水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法
【專利摘要】本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法，包括：第一步，水套內(nèi)的水經(jīng)水套出水口、水箱進水口流入水箱；第二步，當水套內(nèi)無水時，對水套進行加熱；第三步，當培養(yǎng)箱箱體內(nèi)腔的溫度上升到設(shè)定值時，停止對水套加熱，并使培養(yǎng)箱箱體內(nèi)腔的溫度保持在設(shè)定值溫度，進行高溫滅菌；第四步，完成高溫滅菌后，培養(yǎng)箱內(nèi)腔自然冷卻至第一設(shè)定溫度時，打開水泵、水套出水口及水箱進水口，使水在水套與水箱之間循環(huán)流動；第五步，箱體內(nèi)腔溫度降至第二設(shè)定溫度后，使內(nèi)膽充滿純凈水。本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法能實現(xiàn)高溫干熱空氣滅菌或濕熱滅菌，可以彌補目前水套式二氧化碳培養(yǎng)箱不能實現(xiàn)高溫滅菌的缺陷，大大提高了培養(yǎng)研究實驗的成功率。
【專利說明】
水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明主要涉及一種滅菌方法，尤其涉及一種水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體 內(nèi)的生長環(huán)境，如穩(wěn)定的溫度（37°C )、穩(wěn)定的CO2水平（5% )、恒定的酸堿度（PH值：7. 2~ 7. 4)、較高的相對飽和濕度（多95% )，來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。廣泛應(yīng) 用于細胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)，常見于細胞動力學(xué)研究、哺乳動物細胞分泌 物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細胞生 產(chǎn)抗體、體外受精（IVF)、干細胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。
[0003] 二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方式有氣套式加熱和水套式加熱。氣套式加熱是通過遍布箱 體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)腔進行加熱，又叫六面直接加熱。氣套式培養(yǎng)箱的內(nèi)部加熱 系統(tǒng)一般由：不銹鋼內(nèi)膽、加熱電纜、空氣間隔層、保溫層組成，由于加熱電纜直接對內(nèi)膽加 熱，具有加熱升溫快，結(jié)構(gòu)簡單，可方便地進行高溫滅菌處理等優(yōu)點。
[0004] 水套式加熱是通過一個獨立的水套層包圍內(nèi)部的腔體來維持溫度恒定的，水套式 培養(yǎng)箱的內(nèi)部加熱系統(tǒng)一般由：不銹鋼水套內(nèi)側(cè)構(gòu)成內(nèi)膽、注水層、不銹鋼水套外層，加熱 電纜、保溫層組成。
[0005] 水套式培養(yǎng)箱的加熱方式是通過加熱電纜對水套外壁進行加熱，加熱水套內(nèi)水， 然后水溫通過內(nèi)壁不銹鋼間接加熱培養(yǎng)箱內(nèi)膽腔內(nèi)空間，具有加熱均勻，內(nèi)膽溫度腔偏差 小，溫度穩(wěn)定性高的優(yōu)點，由于水的熱容量很大，因此，斷電后相比氣套式培養(yǎng)箱，溫度下降 得更慢，有利于生物樣品的保存。由于水套式培養(yǎng)箱具有溫度均勻性好，溫度穩(wěn)定，斷電后 更長的保溫時間，因此，深受用戶青睞，但是，由于水套注水量很大，一般約有50升水，因此 至今無法進行高溫消毒滅菌，一般水套式培養(yǎng)箱在工作中都通過內(nèi)部HEPA過濾器進行空 氣循環(huán)過濾內(nèi)部空氣以防止不利于細胞/組織培養(yǎng)的污染源生長（污染源：見下所述）。行 業(yè)內(nèi)對兩種不同加熱方式的二氧化碳培養(yǎng)箱又稱之為氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱和水套式二 氧化碳培養(yǎng)箱。
