專利名稱：一種獼猴桃根提取物藥物制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種獼猴桃根的有效部位提取物及其藥物制劑，該藥物具有扶持正氣、增強免疫功能；祛疫癘、增強機體抗感染的能力和消腫散結(jié)、抑制腫瘤的作用，本發(fā)明還涉及獼猴桃根有效部位提取物及其藥物制劑的制備方法。
獼猴桃根(Radix Actinidia Chinensis)，又名藤梨根，性涼，無毒，作為中藥材已收入我國藥典(1977年版)。我國是中華獼猴桃的原產(chǎn)地，對其利用歷史悠久。早在二千多年前的《爾雅》一書中即有記載，而后的《本草拾遺》、《開寶本草》、《本草綱目》、《植物名圖實考》等歷代醫(yī)藥名著對其均有記載。其果實多汁，中醫(yī)認為具有調(diào)中理氣、生津潤燥、解熱除煩功能，其根具有清熱解毒、活血散結(jié)、祛風利濕、殺蟲等功效、主治熱壅反胃、瘡癤瘰癘、淋濁帶下、肝炎腫瘤等。
近年來對狗棗獼猴桃根的化學成分分析、藥理實驗等已有文獻報道，例如，李淑華等報道了從狗棗獼猴桃的根中提取的寡糖(簡稱AKOS)對小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用結(jié)果表明AKOS是一種有效的免疫調(diào)節(jié)劑，對于增強機體的免疫功能具有一定的意義[白求恩醫(yī)科大學學報，1990，16(4)，第350頁]；李平亞等從長白山產(chǎn)狗棗獼猴桃根中，分離得到兩個白色單體，經(jīng)光譜分析和化學方法鑒定為狗棗三糖。對中華獼猴桃的藥理階段性研究，本發(fā)明人已作了部分報道，但到目前為止，尚未見關(guān)于將中華獼猴桃根有效部位制成制劑，并通過體內(nèi)外實驗對其藥理與臨床進行系統(tǒng)研究的文獻報道。盡管對獼猴桃的研究已經(jīng)報道很多，但是，由于獼猴桃種類繁多，而且其根部所含有效成分復雜，所具有的藥理作用也各不相同，因此，對獼猴桃的有效部位提取和制劑研究，以及進一步的藥理和臨床研究是當前的重要研究課題。特別是對于中藥的提取和分離，一方面要考慮其有效成分的純度和結(jié)構(gòu)，另一方面還要考慮提取物的有效性，通常這兩者很難達到統(tǒng)一，在這種情況下，從獼猴桃根中提取有效部位而制備一種療效廣泛而又效果良好的藥物制劑，是當前這一領(lǐng)域需要解決的一個技術(shù)難題。
本發(fā)明目的是從中華獼猴桃的根部提取一種有效部位，制成藥物制劑。所述的藥物制劑具有扶持正氣、增強免疫功能；祛疫癘、增強機體抗感染的能力和消腫散結(jié)、抑制腫瘤的作用。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種從中華獼猴桃的根中提取具有所述特定藥用作用的有效部位的方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種以中華獼猴桃根部有效部位制備藥物的方法。
本發(fā)明所述的藥物制劑含有治療有效量的中華獼猴桃根部多糖總提取物，優(yōu)選含有10-80％重量比的中華獼猴桃根部多糖總提取物。
本發(fā)明所述的藥物制劑含有治療有效量的以下述方法從中華獼猴桃根部提取的有效部位取獼猴桃根片，加2-8倍量20-50％的乙醇浸漬1-3次，每次18-30小時，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為60-95％，靜置，離心，沉淀物并用2-7倍量50-80％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加2-4倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。
本發(fā)明所述的藥物制劑優(yōu)選含有20-70％重量比的以下述方法從中華獼猴桃根部提取的有效部位取獼猴桃根片，加3-6倍量25-40％的乙醇浸漬1-3次，每次20-28小時，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為65-80％靜置，離心，沉淀物并用3-6倍量60-78％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加2-4倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。
