從北美鵝掌楸樹皮中提取胃腸道疾病治療成分的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及從北美鵝掌楸樹皮中提取胃腸道疾病治療成分的方法，該治療成分含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯作為活性成分，并且本發(fā)明還涉及用于胃腸道疾病的治療劑，所述治療劑含有使用所述方法提取的表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯。
【專利說明】從北美鵝掌楸樹皮中提取胃腸道疾病治療成分的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及制備來自北美鵝掌楸（Liriodendron tulipifera)樹皮的提取物的方 法，該提取物用于治療胃腸道疾病。此外，本發(fā)明還涉及用于治療胃腸道疾病的治療劑，所 述治療劑含有提取自北美鵝掌楸樹皮的表美鵝掌楸內(nèi)酯（印itulipinolide)和木香烯內(nèi) 酉旨（costunolide)〇

【背景技術(shù)】
[0002] 據(jù)報(bào)道，胃炎和/或胃潰瘍是最常見的疾病，這是因?yàn)榧s10%的韓國人在一生中 患胃炎和/或胃潰瘍多于一次。已知胃炎和/或胃潰瘍的誘因在于，胃酸消化了包含粘膜、 粘膜下層、外肌層和漿膜的胃壁。如果只是胃粘膜受損則稱為胃炎，而如果胃粘膜下層和外 肌層受損則稱為胃潰瘍。此外，攻擊因子和防御因子之間的不平衡（例如，攻擊因子增加或 防御因子減少）可導(dǎo)致胃炎和/或胃潰瘍的發(fā)生。
[0003] 攻擊因子增加的實(shí)例可為胃酸和/或胃蛋白酶分泌增加，而防御因子減少的實(shí)例 可為胃粘膜缺損、粘液分泌減少、碳酸氫根離子分泌減少和/或前列腺素生成減少。另一方 面，已知幽門螺桿菌（Helicobacter pylori)的感染可導(dǎo)致胃炎和/或胃潰瘍。
[0004] 胃酸過度分泌被視為胃炎和/或胃潰瘍的主要誘因。胃酸是胃壁細(xì)胞分泌的鹽 酸，通過激活胃蛋白酶而具有消化蛋白的作用并具有損傷胃壁的作用。可將用于治療胃炎 和/或胃潰瘍的治療劑分為抑制攻擊因子（例如胃酸、胃蛋白酶、煙、氧自由基和/或醇） 的藥物和增強(qiáng)防御因子的藥物。
[0005] 作為攻擊因子抑制劑，可例舉抗酸劑和/或胃酸分泌抑制劑。此外，作為胃酸分泌 抑制劑，可例舉H2受體拮抗劑（例如西咪替丁、雷尼替丁和/或法莫替丁等）、質(zhì)子泵抑制 劑（PPI)(例如奧美拉唑和/或蘭索拉唑）。特別是，通過給予PPI藥物可使幾乎100 %的 十二指腸潰瘍和超過90%的胃潰瘍得到初步治愈。然而，盡管十二指腸潰瘍和/或胃潰瘍 的初步治愈率得到提高，但是復(fù)發(fā)率并未降低。
[0006] 另一方面，防御因子增強(qiáng)劑可誘導(dǎo)潰瘍性病變的遮補(bǔ)（covering)、粘液的合成和 分泌、胃粘膜中血流量的增高、內(nèi)源性前列腺素的增加和/或組織再生的增強(qiáng)。另外，已知 防御因子增強(qiáng)劑能用于預(yù)防十二指腸潰瘍和/或胃潰瘍的復(fù)發(fā)。當(dāng)然，還可將對幽門螺桿 菌的殺菌治療視為針對潰瘍的重要治療方法。
[0007] 然而，由于導(dǎo)致胃炎和/或胃潰瘍的誘因復(fù)雜，尚未清楚地披露胃炎和/或胃潰瘍 的誘因。因此，還未開發(fā)出確定可行的治療方法。
[0008] 另一方面，北美鵝掌楸（Liriodendron tulipifera L.)是屬于木蘭科 (Magnoliaceae)的一種落葉闊葉喬木。已將北美鵝掌楸用作紙楽原料。已知北美鵝掌楸的 樹皮、樹葉和/或木料中含有生物堿、倍半萜烯和/或木酚素。
[0009] 已知北美鵝掌楸的樹皮中包含具有抗細(xì)菌活性的阿樸啡類生物堿（Hufford C.D·和 Funderburk M.J.，J. Pharm.Sci. 63:第 1338-1339 頁，1974 ;Hufford C.D·等， J. Pharm. Sci. 64 :第789-792頁，1975)。此外，自美國獨(dú)立戰(zhàn)爭以來，含有該生物堿的樹皮 提取物已被用于治療瘧疾。另一方面，在蘇聯(lián)，海罌粟堿生物堿已被用作鎮(zhèn)咳劑。
