用于刺激皮膚的表皮層和真皮層的局部組合物的制作方法
【專利說明】用于刺激皮膚的表皮層和真皮層的局部組合物 發(fā)明領域
[0001] 本發(fā)明涉及局部組合物，其包含維生素 A和胰島素樣生長因子（"IGF"），更具體地， 本發(fā)明涉及一種局部組合物，其包含維生素 A、初乳(或具有高IGF含量的初乳提取物），包含 或不含鳥類(avian)卵殼膜，該局部組合物刺激皮膚的表皮層和真皮層并處理皮膚老化。更 具體地，本發(fā)明涉及這樣的制劑:其包含皮膚學上可接受的載體中的維生素 A、初乳(或具有 高IGF含量的初乳的肽提取物），包含或不含鳥類卵殼膜，其可用于改善表面斑點、褐斑、發(fā) 紅區(qū)域、皺紋的出現(xiàn)和皮膚紋理。提供用于制備這些組合物的方法。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 維生素 A在身體中具有多種功能，例如視力、基因轉(zhuǎn)錄、免疫功能、胚胎發(fā)育和生 殖、骨代謝、造血作用、皮膚和細胞健康，以及抗氧化劑活性。維生素 A是一種脂溶性維生素， 在局部施用后，其能夠容易地進入皮膚。維生素 A的三種主要形式為：視黃醇、視黃醛 (retinaldehyde)(也稱為維生素 A醛(retinal))，以及視黃酸。最常用的形式是醇--視黃 醇。維生素 A及其類似物是細胞分化、細胞增殖和凋亡的高效調(diào)節(jié)劑。由于具有這些活性，維 生素 A和相關(guān)的化合物在胚胎發(fā)育和細胞增殖過程，以及相關(guān)于皮膚結(jié)構(gòu)和皮膚健康的方 面中已具有最為廣泛的研究。近期，在增進對于類維生素 A在其它代謝過程(例如能量代謝） 的發(fā)展中可能所起的作用的方面，集中了相當多的新研究興趣。視黃醇對于皮膚的主要作 用涉及表皮增殖、糖胺多糖形成和結(jié)締組織保持。此外，維生素 A，如視黃醇，是一種眾所周 知的抗氧化劑。
[0004] 人類皮膚持續(xù)直接暴露至空氣、太陽輻射、環(huán)境污染物或其它機械與化學損傷，這 能夠誘導我們自身代謝的活性氧物質(zhì)(ROS)以及自由基的生成。如下幾種因素會導致發(fā)展 外在的皮膚損傷：電離輻射、嚴重的身體和心理壓力、酒精攝入、營養(yǎng)不良、過度飽食、環(huán)境 污染，以及暴露至紫外輻射(UVR)。在所有這些環(huán)境因素中，估計UVR的作用高達80%。紫外 誘導的皮膚中ROS的生成發(fā)展出氧化壓力，此時，它們的形成超過了目標細胞的抗氧化防御 能力。UVR啟動人類皮膚中分子響應的主要機理是:通過ROS的光化學生成，主要形成超氧陰 離子(0(2)(-)( ·))、過氧化氫(H(2)0(2))、羥基自由基(0H( ·))，和單態(tài)氧（（1)0(2))。對 于我們皮膚的僅有的保護是其內(nèi)源性保護（黑色素和酶促抗氧化劑)和我們由食物消耗獲 得的抗氧化劑(維生素 A、C、E等）。降低日光UVR損傷的最重要的策略是避免日光暴露和使用 防曬劑。下一步是通過經(jīng)口或局部施用的外源性抗氧化劑的應用，以及阻止氧化壓力和增 強DNA修復的介入的應用。在紫外光的存在下，視黃醇是非常有效的抗氧化劑;事實上，據(jù)信 其對于抵抗紫外輻射的皮膚防御機制的正常運轉(zhuǎn)而言是必需的。
