專利名稱：具有高活性纖維素酶的濃縮洗滌劑組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有纖維素酶的顆粒狀洗滌劑組合物，該洗滌劑組合物是以濃縮形式存在的。即它們與普通的洗滌劑組合物相比具有較高的密度并含有較少量的無機填充鹽。在本發(fā)明的洗滌劑組合物中，所說的纖維素酶包括通過本文敘述的C14CMC方法定義的高活性纖維素酶。該纖維素酶最好是一種特定的單一組分的內(nèi)葡聚糖酶。
在本技術(shù)領(lǐng)域中，確實非常需要不僅具有良好的清洗性能，而且具有良好的軟化織物的性能以及其他織物護理優(yōu)點的洗滌劑組合物。
對于用于織物的紡織品清洗和降低粗糙度試劑來說，分散纖維素的酶即纖維素酶的功效已經(jīng)被認識相當(dāng)長的時間;GB-A-2，075，028、GB-A-2，095，275和GB-A-2，094，826公開了具有用于改進清洗性能的纖維素酶的洗滌劑組合物GB-A-1，368，599公開了用于降低含棉織物粗糙度的纖維素酶的應(yīng)用;U.S.4，435，307敘述了由Humicola insolens及其餾分衍生的被稱作ACXI的分解纖維素的酶作為降低粗糙度的洗滌劑添加劑的應(yīng)用。
EP-A-0269168公開了含有纖維素酶的最佳洗滌劑組合物，該洗滌劑組合物在弱堿性的PH值范圍內(nèi)配制，并提供了綜合的織物清洗、織物柔軟和織物護理性能。
在WO89109259中已經(jīng)公開了用于降低含棉織物粗糙度的纖維素酶制劑，該纖維素酶制劑含有對于纖維素具有高內(nèi)切酶活性和親合力的內(nèi)葡聚糖酶組分。
然而，纖維素酶的實際應(yīng)用受到這樣一個事實的阻礙，即纖維素酶制劑如在上述先有技術(shù)文獻中公開的那些纖維素酶制劑為復(fù)雜的混合物，其中只有一部分在織物護理方面是有效的。因此，難以實現(xiàn)用于洗滌劑工業(yè)的纖維素酶的成本可行的工業(yè)生產(chǎn)，并且需要應(yīng)用大量的這類纖維素酶制劑，以便達到所需的作用于織物的效果。
就洗滌劑的應(yīng)用性而言，在纖維素酶生產(chǎn)方面的改進通常還未成為足以能辨認的。通過在EP-A-350098中公開的C14CMC方法可以規(guī)定與纖維素酶的洗滌劑應(yīng)用相關(guān)的纖維素酶選擇標準。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，除去10%的固定化放射性標記的羧甲基纖維素之最小值可提供高活性的纖維素酶。在共同未決的丹麥專利申請No.1159/90(申請日1990年5月5日)中已經(jīng)公開了本發(fā)明的屬于高活性定義的優(yōu)選的一類纖維素酶，其中披露了基本由同類的內(nèi)葡聚糖酶組分組成的纖維素酶制劑，該同類的內(nèi)葡聚糖酶組分對于引起抗部分純化的43KD纖維素酶(由Humicola insolens DM1800衍生)的單無性繁殖抗體具有免疫反應(yīng)性。
對于含纖維素物質(zhì)的處理有利的是這種特定的內(nèi)葡聚糖酶纖維素酶組分，這一發(fā)現(xiàn)使現(xiàn)在有可能成本可行地生產(chǎn)纖維素酶(例如通過使用重組DNA技術(shù))，并允許僅用少量的纖維素酶制劑，并達到所需的作用于織物的效果。
另一方面，市場上正在銷售新一代洗滌劑組合物，最好稱之為“濃縮洗滌劑”，盡管它們已被給出各種商品名稱，例如“Ultra”、“Supra”、“Micro”……。這類洗滌劑組合物的特性是，與普通的洗滌劑組合物相比，它們具有較高的密度，并且通過使用比普通洗滌劑組合物少得多的量的“濃縮”洗滌劑組合物，它們能夠達到相同的效果。就其組成而言，通過較少量的無機填充鹽便能最好地反映這一特性。這類“濃縮”洗滌劑組合物的效能最好是通過省去預(yù)洗循環(huán)并使用分散和擴散裝置來達到，上述分散和擴散裝置在主洗循環(huán)開始時被直接放入洗衣機轉(zhuǎn)筒中。
本發(fā)明的目的是提供濃縮形式的洗滌劑組合物，該洗滌劑組合物具有較高的密度并含有少量無機填充鹽，它顯示出最佳的纖維素酶效能。
在EP-A-381397中已揭示了低離子強度對酶的性能，特別是對脂肪酶的性能的作用。
然而，現(xiàn)已驚奇地發(fā)現(xiàn)，濃縮基質(zhì)對本發(fā)明選擇的酶的作用遠遠高于由現(xiàn)有技術(shù)纖維素酶(如在EP-A-381397中公開的)所預(yù)期的作用。
本發(fā)明的另一個目的是提供在洗衣機中處理織物的方法，該方法包括將本發(fā)明洗滌劑組合物以低濃度用于主洗循環(huán)中。
本發(fā)明涉及含有表面活性劑、助洗劑和酶，若需要還含有常用的添加劑的顆粒狀洗滌劑組合物，其特征在于所說的酶包括纖維素酶制劑，按照C14CMC方法，這種纖維素酶制劑提供除去至少10%的固定化放射性標記的羧甲基纖維素，該制劑以25×10-6%(重量)的纖維素酶蛋白質(zhì)存在于洗衣試驗溶液中。
優(yōu)選地，所說的纖維素酶化合物基本由同類的內(nèi)葡聚糖酶組分組成，該同類的內(nèi)葡聚糖酶組分對于引起抗部分純化的約≈43KD纖維素酶(由Humicola insolens，DSM1800衍生)的單元性繁殖抗體具有免疫反應(yīng)性，或是所說的≈43KD內(nèi)葡聚糖酶的同系物。
該洗滌劑組合物為顆粒形式，其特征在于其密度高于普通洗滌劑組合物的密度。在20℃下測定時本發(fā)明組合物的密度范圍為每升組合物550至950g，優(yōu)選每升組合物650至850g。
就組成而言，通過無機填充鹽的量便能最好地表示本發(fā)明組合物的“濃縮”形式。無機填充鹽為粉末形式的洗滌劑組合物的常用成分。在普通的洗滌劑組合物中，該填充鹽存在的量相當(dāng)大，一般為組合物總重量的17-35%。
在本發(fā)明組合物中，所說的填充鹽存在的量不超過組合物總重量的15%，優(yōu)選不超過10%，最優(yōu)選不超過5%。
