專利名稱：給首次接受抗病毒療法的G慢性丙型肝炎感染患者施用包括利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合療法的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及利巴韋林(ribavirin)和α干擾素在制備用于治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述治療方法包括使用治療有效量的利巴韋林和治療有效量的α干擾素治療20-50周的時間期限的聯(lián)合療法。
丙型肝炎病毒的慢性感染是一種具有潛伏性的和緩慢發(fā)展的疾病，它對生命的質(zhì)量有嚴重影響。它最終可以導致肝硬化、代償失調(diào)的肝臟疾病和/或肝細胞癌。
通常將α干擾素單一療法用于治療慢性丙型肝炎感染。然而，這種治療方法不是始終有效的且有時可產(chǎn)生與劑量和治療期限有關(guān)的不可耐受的副作用。已有人提出將利巴韋林作為單一療法治療慢性丙型肝炎感染(Thomas等AASLD摘要，《肝臟病學》(Hepatology)第20卷第4期，Pt2,440號，1994)。不過，通常發(fā)現(xiàn)這種單一療法的治療無效。已有人提出了利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合療法(Lai等“1994年亞太肝臟研究協(xié)會第9屆雙年度科學會議研討會”(Symposium to the 9th Biennial Scientific Meeting AsianPacific Association for the Study of the Liver.1994))；在不能對單獨使用干擾素起持續(xù)反應的慢性丙型肝炎患者中對慢性丙型肝炎使用干擾素α-2b和利巴韋林聯(lián)合療法瑞典實驗?！陡闻K病學雜志》(J.Hepatology),1995；232(增刊2):17-21；BrouwerJT,Nevens F,Michielsen P等；當丙型肝炎對干擾素沒有反應時應選擇何種方法呢？對利巴韋林單一療法與利巴韋林和干擾素的聯(lián)合療法進行比較的安慰劑對照的Benelux多中心重復治療試驗。參見《肝臟病學雜志》(J.Hepatology),1994；212(增刊1):S17；WP2/08摘要。Chemello L,Cavalletto L,Bernardinello E等；慢性丙型肝炎患者對利巴韋林、對干擾素和對兩者聯(lián)合療法的反應及其與HCV基因型的關(guān)系；參見《肝臟病學雜志》(J.Hepatology)，1994；212(增刊1):S12；摘要GS5/29；以及α干擾素和利巴韋林聯(lián)合療法在首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎患者中的作用，參見《肝臟病學雜志》(J.Hepatology),1995；23(增刊2):8-12。Reichard等在《柳葉刀》(LANCET)1998；351；83-87中公開了更多的慢性丙型肝炎患者對使用干擾素α-2b和利巴韋林聯(lián)合療法治療24周比僅用干擾素α-2b治療具有持續(xù)的病毒學反應。Reichard等還公開了單獨用干擾素α-2b足以在這類具有3百萬拷貝/mL HCV-RNA血清值的這類病人中獲得持續(xù)反應。然而，還沒有人描述過一種使用α干擾素和利巴韋林的用于治療首次接受抗病毒療法的特異性HCV基因型感染患者的方法，該方法能以任意長期、有效的方式根除HCV-RNA。
對聯(lián)合使用α干擾素和利巴韋林治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者的方法存在一定的需求，該方法能以任意長期、有效的方式根除HCV-RNA。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及利巴韋林和α干擾素在制備用于治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的改進的用途，所述治療方法包括使用治療有效量的利巴韋林和治療有效量的α干擾素治療20-50周的時間期限的聯(lián)合療法。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)如果首次接受抗病毒治療的病人具有HCV基因型1感染、或如果首次接受抗病毒治療的病人具有HCV基因型1感染且通過定量PCR測定的病毒負載量大于2百萬拷貝/ml的HCV-RNA；給予聯(lián)合療法可持續(xù)40-50周、優(yōu)選為48周時間期限。
我們還發(fā)現(xiàn)如果首次接受抗病毒治療的病人具有HCV基因型2或3感染；給予聯(lián)合療法可持續(xù)20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
本發(fā)明涉及利巴韋林在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素20-50周時間期限；且其中首次接受抗病毒療法的患者具有HCV基因型2或3感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)20-30周時間期限；且其中首次接受抗病毒療法的患者具有HCV基因型1感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限。
本發(fā)明涉及α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的α干擾素和有效量的利巴韋林20-50周時間期限；且其中首次接受抗病毒療法的患者具有HCV基因型1感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限；且其中首次接受抗病毒療法的患者具有HCV基因型2或3感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
本發(fā)明涉及利巴韋林和α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素20-50周時間期限；且其中首次接受抗病毒療法的患者具有HCV基因型1感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限；且其中首次接受抗病毒治療的患者具有HCV基因型2或3感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
本發(fā)明涉及利巴韋林在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素40-50周、優(yōu)選為48周時間期限。
本發(fā)明還涉及α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的α干擾素和有效量的利巴韋林40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限。
本發(fā)明的優(yōu)選方面進一步涉及利巴韋林和α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎基因型1感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限。
因此，本發(fā)明的另一個優(yōu)選的方面進一步涉及利巴韋林和α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的患有慢性丙型肝炎基因型1感染且經(jīng)HCV-RNA定量PCR測定的病毒負載量大于2百萬拷貝/ml的HCV-1 RNA的患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限。
本發(fā)明的另一個優(yōu)選的方面進一步涉及利巴韋林在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的患有慢性丙型肝炎基因型2或3感染的病人以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
本發(fā)明還涉及α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的患有慢性丙型肝炎基因型2或3感染的病人以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的α干擾素和有效量的利巴韋林20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
本發(fā)明進一步涉及利巴韋林和α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的患有慢性丙型肝炎基因型2或3感染的病人以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
所給予的α干擾素優(yōu)選自干擾素α-2a、干擾素α-2b、共有干擾素、純化的α干擾素產(chǎn)物或聚乙二醇化的干擾素α-2a或聚乙二醇化的干擾素α-2b。更優(yōu)選的情況是，α干擾素選自干擾素α-2a、干擾素α-2b或純化的α干擾素產(chǎn)物且所給予的α干擾素的量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為2百萬-1千萬IU/周。在優(yōu)選的實施方案中，所給予的α干擾素是干擾素α-2b且所給予的α干擾素的量為3百萬IUTIW。