[0006] 二氧化碳培養(yǎng)箱是對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。在生物活體內(nèi)，生物 體有自身的免疫系統(tǒng)保護細胞/組織，但是在體外培養(yǎng)時，沒有任何保護自己的免疫屏障。 對于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)：溫度、二氧化碳濃度和濕度，大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究 實驗的需要。然而，對于細胞來說，非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合所述污染源的生存。二 氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：細菌、真菌（霉菌和酵母菌）、病毒、支原體、非同種細胞。經(jīng) 研究實驗表明，以上污染源一旦生長，細胞/組織培養(yǎng)最后基本只能放棄，實驗無法挽救， 對于許多取樣困難的實驗研究來說損失無法估量。因此，培養(yǎng)箱內(nèi)腔空間潔凈度要求顯得 非常關(guān)鍵。
[0007] 目前，為保證二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)腔潔凈度要求，二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌、消毒技術(shù) 主要有干熱、濕熱、紫外燈照射、消毒劑擦拭等。高溫干熱空氣滅菌（溫度大于100°c )和 濕熱（溫度90°C~97°C，濕度大于95% )滅菌是現(xiàn)今世界公認的最有效的兩種滅菌技術(shù)。 目前市場上流行的氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱已經(jīng)普遍采用干熱和濕熱滅菌技術(shù)；水套式二氧 化碳培養(yǎng)箱消毒普遍采用的是紫外燈照射和消毒劑擦拭或HEPA過濾潔凈，而沒有能實現(xiàn) 干熱或濕熱滅菌的水套式二氧化碳培養(yǎng)箱。紫外燈照射法的有效性受很多因素，如遮擋、時 間、強度、照射距離，濕度等影響，消毒效果很難保證；消毒劑擦拭法對培養(yǎng)箱腔體內(nèi)部設(shè)計 的死角、各種器件因無法擦拭等因素導(dǎo)致消毒效果也很有限；而HEPA過濾無法清除生長的 微生物并可能產(chǎn)生二次污染。
[0008] 因此，對于水套式二氧化碳培養(yǎng)箱，若能實現(xiàn)干熱和濕熱滅菌，為保證水套式二氧 化碳培養(yǎng)箱工作空間達到實驗所需的清潔度及無菌環(huán)境要求來說將是突破性的技術(shù)進步。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的在于提供一種能實現(xiàn)水套式二氧化碳培養(yǎng)箱高溫滅菌的水套式培 養(yǎng)箱高溫滅菌方法。
[0010] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法，包括：第一步，水套內(nèi) 的水經(jīng)水套出水口、水箱進水口流入水箱；第二步，當水套內(nèi)無水時，對水套進行加熱；第 三步，當培養(yǎng)箱箱體內(nèi)腔的溫度上升到設(shè)定值時，停止對水套加熱，并使培養(yǎng)箱箱體內(nèi)腔的 溫度保持在設(shè)定值溫度，進行高溫滅菌；第四步，完成高溫滅菌后，培養(yǎng)箱內(nèi)腔自然冷卻至 第一設(shè)定溫度時，打開水栗、水套出水口及水箱進水口，使水在水套與水箱之間循環(huán)流動； 第五步，箱體內(nèi)腔溫度降至第二設(shè)定溫度后，使內(nèi)膽充滿純凈水。
[0011] 所述第三步中，設(shè)定值溫度為濕熱滅菌90°C~97°C，干熱滅菌120°C~140°C。
[0012] 所述第三步中，保持在設(shè)定值溫度的時間為2小時~9小時。