[0010] 根據(jù)1975年的研究，已報(bào)道從北美鵝掌楸樹皮中提取的生物堿部分具有抗細(xì)菌 活性。此外，據(jù)報(bào)道，N-甲基六駁堿、鵝掌楸啡堿和/或liriotulipiferine具有抗真菌 活性（（Huang Hsu，C_Y，1976,碩士論文，North Carlolina State University，Raleigh)。 另外，還報(bào)道了脫氫海罌粟堿和/或鵝掌楸堿（liriodenine)具有細(xì)胞毒性和抗細(xì)菌活性 (Warthen D，Gooden E L 和 Jacobson M.，1969, J.Pharm.Sci.，58 :第 637-638 頁，；Hufford C. D.，F(xiàn)underburk Μ· J.，Morgan J Μ·等，1975, J. Pharm. Sci. 64 :第 789-792 頁；Chen C R， Bed J L，Doskotch R W 等，1974, Lloydia 37 :第 493-500 頁）。 toon] 另一方面，還公開了從北美鵝掌楸樹皮中提取的倍半萜內(nèi)酯具有抗腫瘤活性。 此外，作為北美鵝掌楸樹皮的有效成分，還公開了木香烯內(nèi)酯、郁金香酯、表美鵝掌楸內(nèi) 酉旨、epi-tulipdienolide 和 / 或 y -liriodenolide (Doskotch R. W 和 EL-Feraly F. S., J. Pharm. Sci. 58 :第 877-880 頁，1969 ;Doskotch R. W 和 E LI-Feraly F. S.，J. Org. Chem. 35 :第 1928-1936 頁，1970 ;Moon Μ. K.等，Arch. Pharm. Res. 30 :第 299-302 頁，2007)。
[0012] 此外，在北美鵝掌楸葉子中，還公開了鵝掌楸內(nèi)酯（1 ipiferolide)、二環(huán)氧表美鵝 掌揪內(nèi)酯（epitulipinolide diepoxide)和/ 或peroxyferolide 作為有效成分（Doskotch R. W，EL-Feraly F. S. , Fairchild E H，1976，J. Chem. Soc (Chem. Comm),第 402-403 頁； Doskotch R. W，EL-FeralyF. S.，F(xiàn)airchild E H，1977, J. Org. Chem. 42 :第 3614-3618 頁）。 又一方面，在北美鵝掌楸樹皮中，還公開了木酚素衍生物、松脂醇、（+) - 丁香樹脂醇和/或 鵝掌楸苦素（liriodendrin)以單糖苷或二糖苷的形式作為有效成分（Dickey E E. ,1958， J. Org. Chem. 23 :第 179-184 頁；Fujimoto Η 和 Higuchi Τ·，1977，J. Jap. Wood Res. Soc， 23 :第405-410頁）。此外，還報(bào)道了鵝掌楸苦素引起動物的骨骼生長（韓國專利注冊號 10-0597, 563)。
[0013] 本申請的發(fā)明人認(rèn)為，可施用來自北美鵝掌楸樹皮的、含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木 香烯內(nèi)酯作為活性成分的提取物以治療胃炎和/或胃潰瘍。此外，從來自北美鵝掌楸樹皮 的提取物組合物中分離出了多種的少量物質(zhì)。
[0014] 因此，本申請的發(fā)明人制定了用于從北美鵝掌楸樹皮中制備提取物的方法，所述 提取物用于治療胃炎和/或胃潰瘍。最后，通過開發(fā)出用于制備來自北美鵝掌楸樹皮的、含 有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯作為活性成分的提取物（用于治療胃炎和/或胃潰瘍）的 方法，完成了本發(fā)明。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0015] 技術(shù)問題
[0016] 待解決的問題是開發(fā)有效的方法以從北美鵝掌楸樹皮中制備提取物，所述提取物 用于預(yù)防或治療胃炎和/或胃潰瘍。因此，為了預(yù)防或治療胃炎和/或胃潰瘍，實(shí)施了對如 下的有效方法的開發(fā)：從北美鵝掌楸樹皮中制備含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯作為活 性成分的提取物。
[0017] 技術(shù)方案
[0018] 本申請的目的在于，提供制備來自北美鵝掌楸樹皮的提取物的方法，所述方法 包括如下步驟：1)將1重量份切碎并干燥后的北美鵝掌楸樹皮與2-20重量份的乙酸乙 酯或二氯甲烷混合；以及2)在15-50°C下對混合物提取并濃縮1-4天，其中，提取物含有 0. lwt% -10wt%的表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯，通過選自如下方法中的至少一種進(jìn)行所 述提?。何惴ǎ╡nfleurage)、滲漉法、超聲法、浸漬法或回流法。
