使用產(chǎn)后衍生細(xì)胞治療外周血管疾病的制作方法
【專利說明】使用產(chǎn)后衍生細(xì)胞治療外周血管疾病 本申請是申請日為2006年12月28日，申請?zhí)枮?00680053495. 8 (國際申請?zhí)枮镻CT/US2006/062667)，發(fā)明名稱為"使用產(chǎn)后衍生細(xì)胞治療外周血管疾病"的發(fā)明專利申請的分 案申請。 相關(guān)申請的交叉引用
[0001] 本申請要求2005年12月28日提交的美國臨時(shí)專利申請第60/754, 366號的權(quán)利， 該臨時(shí)專利申請的內(nèi)容通過引用整體結(jié)合到本文中。 發(fā)明領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及針對外周血管疾病患者特別是外周缺血患者的基于細(xì)胞的療法或再 生療法的領(lǐng)域。具體的說，本發(fā)明提供具有以下能力的衍自產(chǎn)后組織的細(xì)胞：刺激和支持血 管發(fā)生，改善血流，再生、修復(fù)和改善受外周缺血事件損害的骨骼肌，和保護(hù)骨骼肌免受缺 血損害。 發(fā)明背景
[0003] 本說明書通篇引用到各種出版物，包括專利、公布的申請、技術(shù)文章和學(xué)術(shù)文章。 這些被引用的出版物每一個(gè)都通過引用整體結(jié)合到本文中。
[0004] 外周血管疾?。≒VD)可因血管特別是肢體和在心臟的遠(yuǎn)端的區(qū)域的血管的動脈 硬化閉塞癥而引起，導(dǎo)致血流減少和閉塞（occlusion)處周圍和下游的組織的氧灌注不 足。PVD常出現(xiàn)在髂血管、股血管和腿彎部血管及鎖骨下血管，它的影響可被血栓癥、栓子或 創(chuàng)傷加劇。據(jù)估計(jì)，在美國大約有800萬到1200萬人受到PVD的折磨，特別是老年人口和 糖尿病患者。
[0005] PVD的常見癥狀包括上下肢和末端（extremities)的痙攣、麻痹、虛弱、肌肉疲勞、 四肢和末端的疼痛、四肢和末端的低溫、末端的變色、皮膚干燥或剝落及高血壓。最常見的 癥狀是跛行或者閉塞的血管下游的肌肉的疼痛感、抽緊感和疲勞感，這些感覺在一些形式 的鍛煉如步行過程中出現(xiàn)，但休息一段時(shí)間后自行消除。
[0006] 在病理生理學(xué)上，閉塞的血管會引起梗阻（obstruction)部位和梗阻部位的遠(yuǎn)端 的組織的局部缺血。這種局部缺血通常稱為外周缺血，意思是它發(fā)生在心臟的遠(yuǎn)端的部位。 局部缺血的嚴(yán)重性因梗阻的大小和數(shù)量、梗阻是否接近肌肉或器官及是否有足夠的多余血 管系統(tǒng)而異。在較為嚴(yán)重的情況中，局部缺血會導(dǎo)致受影響組織的死亡，可導(dǎo)致受影響肢體 的截肢乃至患者的死亡。
[0007] PVD的更為嚴(yán)重病情目前的治療方法包括化療方案、血管成形術(shù)、固定模插入 (insertionofstents)、重建外科手術(shù)（reconstructivesurgery)、旁路移植、受影響組 織的切除術(shù)或者截肢術(shù)?？上У氖?，對于許多患者來說，這些介入方法成功率有限，且許多 患者會經(jīng)歷到病癥或癥狀的惡化。
[0008] 目前，人們有興趣使用能分裂和分化的干細(xì)胞或者來自其他來源的肌肉細(xì)胞（包 括平滑肌細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞）來幫助組織損害的修復(fù)或逆轉(zhuǎn)。干細(xì)胞的移植可用作臨床 工具來重構(gòu)靶組織，從而恢復(fù)生理和解剖機(jī)能。干細(xì)胞技術(shù)的應(yīng)用是廣泛的，包括組織工 程、基因療法遞送和細(xì)胞療法，后者也就是通過外源供應(yīng)能產(chǎn)生或含有生物治療劑的活細(xì) 胞或細(xì)胞成分將這些生物治療劑遞送到靶部位（有關(guān)綜述參見Tresco，P.A.etal，（2000) AdvancedDrugDeliveryReviews42:2-37)。干細(xì)胞的鑒定已刺激了旨在選擇性產(chǎn)生供 再生醫(yī)學(xué)用的特異性細(xì)胞類型的研究。