另一方面，所給予的α干擾素是共有干擾素且所給予的α干擾素的量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為1-20微克/周。在另一個實施方案中，所給予的α干擾素是聚乙二醇化的干擾素α-2b且所給予的聚乙二醇化的干擾素α-2b的量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為0.5-2.0微克/千克/周。另一方面，所給予的α干擾素是聚乙二醇化的干擾素α-2a且所給予的聚乙二醇化的干擾素α-2a的量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為20-250微克/千克/周。
干擾素α-2a或聚乙二醇化的干擾素α-2a或干擾素α-2b或聚乙二醇化的干擾素α-2b的使用是優(yōu)選的。
在20-30周的時間期限和40-50周的時間期限中，利巴韋林的給藥量為800-1200mg/天，優(yōu)選為800、1000或1200mg/天；而干擾素α-2a或干擾素α-2b的給藥量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為2百萬-1千萬IU/周，更優(yōu)選3百萬IU TIW。
詳述令人意外的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)就首次接受抗病毒療法的患有慢性丙型肝炎感染并帶有HCV基因型1的病人或這類首次接受抗病毒治療的帶有HCV基因型1且由定量PCR(“PCR”)測定的病毒負載量大于2百萬拷貝/ml的HCV-RNA病人而言，使用有效量的利巴韋林和有效量的α-干擾素治療至少20-30周的聯(lián)合療法導致治療終止后至少24周在血清中沒有檢測到HCV-RNA的病人比經(jīng)α-干擾素單一療法治療在血清中沒有檢測到HCV-RNA的病人多10倍。當將聯(lián)合療法延長至40-50周的時間期限時，在終止聯(lián)合療法后至少24周在血清中沒有檢測到HCV-RNA的病人比那些用聯(lián)合療法治療24周的在血清中沒有檢測到HCV-RNA的病人多2-3倍并且在終止聯(lián)合療法后至少24周在血清中沒有檢測到HCV-RNA的病人比那些用α-干擾素單一療法治療48周而在血清中沒有檢測到HCV-RNA的病人多8-9倍。參見表6、14、16和17，在使用本發(fā)明聯(lián)合療法后發(fā)現(xiàn)的持續(xù)病毒學反應率依賴于HCV基因型和經(jīng)HCV-RNA/qPCR測定的基線病毒負載量以及用于HCV基因型1的聯(lián)合療法的治療期限。參見表13和15。用于首次接受抗病毒療法的慢性HCV基因型4、5和6感染的患者的聯(lián)合療法的治療期限與首次接受抗病毒療法的帶有慢性HCV基因型1的病人的治療期限相同。用于首次接受抗病毒療法的HCV基因型2和/或3感染的患者的聯(lián)合療法的治療期限較短，即20-30周，優(yōu)選為24周。參見表7、13和15。
本文所用的術(shù)語“α-干擾素”指的是高度同源種類的特異性蛋白質(zhì)家族，它們可抑制病毒復制和細胞增殖并調(diào)制免疫應答。合適的α-干擾素一般包括但不限于重組干擾素α-2b諸如商購自ScheringCorporation,Kenilworth,N.J.的Intron-A干擾素；重組干擾素α-2a諸如商購自Hoffmann-La Roche,Nutl ey,N.J.的Roferon干擾素；重組干擾素α-2c諸如商購自Boehringer IngelheimPharmaceutical,Inc.,Ridgefield,CT.的Beroforα-2干擾素；干擾素α-n1即一種天然α-干擾素的純化混合物諸如商購自Sumitomo,Japan的Sumiferon或諸如商購自Glaxo-Wellcome Ltd.,London,Great Britain的Wellferon干擾素α-n1(INS)；或共有α-干擾素諸如那些描述在美國專利4,897,471和4,695,623(特別是其實施例7、8或9)中的共有α-干擾素和商購自Amgen,Inc.,Newbury Park,CA的特殊產(chǎn)品；或由Interferon Sciences制造的并商購自thePurdue Frederick Co.,Norwalk,CT.的商品名為Alferon的干擾素α-n3即一種天然α-干擾素的混合物。優(yōu)選使用干擾素α-2a或干擾素α-2b。由于在所有的干擾素中干擾素α-2b最廣泛地被批準在全世界范圍內(nèi)用于治療慢性丙型肝炎感染，所以它是最優(yōu)選的。在美國專利4,530,901中描述了干擾素α-2b的制備。
所給予的α干擾素選自干擾素α-2a、干擾素α-2b、共有干擾素、純化的α干擾素產(chǎn)物或聚乙二醇化的干擾素α-2a或聚乙二醇化的干擾素α-2b。
與利巴韋林共同給藥的干擾素α-2a、干擾素α-2b或純化的α干擾素產(chǎn)物的治療有效量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為2百萬-1千萬IU/周。
所給藥的治療有效量的干擾素α-2b為3百萬IU TIW。
當與利巴韋林共同給藥的α干擾素是共有干擾素時，所給藥的治療有效量的α干擾素的治療有效量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為1-20微克/周。
本文所用的術(shù)語“聚乙二醇化的α干擾素”指的是聚乙二醇修飾的α干擾素的綴合物，優(yōu)選干擾素α-2a和干擾素α-2b。優(yōu)選的聚乙二醇-干擾素α-2b綴合物是PEG12000-干擾素α-2b。本文所用的詞組“12,000分子量的聚乙二醇綴合的α干擾素”和“PEG12000-α IFN”指的是諸如按照國際申請WO 95/13090中的方法制備并在α-干擾素2a或α-2b氨基酸與具有12000平均分子量的聚乙二醇之間含有尿烷鍵的綴合物。聚乙二醇化的α干擾素PEG12000-IFN-α-2b商購自Schering-Plough Research Institute,Kenilworth,NJ。
通過使PEG聚合物與干擾素α-2b分子中賴氨酸殘基的ε氨基連接來制備優(yōu)選的PEG12000-干擾素α-2b。單一的PEG12000分子通過尿烷鍵與IFNα-2b分子上的游離氨基綴合。這種綴合物的特征在于所連接的PEG12000的分子量。將PEG12000-IFNα-2b綴合物配制成注射用凍干粉。α干擾素與PEG綴合的目的在于通過顯著延長其在血漿中的半衰期而改進蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運并由此使α干擾素產(chǎn)生延長的活性。
通過將α干擾素與水溶性聚合物偶聯(lián)可以制備其它的α干擾素綴合物。這類聚合物的非限制性實例包括其它聚氧化烯均聚物諸如聚丙二醇類、聚氧乙烯化的多元醇類；其共聚物及其嵌段共聚物。作為另一種以聚氧化烯為基礎(chǔ)的聚合物，可以有效地使用非抗原物質(zhì)諸如葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮類、聚丙烯酰胺類、聚乙烯醇類、以碳水化合物為基礎(chǔ)的聚合物等。這類α干擾素-聚合物的綴合物在美國專利4,766,106、美國專利4,917,888、歐洲專利申請0 236 987、歐洲專利申請0 510 356、0 593 868和0 809 996(聚乙二醇化的干擾素α-2a)以及國際申請WO 95/13090中有描述。
可以在無菌注射用水中用合適的緩沖液例如Tris-HCl、乙酸鹽或諸如磷酸二氫鈉/磷酸一氫鈉這樣的磷酸鹽緩沖液以及藥物上可接受的賦形劑(例如蔗糖)、載體(例如人血漿清蛋白)、毒性劑(例如NaCl)、防腐劑(例如硫柳汞(thimerosol)、甲酚或芐醇)和表面活性劑(例如吐溫或聚山梨醇酯)來配制適合于非腸道給藥的聚乙二醇化的干擾素的藥物組合物?？梢詫⒕垡叶蓟摩粮蓴_素作為凍干粉在2℃-8℃的冷藏條件下保存。當在2℃-8℃下保存并在重建24小時內(nèi)使用時，重建的水溶液是穩(wěn)定的。參見例如美國專利4,492,537、5,762,923和5,766,582。還可以將重建的水溶液保存在諸如用于轉(zhuǎn)運例如胰島素藥物的那些預充滿的多劑量注射器中。典型的合適注射器包括包括連接有諸如商購自Novo nordisk的NOVOLET Novo Pen的筆形注射器的預充滿小瓶的系統(tǒng)；以及可方便使用者自我注射的預充滿的筆形注射器。其它注射器系統(tǒng)包括含有玻璃筒的筆形注射器，在玻璃筒中的分隔小室內(nèi)裝有稀釋劑和凍干的聚乙二醇化的α干擾素粉。
當與利巴韋林共同給藥的α干擾素是聚乙二醇化的干擾素α-2b時，干擾素α-2b的給藥量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為0.5-2.0微克/kg/周。
當與利巴韋林共同給藥的α干擾素是聚乙二醇化的干擾素α-2a時，α干擾素的給藥量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為20-250微克/kg/周。
商購自ICN Pharmaceuticals,Inc.,Costa Mesa,California的利巴韋林即1-β-D-呋喃核糖基-1H-1,2,4-三唑-3-甲酰胺在第11版Merck Index的化合物號8199中有描述。其制備和制劑描述在美國專利4,211,771中。