本發(fā)明所述的藥物制劑優(yōu)選含有30-65％重量比的以下述方法從中華獼猴桃根部提取的有效部位取獼猴桃根片，洗凈，加5倍量30％的乙醇浸漬2次，每次24小時，靜置，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為72％，靜置24小時，離心，沉淀物并用5倍量72％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。
本發(fā)明藥物制劑最佳含有40-60％重量比的上述中華獼猴桃根部有效部位。
本發(fā)明藥物除了含有所述的中華獼猴桃根部有效部位之外，還含有常規(guī)的藥物賦性劑，例如，溶劑，填充劑，粘合劑，崩解劑，增溶劑，增稠劑，矯味劑，防腐劑，濕潤劑，潤滑劑等。
本發(fā)明所說的藥物制劑，根據(jù)常規(guī)的制劑工藝，可以制成任何能夠在臨床上使用的藥物劑型，如，片劑，膏劑，口服液，注射劑，混懸劑，丸劑，散劑，滴眼液，眼藥膏，擦劑，透皮吸收劑，貼劑，膠囊劑，顆粒劑，栓劑等。
本發(fā)明藥物滴眼液的制備方法如下取獼猴桃根片，洗凈，加5倍量30％的乙醇浸漬2次，每次24小時，靜置，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為72％，靜置24小時，離心，沉淀物并用5倍量72％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。粗粉加注射用水溶解，離心，取上清液，經(jīng)微孔濾膜分級過濾，取0.45μ濾膜下的濾液，加入0.03％的尼泊金乙酯與適量氯化鈉，加注射用水調(diào)至每毫升含多糖為1毫克的溶液，濾過，無菌罐封，即得。
上述制法中，粗粉加注射用水溶解后，優(yōu)選先用乳化機10000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，以25000轉(zhuǎn)/分鐘離心1小時，傾取上清液，沉淀再加注射用水適量，再離心1小時，取上清液與前次上清液合并，然后，再經(jīng)微孔濾膜分級過濾，取0.45μ濾膜下的濾液，加入0.03％的尼泊金乙酯與適量氯化鈉，加注射用水調(diào)至每毫升含多糖為1毫克的溶液，濾過，無菌罐封，即得。
上述制法中，氯化鈉的加入量以成品達到等滲壓所需的量為準。
上述藥物的藥效作用主要依賴于從中華獼猴桃根部所提取的有效部位，由于獼猴桃根部含有多種有效成分，篩選一種合理的提取方法，從中獲得具有所需藥效作用的有效部位，是本發(fā)明的一項重要內(nèi)容。本發(fā)明所述的中華獼猴桃根部有效部位的提取方法如下取獼猴桃根片，加2-8倍量20-50％的乙醇浸漬1-3次，每次18-30小時，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為60-95％，靜置，離心，沉淀物并用2-7倍量50-80％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加2-4倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。
本發(fā)明所述的中華獼猴桃根部有效部位的優(yōu)選提取方法是
取獼猴桃根片，洗凈，加5倍量30％的乙醇浸漬2次，每次24小時，靜置，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為72％，靜置24小時，離心，沉淀物并用5倍量72％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。
本發(fā)明方法所制備的藥物具有廣泛的藥理作用，其主要藥效學實驗作用如下一、扶持正氣，增強免疫功能1、促進小鼠脾、胸腺細胞的DNA合成。
2、對人T細胞及其亞群的影響本發(fā)明的中華獼猴桃根部有效部位可刺激人的T淋巴細胞，對提高乙肝患者的外血T4細胞數(shù)有一定作用。
3、誘生白介素2(IL-2)本發(fā)明的中華獼猴桃根部有效部位可使脾細胞培養(yǎng)上清液中IL-2活性較對照組明顯提高。
4、誘導Mφ產(chǎn)生白介素1(IL-1)實驗結(jié)果表明，本發(fā)明的中華獼猴桃根部有效部位可明顯的促進小鼠Mφ釋放IL-1。
5、對天然殺傷(NK)細胞的作用實驗表明本發(fā)明的中華獼猴桃根部有效部位能激活NK細胞的活性。
