl3)δ165.31，161.62，158.97，158.42，144.74，134.53，130.79，125.94，124.66，124.59，118.80，116.79，109.86，66.37，44.36。
實(shí)施例144-甲氧基-N-[4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-苯甲酰胺將4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基胺和4-甲基嗎啉(36μL，0.327mmol)的80％THF/DMA溶液在冰浴中冷卻，然后滴加對茴香酰氯(46μL，0.326mmol)。將反應(yīng)混合物升溫至室溫，與水混合，用CH2Cl2萃取，用Na2SO4干燥并過濾。將殘余物通過快速色譜用100％CH2Cl2至20％EtOAc/CH2Cl2純化。收率14.6mg(10.1％)MS 442.15M+1，440.16M-1。
實(shí)施例15(4-叔丁基-苯基)-[4-(4-嗎啉-4-基-喹唑啉-6-基)-異喹啉-1-基]-胺向微波反應(yīng)瓶中加入(4-硼酸-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基苯基)-胺(120.9mg，0.38mmol，1.2當(dāng)量)、K2CO3(128.7mg，0.93mmol，3當(dāng)量)、6-溴-4-嗎啉-4-基-喹唑啉(92.5mg，0.31mmol，1當(dāng)量)和4∶1 DME∶H2O(5mL)。向該混合物中通入氮?dú)?。加入PdCl2(PPh3)2(47.8mg，0.068mmol，0.22當(dāng)量)并將該瓶密封。將其在微波加熱下于120℃加熱30分鐘。將殘余物與CH2Cl2混合，然后用鹽水洗滌。將有機(jī)相用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。將殘余物通過快速色譜用EtOAc/CH2Cl2純化。收率40.1mg(26.4％)490.4M+1，488M-1。
13C NMR(75MHz，CDCl3)δ163.58，153.04，151.60，149.99，145.16，140.5，136.23，134.63，134.17，129.34，127.5，125.69，124.92，124.40，124.07，123.5，121.0，119.71，17.18，115.82，65.72，49.70，49.26，33.33，30.41。
實(shí)施例16(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-甲基氨基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺將(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺(20mg，0.0515mmol)、MeNH2HCl(4.2mg，1.2當(dāng)量)和Et3N(10mg)的正丁醇溶液在80℃下在密封試管中加熱16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用CH2Cl2(10mL)稀釋，將溶液用NaHCO3(10mL)、H2O(10mL)和鹽水(10mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，濃縮得到油狀物。進(jìn)行色譜分離(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到產(chǎn)物(21mg，99％)。HRMS ESI m/z 384.2158(M+H+，要求384.2188)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.44(d，J＝6.0Hz，1H)，8.32(d，J＝6.0Hz，1H)，8.25(s，1H)，7.91(d，J＝9.0Hz，1H)，7.62(t，J＝6.0Hz，1H)，7.53(d，J＝9.0Hz，2H)，7.51(m，1H)，7.34(d，J＝9.0Hz，2H)，6.75(d，J＝3.0Hz，1H)，5.16(bro，1H)，2.99(d，J＝3.0Hz，2H)，1.27(s，9H)。
實(shí)施例17(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺將3c(4-硼酸-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基苯基)-胺(1.1g，1.5當(dāng)量)、4-氯-2-甲硫基-嘧啶(161mg，1.0當(dāng)量)和Pd(PPh3)4(0.1當(dāng)量)的DME(10mL)溶液用Na2CO3(2M，5mL)處理，然后回流1.5小時(shí)。將溶液冷卻至室溫，然后真空除去DME。將殘余物用CH2Cl2和H2O處理。將有機(jī)萃取液合并，干燥(MgSO4)，然后濃縮得到油狀物。進(jìn)行色譜分離(SiO2，40％EtOAc-己烷)得到淺黃色固體狀的(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺(600mg，65％)。MS ESI m/z 368.20(M+H)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.34(d，J＝6.0Hz，1H)，8.38(d，J＝9.0Hz，1H)，8.29(d，J＝9.0Hz，1H)，8.08(s，1H)，7.69(t，J＝6.0Hz，1H)，7.61(d，J＝9.0Hz，1H)，7.54(d，J＝6.0Hz，2H)，7.49(d，J＝3.0Hz，1H)，7.38(d，J＝6.0Hz，1H)，2.73(bro，3H)，1.32(s，9H)。
實(shí)施例18[4-(4-芐氧基-喹唑啉-6-基)-異喹啉-1-基]-(2-叔丁基-嘧啶-5-基)-胺將NaH(18mg，0.66mmol，4當(dāng)量)加入到5-氨基-2-叔丁基嘧啶(37mg，0.25mmol，1.5當(dāng)量)的THF(1mL)溶液中，然后將形成的懸浮液攪拌30分鐘。將4-芐氧基-6-(1-氯-異喹啉-4-基)-喹唑啉(65mg，0.164mmol，1當(dāng)量)加入到該溶液中并在80℃下加熱4小時(shí)。加入CH2Cl2(5mL)，將溶液用H2O和鹽水洗滌。進(jìn)行色譜分離(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到產(chǎn)物[4-(4-芐氧基-喹唑啉-6-基)-異喹啉-1-基]-(2-叔丁基-嘧啶-5-基)-胺(39mg，46％)。MS/ESI，M+1＝513.19。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.18(s，2H)，8.81(s，1H)，8.37(d，J＝8.0Hz，1H)，8.04(d，J＝8.0Hz，2H)，7.98(s，1H)，7.90(d，J＝8.0Hz，1H)，7.66(m，2H)，7.57(m，1H)，7.51(d，J＝4.0Hz，2H)，7.38(d，J＝8.0Hz，2H)，7.35(m，1H)，5.60(s，2H)，1.43(s，9H)。
18a)4-芐氧基-6-碘-喹唑啉將NaH(152mg，5.7mmol，1.5當(dāng)量)加入到芐基醇(820mg，7.6mmol，2當(dāng)量)的DMF(10mL)溶液中，然后將形成的懸浮液攪拌30分鐘。然后將4-氯-6-碘-喹唑啉(1.1g，3.8mmol，1當(dāng)量)加入到該溶液中，將反應(yīng)混合物在100℃下加熱4小時(shí)。加入CH2Cl2(50mL)并將溶液用H2O和鹽水洗滌。進(jìn)行色譜分離(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到4-芐氧基-6-碘-喹唑啉(1.21g，88％)。MS/ESI，M+1＝362.88。
18b)4-芐氧基-6-(1-氯-異喹啉-4-基)-喹唑啉將4-溴-1-氯-異喹啉(802mg，3.31mmol)的THF(20mL)溶液冷卻至-72℃。滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液)(1.6mL，3.97mmol)，然后將反應(yīng)溫度在-70℃下維持30分鐘。將ZnBr2(900mg，4.2mmol)溶于THF(6mL)，然后在-70℃下將其緩慢轉(zhuǎn)移到上述混合物中。將溶液在-70℃下攪拌40分鐘，然后升溫至室溫。將Pd(PPh3)4(400mg，0.36mmol)的THF(6mL)溶液和4-芐氧基-6-碘-喹唑啉(1.2g，3.31mmol)的THF(4mL)溶液滴加到反應(yīng)混合物中。將溶液在60℃下加熱30分鐘，然后在室溫下靜置過夜。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用飽和NH4Cl和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥。將溶液濃縮至從溶液中沉淀白色固體。將該固體通過過濾收集，用乙醚洗滌并真空干燥。得到600mg 4-芐氧基-6-(1-氯-異喹啉-4-基)-喹唑啉。收率為46％。MS/ESI+，M+1＝397.96。