患有慢性丙型肝炎感染的人可以表現(xiàn)出下列體征或癥狀中的一種或多種(a)ALT升高；(b)抗HCV抗體檢測陽性；(c)通過HCV-RNA檢測陽性證明存在HCV；(d)慢性肝臟疾病的臨床特征；(e)肝細胞損害。
為了實施本發(fā)明，按照足以消除或至少緩解一種或多種上述體征或癥狀的量對表現(xiàn)出一種或多種上述體征或癥狀的病人給予α干擾素和利巴韋林的聯(lián)合療法。包括聚乙二醇化的α干擾素制劑在內(nèi)的α干擾素制劑在口服給藥時無效，所以優(yōu)選的方法是經(jīng)非腸道優(yōu)選通過皮下、IV或IM注射的方式給予α干擾素或聚乙二醇化的α干擾素制劑。將利巴韋林與α干擾素共同給予病人，即在病人接受利巴韋林劑量的相同時間期限過程中給予α干擾素的劑量。可以將利巴韋林以口服膠囊、片劑或液體劑型的形式與非腸道給藥的聚乙二醇化的α干擾素共同給藥。當然，只要是可得到的，兩種藥物的其它給藥方式諸如通過噴鼻劑、經(jīng)皮、通過栓劑、通過緩釋劑型和通過肺部吸入也是所關(guān)注的。只要可轉(zhuǎn)運合適的劑量而不破壞活性組分，那么任何給藥形式都會起作用。
本發(fā)明上下文中的術(shù)語“首次接受抗病毒療法的病人”指的是從未用利巴韋林或任何干擾素包括但不限于α干擾素治療的病人。
本發(fā)明上下文中的術(shù)語“沒有可檢測到的HCV-RNA”指的是通過定量的多循環(huán)逆轉(zhuǎn)錄酶PCR法測定的每ml病人血清中的HCV-RNA低于100拷貝。在本發(fā)明中優(yōu)選通過下述方法來測定HCV-RNA。將該方法在本文中稱作HCV-RNA/qPCR。
使用硫氰酸胍-苯酚-氯仿混合物(mister)、隨后用乙醇-乙酸銨沉淀法從病人血清中提取RNA。將沉淀的RNA離心并將所得的沉淀在Centrivap控制臺(Labconco,Kansas city,Mo.)中干燥。然后將干燥的沉淀重新懸浮于30微升的Ransin(Promega Corp.,Madison,WI)、二硫蘇糖醇(dithiothritol)和焦碳酸二乙酯處理的水混合物中。將樣品保存在-20℃或-20℃以下(優(yōu)選低于-70℃)，直到進行RNA逆轉(zhuǎn)錄(RT)和PCR為止。
為了在RT反應中將完整的RNA序列轉(zhuǎn)變成cDNA，將隨機六脫氧核糖核苷酸(Pharmacia Biotech,Piscataway,NJ)用作第一鏈cDNA合成的引物。將3微升的重新懸浮的樣品的兩個等分試樣加入到3微升的100ng/μl隨機引物中并在70℃下使其變性，然后使用M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶(USB,Cleveland,OH)在含有5mM MgCl2的標準緩沖液中在40℃下逆轉(zhuǎn)錄1小時。最終的RT反應體積是26μl。在逆轉(zhuǎn)錄后立即開始進行PCR。
使用熱穩(wěn)定性Taq聚合酶進行修飾版本的PCR法以擴增cDNA。將75微升的PCR混合物加入到整個RT反應體積(26μl)中，使得在101μl的總體積中最終的MgCl2的濃度為1.5mM。然后將各101μl的樣品分成50.5μl并將礦物油層置于上部以防止蒸發(fā)。
PCR循環(huán)由分別在55℃、74℃和94℃下的90秒退火、90秒延伸和90秒變性步驟組成。使熱循環(huán)樣品進行最終的74℃的延伸10分鐘。使用4套不同的循環(huán)。通過以雙份上樣并在RT后均勻平分這些樣品，從一個樣品中分離出4管物質(zhì)。給4管中的每一管標注不同的循環(huán)號，從而在定量過程中提高敏感性和精確性。通過對每套60管中包括的公知拷貝數(shù)的RNA標準品進行的令人滿意的擴增來評估熱循環(huán)的效率。將兩套引物用于擴增，它們均來自HCV基因組的5’非翻譯區(qū)。這兩套引物是高度保守的并可檢測所有公知的HCV亞型。引物套1上游5’-GTG GTC TGC GGA ACC GGT GAG T-3’；下游5’-TGC ACG GTCTAC GAG ACC TC-3’，該組引物可產(chǎn)生190bp的產(chǎn)物。引物套2上游5’-CTG TGA GGA ACT ACT GTC TTC-3’；下游5’-CCC TAT CAG GCAGTA CCA CAA-3’，該組引物可產(chǎn)生256bp的產(chǎn)物。
然后使擴增的cDNA在3％的瓊脂糖凝膠中進行電泳并轉(zhuǎn)至尼龍膜上。通過Southern印跡法和使用非放射性洋地黃毒苷標記的DNA探針的免疫染色來檢測靶向DNA。使用PCR熱循環(huán)、瓊脂糖凝膠電泳、真空轉(zhuǎn)移Southern印跡、雜交和免疫染色的自動儀器來進行這些過程。各膜中含有公知拷貝數(shù)的連續(xù)稀釋的標準品，這些標準品用于構(gòu)建定量測定樣品帶的標準曲線。由仔細稀釋的來自轉(zhuǎn)錄克隆的HCV-RNA來繪制標準曲線。對轉(zhuǎn)錄物進行放射性摻入研究、凝膠電泳和OD260以便測定它們是否屬于預定的長度。在產(chǎn)生RNA轉(zhuǎn)錄物定量的克隆標準品后，生成更好地代表HCV異源特性的“集合的”標準品。這些集合物通過合并大量來自公知受感染個體的血清或血漿來制成。通過PCR標準該血清/血漿集合物中的克隆轉(zhuǎn)錄物，然后在公知的PCR-陰性液體中稀釋。最后，使用來自Chiron Inc.(Emeryville,CA)的cDNA Quantiplex核酸檢測系統(tǒng)來檢測所述集合物的高拷貝數(shù)樣品。將這些“雙重定量的”集合物等分并在-70℃下保存。在各實驗中使用5,000,000、1,000,000、500，000、100,000、10,000和1000拷貝/ml的稀釋液。
當標準曲線最為線性時，使用自動掃描儀/光密度計在展開過程中的間隔將各Southern印跡膜掃描入計算機以便測定。然后測定所得電子影象的帶面積和平均帶密度。將所有讀取值標準化成整合帶密度并與標準曲線進行比較以便獲得各帶中病毒拷貝數(shù)的數(shù)值。
本發(fā)明上下文中所用的術(shù)語“持續(xù)的病毒學反應”指的是在聯(lián)合療法治療結(jié)束后在按照本發(fā)明治療至少24周的病人血清中沒有可檢測到的HCV-RNA。優(yōu)選的情況是，在治療結(jié)束后，持續(xù)的病毒學反應的期限至少為1年或更長。
實施下列臨床治療方案研究1總體設計和研究計劃這是一個預期的、多中心的、隨機的、雙盲的平行組。本研究對在首次接受抗病毒療法的患有代償性慢性丙型肝炎的病人中用INTRONA+利巴韋林治療24-48周與用INTRONA+安慰劑治療24-48周進行了比較，所述的病人沒有預先用任何干擾素包括但不限于α干擾素(INTRONA、Roferon-A、共有干擾素或Wellferon)療法進行過治療并且預先也沒有用利巴韋林進行過治療。另外，在前2年內(nèi)預先用任何其它抗病毒或免疫調(diào)制藥物治療過的病人不包括在本研究中。合適的病人通過HCV-RNA陽性血清、肝臟活檢和實驗室檢驗證明患有慢性丙型肝炎。
將病人隨機分成用INTRONA+利巴韋林或INTRONA+安慰劑治療。INTRONA的劑量為3百萬IU SC TIW；利巴韋林的劑量為1000或1200mg PO/日(基于體重)、分成兩次劑量。由CentralRandomization Center按照等比例指定治療組。將隨機化程序設計成嘗試根據(jù)預治療肝臟活檢組織、血清HCV-RNA/qPCR水平和HCV基因型中在病變部位內(nèi)和經(jīng)過病變部位時存在或不存在肝硬化來平衡治療組。
將研究療法給予24-48周。整個研究過程為48或72周以便測定治療的長期作用。在隨機化時間時指定治療期限。
在治療過程中和治療后隨訪過程中，將生化檢查(ALT)、病毒學檢查(HCV-RNA)和組織學檢查(肝臟活檢組織)用于評估對研究療法的反應性質(zhì)和期限?？勺兊某跫壒π嵌x為在治療結(jié)束后至少24周測定的血清HCV-RNA/qPCR損失(＜100拷貝/mL)的總體反應。此外，還將肝臟炎癥的下降、如Knodell組織學活性指數(shù)(HAI)所測定的治療后肝臟活檢組織的改善和ALT的正?；瘷z驗為最終二級功效。通過監(jiān)測所選擇的實驗室參數(shù)且另外通過記錄和估計任何不良反應的發(fā)生率來評估本研究療法的安全性。
治療方案有4種研究的治療方案1．INTRONA3百萬IU SC TIW+分成兩次劑量的利巴韋林1000或1200mg/天PO、治療24周；或2．INTRONA3百萬IU SC TIW+分成兩次劑量的與利巴韋林PO劑量相同的安慰劑、治療24周；或3．INTRONA3百萬IU SC TIW+分成兩次劑量的利巴韋林1000或1200mg/天PO、治療48周；或4．INTRONA3百萬IU SC TIW+分成兩次劑量的與利巴韋林PO劑量相同的安慰劑、治療48周。
將研究療法1和2給予24周；將研究療法3和4給予48周。以3百萬IU TIW的固定劑量給予用于丙型肝炎的標準INTRONA(重組干擾素α-2b)治療方案。每一位病人均可收到有關(guān)制劑和皮下給予INTRONA的說明。將利巴韋林在每日的早晨和晚上給藥兩次。根據(jù)開始觀察時病人的體重來決定劑量。體重≤75kg的病人每日接受1000mg，分別是早晨2個200mg膠囊和晚上3個200mg膠囊。體重＞75kg的病人每日接受1200mg，分別是早晨和晚上各3個200mg膠囊。
