一種胃、胰蛋白酶處理的枸菊地黃復(fù)合微生態(tài)口服液的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種胃、胰蛋白酶處理的枸菊地黃復(fù)合微生態(tài)口服液的制備方法，特 別涉及一種利用生物技術(shù)處理枸菊地黃丸組方的方法，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 中醫(yī)認(rèn)為：肝開竅于目，肝血上注于目則能視，S間艮睛的功能與肝密切相關(guān)；在五 行理論中，肝屬木，腎屬水，水能生木，腎與肝是一對(duì)母子關(guān)系，即肝為腎之子，腎為肝之母， 母臟病變會(huì)影響到子臟；又肝主藏血，腎主藏精，精、血互生，因此肝與腎密切相關(guān)；因此， 治療眼部疾病，往往從肝腎入手。杞菊地黃丸由六味地黃丸加枸杞子、菊花而成。枸杞子： 甘平質(zhì)潤，入肺、肝、腎經(jīng)，補(bǔ)腎益精，養(yǎng)肝明目；菊花：辛、苦、甘，微寒，善清利頭目，宣散肝 經(jīng)之熱，平肝明目。八種藥物配伍組合共同發(fā)揮滋陰、養(yǎng)肝、明目的作用，對(duì)肝腎陰虛同時(shí)伴 有明顯的頭暈視物昏花等頭、眼部疾患，尤為有效。
[0003] 但由于枸菊地黃丸屬甘溫性，偏于補(bǔ)陰的藥，主治腎陰虛，其配方中陰柔的藥多一 些，所以吃后有時(shí)候會(huì)妨礙消化的副作用，因此不僅脾胃功能弱、消化不良者慎吃，而且長 期服用會(huì)導(dǎo)致腹?jié)M、便溏、食欲不振等不適癥狀。
[0004] 雙歧桿菌Bifidobacterium是1899年由法國學(xué)者Tissier從母乳營養(yǎng)兒的糞便 中分離出的一種厭氧的革蘭氏陽性桿菌，末端常常分叉，故名雙歧桿菌。雙歧桿菌具有以下 治療效果：1、維護(hù)腸道正常細(xì)菌菌群平衡，抑制病原菌的生長，防止便秘，下痢和胃腸障礙 等；2、抗腫瘤；3、在腸道內(nèi)合成維生素、氨基酸和提高機(jī)體對(duì)鈣離子的吸收；4、降低血液中 膽固醇水平，防治高血壓；5、改善乳制品的耐乳糖性，提高消化率；6、增強(qiáng)人體免疫機(jī)能， 預(yù)防抗生素的副作用，抗衰老，延年益壽。
[0005] 植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)是乳酸桿菌中的一種，常存在于發(fā)酵的 蔬菜和果汁中。植物乳桿菌作為人體胃腸道的益生菌群，具有維持腸道內(nèi)菌群平衡、提高機(jī) 體免疫力和促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收等多種功能。植物乳桿菌在食品工業(yè)中應(yīng)用十分廣泛。由于 對(duì)食鹽、亞硝酸鹽具有良好的耐受性，對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪無明顯直接的分解作用等特點(diǎn)，在發(fā) 酵肉制品中應(yīng)用很多。同時(shí)，也廣泛用于發(fā)酵植物性食品，此外利用植物乳桿菌還可以生產(chǎn) 共軛亞油酸。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種胃、胰蛋白酶處理的枸菊地黃復(fù)合微生態(tài) 口服液的制備方法。
[0007] 術(shù)語說明
[0008] 胃蛋白酶的活力單位（U):采用中國藥典1977年版制定的檢測方法檢測的活力單 位。
[0009] 胰蛋白酶的活力單位（U):采用中國藥典1990年版制定的檢測方法檢測的活力單 位。
[0010] 本發(fā)明技術(shù)方案如下：
[0011] 一種胃、胰蛋白酶處理的枸菊地黃復(fù)合微生態(tài)口服液的制備方法，步驟如下：
[0012] (1)將枸菊地黃丸原料中的八味原料藥經(jīng)粉碎后，制得原料粉末，然后按每百克原 料粉末加入200~600克水和煉蜜，混合均勻，制得原料漿液；
[0013] (2)向步驟（1)制得的原料漿液中加入酸調(diào)pH值為1.5~2. 2,按每百克枸菊地 黃丸原料加入20~60活力單位的胃蛋白酶，在溫度36~38°C，處理2~3小時(shí)，堿調(diào)pH 值為7. 8~8. 2,制得胃蛋白酶處理的漿液；
[0014] (3)向步驟（2)制得的胃蛋白酶處理的漿液中，按每百毫升加入20~50活力單位 的胰蛋白酶，在溫度36~38°C，處理2~3小時(shí)，酸調(diào)pH值至5. 5~6,制得胃、胰蛋白酶 處理的漿液；
[0015] (4)向步驟（3)制得的胃、胰蛋白酶處理的漿液中，按每百毫升接種0. 5~2g的經(jīng) 活化的雙歧桿菌和1. 5~3g的經(jīng)活化的植物乳桿菌，制得胃、胰蛋白酶處理的枸菊地黃復(fù) 合微生態(tài)口服液。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（1)的枸菊地黃丸原料如下，均為重量份：
[0017] 枸杞子40份、菊花40份、熟地黃160份、制山茱萸(酒萸肉）80份、牡丹皮60份、 山藥80份、茯苓60份、澤瀉60份、煉蜜7~10份。
[0018] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（1)的枸菊地黃丸原料如下，均為重量份：