實(shí)施例19(4-甲硫基-苯基)-[4-(6-嗎啉-4-基-吡嗪-2-基)-異喹啉-1-基]-胺將NaH(11mg，0.4mmol，4當(dāng)量)加入到4-甲硫基-苯基胺(17mg，0.12mmol，1.2當(dāng)量)的THF(1mL)溶液中，然后將形成的懸浮液攪拌30分鐘。然后加入1-氯-4-(6-嗎啉-4-基-吡嗪-2-基)-異喹啉(33mg，0.1mmol，1當(dāng)量)并將反應(yīng)混合物在80℃下加熱4小時(shí)。加入CH2Cl2(5mL)并將溶液用H2O和鹽水洗滌。進(jìn)行色譜分離(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到標(biāo)題化合物(33mg，99％)。MS/ESI，M+1＝430.17。
1H NMR(400MHz，CDCl3)8.35(d，J＝12.0Hz，1H)，8.29(s，1H)，8.20(s，1H)，8.13(s，1H)，8.00(d，J＝8.0Hz，1H)，7.98(s，1H)，7.90(d，J＝8.0Hz，1H)，7.69(t，J＝8.0Hz 2H)，7.65(d，J＝8.0Hz，2H)，7.61(t，J＝8.0Hz 1H)，7.34(d，J＝8.0Hz，2H)，3.86(t，J＝4.0Hz 4H)，3.65(t，J＝8.0Hz，4H)，2.50(s，3H)。
19a)4-(6-溴-吡嗪-2-基)-嗎啉將PBr3(11g，36.9mmol，5.5當(dāng)量)在室溫下加入到2，6-二氯-吡嗪(1.0g，6.7mmol，1當(dāng)量)中，然后在150℃下加熱24小時(shí)。將該溶液真空干燥，將殘余物溶于CH2Cl2(50mL)。將有機(jī)液用H2O、鹽水洗滌，然后干燥。將嗎啉于0℃下加入到該溶液中，然后在5小時(shí)內(nèi)升溫至室溫。將溶液用H2O和鹽水洗滌。進(jìn)行色譜分離(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到產(chǎn)物4-(6-溴-吡嗪-2-基)-嗎啉(0.5g，31％)。MS/ESI，M+1＝246.01。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.99(s，1H)，7.95(s，1H)，3.82(t，J＝4.0Hz，4H)，3.58(t，J＝4.0Hz，4H)。
19b)1-氯-4-(6-嗎啉-4-基-吡嗪-2-基)-異喹啉將4-溴-1-氯-異喹啉(400mg，1.65mmol)的THF(20mL)溶液冷卻至-72℃。滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液)(0.80mL，2mmol)并將反應(yīng)溫度在-70℃～-68℃下維持30分鐘。將ZnBr2(408mg，1.91mmol)溶于THF(6mL)，然后在-70℃下將其緩慢轉(zhuǎn)移到上述混合物中。將溶液在-70℃下攪拌40分鐘，然后通過除去冷卻浴而升溫至室溫。將Pd(PPh3)4(190mg，0.164mmol)的6ml THF溶液和4-(6-溴-吡嗪-2-基)-嗎啉(400mg，1.65mmol)的THF(4mL)溶液滴加到反應(yīng)混合物中，然后將溶液在60℃下加熱30分鐘，然后在室溫下靜置過夜。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用飽和NH4Cl和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥。將溶液濃縮至白色固體從溶液中析出。將固體通過過濾收集，用乙醚洗滌并真空干燥。得到300mg 1-氯-4-(6-嗎啉-4-基-吡嗪-2-基)-異喹啉。收率為56％。MS/ESI+，M+1＝327。
實(shí)施例20(4-叔丁基-苯基)-[8-氯-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺將(4-叔丁基-苯基)-[8-氯-4-(2-氯-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺(15mg，0.03mmol)與嗎啉(10mL)混合，然后在80℃下加熱1小時(shí)。將溶液真空濃縮，然后通過硅膠柱純化。收率10mg，60％的收率。MS473。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.42，8.40(d，2H)，8.36(d，2H)，8.26(s，1H)，7.65-7.41(m，5H)，3.88-3.78(m，8H)，1.34(s，9H)。
20a)1，8-二氯-異喹啉向8-氯-異喹啉(J.Org.Chem.1977，42(19)，3208-9.)(11g，54mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液中分幾批加入MCPBA(25g，112mmol)。攪拌3小時(shí)后加入乙醚(400mL)，然后加入己烷(1L)。將溶液攪拌過夜并真空濃縮，加入乙醚(200mL)和己烷(400mL)，攪拌過夜。將沉淀過濾，風(fēng)干，然后與20gPCl5和甲苯(150mL)混合。將溶液加熱回流3小時(shí)，用NaHCO3中和。將溶液用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥并真空濃縮得到8g(72％)1，8-二氯-異喹啉。MS198。
20b)(4-叔丁基-苯基)-(8-氯-異喹啉-1-基)-胺將1，8-二氯-異喹啉(8g，39mmol)的丁醇(8mL)溶液、HCl(4N的二烷溶液，6mL)和4-叔丁基-苯基胺(6g，40mmol)在70℃下加熱20分鐘，真空濃縮，然后加入NaHCO3溶液。用EtOAc萃取，然后將有機(jī)層真空濃縮，通過硅膠柱純化。得到3.6g(30％)(4-叔丁基-苯基)-(8-氯-異喹啉-1-基)-胺。MS310。
20c)(4-溴-8-氯-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺向冰冷的(4-叔丁基-苯基)-(8-氯-異喹啉1-基)-胺(3.6g，7mmol)的THF(20mL)溶液中分幾批加入Me3PhNBr3(2.88g，7.6mmol)。然后除去冰浴并將溶液升溫至室溫，15分鐘后加入NaHCO3溶液。用EtOAc萃取，然后真空濃縮得到2.6g(89％)(4-溴-8-氯-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺。MS388。
20d)(4-硼酸-8-氯-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺將(4-溴-8-氯-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(1.6g，2.88mmol)的THF(20mL)溶液冷卻至-78℃，然后滴加n-BuLi(1.6M的己烷溶液，3.9mL)。將溶液在-78℃下靜置1小時(shí)，然后除去冷卻浴，將反應(yīng)混合物緩慢升溫至室溫。在室溫下攪拌30分鐘后加入水(1mL)，將溶液真空濃縮。將HCl(50mL，1M)加入到粗油中并攪拌4小時(shí)。然后將溶液傾析，加入乙醚以形成沉淀物。然后將沉淀物過濾并風(fēng)干，得到611mg(60％)(4-硼酸-8-氯-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺。MS354。
20e)(4-叔丁基-苯基)-[8-氯-4-(2-氯-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺將(4-硼酸-8-氯-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(100mg，0.28mmol)、2，4-二氯-嘧啶(41.4mg，0.28mmol)、PdCl2(PPh3)2的DME(2mL)溶液和Na2CO3(2mL，1M溶液)在密封試管中于80℃下加熱1小時(shí)，用CH2Cl2萃取，通過硅膠柱純化得到31mg，26％的收率。MS422。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.45(s，1H)，8.67(d，2H)，8.39(d，2H)，8.27(s，2H)，7.66-7.60(m，3H)，1.35(s，9H)。