將隨機化程序設計成根據(jù)下列基線特征來平衡各組·預治療的肝臟組織學(肝硬化或沒有肝硬化)；·血清HCV-RNA/qPCR情況(HCV-RNA/qPCR≤2,000,000或HCV-RNA/qPCR＞2,000,000拷貝/mL)；和·HCV基因型(1或其它)。將帶有混合基因型(包括1型)的病人歸類為用于平衡目的的1型。
功效初級功效目的是將治療組1和2和3和4有關(guān)定義為在治療結(jié)束后24周時測定的血清HCV-RNA/qPCR損失(可檢測的)的持續(xù)病毒學反應率與無法檢測到的濃度或與＜100拷貝/mL的濃度進行比較。還檢驗了下列最終二級功效最終二級功效·在隨訪24周時ALT正?；∪说谋壤弧せ顧z組織得到改善的病人的比例(類型Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ合并評分)；·來自活檢組織評分(類型Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ合并評分)中基線的改變；·在以HCV-RNA/qPCR為基礎(chǔ)的治療終點時的反應率；·在治療終點時ALT正常化病人的比例；·在以HCV-RNA/qPCR為基礎(chǔ)的隨訪24周時的反應率。
病毒學進入態(tài)和從進入態(tài)的改變由中心實驗室進行血清HCV-RNA/qPCR檢測。在基線上需要HCV-RNA陽性試驗結(jié)果；僅HCV-RNA陽性的病人適合參與。在第4周、第12周、第24周安排重復檢驗；且如果病人屬于48周的治療組，那么在第36周和第48周安排檢驗。所有病人均已安排了隨訪第12周和第24周的重復檢驗。
如下評估反應反應者如果在給定的時間點處HCV-RNA/qPCR為陰性(＜100拷貝/mL)，那么將處于該時間點的病人列為反應者。
持續(xù)反應者如果病人在隨訪的24周時是反應者，那么將該病人列為持續(xù)反應者。
注意將沒有滿足這些標準的病人包括在得到所需的HCV-RNA/qPCR評估前中斷的病人列為非反應者。
總體反應者以血清HCV-RNA/qPCR和由Knodell HAI炎癥評分評估的肝臟組織學改變?yōu)榛A(chǔ)。如果他/她是一個持續(xù)反應者且他/她的治療后Knodell HAI炎癥評分(類型Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ之和)比治療前的評分提高了2個或2個以上單位，那么將該病人列為總體反應者。
肝臟組織學要求肝臟活檢在上述病人登記6個月內(nèi)且對所有病人來說是隨訪的第24周時進行。由單獨的病理學家使用Knodell組織學活性評分來對活檢組織進行評估。中心病理學家看不見病人的鑒定、治療組和相對于治療(治療前或治療后)獲得活檢組織的時間。通過將在基線觀察到的炎癥活性的水平與在隨訪第24周時出現(xiàn)的炎癥活性的水平進行比較來評估研究療法的功效。
結(jié)果有912個病人在42US中心進行了登記并將他們隨機分成用INTRONA+利巴韋林治療(N=228)24周或用INTRONA+安慰劑治療(N=23)24周或用INTRONA+利巴韋林治療(“I+R”)(N=228)48周或用INTRONA+安慰劑治療(“I+P”)(N=225)48周。
總之，81％(734/912)的病人完成了治療和24周隨訪。在24周I+R組中89％(203/228)的病人、在24周I+P組中90％(207/231)的病人、在48周I+R組中70％(159/228)的病人和在48周I+P組中73％(165/225)的病人完成了本研究。
20％(178/912)的病人在治療過程中中斷治療11％(25/228)來自24周I+R組；10％(24/231)來自24周I+P組；30％(69/228)來自48周I+R組；且27％(60/225)來自48周I+P組。不良反應是所有組中病人中斷治療的最常見的原因(使用24周I+R的為8％[19/228]；使用24周I+P的為9％[20/231]；使用48周I+R的為20％[45/228]；且使用48周I+P的為14％[32/225])。
至少96％的完成治療并進入隨訪研究的病人完成了本研究。在隨訪過程中僅有24周I+R組中的2個病人、24周I+P組中的8個病人、48周I+R組中的7個病人和48周I+P組中的4個病人中斷了研究。
對所有研究1中的病人來說，將病人的體重及其基線疾病特征(HCV基因型和原始病毒負載量)列在下面的表1中。在進行HCV-RNA/qPCR檢測的病人血清樣品上處理HCV基因型。
表1．研究1病人的體重和基線疾病特征Ⅰ+R1Ⅰ+P2Ⅰ+R1Ⅰ+P224周 24周 48周 48周體重 (N=228) (N=231)(N=228) (N=225)＞75kg 148(65％) 157(68％) 133(58％)153(685)＜75kg 80(35％) 74(32％) 95(42％) 72(32％)HCV基因型31 164(72％) 167(72％) 166(73％)162(72％)2 29(13％) 38(17％) 37(16％) 43(19％)3 28(12％) 24(10％) 23(10％) 19(8％)4 6(3％)2(0.9％) 1(0.4％) 1(0.4％)5 00 1(0.4％) 06 1(0.4％) 0 0 0HCV-RNA/qPCR(拷貝/mL)，幾何平均值3,070,0192,767,469 2,922,925 2,819,324≤2百萬拷貝/mL62(27％) 74(32％)76(33％)63(28％)＞2百萬拷貝/mL166(73％)157(68％) 152(67％) 162(72％)表1的附注1．I+R是IntronA+利巴韋林；2．I+P是IntronA+安慰劑；3．將亞基因型在其相應的基因型中分類。
本報告中所有功效和安全性的討論均以所有治療組的數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)。
功效本研究的目的在于根據(jù)總反應率和病毒學反應率(以HCV-RNA(qPCR)為基礎(chǔ))比較INTRONA+利巴韋林與INTRONA+安慰劑持續(xù)24和48周的治療。本研究可變的初級功效是總反應率。
來自有關(guān)此功效的結(jié)論如下在治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎病人中給予INTRONA+利巴韋林的聯(lián)合療法治療48周比INTRONA的單一療法提高功效2-3倍。48周的INTRONA+利巴韋林聯(lián)合療法可增加治療結(jié)束時的反應率并降低復發(fā)率，從而產(chǎn)生比48周INTRONA+安慰劑更好的持續(xù)病毒反應率。這種功效的提高包括疾病的所有方面并導致·持續(xù)根除可檢測到的HCV-RNA；·改善肝臟炎癥；·ALT正?；弧nodell HAI炎癥評分增加。
血清HCV-RNA的持續(xù)損失與肝臟炎癥的改善或消除有關(guān)。結(jié)果證明了持續(xù)病毒學反應、肝臟炎癥的改善、ALT正?；cHQL改善之間的相關(guān)性。
隨訪結(jié)束的總反應率是血清HCV-RNA(qPCR)與隨訪結(jié)束時(治療結(jié)束后24周)肝臟組織學改變的結(jié)合體。如果在治療后24周評估時HCV-RNA(qPCR)為陰性，那么將該病人列為總體反應者；且如果治療后的值已經(jīng)比治療前的評分下降了2個或2個以上單位，那么這類治療后的Knodell HAI炎癥評分(類型Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ之和)已經(jīng)改善。將截止到第一次出現(xiàn)HCV-RNA陰性時的持續(xù)病毒學反應者百分比、隨訪結(jié)束(持續(xù))病毒學反應的百分比、組織學反應的百分比和總反應率的百分比概括在表2、3、4和5中。隨訪結(jié)束時HCV-RNA持續(xù)病毒學反應在治療結(jié)束后24周HCV-RNA的持續(xù)損失在INTRONA+利巴韋林的聯(lián)合治療的病人組中在治療結(jié)束后24周根除血清中HCV-RNA的病人的比例比接受INTRONA+安慰劑的病人比例高2-3倍(41％對16％)。
延長聯(lián)合療法對復發(fā)率有最大的影響。在治療結(jié)束后24周時，48周聯(lián)合療法的復發(fā)率與48周Intron A+安慰劑治療的復發(fā)率相同(12％)。用聯(lián)合療法延長治療(48周)和降低的復發(fā)率產(chǎn)生了最高的持續(xù)病毒學反應率。用48周聯(lián)合療法的持續(xù)病毒學反應率比24周聯(lián)合療法的持續(xù)病毒學反應率顯著提高(38％對31％,p值=0.053)。
將聯(lián)合療法從24周延長至48周極大地可增加在第12周和第24周HCV-RNA第一次成為陰性的病人的持續(xù)病毒學反應。成為持續(xù)病毒學反應者的大多數(shù)病人截止到第4周時HCV-RNA為陰性。正如表2中所概括的，觀察到對24周聯(lián)合療法(Ⅰ+R)有持續(xù)病毒學反應的病人在24周治療的第4周時為81％(35/44)且對48周聯(lián)合療法有持續(xù)病毒學反應的病人在48周治療的第4周時為81％(36/45)。注意到24周和48周聯(lián)合療法的病人中，大部分在第12周首次反應，成為持續(xù)病毒學反應者。在24周聯(lián)合療法組中這些病人中的42％和在48周聯(lián)合療法組中這些病人中的63％中，這些反應是持續(xù)的。此外，在第24周時HCV-RNA第一次成為陰性的48周聯(lián)合療法組中44％的病人實現(xiàn)了持續(xù)的病毒學反應。在24周后發(fā)生的反應那些病人中沒有一個成為任何治療組中的持續(xù)反應者。
