本申請涉及藥物制劑領域。具體而言，本發(fā)明涉及一種馬西替坦微球制劑及其制備方法。

背景技術：

肺動脈高壓指各種原因引起的肺動脈壓力持久增高，為罕見的慢性綜合病癥，表現(xiàn)為肺動脈縮小、破損及血壓過高。其病因復雜，診斷、治療棘手是該治療領域長期以來發(fā)展緩慢的主要原因。據(jù)估計，僅美國和歐洲就有13萬肺動脈高壓患者。在中國，由于人口基數(shù)較大，致病因素較多，肺動脈高壓的發(fā)病率被大大低估。如果患者在肺動脈高壓發(fā)作后的2年內沒有得到有效的治療，其存活率僅為40％-55％。

馬西替坦是actelion制藥公司研制的一種內皮素(endothelin，et)受體拮抗劑，可以抑制由內皮素引起的血管收縮，對eta受體、etb受體具有雙重抑制作用，可用于治療肺動脈高壓、肺纖維等疾病。馬西替坦分子式為c19h20br2n6o4s，化學名稱：n-[5-(4-溴苯基)-6-[2-[(5-溴-2-嘧啶基)氧]乙氧基]-4-嘧啶基]-n′-丙基磺酰胺，結構如式(i)所示：

現(xiàn)有馬西替坦片(商品名opsumit)，其規(guī)格為10mg/片，每天服用一次。臨床研究顯示，在用opsumit治療患者中觀察到最常見不良反應(比安慰劑更頻3％或以上)有貧血、鼻咽炎/咽炎、支氣管炎、頭痛、流感和泌尿道感染。作為內皮素受體拮抗劑，馬西替坦經口服給藥后還存在肝毒性、胚胎胎兒毒性等風險。

已經有研究表明，粒徑在7-30μm的微球在靜脈注射后，可以被 肺毛細血管床機械性濾取，從而具有肺靶向性。因此，為了降低馬西替坦片的副作用，需要開發(fā)一種制備馬西替坦微球的方法，使所得微球的平均粒徑在7-30μm的范圍內。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的發(fā)明人經過研究，提出一種制備馬西替坦微球制劑的方法。

本發(fā)明的制備馬西替坦微球制劑的方法，包括以下步驟：

(1)將聚合物載體材料和馬西替坦先后溶于油相溶劑，作為油相；以乳化劑的水溶液作為水相；

(2)在室溫下，將所述油相加入所述水相中并進行勻質化，形成o/w乳劑；

(3)將所述o/w乳劑加入至穩(wěn)定劑的水溶液中，攪拌，使油相溶劑完全揮發(fā)；

(4)離心分離微球，并用蒸餾水洗滌，干燥。

相應地，本發(fā)明還提供根據(jù)上述方法制備的馬西替坦微球制劑。

附圖說明

圖1是示出了實施例1的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖2是示出了實施例2的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖3是示出了實施例3的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖4是示出了實施例4的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖5是示出了實施例5的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖6是示出了實施例6的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖7是示出了實施例7的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖8是示出了實施例8的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖9是示出了實施例9的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖10是示出了實施例10的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖11是示出了實施例11的馬西替坦微球的粒徑分布圖。

圖12是示出了實施例2的馬西替坦微球制劑的體外釋放度隨時間變化的曲線。

具體實施方式

本發(fā)明提供一種制備馬西替坦微球制劑的方法，包括以下步驟：

(1)將聚合物載體材料和馬西替坦先后溶于油相溶劑，作為油相(分散相)；以乳化劑的水溶液作為水相(連續(xù)相)；

(2)在室溫下，將所述油相加入所述水相中并進行勻質化，形成o/w乳劑；

(3)將所述o/w乳劑加入至穩(wěn)定劑的水溶液中，攪拌，使油相溶劑完全揮發(fā)；

(4)離心分離微球，并用蒸餾水洗滌，干燥。

在本發(fā)明上下文中，所述聚合物載體材料指常用的可生物降解的聚合物材料，包括但不限于聚乳酸-羥基乙酸共聚物(plga)、聚乳酸(pla)、聚乙醇酸(pga)、聚己內酯(pcl)或聚三亞甲基碳酸酯(ptmc)，最優(yōu)選聚乳酸-羥基乙酸共聚物。

在本發(fā)明的上下文中，所述油相溶劑通常具有以下性質：(1)能溶解聚合物；(2)在連續(xù)相中的溶解度小；(3)具有高的蒸汽壓和低沸點；(4)毒性小。在本文中，所述油相溶劑一般指有機溶劑，包括但不限于二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯，或上述任意兩種溶劑的混合物，最優(yōu)選為二氯甲烷。

在本發(fā)明的上下文中，所述乳化劑選自聚乙烯醇(pva)、甘油硬脂酸酯、聚乙二醇油酸酯和吐溫-80，最優(yōu)選聚乙烯醇。

在本發(fā)明的上下文中，所述穩(wěn)定劑選自聚乙烯吡咯烷酮(pvp)或聚乙烯醇，優(yōu)選聚乙烯吡咯烷酮。

在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，其中在步驟(2)中，油相與水相的體積比為1∶1至1∶40，優(yōu)選為1∶5至1∶30，最優(yōu)選為1∶15。

在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，其中在步驟(2)中，勻質化在6000-12000rpm，優(yōu)選7000-10000rpm，最優(yōu)選8500rpm下進行。