實(shí)施例21(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺將脫氣的(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-異喹啉-1-基]-胺、2，4-二氯嘧啶(117mg，0.785mmol)、K2CO3(291mg，2.141mmol)和Pd(PPh3)4的DME(3mL)溶液在60℃下加熱過夜。將水加入到該混合物中，然后用Et2O萃取。將有機(jī)層通過硅膠墊過濾，將溶液濃縮得到油狀物。然后將該油狀物溶于嗎啉(1mL)并在80℃下加熱過夜。將混合物濃縮并通過制備型TLC和制備型HPLC純化(35％-65％CH3CN/水的0.1％TFA溶液)。將級(jí)分通過飽和NaHCO3游離堿化，用EtOAc萃取得到棕色固體(6mg)。M+H+＝458.25。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ1.31(s，9H)，3.70(m，4H)，3.77(m，4H)，7.02(d，1H，J＝5.14Hz)，7.38(d，2H，J＝8.44Hz)，7.59(m，1H)，7.72(d，2H，J＝8.80Hz)，8.30(m，2H)，8.47(d，1H，J＝5.14Hz)，8.72(dd，1H，J＝5.87，9.17Hz)，9.51(s，1H)。
21a)1-氯-6-氟-異喹啉將6-氟-2H-異喹啉-1-酮(PCT/GB02/00514；WO 02/062816)(1.3g，7.97mmol)和POCl3(3.7g，23.9mmol)在CH3CN(20mL)和4N HCl/二烷(2mL)中的溶液在50℃下加熱過夜。將反應(yīng)混合物用NaHCO3溶液稀釋，用EtOAc萃取。將有機(jī)層濃縮得到橙色固體(1.1g，78％)。M+H+＝181.8。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.42(m，2H)，8.26(m，3H)。
21b)(4-叔丁基-苯基)-(6-氟-異喹啉-1-基)-胺將1-氯-6-氟-異喹啉(1g，6.13mmol)和4-叔丁基-苯胺(1.1g，6.74mmol)在n-BuOH(20mL)和4N HCl/二烷(1mL)中的溶液在80℃下加熱過夜。將混合物濃縮，將殘余物用飽和NaHCO3堿化并用EtOAc萃取。將有機(jī)層干燥，濃縮，通過硅膠柱純化(己烷至10％EtOAc/己烷)得到黃色固體(900mg，56％)。M+H+＝295.3。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.29(s，9H)，7.13(d，1H，J＝6Hz)，7.34(d，2H，J＝8.67Hz)，7.50(m，1H)，7.60(dd，1H，J＝2.64，9.8Hz)7.72(d，2H，J＝8.67Hz)，7.96(d，1H，J＝5.65Hz)，8.61(dd，1H J＝5.46，9.23Hz)，9.16(s，1H)。
21c)(4-溴-6-氟-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺將(4-叔丁基-苯基)-(6-氟-異喹啉-1-基)-胺(2.17g，7.37mmol)和PhMe3NBr3(2.93g，7.81mmol)的THF(30mL)溶液在0℃下攪拌30分鐘。蒸發(fā)THF并將固體溶于CH2Cl2和水(每次均為200mL)。將有機(jī)層用水(2×50mL)和鹽水(50mL)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮得到淺棕色固體(2.75g，99％)。M+H+＝375.2。
1H NMR(300MHz，DMSO)1.29(s，9H)，7.36(d，2H，J＝8.67Hz)，7.65(dd，4H，J＝7.35，8.85Hz)，8.17(s，1H)，8.70(dd，1H，J＝5.27，9.42Hz)，9.38(s，1H)。
21d)(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-異喹啉-1-基]-胺將脫氣的(4-溴-6-氟-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(500mg，1.34mmol)、二(頻那醇)二硼(748mg，2.93mmol)、KOAc(391mg，4.019mmol)和Pd(pddf)Cl2的DMF(10mL)溶液在80℃下加熱過夜。將水加入到該混合物中并用乙醚萃取。將乙醚層通過硅膠墊過濾，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到棕色固體。M+H+＝421.3。該固體不經(jīng)進(jìn)一步純化即可用于下一步驟。
實(shí)施例22(4-叔丁基-苯基)-[6-氯-4-(2-氯-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺該化合物通過與實(shí)施例21相類似的順序制得。
MS4221H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.66(d，1H)，8.59(s，1H)，8.38(d，1H)，8.25(s，1H)，8.72(d，1H)，7.6-7.5(m，5H)，1.34(s，9H)。
實(shí)施例23(4-叔丁基-苯基)-[6-氯-4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺該化合物通過與實(shí)施例21相類似的順序制得。
MS4731H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.65(m，1H)，8.37-8.32(m，2H)，8.15(s，1H)，7.55-7.51(m，3H)，7.39(d，2H)，6.86(d，2H)。
實(shí)施例24將氰尿酰氯(1.8g，10mmol)和DME(20mL)冷卻至0℃，然后緩慢加入原料胺(3.3mmol)。然后除去冰浴，將溶液升溫至室溫并攪拌過夜。然后將溶液真空濃縮，將固體與(4-硼酸-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(3.3mmol)、PdCl2(PPh3)2(144mg)、DME(6mL)和Na2CO3(1M溶液，5.4mL)混合，然后在80℃下加熱2小時(shí)。分離出有機(jī)層，真空濃縮，然后通過反相HPLC系統(tǒng)純化。分離收率5％。
(4-叔丁基-苯基)-[4-(4-氯-6-嗎啉-4-基-[1，3，5]三嗪-2-基)-異喹啉-1-基]-胺MS475.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.11(d，1H)，8.55，(s，1H)，8.00(d，1H)，7.81-7.76(m，1H)，7.41-7.36(m，1H)，7.32(d，2H)，7.19(d，2H)，3.94-3.73(m，8H)，1.25(s，9H)。
(4-叔丁基-苯基)-{4-[4-氯-6-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基)-[1，3，5]三嗪-2-基]-異喹啉-1-基}-胺MS5031H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.02(d，1H)，8.37(s，1H)，8.21(d，1H)，7.81-7.76(m，1H)，7.49-7.44(m，1H)，7.29(d，2H)，7.13(d，2H)，4.60-4.56(m，2H)，3.59-3.54(m，2H)，2.27-2.62(m，2H)，1.23-1.20(m，15H)。
4-{4-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-異喹啉-4-基]-6-氯-[1，3，5]三嗪-2-基}-哌嗪-1-甲酸乙酯MS5461H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.08(d，1H)，8.57(s，1H)，7.97(d，1H)，7.79-7.74(m，1H)，7.61-7.59(m，1H)，7.33(d，2H)，7.20(d，2H)，4.17-4.10(q，2H)，3.93-3.86(m，4H)，3.55(b，4H)，1.25-1.18(m，12H)。
(4-叔丁基-苯基)-[4-(4-氯-6-硫代嗎啉-4-基-[1，3，5]三嗪-2-基)-異喹啉-1-基]-胺MS4911H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.07(d，1H)，8.49(s，1H)，8.06(d，1H)，7.80-7.75(m，1H)，7.60(m，1H)，4.18(b，4H)，2.67(b，4H)，1.24(s，9H)。