[0019] 枸杞子40份、菊花40份、熟地黃160份、制山茱萸(酒萸肉）80份、牡丹皮60份、 山藥80份、茯苓60份、澤瀉60份、煉蜜16~22份。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（2)、（3)中的酸為鹽酸。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（1)的堿為碳酸鈉。
[0022] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（4)中經(jīng)活化的雙歧桿菌是指將雙歧桿菌接種于 TPY液體培養(yǎng)基中，在36~38°C培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期的雙歧桿菌。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的，所述TPY液體培養(yǎng)基每升組分如下：
[0024] 蛋白胨15. 0g、酵母粉2. 0g、葡萄糖20. 0g、可溶性淀粉0· 5g、氯化鈉5. Og、5wt°/〇 半胱氨酸溶液10.0 mL、西紅柿浸出液400.0 mL、吐溫801. 0g、肝提取液80.0 mL、蒸餾水 520.0 mT,. ρΗ7· 0。
[0025] 所述西紅柿浸出液的制備為本領(lǐng)域常規(guī)方法，步驟如下：
[0026] 將新鮮西紅柿洗凈稱重后切碎，加等量蒸餾水在KKTC水浴中加熱，攪拌90min， 然后用紗布過濾，調(diào)pH7. 0。
[0027] 所述肝提取液的制備為本領(lǐng)域常規(guī)方法，步驟如下：
[0028] 稱取新鮮豬肝1000g，切成小塊或絞碎，加蒸餾水至2000mL，混勻，置冰箱中過夜， 第二天煮沸15min，紗布過濾并擠壓收集濾液，加水定容至2000mL。
[0029] 所述雙歧桿菌為腸道益生菌，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)需要進(jìn)行選擇，如中 國專利文獻(xiàn)CN102946891A中的菌種保藏號(hào)為NCMB41676的雙歧桿菌，中國專利文獻(xiàn) CN101679938A中的菌種保藏號(hào)為NCMB41387的長雙歧桿菌等。
[0030] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（4)中經(jīng)活化的植物乳桿菌是指將植物乳桿菌接種 于MRS液體培養(yǎng)基中，在30~35°C培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期的植物乳桿菌。
[0031] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的，所述所述MRS液體培養(yǎng)基每升組分如下：
[0032] 蛋白胨 lO.Og、牛肉膏 lO.Og、酵母膏 5.0g、檸檬酸氫二銨[(NH4)2HC6H50 7]2.0g、 葡萄糖（C6H12O6 · H2O) 20. 0g、吐溫 801. OmL、乙酸鈉（CH3COONa · 3H20) 5. 0g、磷酸氫二鉀 (K2HPO4 · 3H20) 2. 0g、硫酸鎂（MgSO4 · 7H20) 0· 58g、硫酸錳（MnSO4 · H2O) 0· 25g、瓊脂 18. 0g、 蒸饋水定容至1000 mL, ρΗ6· 2~6· 6。
[0033] 所述植物乳桿菌為腸道益生菌，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)需要進(jìn)行選擇，如中國 專利文獻(xiàn)CN102597214A中的菌種保藏號(hào)為KCTC11403BP的植物乳桿菌CJLP133,中國專利 文獻(xiàn)CN102597215A中的菌種保藏號(hào)為KCTC11401BP的植物乳桿菌CJLP55等。
[0034] 有益效果
[0035] 本發(fā)明通過將傳統(tǒng)枸菊地黃丸原料經(jīng)胃、胰蛋白酶分解處理，得到了副作用較小 的胃、胰蛋白酶處理的枸菊地黃復(fù)合微生態(tài)口服液，該品酸甜適口，且經(jīng)實(shí)際應(yīng)用，長期服 用該胃、胰蛋白酶處理的枸菊地黃復(fù)合微生態(tài)口服液不僅能夠達(dá)到服用枸菊地黃丸治療效 果，并且導(dǎo)致胃寒、阻礙消化的副作用也得到極大的降低。
【具體實(shí)施方式】
[0036] 下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步說明，但本發(fā)明所保護(hù)范圍不限 于此。
[0037] 實(shí)施例中的TPY液體培養(yǎng)基每升組分如下：
[0038] 蛋白胨15. 0g、酵母粉2. 0g、葡萄糖20. 0g、可溶性淀粉0· 5g、氯化鈉5. 0g、5wt% 半胱氨酸溶液10.0 mL、西紅柿浸出液400.0 mL、吐溫801. 0g、肝提取液80.0 mL、蒸餾水 520.0 mL、pH7. 0 ;
[0039] 所述西紅柿浸出液的制備步驟如下：
[0040] 將新鮮西紅柿洗凈稱重后切碎，加等量蒸餾水在l〇〇°C水浴中加熱，攪拌90min， 然后用紗布過濾，調(diào)pH7. 0 ;
[0041] 所述肝提取液的制備步驟如下：
[0042] 稱取新鮮豬肝lOOOg，切成小塊或絞碎，加蒸餾水至2000mL，混勻，置冰箱中過夜， 第二天煮沸15min