[0005] 維生素 A在皮膚中被代謝成視黃醛，以及維生素 A的生物活性形式，視黃酸。這些化 合物通稱為類維生素 A。類維生素 A是具有多效性功能，并且對于某些皮膚結(jié)構(gòu)具有相對選 擇性靶向的化合物。它們屬于維生素，因為視黃醇(維生素 A)不在體內(nèi)合成而是必須源自飲 食，但也屬于具有內(nèi)分泌活性的激素，因為視黃醇會被轉(zhuǎn)換成與核受體結(jié)合的分子，顯示活 性，然后失活。類維生素 A通過結(jié)合并活化核類維生素 A受體來對目標細胞發(fā)揮其作用。類維 生素 A受體與其二聚體形式的配體結(jié)合。兩種不同的類維生素 A受體分子之間，以及，類維生 素 A X受體和維生素 D受體以及三碘甲狀腺氨酸受體之間，均能形成異二聚體。這指示了類 維生素 A和其它激素信號轉(zhuǎn)導分子之間的復雜相互作用。被其它信號轉(zhuǎn)導機制(例如AP-1) 激活的類維生素 A受體與轉(zhuǎn)錄因子的相互作用可能會使類維生素 A的作用離解。類維生素 A 能顯示激動活性，但也可以是中性拮抗劑和反向激動劑。局部和經(jīng)口的視黃醇、維甲酸、異 維甲酸和貝沙羅汀(bexarotene)，局部的阿利維A酸、視黃醛、毛替垂尼、阿達帕林、他扎羅 汀，和系統(tǒng)素阿曲汀(acitretin)由一系列發(fā)布的類維生素 A構(gòu)成。
[0006] 牛皮癬和相關(guān)疾病、角質(zhì)化的先天性疾病、痤瘡、光老化和維生素缺乏癥A，是標準 公認的類維生素 A治療的適應癥;皮膚T細胞淋巴瘤、AIDS相關(guān)的卡波濟氏肉瘤、急性早幼粒 細胞性白血病和光化性小痣在近期被增加確認為類維生素 A治療的適應癥。類維生素 A已被 成功用于若干其它皮膚病，例如，上皮前癌和腫瘤、皮脂溢、紅斑痤瘡和痤瘡樣皮膚病、扁平 苔蘚、嗜酸性膿皰性毛囊炎、尖圭濕疏、萎縮性硬化性苔蘚和萎縮癥(atrophicus)。
[0007] 用于皮膚時，類維生素 A是高度有效的抗老化美容化合物。其能夠逆轉(zhuǎn)由UVA范圍 (315~400nm)內(nèi)的紫外光所致的真皮損傷。類維生素 A的主要美容應用之一是用于造成老 化的皮膚的薄表皮的受控增殖。眾所周知，維生素 A對于皮膚健康的控制而言是必需的，其 中它在包含過度增殖和加速表皮增殖的延遲和減少方面均起作用。已顯示對皮膚施加某些 濃度的視黃醇會造成過度增殖。此外，在表皮和真皮的代謝之間存在相互關(guān)系，其中類維生 素 A(例如視黃醇)能夠誘導膠原合成和修復，并且促進再生。視黃醇施用的主要作用是增加 糖胺聚糖，具體是增加透明質(zhì)酸。
[0008] 維生素 A控制表皮增殖，增加膠原彈性蛋白和糖胺聚糖的量，起到抗氧化劑的作 用，協(xié)助防止由UVA所致的損傷，使皮膚更加彈韌柔軟，并且協(xié)助控制區(qū)段性色素沉積。因為 其對皮膚具有多種益處，希望制出包含維生素 A的改善的組合物，以用于處理老化和日光損 傷的皮膚。
[0009] 胰島素樣生長因子(IGF)
[0010] 胰島素樣生長因子(IGF)是與胰島素具有高度序列相似性的一組蛋白質(zhì)。IGF是細 胞通常與其生理環(huán)境交流的復雜系統(tǒng)的一部分。該復雜系統(tǒng)(通常稱作IGF〃軸〃）由以下部 分構(gòu)成:兩種細胞表面受體（IGF1R和IGF2R)、兩種配體（IGF-1和IGF-2)、六種高親和性IGF 結(jié)合性蛋白質(zhì)（IGFBP-1~IGFBP-6)的家族，以及相關(guān)的IGFBP降解酶，統(tǒng)稱為蛋白酶。胰島 素樣生長因子I(IGF-I)主要由肝臟經(jīng)生長激素(GH)刺激后分泌。IGF-I對于常規(guī)生理學的 調(diào)節(jié)以及多種病理學狀態(tài)(包括癌癥)而言均具重要性。已顯示，IGF軸在細胞增殖的促進和 細胞死亡(凋亡）的抑制中具有作用。認為胰島素樣生長因子2(IGF-2)是早期發(fā)育所需的主 要生長因子，而IGF-I表達是實現(xiàn)最大生長所需的。已知造成循環(huán)中GH和IGF-I水平變化的 因素包括:個體的遺傳構(gòu)成、一天中的時間、其年齡、性別、鍛煉狀態(tài)、壓力水平、遺傳學、營 養(yǎng)水平和身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、疾病狀態(tài)、種族、雌激素狀態(tài)和外源性攝入。IGF-I涉及神經(jīng) 發(fā)育的調(diào)節(jié)，包括神經(jīng)發(fā)生、髓鞘形成、突觸發(fā)生，和樹突分枝，以及神經(jīng)元損傷后的神經(jīng)元 保護。兒童中IGF-I血清水平的升高與較高的IQ相關(guān)聯(lián)。IGF確實是多能且重要的生物學物 質(zhì)。