實(shí)施例25(4-叔丁基-苯基)-[4-(6-嗎啉-4-基-吡嗪-2-基)-異喹啉-1-基]-胺按照Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)的一般方法(實(shí)施例1)制得。M+H+＝440.2。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.37(s，1H)，8.61(d，J＝8.29Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.28(d，J＝7.91Hz，1H)，8.16(d，J＝8.67Hz，2H)，7.75(m，3H)，7.67(t，J＝7.91Hz，1H)，7.37(d，J＝8.67Hz，2H)，3.75(m，4H)，3.60(m，4H)，1.31(s，9H)。
25a)4-(6-氯-吡嗪-2-基)-嗎啉將2，6-二氯-吡嗪(2g，13.4mmol)和嗎啉(4.7g，56.7mmol)的CH3CN(50mL)溶液攪拌過夜。濾出白色固體，將溶液減壓濃縮。將殘余物通過短硅膠柱進(jìn)一步純化得到白色固體狀產(chǎn)物(2g，75％)。M+H+＝200.13。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.29(s，1H)，7.9(s，1H)，3.70(m，4H)，3.54(m，4H)。
實(shí)施例26(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-嗎啉-4-基-噻唑-4-基)-萘-1-基]-胺按照Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)的一般方法(實(shí)施例1)制得。M+H+＝445.21。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.24(s，1H)，8.56(d，J＝7.54Hz，1H)，8.35(d，J＝8.29Hz，1H)，8.12(s，1H)，7.75(m，3H)，7.64(t，J＝7.54Hz，1H)7.35(d，J＝8.67Hz，2H)，7.04(s，1H)，3.76(m，4H)，3.44(m，4H)，1.30(s，9H)。
26a)4-(4-氯-噻唑-2-基)-嗎啉將噻唑烷-2，4-二酮(0.5g，4.27mmol)和POCl3(2mL，21mmol)在CH3CN(20mL)和4N HCl/二烷(1mL)中的溶液在70℃下加熱過夜。將混合物倒在冰水中并用飽和NaHCO3中和，然后用EtOAc萃取。將有機(jī)層干燥，濃縮，用嗎啉(1.8g，21mmol)處理。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用EtOAc稀釋，用水(3×50mL)和鹽水(50mL)洗滌。將EtOAc相減壓濃縮，通過硅膠色譜純化得到產(chǎn)物(126mg，15％)。M+H+＝205.6。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ6.81(s，1H)，3.69(m，4H)，3.35(m，4H)。
實(shí)施例27(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-嗎啉-4-基-1H-咪唑-4-基)-異喹啉-1-基]-胺將嗎啉-4-基甲脒氫溴化物(40mg，0.189mmol)、K2CO3(32mg，0.227mmol)和2-溴-1-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-異喹啉-4-基]-乙酮(30mg，0.076mmol)的DMF(1mL)懸浮液在室溫下攪拌30分鐘，然后用水稀釋，用Et2O萃取。將有機(jī)相干燥，濃縮，通過制備型TLC進(jìn)一步純化，用5％MeOH的EtOAc溶液展開。收集橙色帶(Rf＝0.394)，用EtOAc萃取得到淺黃色化合物(20mg，60％)。M+H+＝335.1764。
1H NMR(300MHz.CD3OD)δ8.37(d，J＝7.91Hz，1H)，8.12(d，J＝7.91Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.71(t，J＝7.72Hz，1H)，7.61(t，J＝7.54Hz，1H)，7.52(d，J＝9.04Hz，2H)，7.40(d，J＝8.67Hz，2H)，6.87(s，1H)，3.82(m，4H)，3.35(m，4H)，1.34(s，9H)。
27a)1-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-異喹啉-4-基]-2-羥基-乙酮向(4-溴-異喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(500mg，1.407mmol)的無水THF(50mL)溶液中于-78℃下加入2.5M BuLi的己烷溶液(1.407mL，2.62mmol)。在相同的溫度下攪拌1小時(shí)后，將混合物緩慢升溫至-40℃。將反應(yīng)混合物冷卻至-78℃，然后緩慢加入(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙酸甲酯(460mg，2.11mmol)的THF(5mL)溶液。將混合物在相同的溫度下攪拌2小時(shí)，然后在40℃下加熱2小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫，用5mL飽和NH4Cl終止反應(yīng)。將溶液真空濃縮，向混合物中加入水和EtOAc，然后用EtOAc萃取，用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，用Na2SO4干燥。將溶液濃縮，通過快速柱進(jìn)一步純化(100％己烷至40％EtOAc的己烷溶液)得到黃色固體(155mg，33％)。M+H+＝335.1764。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.76(s，1H)，8.99(d，J＝8.67Hz，1H)，8.69(s，1H)，8.60(d，J＝7.91Hz，1H)，7.84(t，J＝7.16Hz，1H)，7.72(d，J＝8.67Hz，2H)，7.67(d，J＝7.16Hz，1H)，7.40(d，J＝8.67Hz，2H)，4.96(t，J＝5.84Hz，1H)，4.75(d，J＝5.28Hz，2H)，1.31(s，9H)。
27b)2-溴-1-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-異喹啉-4-基]-乙酮將1-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-異喹啉-4-基]-2-羥基-乙酮(25mg，0.075mmol)在CH2Cl2中形成懸浮液，依次加入PPh3(59mg，0.224mmol)和CBr4(74mg，0.224mmol)。將混合物攪拌過夜。將混合物上樣到制備型TLC板上，然后用CH2Cl2展開。收集黃色帶(Rf＝0.5)并用EtOAc萃取得到黃色固體(15mg，50％)。M+H+＝335.1764。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.99(s，1H)，9.07(d，J＝8.29Hz，1H)，8.98(s，1H)，8.73(d，J＝8.29Hz，1H)，7.88(m，3H)，7.72(t，J＝7.16Hz，1H)，7.47(d，J＝9.04Hz，2H)，4.95(s，2H)，1.34(s，9H)。
實(shí)施例28(4-叔丁基-苯基)-{4-[2-(四氫-吡喃-4-基)-嘧啶-4-基]-異喹啉-1-基}-胺將4-氯醛吡喃于室溫下滴加到Mg(66mg，95％，2.6mmol)的THF(5mL)懸浮液中，然后將溶液加熱回流2小時(shí)。冷卻至室溫后，將該溶液于-78℃下轉(zhuǎn)移到化合物(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺(50mg，013mmol)的THF溶液中。然后將溶液在4小時(shí)內(nèi)升溫至室溫。加入CH2Cl2(10mL)并將溶液用H2O和鹽水洗滌。進(jìn)行色譜分離(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到產(chǎn)物(15mg，26％)。MS ESI m/z 437(M+H+)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.76(d，J＝6.0Hz，1H)，8.51(d，J＝6.0Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.01(d，J＝9.0Hz，1H)，7.73(t，J＝9.0Hz，1H)，7.65(m，3H)，7.43(m，3H)，4.15(m，1H)，4.11(m，1H)，3.25(m，1H)，3.19，2.38(s，3H)，1.26(d，J＝3.0Hz，6H)。