[0013] 所述第四步中，第一設(shè)定溫度為50°C~70°C。
[0014] 所述第五步中，第二設(shè)定溫度為37°C。
[0015] 本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法能實現(xiàn)高溫干熱空氣滅菌（溫度大于100°C ) 或濕熱（溫度90°C~97°C，濕度大于95%)滅菌，可以彌補目前水套式二氧化碳培養(yǎng)箱不 能實現(xiàn)高溫滅菌的缺陷，大大提高了培養(yǎng)研究實驗的成功率。
【附圖說明】
[0016] 圖1為水套式培養(yǎng)箱結(jié)構(gòu)示意圖；
[0017] 圖2為水套式培養(yǎng)箱第一次加水示意圖；
[0018] 圖3為水套式培養(yǎng)箱正常工作示意圖；
[0019] 圖4為本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法高溫滅菌模式示意圖；
[0020] 圖5為水套式培養(yǎng)箱水循環(huán)系統(tǒng)不意圖；
[0021] 圖6為本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法實施例培養(yǎng)箱內(nèi)腔中心點90°C升溫溫 度變化曲線圖；
[0022] 圖7為本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法實施例培養(yǎng)箱內(nèi)腔中心點升溫、降溫溫 度變化曲線圖；
[0023] 圖8為傳統(tǒng)氣套式培養(yǎng)箱90°C高溫濕熱滅菌的溫度變化曲線圖；
[0024] 圖9為本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法90°C高溫濕熱滅菌的溫度變化曲線圖。
[0025] 本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法附圖中附圖標記說明：
[0026] 1-箱體 2-水套 3-水套出水口
[0027] 4-水套進水口 5-水箱 6-水箱進水口
[0028] 7-水箱出水口 8-第一循環(huán)通道 9-外部進水口
[0029] 10-加熱單元 11-第二循環(huán)通道 12-水栗
[0030] 13-排水口 14-單向常閉型電磁閥15-水套排氣通道
[0031] 16-安全閥 17-水箱排氣通道 18-高水位傳感器
[0032] 19-低水位傳感器 20-溫度傳感器 21-液位傳感器
[0033] 22-保溫層
【具體實施方式】
[0034] 下面結(jié)合附圖對本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法作進一步詳細說明。
[0035] 由于一些技術(shù)原因，本領(lǐng)域無人關(guān)注并深入研究解決，市場上也從未出現(xiàn)過帶高 溫滅菌功能的水套式培養(yǎng)箱。這是由于一般水套培養(yǎng)箱內(nèi)有約50升水，熱容量特別大，升 溫特別慢，通常情況下，即使從室溫15°C加熱到常用工作溫度37. (TC需要一天時間；如要 加熱到最低滅菌溫度90°C，則需要很大功率和很漫長的時間，即使加熱到90°C，由于水套 培養(yǎng)箱保溫性能好，降溫將更漫長（可能長達幾天），缺乏實用性。
[0036] 同時，由于滅菌溫度很高，接近水的沸點，在水套內(nèi)的大量水一旦沸騰將產(chǎn)生高壓 蒸汽，造成危險。很多觀點認為，將水套內(nèi)水抽干，可以加熱內(nèi)膽腔體，但是由于水套內(nèi)的水 變?yōu)榭諝?，空氣是溫度的不良?dǎo)體，將大大影響加熱升溫速度，可能長時間無法加熱至最低 滅菌溫度90°C，導(dǎo)致該方法缺乏實用性。對此，本發(fā)明人在發(fā)明的初期也存在非常大的疑 惑，擔心無法快速加熱至滅菌溫度而使本方法對用戶無實用意義。
[0037] 最后，對于水套內(nèi)抽出的約50升水的放置問題也會導(dǎo)致培養(yǎng)箱的體積臃腫而缺 乏實用性，或因為體積過大，占地面積過大而不受用戶歡迎。
[0038] 經(jīng)過本發(fā)明的實驗，以上問題都獲得了解決，并且某些性能更好。