[0009] 干細(xì)胞技術(shù)治療潛力的實(shí)現(xiàn)的一個(gè)阻礙一直是獲得足夠數(shù)量的干細(xì)胞有困難。胚 胎組織或胎兒組織是干細(xì)胞的一個(gè)來源。已從多種哺乳動物物種（包括人類）分離了胚胎 干細(xì)胞和祖細(xì)胞，有幾種這種細(xì)胞類型已被證實(shí)能夠自我更新和擴(kuò)展以及分化成多種不同 的細(xì)胞譜系。但從胚胎或胎兒來源衍生干細(xì)胞已引起了許多倫理和道德問題，這些問題需 要通過鑒定其它來源的多能（multipotent)或多潛能（pluripotent)細(xì)胞來進(jìn)行避免。
[0010] 產(chǎn)后組織如臍帶和胎盤作為干細(xì)胞的另選來源已引起人們興趣。例如，已描述了 通過胎盤的灌注或從臍帶血或組織進(jìn)行的收集來回收干細(xì)胞的方法。從這些方法獲取干細(xì) 胞的限制因素一直是所獲得的臍帶血體積或細(xì)胞數(shù)量不足，還有從這些來源獲得的細(xì)胞群 體存在異質(zhì)性或缺乏表征。
[0011] 具有分化成一批（anarrayof)骨骼肌譜系、周細(xì)胞譜系或血管譜系的能力的基 本上均質(zhì)的這種細(xì)胞群體，如能得到可靠的、良好表征的和充裕的供應(yīng)，在以下各種診斷性 和治療性應(yīng)用中將會是有利的：骨骼肌修復(fù)、再生和改善，血管發(fā)生的刺激和/或支持，和 外周缺血事件后血流的改善，特別是在PVD患者中。 發(fā)明概述
[0012] 本發(fā)明的一個(gè)方面涉及用于治療患有外周血管疾病的患者的方法，所述方法包括 將產(chǎn)后衍生細(xì)胞以能有效治療外周血管疾病的量給予該患者，其中所述產(chǎn)后衍生細(xì)胞衍自 基本上沒有血液的人胎盤或臍帶組織；其中所述細(xì)胞能夠在培養(yǎng)中自我更新和擴(kuò)展，和具 有分化成至少骨骼肌、血管平滑肌、周細(xì)胞或血管內(nèi)皮表型的細(xì)胞的潛力；其中所述細(xì)胞需 要L-纈氨酸用于生長并能在至少約5%氧中生長；其中所述細(xì)胞還包含以下特征中的至少 一個(gè)：a)在培養(yǎng)中倍增至少約40次的潛力；b)在包被或未包被的組織培養(yǎng)容器上的貼壁 和擴(kuò)展，其中包被組織培養(yǎng)容器包含明膠、層粘連蛋白、膠原、聚鳥氨酸、玻連蛋白或纖連蛋 白的包被層；c)組織因子、波形蛋白和a-平滑肌肌動蛋白中的至少一個(gè)的產(chǎn)生；d)⑶10、 CD13、CD44、CD73、CD90、PDGFr-a、PD-L2 和HLA-A，B，C中的至少一個(gè)的產(chǎn)生；e)CD31、CD34、 CD45、CD80、CD86、CD117、CD141、CD178、B7-H2、HLA-G和HLA-DR，DP，DQ中的至少一個(gè)的 產(chǎn)生的缺乏，這通過流式細(xì)胞術(shù)來檢測；f)相對于成纖維細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞或髂嵴骨髓 細(xì)胞這些人細(xì)胞而言，至少一個(gè)編碼以下物質(zhì)的基因的基因表達(dá)提高：白細(xì)胞介素8 ;網(wǎng)硬 蛋白（reticulonU;趨化因子（C-X-C模體）配體1(黑素瘤生長刺激活性，a);趨化因子 (C-X-C模體）配體6(粒細(xì)胞趨化蛋白2);趨化因子（C-X-C模體）配體3 ;腫瘤壞死因子， a誘導(dǎo)蛋白3 ;C型凝集素超家族成員2 ;Wilms腫瘤1 ;醛脫氫酶1家族成員A2 ;腎素；氧 化低密度脂蛋白受體1 ;人類（Homosapiens)克隆IMAGE:4179671 ;蛋白激酶CG;假擬蛋 