無機填充鹽(如在本發(fā)明組合物中所指的)選自堿金屬和堿土金屬的硫酸鹽和氯化物。
優(yōu)選的填充鹽是硫酸鈉。
表面活性劑在本發(fā)明洗滌劑組合物中可以使用各種各樣的表面活性劑。美國專利3，664，961(于1972年5月23日頒布給Norris)中一般列舉了陰離子、非離子、兩性的和兩性離子類，并給出了各種表面活性劑。
陰離子表面活性劑的混合物特別適合于本發(fā)明，特別是磺酸鹽和硫酸鹽表面活性劑的混合物，其重量比為5∶1至1∶2，優(yōu)選為3∶1至2∶3，更優(yōu)選為3∶1至1∶1。優(yōu)選的磺酸鹽包括烷基中具有9至15，特別是具有11至13個碳原子的烷基苯磺酸鹽，和α-磺酸化脂肪酸甲酯，其中脂肪酸是由C12-C18脂肪源，特別是由C16-C18脂肪源衍生的。在每個例子中的陽離子是堿金屬，最好是鈉。優(yōu)選的硫酸鹽表面活性劑是烷基中具有12至18個碳原子的烷基硫酸鹽任意地與乙氧基硫酸鹽混合，該乙氧基硫酸鹽在其烷基中具有10至20個碳原子，最好是具有10至16個碳原子，并且平均乙氧基化度為1至6。本發(fā)明優(yōu)選的烷基硫酸鹽的例子是牛脂烷基硫酸鹽、椰子烷基硫酸鹽和C14-15烷基硫酸鹽。在每個例子中的陽離子也是堿金屬陽離子，最好是鈉。
用于本發(fā)明的一類非離子表面活性劑是環(huán)氧乙烷與疏水部分的縮合物，它提供了具有平均親水-親油平衡(HLB)度范圍為8至17，優(yōu)選9.5至13.5，更優(yōu)選10至12.5的表面活性劑。所說的疏水(親油)部分就其性質(zhì)而言可以是脂族的或芳族的，并且它與任何特定的疏水基縮合的聚氧乙烯基的長度可容易地進行調(diào)節(jié)，以便產(chǎn)生在親水和疏水部分之間具有所需平衡度的水溶性化合物。
特別優(yōu)選的這類非離子表面活性劑是每摩爾醇含有3-8摩爾環(huán)氧乙烷的C9-C15伯醇乙氧基化物，特別是每摩爾醇含有6-8摩爾環(huán)氧乙烷的C14-C15伯醇和每摩爾醇含有3-5摩爾環(huán)氧乙烷的C12-C14伯醇。
另一類非離子表面活性劑包括下述通式的烷基聚葡糖苷化合物其中，z是由葡萄糖得到的部分，R是含有12至18個碳原子的飽和的疏水烷基;t是0至10和n是2或3;x是1.3至4，該化合物含有小于10%的未反應(yīng)的脂肪醇和小于50%的短鏈烷基聚葡糖苷。這類化合物和其在洗滌劑中的應(yīng)用被公開在EP-B0070077、0075996和0094118中。
下式的多羥基脂肪酸酰胺表面活性劑作為非離子表面活性劑也是適合的

其中，R1是H、C1-4烴基、2-羥乙基、2-羥丙基，或其混合物，R2是C5-31烴基，和Z是帶有直接連到其鏈上的至少3個羥基的直鏈烴基的多羥基烴基，或其烷氧基化衍生物。優(yōu)選R1是甲基，R2是直鏈C11-15烷基或鏈烯基，如椰子烷基或其混合物，且Z是在還原胺化反應(yīng)中由糖如葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖還原得到的。
另一類表面活性劑是半極性表面活性劑，例如氧化胺。適合的氧化胺選自單C8-C20，優(yōu)選C10-C14N-烷基或鏈烯基氧化胺和二氧化亞丙基-1，3-二胺，其中保持N位置被甲基、羥乙基或羥丙基取代。
還有一類表面活性劑是兩性表面活性劑，例如多胺基類表面活性劑。
陽離子表面活性劑也可以在本發(fā)明的洗滌劑組合物中使用，并且適合的季銨表面活性劑選自單C8-C16，優(yōu)選C10-C14N-烷基或鏈烯基銨表面活性劑，其中保持N位置被甲基、羥乙基或羥丙基取代。
優(yōu)選各類表面活性劑的混合物，更優(yōu)選的是陰離子-非離子混合物。以及陰離子-非離子-陽離子混合物。特別優(yōu)選的混合物描述在英國專利2040987和歐洲公開申請0087914中。洗滌劑組合物可含有1-70%(重量)的表面活性劑，但通常存在于本發(fā)明組合物中的表面活性劑的量為1%至30%，較優(yōu)選10-25%(重量)。
助洗劑助洗劑物質(zhì)一般是以本發(fā)明洗滌劑組合物的10至60%存在。本發(fā)明的組合物不含或基本不含含磷酸鹽的助洗劑(本發(fā)明所定義的基本不含是組成量少于總洗滌劑助洗劑體系的1%)，并且本發(fā)明的助洗劑體系由水溶性助洗劑，水不溶性助洗劑，或其混合物組成。
水不溶性助洗劑可以是無機離子交換物質(zhì)，一般是無機水合硅鋁酸鹽物質(zhì)，更優(yōu)選的是水合的合成沸石，如水合沸石A、X、B或HS。
優(yōu)選的硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)具有下述的通式的晶胞單元其中M是鈣交換的陽離子，z和y至少為6，z與y的摩爾比為1.0至0.5，且X至少為5，優(yōu)選為7.5至276，更優(yōu)選10至264。所說的硅鋁酸鹽物質(zhì)是以水合形式存在的，并且優(yōu)選的是含有10至28%更優(yōu)選的是含有18至22%的水的結(jié)晶體。
上述硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)，其特征在于其粒度直徑為0.1至10微米，優(yōu)選為0.2至4微米。本文中的術(shù)語“粒度直徑”代表所給出的離子交換物質(zhì)的平均粒度直徑，它是通過常規(guī)的分析技術(shù)，例如利用掃描電子顯微鏡的顯微測定來測定的。所說的硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)的另一個特征在于其鈣離子交換能力至少為200mg當(dāng)量CaCO3水硬度/g硅鋁酸鹽(以無水基準計算)，且通常的范圍為300mg當(dāng)量/g至352mg當(dāng)量/g。本文的硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)的再一個特征在于其鈣離子交換速率，詳細描述見GB-1，429，143。