[0011] 胰島素樣生長因子1受體(IGF-IR)是一種多功能受體，其介導用于細胞增殖、分化 和存活的信號。遺傳學實驗顯示，皮膚中IGF-IR的失活導致表皮破壞。已觀察到，真皮成纖 維細胞產(chǎn)生IGF-I，表皮基底角化細胞呈IGF-I陰性但呈IGF-I受體陽性，并且顆粒層的角化 細胞產(chǎn)生IGF-I。這些觀察結(jié)果指示，基底角化細胞的有絲分裂受真皮和顆粒層中表達的 IGF-I的調(diào)節(jié)，或者真皮成纖維細胞負責對基底角化細胞隔離IGF-I，并且顆粒層源性的 IGF-I可以是表皮分化的自分泌調(diào)節(jié)劑。IGF-I及其受體在毛囊中的分布指示，IGF-I在那些 位點處可能是成形素而非有絲分裂原，因為其增殖細胞而非其分化細胞呈IGF-I受體陰性。 此外，真皮乳頭的IGF-I受體表達似乎在從毛發(fā)生長初期到毛發(fā)生長中期的轉(zhuǎn)變過程中關(guān) 閉，這暗示了IGF-I在毛發(fā)生長周期中的調(diào)節(jié)作用。
[0012]胰島素樣生長因子I(IGF-I)受體對于體外表皮角化細胞增殖而言是至關(guān)重要的， 并且其在正常和牛皮癬表皮中的表達表明，其可能體內(nèi)調(diào)節(jié)角化細胞增殖。在正常皮膚中， IGF-I受體由基底表皮角化細胞以及類基底或未分化的有發(fā)育力的與毛囊外根鞘、皮脂腺 和毛母質(zhì)相關(guān)聯(lián)的表皮細胞表達。經(jīng)歷由干癬、慢性皮膚損傷和蕈樣真菌病的〃再生〃分化 (角蛋白16+、Ki67+上基底角化細胞)的增生性表皮持續(xù)顯示IGF-I受體的表達的增加。在這 些情況中，擴大的IGF-I受體表達的區(qū)域界定了角化細胞增殖的表皮區(qū)域。這表明，細胞表 面IGF-I受體由具有增殖潛力的表皮細胞廣泛表達，該受體表達可由不同的表皮生長狀態(tài) 來調(diào)節(jié)，并且這些受體在高度分化的表皮細胞中被大幅下調(diào)。
[0013]人角化細胞對于紫外線B(UVB)的正確響應取決于胰島素樣生長因子I(IGF-I)受 體的活化狀態(tài)。在其中IGF-I受體非正確失活的條件下生長的角化細胞在UVB-誘導的DNA損 傷的存在下復制。在人類皮膚中，表皮角化細胞不表達IGF-I，從而角化細胞上的IGF-I受體 由真皮成纖維細胞分泌的IGF-I活化?，F(xiàn)在已知，由人類成纖維細胞產(chǎn)生的IGF-I是角化細 胞的正確UVB響應所必需的。在體外的衰老的成纖維細胞中，IGF-I的表達被沉默。利用定量 反轉(zhuǎn)錄酶-PCR和免疫組織化學，已顯示體內(nèi)的衰老真皮中，IGF-I表達也被沉默。衰老的皮 膚中IGF-I表達的減少與衰老的志愿者中的非正確UVB響應相關(guān)聯(lián)。最后，正確的UVB響應在 用外源性IGF-I預處理的體內(nèi)的衰老的皮膚中恢復。這些研究為IGF-I受體(IGF-IR)在抑制 UVB-誘導的癌發(fā)生中的作用提供了進一步的證據(jù)，表明成纖維細胞在維持角化細胞IGF-IR 的正確活化中具有重要作用，并且暗示IGF-I在衰老的皮膚中的表達減少可能是老化相關(guān) 的非黑素瘤皮膚癌發(fā)展的重要部分。由除角化細胞以外的皮膚細胞局部產(chǎn)生的IGF-I，與其 受體(主要在基底角化細胞中表達)相互作用，以維持組織穩(wěn)態(tài)。
[0014] IGF調(diào)節(jié)表皮的增殖;協(xié)助皮膚修復，是對UVB紫