一種注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化混懸液及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，特別涉及一種注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液及其制備方法。與市售的一些難溶性注射劑相比，本發(fā)明不含對(duì)人體有毒性的傳統(tǒng)表面活性劑和易引起過敏反應(yīng)的有機(jī)溶劑，因此避免了其帶來的過敏和毒性反應(yīng)，臨床使用方便。在小鼠藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)中，本發(fā)明顯示出較好的治療效果。本發(fā)明的注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液具有制備工藝簡(jiǎn)單、可長(zhǎng)期存放、療效好等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】一種注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化混懸液及其制備方法
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】:本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，特別涉及一種注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液及其制備方法。
[0002]【背景技術(shù)】:藥物納米化技術(shù)是目前為止改善二類藥物溶出和提高其生物利用度最為有效、載藥量最高和最易于產(chǎn)業(yè)化的納米技術(shù)之一。但是該技術(shù)仍存在缺陷，如很難或無法實(shí)現(xiàn)靶向給藥；注射給藥后藥物結(jié)晶在體循環(huán)過程會(huì)被溶解掉；可選的穩(wěn)定劑除了 PVP，HPMC，EPC，吐溫，Poloxamer，TPS等以外，其他的選擇很有限。鑒于目前存在的問題，本發(fā)明利用食物蛋白(豆蛋白、乳清蛋白和￠-乳球蛋白等)替代傳統(tǒng)的穩(wěn)定劑，制備食物蛋白穩(wěn)定化的難溶性藥物納米結(jié)晶。
[0003]以紫杉醇為例，紫杉醇是常用的化療藥物之一。紫杉醇(Paclitaxel，商品名Taxol)是一種二職類化合物,最早由Wani等從短葉紅豆杉(Taxus brevifolia)的樹皮中分離得到并確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。紫杉醇主要是通過抑制微管解聚使腫瘤細(xì)胞的有絲分裂終止及使腫瘤細(xì)胞凋亡，最后導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡。傳統(tǒng)紫杉醇因?yàn)殡y溶于水，需要有機(jī)溶劑聚氧乙烯蓖麻油作為輔劑，這些輔劑明顯增加了藥物治療相關(guān)的毒性，嚴(yán)重限制了該藥的療效和安全應(yīng)用。由于紫杉醇在紅豆杉樹皮中含量?jī)H為萬分之二至五，在葉、莖中含有僅為十萬分之五左右，提取工藝復(fù)雜，不僅造成了紫杉醇的價(jià)格昂貴，而且將大量破壞現(xiàn)已不多的紅豆杉等植物資源。因此研制療效好，毒副作用低的紫杉醇制劑，不僅具有重大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)價(jià)值，對(duì)保護(hù)生態(tài)環(huán)境也有重大貢獻(xiàn)。
[0004]
【發(fā)明內(nèi)容】
:本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的局限性，提供了一種以具有很好生物相容性和與難溶性藥物結(jié)合能力很強(qiáng)的食物 蛋白(如￠-乳球蛋白、大豆蛋白、乳清蛋白及各自的單體等)作為載體的注射用 難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液，本發(fā)明的另一目的是提供該種納米混懸液的制備方法，剛方法工藝簡(jiǎn)單、制備過程易控、制備的納米粒子
質(zhì)量穩(wěn)定。
[0005]本發(fā)明具體技術(shù)方案為:一種注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液，其特征在于其組分和各組分的重量百分含量分別為:
[0006]難溶性藥物:5-90 %，
[0007]食物蛋白:10-80%，和
[0008]凍干保護(hù)劑:5_60%，其中最優(yōu)比例為40-50%的難溶性藥物，40-50%的食物蛋白以及5-10%的凍干保護(hù)劑。