對于接受48周聯(lián)合療法的病人來說，在第12周和第24周時第一次成為反應者那些在治療結(jié)束后24周成為持續(xù)病毒學反應者的數(shù)量是最高的。(參見下面的表2)。
表2．研究1截止到的第一次沒有可檢測到的HCV-RNA濃度時的持續(xù)病毒學反應者的百分比IntronA+利巴韋林 IntronA+安慰劑第一次沒有可檢測到的HCV-RNA的 24周 48周 24周48周時間(周數(shù))4 81％(35/43)80％(36/45)48％(10/21) 70％(14/20)1242％(30/72)63％(40/63)9％(3/32) 35％(11/31)2446％(5/11) 44％(11/25)0％(0/22) 22％(4/18)
表3概括血清HCV-RNA指示的隨訪結(jié)束病人的反應表3隨訪結(jié)束的血清HCV-RNA治療結(jié)束(EOT)后24周時根除了HCV-RNA的病人的比例所有治療的95％INTRON A+ INTRON A+p-值置信區(qū)間的病人利巴韋林安慰劑反應情況A BC DB對D在EOT時 24周48周24周48周陰性121(53％) 115(50％) 66(24％)54(24％) ＜0.001陽性107(47％) 113(50％) 165(71％) 171(76％)在隨訪結(jié)束時持續(xù)反應者 70(31％) 87(38％)13(6％) 29(13％) ＜0.001復發(fā)者 54(24％) 28(12％)53(23％)26(12％)非反應者104(46％) 113(50％) 165(71％) 170(76％)1治療結(jié)束的費希爾精確試驗A對B的P值為0.639；A對C的P值為＜0.001；A對D的P值＜0.001。
2隨訪結(jié)束比較的邏輯回歸A對B的P值為0.53；A對C的P值為＜0.001；A對D的P值＜0.001。
與INTRON A單一療法相比，聯(lián)合療法可顯著提高治療結(jié)束時的病毒學反應。參見表3。48周聯(lián)合療法與48周INTRON A單一療法比較的p值以及24周聯(lián)合療法與24周和48周INTRON A單一療法比較的p值各為＜0.001。從24周延長至48周的聯(lián)合療法使復發(fā)率降低了50％(從24％降低至12％)，由此使得48周聯(lián)合療法比24周聯(lián)合療法更為有效(p=0.053)。
得到用INTRONA+利巴韋林治療24周和48周病人的治療前和治療后的活檢組織分別為79％(179/228)和69％(157/228)且接受INTRONA+安慰劑治療24周和48周的那些病人的活檢組織分別為76％(176/231)和70％(158/225)。表4概括了對帶有治療前和治療后肝臟活檢組織結(jié)果的病人的肝臟炎癥的治療作用。由于HCV-RNA復制的持續(xù)損失，所以在接受聯(lián)合療法療48周的病人中肝臟炎癥得到改善的病人比例明顯比接受INTRONA單一療法治療48周的那些病人多(p＜0.001)。
可檢測到的HCV-RNA的根除與血清ALT的正?；瘶O為相關(guān)。在隨訪結(jié)束時使用聯(lián)合療法使ALT正常的病人比INTRONA單一療法多2-3倍以上。在ALT已經(jīng)持續(xù)正?；牟∪酥?，與接受24周聯(lián)合療法和24周或48周INTRON A單一療法的病人相比，較高比例的48周聯(lián)合療法的病人是持續(xù)病毒學反應者。
表4隨訪結(jié)束的肝臟組織學在治療結(jié)束后24周以Knodell HAI(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ)評分為基礎(chǔ)的肝臟組織學改善病人b的數(shù)量(％)病人情況 INTRON A+利巴韋林INTRON A+安慰劑 p值cABCD24周 48周 24周48周(N=179)a(N=157)a(N+176)a(N=158)a改善的活檢 102(57％) 96(61％) 77(44％)65(41％) ＜0.001組織da N=具有成對活檢組織樣品的病人數(shù)量。
b 具有治療前和治療后活檢組織的病人。
c 費希爾精確試驗。
d 在Knodell組織學指數(shù)(HAI)評分(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ之和)中來自治療前至治療后列為區(qū)別于治療前的減少2或2以上單位的改變。
總體反應當設計本研究時，認識到因為肝臟活檢是一種侵害過程，對于所有病人來說，在治療后獲得肝臟活檢組織是不可能的。因此，治療方案和統(tǒng)計學分析計劃指定對總體反應的分析應以所有受治療病人的數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)并通過對病人的最大可能性估計方法(MLE)來評估，可以不測定所述病人的總體反應情況，即病人帶有陰性HCV-RNA且未得到(治療后)活檢組織評估結(jié)果。該治療方案還指定對具有治療前和治療后的活檢結(jié)果的病人(即具有完整數(shù)據(jù)的病人)進行附加分析?？傮w反應是可檢測到的HCV-RNA的持續(xù)損失與隨訪結(jié)束時肝臟組織學改善的結(jié)合體。將總體反應概括在以下列分析為基礎(chǔ)的表5中
·最大可能性估計(MLE)；·具有完整數(shù)據(jù)的病人(治療前和治療后活檢結(jié)果)；·因失敗而未得到治療數(shù)據(jù)(HCV/活檢兩者或其中之一)的病人。
表5 總體反應率INTRON A+INTRON A+利巴韋林 安慰劑分析的數(shù)據(jù) A B C D p值b24周 48周 24周 48周 B對D最大可能性 26％ 35％5％9％ ＜0.001估計a具有完整 29％ 41％5％11％＜0.001數(shù)據(jù)的病人c(52/179) (64/157)(8/170)(18/158)因失敗 23％ 28％28％8％＜0.001而未治療d(52/228) (64/228)(64/228)(18/225)a 以邏輯回歸為基礎(chǔ)的MLE。具有完整活檢數(shù)據(jù)的邏輯回歸分析。A對D的p值＜0.001且A對B的p值為0.096。
b 費希爾精確試驗。
c 完整數(shù)據(jù)=治療前和治療后活檢結(jié)果。(邏輯回歸分析。)d 將未得到病毒學或活檢數(shù)據(jù)之一或兩者均未得到的病人計為非反應者。
當根據(jù)對隨訪結(jié)束時根除HCV-RNA的治療作用和對肝臟炎癥的改善作用的個體結(jié)果預測時，INTRONA+利巴韋林的48周治療組中的總體反應率顯著大于(p＜0.001)在INTRONA+安慰劑的48周治療組中觀察到的總體反應率。在由MLE和完整活檢所測定的48周聯(lián)合療法治療與48周INTRON A單一療法治療相比的總體反應中的改善存在統(tǒng)計顯著性。24周和48周聯(lián)合療法治療的總體反應率明顯分別高于24周和48周INTRON A單一療法的總體反應率。
對所有的基線人數(shù)統(tǒng)計變化和疾病特征進行邏輯回歸分析。唯一基線統(tǒng)計顯著性的病人和以隨訪結(jié)束的持續(xù)反應為特征的疾病特征是非1型的基因型且病毒負載量≤2百萬。
對于病毒拷貝的數(shù)量(≤2百萬，＞2百萬)來說，在帶有≤2百萬拷貝的病人中存在有利于高反應率的統(tǒng)計顯著性差異(表6)。
當將基因型和基線病毒負載合并時，觀察到了反應層次。那些具有非1型基因型且基線病毒負載量≤2百萬拷貝的接受24周和48周聯(lián)合療法的病人具有最佳的隨訪結(jié)束反應；對于那些具有基因型1和＞2百萬拷貝的使用48周INTRON A+利巴韋林聯(lián)合療法的病人來說，持續(xù)的病毒學反應是那些使用聯(lián)合療法僅治療24周的相同類型病人的持續(xù)病毒學反應的兩倍。(參見表6)表6 疾病特征對持續(xù)反應所有受治療的病人病人數(shù)量(％)疾病特征aINTRON A+ INTRON A+利巴韋林 安慰劑24周 48周 24周48周HCV-RNA/病毒 42％(26/62)43％(33/76)9％(7/74) 29％(18/63)負載量≤2百萬拷貝/ml＞2百萬拷貝/mL 27％(44/166) 36％(54/152) 4％(6/157) 7％(11/162)HCV基因型1 16％(26/164) 28％(46/166) 2％(3/167) 7％(11/162)其它基因型 69％(44/64)66％(41/62)16％(10/64)29％(18/63)基因型/基線HCV-RNA其它基因型 88％(14/16)71％(15/21) 25％(5/20)50％(10/20)≤2百萬拷貝/ml其它基因型 63％(30/48)63％(26/41) 11％(5/44)19％(8/43)＞2百萬拷貝/ml基因型1,≤226％(12/46)33％(18/55) 4％(2/54) 19％(8/43)百萬拷貝/ml基因型1,＞212％(14/118) 25％(28/111)1％(1/113)3％(3/119)百萬拷貝/mla 在登記時，根據(jù)由HCV-RNA/PCR的HCV-RNA測定的HCV病毒拷貝的數(shù)量(≤2百萬，＞2百萬)、基因型(1或其它)和肝硬化來對病人分類。