[0039] 圖8為傳統(tǒng)90°C高溫濕熱滅菌氣套式培養(yǎng)箱的溫度變化曲線；升溫階段：約2小 時；90°C滅菌階段：保持9小時；降溫恢復(fù)階段：約14小時。
[0040] 圖9為采用本發(fā)明的水套式培養(yǎng)箱90°C高溫濕熱滅菌的溫度變化曲線。
[0041] 由以上2個圖可見，對比傳統(tǒng)氣套式培養(yǎng)箱，本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法 的降溫恢復(fù)速度大大加快了，約4小時，時間縮短了約10小時，這意味著更快的滅菌周期， 或者相同滅菌周期，可以延長有效滅菌時間。相對傳統(tǒng)氣套式培養(yǎng)箱滅菌性能大幅度提升。
[0042] 從水套出水口放出水后，水套內(nèi)仍然殘留少量水，一旦加熱，溫度過高殘余水則可 能會沸騰，產(chǎn)生蒸汽，因此，在本發(fā)明中，我們增加了專用通氣口、安全泄壓閥、溫度保護裝 置，并針對以上所述裝置進行了測試，測試結(jié)果完全符合安全要求。為防止水套內(nèi)水管堵 塞，我們增加了雙重的水位傳感器，確保水套內(nèi)水完全排除后才開始滅菌升溫流程。
[0043] 水套式培養(yǎng)箱，包括：水套2，水套2設(shè)置在中空的培養(yǎng)箱箱體1的腔體內(nèi)，水套2 為一面敞開、五面盛水的隔水夾層。水套2內(nèi)上部裝有高水位傳感器18和低水位傳感器 19。當水套2內(nèi)水位高于高水位傳感器18的探頭時，信號會傳至控制裝置，控制裝置發(fā)出 信號停止供水；當水套2內(nèi)水位低于低水位傳感器19的探頭時，信號會傳至控制裝置，控制 裝置發(fā)出信號經(jīng)由第二循環(huán)通道11從水套進水口 4進行補水。
[0044] 水套2內(nèi)下部裝有液位傳感器21，當液位傳感器21感知水套2內(nèi)無水，信號傳到 控制裝置，控制裝置發(fā)出指令信號給水套2外側(cè)的加熱單元10對水套2進行加熱。水套2 內(nèi)下部裝有一個溫度傳感器20,當水套2內(nèi)水溫升到設(shè)定值時，通過控制裝置發(fā)出指令信 號停止對水套2加熱。
[0045] 在水套2底部與水箱5連接的第一循環(huán)通道8內(nèi)設(shè)有單向常閉型電磁閥14,設(shè)備 正常運行時閥門關(guān)閉。水套2內(nèi)腔需要實施高溫滅菌前，向常閉型電磁閥14通過控制裝置 發(fā)出指令信號打開，從水套出水口 3放出循環(huán)水至水箱5。
[0046] 水套2頂部有通氣口，其上連接有水套排氣通道15,在內(nèi)腔進行高溫滅菌時，若水 套2夾層內(nèi)有殘余水，殘余水升溫后會釋放水蒸汽，水蒸汽通過所述水套排氣通道15排出， 保持水套2夾層內(nèi)空氣壓力與外部大氣壓力一致。同時，在水套排氣通道15內(nèi)設(shè)有機械式 安全閥16,在高溫滅菌過程中若發(fā)生所述水套排氣通道15堵塞，水套2夾層內(nèi)空氣壓力大 于外界大氣壓時，安全閥16打開釋放壓力，始終保持水套2夾層內(nèi)空氣壓力與外部大氣壓 力一致。
[0047] 在高溫滅菌模式打開時，水套2外側(cè)五個面的加熱單元10打開，給水套2加熱，水 套2內(nèi)腔溫度升至高溫滅菌設(shè)定值時，為保持高溫滅菌設(shè)定值溫度對水套2內(nèi)腔進行滅菌， 控制裝置可任意打開或關(guān)閉任一加熱單元10。當液位傳感器21感知水套2內(nèi)無水時，控制 裝置發(fā)出指令對水套2進行加熱。溫度傳感器20測定水套2夾層內(nèi)水溫升到設(shè)定值時，控 制裝置發(fā)出指令信號停止對水套2加熱。
[0048] 水箱5上部有一水箱進水口 6,通過第一循環(huán)通道8與水套2底部的水套出水口 3 相通。水箱5底部有一排水口 13,水套內(nèi)的水受污染后需要換水時排水口 13打開排出循環(huán) 水。水箱5上部有排氣口，其上連接有水箱排氣通道17,為保持水箱5內(nèi)氣壓與外部大氣壓 相一致。水箱5底部的水箱出水口 7處設(shè)有一單向常閉型電磁閥14,循環(huán)水系統(tǒng)運行時受 控制裝置指令打開。水箱5的容積大于水套2的容積，這樣設(shè)計的目的是：1)保證在本發(fā) 明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌過程中，水箱5能夠完全容納從水套2放入到水箱5的水；2)培 養(yǎng)箱長期工作致使水套2內(nèi)的水位低于低水位傳感器19的探頭時，控制裝置發(fā)出信號開啟 補水系統(tǒng)，水箱5內(nèi)多余的水可作補水用。
