本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體的說，本發(fā)明涉及一種治療心肌缺血再灌注損傷的藥物組合物以及化合物在制備治療心肌缺血再灌注損傷的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
：再灌注治療能快速打開堵塞血管、恢復(fù)冠脈血供，是治療冠心病急性心肌梗死的重要手段。但再灌注治療只是一種局部治療，并不能終止冠心病的病理發(fā)展進程，加之治療后出現(xiàn)的一系列心肌缺血再灌注損傷(miri)，嚴重制約了冠心病的治療效果。有研究證實，急性心肌梗死患者即使接受最佳的再灌注治療，仍有10％～30％出現(xiàn)miri，miri被認為是導致心梗后心力衰竭發(fā)生率高達25％及年死亡率達10％的主要原因，因此防治miri是臨床急需解決的問題。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種治療心肌缺血再灌注損傷的藥物組合物。為了實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供一種治療心肌缺血再灌注損傷的藥物組合物，所述藥物組合物含有具有下列結(jié)構(gòu)的化合物：優(yōu)選地，r1可以任意選自：直鏈或支鏈(c1-c12)烷基、環(huán)(c3-c6)烷基、烷氧基、氫、羥基、鹵素等。優(yōu)選地，r2可以任意選自：直鏈或支鏈(c1-c6)烷基、直鏈或支鏈(c2-c6)烯基、直鏈或支鏈(c2-c6)炔基、(c3-c7)環(huán)烷基、(c3-c7)環(huán)烯基、苯基等。更優(yōu)選地，r1獨立地表示br。更優(yōu)選地，r2獨立地表示苯環(huán)。本發(fā)明還提供化合物在制備治療心肌缺血再灌注損傷的藥物中的用途，所述化合物其結(jié)構(gòu)為：優(yōu)選地，r1可以任意選自：直鏈或支鏈(c1-c12)烷基、環(huán)(c3-c6)烷基、烷氧基、氫、羥基、鹵素等。優(yōu)選地，r2可以任意選自：直鏈或支鏈(c1-c6)烷基、直鏈或支鏈(c2-c6)烯基、直鏈或支鏈(c2-c6)炔基、(c3-c7)環(huán)烷基、(c3-c7)環(huán)烯基、苯基等。更優(yōu)選地，r1獨立地表示br。更優(yōu)選地，r2獨立地表示苯環(huán)。本發(fā)明藥物組合物在miri早期可以保護內(nèi)皮細胞功能、抑制氧化及炎癥浸潤，在miri晚期可能通過抑制細胞凋亡，縮小心肌梗死面積，改善心功能來實現(xiàn)對心臟的保護作用。附圖說明圖1是對大鼠心臟心肌梗死的影響(伊文思藍-ttc雙染)。圖2是各組心肌細胞凋亡情況(tunel，×200)。圖3是各組caspase-3、bax及bcl-2的蛋白表達情況。圖4是各組caspase-3、bax及bcl-2蛋白電泳結(jié)果。a.假手術(shù)組；b.模型組；c.本發(fā)明藥物組。具體實施方式下面通過實施例來具體說明本發(fā)明藥物的效果。實驗例1本發(fā)明藥物的表征lc-ms:m/z(esi):481(m+h)+。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.57(d,j＝4.0hz,1h),7.69(m,1h),7.57(m,1h),7.39-7.41(m,4h),7.25-7.28(m,2h),7.13(m,2h),4.30(dd,j＝8.0,12hz,2h),2.47(m,1h),1.20(m,2h),0.91(m,2h)。實驗例2本發(fā)明藥物治療心肌缺血再灌注損傷的效果分組及給藥大鼠按體重隨機分為假手術(shù)組、模型組、本發(fā)明藥物組，每組20只，預(yù)防性給藥7d，然后進行造模手術(shù)。其中假手術(shù)組及模型組均以0.5重量％的羧甲基纖維素鈉水溶液灌胃1ml，本發(fā)明藥物組灌胃實施例1藥物1mg/kg。