丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了丹紅注射液作為作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)應(yīng)用方面的技術(shù)偏見，通過實驗得出，丹紅注射液對特非那定引起的斑馬魚心臟節(jié)律變化有明顯的改善作用。并且丹紅注射液在濃度≤30μL/mL時，對正常斑馬魚連續(xù)6天未顯示出明顯致畸作用?；诘ぜt注射液在臨床上的廣泛應(yīng)用，可為特非那定合并用藥和增強其安全性提供理論依據(jù)。
【專利說明】
丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種丹紅注射液的應(yīng)用，特別涉及一種丹紅注射液作為特非那定心臟 不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用，屬于藥物開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展，尤其是人口老齡化及城鎮(zhèn)化進程的加速，中國心血管疾病 危險因素流行趨勢呈明顯上升態(tài)勢，導(dǎo)致了心血管疾病的發(fā)病人數(shù)持續(xù)增加。據(jù)《中國心血 管病報告2014》公布，全國有心血管病患者2.9億，每5個成人中有1名患心血管病。心血管疾 病死亡率居各種疾病之首，每5例死亡者中就有2例死于心血管病。據(jù)《中國心血管病報告 2014》公布，對全國22家省級醫(yī)院心內(nèi)科住院患者的回顧性調(diào)查顯示，心內(nèi)科住院患者中心 律失常占26.8%。植入性心臟起搏器是針對心動過緩唯一有效的治療方法，手術(shù)成功率高， 并發(fā)癥低。導(dǎo)管射頻消融術(shù)(RFCA)根治預(yù)激綜合征(WPW)和室上性心動過速(SVT)作為成熟 技術(shù)已在我國廣泛使用。我國的心律失常在健康有序地發(fā)展，但仍然存在困難與不足，主要 表現(xiàn)在:開展起搏器、ICD、CRT、房顫射頻消融手術(shù)的醫(yī)院不足、專業(yè)人員及技術(shù)缺乏;醫(yī)保 支付不足等方面。
[0003] 特非那定為第二代抗組胺藥，化學(xué)名為α-[4_1，1-二甲基乙基)苯基]-4-(羥基-二 苯甲基)-1_哌啶丁醇。用于治療過敏性疾病。它的最大優(yōu)點是不會對中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生鎮(zhèn) 靜作用，因此不會產(chǎn)生嗜睡、困倦、乏力、注意力不集中等副作用。但是臨床使用發(fā)現(xiàn)特非那 定可導(dǎo)致嚴(yán)重的心率失常，于上世紀(jì)90年代末在歐美等國家撤市或限制使用，該藥目前在 我國以處方藥管理。特非那定的藥物本身而非代謝產(chǎn)物有誘發(fā)心律失常的作用。特非那定 引起的偶發(fā)尖端扭轉(zhuǎn)性室速發(fā)生于那些特非那定代謝受損的患者。特非那定誘發(fā)心律失常 的機制和其他能夠引起尖端扭轉(zhuǎn)型室速的藥物相似，是由于其阻滯了鉀通道。阻斷了心室 肌細(xì)胞膜上快速激活的延遲整流鉀電流（IKr)，使心肌復(fù)極時間及動作電位時間延長，表現(xiàn) 為體表心電圖QT間期延長，心肌各部分復(fù)極離散度增加，QT間期延長，產(chǎn)生早期后除極 (EAD)和觸發(fā)活動，繼而導(dǎo)致多型性室性心律失常及尖端扭轉(zhuǎn)型室速(TdP)。
[0004] 特非那定不合理用藥導(dǎo)致的心臟毒性是明顯存在的，我國對特非那定實施處方藥 管理，說明書中已對心臟毒性等風(fēng)險已進行了提示，建議醫(yī)務(wù)人員嚴(yán)格掌握適應(yīng)癥，避免禁 忌證用藥，控制用藥劑量療程。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)特非那定引起的心臟毒性并不比其他藥 明顯，如果嚴(yán)格控制禁忌癥和不良的合并用藥，對于原有心血管系統(tǒng)疾病的患者權(quán)衡利弊， 警惕臨床應(yīng)用該藥的不良反應(yīng)，規(guī)范用藥劑量及合并藥物，對可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)提前預(yù) 防用藥，將提高特非那定臨床用藥的有效性和安全性。
[0005] 丹紅注射液是以丹參為主藥、紅花為輔藥制成的中藥注射劑，具有活血化瘀，通脈 舒絡(luò)的功效。經(jīng)專利和文獻檢索，未發(fā)現(xiàn)丹紅注射液用于拮抗特非那定心臟不良反應(yīng)藥物 方面的研究或報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對現(xiàn)有的特非那定臨床不良反應(yīng)現(xiàn)狀，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種 丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用。
[0007] 術(shù)語說明：
[0008] 丹紅注射液:收載于國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編，標(biāo)準(zhǔn)編號:WS-11220(ZD-1220)-2002。
[0009] 丹紅注射液配方:丹參750克，紅花250克，注射用氯化鈉7克，制成1000mL。