[0019] 本申請的另一目的在于，提供對來自北美鵝掌楸樹皮的提取物進(jìn)行純化的方法， 所述方法包括如下步驟：1)將得到的提取物用C1-C3低級醇水溶液溶解；2)向步驟1)中得 到的混合物中加入己烷并混合，隨后移除己烷層中的脂質(zhì)和水不溶性物質(zhì)；以及3)對低級 醇水溶液層中的物質(zhì)進(jìn)行分離、純化和干燥。
[0020] 此外，所述步驟2)進(jìn)一步包括如下步驟：向低級醇水溶液層中加入水，從而得到 低濃度的低級醇水溶液；加入二氯甲烷，從而得到二氯甲烷層；以及對二氯甲烷層中的物 質(zhì)進(jìn)行分離、純化和干燥。
[0021] 另一方面，本申請的另一目的在于，提供根據(jù)上述方法得到的來自北美鵝掌楸樹 皮的提取物，所述提取物含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯作為活性成分。
[0022] 本申請的又一目的在于，提供用于預(yù)防或治療胃炎和/或胃潰瘍的藥物組合物， 其中，所述藥物組合物含有作為來自北美鵝掌楸樹皮的提取物的活性成分的表美鵝掌楸內(nèi) 酯和木香烯內(nèi)酯。
[0023] 有益效果
[0024] 本申請的顯著有益效果在于，提供了有效的方法以制備來自北美鵝掌楸樹皮的提 取物，所述提取物用于預(yù)防或治療胃炎和/或胃潰瘍。因此，為了預(yù)防或治療胃炎和/或胃 潰瘍，開發(fā)出了有效的方法，用來制備來自北美鵝掌楸樹皮的、含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香 烯內(nèi)酯作為活性成分的提取物。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0025] 圖1示出制備例9所述的來自北美鵝掌楸樹皮的純化物質(zhì)的液相色譜數(shù)據(jù)。確認(rèn) 了含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯。
[0026] 圖2示出在純化步驟前制備例1所述的來自北美鵝掌楸樹皮的提取物的液相色譜 數(shù)據(jù)。確認(rèn)了含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯。
[0027] 圖3示出制備例11所述的來自北美鵝掌楸樹皮的純化物質(zhì)的液相色譜數(shù)據(jù)。確 認(rèn)了含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯。

【具體實(shí)施方式】
[0028] 本申請?zhí)峁┝藖碜员泵砾Z掌楸樹皮的提取物，所述提取物含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和 木香烯內(nèi)酯。
[0029] 進(jìn)一步而言，本申請?zhí)峁┝酥苽鋪碜员泵砾Z掌楸樹皮的提取物的方法。
[0030] 進(jìn)一步而言，本申請?zhí)峁┝藖碜员泵砾Z掌楸樹皮的、含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香 烯內(nèi)酯的提取物；以及用于預(yù)防或治療胃炎和/或胃潰瘍的藥物組合物，所述藥物組合物 含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯作為活性成分。
[0031] 接下來，將對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。
[0032] 使用提取溶劑制備來自北美鵝掌楸樹皮的提取物，所述提取溶劑選自乙酸乙酯、 二氯甲烷、醇、醇水溶液和/或上述溶劑的混合物。此外，在該提取物中含有表美鵝掌楸內(nèi) 酯和木香烯內(nèi)酯。當(dāng)然，將表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯用作來自北美鵝掌楸樹皮的提取 物的成分指示物。
[0033] 當(dāng)然，來自北美鵝掌楸樹皮的提取物對于治療胃腸道疾病具有出色的功效。為測 定治療胃炎和/或胃潰瘍的功效，使用了多種動物體內(nèi)試驗(yàn)?zāi)Ｐ?。例如，使用了水?束縛 應(yīng)激模型、HCl-EtOH誘發(fā)胃炎模型和/或吲哚美辛誘發(fā)胃潰瘍模型。作為試驗(yàn)結(jié)果，來自 北美鵝掌楸樹皮的提取物通過促進(jìn)前列腺素的生物合成，顯示出針對胃炎和/或胃潰瘍的 出色功效。