模型建立以10％水合氯醛腹腔注射麻醉，經(jīng)口腔行氣管插管，連接小動物呼吸機，呼吸頻率約70次/min，潮氣量7～8ml，呼吸比1：3，連接多通道生理信號采集系統(tǒng)，描記術(shù)前ⅱ導聯(lián)心電圖。于左側(cè)第3或第3肋間切口，鈍性分離皮下組織及肌肉，打開心包膜，在左心耳下緣距肺動脈弓根部2mm處結(jié)扎(3/8圓針)，進針深度約1mm，寬度約2mm，在冠脈前降支面置硅膠管連同冠脈用4號醫(yī)用縫合線一起結(jié)扎。50min后，剪去結(jié)扎線，連同硅膠管一同取出，進行再灌注。假手術(shù)組只在相應(yīng)部位穿線不結(jié)扎。關(guān)閉胸腔，逐層縫合肌肉、皮膚，術(shù)后腹腔注射青霉素10萬單位預(yù)防感染。結(jié)扎成功標志：結(jié)扎下方心肌顏色變灰白，同時心電圖st段進行性抬高甚至弓背向上(較正常至少抬高2mm)。復(fù)灌成功標志：心臟顏色由灰白逐漸恢復(fù)正常，或30min內(nèi)心電圖st下降至少50％。造模前心率<350次/min者，未到規(guī)定時間死亡者及造模不成功者予以剔除。標本采集及指標檢測再灌注2h心肌酶、內(nèi)皮功能檢測每組取造模成功大鼠5只，采集血清，以全自動生化分析儀檢測乳酸脫氫酶(ldh)及肌酸激酶同工酶(ck-mb)，以放射免疫法檢測血清內(nèi)皮素(et-1)，紫外分光光度計檢測血清no水平，紫外分光光度計檢測心肌丙二醛(mda)、髓過氧化物酶(mpo)水平。心肌梗死面積測定每組另取造模成功未取血大鼠5只于再灌注48h時處死，術(shù)前與取材前b超檢測心臟射血分數(shù)，從大鼠左肺靜脈注射0.5％依文思藍約1.5ml，待大鼠口唇爪甲變藍后摘取心臟，以冰鹽水沖洗，擦干，置于-20℃凍存20min后，沿結(jié)扎線以下切成等厚的4～5片，放入1％ttc溶液中，37℃孵育15～20min，流水沖洗。非缺血區(qū)呈藍色，缺血未梗死區(qū)呈磚紅色，缺血區(qū)(aar)為灰白區(qū)與磚紅色區(qū)域之和，梗死區(qū)(an)呈灰白色，放置于10％甲醛中室溫固定24h。然后用l2035awpioneer數(shù)碼照相機進行圖像采集，以version6.0mediacyberneticsimage-proplus圖像分析軟件分別計算出梗死區(qū)、占缺血區(qū)面積的比例，缺血區(qū)占左室面積的比例。westernblot法檢測心肌天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-3)、b細胞淋巴瘤-2(bcl-2)、bcl-2相關(guān)x蛋白(bax)蛋白表達。每組取5只大鼠分別檢測心肌caspase-3、bax及bcl-2蛋白表達。根據(jù)試劑說明書提取蛋白，bca法檢測組織蛋白濃度，調(diào)整蛋白濃度，上樣，根據(jù)蛋白目的分子量設(shè)定電泳條件，轉(zhuǎn)膜，封閉，經(jīng)一抗(1：1000)，二抗孵育，顯色曝光，將顯色后的圖片掃描后，使用gelimagesystemver.4.00軟件(上海天能科技有限公司)對圖像進行灰度分析。以目的蛋白灰度值/β-actin灰度值表示目的蛋白相對表達量。tunel法檢測細胞凋亡每組取5只大鼠做心臟石蠟切片，脫水，蛋白酶k中孵育后避光條件下加稀釋液，tunel反應(yīng)液，37℃放置1h轉(zhuǎn)化pod，37℃烤箱中放置30min，取出沖洗后加dab，經(jīng)蘇木素復(fù)染，梯度酒精脫水，二甲苯溶液透明，封片。于光學顯微鏡下觀察，其中正常心肌細胞核呈藍色，凋亡細胞核呈現(xiàn)出深淺不一的棕褐色。每張切片于凋亡細胞分布相同區(qū)域隨機選取5個高倍視野，計算平均每個視野中的凋亡細胞數(shù)占總細胞數(shù)的百分比，即為凋亡指數(shù)。統(tǒng)計學處理采用spss17.0統(tǒng)計軟件。計量資料結(jié)果以表示，多組間比較采用單因素方差分析，p<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。