白DKFZp564F013 ;在卵巢癌1中下調(diào)；和來自克隆DKFZp547klll3的人類基因；g)相對于成 纖維細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞或髂嵴骨髓細(xì)胞這些人細(xì)胞而言，至少一個(gè)編碼以下物質(zhì)的基因 的基因表達(dá)減少：矮身材同源框2 ;熱激27kDa蛋白2 ;趨化因子（C-X-C模體）配體12 (基 質(zhì)細(xì)胞衍生因子1);彈性蛋白（主動脈瓣上狹窄、Williams-Beure綜合征）；人類mRNA; cDNADKFZp586M2022 (來自克隆DKFZp586M2022);間充質(zhì)同源框2 (生長停滯特異性同源 框）；sineoculis同源框同源物1 (果蠅）；晶狀體蛋白，aB;形態(tài)發(fā)生2的凌亂締合激活 劑；DKFZP586B2420蛋白；類似于neuralin1 ;四連蛋白（纖溶酶原結(jié)合蛋白）；src同源性 3 (SH3)和半胱氨酸富集域；膽固醇25-羥化酶；矮子相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子-3 ;白細(xì)胞介素11受體， a;前膠原C肽鏈內(nèi)切酶增強(qiáng)子；卷曲同源物7(果蠅）；假擬基因BC008967;膠原，VIII型， a1 ;生腱蛋白C(結(jié)合腕蛋白（hexabrachion));易洛魁族人同源框蛋白5;hephaestin;整 聯(lián)蛋白，0 8 ;突觸小泡糖蛋白2 ;成神經(jīng)細(xì)胞瘤，致瘤性1的抑制；胰島素樣生長因子結(jié)合 蛋白2,36kDa;人類cDNAFLJ12280fis，克隆MAMMA1001744;細(xì)胞因子受體樣因子1 ;鉀中 等/小電導(dǎo)率鈣激活通道，亞家族N，成員4 ;整聯(lián)蛋白，0 7 ;帶PDZ結(jié)合模體的轉(zhuǎn)錄共激活 劑（TAZ);sineoculis同源框同源物2(果蠅）；KIAA1034蛋白；小泡相關(guān)膜蛋白5(肌短 蛋白）；含EGF纖蛋白樣胞外基質(zhì)蛋白1 ;早期生長應(yīng)答3 ;distal-less同源框5 ;假擬蛋白 FLJ20373;醛-酮還原酶家族1，成員C3(3-a羥基類固醇脫氫酶，II型）；雙糖鏈蛋白聚 糖；帶PDZ結(jié)合模體的轉(zhuǎn)錄共激活劑（TAZ);纖連蛋白1 ;腦啡肽原；整聯(lián)蛋白，0樣1 (帶 EGF樣重復(fù)結(jié)構(gòu)域）；人類mRNA全長插入cDNA克隆EUROIMAGE1968422 ;EphA3 ;KIAA0367 蛋白；鈉尿肽受體C/鳥苷酸環(huán)化酶C(心房鈉尿肽受體C);假擬蛋白FLJ14054 ;人類mRNA; cDNADKFZp564B222(來自克隆DKFZp564B222) ;BCL2/腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白 3 樣；AE結(jié)合蛋白1 ;細(xì)胞色素c氧化酶亞單位Vila多肽1(肌肉）；類似于neuralin1 ;B細(xì) 胞易位基因 1 ;假擬蛋白FLJ23191 和DKFZp586L151 ;h)MCP-l、IL-6、IL-8、GCP-2、HGF、KGF、 FGF、HB-EGF、BDNF、TPO、MIPla、RANTES和HMP1 中的至少一個(gè)的分泌；i)TGF-0 2、ANG2、 TOGFbb、MIPlb、1309、MDC和VEGF中的至少一個(gè)的分泌的缺乏，這通過ELISA來檢測。
[0013] 在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，外周血管疾病是外周缺血。在某些實(shí)施方案中，所述細(xì) 胞在體外被誘導(dǎo)分化成骨骼肌、血管平滑肌、周細(xì)胞或血管內(nèi)皮譜系細(xì)胞后再進(jìn)行給予。在 另一個(gè)實(shí)施方案中，對所述細(xì)胞進(jìn)行遺傳工程改造以產(chǎn)生能促進(jìn)外周血管疾病的治療的基 因產(chǎn)物。
