穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑組合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體的說，涉及穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑凍干組合物及 其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 穿心蓮內(nèi)酯（分子式為C2QH3Q05,分子量為350. 45)為爵床科植物穿心蓮中提取 得到的二萜內(nèi)酯化合物，是中藥穿心蓮的主要有效成分之一，具有清熱解毒、涼血消腫等功 能?，F(xiàn)代藥理研究表明，穿心蓮內(nèi)酯具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、治療心血管 疾病、保肝利膽等作用。臨床用于治療菌痢、鉤端螺旋體病、腦膜炎、肺炎、上呼吸道感染。
[0003] 穿心蓮內(nèi)酯在沸乙醇中溶解，甲醇或乙醇中微溶，極微溶于氯仿，乙醚中幾乎不 溶，水中的溶解度只有〇. 〇7mg/mL (22°C )，熔點(diǎn)230-231°C，油水分配系數(shù)為3. 90。針對(duì)臨 床上病毒感染急癥的需求，亟需研發(fā)穿心蓮內(nèi)酯注射劑，但由于其給藥劑量較高（穿心蓮 內(nèi)酯片日用量為300-450mg ;喜炎平注射液日用量為250-500mg)，所以對(duì)制劑中的藥物濃 度有較高的要求，而現(xiàn)有技術(shù)無法達(dá)到這個(gè)要求。如張等以吐溫80、普郎尼克F68、聚氧乙 烯（35)氫化蓖麻油、聚氧乙烯（40)氫化蓖麻油、聚乙二醇12羥基硬脂酸酯、聚乙二醇400、 聚乙二醇300和丙二醇等增溶輔料均無法將其增溶至要求濃度（2. 5mg/mL);以脂質(zhì)體、乳 劑和膠束為載體，或仍無顯著提高制劑藥物濃度，或需加入大量輔料及有機(jī)溶劑。為了解決 上述問題，穿心蓮內(nèi)酯注射劑的研發(fā)已受國家科技重大專項(xiàng)"基于脂質(zhì)載體釋藥技術(shù)的穿 心蓮內(nèi)酯新給藥系統(tǒng)的研究與開發(fā)"的資助。
[0004] 參考文獻(xiàn)：張海燕，齊云，廖永紅.注射劑常用增溶性藥用輔料的安全與增溶研究 [J]·中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(11) :1-4.
[0005] 于波濤，張志榮.穿心蓮內(nèi)酯脂質(zhì)體的制備及體外釋放特性[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜 志，2009, 40 (2) :114-116.
[0006] 歐陽五慶，吳旭錦.一種穿心蓮內(nèi)酯納米乳口服液及其制備方法[P].中國專 利：200610104591. 2,2007-03-21.
[0007] 納米混懸劑是利用表面活性劑的穩(wěn)定作用，將藥物微粒分散在水中，通過粉碎或 控制析晶等技術(shù)形成穩(wěn)定的納米膠態(tài)分散體。制劑中藥物粒徑小（平均粒徑小于1 μ m，一 般在100-500nm)、比表面積大，這是解決難溶性藥物水溶性的一個(gè)重要技術(shù)。
[0008] 納米混懸劑的應(yīng)用特點(diǎn)：
[0009] 1.藥物以固體微粒分散于介質(zhì)（通常為水）中，制劑含藥量高，特別適合大劑量、 難溶藥物的口服和注射給藥。
[0010] 2.應(yīng)用范圍廣，可以應(yīng)用于那些水不溶但溶于油的藥物（高ΙορΡ)，如CoQi。納米 混懸劑；對(duì)于那些高熔點(diǎn)、水油均不溶的藥物（以脂質(zhì)體、乳劑、固體脂質(zhì)納米粒等脂質(zhì)系 統(tǒng)無法有效載藥），納米混懸劑也能輕而易舉地使制劑中藥物濃度達(dá)到臨床應(yīng)用的需求。
[0011] 參考文獻(xiàn)：
[0012] Rabinow BE.Nanosuspensions in drug delivery[J]. Nature Reviews Drug Discovery, 2004, 3(9):785-796.