在本發(fā)明實施中使用的硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)是市場上可買到的，并且可以是天然存在的物質(zhì)，但最好是合成衍生的物質(zhì)。用于生產(chǎn)硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)的方法詳述在美國專利3，985，669中。用于本發(fā)明的優(yōu)選的合成結(jié)晶硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)是可買到的稱作沸石A、沸石B、沸石X、沸石HS的物質(zhì)及其混合物。在特別優(yōu)選的實施方案中，所說的結(jié)晶的硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)是沸石A，且具有如下通式其中X為20至30，優(yōu)選27。具有通式Na86〔(AlO2)86(SiO2)106〕10.276H2O的沸石X以及具有通式Na6〔(AlO2)6(SiO2)6〕7.5H2O的沸石HS也是適合的。
另一種適合的水不溶性無機助洗劑物質(zhì)是層狀硅酸鹽，例如SKS-6(Hoechst)。SKS-6是一種由硅酸鈉(Na2Si2O5)組成的層狀硅酸鹽晶體。高Ca++/Mg++結(jié)合容量主要是陽離子交換機制。在熱水中，該物質(zhì)變得更加可溶。
水溶性助洗劑可以是單體或低聚物羧酸鹽螯合劑。
含有一個羧基的適合的羧酸鹽包括乳酸、乙醇酸和其醚的衍生物(公開在比利時專利831，368、821，369和821，370中)。含有兩個羧基的多羧酸鹽包括琥珀酸、丙二酸、(亞乙二氧基)雙乙酸、馬來酸、雙乙醇酸、酒石酸、羥基丙二酸和富馬酸的水溶性鹽以及醚羧酸鹽(描述在德國公開說明書2，446，686和2，446，687及美國專利3，935，257中)，以及亞硫酰羧酸鹽(描述在比利時專利840，623中)。含有三個羧基的多羧酸鹽包括，尤其是水溶性檸檬酸鹽、烏頭酸鹽和檸康酸鹽以及琥珀酸鹽的衍生物，如羧甲氧基琥珀酸鹽(描述在英國專利1，379，241中)、乳氧基琥珀酸鹽(描述在荷蘭申請7205873中)和含氧多羧酸鹽物質(zhì)，如2-氧雜-1，1，3-丙烷三羧酸鹽(描述在英國專利1，387，447中)。
含有四個羧基的多羧酸鹽包括含氧二琥珀酸鹽(公開在英國專利1，261，829中)、1，1，2，2-乙烷四羧酸鹽、1，1，3，3-丙烷四羧酸鹽和1，1，2，3-丙烷四羧酸鹽。含有磺基取代基的多羧酸鹽包括磺基琥珀酸鹽衍生物(公開在英國專利1，398，421和1，398，422及美國專利3，936，448中)和磺化熱解檸檬酸(描述在英國專利1，082，179中)。而含有膦基取代基的多羧酸鹽公開在英國專利1，439，000中。
脂環(huán)和雜環(huán)多羧酸鹽包括環(huán)戊烷-順，順，順-四羧酸鹽、環(huán)戊二烯金屬化物五羧酸鹽、2，3，4，5-四氫呋喃-順，順，順-四羧酸鹽、2，5-四氫呋喃-順-二羧酸鹽、2，2，5，5-四氫呋喃-四羧酸鹽、1，2，3，4，5，6-己烷六羧酸鹽和多元醇，例如山梨糖醇、甘露糖醇和木糖醇的羧甲基衍生物。芳族多羧酸鹽包括苯六甲酸、1，2，4，5-苯四酸和苯二甲酸的衍生物(公開在英國專利1，425，343中)。
在上述多羧酸鹽中，優(yōu)選的多羧酸鹽是每個分子含有多至三個羧基的羥基羧酸鹽，特別是檸檬酸鹽。
用于本發(fā)明組合物中的優(yōu)選的助洗劑體系包括水不溶性硅鋁酸鹽助洗劑如沸石A和水溶性羧酸鹽螯合劑如檸檬酸的混合物。
對于本發(fā)明來說，能形成助洗劑體系部分的其他助洗劑物質(zhì)包括無機物質(zhì)例如堿金屬碳酸鹽、碳酸氫鹽、硅酸鹽和有機物質(zhì)例如有機膦酸鹽、氨基聚亞烷基膦酸鹽和氨基多羧酸鹽。
其他適合的水溶性有機鹽是均聚或共聚酸或其鹽，其中，多羧酸含有通過不多于兩個碳原子而相互分開的至少兩個羧基。
這類聚合物公開在GB-A-1，596，756中。這類鹽的例子是分子量為2000-5000的多羧酸鹽及其與馬來酐的共聚物，該共聚物分子量為20，000至70，000，特別是約40，000。
纖維素酶已經(jīng)通過不同的分析方法定義了對于各種應(yīng)用的酶的活性而且特別是纖維素酶的活性。這些方法均試圖提供在使用性能方面所預(yù)期的實際評價或至少與使用性能相關(guān)的測定。如已詳述于歐洲專利申請EP-A-350098中。許多方法特別是生產(chǎn)纖維素酶經(jīng)常使用的這些方法與洗衣洗滌劑組合物中纖維素酶的使用性能沒有密切的關(guān)系。這是由于各種其他的使用條件造成的，對于上述使用條件來說，這些活性的測定方法已被改進。
在EP-A-350098中所述的方法已經(jīng)被改進，使對于洗衣洗滌劑組合物中的纖維素酶活性的評定成為并具有可預(yù)測性的相互關(guān)系。
因此，為了鑒別用于本發(fā)明的纖維素酶與并不構(gòu)成本發(fā)明目的的纖維素酶，本發(fā)明使用在EP-A-350098中公開的方法。下文被稱為C14CMC方法的篩選方法(該方法采用的是由EP-A-350098所公開的方法)可敘述如下原理用于篩選的C14CMC方法的原理是，在規(guī)定的纖維素酶濃度下，在洗滌溶液中，測定從織物底物中除去的固定化羧甲基纖維素(CMC)。使用C14放射性碳，通過某些CMC的放射性標記來測定除去的CMC。在纖維素酶處理之前和之后，簡單計數(shù)在織物底物上的放射性C14的量便能評價纖維素酶的活性。
樣品的制備CMC的制備按照表Ⅰ來制備放射性CMC儲液。通過EP-A-350098所述的方法可得到放射性CMC。
織物底物織物底物是具有5cm×5cm大小的細棉織品布樣。在其中心用0.35ml放射性標記的CMC儲液接種，然后將該細棉織品污布風(fēng)干。