[0014] 在所述方法的一些實(shí)施方案中，將所述細(xì)胞與至少一種其他細(xì)胞類型一起給 予，該其他細(xì)胞類型可包括骨骼肌細(xì)胞、骨骼肌祖細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、血管平滑肌祖 細(xì)胞、周細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮祖細(xì)胞或者其他多潛能（multipotent)或多能 (pluripotent)干細(xì)胞。該其他細(xì)胞類型可以在給予產(chǎn)后衍生細(xì)胞的同時(shí)或之前或之后給 予。
[0015] 在其他實(shí)施方案中，將所述細(xì)胞與至少一種其他藥物一起給予，該其他藥物可以 是例如抗血栓形成劑、抗炎劑、免疫抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、促生血管劑或抗細(xì)胞凋亡劑。該其 他藥物可以在給予產(chǎn)后衍生細(xì)胞的同時(shí)或之前或之后給予。
[0016] 所述細(xì)胞優(yōu)選在外周缺血的部位或在該部位的近端給予，但也可在外周缺血的遠(yuǎn) 端的部位給予。它們可通過注射、輸注、植入患者體內(nèi)的裝置來給予，或者通過含有它們的 基質(zhì)（matrix)或支架（scaffold)的植入來給予。所述細(xì)胞可對患者的骨豁肌、血管平滑 肌或血管內(nèi)皮施加營養(yǎng)作用如增殖。所述細(xì)胞可誘導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi) 皮細(xì)胞、骨骼肌祖細(xì)胞、周細(xì)胞、血管平滑肌祖細(xì)胞或血管內(nèi)皮祖細(xì)胞迀移到外周血管疾病 如外周缺血的（一個(gè)或多個(gè)）部位。
[0017] 本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及用以治療外周血管疾病患者的藥物組合物和藥盒，所述 藥物組合物和藥盒包含藥物可接受的載體和上述產(chǎn)后衍生細(xì)胞或從這種產(chǎn)后衍生細(xì)胞制 備的制品（preparation)。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述制品包含F(xiàn)GF和HGF。所述藥物 組合物和藥盒被設(shè)計(jì)和/或配制用來實(shí)施上述本發(fā)明方法。
[0018] 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，上述方法可用從所述產(chǎn)后衍生細(xì)胞制備的制品來實(shí) 施，其中所述制品包含所述產(chǎn)后衍生細(xì)胞的細(xì)胞裂解物、所述產(chǎn)后衍生細(xì)胞的胞外基質(zhì)或 生長所述產(chǎn)后衍生細(xì)胞的條件培養(yǎng)基。優(yōu)選的是這種制品包含F(xiàn)GF和HGF。
[0019] 本發(fā)明的其他方面涉及含有包含所述產(chǎn)后衍生細(xì)胞的細(xì)胞裂解物、胞外基質(zhì)或條 件培養(yǎng)基的制品的藥物組合物和藥盒。
[0020] 參閱下文的發(fā)明詳述和實(shí)施例，將會理解本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)。 附圖簡述