b表7 由HCV-基因型導致的持續(xù)病毒學反應率(％)INTRON A+ INTRON A+利巴韋林 安慰劑基因型24周 48周 24周 48周116％(27/165) 28％(46/166) 21％(4/168) 7％(11/162)283％(25/30)68％(25/37)18％(7/38)35％(15/43)357％(16/28)65％(15/23)8％(2/24) 16％(3/19)4-6 40％(2/5) 50％(1/2) 00表7闡述了使用48周聯(lián)合療法的各基因型病人的持續(xù)病毒學反應率大于用Intron A+安慰劑治療24和48周的那些病人的持續(xù)病毒學反應率。除HCV-基因型2的病人外，聯(lián)合療法期限的延長可增加具有持續(xù)病毒學反應的病人的比例。參見表15研究1和2的合并的病毒學反應。對持續(xù)病毒學反應的邏輯回歸分析表明除治療組外，非1型HCV基因型和基線HCV病毒≤2百萬拷貝/mL是持續(xù)病毒學反應的顯著預測者(p值≤0.0111)。最值得注意的是，用聯(lián)合療法治療48周可改善預計有最低反應率病人即那些帶有HCV-基因型1且大于≤2百萬拷貝HCV病毒/mL的病人的持續(xù)病毒學反應率。這些病人具有兩倍于用聯(lián)合療法治療24周的那些病人的持續(xù)病毒學反應率。接受48周聯(lián)合療法的HCV-基因型1病人的持續(xù)病毒學反應率明顯高于那些接受24周聯(lián)合療法的病人的持續(xù)病毒學反應率。
研究2通過基本上與上述研究1中所述相同的方法，使用下列三種治療方案在43個國際地點(832位病人)中實施研究2將結(jié)果概括如下1．INTRONA3百萬IU SC TIW+利巴韋林1000或1200mg/天將PO分成兩次劑量給藥24周；或2．INTRONA3百萬IU SC TIW+利巴韋林1000或1200mg/天將PO分成兩次劑量給藥48周；或3．INTRONA3百萬IU SC TIW+與利巴韋林相同劑量的安慰劑將PO分成兩次劑量給藥48周。
功效初級功效的目的是如在隨訪結(jié)束時(在治療結(jié)束后24周)測定的可檢測血清HCV-RNA(qPCR)損失所定義的持續(xù)病毒學反應。如果在治療后24周的評估時HCV-RNA(qPCR)為陰性且治療后Knodell HAI炎癥評分(類型Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ之和)已經(jīng)比治療前的評分改善了(下降了)2個或2個以上單位，那么將該病人分類為總體反應者。將截止到第一次HCV-RNA陰性時的持續(xù)病毒學反應者、隨訪結(jié)束的病毒學反應、組織性反應和總體反應率的百分比概括在表9、10、11和12中。
對于研究2中的所有病人來說，將病人體重及其基線疾病特征(HCV基因型和最初病毒負載量)列在下面的表8中。
表8．研究2病人的體重和基線疾病特征INTRON A+ INTRON A+利巴韋林 安慰劑體重24周 48周48周＞75kg116(42％)129(47％)122(44％)≤75kg161(58％)148(53％)156(56％)HCV基因型1 161(58％)159(57％)168(60％)2 27(10％) 23(8％) 21(8％)3 73(26％) 74(27％) 79(28％)4 12(4％) 16(6％) 9(3％)5 1(0.4％) 5(2％) 1(0.4％)6 3(1％)00HCV-RNA/PCR的HCV-RNA(拷貝數(shù)/ml)幾何平均值2,229,79 72,064,9592,351,824≤2百萬拷貝/mL108(39％)115(42％)95(34％)＞2百萬拷貝/mL169(61％)162(59％)183(66％)表9．研究2截止到第一次沒有可檢測到的HCV-RNA濃度時的持續(xù)病毒學反應者的百分比第一次沒有可檢 Intron A+ Intron A+測到的HCV-RNA 利巴韋林 安慰劑的時間(周數(shù))2448周 48周4 84％(57/68)83％(58/70)72％(33/46)12 47％(36/77)69％(51/74)34％(18/53)24 12％(3/26) 45％(9/20) 10％(2/21)正如表9中所概括的，大多數(shù)成為持續(xù)病毒學反應者的病人在治療4周時具有陰性HCV-RNA水平。然而，在24和48周聯(lián)合療法治療組中在第4周時HCV-RNA為陽性的大部分病人在第12周時第一次起反應；在24周治療組中47％的病人和48周治療組中69％的病人成為持續(xù)反應者。重要的是，在48周聯(lián)合療法治療組中第一次在第24周時成為陰性的45％的病人(9/20)成為持續(xù)病毒學反應者。第24周后在任意三個治療組中發(fā)生的反應中沒有一個成為持續(xù)的。隨訪結(jié)束的HCV-RNA反應在治療結(jié)束后24周的HCV-RNA的持續(xù)損失在用INTRONA+利巴韋林聯(lián)合療法治療的病人中在聯(lián)合療法治療結(jié)束后24周的血清中根除了HCV-RNA的病人比例明顯高于接受INTRONA單一療法的那些病人的比例。表10概括了如血清HCV-RNA所指示的隨訪結(jié)束的病人反應。
表10．隨訪結(jié)束的血清HCV-RNA在治療結(jié)束后(EOT)和隨訪結(jié)束(EOFU)后24周時根除了HCV-RNA的病人比例。
病人數(shù)量(％)INTRON A+ INTRON A+利巴韋林 安慰劑A B C24周 48周 48周 B對C1(N=277) (N=277) (N=278)的P值EOT2陰性57％(157) 52％(145) 33％(93) ＜0.001陽性42％(120) 42％(132) 65％(185)EOFU3持續(xù)的 35％(96) 43％(118) 19％(53) ＜0.001復發(fā)的 23％(23) 10％(27) 15％(41)非反應者42％(42) 48％(132) 66％(184)1EOT比較的費希爾精確試驗；EOFU的邏輯回歸。
2EOT=治療結(jié)束。A對C的P值=＜0.001且A對B的P值為0.348。
3EOFU=隨訪結(jié)束。A對C的P值=＜0.001且A對B的P值為0.055。
表10說明(1)24周和48周聯(lián)合療法在治療結(jié)束時比IntronA單一療法顯著增加了持續(xù)病毒學反應(兩者的p值均＜0.001)；和(2)聯(lián)合療法從24周延長至48周對復發(fā)率具有最大限度的影響(48周為10％-24周為23％，p值為0.055)。隨訪結(jié)束的肝臟組織學治療結(jié)束后24周以Knodell組織學活性指數(shù)(HAI)評分(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ)為基礎(chǔ)的肝臟組織學改善分別獲得用INTRONA+利巴韋林治療24周和48周的74％(204/277)和60％(167/277)病人以及接受INTRONA+安慰劑的69％(191/278)那些病人的治療前和治療后的活檢組織。表11概括了對具有治療前和治療后肝臟活檢組織結(jié)果的病人的肝臟炎癥的治療作用。由于HCV-RNA復制持續(xù)損失，所以在接受聯(lián)合療法48周的病人中肝臟炎癥改善病人的比例顯著高于(p＜0.001)接受INTRONA單一療法48周病人的比例。聯(lián)合療法從24周延長至48周還顯著增加了肝臟炎癥改善的病人的比例(p值=0.046)。
表11．隨訪結(jié)束的肝臟組織學治療結(jié)束后24周以Knodell HAI(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ)評分為基礎(chǔ)的肝臟組織學改善病人b數(shù)量(％)INTRON A+INTRON A+利巴韋林 安慰劑病人情況A BC24周48周 48周 B對C的(N=204)a(N=167)a(N=191)ap值c改善的活檢組織d53％(107) 63％(105)39％(74) ＜0．001a 具有成對活檢組織的病人數(shù)量。
b 具有治療前和治療后活檢組織的病人。
c 費希爾精確試驗。A對C的P值=0.007且A對B的P值為0.046。
d 在Knodell組織學指數(shù)(HAI)評分(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ之和)中來自治療前至治療后列為區(qū)別于治療前的減少2或2上單位的改變。
總體反應將總體反應概括在以下列分析為基礎(chǔ)的表12中·最大可能性估計(MLE)；·具有完整數(shù)據(jù)(治療前和治療后活檢結(jié)果)的病人；·因治療失敗而未得到數(shù)據(jù)(HCV-RNA/活檢兩者或兩者之一)的病人。
表12．總體反應率INTRON A+INTRON A+利巴韋林 安慰劑數(shù)據(jù)分析 A B C24周 48周 48周ML估計值 28％ 37％ 17％具有完整活檢數(shù)據(jù)c的病人30％(62/204) 41％(68/167) 17％(32/191)因失敗未得到治療的病人 22％(62/277) 24％(68/277) 12％(32/278)
a 以邏輯回歸為基礎(chǔ)的MIE。B對C的P值=＜0.001且A對C的P值＜0.002且A對B的P值為0.043。
b 費希爾精確試驗。
c 完整數(shù)據(jù)=治療前和治療后活檢結(jié)果。B對C的P值=＜0.001、A對C的P值＜0.005且A對B的P值為0.032。
d 將未得到病毒學或活檢數(shù)據(jù)的或兩者均未得到的病人計為試驗失敗的病人。
正如對隨訪結(jié)束時根除HCV-RNA的治療作用和對肝臟炎癥的改善作用的個體結(jié)果所預測的，對于所有評估方法來說，INTRONA+利巴韋林組中的總體反應率明顯比在INTRONA+安慰劑組中觀察到的改善高兩倍。