[0034]另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物，所述藥物組合物含有來自北美鵝掌楸樹皮 提取物的表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯作為活性成分，用于預(yù)防或治療胃腸道疾病。
[0035] 本申請?zhí)峁┝藖碜员泵砾Z掌楸樹皮的提取物，以及含有該提取物用于預(yù)防或治療 胃腸道疾病的藥物組合物。所述胃腸道疾病優(yōu)選為胃炎或胃潰瘍。
[0036] 本申請的制備方法包括2個制備步驟：（1)使用乙酸乙酯或二氯甲烷的特定溶劑 制備來自北美鵝掌楸樹皮的提取物的步驟（方法1)，（2)通過提高步驟（1)中所得到的提 取物中的成分指示物的量而獲得純化物質(zhì)的純化步驟（方法2)。
[0037] 在方法1中，在對北美鵝掌楸的樹皮進(jìn)行切碎和制成粉末后，使用選自乙酸乙酯 或二氯甲烷的提取溶劑實(shí)施提取。在將提取物濃縮后，得到的物質(zhì)含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和 木香烯內(nèi)酯作為活性成分。
[0038] 在方法2中，使用醇水溶液溶解方法1中得到的提取物。加入己烷后，移除溶于己 烷中的脂質(zhì)成分和水不溶性物質(zhì)。在對醇水溶液層進(jìn)行分離后，得到高純度的表美鵝掌楸 內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯。進(jìn)一步而言，通過加入水可將所述醇水溶液稀釋為低濃度的醇水溶液。 在向所得到的醇水溶液中加入二氯甲烷后，可在二氯甲烷部分中分離并純化表美鵝掌楸內(nèi) 酯和木香烯內(nèi)酯。
[0039] 將根據(jù)方法1和方法2得到的部分進(jìn)行濃縮并干燥。最后，在移除所述部分中殘 留的溶劑后，制得提取物組合物。
[0040] 因此，本發(fā)明提供了一種從北美鵝掌楸樹皮中提取并純化表美鵝掌楸內(nèi)酯（式1) 和木香烯內(nèi)酯（式2)的方法。
[0041]

【權(quán)利要求】
1. 一種制備來自北美鵝掌楸樹皮的提取物的方法，所述方法包括如下步驟： 1) 將1重量份切碎并干燥后的北美鵝掌楸樹皮與2-20重量份的乙酸乙酯或二氯甲烷 混合；以及 2) 在15-50°C下，對混合物提取并濃縮1-4天， 其中，所述提取物含有〇. lwt% -10wt%的表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯， 通過選自如下方法中的至少一種進(jìn)行所述提?。何惴?、滲漉法、超聲法、浸漬法或回 流法。
2. -種對來自北美鵝掌楸樹皮的提取物進(jìn)行純化的方法，所述方法包括如下步驟： 1) 將所述權(quán)利要求1中得到的提取物用C1-C3低級醇水溶液溶解； 2) 向所述步驟1)得到的混合物中加入己烷并混合，隨后移除己烷層中的脂質(zhì)和水不 溶性物質(zhì)；以及 3) 對所述低級醇水溶液層中的物質(zhì)進(jìn)行分離、純化和干燥。
3. 如權(quán)利要求2所述的對來自北美鵝掌楸樹皮的提取物進(jìn)行純化的方法，其中，所述 步驟2)進(jìn)一步包括如下步驟：向所述低級醇水溶液層中加入水，從而得到低濃度的低級醇 水溶液；加入二氯甲烷，從而得到二氯甲烷層；以及對所述二氯甲烷層中的物質(zhì)進(jìn)行分離、 純化和干燥。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法得到的來自北美鵝掌楸樹皮的提取物，其 中，所述提取物中含有表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯作為活性成分。
5. 用于預(yù)防或治療胃炎和/或胃潰瘍的藥物組合物，其中，所述藥物組合物含有作為 權(quán)利要求4所述的來自北美鵝掌楸樹皮的提取物的活性成分的表美鵝掌楸內(nèi)酯和木香烯 內(nèi)酯。
【文檔編號】A61K36/896GK104125835SQ201380009736
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2013年2月1日 優(yōu)先權(quán)日:2012年2月16日
【發(fā)明者】金落斗 申請人:草堂藥品工業(yè)株式會社