6、對遲發(fā)超敏(DTH)反應(yīng)的影響實驗表明本發(fā)明藥物能有效地恢復被環(huán)磷酰胺抑制了的遲發(fā)超敏(DTH)反應(yīng)。
7、對特異花結(jié)形成細胞及抗體形成細胞的影響實驗表明本發(fā)明藥物能明顯增加特異花結(jié)形成細胞(SRFC)數(shù)，但對抗體形成細胞(PFC)無任何影響。
二、祛疫癘、增強機體抗感染的能力本發(fā)明藥物體外實驗對單純皰疹病毒等五種病毒的11個毒株(包括DNA病毒和RNA病毒)均有抑制作用。對水泡性口炎病毒及脊髓灰質(zhì)炎病毒則無效。體內(nèi)對單皰、流感病毒感染的致死有明顯保護作用，并能誘生干擾素。對家兔實驗性單皰病毒角膜炎的療效優(yōu)于西藥皰疹凈。因此，本發(fā)明藥物也是一種抗病毒中藥制劑，對致病菌感染的致死亦有明顯保護作用。
三、消腫散結(jié)、抑制腫瘤本發(fā)明藥物體內(nèi)給藥對小鼠移植瘤EAC、Heps、P388有抑制作用。
本發(fā)明藥物的臨床研究結(jié)果如下1、本發(fā)明藥物對正常志愿者40人眼的I期實驗，表明本發(fā)明藥物對人眼無刺激性。對46例人眼的單皰病毒性角膜炎的II期初步療效觀察表明，本發(fā)明藥物優(yōu)于西藥皰疹凈，可縮短治愈期，提高治愈率。
2、本發(fā)明藥物對89例艾滋病患者的治療結(jié)果顯示，長期(三個月)肌注，除少數(shù)病例一過性發(fā)熱和局部疼痛外，無明顯毒副反應(yīng)。本發(fā)明藥物單獨或與中藥合用，取得了改善癥狀和調(diào)整細胞免疫功能療效的作用，少數(shù)病例出現(xiàn)HIV血清抗體陰轉(zhuǎn)。
3、本發(fā)明藥物對9例乙肝患者的初步治療結(jié)果顯示，對調(diào)整細胞免疫功能、改善肝功能和癥狀有一定作用。
實施例1提取中華獼猴桃根部的有效部位取獼猴桃根片1000克，洗凈，加5倍量30％的乙醇浸漬2次，每次24小時，靜置，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為72％，靜置24小時，離心，沉淀物并用5倍量72％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉100克。
實施例2制備本發(fā)明藥物滴眼液取實施例1制備的粗粉，加注射用水溶解，先用乳化機10000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，以25000轉(zhuǎn)/分鐘離心1小時，傾取上清液，沉淀再加注射用水適量再離心1小時，取上清液與前次上清液合并，然后，再經(jīng)微孔濾膜分級過濾，取0.45μ濾膜下的濾液，加入0.03％的尼泊金乙酯與適量氯化鈉(氯化鈉的加入量為成品達到等滲壓所需的量)，加注射用水調(diào)至每毫升含多糖為1毫克的溶液，濾過，無菌罐封，即得。
實施例3本發(fā)明藥物膠囊劑的制備取獼猴桃根片1000克，洗凈，加5倍量30％的乙醇浸漬2次，每次24小時，靜置，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為72％，靜置24小時，離心，沉淀物并用5倍量72％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎，過100目篩，得粉100克，將所得藥粉與淀粉以1∶1比例混合均勻，裝膠囊，每克含藥1克。
實施例4本發(fā)明藥物注射劑的制備取實施例1制備的粗粉500克，加注射用水溶解，先用乳化機10000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，以25000轉(zhuǎn)/分鐘離心1小時，傾取上清液，沉淀再加注射用水適量再離心1小時，取上清液與前次上清液合并，然后，再經(jīng)微孔濾膜分級過濾，取0.45μ濾膜下的濾液，加入0.03％的尼泊金乙酯與適量氯化鈉(氯化鈉的加入量為成品達到等滲壓所需的量)，加注射用水調(diào)至每毫升含多糖為1毫克的溶液，濾過，無菌罐封，即得。
實施例5本發(fā)明藥物片劑的制備取實施例1制備的粗粉1000克，加入賦性劑淀粉，混合均勻，以乙醇造粒，整粒，如壓片機壓片，制得片劑。
權(quán)利要求