[0049] 循環(huán)單元包括一個第二循環(huán)通道11及微型水栗12。當水套2首次加水或水套2 內(nèi)循環(huán)水更換時，水栗12通過控制裝置發(fā)出指令信號打開，從培養(yǎng)箱外部經(jīng)由外部進水口 9吸入純凈水，通過水套2頂部水套進水口 4給水套2加水。當水套2夾層內(nèi)水位升至高水 位傳感器18的探頭時，信號傳至控制裝置，控制裝置發(fā)出指令信號，水栗12停止工作，停止 給水套2加水。
[0050] 在開啟高溫滅菌模式前，水套2底部的單向常閉型電磁閥14受控制裝置發(fā)出指令 打開，水套2夾層內(nèi)水經(jīng)水箱進水口 6流入水箱5。在高溫滅菌模式進行時，循環(huán)單元停止 工作。在高溫滅菌模式結(jié)束時，水箱5底部的單向常閉型電磁閥14和水栗12同時打開，循 環(huán)水被水栗12吸附經(jīng)由第二循環(huán)通道11通過水套進水口 4進入水套2內(nèi)。
[0051] 需要更換水套2夾層內(nèi)循環(huán)水時，水套2底部的單向常閉型電磁閥14和水箱出水 口 7受控制裝置發(fā)出指令打開，水套2內(nèi)水經(jīng)水箱進水口 6流入水箱5,再經(jīng)過水箱出水口 7排出箱體1外。
[0052] 需要清洗水套2和水箱5時，控制裝置發(fā)出指令，水栗12開啟，水套2底部的單向 常閉型電磁閥14打開，水箱5底部的單向常閉型電磁閥14打開，循環(huán)水在水套2和水箱5 之間循環(huán)流動，清洗完畢，打開水箱5底部排水口 13,排出循環(huán)水。
[0053] 當水套2內(nèi)的水位低于低水位傳感器19的探頭時，信號傳至控制裝置，控制裝置 發(fā)出指令，水栗12開啟，水箱5底部的單向常閉型電磁閥14打開，水栗12從水箱5吸附水 經(jīng)水套進水口 4給水套2內(nèi)補水。當水套2內(nèi)水位高于高水位傳感器18的探頭時，信號傳 至控制裝置，控制裝置發(fā)出指令，水栗12關(guān)閉，水箱5底部的單向常閉型電磁閥14關(guān)閉，補 水停止。
[0054] 第一次加水，如圖2所示，箭頭表示水流方向，控制裝置發(fā)出指令，水栗12開啟，外 部進水口 9打開，水流如圖1所示，從外部進水口 9經(jīng)過第二循環(huán)通道11通過水套進水口 4流入水套2,當水套2內(nèi)水位升至高水位傳感器18的探頭時，信號傳至控制裝置，控制裝 置發(fā)出指令，水栗12關(guān)閉，停止供水。
[0055] 圖3所示，所有閥門關(guān)閉，水栗12關(guān)閉。當培養(yǎng)箱內(nèi)腔中心點溫度低于設(shè)定值 時，例如設(shè)定值是36. 8°C，信號傳至培養(yǎng)箱控制裝置，發(fā)出指令，則布置于水套2底部的加 熱單元10打開加熱，當培養(yǎng)箱內(nèi)腔中心點溫度高于設(shè)定值時，例如設(shè)定值是37°C，信號傳 至培養(yǎng)箱的控制裝置，發(fā)出指令，則布置于水套2底部的加熱單元10停止加熱，如此反復(fù)， 以保證培養(yǎng)箱箱體1內(nèi)腔溫度在設(shè)定溫度范圍內(nèi)變化，例如保證培養(yǎng)箱箱體1內(nèi)腔溫度在 36. 8°C~37. 2°C范圍內(nèi)變動。為防止實驗運行中培養(yǎng)箱內(nèi)腔中心點溫度計損壞，造成主控 系統(tǒng)失靈，則啟動應(yīng)急方案，溫度傳感器20暫時起到上述測定功能，防止實驗失敗。