[0021] 圖1顯示hUTC批次120304、MSCs和成纖維細(xì)胞對內(nèi)皮細(xì)胞的增殖的作用。內(nèi)皮 細(xì)胞以5000個(gè)細(xì)胞/cm2(10, 000個(gè)細(xì)胞/孔）的密度接種到24孔組織培養(yǎng)皿的底部上， hUTC批次120304、MSCs或成纖維細(xì)胞以5000個(gè)細(xì)胞/cm2 (1，650個(gè)細(xì)胞/嵌塊（insert)) 的密度接種在轉(zhuǎn)孔嵌塊的內(nèi)部，細(xì)胞是在共培養(yǎng)培養(yǎng)基（Hayflick80%+EGM-2MV20%或 Hayflick50%+EGM-2MV50%)中。共培養(yǎng)7天后，收獲細(xì)胞，用GUAVA?儀器計(jì)數(shù)。還 將內(nèi)皮細(xì)胞保持在EGM-2MV中作為陽性對照。A，HUVECs。B，HCAECs。C，HIAECs。
[0022] 圖2顯示hUTC批次120304和中和性抗體對內(nèi)皮細(xì)胞的增殖的作用。HUVECs或 HCAECs以5000個(gè)細(xì)胞/cm2 (10, 000個(gè)細(xì)胞/孔）的密度接種到24孔組織培養(yǎng)皿的底部上， hUTC批次120304以5000個(gè)細(xì)胞/cm2 (1，650個(gè)細(xì)胞/嵌塊）的密度接種在轉(zhuǎn)孔嵌塊的內(nèi)部， 細(xì)胞是在共培養(yǎng)培養(yǎng)基（Hayflick50%+EGM-2MV50%)中。此時(shí)還加入抗FGF(7yg/ml)、 HGF(1yg/ml)或VEGF(1yg/ml)的中和性抗體。共培養(yǎng)7天后，收獲細(xì)胞，用GUAVA? 儀器計(jì)數(shù)。還將內(nèi)皮細(xì)胞保持在EGM-2MV培養(yǎng)基中作為陽性對照。顯示了用生長因子單獨(dú) 處理和用生長因子加中和性抗體處理的細(xì)胞。A，HUVECs.。B，HCAECs。
[0023] 圖3顯示hUTC批次120304細(xì)胞裂解物和中和性抗體對HUVECs的增殖的作用。 HUVECs以在EGM-2MV培養(yǎng)基中5000個(gè)細(xì)胞/cm2 (10, 000個(gè)細(xì)胞/孔）的密度接種到24孔 組織培養(yǎng)皿的底部上，保持8小時(shí)。然后將細(xì)胞在0. 5ml含0. 5%FBS和不含生長因子的 EGM-2MV培養(yǎng)基中溫育過夜，進(jìn)行血清饑餓處理。之后，加入FBS、新制備的hUTC批次120304 細(xì)胞裂解物和抗FGF(7yg/ml)或HGF(1yg/ml)的中和性抗體。培養(yǎng)4天后，收獲細(xì)胞，用 GUAVA?儀器計(jì)數(shù)。淺灰色柱條為培養(yǎng)基對照。中灰色柱條為與含62.5yg蛋白質(zhì)的裂 解物溫育的HUVECs。深灰色柱條為與含125yg蛋白質(zhì)的裂解物溫育的HUVECs。
[0024] 圖4顯示hUTCs和MSCs對內(nèi)皮細(xì)胞的迀移的作用。HUVECs或HCAECs以5000個(gè) 細(xì)胞/cm2 (23, 000個(gè)細(xì)胞/嵌塊）的密度接種在轉(zhuǎn)孔嵌塊的內(nèi)部，hUTC批次120304或MSCs 以5000個(gè)細(xì)胞/cm2 (48, 000個(gè)細(xì)胞/孔）的密度接種到6孔組織培養(yǎng)皿的底部上，細(xì)胞是 在在共培養(yǎng)培養(yǎng)基（Hayflick50%+EGM-2MV50%)中。共培養(yǎng)7天后，收獲在轉(zhuǎn)孔嵌塊 的底面上的細(xì)胞，用GUAVA?儀器計(jì)數(shù)。還將內(nèi)皮細(xì)胞保持在EGM-2MV培養(yǎng)基中作為對 照。A，HUVECs。B，HCAECs。
