一種含阿奇霉素的緩釋滴眼液及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種以阿奇霉素為有效成分的具有緩釋作用的滴眼液及其制備方法，本發(fā)明方法針對阿奇霉素水溶性差以及脂質(zhì)體物理化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定等問題，采用乳化蒸發(fā)-低溫固化法制備殼聚糖修飾的阿奇霉素固體脂質(zhì)納米粒，提高了脂質(zhì)納米粒在儲存中的穩(wěn)定性，實現(xiàn)了阿奇霉素在眼部的緩慢釋放，使得藥物充分發(fā)揮藥效，起到最好的治療作用。本發(fā)明的眼藥水主要應(yīng)用于治療細菌性結(jié)膜炎。
【專利說明】一種含阿奇霉素的緩釋滴眼液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體是一種以阿奇霉素為活性成分的具有抗菌作用的緩釋滴眼液。
技術(shù)背景
[0002]細菌性結(jié)膜炎是最常見的眼科疾病，約占所有結(jié)膜炎的5%，常致眼組織不同程度的損害，有時后果嚴(yán)重，危害視力，是主要的致盲眼病之一。細菌性結(jié)膜炎具有自愈性，但抗感染治療可縮短疾病進程、防止傳染、減少并發(fā)癥發(fā)生。細菌性結(jié)膜炎的致病菌種類很多，革蘭氏陽性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌是最常見的病原體?？股厥悄壳爸委熂毦越Y(jié)膜炎的主要手段，因作用迅速，療效明顯而廣泛應(yīng)用于臨床。
[0003]阿奇霉素是一種半合成的氮雜十五元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物，常用于敏感細菌所引起的感染，主要通過與細菌細胞中的核糖體50S亞基結(jié)合，阻礙細菌轉(zhuǎn)肽過程，抑制依賴于RNA的蛋白質(zhì)合成而發(fā)揮抗菌作用。阿奇霉素通過吞噬細胞吸收和轉(zhuǎn)運，具有很好的組織細胞滲透能力，在機體組織中濃度高，作用持續(xù)時間長，抗菌譜廣，抑菌效果好，不良反應(yīng)小。目前臨床應(yīng)用的劑型主要有片劑、膠囊、干混懸劑、注射劑、散劑和顆粒劑等。2007年4月美國食品藥品管理局批準(zhǔn)了阿奇霉素眼用溶液(商品名:AzaSite? )用于治療細菌性結(jié)膜炎和沙眼。但作為傳統(tǒng)的眼用制劑，它勢必存在滯留時間短、生物利用度低等一系列問題，并且臨床應(yīng)用主要的不良反應(yīng)為眼部刺激性。
[0004]為了提高眼部生物利用度，延長作用時間，眼部給藥主要集中在研究新劑型給藥系統(tǒng)方面，如膠粒系統(tǒng)、微粒系統(tǒng)、凝膠系統(tǒng)、眼部插入劑和植入劑、給藥裝置等，取得一定的進展。
[0005]CN103211755A公開了無菌穩(wěn)定的阿奇霉素滴眼液的生產(chǎn)方法，將活性成分的阿奇霉素和藥學(xué)可接受的輔料按凍干工藝制備成無菌凍干粉未，然后在臨床使用中溶解在無菌的專用溶劑中，此方法克服現(xiàn)有的阿奇霉素滴眼液在生產(chǎn)過程中的不穩(wěn)定性，但該滴眼液存在使用上的不便，使用者須自行配置，凍干粉末和無菌溶劑的用量難以控制，造成藥量不均。且在使用過程中有可能再次污染。
[0006]CN101077352A公開了一種含乳糖酸阿奇霉素的眼用制劑，該發(fā)明包括2個劑型，即乳糖酸阿奇霉素滴眼液和眼用凝膠。解決了制劑的穩(wěn)定性和刺激性，但傳統(tǒng)的凝膠劑因為熱壓滅菌會對凝膠結(jié)構(gòu)造成不可逆的破壞，所以需在制備凝膠之前對所用的原料進行滅菌并在生產(chǎn)過程中保持嚴(yán)格的無菌操作，此外凝膠為半固體制劑，存在給藥劑量不準(zhǔn)確的缺點。
[0007]CN102106812A公開了一種阿奇霉素超細粉體原位凝膠滴眼液及其制備方法，解決阿奇霉素溶解度低、常規(guī)凝膠中藥物分散不均導(dǎo)致給藥劑量不準(zhǔn)等問題，但在耐受性方面效果不理想，凝膠長時間滯留在眼部會引起不適，且該專利工藝復(fù)雜，很難從技術(shù)上達到要求。