CMC的固定為了在細棉織品布樣上固定放射性標記CMC，使用由德國Original Haunau制造的瓶式去污力測試儀“Linitest Original Haunau”。該瓶式去污力測試儀的金屬瓶用400ml硬水(4毫摩爾Ca++/升)充滿，每個瓶可以使用13塊布樣之最大數(shù)目。然后，該瓶在瓶式去污力測試儀中，在從20至60℃的加熱循環(huán)中保溫40分鐘。保溫后，所說的布樣在流動的自來水中漂洗1分鐘。將它們擠壓并使之風(fēng)干至少30分鐘。
按照EP-A-350098的方法，具有固定化的放射性CMC的布樣品在沒有洗滌時也可作為“空白樣品”來測定。
樣品的處理洗衣試驗溶液按照表Ⅱ的組成來制備洗衣試驗溶液。將其平衡至PH為7.5。該洗衣試驗溶液是向其添加纖維素酶試驗樣品的基礎(chǔ)物。在測定要添加的纖維素酶的量之前，應(yīng)小心操作，通過添加水達到100%平衡而不稀釋該洗衣試驗溶液。添加的用于此篩選試驗中的纖維素酶的量應(yīng)當(dāng)使在洗衣試驗溶液中纖維素酶蛋白達到25×10-6%(重量)(在14.5℃下等于0.25mg/l)。
洗滌方法在洗衣模擬方法中，處理用放射性標記CMC如此接種的污布。該洗衣方法是在由德國Original Haunau制造的瓶式去污力測試儀“Linitest Original Haunau”中模擬的。將單塊污布放入20cm3玻璃管形瓶中。該管形瓶用10ml洗衣試驗溶液充滿，然后將其密封，使之不漏液體?？蓪⒍噙_5個管形瓶放入每個瓶式去污力測試儀的瓶中。該瓶用水充滿，水是用作洗衣模擬的熱傳遞介質(zhì)。洗衣模擬在20至60℃的加熱循環(huán)中進行40分鐘。
處理樣品后，該管形瓶浸在冷水中，接著將每塊污布從其管形瓶中取出，在燒杯中用流動的軟水漂洗，將其擠壓并使之風(fēng)干至少30分鐘。
測定為了測定除去的放射性標記CMC，使用閃爍計數(shù)器，例如LKB1210°Ultrabeta閃爍計數(shù)器。為了得到最精確的結(jié)果，應(yīng)該遵循用于該特定的閃爍計數(shù)器的最佳操作的手控指令。例如，對于LKB 1210 Ultrabeta閃爍計數(shù)器來說，應(yīng)當(dāng)按照下列步驟進行。將要測定的污布放入用12ml閃爍劑液體(例如得自Packard的閃爍劑299)充滿的塑料管形瓶中。然后使污布穩(wěn)定至少30分鐘。然后，將管形瓶放入LKB 1210Ultrabeta閃爍計數(shù)器中，并得到污布的相應(yīng)的放射性計數(shù)。
為了測定僅僅由于纖維素酶而除去的CMC的量，必須測定已被同時接種但在沒有纖維素酶存在的洗衣試驗溶液中已被處理的污布。于是，可把纖維素酶的活性表示為除去的放射性標記CMC的百分數(shù)。該百分數(shù)通過下式計算除去的放射性CMC%＝ (XO-XC)/(XO) ×100其中XO是用沒有纖維素酶存在的洗衣試驗溶液處理的污布的放射性閃爍計數(shù)XC是用含有待評價的纖維素酶的洗衣試驗溶液處理的污布的放射性閃爍計數(shù)統(tǒng)計依據(jù)，方法的確定為了提供正確的統(tǒng)計結(jié)果，應(yīng)使用標準的統(tǒng)計分析。對于所給出的實例，由于使用LKB 1210 Ultrabeta閃爍計數(shù)器，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)對于每個放射性閃爍計數(shù)來說，可使用3個污布樣品量值。為了通過內(nèi)部的不同方法相互校核所得結(jié)果，推薦使用EP-A-350098的“空白樣品”的測定和計算。這將能發(fā)現(xiàn)和消除錯誤。
結(jié)果分析所述篩選試驗確實提供了一種快速、獨特并且可靠的方法，用來鑒別滿足本發(fā)明活性標準的纖維素酶與不是本發(fā)明部分的纖維素酶。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，按照上述的C14CMC方法，除去10%或更多的固定的放射性標記CMC表明，相應(yīng)的纖維素酶滿足了本發(fā)明的需要。
對本技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)熟練的技術(shù)人員顯而易見的是，除去的百分數(shù)高于10%表明相應(yīng)的纖維素酶具有較高的活性。因此，可以預(yù)期，按照C14CMC方法，在洗衣試驗溶液中的蛋白質(zhì)濃度下，能提供除去高于25%或最好高于50%的放射性標記CMC的纖維素酶將達到此纖維素酶用于洗衣洗滌劑的更好的性能指標。
同樣已預(yù)期到的是，用于C14CMC方法的較高濃度纖維素酶將會提供較高的除去百分數(shù)。然而，在纖維素酶濃度和由此得到的除去百分數(shù)之間不存在已經(jīng)證實的線性關(guān)系。
此外還已預(yù)期到，對于C14CMC方法，使用較高濃度的纖維素酶將會提供較高的除去百分數(shù)。
表Ⅰ放射性C14標記CMC儲液 (所有百分數(shù)都以溶液總重量計)

＊總的CMC含有非放射性和放射性CMC，而放射性CMC提供了放射性，該放射性足以使在所使用的閃爍計數(shù)器上清晰地讀數(shù)。例如，放射性CMC可具有0.7毫居/g的活性并可被混合。
表Ⅱ洗衣試驗溶液 (所有百分數(shù)都以溶液總重量計)<

>按照本發(fā)明，優(yōu)選的纖維素酶是在丹麥專利申請1159/90中所述的那些纖維素酶。例如，用于本發(fā)明組合物中的纖維素酶制劑可基本由同類的內(nèi)葡聚糖酶組分所組成，該同類的內(nèi)葡聚糖酶組分對于引起抗高度純化的43KD纖維素酶(由Humicola insolens，DSM1800衍生)的抗體具有免疫反應(yīng)性，或是所說的43KD內(nèi)葡聚糖酶的同系物。
應(yīng)該強調(diào)的是，本發(fā)明的所有纖維素酶必須滿足上述篩選試驗的標準。然而，在丹麥專利申請1159/90中規(guī)定了其他標準，將其與本發(fā)明的篩選試驗結(jié)合便能確定優(yōu)選的纖維素酶。