[0025] 圖5顯示hUTC批次120304和中和性抗體對內(nèi)皮細(xì)胞的迀移的作用。HUVECs或 HCAECs以5000個(gè)細(xì)胞/cm2(23, 000個(gè)細(xì)胞/嵌塊）的密度接種在轉(zhuǎn)孔嵌塊的內(nèi)部，hUTC 批次120304以5000個(gè)細(xì)胞/cm2(48, 000個(gè)細(xì)胞/孔）的密度接種到6孔組織培養(yǎng)皿的 底部上，細(xì)胞是在在共培養(yǎng)培養(yǎng)基（Hayflick50%+EGM-2MV50%)中。此時(shí)還加入抗 FGF(7yg/ml)或HGF(lyg/ml)的中和性抗體。共培養(yǎng)7天后，收獲在轉(zhuǎn)孔嵌塊的底面上 的細(xì)胞，用GUAVA?儀器計(jì)數(shù)。還將內(nèi)皮細(xì)胞保持在EGM-2MV培養(yǎng)基中作為對照。A， HUVECs〇B，HCAECs〇 發(fā)明詳述
[0026] 在本說明書和權(quán)利要求書中使用到各種術(shù)語。這些術(shù)語采用其在本領(lǐng)域的普通含 義，除非另有規(guī)定。其他專門定義的術(shù)語要按與本文提供的定義相一致的方式來解釋。
[0027] 干細(xì)胞是以單個(gè)細(xì)胞同時(shí)具有自我更新和分化產(chǎn)生后代細(xì)胞的能力為特征的未 分化細(xì)胞，包括自我更新的祖細(xì)胞、非自我更新的祖細(xì)胞和末端分化細(xì)胞。干細(xì)胞還以其以 下能力為特征：從多個(gè)胚層（內(nèi)胚層、中胚層和外胚層）體外分化成各種細(xì)胞譜系的功能細(xì) 胞的能力，在移植后產(chǎn)生具多個(gè)胚層的組織的能力，和在注射到胚泡后實(shí)質(zhì)上促成大多數(shù) 的組織（如果不是實(shí)質(zhì)上促成所有的組織的話）的能力。
[0028] 干細(xì)胞根據(jù)它們的發(fā)育潛力分為以下幾類：（1)全能細(xì)胞（totipotent) ; (2)多能 細(xì)胞（pluripotent) ;(3)多潛能細(xì)胞（multipotent) ;(4)寡能細(xì)胞（oligopotent)和（5) 單能細(xì)胞（unipotent)。全能細(xì)胞能夠產(chǎn)生所有的胚胎和胚胎外細(xì)胞類型。多能細(xì)胞能夠 產(chǎn)生所有的胚胎細(xì)胞類型。多潛能細(xì)胞包括能夠產(chǎn)生細(xì)胞譜系的子集（subset)，但都在特 定的組織、器官或生理系統(tǒng)當(dāng)中的那些細(xì)胞。例如，造血干細(xì)胞（HSC)能產(chǎn)生包括以下的后 代：HSC(自我更新）、局限于血細(xì)胞的寡能祖細(xì)胞及所有為血液的正常組分的細(xì)胞類型和 成分（例如血小板）。寡能細(xì)胞能比多潛能干細(xì)胞產(chǎn)生更局限的細(xì)胞譜系子集。單能細(xì)胞 能夠產(chǎn)生單一細(xì)胞譜系（例如精子發(fā)生干細(xì)胞）。
[0029] 干細(xì)胞還根據(jù)它們的獲取來源來分類。成人干細(xì)胞通常是見于包含多個(gè)分化細(xì)胞 類型的組織中的多潛能未分化細(xì)胞。成人干細(xì)胞能自我更新。在正常的情況下，它還能分化 產(chǎn)生其來源組織的特化細(xì)胞類型，或許還產(chǎn)生其他組織類型的特化細(xì)胞類型。胚胎干細(xì)胞 是來自胚泡階段的胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（innercellmass)的多能細(xì)胞。胎兒干細(xì)胞是來源于 胎兒組織或膜的干細(xì)胞。產(chǎn)后干細(xì)胞是基本上來源于分娩后可得到的胚胎外組織即胎盤和 臍帶的多潛能細(xì)胞或多能細(xì)胞。已發(fā)現(xiàn)這些細(xì)胞具有多能干細(xì)胞所特有的特征，包括快速 增殖和有分化成許多細(xì)胞譜系的潛力。產(chǎn)后干細(xì)胞可以是衍自血液（例如從臍帶血獲得）， 或者是非衍自血液（例如從臍帶的非血液組織和胎盤獲得）。
[0030] 胚胎組織通常定義為來源于胚胎（在人類中是指從授精到發(fā)育約六個(gè)星期的時(shí) 期）的組織。胎兒組織是指來源于胎兒的組織，胎兒在人類中是指從發(fā)育約六個(gè)星期到分 娩的時(shí)期。胚胎外組織是與胚胎或胎兒有關(guān)、但不來源于胚胎或胎兒的組織。胚胎外組織 包括胚胎外膜（絨毛膜、羊膜、卵黃囊和尿囊）、臍帶和胎盤（它本身從絨毛膜和母體基蛻膜 形成）。