[0056] 圖4所示為本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法高溫滅菌模式示意圖。開啟高溫滅 菌模式，控制裝置發(fā)出指令，單向常閉型電磁閥14打開，循環(huán)水從水套2內(nèi)從水套出水口 3 流出，經(jīng)過第一循環(huán)通道8從水箱進水口 6流入水箱5內(nèi)，當循環(huán)水完全從水套2流入水箱 5之后，液位傳感器21感知無水信號傳至控制裝置，發(fā)出指令，布置在水套2外側(cè)的左、右、 下、后四個方向的加熱源10和外門上的加熱元器件同時通電，對水套2進行加熱，當培養(yǎng)箱 箱體1內(nèi)腔溫度升到設(shè)定值時（例如設(shè)定值90°C )，控制裝置發(fā)出指令，所有加熱單元停止 加熱。此時培養(yǎng)箱箱體1內(nèi)腔溫度會繼續(xù)升高，當溫度升到極限值時，例如92°C，培養(yǎng)箱箱 體1內(nèi)腔溫度開始下降，當培養(yǎng)箱箱體1內(nèi)腔溫度下降到設(shè)定值（例如設(shè)定值90°C)，信號 傳至控制裝置，相關(guān)加熱單元再次通電對水套2加熱，當培養(yǎng)箱箱體1內(nèi)腔溫度升到設(shè)定值 時（例如設(shè)定值90°C)，控制裝置發(fā)出指令，所有加熱單元10停止加熱。如此循環(huán)反復(fù)，使 培養(yǎng)箱箱體1內(nèi)腔溫度保持在設(shè)定值溫度（例如設(shè)定值90°C )持續(xù)設(shè)定時間長度，例如設(shè) 定時間9個小時，即持續(xù)保持培養(yǎng)箱箱體1內(nèi)腔溫度在90°C達9個小時，此時所有加熱單元 10停止對水套2加熱，以此達到對培養(yǎng)箱箱體1內(nèi)腔進行90°C高溫高濕滅菌。
[0057] 本發(fā)明水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法實現(xiàn)90°C高溫高濕滅菌情況。
[0058] 打開水栗12及外部進水口 9,使水套2充滿純凈水；關(guān)閉水栗12及外部進水口 9 的閥門，打開單向常閉型電磁閥14,讓水從水套出水口 3流出，經(jīng)過第一循環(huán)通道8從水箱 進水口 6流入水箱5內(nèi)儲存；水套五面五組加熱源10同時通電。內(nèi)腔中心溫度升到90°C 時，加熱單元10停止加熱，同時測量培養(yǎng)箱外部可觸及部位各關(guān)鍵點所達到的溫度；自水 套2內(nèi)腔中心點溫度達到90°C后，PC電腦間隔5秒記錄內(nèi)腔中心點溫度參數(shù)；自水套2內(nèi) 腔中心點熱電偶輸出溫度達到90°C后，所有加熱單元10斷電，不觸碰培養(yǎng)箱任何零部件情 況下，讓培養(yǎng)箱自然冷卻；當水套2內(nèi)腔中心點溫度從90°C降至60°C時，記下所需時間；同 時打開水栗12、單向常閉型電磁閥14,讓水在水套2與水箱5之間循環(huán)流動；當水套2內(nèi)腔 中心點溫度降至37°C時，關(guān)閉水循環(huán)系統(tǒng)，同時記下從60°C降至37°C所需時間。
[0059] 每隔15分鐘分別對水套2的底部、背部、左側(cè)面、右側(cè)面，頂部、玻璃門及水套2內(nèi) 腔中心點、上壁、下壁及玻璃的溫度及加溫的時間進行記錄，具體為表1~表3所示：
[0060] 實施例一，環(huán)境溫度：30°C ;升溫時間：10 :30~12 :45
[0062] 表 1
[0063] 說明：
[0064] 1)培養(yǎng)箱腔體內(nèi)膽中心溫度從30°C升到90°C所用時間是2小時15分鐘；
[0065] 2)培養(yǎng)箱腔體內(nèi)膽中心溫度升至90°C時，加熱單元10斷電后，培養(yǎng)箱腔體內(nèi)膽中 心溫度最高升至90.9 °C。
[0066] 實施例二，環(huán)境溫度：29°C ;升溫時間：10 :15~13 :15
[0067]
[0068] 表 2
[0069] 說明：
[0070] 1)培養(yǎng)箱腔體內(nèi)膽中心溫度從29°C升到90°C所用時間是3小時；
[0071] 2)培養(yǎng)箱腔體內(nèi)膽中心溫度升至90°C時，加熱單元10斷電后，培養(yǎng)箱腔體內(nèi)膽中 心溫度最高升至90. 4°C。
[0072] 實施例三，環(huán)境溫度：34°C ;升溫時間：09 :30~11 :00
[0074] 表 3
[0075] 說明：
[0076] 1)內(nèi)膽中心溫度從36°C升到90°C所用時間是1小時30分鐘（水套內(nèi)的水已在一 天前放出）；