[0013] 3.有機(jī)溶劑和輔料用量少，毒性小，安全性高。目前增加難溶性藥物水溶性通常采 用共溶劑增溶、表面活性劑增溶等技術(shù)。但共溶劑增溶存在有機(jī)溶劑毒副作用，配伍時(shí)藥物 析出等問題；而大量表面活性劑的加入會(huì)帶來潛在的毒副作用，其中注射增溶劑吐溫80還 可能帶來溶血性問題。納米混懸劑一般僅用少量輔料和有機(jī)溶劑，甚至不需要有機(jī)溶劑，從 注射安全性考慮，納米混懸劑具有較大的優(yōu)勢(shì)。
[0014] 4.改變藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，減少給藥頻率。由于特殊的粒徑效應(yīng)，靜脈注射納米混懸劑在 體內(nèi)的清除與分布與溶液劑是完全不同的。納米粒子大部分被體內(nèi)的巨噬細(xì)胞吞噬，聚集 在肝、脾等組織，這些組織成為藥物的"倉庫"，藥物可緩慢地釋放，延長(zhǎng)作用時(shí)間，如伊曲康 唑納米混懸劑注射后24h，血藥濃度能達(dá)到2. 8 μ g/mL。
[0015] 5.增大藥物溶解度，提高藥物溶出速率。根據(jù)Ostwald-Freundlich方程提出的粒 徑與溶解度的關(guān)系，藥物的納米化處理，可增大藥物溶解度，而其比表面積的增加同時(shí)提高 了其溶出速度，這也是改善口服難溶性藥物生物利用度的有效措施。
[0016] 6.提高藥物穩(wěn)定性。將化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的藥物制劑制備成納米混懸劑后，一方面 固體藥物比藥物分子與外界環(huán)境接觸小，另一方面納米混懸劑中的表面活性劑以及高分子 對(duì)藥物顆粒有包裹作用。因此，藥物納米化大大增加其化學(xué)穩(wěn)定性。
[0017] 7.可起到被動(dòng)或者主動(dòng)靶向作用。納米制劑的體內(nèi)分布與其粒徑有很大關(guān)系，一 般大于7 μπι的微粒被肺毛細(xì)血管截留，更小的微粒被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（RES)匯集于肝脾組 織，而在100nm左右的粒子則易借助EPR效應(yīng)靶向于腫瘤。所以可以根據(jù)治療目的，制備不 同粒徑的納米制劑，從而靶向治療對(duì)應(yīng)病灶。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0018] 本發(fā)明目的是提供一種可注射的穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑組合物及其制備工藝和 使用方法。該納米混懸劑處方簡(jiǎn)單，制備工藝精簡(jiǎn)且易于產(chǎn)業(yè)化、載藥量高、穩(wěn)定性好，無有 機(jī)溶劑、安全性好。
[0019] 本發(fā)明要解決的第一個(gè)技術(shù)問題是提供穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑組合物，其包含以 下組分和質(zhì)量百分含量：
[0020] 穿心蓮內(nèi)酯 0.05%-5% 穩(wěn)定劑 0.5%-5°/〇 稀釋穩(wěn)定劑 0.005%-1% 添加水至 100%,
[0021 ] 其中所述的穩(wěn)定劑選自普朗尼克F68、普朗尼克F87、普朗尼克F108、普朗尼 克F127、普朗尼克P124、聚氧乙烯蓖麻油（Cremophor EL)、聚氧乙烯醚（35)氫化蓖麻 油（Cremophor RH 35)、聚氧乙稀醚（40)氫化蓖麻油（Cremophor RH 40)、聚山梨酯 80(Polysorbate 80)、聚乙二醇12羥基硬脂酸酯（solutol HS 15);天然磷脂：大豆卵磷 脂（SPC)、蛋磷脂（EPC);合成磷脂：氫化大豆磷脂（HSPC)、二油酰磷脂酰膽堿（D0PC)、二 油酰磷脂酰乙醇胺（DOPE)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿（DPPC)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺（DPPE)、 二硬脂酰磷脂酰膽堿（DSPC)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（DSPE)、二硬脂酰磷脂酰甘油 (DSPG)、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿（DMPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺（DSPE)、二月桂酰磷 脂酰膽堿（DLPC)、二月桂酰磷脂酰乙醇胺（DLPE)、二硬脂?