實(shí)施例29(4-異丙基-苯基)-[4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-[2，6]萘啶-1-基]-胺將脫氣的(4-硼酸-[2，6]萘啶-1-基)-(4-異丙基-苯基)-胺(400mg，1當(dāng)量)、4-(4-溴-嘧啶-2-基)-嗎啉(300mg，1.2當(dāng)量)、PdCl2(PPh3)2(0.1當(dāng)量)在DME(5mL)和Na2CO3(2M，5mL)中的溶液加熱回流1.5小時(shí)。真空除去DME，將殘余物溶于CH2Cl2(20mL)。用H2O和鹽水洗滌后，將該有機(jī)溶液干燥(MgSO4)，然后濃縮得到油狀物。進(jìn)行色譜分離(SiO2，40％EtOAc-己烷)得到淺黃色固體狀的(4-異丙基-苯基)-[4-(2-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基)-[2，6]萘啶-1-基]-胺(200mg，47％)。HRMS ESI m/z 427.2275(M+H+，C25H27ON6要求427.2246)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.06(s，1H)，8.75(d，J＝6.0Hz，1H)，8.48(t，J＝3.0Hz 1H)，7.75(d，J＝6.0Hz，1H)，7.64(d，J＝9.0Hz，2H)，7.31(d，J＝9.0Hz，2H)，6.90(d，J＝3.0Hz 1H)，3.92(m，4H)，3.94(m，4H)，2.96(m，1H)，1.30(d，J＝6.0Hz，6H)。
29a)(4-異丙基-苯基)-[2，6]萘啶-1-基-胺將HCl/二烷溶液(4N，2.18mL)加入到1-氯-[2，6]萘啶(J.HetercyclicChem.，18，1349(1981)和4-異丙基苯胺的正丁醇(5mL)溶液中，然后將形成的溶液在80℃下加熱4小時(shí)，然后蒸發(fā)至干。將殘余物溶于CH2Cl2(20mL)，用飽和NaHCO3(20mL)、H2O(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌。將有機(jī)液干燥(Na2SO4)并濃縮。進(jìn)行色譜分離(SiO2，20-80％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到(4-異丙基-苯基)-[2，6]萘啶-1-基-胺(1.0g，48％)。MS ESI m/z264.15(M+H+)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.21(s，1H)，8.09(d，J＝6.0Hz，1H)，8.25(d，J＝6.0Hz，1H)，7.69(d，J＝6.0Hz，1H)，7.63(d，J＝9.0Hz，2H)，7.28(d，J＝9.0Hz，2H)，7.21(d，J＝6.0Hz，1H)，7.12(s，1H)，2.95(m，1H)，1.29(d，J＝6.0Hz，6H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ152.4，144.8，143.4，127.4，121.3，114.4，111.1，77.6，34.0，24.5。
29b)(4-溴-[2，6]萘啶-1-基)-(4-異丙基-苯基)-胺將三甲基苯基三溴化銨(1.03g，2.74mmol)在0℃下加入到(4-異丙基-苯基)-[2，6]萘啶-1-基-胺(680mg，2.58mmol)的THF(10mL)溶液中。將溶液升溫至室溫并攪拌1小時(shí)。將THF蒸發(fā)至干，將殘余物溶于CH2Cl2(20mL)。將溶液用H2O(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌。將有機(jī)液干燥(Na2SO4)并濃縮至2mL。進(jìn)行色譜分離(SiO2，20-80％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到(4-溴-[2，6]萘啶-1-基)-(4-異丙基-苯基)-胺(650mg，74％)。MS ESIm/z 342(M+H+)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.54(s，1H)，8.80(d，J＝6.0Hz，1H)，8.34(s，1H)，7.67(d，J＝6.0Hz，1H)，7.59(d，J＝6.0Hz，2H)，7.29(d，J＝9.0Hz，2H)，7.14(s，1H)，2.95(m，1H)，1.29(d，J＝6.0Hz，6H)。
29c)(4-硼酸-[2，6]萘啶-1-基)-(4-異丙基-苯基)-胺將BuLi的己烷溶液(1.1mL，2.57mmol，2.5當(dāng)量)溶液在-78℃下加入到(4-溴-[2，6]萘啶-1-基)-(4-異丙基-苯基)-胺(350mg，1當(dāng)量，1.02mmol)的THF(10mL)溶液中。將反應(yīng)溶液用B(O-iPr)3(0.31mL，1.3當(dāng)量)處理，然后在5小時(shí)內(nèi)升溫至23℃。將溶液0.5mL H2O終止反應(yīng)，然后真空干燥。將殘余物用4N HCl(2mL)處理，有淺黃色固體沉淀析出。將固體過濾，用1N HCl洗滌，干燥得到粗產(chǎn)物(4-硼酸-[2，6]萘啶-1-基)-(4-異丙基-苯基)-胺(400mg)。
實(shí)施例304-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-異喹啉-4-基]-嘧啶-2-甲腈將(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯-嘧啶-4-基)-異喹啉-1-基]-胺(25mg，0.064mmol)、KCN(8.4mg.2當(dāng)量)、PdCl2(PPh3)4(5mg)和Et3N(10mg)的DMF(1mL)溶液在80℃下加熱4小時(shí)。加入10ml DCM，將溶液用NH4Cl(10mL)、H2O和鹽水洗滌。進(jìn)行色譜分離(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脫)得到標(biāo)題化合物(24mg，99％)。MS ESI m/z 380.20(M+H)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.89(d，J＝6.0Hz，1H)，8.48(t，J＝9.0Hz，2H)，8.24(s，1H)，8.00(d，J＝6.0Hz，1H)，7.81(t，J＝6.0Hz，1H)，7.70(d，J＝6.0Hz，1H)，7.60(d，J＝9.0Hz，2H)，7.45(d，J＝9.0Hz，2H)，1.36(s，9H)。
生物學(xué)實(shí)施例利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)從昆蟲細(xì)胞純化具有人類序列的活性B-Raf、C-Raf和V599E B-Raf蛋白。Raf抑制作用在涂有IκB-α并用Superblock封閉的96-孔微板中進(jìn)行試驗(yàn)。利用磷-IκB-α特異性抗體(Cell Signaling#9246)、抗-小鼠IgG堿性磷酸酶結(jié)合的二級(jí)抗體(Pierce #31320)和堿性磷酸酶底物ATTOPHOS(Promega，#S101)檢測IκB-α在絲氨酸36的磷酸化作用。
表2和3中的下列化合物抑制野生型C-Raf的IC50為0.05mmol/L至4.0mmol/L，和/或抑制突變型B-Raf(V599E)的IC50為0.08mmol/L至4.0mmol/L。
表2


































表3
實(shí)施例A人B-Raf基因中T1796A突變的檢測檢測引物GATTTTGGTCTAGCTACAGA次級(jí)引物GACTTTCTAGTAACTCAGCAG基因DNA利用GENELUTE哺乳動(dòng)物基因DNA試劑盒(Sigma Cat.#G1N 350)由人類黑素瘤細(xì)胞系分離得到。PCR反應(yīng)在PCR機(jī)(MJ Research，PTC100型)上以總體積50mL進(jìn)行，使用Roche的PCR Core試劑盒(Cat.#1578553)。PCR反應(yīng)混合物含有5mL 10x反應(yīng)緩沖液，1mL 10mMdNTPs，100-1000ng模板DNA，0.5mL Taq聚合酶(2.5-5單位)，1mL 31μM各引物的儲(chǔ)備液。
PCR條件如下95℃ 3分鐘 72℃ 10分鐘4℃擴(kuò)增后，將8mL PCR反應(yīng)混合物與2mL核酸樣本載入緩沖液(BioRadCat.#161-0767)混合。將10mL樣本加到含有0.3μg/mL溴化乙錠(PierceCat.#17898)的1.5％瓊脂糖(GIBCO-BRL Cat.#15510-027)凝膠上。將分子量標(biāo)準(zhǔn)物(100bp DNA梯，來自Invitrogen Cat.#10380-012)加到相鄰的泳道內(nèi)。通過在TAE緩沖液中電泳分離出DNA(0.04M Tris-乙酸，0.01MEDTA，0.02M冰乙酸，pH 8.4)(Roche Cat.#1666690)。電泳條件是在120伏下保持30-40分鐘。分離后，將凝膠置于UV光下并用AlphaImager 2000記錄系統(tǒng)拍照。