本發(fā)明藥物對再灌注2h心肌酶的影響組別ldh/u·l-1ck-mb/mmol·l-1假手術(shù)1340.27±330.428055.25±3460.83模型4115.50±800.942)27903.16±8082.152)本發(fā)明藥物3200.00±720.402，3)19025.15±4652.302，3)注：與假于術(shù)比較2)p<0.01；與模型組比較3)p<0.01。與假手術(shù)比較，模型組及本發(fā)明藥物組ldh及ck-mb均顯著升高(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物組ldh及ck-mb均明顯降低(p<0.05)。本發(fā)明藥物對再灌注2h內(nèi)皮功能的影響與假手術(shù)比較，模型組血清et-1顯著上升(p<0.01)，no明顯下降(p<0.05)；與模型比較，本發(fā)明藥物組et-1明顯下降(p<0.05)，而no明顯上升(p<0.05)。見下表。組別et-1/ng·l-1no/μmol·l-1假手術(shù)39.00±4.308.17±1.65模型48.35±2.532)4.30±2.161)本發(fā)明藥物40.62±6.153)7.81±3.421，3)注：與假于術(shù)比較1)p<0.05，2)p<0.01；與模型組比較3)p<0.01。本發(fā)明藥物對再灌注2h心肌組織氧化損傷的影響與假手術(shù)組比較，模型組mda及mpo均顯著升高(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物組mda及mpo明顯降低(p<0.05)。見下表。組別mda/g·μmol-1mpo/u·g-1假手術(shù)1.58±0.200.94±0.05模型2.80±0.382)1.35±0.072)本發(fā)明藥物2.12±0.303)1.03±0.203)注：與假于術(shù)比較2)p<0.01；與模型組比較3)p<0.01。本發(fā)明藥物對再灌注48h心臟射血分數(shù)及心肌梗死面積的影響與假手術(shù)組比較，模型組及本發(fā)明藥物組大鼠ef值顯著下降(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物組大鼠ef值明顯上升(p<0.05)。假手術(shù)組無心肌梗死；與模型組比較，本發(fā)明藥物組心梗/缺血面積比率顯著下降(p<0.01)。見表4和圖1。組別ef缺血/左室面積心梗/缺血面積假手術(shù)92.09±6.8800模型69.00±12.602)52.55±10.9051.01±5.57本發(fā)明藥物78.43±9.922，3)47.75±11.5443.10±4.052)注：與假于術(shù)比較2)p<0.01；與模型組比較3)p<0.01。本發(fā)明藥物對再灌注48h心肌細胞調(diào)亡指數(shù)影響與假手術(shù)比較，各組心肌凋亡指數(shù)均有顯著升高(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物能顯著降低心肌凋亡指數(shù)(p<0.01)。見下表和圖2。組別凋亡指數(shù)/％假手術(shù)9.45±0.36模型49.63±0.352)本發(fā)明藥物27.36±0.712，4)注：與假于術(shù)比較2)p<0.01；與模型組比較4)p<0.01。本發(fā)明藥物對再灌注48h心肌caspase-3、bax及bcl-2的蛋白表達的影響與假手術(shù)比較，模型組及本發(fā)明藥物組caspase-3表達明顯升高(p<0.05)；與模型比較，本發(fā)明藥物組caspase-3表達顯著降低(p<0.01)。與假手術(shù)比較，模型組及本發(fā)明藥物組bax表達明顯升高(p<0.05)；與模型比較，本發(fā)明藥物組bax表達顯著降低(p<0.01)。與假手術(shù)比較，模型組及本發(fā)明藥物組bcl-2表達顯著降低(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物組bcl-2表達明顯升高(p<0.05)。見圖3、4。當前第1頁12