[0010] 丹紅注射液制備方法:丹參用稀乙醇浸提2次，取濾液。藥渣與紅花用水浸提2次， 取濾液。合并濾液，濃縮至清膏，加入氯化鈉至等滲，調(diào)節(jié)PH6-7,濾過，冷藏，加注射用水至 規(guī)定量，濾過，灌封，滅菌，即得。
[0011] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0012] 丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述的應(yīng)用，丹紅注射液臨床用法用量為：肌肉注射一次1-2ml，一日1-2次;或者靜脈注射，一次3-4ml，加入質(zhì)量濃度50 %葡萄糖注射液20ml稀釋后緩 慢注射，一日1-2次。
[0014] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述的應(yīng)用，所述心臟不良反應(yīng)包括尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動過 速、陣發(fā)性室性心動過速、竇性心動過緩伴心律不齊、完全右束支傳導(dǎo)阻滯和/或心房纖顫。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述的應(yīng)用，丹紅注射液與特非那定的臨床使用時間是同時 使用。
[0016] 有益效果
[0017] 本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)應(yīng)用方面的技術(shù)偏見，丹紅注射液具有較優(yōu)的緩解特非那 定心臟不良反應(yīng)的作用。通過實驗得出，丹紅注射液對特非那定引起的斑馬魚心臟節(jié)律變 化有明顯的改善作用。并且丹紅注射液在濃度彡30yL/mL時，對正常斑馬魚連續(xù)6天未顯示 出明顯致畸作用?；诘ぜt注射液在臨床上的廣泛應(yīng)用，可為特非那定合并用藥和增強其 安全性提供理論依據(jù)。
[0018] 以下用具體實驗例和實施例對本發(fā)明作進一步說明，但不限于本發(fā)明。
[0019] 實驗例1:
[0020] 本實施例所用的丹紅注射液，其主要成分為丹參、紅花和注射用水，生產(chǎn)廠家為菏 澤步長制藥有限公司，生產(chǎn)批號為15051030,國藥準(zhǔn)字為Z20026866。
[0021 ] 本實施例所用的特非那定購自sigma公司，tefenadine)，原始溶液為濃度為IOmM 溶于二甲基亞砜的溶液。使用時須用培養(yǎng)用水稀釋。
[0022]本實驗例所用斑馬魚為健康A(chǔ)B品系或野生型斑馬魚（均可購自中國科學(xué)院上海生 命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所），飼養(yǎng)在28°C、光周期14小時的魚房中，并且 將雄魚與雌魚分開飼養(yǎng)，養(yǎng)殖用水的配方見表1。魚房固定于每天早上9:00開始光照，并喂 食豐年蝦，而下午16:00再度喂食豐年蝦一次，如此飼育之斑馬魚可確保魚卵質(zhì)量與產(chǎn)量穩(wěn) 定。待魚進食完畢后把魚撈出來置于配對盒中，每盒中含一對公母魚，并在配對盒上層插入 隔板將公、母分開，避免魚在預(yù)定時間之前產(chǎn)卵。隔日，欲使用魚卵前先將隔板抽出，讓魚可 以開始進行追尾，約隔3~5分鐘后魚就會開始產(chǎn)卵。收集魚卵，以清水小心的沖掉雜質(zhì)后， 將干凈的魚卵轉(zhuǎn)置到注有胚胎培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿后即可。
[0023]表1.養(yǎng)殖用水的配方
[0025] 斑馬魚胚胎的獲得與使用：
[0026] 利用野生型的斑馬魚進行交配，配對前一天需使用隔板，以確保胚胎時期的一致 性。使用同一對的胚胎進行實驗，生出的胚胎時間控制在半小時以內(nèi)，降低胚胎間發(fā)育時間 的差異性，將胚胎收在加有胚胎培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，使胚胎不易發(fā)霉外，也讓水中礦物質(zhì)含 量一致。將出生后2小時的斑馬魚置于解剖鏡下，選取發(fā)育正常的斑馬魚仔魚，放入6孔板 中，每孔15尾。從斑馬魚胚胎出生后2小時左右加入特非那定和丹紅注射液，同時加入 0.2_〇1 · L-I的苯硫脲，防止色素沉積過多，影響觀察心臟形態(tài)。
[0027] 化合物處理：
[0028] 設(shè)置6個實驗組：1個溶劑對照組，1個特非那定處理組，3個特非那定+丹紅注射液 處理組。移除微孔板中的養(yǎng)殖用水，空白對照組中加入5ml養(yǎng)殖用水，溶劑對照組加入5ml含 體積濃度0.1%二甲基亞砜的養(yǎng)殖用水溶液，特非那定處理組加入5ml 4μπι〇1 · L-I特非那 定溶液，特非那定+丹紅注射液處理組分別加入4ym〇l · L-I特非那定溶液和4yL/mL、8yL/ mL、16yL/mL和30yL/mL丹紅注射液，放入28 °C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6天后，每天更換一次新鮮 藥液，至出生后6天每組3個平行孔。
[0029] 表型分析：
[0030] 加入0.3%。(質(zhì)量百分比）的三卡因麻醉斑馬魚，然后用4% (質(zhì)量百分比）甲基纖維 素固定于載玻片上，接著在倒置顯微鏡下觀察心臟形態(tài)。