[0008]CN102125577A公開了一種將阿奇霉素眼用制劑制成脂質(zhì)體原位凝膠的方法，脂質(zhì)體的生物相容性可以避免凝膠對眼部的刺激，但是原位凝膠在發(fā)生相變時，由于黏度變大，脂質(zhì)體無法均勻分散于凝膠介質(zhì)中，容易導(dǎo)致劑量不易控制，且原位凝膠發(fā)生相變依賴于眼部pH、溫度等發(fā)生變化，而這種變化會對脂質(zhì)體的穩(wěn)定性產(chǎn)生影響，使得脂質(zhì)體中包封的藥物迅速滲漏，影響治療效果。
[0009]因此，發(fā)明一種含阿奇霉素的緩釋滴眼液，既能解決阿奇霉素水溶性差、一般制劑生物利用度低、對眼部有刺激等問題，又能保證阿奇霉素在眼部的緩慢釋放，且能規(guī)?；笊a(chǎn)，是我們急待解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明為一種阿奇霉素的緩釋滴眼液，其主要優(yōu)勢在于將阿奇霉素包封于固體脂質(zhì)納米粒中，解決阿奇霉素水溶性低，不穩(wěn)定等問題，且利用可生物降解、無毒、生物相容性好的水溶性殼聚糖對固體脂質(zhì)納米粒進行表面修飾，構(gòu)建具有較高穩(wěn)定性和緩釋作用的眼部給藥系統(tǒng)，克服了未經(jīng)修飾的固體脂質(zhì)納米粒表面荷負電，不利于藥物角膜滲透的缺點。
[0011]脂質(zhì)體是由天然的或合成的磷脂雙分子層包裹而成的水溶性微小囊泡，易與生物融合，具有良好的生物相容性，且無毒、無免疫原性。脂質(zhì)體的這種結(jié)構(gòu)使其作為藥物載體，具有增加角膜透過性、可降解性等優(yōu)點。近年來，眼用脂質(zhì)體取得了較大的進展，出現(xiàn)了如噻嗎洛爾脂質(zhì)體滴眼劑、阿昔洛韋脂質(zhì)體滴眼劑、毛果蕓香堿脂質(zhì)體滴眼劑、流動態(tài)脂質(zhì)體包裹抗生素滴眼劑、聚維酮碘脂質(zhì)體滴眼劑等。脂質(zhì)體用于眼前段給藥主要是用來改善角膜附著，提高聚合物滲透性；用于眼后段疾病的治療主要是保證藥物能在視網(wǎng)膜中靶向釋放，達到改善藥物在玻璃體內(nèi)半衰期的作用。
[0012]傳統(tǒng)脂質(zhì)體的缺點是載藥量低，穩(wěn)定性差，無菌脂質(zhì)體的大工業(yè)生產(chǎn)成本高，技術(shù)上有難度。固體脂質(zhì)納米粒(solid lipid nanoparticles, SLNs)是以固態(tài)天然或合成的生物相容的高熔點脂質(zhì)材料(如硬脂酸，飽和脂肪酸甘油酯等)為載體，將藥物包裹于類脂核中或吸附于納米粒表面形成粒徑為50-1000nm的固體膠粒給藥體系。SLNs既具備聚合納米粒物理穩(wěn)定性高，避免藥物的降解或泄漏以及良好的緩釋性的優(yōu)勢，又兼具了脂質(zhì)體，乳劑毒性低，能大規(guī)模生產(chǎn)的優(yōu)點，是一種很有發(fā)展前景的藥物載體。
[0013]然而，普通SLNs眼部給藥也面臨幾個問題:首先，由于SLNs的粒徑遠大于細胞間隙，不易通過細胞間緊密連接被吸收，又無法有效誘導(dǎo)細胞內(nèi)吞，因而透過角膜吸收的能力不是很理想。其次，受到眨眼及流淚的影響，SLNs在眼中停留時間較短，往往尚未被完全攝取即被清除，生物利用度低。為了解決上述問題，有必要對SLNs進行修飾，延長藥物在角膜前的滯留時間及增加藥物的角膜滲透性。
[0014]殼聚糖是甲殼素脫去乙酰基的衍生物。它是自然界中存在的唯一荷正電的堿性多糖，在生物體內(nèi)可被溶菌酶降解，具有無毒、良好的生物相容性、低免疫排斥反應(yīng)、生物粘附性及跨細胞膜轉(zhuǎn)導(dǎo)能力等一系列特性。
[0015]本發(fā)明結(jié)合殼聚糖和固體脂質(zhì)納米粒的優(yōu)勢，制備殼聚糖修飾的固體脂質(zhì)納米粒(CS-SLNs)，利用殼聚糖與角膜表面電荷間的靜電力等因素有助于促進藥物與粘膜特異性結(jié)合，從而延長CS-SLNs在角膜的滯留時間，利于其透過屏障，提高角膜對CS-SLNs的攝取率。CS-SLNs滴眼給藥，眼內(nèi)無異物感，不影響眼部正常的生理功能，患者順應(yīng)性好。同時，殼聚糖具有抗菌性，該制劑不需要添加防腐劑，具有緩釋，提高藥物生物利用度的優(yōu)勢，且殼聚糖包覆的固體脂質(zhì)納米粒Zeta電位發(fā)生明顯變化，可改善其儲存穩(wěn)定性。
[0016] 本發(fā)明的另外一個目的是提供一種含阿奇霉素的緩釋滴眼液的制備工藝。