1.一種以中華獼猴桃根制備的藥物，其特征在于該藥物含有治療有效量的中華獼猴桃根多糖總提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其特征在于它含有10-80％重量比的中華獼猴桃根多糖總提取物。
3.一種以中華獼猴桃根制備的藥物，其特征在于該藥物含有治療有效量的以下述方法從中華獼猴桃根部提取的有效部位取獼猴桃根片，加2-8倍量20-50％的乙醇浸漬1-3次，每次18-30小時，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為60-95％，靜置，離心，沉淀物并用2-7倍量50-80％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加2-4倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于它含有20-70％重量比的以下述方法從中華獼猴桃根部提取的有效部位取獼猴桃根片，加3-6倍量25-40％的乙醇浸漬1-3次，每次20-28小時，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為65-80％靜置，離心，沉淀物并用3-6倍量60-78％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加2-4倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于它含有30-65％重量比的以下述方法從中華獼猴桃根部提取的有效部位取獼猴桃根片，洗凈，加5倍量30％的乙醇浸漬2次，每次24小時，靜置，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為72％，靜置24小時，離心，沉淀物并用5倍量72％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于它含有40-60％重量比的所述中華獼猴桃根的有效部位。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于它還含有常規(guī)的藥物賦性劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于該藥物的劑型是任何能夠在臨床上使用的藥物劑型。
9.一種滴眼液的制備方法，其特征在于該方法的工藝步驟是取獼猴桃根片，洗凈，加5倍量30％的乙醇浸漬2次，每次24小時，靜置，取上清液，合并，加乙醇調(diào)至含乙醇量為72％，靜置24小時，離心，沉淀物并用5倍量72％的乙醇、無水乙醇各洗一次，棄去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗滌一次，棄去乙醚液，沉淀物室溫減壓干燥，研碎得粉，粗粉加注射用水溶解，離心，取上清液，經(jīng)微孔濾膜分級過濾，取0.45μ濾膜下的濾液，加入0.03％的尼泊金乙酯與適量氯化鈉，加注射用水調(diào)至每毫升含多糖為1毫克的溶液，濾過，無菌罐封，即得。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的滴眼液，其特征在于所述方法中，粗粉加注射用水溶解后，先用乳化機10000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，以25000轉(zhuǎn)/分鐘離心1小時，傾取上清液，沉淀再加注射用水適量，再離心1小時，取上清液與前次上清液合并，然后，再經(jīng)微孔濾膜分級過濾，取0.45μ濾膜下的濾液，加入0.03％的尼泊金乙酯和使成品達到等滲壓所需量的氯化鈉，加注射用水調(diào)至每毫升含多糖為1毫克的溶液，濾過，無菌罐封，即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種獼猴桃根的有效部位提取物及其藥物制劑，該藥物具有扶持正氣、增強免疫功能；祛疫癘、增強機體抗感染的能力和消腫散結(jié)、抑制腫瘤的作用，本發(fā)明還涉及獼猴桃根有效部位提取物的提取方法以及該藥物制劑的制備方法。
文檔編號A61P31/12GK1156624SQ96120260
公開日1997年8月13日 申請日期1996年10月30日 優(yōu)先權(quán)日1996年10月30日
發(fā)明者張菊明, 林佩芳, 梁炳圻, 洪行球, 陳良良 申請人:浙江中醫(yī)學院