[0009]本發(fā)明中，蛋白來源于食物，實(shí)例中所述的￠-乳球蛋白和乳清蛋白來源于牛奶，大豆蛋白來源豆類植物。
[0010]本發(fā)明中，所述的凍干保護(hù)劑是本領(lǐng)域常規(guī)的凍干過程中使用的保護(hù)劑。凍干保護(hù)劑在凍干過程中起保護(hù)作用，在干燥后起支撐作用，因此稱為凍干保護(hù)劑，又稱支架劑。
[0011]本發(fā)明的注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液中，如有必要還可含有適量的pH調(diào)節(jié)劑，以滿足2010年版《中國(guó)藥典》對(duì)注射劑的要求，這個(gè)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是比較容易做到的，主要包括鹽酸、氫氧化鈉、檸檬酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽緩沖液等中一種或其以任何比例混合的混合物。
[0012]本發(fā)明還提供了上述難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸劑的制備方法，其具體步驟如下:
[0013]I)將難溶性藥物的原料藥加入丙酮中，超聲溶解后作為有機(jī)相；
[0014]2)將食物蛋白粉末加入到水中或者緩沖溶液中，攪拌溶解后置于沸水中加熱變性
0.5-lh ；
[0015]3)將凍干保護(hù)劑加入到稀釋后的熱變性后的食物蛋白溶液中，攪拌溶解后調(diào)節(jié)pH至7-10作為水相；
[0016]4)在攪拌的條件下將有機(jī)相加入到水相中，30s后探頭超聲5-10min，將所得的溶液通過微孔濾膜過濾除菌，置于潔凈的容器中；
[0017]5)將過濾除菌后的溶液在_30°C?_50°C條件下冷凍，經(jīng)冷凍干燥凍干，即得。
[0018]本發(fā)明中，步驟I )所述的有機(jī)相中的難溶性溶液濃度是每I毫升丙酮含I?50毫克的難溶性藥物，IOmg尤佳；
[0019]步驟3)中所述的水相中食物蛋白和凍干保護(hù)劑濃度分別是每I毫升溶液中含
0.1-1毫克的食物蛋白，含1-20毫克的凍干保護(hù)劑，其中蛋白優(yōu)選濃度為Img / ml，凍干保護(hù)劑優(yōu)選濃度為0.1mg / ml o
[0020]步驟2)中所述的緩沖液較佳的選自檸檬酸鹽、磷酸鹽和醋酸鹽緩沖液中的一種或多種。
[0021]步驟3)和4)中所述的攪拌條件為實(shí)驗(yàn)室或生產(chǎn)線上常用的攪拌方式，能夠達(dá)到混勻的目的即可，可以采用手工攪拌、磁力攪拌、電動(dòng)攪拌器、高速剪切機(jī)進(jìn)行攪拌。為了使有機(jī)相和水相快速混合均勻，可優(yōu)選轉(zhuǎn)速不低于1200轉(zhuǎn)/分鐘的方式進(jìn)行攪拌。
[0022]步驟4)所述的微孔濾膜法較佳的是通過0.22 y m的微孔濾膜過濾除菌，所述的容器優(yōu)選西林瓶。
[0023]步驟4)所述的冷凍干燥機(jī)凍干時(shí)能夠除去樣品中的丙酮和水，得到外形良好、夕卜形疏松的凍干粉，較佳的可進(jìn)一步充氮，加塞，軋蓋，然后保存。
[0024]本發(fā)明所述的注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液，臨用前加入注射用水、生理鹽水、含緩沖鹽的水溶液、或者葡萄糖注射液等溶媒，復(fù)溶后即形成100-300nm的混懸液，每Iml的混懸液含難溶性藥物可以為I?5mg，優(yōu)選為2mg。
[0025]本發(fā)明除特殊說明，所用的百分比都是重量百分比。
[0026]本發(fā)明所用的原料或者試劑，均市售可得。
[0027]目前，我們選取的難溶性藥物的臨床研究已十分成熟，因此我們不再做具體實(shí)驗(yàn)，我們將僅對(duì)制得的納米混懸液的粒徑、釋放等做些研究。
[0028]采用Zetasizer粒徑分布儀、透射電鏡等對(duì)納米混懸液進(jìn)行表征。
[0029]本發(fā)明的注射用難溶性食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液具有制備工藝簡(jiǎn)單、可長(zhǎng)期存放等優(yōu)點(diǎn)。
【專利附圖】

【附圖說明】:
[0030]圖1為實(shí)例I所制得的紫杉醇P -乳球蛋白納米混懸液的TEM圖。由圖中可見，& -乳球蛋白包覆紫杉醇納米晶體，該納米晶體呈棒狀，粒徑在100-300nm之間。[0031]圖2為實(shí)例2所制得的紫杉醇P -乳球蛋白納米混懸液粒徑分布圖，縱坐標(biāo)為占顆粒總體積的百分比，橫坐標(biāo)為顆粒粒徑。