通?？稍谀z中檢測到兩個(gè)譜帶。快速移動(dòng)的譜帶在100bp標(biāo)志線的前面，其代表引物。由T1796A突變特異性PCR擴(kuò)增產(chǎn)生的DNA具有152bp的預(yù)測大小，并且移動(dòng)在100bp標(biāo)準(zhǔn)物和200bp標(biāo)準(zhǔn)物之間。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物通過測序進(jìn)行確認(rèn)。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的存在表明T1796A突變存在于模板DNA中。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的缺乏表明組織樣本中不存在突變。
其它B-RAF突變通過該方法利用下表中關(guān)于突變所示的檢測引物和次級(jí)引物進(jìn)行檢測
權(quán)利要求
1.式(I)化合物其中n是0-2；r是0-2m是0-4；J是未取代的或者被Q取代一次或兩次，其中J是芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基，其中芳基是含有6-14個(gè)碳原子的芳香族基團(tuán)，諸如苯基、萘基、芴基和菲基；雜芳基是含有4-14個(gè)、特別是5-7個(gè)環(huán)原子、其中1、2或3個(gè)環(huán)原子彼此獨(dú)立地選自N、S和O的芳香族基團(tuán)，諸如呋喃基、吡喃基、吡啶基、1，2-、1，3-和1，4-嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、三唑基、唑基、喹唑啉基、咪唑基、吡咯基、異唑基、異噻唑基、吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、異喹啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、異苯并呋喃基、色烯基、嘌呤基、噻蒽基、呫噸基、吖啶基、咔唑基和吩嗪基；環(huán)烷基是含有3-8個(gè)、優(yōu)選5-6個(gè)環(huán)原子的飽和環(huán)狀基團(tuán)，諸如環(huán)丙基、環(huán)戊基和環(huán)己基；雜環(huán)烷基是含有3-8個(gè)、優(yōu)選5-6個(gè)環(huán)原子、其中1、2或3個(gè)環(huán)原子彼此獨(dú)立地選自N、S和O的飽和環(huán)狀基團(tuán)，諸如哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、吡咯烷基和吡唑烷基；Q是選自下列的在1或2個(gè)碳原子上的取代基鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-N(R)R、-NRS(O)2N(R)R、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)R2、-S(O)2N(R2)R2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基，諸如取代或未取代的咪唑基和取代或未取代的吡啶基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基，諸如取代或未取代的哌啶基、取代或未取代的piperazolyl、取代或未取代的四氫吡喃基和取代或未取代的氮雜環(huán)丁烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)基、氨基、單-或二-取代的氨基、雜芳基-芳基；R是H、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基-烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；X是鍵、Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基，優(yōu)選-NH-、-NHC(O)-、-NHC(O)NH-；Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環(huán)烷基或取代或未取代的雜環(huán)烷基；并且Z是氨基、單-或二-取代的氨基、鹵素、烷基、取代的烷基、羥基、醚化的或酯化的羥基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲?；-單-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯基-低級(jí)烷硫基、烷基苯硫基、苯基亞磺?；?、苯基-低級(jí)烷基亞磺?；⑼榛交鶃喕酋；?、苯基磺?；?、苯基-低級(jí)烷基磺?；蛲榛交酋；?，并且其中，如果存在一個(gè)以上的基團(tuán)Z(m≥2)，則取代基Z相同或不同；或者其中一個(gè)或多個(gè)N原子帶有氧原子的上述化合物的N-氧化物；或其可藥用鹽。
2.式(Ia)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽 其中r是0-2；n是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T均為CH或CQ或者A、B、D和E均為CH或CQ且T是N或者B、D、E和T均為CH或CQ且A是N或者A、B、T和E均為CH或CQ且D是N或者A、B、D，和T均為CH或CQ且E是N或者A、B和D均為CH或CQ且E和T是N或者B、E，和T均為CH或CQ且A和D均為N或者A、D和T均為CH或CQ且B和E均為N或者A和D均為CH或CQ且B、E和T均為N；Q是選自下列的在1或2個(gè)碳原子上的取代基鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-N(R)R、-NRS(O)2N(R)R、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)R2、-S(O)2N(R2)R2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基諸如取代或未取代的咪唑基和取代或未取代的吡啶基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基，諸如取代或未取代的哌啶基、取代或未取代的piperazolyl、取代或未取代的四氫吡喃基和取代或未取代的氮雜環(huán)丁烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)基、氨基、單-或二-取代的氨基、雜芳基-芳基；R是H、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基-烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；X是鍵、Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基，優(yōu)選-NH-、-NHC(O)-、-NHC(O)NH-；Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環(huán)烷基或取代或未取代的雜環(huán)烷基；并且Z是氨基、單-或二-取代的氨基、鹵素、烷基、取代的烷基、羥基、醚化的或酯化的羥基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷?；?、氨基甲?；?、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯基-低級(jí)烷硫基、烷基苯硫基、苯基亞磺?；⒈交?低級(jí)烷基亞磺?；⑼榛交鶃喕酋；?、苯基磺?；?、苯基-低級(jí)烷基磺?；蛲榛交酋；?，并且，如果存在一個(gè)以上的基團(tuán)Z(m≥2)，則取代基Z相同或不同。