在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，其中在步驟(3)中，所述聚乙烯吡咯烷酮水溶液的質量濃度為0.01％至0.5％，優(yōu)選0.01至0.3％，最優(yōu)選0.1％。

相應地，本發(fā)明還提供一種通過本發(fā)明的方法制備的馬西替坦微球制劑，其特征在于，至少80％的所述馬西替坦微球的粒徑在7-30μm 范圍內。

在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明的馬西替坦微球制劑的載藥量為1％-7％，優(yōu)選2％-5％，最優(yōu)選3％-4.5％。

在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明的馬西替坦微球制劑的包封率為60％以上，優(yōu)選70％以上，更優(yōu)選80％以上，最優(yōu)選90％以上。

實施例

以下結合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細描述。以下實施例不應被解釋為對本發(fā)明的限制。凡基于本發(fā)明內容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。

實施例1

采用乳化-溶劑揮發(fā)法制備載藥微球。稱取600mgplga和30mg馬西替坦溶于2.82g二氯甲烷中，作為油相，以0.5％pva水溶液為水相，在室溫下以1∶15的比例將油相加入到水相中，以7000rpm高速剪切120s，形成o/w乳劑。將所得o/w乳劑以體積比1∶3加入到攪拌狀態(tài)的0.1％pvp水溶液中，繼續(xù)攪拌3h，使二氯甲烷充分揮發(fā)，得到本發(fā)明的馬西替坦微球。隨后離心分離所述馬西替坦微球，用蒸餾水洗滌3次后，干燥。

按以下方法測定所得微球的包封率、載藥量和粒徑。

稱取微球5mg，于15ml離心管中，加入0.5ml二氯甲烷，超聲使微球溶解，再加入2.5ml甲醇，渦旋10min，11000r/min離心10min，取上清液。用hplc測定微球中馬西替坦的含量。

載藥量＝(微球中馬西替坦質量/微球總質量)×100％

包封率＝(微球中馬西替坦質量/投入馬西替坦總質量)×100％

將微球分散在純水中，經超聲分散后用激光粒度儀檢測微球平均粒徑及粒徑分布。

經測定，所得微球的包封率為88.92％，載藥量4.02％，平均粒徑為23.5μm，且80.2％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖1。

實施例2：

按與實施例1相同的方法制備載藥微球，除了剪切速率為8500rpm。經測定，所得微球的包封率為93.76％，載藥量4.37％，平均粒徑為16.8μm，且91.6％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖2。

實施例3：

按與實施例1相同的方法制備載藥微球，除了剪切速率為10000rpm。經測定，所得微球的包封率為85.76％，載藥量4.15％，平均粒徑為11.6μm，且86.3％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖3。

從實施例1-3的結果可以看出，剪切速率的大小影響微球的粒徑：在7000rpm-10000rpm的范圍內，剪切速率越大，微球粒徑隨之變小。最優(yōu)選地，剪切速率為8500rpm。

實施例4：

按與實施例2相同的方法制備載藥微球，除了油水相比例為1∶8。經測定，所得微球的包封率為86.76％，載藥量4.00％，平均粒徑為12.9μm，且84.5％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖4。

實施例5：

按與實施例2相同的方法制備載藥微球，除了油水相比例為1∶25。經測定，所得微球的包封率為89.76％，載藥量4.22％，平均粒徑為24.9μm，且82.5％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖5。

實施例4和5的結果表明，隨著水相體積增大，微球粒徑也隨之變大。

實施例6：

以pcl代替plga，用與實施例2相同的方法制備載藥微球。經測定，所得微球的包封率為73.76％，載藥量3.32％，平均粒徑為13.4μm，且80.9％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖6。

實施例7：

以丙酮作為有機相，用于實施例2相同的方法制備載藥微球。經測定，所得微球的包封率為63.15％，載藥量3.17％，平均粒徑為12.7 μm，且86.5％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖7。

實施例8：

以0。5％的甘油硬脂酸酯水溶液作為乳化劑，用與實施例2相同的方法制備載藥微球。經測定，所得微球的包封率為83.76％，載藥量3.96％，平均粒徑為27.7μm，有55.6％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖8。

實施例9：

用0.1％pva水溶液代替0.1％pvp水溶液作為穩(wěn)定劑，用與實施例2相同的方法制備載藥微球。經測定，所得到微球包封率為86.22％，載藥量4.25％，平均粒徑為29.8μm，有45.6％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖9。

實施例10：

按與實施例2相同的方法制備載藥微球，除了穩(wěn)定劑pvp濃度為0.01％。經測定，所得到微球包封率為90.20％，載藥量4.17％，平均粒徑為22.5μm，有84.6％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖10。

實施例11：

按與實施例2相同的方法制備載藥微球，除了穩(wěn)定劑pvp濃度為0.3％。經測定，所得到微球包封率為89.23％，載藥量4.21％，平均粒徑為18.8μm，有88.9％的微球粒徑分布在7～30μm，粒徑分布見圖11。

實施例12：釋放度的測定

以實施例2的馬西替坦微球制劑作為樣品，精密稱取冷凍干燥后的馬西替坦微球制劑，加入到37.5℃、ph7.4的磷酸緩沖液中，在恒溫振蕩器中以100rpm的速度震蕩，分別于1、2、4、8、12、24、48、72、96、144、168h取樣，并在取樣后補充相同體積的等溫釋放介質。用高效液相色譜法檢測藥物累積釋放量(見表1)，繪制微球體外釋放隨時間變化的曲線(圖12)。

表1：馬西替坦微球體外釋放結果