[0031] 溶劑對照組和空白對照組中心臟形態(tài)正常。特非那定組出現(xiàn)心包水腫和卵黃囊水 月中。隨著丹紅注射液濃度的增加，心包水腫和卵黃囊水腫逐漸消失(見附圖1，出生后6天的 斑馬魚仔魚）。隨著丹紅注射液濃度增加，受試斑馬魚死亡率逐漸增加。經(jīng)實驗探索確定丹 紅注射液與特非那定共用的最大安全濃度為30yL/mL。因此，可通過觀察心臟形態(tài)分析丹紅 注射液(<30yL/mL)對特非那定毒性的緩解作用。
[0032]定量分析：
[0033]加入濃度為0.3%。(質(zhì)量百分比）的三卡因麻醉斑馬魚，然后用3% (質(zhì)量百分比）甲 基纖維素固定于載玻片上，在一個安靜的環(huán)境下，保持室溫25°C，記錄15秒內(nèi)斑馬魚的心跳 數(shù)，所得心跳數(shù)乘以4為每分鐘斑馬魚的心率。
[0034]正常狀態(tài)下的斑馬魚心房與心室跳動節(jié)律一致。特非那定給藥后，斑馬魚心房率 與心室率比值在2.5左右。丹紅注射液與特非那定共同給藥組，斑馬魚心臟心房率與心室率 的比值明顯下降，比值在1.5左右。說明丹紅注射液對特非那定引起的斑馬魚心臟節(jié)律變化 有明顯的改善作用(見附圖2)。
[0035] 提取實驗各組的信使核糖核酸，經(jīng)過轉(zhuǎn)錄組學(xué)測序分析發(fā)現(xiàn)多個與心臟功能有關(guān) 的基因表達水平發(fā)生了明顯變化，丹紅注射液可以恢復(fù)這些基因的表達(見表2)。
[0036] 表2每個實驗組中心臟電節(jié)律相關(guān)基因表達水平的變化

【附圖說明】
[0039] 圖1是丹紅注射液對特非那定引起的心包水腫的緩解作用圖；其中，A.溶劑對照 組；B.特非那定4μηιο1 · L-1;C.特非那定4μηιο1 · L-I+丹紅注射液4yL/mL;D.特非那定4μ mol · L-I+丹紅注射液8yL/mL;E.特非那定4μπιο1 · L-I+丹紅注射液16yL/mL;
[0040] 圖2是丹紅注射液對特非那定引起的斑馬魚心律異?，F(xiàn)象的保護作用圖。
【具體實施方式】
[0041] 本實施例所述丹紅注射液的生產(chǎn)廠家為菏澤步長制藥有限公司，生產(chǎn)批號為 15051030,國藥準(zhǔn)字為Z20026866。本實施例所用的特非那定購自sigma公司，原始溶液為濃 度為IOmM溶于二甲基亞砜的溶液。使用時須用培養(yǎng)用水稀釋。
[0042] 實施例1、丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用
[0043] 丹紅注射液作為特非那定尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動過速不良反應(yīng)拮抗劑的臨床用法 用量:肌肉注射一次l-2ml，一日1-2次。
[0044] 實施例2、丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用
[0045] 丹紅注射液作為特非那定陣發(fā)性室性心動過速不良反應(yīng)拮抗劑的臨床用法用量： 靜脈注射，一次4ml，加入質(zhì)量濃度50 %葡萄糖注射液20ml稀釋后緩慢注射，一日1-2次。
[0046] 實施例3、丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用
[0047] 丹紅注射液作為特非那定竇性心動過緩伴心律不齊不良反應(yīng)拮抗劑的臨床用法 用量:肌肉注射一次l-2ml，一日1-2次。
[0048] 實施例4、丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用
[0049] 丹紅注射液作為特非那定完全右束支傳導(dǎo)阻滯和心房纖顫不良反應(yīng)拮抗劑的臨 床用法用量:靜脈注射，一次4ml，加入質(zhì)量濃度50 %葡萄糖注射液20ml稀釋后緩慢注射，一 日1-2次。
【主權(quán)項】
1. 丹紅注射液作為特非那定心臟不良反應(yīng)拮抗劑的應(yīng)用。2. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，丹紅注射液臨床用法用量為:肌肉注射一次 l-2ml，一日 1-2 次。3. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，丹紅注射液臨床用法用量為:靜脈注射，一次 3-4ml，加入質(zhì)量濃度50 %葡萄糖注射液20ml稀釋后緩慢注射，一日1-2次。4. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述心臟不良反應(yīng)包括尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動 過速、陣發(fā)性室性心動過速、竇性心動過緩伴心律不齊、完全右束支傳導(dǎo)阻滯和/或心房纖 顫。5. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，丹紅注射液與特非那定的臨床使用時間是同 時使用。
【文檔編號】A61K9/08GK105943605SQ201610498724
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月29日
【發(fā)明人】何秋霞, 韓利文, 劉可春, 彭維兵, 楚杰, 韓建, 張云, 王希敏, 侯海榮, 王雪, 孫晨, 王榮春, 張姍姍
【申請人】山東省科學(xué)院生物研究所