3.權(quán)利要求2所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽，其中r是0-2；n是0或1；m是0或1；A、B、D和E均為CH或CQ且T是N或者A、B、T和E均為CH或CQ且D是N或者A、B和D均為CH或CQ且E和T均為N；Q是選自下列的在1或2個(gè)碳原子上的取代基鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)基、氨基、單-或二-取代的氨基；R是H或低級(jí)烷基，R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；X是-NR-、-O-或-S-；Y是未取代的或者被選自下列的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的取代基所取代的苯基氨基；低級(jí)烷?；被?、鹵素、低級(jí)烷基、鹵代-低級(jí)烷基、羥基；低級(jí)烷氧基、苯基-低級(jí)烷氧基和氰基，或者與前述取代基二者擇一地或額外地，低級(jí)鏈烯基、C8-12烷氧基、低級(jí)烷氧基羰基、氨基甲?；?、低級(jí)烷基氨基甲酰基、低級(jí)烷?；?、鹵代-低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷基巰基、鹵代-低級(jí)烷基巰基、羥基-低級(jí)烷基、低級(jí)烷基磺?；?、鹵代-低級(jí)烷基磺?；?、苯基磺?；⒍u基硼(-B(OH)2)和低級(jí)亞烷基二氧基，或者Y是吡啶基；并且Z是鹵素；氨基；N-低級(jí)烷基氨基；羥基-低級(jí)烷基氨基；苯基-低級(jí)烷基氨基；N，N-二-低級(jí)烷基氨基；N-苯基-低級(jí)烷基-N-低級(jí)烷基氨基；N，N-二-低級(jí)烷基苯基氨基；低級(jí)烷?；被?；或選自苯甲?；被捅交?低級(jí)烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情況下的苯基均是未取代的或者被硝基或者氨基取代，或者還被鹵素、氨基、N-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷酰基或者被氨基甲?；〈?。
4.權(quán)利要求3所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是0-2；n是0或1；m是0或1；A、B、D和E均為CH或CQ且T是N，或者A、B和D均為CH或CQ且E和T均為N；Q與A、與D或與A和D成鍵，并且選自氟、氯或溴、甲基、乙基、丙基；羥基、甲氧基、乙氧基、2-羥基乙氧基、2-甲氧基乙氧基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基、羥基亞氨基甲基、乙?；?、甲?；?、甲基巰基或氨基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-正丙基-或N-異丙基氨基、2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基、3-(4-嗎啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺?；?氨基、(甲基磺酰基)氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氫-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基、2-羥基乙基氨基、(2-甲氧基乙基)甲基氨基、2-(2-羥基乙氧基)乙基氨基、螺烷、1-氮雜環(huán)丁烷基、3-乙氧基羰基-1-氮雜環(huán)丁烷基、3-羧基-1-氮雜環(huán)丁烷基、四氫-2H-1，3-嗪基、二氫-1，2，5-噻嗪-5(6H)-基、四氫-1(2H)-嘧啶基)、3-(乙酰基四氫)-1(2H)-嘧啶基、哌嗪基、4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪基、4-(乙氧基羰基)-1-哌嗪基、4-乙酰基-1-哌嗪基、哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羥基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺?；?1-哌啶基、(四氫-2H-吡喃-4-基)氧基、4-嗎啉基、3，5-二甲基嗎啉基或2-苯基-4-嗎啉基；R是H或甲基；X是-NR-、-O-或-S-；Y是未取代的或者被選自下列的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的取代基所取代的苯基氨基；乙酰基氨基；氟、氯或溴；叔丁基、甲基、乙基或丙基；三氟甲基；羥基；甲氧基、乙氧基；芐氧基；氰基或者(與前述取代基二者擇一地或額外地)乙烯基、C8-12烷氧基、叔丁氧基羰基、氨基甲?；?、N-甲基-氨基甲?；騈-叔丁基-氨基甲?；?、乙酰基、苯基氧基、三氟甲氧基、1，1，2，2-四氟乙基氧基、乙氧基羰基、甲基巰基、三氟甲基巰基、羥基甲基、甲磺?；?、三氟甲磺?；?、苯基磺酰基、二羥基硼(-B(OH)2)、2-甲基-嘧啶-4-基、唑-5-基、2-甲基-1，3-二氧戊環(huán)-2-基、1H-吡唑-3-基、1-甲基-吡唑-3-基、連接到兩個(gè)相鄰碳原子上的亞甲基二氧基，或者Y是吡啶基、2-、3-或4-氨基苯基、2-、3-或4-乙酰基氨基苯基、2-、3-或4-氟苯基、2-、3-或4-氯苯基、2-、3-或4-溴苯基、2，3-、2，4-、2，5-或3，4-二氯苯基、氯-氟-苯基、4-氯-2-氟苯氨基、2-、3-或4-甲基苯基、2-、3-或4-乙基苯基、2-、3-或4-丙基苯基、甲基-氟-苯基、2-、3-或4-三氟甲基苯基、2-、3-或4-羥基苯基、2-、3-或4-甲氧基苯基、2-、3-或4-乙氧基苯基、甲氧基-氯-苯基、2-、3-或4-芐氧基苯基、2-、3-或4-氰基苯基、2-、3-或4-甲基苯基、4-氯-5-三氟甲基苯基、3-溴-5-三氟甲基苯基、3，5-二甲基苯基、4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基、3-溴-4-乙基-苯基或3-氯芐基苯基；并且Z是鹵素、氨基、N-低級(jí)烷基氨基、羥基-低級(jí)烷基氨基、苯基-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、N-苯基-低級(jí)烷基-N-低級(jí)烷基氨基；N，N-二-低級(jí)烷基苯基氨基、低級(jí)烷?；被蜻x自苯甲?；被捅交?低級(jí)烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情況下的苯基均是未取代的或者被硝基或氨基取代，或者還被鹵素、氨基、N-低級(jí)烷基氨基、N，N-二-低級(jí)烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級(jí)烷氧基羰基、低級(jí)烷?；虬被柞；〈?。
5.權(quán)利要求2所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是1；n是0；m是0；B、D、E和T是CH或CQ且A是N或者A、B、D和E均為CH或CQ且T是N；Q是選自下列的在1或2個(gè)碳原子上的取代基氟、氯、甲基、乙基、丙基；氨基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-正丙基氨基、N-異丙基氨基、2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基、3-(4-嗎啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺酰基)氨基、(甲基磺?；?氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氫-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基、2-羥基乙基氨基、2-(2-羥基乙氧基)乙基氨基、四氫-1(2H)-嘧啶基、3-(乙?；臍?-1(2H)-嘧啶基、哌嗪基、4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪基、4-(乙氧基羰基)-1-哌嗪基、4-乙?；?1-哌嗪基、哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羥基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺?；?1-哌啶基、4-嗎啉基、3，5-二甲基嗎啉基或2-苯基-4-嗎啉基；R是H或甲基，X是-NH-；并且Y是未取代的或者被選自下列的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的取代基所取代的苯基氟、氯、溴；低級(jí)烷基、三氟甲基；4-氯苯基、2-、3-或4-甲基苯基、4-氯-5-三氟甲基苯基、3-溴-5-三氟甲基苯基、3，5-二甲基苯基；4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基或3-溴-4-乙基-苯基。