[0032]圖3為實(shí)例3中所制得的紫杉醇P -乳球蛋白納米混懸液在pH7.4磷酸鹽緩沖液中的溶出曲線
[0033]圖4為實(shí)驗(yàn)例I與牛血清蛋白(BSA)的穩(wěn)定性對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0034]圖5為實(shí)驗(yàn)例2藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)中小鼠的存活率圖
[0035]圖6為實(shí)驗(yàn)例2藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)中小鼠的相對(duì)腫瘤生長(zhǎng)率圖
【具體實(shí)施方式】:
[0036]下面用實(shí)例來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受其限制。下列實(shí)施例中未注明具體的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。
[0037]實(shí)例I
[0038]
【權(quán)利要求】
1.一種難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液，其特征在于其組分和各組分占微球總量的重量百分比分別為: 難溶性藥物:5-90 %， 食物蛋白:10-80%，和 凍干保護(hù)劑:5-60 %，其中最優(yōu)比例為40-50%的難溶性藥物，40-50%的食物 蛋白以及5-10%的凍干保護(hù)劑。
2.如權(quán)利要求1所述的難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液，其所述的食物蛋白可以是￠-乳球蛋白、大豆蛋白、乳清蛋白及其相應(yīng)的單體，其中最優(yōu)蛋白為￠-乳球蛋白。
3.如權(quán)利要求1所述的難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液，其特征在于，所述的難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液還含有PH調(diào)節(jié)劑，選自鹽酸、氫氧化鈉、檸檬酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽緩沖液等中一種或其以任何比例混合的混合物。
4.一種如權(quán)利要求1?3任一項(xiàng)所述的注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)將難溶性藥物原料藥加入丙酮中，超聲溶解后作為有機(jī)相；本發(fā)明中活性藥物可選自疏水性藥物如紫杉醇、多西紫杉醇、伊立替康、5-氟尿嘧啶、卡莫司汀、阿霉素、苯芥膽甾醇、哌泊舒凡、他莫昔芬、洛莫司汀、藤黃酸、冬凌草甲素、鬼白毒素或它們的組合，其中最優(yōu)藥物為紫杉醇； 2)將食物蛋白粉末加入到水中或者緩沖溶液中，攪拌溶解后置于沸水中加熱變性0.5-lh ； 3)將凍干保護(hù)劑加入到稀釋后的熱變性后的食物蛋白溶液中，攪拌溶解后調(diào)節(jié)pH至7-9作為水相； 4)在攪拌的條件下將有機(jī)相加入到水相中，30s后探頭超聲5-10min，將所得的溶液通過微孔濾膜過濾除菌，置于潔凈的容器中； 6)將過濾除菌后的溶液在_30°C?_50°C條件下冷凍，經(jīng)冷凍干燥凍干，即得。
5.如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟I)所述的有機(jī)相中的難溶性溶液濃度是每I毫升丙酮含I?50毫克的難溶性藥物，10毫克尤佳；步驟3)中所述的水相中食物蛋白和凍干保護(hù)劑濃度分別是每I毫升溶液中含0.1-1毫克的食物蛋白，含1-20毫克的凍干保護(hù)劑，其中蛋白優(yōu)選濃度為Img / ml,凍干保護(hù)劑優(yōu)選濃度為0.1mg / ml。
6.如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟4)中所述的攪拌條件是轉(zhuǎn)速不低于1200轉(zhuǎn)/分鐘。
7.包含權(quán)利要求1?4任一項(xiàng)所述的注射用難溶性藥物食物蛋白穩(wěn)定化納米混懸液。
【文檔編號(hào)】A61K45/00GK103432072SQ201310418111
【公開日】2013年12月11日 申請(qǐng)日期:2013年9月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月11日
【發(fā)明者】尹莉芳, 何偉, 李永吉, 武占楠, 趙海偉 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)