[0017]目前，固體脂質(zhì)納米粒的制備主要有高壓乳化法，但此法對設(shè)備要求高，且所得的固體脂質(zhì)納米粒粒徑較大且分布廣，質(zhì)量難以控制；微乳技術(shù)所得分散液的固體含量較低；高剪切乳化超聲法存在金屬污染等問題；而乳化蒸發(fā)-低溫固化法可避免上述缺點，且操作簡單，可工業(yè)化大生產(chǎn)。但此法有少量粒子聚集現(xiàn)象。若在處方中加入一定量的殼聚糖后聚集現(xiàn)象消失，這可能是由于殼聚糖通過靜電、氫鍵和疏水鍵等作用與固體脂質(zhì)納米粒結(jié)合，增加粒子間的斥力，防止粒子的聚集，形成“構(gòu)象云”從而產(chǎn)生較大的空間位阻，提高固體脂質(zhì)納米粒的穩(wěn)定性。目前，未見公開刊物有報道用乳化蒸發(fā)-低溫固化法制備阿奇霉素固體脂質(zhì)納米粒，筆者通過大量實驗證實此法簡單可行，且經(jīng)改進后的工藝制備的阿奇霉素固體脂質(zhì)納米粒質(zhì)量合格。具體操作步驟如下:
[0018]①稱取處方量的磷脂、膽固醇和阿奇霉素，加入到有機溶劑中，70°C加熱，渦旋使完全溶解，置于水浴中保溫，作為有機相；
[0019]②配置處方量的乳化劑/助乳化劑溶液，構(gòu)成內(nèi)水相，水浴加熱至相同溫度70°C ；
[0020]③用定量針頭吸取有機相，通過5#針頭大小的孔徑，緩慢滴入同溫度的內(nèi)水相中，恒溫攪拌使有機溶劑蒸發(fā)并濃縮至適當(dāng)?shù)捏w積，得到初乳；
[0021]④按處方量稱取殼聚糖，加入到pH緩沖液中，配置成連續(xù)相(外水相)，保持溫度0-4 0C ；
[0022]⑤攪拌下將所得的初乳迅速傾倒入外水相中，攪拌繼續(xù)固化2h，恢復(fù)到室溫；
[0023]⑥補加注射用水至全量；
[0024]⑦過0.45 μ m的微孔濾膜，除菌，分裝即得。
[0025]該法制備殼聚糖修飾的固體脂質(zhì)納米粒的工藝具有操作簡便，適合工業(yè)化生產(chǎn)，制得的固體脂質(zhì)納米粒粒徑大小均勻，有較高的可重復(fù)性等優(yōu)點，無需超聲等高能乳化過程，實現(xiàn)了低能乳化，是一種值得推廣應(yīng)用的制備方法。穩(wěn)定性初步考察試驗表明本發(fā)明所制得的殼聚糖修飾的固體脂質(zhì)納米粒在4°C低溫條件下，六個月內(nèi)，納米粒外觀、包封率、粒徑、PI值、Zeta電位沒有顯著變化，且未見凝聚沉淀現(xiàn)象，說明該制劑在冰箱(4°C )中質(zhì)量穩(wěn)定性良好。
[0026]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
[0027]—種含阿奇霉素的緩釋滴眼液，原輔料組成以重量百分比計，包括:阿奇霉素
0.5% -3%;磷脂 1% -6%;膽固醇 0.8% -4%;乳化劑 0.2% _3%;pH 緩沖液 0.1% -1.5%；抗氧劑0.01% -3%;穩(wěn)定劑0.01% -5%;殼聚糖3% -10%;滲透壓調(diào)節(jié)劑0.01% -2.5%。
[0028]所述磷脂為大豆磷脂、蛋黃磷脂、磷脂酰膽堿中的一種或幾種的組合；所述有機溶劑為甲醇、丙酮、三氯甲烷、無水乙醇中的一種或幾種的組合；所述乳化劑為聚甘油硬脂酸酯、聚甘油油酸酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚山梨酯80、泊洛沙姆188、司盤、PEG中的一種或幾種的組合；所述PH緩沖液為磷酸鈉緩沖液、醋酸鈉緩沖液、枸櫞酸鈉緩沖液中的一種或幾種的組合，且PH6.0-7.5 ;所述抗氧劑為維生素C、維生素E、丁基化羥基甲苯、丙二醇、甘油、檸檬酸、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、茶多酚、蘆丁脂肪酸酯、姜黃素、肌肽中的一種或幾種的組合；所述滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、乳糖、硼砂、甘油中的一種或幾種的組合；所述穩(wěn)定劑為聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚山梨酯80中的一種或幾種的組合。[0029]為了考察本發(fā)明所得制劑的穩(wěn)定性和生物利用性，我們做了如下試驗。
[0030]實驗1:本發(fā)明制劑穩(wěn)定性研究:
[0031](I)實驗方法:按照實施例1制備殼聚糖修飾的阿奇霉素固體脂質(zhì)納米粒滴眼液，以性狀、pH、含量、無菌、有關(guān)物質(zhì)為考察項目，進行加速試驗(溫度25±2°C，相對濕度75%±5%條件下避光保存，1、2、3、6個月時取樣檢測)和長期試驗(溫度6±2°C，相對濕度60% ± 10%條件下避光保存，3、6、9、12、18、24個月時取樣檢測)。