優(yōu)選用于本發(fā)明組合物中的纖維素酶制劑，除了滿足篩選試驗外，內(nèi)葡聚糖酶組分顯示的CMC內(nèi)切酶活性為每毫克總蛋白量至少約50、優(yōu)選至少約60、特別優(yōu)選至少約90CMC內(nèi)切酶單位。尤其優(yōu)選的內(nèi)葡聚糖酶組分顯示的CMC內(nèi)切酶活性為每毫克總蛋白量至少100CMC內(nèi)切酶單位。
在本文中，術(shù)語“CMC內(nèi)切酶活性”是指以內(nèi)葡聚糖酶組分能將纖維素降解為葡萄糖、纖維素二糖和三糖的能力來表示的內(nèi)葡聚糖酶活性，該活性的測定是在用本發(fā)明的纖維素酶制劑保溫后，通過測定羧甲基纖維素(CMC)溶液粘度的降低來進行的，詳述如下。
由CMC粘度的降低可測定CMC內(nèi)切酶(內(nèi)葡聚糖酶)活性，敘述如下在PH值為9時，在0.1M三羥甲基氨基甲烷緩沖液中制備含有35g/l的CMC(Hercules 7 LFD)的底物溶液。將待分析的酶樣品溶于相同的緩沖液中。10ml底物溶液與0.5ml酶溶液混合，并將其轉(zhuǎn)移到在40℃下恒溫的粘度計(如Haake VT 181，NV傳感器，181rpm)中。混合后并再過30分鐘盡快取粘度讀數(shù)。在這些條件下使粘度降低至1/2的酶的量被定義為1單位CMC內(nèi)切酶活性。
用本技術(shù)領(lǐng)域中技術(shù)熟練的技術(shù)人員已知的方法，使用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和用標記蛋白質(zhì)的等電聚焦來分別測定用于本發(fā)明的纖維素酶制劑中的內(nèi)葡聚糖酶組分的分子量和等電點(PI)。用這種方法測定的特定內(nèi)葡聚糖酶組分的分子量是43KD，該種內(nèi)葡聚糖酶的等電點為約5.1。
纖維素二糖水解酶的活性可以定義為對于纖維素二糖對硝基苯基的活性。該活性是以在37℃下PH值為7.0時每分鐘釋放的微摩爾硝基苯基來測定的。已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的內(nèi)葡聚糖酶組分基本上沒有纖維素二糖水解酶活性。
本發(fā)明纖維素酶制劑中的內(nèi)葡聚糖酶組分最初是通過多種純化方法分離的，即包括按照U.S.4，435，307進行的粗制H.insolens纖維素酶混合物的反相HPLC純化。這種方法已經(jīng)令人驚奇地導(dǎo)致分離出作為單一組分的43KD內(nèi)葡聚糖酶，由于它的特別高的內(nèi)葡聚糖酶活性而使其具有意想不到的優(yōu)良性能。
除了篩選試驗外，用于本發(fā)明組合物中的纖維素酶還可以進一步定義為具有內(nèi)葡聚糖酶活性的酶(下文稱之為“內(nèi)葡聚糖酶”)，或具有內(nèi)葡聚糖酶活性的酶的同系物，這些酶具有列于附加的順序表ID＃2中的氨基酸順序。
在本文中，術(shù)語“同系物”是指通過DNA編碼的多肽，該DNA在某些特定條件下(如在5×SSC中預(yù)浸漬，在20%甲酰胺、5×Denhardt′s溶液、50mM磷酸鈉、pH6.8及50μg變性聲處理的小牛胸腺DNA的溶液中在40℃預(yù)雜交1h，接著在補加了100μM ATP的相同溶液中在40℃雜交18h)雜交到與為具有這種氨基酸順序的內(nèi)葡聚糖酶編碼的DNA相同的探查物上。該術(shù)語包括上述順序的衍生物，得到這些衍生物可通過將一個或多個氨基酸殘基加到天然順序的C-和N-端的一端或兩端，在天然順序的一個或多個位點上取代一個或多個氨基酸殘基，在天然氨基酸順序的一端或兩端或在天然順序中的一個或多個位點上消除一個或多個氨基酸殘基，或在天然順序中的一個或多個位點上插入一個或多個氨基酸殘基。
本發(fā)明的內(nèi)葡聚糖酶的生產(chǎn)可以通過Humicola物種如Humicola insolens，例如菌株DSM1800，按照關(guān)于用于專利程序目的的微生物保藏的國際承認的布達佩斯協(xié)定的條款(布達佩斯協(xié)定)，于1981年10月1日保藏在Deutsche Sammlung von Mikroorganismen，Mascheroder Weg 1B，D-3300 Braunschweig，F(xiàn)RG。
另一方面，除了篩選試驗外，用于本發(fā)明的纖維素酶還可以進一步定義為具有列于附加的順序表ID＃4中的氨基酸順序的內(nèi)葡聚糖酶，或顯示內(nèi)葡聚糖酶活性的酶(如上定義的)的同系物。所述內(nèi)葡聚糖酶的生產(chǎn)可以通過Fusarium物種如Fusarium oxysporum，例如菌株DSM2672，按照布達佩斯協(xié)定的條款，于1983年6月6日保藏在Deutsche Sammlung von Mikroorganismen，Mascheroder Weg 1B，D-3300 Braunschweig，F(xiàn)RG。
此外，預(yù)期的同系的內(nèi)葡聚糖酶可以由能產(chǎn)生分解纖維素的酶的其他微生物，例如物種Trichoderma、Myceliophthora、Phanerochaete、Schizophyllum、Penicillium、Aspergillus及Geotricum衍生而來。
然而，對于本發(fā)明纖維素酶制劑的工業(yè)生產(chǎn)來說，優(yōu)選使用重組DNA技術(shù)或其他技術(shù)，包括所涉及的微生物的發(fā)酵調(diào)整或突變，以確保所需的酶活性的過剩生產(chǎn)。這些方法和技術(shù)是本領(lǐng)域已知的，并且可由本領(lǐng)域中熟練的技術(shù)人員很容易地實施。
因此，內(nèi)葡聚糖酶組分可以是通過一種方法生產(chǎn)的酶，該方法包括，在允許表達內(nèi)葡聚糖酶組分或其前體的條件下的培養(yǎng)介質(zhì)中，培養(yǎng)用重組DNA媒介物轉(zhuǎn)化的宿主細胞，該媒介物攜帶著編碼所述的內(nèi)葡聚糖酶組分或所述的內(nèi)葡聚糖酶組分前體的DNA順序，以及編碼功能的DNA順序，這些功能允許表達編碼內(nèi)葡聚糖酶組分或其前體的DNA順序，并從培養(yǎng)物中回收內(nèi)葡聚糖酶組分。