；字Ｒ掖及?聚乙二醇 2000 (DSPE-mPEG2_)等中的一種或其任意混合物；所述的稀釋穩(wěn)定劑選自膽酸及其鈉鹽、 脫氧膽酸及其鈉鹽、去氫膽酸及其鈉鹽、?；悄懰峒捌溻c鹽、?；切苋パ跄懰峒捌溻c鹽、牛 磺鵝去氧膽酸及其鈉鹽等膽酸鹽中的一種或其任意混合物。
[0022] 作為優(yōu)選，本發(fā)明的穩(wěn)定劑為：普朗尼克F68、普朗尼克F108、普朗尼克F127、聚氧 乙烯蓖麻油、聚氧乙烯醚（40)氫化蓖麻油、大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫 化蛋黃卵磷脂、聚乙二醇12羥基硬脂酸酯中的一種或其任意混合物；稀釋穩(wěn)定劑為：脫氧 膽酸鈉、?；悄懰徕c、?；切苋パ跄懰徕c、?；蛆Z去氧膽酸鈉中的一種或任意混合物。
[0023] 更為優(yōu)選地，本發(fā)明中穩(wěn)定劑的用量為：普朗尼克F68、普朗尼克F108及普朗尼克 F127為0. 5% -5% ;聚氧乙烯蓖麻油和聚氧乙烯醚（40)氫化蓖麻油為0. 5% -5% ;大豆卵 磷脂、氫化大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂及氫化蛋黃卵磷脂為〇. 5% -2%;聚乙二醇12羥基硬脂 酸酯為2 % -5 % ;
[0024] 稀釋穩(wěn)定劑的用量為：脫氧膽酸鈉為0. 005% -0. 5%，牛磺膽酸鈉為0. 01 % -1 %， 牛磺熊去氧膽酸鈉為〇. 01% -1 %，?；蛆Z去氧膽酸鈉為〇. 005% -0. 5%。
[0025] 由于納米粒的物理穩(wěn)定性對(duì)穩(wěn)定劑濃度很敏感，若臨床需要靜脈滴注必然需要稀 釋，期間可能產(chǎn)生粒子聚集等問題，而使用大量穩(wěn)定劑會(huì)帶來潛在的毒性。因此本發(fā)明中在 穩(wěn)定劑的基礎(chǔ)上加入少量稀釋穩(wěn)定劑，即能起到穩(wěn)定納米粒的作用，不需要加入大量的一 般穩(wěn)定劑，從而減少大量穩(wěn)定劑帶來的毒性。
[0026] 本發(fā)明要解決的第二個(gè)技術(shù)問題是提供穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑組合物的制備方 法。本發(fā)明所提供的制備方法有兩種：第一種制備方法是介質(zhì)研磨法，即將穿心蓮內(nèi)酯和穩(wěn) 定劑混合，加入球磨珠研磨，制得l〇〇-l〇〇〇nm左右的穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑；第二種方法 是高壓均質(zhì)法，是將過100目的穿心蓮內(nèi)酯原料藥與穩(wěn)定劑混合，通過高壓均質(zhì)機(jī)粉碎制 得100-1000nm左右的穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑。
[0027] 本發(fā)明提供的第一種制備穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑的方法是介質(zhì)研磨法，包括以 下步驟：1)將穩(wěn)定劑溶于水，完全溶解后依次加入藥物及球磨介質(zhì)；2)轉(zhuǎn)移至球磨機(jī)，以 200-400rmp工作10min，間歇2-5min，12-24次循環(huán)；3)分離球磨介質(zhì)，得到乳白色納米混 懸液，向其中加入稀釋穩(wěn)定劑，攪拌或渦旋使所加物質(zhì)溶解；4)分裝得穩(wěn)定的納米混懸劑。 研磨球粒徑為0. 2-lmm，投放量為球磨介質(zhì)/水=2/1 - 4/1 ;稀釋穩(wěn)定劑可以研磨后加，亦 可以研磨前加。
[0028] 本發(fā)明提供的第二種制備穿心蓮內(nèi)酯納米混懸劑的方法是高壓均質(zhì)法，包括以下 步驟：1)將穩(wěn)定劑溶于水，完全溶解后加入過100目的穿心蓮內(nèi)酯原料藥；2)轉(zhuǎn)移至高壓 均質(zhì)機(jī)，500bar循