[0077] 2)內(nèi)膽中心溫度升至90°C時，加熱電纜斷電后，內(nèi)膽中心溫度最高升至90. 5°C ;
[0078] 3)內(nèi)膽中心溫度從90°C斷電后降至60°C時用時2小時；
[0079] 4)內(nèi)膽中心溫度60°C循環(huán)水（循環(huán)水共40升）進入水套開始循環(huán)冷卻，內(nèi)膽中 心溫度降至37 °C用時42分鐘。
[0080] 每隔10分鐘分別對水套2的底部、背部、左側(cè)面、右側(cè)面，頂部、玻璃門及水套2內(nèi) 腔中心點、上壁、下壁、左壁、右壁及玻璃的溫度及加溫的時間進行記錄，具體為表4所示：
[0081] 實施例四，環(huán)境溫度：27°C ;升溫時間：10 :00~12 :35
[0084] 表 4
[0085] 說明：
[0086] 1)內(nèi)膽中心溫度從31. 8°C升到90°C所用時間是2小時35分鐘；
[0087] 2)內(nèi)膽中心溫度升至90°C時，加熱電纜斷電后，內(nèi)膽中心溫度最高升至90. 9°C ;
[0088] 3)內(nèi)膽中心溫度從90°C斷電后降至60°C時用時2小時57分鐘；
[0089] 4)內(nèi)膽中心溫度60°C循環(huán)水（循環(huán)水共48升）進入水套開始循環(huán)冷卻，內(nèi)膽中 心溫度降至37 °C用時58分鐘。
[0090] 由此可見，本發(fā)明水套式二氧化碳培養(yǎng)箱實現(xiàn)高溫滅菌可行。能實現(xiàn)高溫干熱空 氣滅菌（溫度大于l〇〇°C，加熱時間加長或功率加大）或濕熱滅菌（溫度90~97°C，濕度 大于95 %，濕度采用同氣套式相同的自然蒸發(fā)方式），可以彌補目前水套式二氧化碳培養(yǎng) 箱不能實現(xiàn)高溫滅菌的情況，大大提高了培養(yǎng)研究實驗的成功率。
[0091] 以上已對本發(fā)明創(chuàng)造的較佳實施例進行了具體說明，但本發(fā)明創(chuàng)造并不限于所述 實施例，其他人員在不違背本發(fā)明創(chuàng)造精神的前提下作出等同的變型或替換均包含在本申 請權(quán)利要求所限定的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法，其特征在于，包括如下步驟： 第一步，水套內(nèi)的水經(jīng)水套出水口、水箱進水口流入水箱； 第二步，當水套內(nèi)無水時，對水套進行加熱； 第三步，當培養(yǎng)箱箱體內(nèi)腔的溫度上升到設(shè)定值時，停止對水套加熱，并使培養(yǎng)箱箱體 內(nèi)腔的溫度保持在設(shè)定值溫度，進行高溫滅菌； 第四步，完成高溫滅菌后，培養(yǎng)箱內(nèi)腔自然冷卻至第一設(shè)定溫度時，打開水栗、水套出 水口及水箱進水口，使水在水套與水箱之間循環(huán)流動； 第五步，箱體內(nèi)腔溫度降至第二設(shè)定溫度后，使內(nèi)膽充滿純凈水。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法，其特征在于，所述第三步中，設(shè) 定值溫度為濕熱滅菌90°C~97°C，干熱滅菌120°C~140°C。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法，其特征在于，所述第三步中，保 持在設(shè)定值溫度的時間為2小時~9小時。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法，其特征在于，所述第四步中，第 一設(shè)定溫度為50°C~70°C。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的水套式培養(yǎng)箱高溫滅菌方法，其特征在于，所述第五步中，第 二設(shè)定溫度為37 °C。
【文檔編號】A61L2/06GK105983111SQ201510058536
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年2月4日
【發(fā)明人】吳峻, 張云春, 孫大煒
【申請人】上海力申科學(xué)儀器有限公司