含有由編碼如上所述的內(nèi)葡聚糖酶或酶的前體形式的DNA順序的DNA組成包括具有列于附加的順序表ID＃1或ID＃3中的DNA順序的DNA組成或其變體。DNA順序合適的變體的實例是不產(chǎn)生內(nèi)葡聚糖酶的另一種氨基酸順序的核苷酸取代物，但此核苷酸取代物卻對應(yīng)于引入此DNA組成的宿主生物體的密碼子的使用，或者是產(chǎn)生不同的氨基酸順序的核苷酸取代物，因此該核苷酸取代物可能產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，這種蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)可能會產(chǎn)生具有不同性質(zhì)的內(nèi)葡聚糖酶突變體而非天然酶?？赡艿淖凅w的其他實例有在該順序的一端插入一個或多個核苷酸，或在該順序的一端或其內(nèi)消除一個或多個核苷酸。
用于本發(fā)明的編碼內(nèi)葡聚糖酶的DNA組成可以通過已經(jīng)確立的標準方法進行合成制備，例如，由S.L.Beaucage和M.H.Caruthers在Tetrahedron Letters 22，1981，PP.1859-1869中所述的磷酰胺方法或由Matthes等人在EMBO Journal3，1984，PP.801-805中所述的方法。按照磷酰胺方法，例如在自動DNA合成儀中合成低聚核苷酸，將其提純、退火、連接并在合適的媒介物中進行無性繁殖。
編碼內(nèi)葡聚糖酶或其前體的DNA組成的分離可以通過例如建立cDNA或建立產(chǎn)生纖維素酶的微生物(如Humicola insolens，DSM1800)的基因組庫來進行，并通過常規(guī)方法篩選陽性無性繁殖，如通過使用低聚核苷酸探查物進行雜交，所用低聚核苷酸探查物是根據(jù)標準方法(參考Sambrook等人，Molecular CloningA Laboratory Manual，2nd.Ed.Cold Spring Harbor，1989)以內(nèi)葡聚糖酶的全部或部分氨基酸順序為基礎(chǔ)合成的，或通過選擇可表達合適的酶活性(即上面定義的CMC內(nèi)酶活性)的無性繁殖，或通過選擇可產(chǎn)生帶有抗天然纖維素酶(內(nèi)葡聚糖酶)抗體的反應(yīng)性蛋白質(zhì)的無性繁殖。
最后，DNA組成可以是混合合成的與基因組的、混合合成的與cDNA或混合基因組的與cDNA的起源物，該起源物可按照標準方法通過連接合成的、基因組的或cDNA起源物(在適當(dāng)?shù)那闆r下)的片段進行制備，此片段對應(yīng)于整個DNA組成的各個部分。DNA組成還可以通過使用特定的引發(fā)物進行聚合酶鏈反應(yīng)來制備，例如在US4，683，202中或R.K.Saiki等人在Science 239，1988，pp.487-491中所描述的那樣。
有上述DNA組成插入的重組表達媒介物包括任何可便于進行重組DNA方法的媒介物，媒介物的選擇常常取決于媒介物被引入的宿主細胞。因此，媒介物可以是自動復(fù)制媒介物，即以染色體外實體形態(tài)存在的媒介物，該媒介物的復(fù)制不依賴于染色體的復(fù)制，例如質(zhì)粒。另一方面，該媒介物可以在它被引入宿主細胞時被結(jié)合進入宿主細胞基因組中，并與其已被結(jié)合進入的染色體一起被復(fù)制。
在該媒介物中，編碼內(nèi)葡聚糖酶的DNA順序應(yīng)當(dāng)可行地被連接到合適的啟動子和終止密碼子順序上。該啟動子可以是在選擇的宿主細胞中顯示轉(zhuǎn)錄活性的任何DNA順序，并且可以由編碼宿主細胞的同系或異系蛋白質(zhì)的基因衍生得到。用于連接分別為內(nèi)葡聚糖酶、啟動子和終止密碼子的編碼的DNA順序并將其插入合適的媒介物中的方法對于本領(lǐng)域中熟練的技術(shù)人員來說是已知的(參見，例如Sambrook等人，在所引的書中)。
用上述DNA組成或上述表達媒介物轉(zhuǎn)化的宿主細胞可以屬于例如Aspergillus物種，最好是Aspergillys oryzae或Aspergillus niger。真菌細胞可以通過一種方法來轉(zhuǎn)化，該方法包括原生質(zhì)體的形成和轉(zhuǎn)化，接著按自身為已知的方式進行細胞壁的再生。Aspergillus用作宿主微生物被描述在EP 238023中(Novo Industri A/S的)，其內(nèi)容在此引入作為參考。宿主細胞還可以是酵母細胞，例如Saccharomyces cerevisiae菌株。
另一方面，宿主生物可以是細菌，特別是Streptomyces和Bacillus及E.coli菌株。細菌細胞的轉(zhuǎn)化可以按照常規(guī)方法進行。例如，正象Sambrook等人在Molecular CloningA Laboratory Manual，Cold Spring Harbor，1989中所描述的。
合適的DNA順序及媒介物結(jié)構(gòu)的篩選也可以通過標準方法進行(參見Sambrook等人，在所引的書中)。
用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的宿主細胞的介質(zhì)可以是適于所討論的宿主細胞生長的任何常用介質(zhì)。被表達的內(nèi)葡聚糖酶可以便利地被分泌進入培養(yǎng)介質(zhì)中，并且可以通過已知方法將其從培養(yǎng)介質(zhì)中加以回收，這些方法包括通過離心或過濾從介質(zhì)中分離出細胞，利用鹽如硫酸銨沉淀介質(zhì)的蛋白質(zhì)組分，接著利用色譜方法如離子交換色譜法、親合色譜法等。
通過使用如上說明的重組DNA技術(shù)、蛋白質(zhì)提純技術(shù)、發(fā)酵和突變技術(shù)或其他本領(lǐng)域已知的技術(shù)，提供高純度的內(nèi)葡聚糖酶是可能的。