對所有的基線人數(shù)統(tǒng)計變化和疾病特征進行邏輯回歸分析。以隨訪結(jié)束的持續(xù)反應為特征的唯一基線統(tǒng)計顯著性特征性預測(Characteristic predictive)是非1型的基因型。
表13．由研究2病人的HCV基因型的持續(xù)病毒學反應率INTRON A+INTRON A+利巴韋林 安慰劑基因型 24周 48周 48周118％(29/162) 30％(48/159) 11％(19/168)259％(16/27)74％(17/23)35％(8/23)366％(48/73)61％(45/74)32％(25/79)4-6 19％(3/16) 38％(8/21) 12％(1/8)對于所有基因型來說，聯(lián)合療法提供了高于Intron A+安慰劑的持續(xù)病毒學反應率。聯(lián)合療法延長至48周的期限可增加除3型外所有基因型的持續(xù)病毒學反應的比例。(參見表13以及描述研究1和2合并的病毒學(vivologic)反應的表15)。
對于病毒拷貝的數(shù)量(≤2百萬，＞2百萬)來說，存在有利于帶有≤2百萬拷貝病人中較高持續(xù)病毒學反應率的數(shù)量差異(表14)。當將基因型與基線病毒負載量合并時，獲得了反應層次。這些帶有非1型基因型且基線病毒負載量≤2百萬拷貝的病人具有最佳的隨訪結(jié)束反應；所有組中那些帶有基因型1且＞2百萬拷貝的接受48周以上聯(lián)合療法治療的病人具有最顯著的基本病毒學反應改善。
表14疾病特征對持續(xù)病毒學反應研究2中所有經(jīng)治療的病人病人數(shù)量(％)疾病特征 INTRON A+ INTRON A+利巴韋林 安慰劑24周 48周 48周HCV-RNA/qPCR 44％(48/108)47％(54/115)31％(15/49)≤2百萬拷貝/ml＞2百萬拷貝/mL28％(48/109)40％(64/102)13％(24/183)HCV基因型118％(29/161)30％(48/159)11％(19/168)其它基因型58％(67/116)59％(70/118)31％(34/110)基因型/基線HCV-RNA/qPCR其它基因型/ 53％(28/53) 62％(34/55) 31％(15/49)≤2百萬拷貝/mL其它基因型/ 62％(39/63) 57％(36/63) 31％(19/61)＞2百萬拷貝/mL基因型1& 36％(20/55) 33％(20/60) 30％(14/46)≤2百萬拷貝/mL基因型1& 8％(9/106) 28％(28/99) 4％(5/122)＞2百萬拷貝/mL表14解釋了延長至48周的聯(lián)合療法一般可改善持續(xù)病毒學反應率。在接受48周聯(lián)合療法的非1型基因型且最初HCV濃度為≤2百萬拷貝/mL的病人中觀察到了最高的持續(xù)病毒學反應率。重要的是，對于具有基因型1和HCV濃度≤2百萬的病人來說，使用48周聯(lián)合療法的持續(xù)病毒學反應率高于僅用24周聯(lián)合療法的反應率3倍以上。
對研究1+2中所有病人的合并結(jié)果的功效的結(jié)論聯(lián)合療法明顯比用于最初慢性丙型肝炎治療的INTRONA單一療法有效。在這些用48周聯(lián)合療法治療的首次接受抗病毒療法的病人中持續(xù)的病毒學反應率比48周Intron A單一療法幾乎高3倍并且48周聯(lián)合療法顯著高于24周聯(lián)合療法。兩種治療作用可以導致持續(xù)反應率的改善在治療結(jié)束時的較高反應率和降低的復發(fā)率。這些作用的基本結(jié)果是使用48周聯(lián)合療法比48周單一療法或使用聯(lián)合療法的較短期限的治療方案有最高的持續(xù)反應率。這種使用48周聯(lián)合療法對功效的提高還涉及其它反應的測定值諸如生化(ALT)和組織終點。
實際上，血清HCV-RNA的持續(xù)損失與其它臨床終點-ALT正?；透闻K炎癥的改善或消除非常相關(guān)。在隨訪結(jié)束時可檢測到的HCV-RNA的損失與所有治療組中ALT的正?；嘘P(guān)，而使用聯(lián)合療法使這種損失在某種程度上較高。大多數(shù)ALT正常的使用聯(lián)合療法的病人的HCV-RNA也為陰性(83-87％)。
延長療法的期限對復發(fā)率有最大的影響。在隨訪結(jié)束時，48周聯(lián)合療法和單一療法治療組的復發(fā)率均低于24周聯(lián)合療法治療組的復發(fā)率。與48周Intron A單一療法相比，由24和48周聯(lián)合療法產(chǎn)生的最佳治療反應與下降的復發(fā)率的結(jié)合產(chǎn)生最高的持續(xù)反應率。使用48周聯(lián)合療法的持續(xù)反應率比使用Intron A單一療法的持續(xù)反應率高兩倍(p＜0.001)。使用48周聯(lián)合療法的持續(xù)病毒學反應率也高于僅使用24周聯(lián)合療法的持續(xù)病毒學反應率高(p=0.008)。
維持聯(lián)合療法的益處而不考慮復發(fā)病人中對INTRONA單一療法和24周聯(lián)合療法反應的標準預測值。在進入這些試驗時，通過下列疾病特征來對病人分類HCV基因型(1型或其它基因型)；HCV病毒濃度的范圍(在血清中病毒拷貝數(shù)≤2百萬/mL或＞2百萬/mL)；和肝硬化(存在或不存在)。對持續(xù)病毒學反應的邏輯回歸分析表明包括治療組在內(nèi)，僅HCV基因型是持續(xù)病毒學反應的顯著預測者。看起來治療前HCV病毒濃度和肝硬化的存在均不會影響預先未治療病人實現(xiàn)對聯(lián)合療法的持續(xù)病毒學反應的能力。
由于使用了48周聯(lián)合療法，所有持續(xù)反應率始終高于48周Intron A單一療法的持續(xù)反應率而與基因型無關(guān)并且一般高于24周聯(lián)合療法的持續(xù)反應率。作為一組感染了基因型1的病人，已經(jīng)證實它們對INTRONA單一療法的反應低于感染了(wit)其它基因型的病人。盡管如此，使用48周聯(lián)合療法的基因型1的持續(xù)病毒學反應率仍然高于48周Intron A單一療法約3倍且使用48周聯(lián)合療法幾乎比24周聯(lián)合療法高2倍。聯(lián)合療法始終在感染了其它基因型的病人中產(chǎn)生較高的持續(xù)病毒學反應率。使用24和48周聯(lián)合療法的反應率高于使用48周Intron A單一療法的反應率并且在除2型和3型外的所有基因型中在第24周時以及在48周聯(lián)合療法后基因型具有相同的反應率即64％，將聯(lián)合療法的期限延長至48周可增加具有持續(xù)病毒學反應的病人的比例。(參見表15)聯(lián)合療法在產(chǎn)生持續(xù)病毒學反應方面也比48周Intron A單一療法有效而與基線病毒濃度無關(guān)。48周聯(lián)合療法始終在各病毒感染濃度產(chǎn)生高于48周Intron A單一療法的持續(xù)病毒學反應率。對于24周和48周聯(lián)合療法治療組中的大多數(shù)病毒濃度來說，除最高病毒濃度(5-＜6和≥6×106拷貝/mL)外，持續(xù)反應率是類似的，其中使用48周聯(lián)合療法組的持續(xù)反應率大約高于24周聯(lián)合療法組2倍。
如上所述，具有非1型基因型的病人具有高于具有1型病人的持續(xù)病毒學反應率且病毒濃度≤2百萬/mL與比＞2百萬/mL具有更好的反應率相關(guān)。注意將聯(lián)合療法的治療期限延長至48周可改善預計具有最低反應率病人即那些具有基因型1和＞2百萬拷貝的HCV-RNA/mL的病人的持續(xù)反應率。在該組病人中將聯(lián)合療法延長至48周可產(chǎn)生4倍于僅用24周聯(lián)合療法產(chǎn)生的持續(xù)病毒學反應率。
其它人數(shù)統(tǒng)計/病史特征對使用聯(lián)合療法的結(jié)果幾乎沒有影響。相反，注意到在大于55歲、＞75kg或通過輸液感染的病人中使用48周Intron A單一療法的持續(xù)反應率相當?shù)汀Ｋ胁∪说某掷m(xù)反應率在10-12％的范圍。
在慢性丙型肝炎病人中成對活檢組織的可利用性高于相似類型的研究。正如所預計的，對于一定比例的各種原因的病人來說，治療前和/或治療后肝臟活檢組織是不能利用的。然而，成對活檢組織獲自71％的病人。注意到在隨訪結(jié)束時48周聯(lián)合療法病人情況得到改善的比例顯著高于48周Intron A單一療法(p＜0.001)。24周聯(lián)合療法也明顯比48周Intron A單一療法在改善肝臟炎癥方面更為有效。如上所述，維持與病毒學反應的相關(guān)性，無論是通過改善情況還是根據(jù)來自炎癥死亡評分的平均改變值來評估活檢組織；64-69％的病人在肝臟炎癥方面得到了改善，來自基線的平均改變值為-3.8-5.0。最主要的平均改變值出現(xiàn)在48周Intron A單一療法病人中。
正如所預計的，在所有治療組中持續(xù)的病毒學反應者在肝臟活檢組織炎癥評分方面均比HCV-RNA仍然呈陽性的病人經(jīng)歷了較大的改善，而盡管在所有組中改善程度是類似的，但是使用24周和48周聯(lián)合療法的具有組織學改善的病毒學反應者比例至少高于48周IntronA單一療法2倍。延長聯(lián)合療法的期限可導致在肝臟炎癥方面有較高的平均改善。此外，令人感興趣的是注意到從48周聯(lián)合療法中的復發(fā)的病人具有顯著的炎癥平均改善。將合并的結(jié)果概括在表15-20中。
表15．研究1和2的合并的病毒學反應功效在治療結(jié)束時(EOT)可檢測到的HCV-RNA的損失和在隨訪結(jié)束時的持續(xù)病毒學反應以及病人反應的百分比