[0032](2)實驗結(jié)果見下表:
[0033]6個月加速試驗
[0034]
【權(quán)利要求】
1.一種含阿奇霉素的滴眼液，其特征在于:所述滴眼液的有效成分阿奇霉素經(jīng)乳化蒸發(fā)-低溫固化法制備成阿奇霉素固體脂質(zhì)納米粒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于:固體脂質(zhì)納米粒為用殼聚糖修飾的磷脂雙分子膜。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于:滴眼液的原輔料組成包括:阿奇霉素、磷脂、膽固醇、殼聚糖、乳化劑、抗氧劑、穩(wěn)定劑、pH緩沖液、滲透壓調(diào)節(jié)劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于:不需要添加防腐劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的滴眼液，其特征在于:磷脂為大豆磷脂、蛋黃磷脂、磷脂酰膽堿中的一種或幾種的組合；乳化劑為聚甘油硬脂酸酯、聚甘油油酸酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚山梨酯80、泊洛沙姆188、司盤中的一種或幾種的組合，優(yōu)選泊洛沙姆188 ;抗氧劑為維生素C、維生素E、丁基化羥基甲苯、丙二醇、甘油、檸檬酸、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、茶多酚、蘆丁脂肪酸酯、姜黃素、肌肽中的一種或幾種的組合，優(yōu)選維生素C ;穩(wěn)定劑為聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、油酸中的一種或幾種的組合，優(yōu)選聚乙二醇；pH緩沖液為磷酸鈉緩沖液、醋酸緩沖液、硼酸緩沖液、枸櫞酸緩沖液中的一種或幾種的組合，優(yōu)選磷酸鈉緩沖液，且PH6.0-7.5 ;滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、乳糖、硼砂、甘油中的一種或幾種的組合，優(yōu)選甘露醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的滴眼液，其特征在于:原輔料組成以重量百分比計，包括阿奇霉素0.5% -3% ;磷脂1% -6% ;膽固醇0.8% -4% ;乳化劑0.2% -3% ;pH緩沖液0.1% -1.5% ;抗氧劑0.01% -3% ;穩(wěn)定劑0.01% -5% ;殼聚糖3% -10% ;滲透壓調(diào)節(jié)劑0.01% -2.5%。
7.一種含阿奇霉素的緩釋滴眼液的制備方法，包括以下步驟: ①稱取處方量的磷脂、膽固醇和阿奇霉素，加入到有機溶劑中，70°C加熱，渦旋使完全溶解，置于水浴中保溫，作為有機相； ②配置處方量的乳化劑/助乳化劑溶液，構(gòu)成內(nèi)水相，水浴加熱至相同溫度70°C； ③用定量針頭吸取有機相，通過規(guī)定孔徑的針頭，緩慢滴入同溫度的內(nèi)水相中，恒溫攪拌使有機溶劑蒸發(fā)并濃縮至適當(dāng)?shù)捏w積，得到初乳； ④按處方量稱取殼聚糖，加入到PH緩沖液中，配置成連續(xù)相(外水相)，保持溫度0-4 0C ； ⑤攪拌下將所得的初乳迅速傾倒入外水相中，攪拌繼續(xù)固化2h，恢復(fù)到室溫； ⑥補加注射用水至全量； ⑦過0.45 μ m的微孔濾膜，除菌，分裝即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備工藝，其選擇的定量取樣針頭的孔徑優(yōu)選4-6#注射器孔徑，優(yōu)選5#注射器孔徑。
9.根據(jù)權(quán)利 要求1所述的滴眼液，其特征在于:該組合物主要用于治療急性細菌性結(jié)膜炎、沙眼等眼科疾病。
【文檔編號】A61K9/51GK103989660SQ201410246481
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年6月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月5日
【發(fā)明者】祁梅芳, 楊波, 耿海明, 于艷春 申請人:武漢武藥科技有限公司