在本發(fā)明組合物中上述纖維素酶的濃度應(yīng)當(dāng)是這樣的，即釋放在洗滌溶液中的酶蛋白質(zhì)的量為每升洗滌溶液0.005至40mg，優(yōu)選為每升洗滌溶液0.01至10mg。
任選組分本發(fā)明組合物通常將包括任選組分，它們一般構(gòu)成了洗滌劑組合物的一部分。這種任選組分的實例有抗再沉積和污垢懸浮劑，熒光增白劑、漂白劑、漂白活化劑、抑泡劑、抗結(jié)塊劑、染料和顏料，可以根據(jù)需要以各種量將它們加入。
適用于本發(fā)明的抗再沉積和污垢懸浮劑包括纖維素衍生物，如甲基纖維素、羧甲基纖維素和羥乙基纖維素以及均聚或共聚的聚羧酸或其鹽。這類聚合物包括前面提到的作為助洗劑的聚丙烯酸酯和馬來酐-丙烯酸共聚物，以及馬來酐與乙烯、甲基乙烯基醚或異丁烯酸的共聚物，其中馬來酐占共聚物至少20%(摩爾)。這些物質(zhì)的用量通常為組合物的0.5%至10%(重量)，較優(yōu)選0.75%至8%(重量)，最優(yōu)選1%至6%(重量)。
優(yōu)選的熒光增白劑為適當(dāng)?shù)年庪x子，其實例有4，4′-雙-(2-二乙醇氨基-4-苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)茋-2∶2′-二磺酸二鈉，4，4′-雙-(2-嗎啉代-4-苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)茋-2∶2′-二磺酸二鈉，4，-4′-雙-(2，4-二苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)茋-2∶2′-二磺酸二鈉，4′，4″-雙-(2，4-二苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)茋-2-磺酸-鈉，4，4′-雙(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羥乙基氨基)-S-三嗪-6-基氨基)茋-2，2′-二磺酸二鈉，4，4′-雙-(4-苯基-2，1，3-三唑-2-基)茋-2，2′-二磺酸二鈉，4，4′-雙-(2-苯胺基-4-(1-甲基-2-羥乙基氨基)-S-三嗪-6-基氨基)茋-2，2′-二磺酸二鈉和2-茋基-4″-(萘并-1′，2′∶4，5)-1，2，3-三唑-2″-磺酸鈉。
可以使用任何顆粒無機過水合物漂白劑，其用量為組合物的3%至40%(重量)，較優(yōu)選8%至25%(重量)，最優(yōu)選12%至20%(重量)。這種漂白劑的優(yōu)選實例有過硼酸鈉-水合物和四水合物，過碳酸鹽，及其混合物。
另一種優(yōu)選單獨混合的組分是過氧羧酸漂白劑前體，通常稱為漂白活化劑，它優(yōu)選以顆?；蚪Y(jié)塊形式被加入。合適的這類化合物的實例公開在英國專利1586769和2143231中，它們形成顆粒形式的方法被描述在歐洲公開專利申請0062523中。這類化合物的優(yōu)選實例為四乙酰乙二胺和3，5，5-三甲基己酰氧基苯磺酸鈉。
漂白活化劑一般用量為組合物的0.5%至10%(重量)，較優(yōu)選1%至8%(重量)，最優(yōu)選2%至6%(重量)。
另一種任選組分是抑泡劑，以硅氧烷和氧化硅-硅氧烷混合物為例。硅氧烷通常由烷基化聚硅氧烷物質(zhì)提供，而硅一般以細碎形式使用，例如硅氣凝膠和干凝膠以及各種疏水硅。這些物質(zhì)可以以顆粒形式被加入，這些顆粒中的抑泡劑是便于釋放地被結(jié)合在水溶的或水分散的非表面活性洗滌劑基本不滲透的載體中。用另一種方法，可將抑泡劑溶解或分散于液體載體中，并通過噴霧到一種或多種其他組分上而施用。
如上所述，有用的硅氧烷抑泡劑包括上文指出類型的烷基化硅氧烷和固體氧化硅的混合物。這類混合物是通過將硅氧烷添加到固體氧化硅的表面來制備的。優(yōu)選的硅氧烷抑泡劑由疏水的硅烷化的(最好是三甲基硅烷化)氧化硅提供，這種硅的粒度在10毫微米至20毫微米范圍內(nèi)，其比表面積大于50m2/g，它與二甲基硅氧烷流體緊密地混合，此硅氧烷的分子量在約500至約200，000范圍內(nèi)且硅氧烷與硅烷化的氧化硅之重量比為約1∶1至約1∶2。
優(yōu)選的硅氧烷泡沫抑制劑公開在Bartollota等人的美國專利3，933，672中。其他特別有用的抑泡劑是自乳化硅氧烷抑泡劑，其描述在德國專利申請DTOS2，646，126(于1977年4月28日公開)中。這種化合物的一個實例是DC-544，市場上可由Dow Corning買到，它是硅氧烷/乙二醇共聚物。
上述抑泡劑一般用量為組合物重量的0.001%至2%(重量)，優(yōu)選0.01%至1%(重量)。泡沫抑制劑最好是以單獨的顆粒體形式加入，這便能允許其中含有其他泡沫抑制物質(zhì)，如C20-C24脂肪酸，微晶石蠟和環(huán)氧乙烷與環(huán)氧丙烷的高分子量共聚物，而它們對于基質(zhì)的分散性無不利影響。制備這種泡沫抑制顆粒體的技術(shù)公開在上述Bartolotta等人的美國專利3，933，672中。
其他有用的聚合物是聚乙二醇，優(yōu)選的是，分子量為1000至10000，較優(yōu)選2000至8000，最優(yōu)選約4000的那些聚乙二醇。這些聚合物的用量為0.20%至5%，較優(yōu)選0.25%至2.5%(重量)。這些聚合物和上述均聚或共聚的聚羧酸酯鹽對于改善白度保持性、織物灰分沉積以及改善在過渡金屬雜質(zhì)存在下對泥土、蛋白質(zhì)污垢和可氧化污垢的清潔性能是很有價值的。
用于本發(fā)明組合物的去污劑是常用的對苯二酸與乙二醇和/或丙二醇單元按各種排列的共聚物或三元共聚物。這類聚合物的實例公開在共同轉(zhuǎn)讓的美國專利4，116，885和4，711，730以及歐洲專利申請0272033中。根據(jù)EP-A-0272033，特別優(yōu)選的聚合物具有下式
其中PEG為-(OC2H4)O-，PO為(OC3H6O)，且T為(pcOC6H4CO)。