1病人特征(a)66％男性；34％女性；(b)平均年齡42.7歲；(c)治療前平均HCV-RNA濃度＜2百萬拷貝/ml:34％，而＞2百萬拷貝/ml:66％；Super Quant,NGI；(d)HCV基因型1=66％；基因型2=13％，非基因型1-3=3％。
2EOT是治療結(jié)束B對D的P值=＜0.001；A對D的P值=＜0.001。
EOFU是隨訪結(jié)束-治療后24周；A對B的P值=0.257；B對D的P值=＜0.001；A對D的P值=＜0.001。
3隨訪結(jié)束時的持續(xù)病毒學反應；A對B的P值=0.008。
4在24周結(jié)束時HCV基因型2和3的持續(xù)病毒學反約為64.5％；而在48周結(jié)束時約為65％。
表16．所有HCV-基因型1病人的持續(xù)病毒學反應的百分比Intron A+利巴韋林 Intron A+安慰劑病人 24周 48周 24周 48周
用聯(lián)合療法治療24周和48周的所有HCV基因型1病人的持續(xù)病毒學反應具有優(yōu)于用INTRON A+安慰劑治療24周和48周的所有HCV基因型1病人的統(tǒng)計顯著性。具有基線HCV病毒負載量大于2百萬拷貝/mL的HCV-基因型1病人在用聯(lián)合療法24周和48周時的持續(xù)病毒學反應在統(tǒng)計學上顯著優(yōu)于INTRON A+安慰劑的24周和48周的治療。
表17．由研究1&2的HCV基因型和基線HCV-RNA濃度導致的持續(xù)病毒學反應Intron A+利巴韋林 Intron A+安慰劑病人24周48周 24周48周HCV基因型1且基線HCV-32％33％ 4％ 25％RNA濃度≤2百萬拷貝/mLHCV基因型1且基線HCV-11％27％ 1％ 4％RNA濃度＞2百萬拷貝/mL其它HCV基因型且基線 61％64％ 25％36％HCV-RNA濃度＞2百萬其它HCV基因型且基線 62％61％ 11％10％HCV-RNA濃度＞2百萬拷貝1HCV-基因型4/5/6導致3％病人對I+R產(chǎn)生持續(xù)反應24％(24周)和38％(48周)和對I+P產(chǎn)生持續(xù)反應0％(24周)和11％(48周)；HCV-基因型2+3的持續(xù)反應率與上述相同。
表18．由所有病人(研究1&2)的基線HCV-RNA濃度導致的持續(xù)病毒學反應病人Intron A+利巴韋林Intron A+安慰劑24周 48周 24周 48周帶有基線HCV-RNA濃度≤2 44％ 46％ 9％ 36％百萬拷貝/mL的病人帶有基線HCV-RNA濃度＞2 27％ 38％ 4％ 10％百萬拷貝/mL的病人表19．研究1&2的截止到第一次沒有可檢測到的HCV-RNA時的持續(xù)病毒學反應者的百分比Intron A+利巴韋林 Intron A+安慰劑第一次沒有24周 48周 24周 48周可檢測到的HCV-RNA的時間(周)483％(92/111) 82％(94/115) 48％(10/21) 71％(47/66)1244％(66/149) 66％(91/137) 9％(3/32) 35％(29/84)2419％(8/42) 44％(20/45) 0％(O/22) 15％(6/39)
表20．ALT反應在來自研究1&2的所有病人中血清ALT的正?；疘NTRON A+ INTRONA+利巴韋林 安慰劑治療A B C D B對D A對D結(jié)束時 24周48周24周 48周 的pa值 的pa值(N=505) (N=505) (N=231)(N=503)研究1&2b66％(329) 66％(334) 24％(56) 37％(185) ＜0.001 0.7391 58％(133) 61％(138) 24％(56) 28％(62)＜0.001＜0.0012 71％(196) 71％(196) - 44％(123) ＜0.001＜0.001隨訪結(jié)束研究1+2b36％(181) 44％(221) 11％(25) 24％(102) ＜0.001＜0.0011 32％(72)36％(83)11％(25) 16％(35)＜0.001＜0.0012 39％(109) 50％(138) -24％(67)＜0.001＜0.001a合并結(jié)果的Cochran-Mantet Haenszel一般關(guān)系；各研究的費希爾精確試驗。
b合并的結(jié)果。
可以對本發(fā)明作許多改變和變化而不會脫離本發(fā)明的實質(zhì)和范圍，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。本文所述的特定實施方案僅通過實施例來提供，且本發(fā)明僅通過所附的權(quán)利要求以及與所要求的這類權(quán)利要求相同技術(shù)方案的全部范圍來限定。
權(quán)利要求
1．利巴韋林在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素20-50周的時間期限；且其中首次接受抗病毒治療的患者具有HCV基因型2或3感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)20-30周的時間期限優(yōu)選24周；且其中首次接受抗病毒治療的患者具有HCV基因型1感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限。
2．α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的α干擾素和有效量的利巴韋林20-50周的時間期限；且其中首次接受抗病毒治療的患者具有HCV基因型1感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限；且其中首次接受抗病毒治療的患者具有HCV基因型2或3感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
3．利巴韋林和α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素20-50周的時間期限；且其中首次接受抗病毒治療的患者具有HCV基因型1感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限；且其中首次接受抗病毒治療的患者具有HCV基因型2或3感染，利巴韋林和α干擾素的聯(lián)合給藥持續(xù)20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
4．上述權(quán)利要求中任意一項所述的用途，其中首次接受抗病毒療法的患者帶有HCV基因型1感染且經(jīng)HCV-RNA定量PCR檢測病毒負載量大于2百萬拷貝/ml。
5．權(quán)利要求1、2或3中任意一項的用途，其中所述病人具有HCV基因型1感染且經(jīng)HCV-RNA定量PCR測定的病毒負載量大于2百萬拷貝/ml的HCV-1RNA；且其中的給藥持續(xù)40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限。
6．利巴韋林和α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎基因型1感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限。
7．利巴韋林和α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎基因型2或3感染患者以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素20-30周、優(yōu)選為24周的時間期限。
8．利巴韋林和α干擾素在制備用于通過下列方法治療首次接受抗病毒療法的患有慢性丙型肝炎基因型1感染且經(jīng)HCV-RNA定量PCR測定的病毒負載量大于2百萬拷貝/ml的HCV-1 RNA的病人以便根除可檢測到的HCV-RNA的藥物組合物中的用途，所述方法包括聯(lián)合給予有效量的利巴韋林和有效量的α干擾素40-50周、優(yōu)選為48周的時間期限。
9．上述權(quán)利要求中任意一項所述的用途，其中利巴韋林的給藥量為800-1200mg/天。
10．權(quán)利要求1-9中任意一項所述的用途，其中所給予的α干擾素選自干擾素α-2a、干擾素α-2b、共有干擾素、純化的α干擾素產(chǎn)物、聚乙二醇化的干擾素α-2a或聚乙二醇化的干擾素α-2b。
11．權(quán)利要求1-9中任意一項所述的用途，其中所用的α-干擾素是干擾素α-2b且α干擾素的給藥量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為2百萬-1千萬IU/周。
12．權(quán)利要求1-9中任意一項所述的用途，其中α-干擾素是干擾素α-2a且α干擾素的給藥量以每周、TIW、QOD或每日為基礎(chǔ)為2百萬-1千萬IU/周。
全文摘要
本發(fā)明公開了利巴韋林和α干擾素在制備用于治療首次接受抗病毒療法的慢性丙型肝炎感染患者以便根除可檢測到的HCV－RNA的藥物組合物中的用途,所述的治療方法包括使用治療有效量的利巴韋林和治療有效量的α干擾素治療20－50周的時間期限的聯(lián)合療法。
文檔編號A61K31/70GK1309568SQ99808596
公開日2001年8月22日 申請日期1999年5月13日 優(yōu)先權(quán)日1998年5月15日
發(fā)明者J·K·奧爾布雷克特 申請人:先靈公司