[0031] 分化是非特化的（"非定向的"）細(xì)胞或特化程度較低的細(xì)胞獲得特化細(xì)胞（例如 神經(jīng)細(xì)胞或肌細(xì)胞）的特征的過程。分化細(xì)胞是在細(xì)胞的譜系當(dāng)中占有了較為特化的（"定 向的"）狀態(tài)的細(xì)胞。術(shù)語定向當(dāng)應(yīng)用到分化的過程時(shí)是指在分化途徑中進(jìn)行到這樣的程 度的細(xì)胞，在該程度下，它在正常情況下會繼續(xù)分化成特定的細(xì)胞類型或細(xì)胞類型子集，且 在正常情況下不能分化成別的細(xì)胞類型或者回復(fù)到分化程度較低的細(xì)胞類型。去分化是指 細(xì)胞回復(fù)到細(xì)胞的譜系當(dāng)中特化（或定向）程度較低的狀態(tài)的過程。本文所用的細(xì)胞的譜 系定義某細(xì)胞的遺傳，也就是說它來自哪些細(xì)胞和它能產(chǎn)生什么細(xì)胞。某細(xì)胞的譜系將確 定細(xì)胞在發(fā)育和分化的遺傳體系（hereditaryscheme)當(dāng)中的位置。
[0032] 在廣義上，祖細(xì)胞是具有產(chǎn)生比它本身更為分化的后代的能力、但仍保持補(bǔ)充祖 細(xì)胞庫的能力的細(xì)胞。按這個(gè)定義，干細(xì)胞本身也是祖細(xì)胞，末端分化細(xì)胞的更為直接的前 體同樣是祖細(xì)胞。當(dāng)提到本發(fā)明的細(xì)胞時(shí)，可使用祖細(xì)胞的這個(gè)廣泛定義，這在下文中有更 詳細(xì)的描述。在狹義上，祖細(xì)胞往往定義為在分化途徑中處于中間地位的細(xì)胞，也就是說它 從干細(xì)胞產(chǎn)生，在成熟細(xì)胞類型和細(xì)胞類型子集的產(chǎn)生中處于中間地位。這種類型的祖細(xì) 胞通常不能夠自我更新。因此，如果在本文中提到這種類型的細(xì)胞，它會被稱為非更新祖細(xì) 胞或者稱為中間祖細(xì)胞或前體細(xì)胞。
[0033] 本文所用的詞語分化成中胚層譜系、外胚層譜系或內(nèi)胚層譜系是指分別變得定向 于特定的中胚層譜系、外胚層譜系或內(nèi)胚層譜系的細(xì)胞。分化成中胚層譜系或產(chǎn)生特定中 胚層細(xì)胞的細(xì)胞的實(shí)例包括但不限于生脂細(xì)胞、生軟骨細(xì)胞、生心臟細(xì)胞、生真皮細(xì)胞、造 血細(xì)胞、成血管細(xì)胞、生肌細(xì)胞、生腎細(xì)胞、生泌尿生殖道細(xì)胞、生骨細(xì)胞、生心包細(xì)胞或基 質(zhì)細(xì)胞。分化成外胚層譜系的細(xì)胞的實(shí)例包括但不限于表皮細(xì)胞、生神經(jīng)細(xì)胞和生神經(jīng)膠 質(zhì)細(xì)胞。分化成內(nèi)胚層譜系的細(xì)胞的實(shí)例包括但不限于生胸膜細(xì)胞、生肝細(xì)胞、產(chǎn)生腸內(nèi)膜 的細(xì)胞和產(chǎn)生胰腺和內(nèi)臟的細(xì)胞。
[0034] 本發(fā)明所用的細(xì)胞通常稱為產(chǎn)后細(xì)胞或產(chǎn)后衍生細(xì)胞（procs)。它們有時(shí)候還可 更具體地稱為臍帶衍生細(xì)胞（UDCs)或胎盤衍生細(xì)胞（PDCs)。另外，細(xì)胞還可被描述為干細(xì) 胞或祖細(xì)胞，后一術(shù)語以廣義使用。術(shù)語衍生用來表示細(xì)胞已從它們的生物來源獲得并進(jìn) 行了生長或以別的方式進(jìn)行了體外操縱（例如在生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)以擴(kuò)展群體和/或產(chǎn)生 細(xì)胞系）。臍帶干細(xì)胞的體外操縱和本發(fā)明的臍帶衍生細(xì)胞的獨(dú)特特征在下文中作詳細(xì)描 述。