某些聚合物如分子量一般為5000-20000，優(yōu)選10000-15000的聚乙烯吡咯烷酮也形成有用的試劑，用以阻止洗滌過程中織物之間不穩(wěn)定染料的轉(zhuǎn)移。
織物柔軟劑也可以加入本發(fā)明的洗滌劑組合物中。這些試劑可以是無機類型或有機類型的。無機柔軟劑以綠土粘土為例，它被公開在GB-A-1，400，898中。有機織物柔軟劑包括水不溶性叔胺，如公開在GB-A-1514276和EP-B-0011340中，這些叔胺與單C12-C14季銨鹽的組合被公開在EP-B-0026527和EP-B-0026528中，雙長鏈酰胺公開在EP-B-0242919中?？椢锶彳涹w系的其他有用的有機組分包括高分子量的聚環(huán)氧乙烷，如公開在EP-A-0299575和0313146中。
綠土粘土的量一般為5%至20%，優(yōu)選8%至15%(重量)，使該物質(zhì)以干混組分加到制劑的其余部分。有機柔軟劑如水不溶性叔胺或雙長鏈酰胺物質(zhì)加入的量為0.5%至5%(重量)，通常為1%至3%(重量)，而高分子量的聚環(huán)氧乙烷物質(zhì)和水溶性陽離子物質(zhì)加入的量為0.1%至2%，通常為0.15%至1.5%(重量)。這些物質(zhì)一般被加到組合物的噴霧干燥部分，不過在某些實例中，更適宜以干混顆粒將它們加入，或以熔融液體將它們噴霧到組合物的其他固體組分上。
除本發(fā)明特定的纖維素酶制劑之外的酶可以存在于本發(fā)明組合物中，如蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。
制備方法本發(fā)明的組合物可以通過各種方法制備，包括干混合、噴霧干燥、附聚和?；约斑@些方法的任意組合。
優(yōu)選的制備方法制備本發(fā)明組合物的優(yōu)選方法包括在高速混合機和干混合機中噴霧干燥與附聚相組合。
含有相對不溶的陰離子表面活性劑的第一顆粒狀組分被噴霧干燥，在與其余部分再混合之前將部分噴霧干燥產(chǎn)物轉(zhuǎn)移并經(jīng)過低濃度的非離子表面活性劑噴霧。第二顆粒狀組分的制備是用碳酸鈉作中和劑，在連續(xù)高速混合機如Lodige KM混合機中通過陰離子表面活性劑酸的干燥中和來進行的。然后將第一和第二組分以及其他干混合組分如羧酸鹽螯合劑、無機過氧漂白劑、漂白活化劑、污垢懸浮劑、硅酸鹽和酶一起進料到傳送帶上，由此它們被輸送到水平旋轉(zhuǎn)的滾筒，在滾筒內(nèi)將香料及硅氧烷抑泡劑噴霧到該產(chǎn)物上。在極其優(yōu)選的組合物中，采用另一滾筒混合步驟，該步驟中引入低濃度(近似為2%)的細碎晶狀硅鋁酸鹽，以增加密度并改善顆粒的流動性能。
洗滌方法當(dāng)將遠遠小于普通洗滌劑組合物的量的本發(fā)明組合物用于洗衣機的主洗循環(huán)時，本發(fā)明的濃縮洗滌劑組合物能夠達到相同的效果。
因此，在本發(fā)明的另一實施方案中，同時提供了在洗衣機中洗滌織物的方法，其中對于主洗循環(huán)，本發(fā)明洗滌劑組合物的用量為15至170g。
通常，在歐洲的條件下，用于主洗循環(huán)的洗滌劑組合物的建議用量為80至140g，不需要預(yù)洗。
本發(fā)明的洗滌劑組合物最好直接送入轉(zhuǎn)筒而不是間接地通過洗衣機的外殼。這可以極容易地實現(xiàn)，即通過在袋或貯存器中加入組合物，在洗滌循環(huán)開始時，隨著攪拌、轉(zhuǎn)筒內(nèi)洗滌水的溫升或浸沒組合物，由此將其釋放出來。該貯存器與要洗的織物一起放在轉(zhuǎn)筒內(nèi)。另一方法是，洗衣機本身可以調(diào)節(jié)以使組合物直接加入轉(zhuǎn)筒，例如通過在入口蓋中的懸浮裝置。
含有包裝在袋或貯存器中的洗滌劑組合物的產(chǎn)品通常以這樣的方式進行設(shè)計，以便使整個貯存器保持在干燥狀態(tài)下，以防止干燥時貯存器內(nèi)東西的外流，但當(dāng)將其暴露于洗滌環(huán)境之中通常是浸沒在水溶液中時，該貯存器又要適宜釋放它里面的東西。
貯存器一般是柔韌性的，如袋或盒。袋可以具有涂敷了不透水的保護性物質(zhì)的纖維狀結(jié)構(gòu)，以便保持袋內(nèi)的東西不變，如在歐洲公開專利申請0018678中所公開的。用另一方法，袋可以由水不溶性合成聚合物制成，并有封邊或密封用來隔絕水溶液介質(zhì)，如在歐洲公開專利申請0011500、0011501、0011502和0011968中所公開的。水易脆密封的一種簡易形式包括一道處理的水溶性粘合劑和由不透水聚合物膜如聚乙烯或聚丙烯制成的密封一邊的袋。
在各種袋或貯存器產(chǎn)品形式中，可以采用疊層層狀產(chǎn)品，其中中心可變形層用組合物浸漬和/或涂敷，然后應(yīng)用一個或多個外層以產(chǎn)生織物狀的美學(xué)效果。這些層可以一起密封以便在使用過程中保持連接，或者可以分別與水接觸以便促進涂敷或浸漬物質(zhì)的釋放。
另一種疊層形式包括一個模壓或變形層用來提供一系列袋狀貯存器，將洗滌劑組合物定量沉積到每個袋中，在第一層上覆蓋第二層，并密封兩層相接觸的袋狀貯存器之間的那些區(qū)域。組分以顆粒、糊或熔融形式沉積，疊層層在其被加入水中之前應(yīng)當(dāng)阻止袋狀貯存器內(nèi)的物質(zhì)外流。這些層可以是獨立的或者保持連在一起與水接觸，唯一的要求是這種結(jié)構(gòu)應(yīng)當(dāng)能夠使袋狀貯存器內(nèi)的物質(zhì)快速釋放到溶液中去。每單位面積基體的袋狀貯存器的數(shù)量是一個選擇問題，但通常在每平方米500至25，000之間。
用于本發(fā)明的可變形疊層的合適的物質(zhì)其中包括泡沫材料、紙和紡織與非紡織品。
然而，實施本發(fā)明洗滌方法的優(yōu)選方法包括使用可重復(fù)使用的帶有間隔層的配料裝置，該裝置可透過液體但不能透過固體組合物。
這類裝置公開于歐洲專利申請
發(fā)明者A·C·貝克, R·A·A·瑟勒曼斯, A·布施 申請人:普羅格特·甘布爾公司