6.權(quán)利要求2所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是1；n是0；m是0；A、B、D和E均為CH或CQ且T是N；Q是選自下列的在一個(gè)碳原子上的取代基氨基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-正丙基氨基、N-異丙基氨基、2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基、3-(4-嗎啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺?；?氨基、(甲基磺?；?氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氫-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基、2-羥基乙基氨基、2-(2-羥基乙氧基)乙基氨基、哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羥基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺?；?1-哌啶基或嗎啉基；R是H；X-NH-；并且Y是未取代的或者被下列基團(tuán)所取代的苯基氯、甲基、三氟甲基、異丙基、叔丁基、甲氧基、4-三氟甲氧基苯基；萘基；未取代的或者被低級(jí)烷基所取代的環(huán)己基、未取代的或者被鹵素或低級(jí)烷基所取代的吲哚基。
7.權(quán)利要求6所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是1；n是0；m是0；A、B、D和E均為CH且T是N；Q是選自嗎啉基的在一個(gè)碳原子上的取代基；R是H；X是-NH-；并且Y是在4-位上被叔丁基或三氟甲基取代的苯基。
8.權(quán)利要求4所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中r是1；n是0；m是0；A、B和D均為CH且E和T均為N；X是-NH-；Y是在4-位上被叔丁基取代的苯基；并且Q是D上的2-羥基乙基氨基取代基。
9.權(quán)利要求1所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中n是0-2；r是0-2；m是0-4；J是二環(huán)雜芳族環(huán)系，其選自吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、異苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、色烯基和嘌呤基；Q是在二環(huán)環(huán)系的任一個(gè)或兩個(gè)環(huán)上并且在二環(huán)環(huán)系的任一個(gè)或兩個(gè)環(huán)上的一個(gè)或兩個(gè)碳原子上的取代基，其選自鹵素、未取代的或取代的低級(jí)烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜芳基、未取代的或取代的環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基、-C1-4烷基-雜環(huán)基、氨基、單-或二-取代的氨基；R是H或低級(jí)烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的環(huán)烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-雜芳基或-C1-4烷基-雜環(huán)烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基；Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環(huán)烷基或取代或未取代的雜環(huán)烷基；并且Z是氨基、單-或二-取代的氨基、鹵素、烷基、取代的烷基、羥基、醚化的或酯化的羥基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷?；?、氨基甲酰基、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；?、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯基-低級(jí)烷硫基、烷基苯硫基、苯基亞磺?；?、苯基-低級(jí)烷基亞磺?；?、烷基苯基亞磺?；?、苯基磺?；?、苯基-低級(jí)烷基磺?；蛲榛交酋；?，并且，如果存在一個(gè)以上的基團(tuán)Z(m≥2)，則取代基Z相同或不同。
10.權(quán)利要求9所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中n是0；r是0；m是0；J是二環(huán)雜芳族環(huán)系，其選自吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、異苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮雜萘基、色烯基和嘌呤基；R是H或低級(jí)烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亞砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亞脲基；并且Y是H、低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環(huán)烷基或取代或未取代的雜環(huán)烷基。
11.權(quán)利要求10所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中n是0；r是0；m是0；J是異喹啉基；X是NH；并且Y是4-叔丁基苯基。
12.權(quán)利要求10所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中n是0；r是0；m是0；J是喹唑啉基；X是NH；并且Y是4-叔丁基苯基。
13.權(quán)利要求10所述的化合物或其N-氧化物或可藥用鹽其中n是0；r是0；m是0；J是異喹啉基；X是NH；并且Y是2-叔丁基-嘧啶-5-基。
14.包含與可藥用載體混合的權(quán)利要求1所述的化合物的藥物組合物。
15.對患有其特征在于通過MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑傳導(dǎo)的信號(hào)過多的疾病的患者進(jìn)行治療的方法，該方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的權(quán)利要求1的化合物。
16.權(quán)利要求15所述的方法，其中，其特征在于通過MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑傳導(dǎo)的信號(hào)過多的疾病是癌癥。
17.權(quán)利要求16所述的方法，其中的癌癥是黑素瘤、結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌或肝癌。
18.權(quán)利要求17所述的方法，其中癌癥是黑素瘤。
19.治療患者的黑素瘤的方法，該方法包括(a)對患者的黑素瘤組織進(jìn)行檢測以確定黑素瘤組織是否表達(dá)突變型RAF激酶或過度表達(dá)野生型RAF激酶；和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織過度表達(dá)野生型RAF激酶或表達(dá)活化的突變型B-RAF激酶，則用抑制RAF激酶有效量的權(quán)利要求1所述的化合物對患者進(jìn)行治療。
20.權(quán)利要求19所述的方法，其中突變型RAF激酶對應(yīng)于選自下列的B-RAF激酶基團(tuán)的突變G1388A、G1388T、G1394C、G1394A、G1394T、G1403C、G1403A、G1753A、T1782G、G1783C、C1786G、T1787G、T1796A和TG1796-97AT。
21.權(quán)利要求20所述的方法，其中的黑素瘤表達(dá)突變型RAF激酶。
22.權(quán)利要求21所述的方法，其中突變型RAF激酶是V599E突變。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中的可變?nèi)〈绫疚乃?。該化合物可用于治療其特征在于異常的MAP激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑的病癥和疾病，諸如癌癥。
文檔編號(hào)C07D413/14GK1886378SQ200480034678
公開日2006年12月27日 申請日期2004年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月24日
發(fā)明者C·A·芬克, L·B·佩雷斯, T·M·拉姆齊, N·尤素夫, R·W·韋薩塞, D·B·巴特, M·L·薩比奧, S·金 申請人:諾瓦提斯公司