專利名稱：三磷酸腺苷或其可藥用鹽在制備治療子宮內(nèi)膜異位癥的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及三磷酸腺苷(ATP)或其可藥用鹽在制備用于治療子宮內(nèi)膜異位癥的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
子宮內(nèi)膜異位癥是生育期女性常見的婦科良性疾病，發(fā)病率可高達(dá)10% 15%。其病理特點(diǎn)是子宮內(nèi)膜腺體或子宮內(nèi)膜間質(zhì)出現(xiàn)在宮腔被覆內(nèi)膜和宮體肌層以外的任何部位。子宮內(nèi)膜異位癥病灶多分布于宮骶韌帶、卵巢、或子宮直腸間隙，主要引發(fā)疼痛、不孕及盆腔包塊三大臨床問題。腹腔鏡是目前診斷子宮內(nèi)膜異位癥的金標(biāo)準(zhǔn)和首選的治療手段。 子宮內(nèi)膜異位癥的治療原則是根據(jù)患者年齡、癥狀、病變部位、病情嚴(yán)重程度和范圍以及患者對生育的要求情況等全面分析，實(shí)施個體化治療方案?？梢圆捎盟幬铩⑹中g(shù)或手術(shù)聯(lián)合藥物等治療方法。1、手術(shù)治療目的是切除病灶和恢復(fù)解剖結(jié)構(gòu)。包括腹腔鏡手術(shù)和開腹手術(shù)。但復(fù)發(fā)率較高，大于20%。這種治療是有創(chuàng)傷的，成本較高，有手術(shù)并發(fā)癥的可能性。2、藥物治療目的是對于臨床確診的患者手術(shù)治療前先用藥物治療。這樣，可以使子宮內(nèi)膜異位病灶縮小、軟化，利于手術(shù)順利進(jìn)行。手術(shù)后應(yīng)用藥物治療可減少術(shù)后復(fù)發(fā)及手術(shù)粘連的發(fā)生。藥物治療的機(jī)理是降低雌激素水平。大致分為避孕藥、高效孕激素、雄激素類衍生物、促性腺激素釋放激素激動劑(GnRH-a)等幾類。各種藥物療效相似，但都具有各種各樣的副作用。此外，除了避孕藥，其他的藥物費(fèi)用較高。I) 口服避孕藥(0CS):通過阻斷卵泡的發(fā)育，減少雌激素的產(chǎn)生，使子宮內(nèi)膜萎縮，減少經(jīng)血倒流，緩解子宮內(nèi)膜異位癥癥狀。作為一線藥物常用復(fù)方地索高諾酮(Marvelon，媽富隆)或者達(dá)英-35。副作用是部分患者出現(xiàn)惡心、嘔吐、頭痛、頭暈、體重增加和情緒波動等。因避孕藥中的雌、孕激素會刺激子宮肌瘤長大，故有肌瘤者慎用。這種療法造成類似妊娠的閉經(jīng)，稱假孕療法。適用于輕度子宮內(nèi)膜異位癥患者。2)孕激素可反饋性抑制下丘腦-垂體-卵巢軸，通過抑制排卵降低體內(nèi)雌激素水平。此外，還可以直接作用于異位的子宮內(nèi)膜，使之過度蛻膜變，進(jìn)而萎縮壞死。常用藥物有炔諾酮(婦康片)，甲地孕酮(婦寧片)和安宮黃體酮等。炔諾酮副反應(yīng)類似達(dá)那唑，有時還有惡心、嘔吐等消化道癥狀。甲地孕酮和安宮黃體酮的雄激素不良反應(yīng)較輕。用藥期間應(yīng)定期檢查肝功能。因?yàn)樵屑に貢碳ぷ訉m肌瘤長大，故有肌瘤者慎用。已作為二線治療子宮內(nèi)膜異位癥疼痛患者的選擇藥物，適用于輕中度患者。3)達(dá)那唑直接與子宮內(nèi)膜雌、孕激素受體結(jié)合，抑制內(nèi)膜細(xì)胞增生，最終導(dǎo)致子宮內(nèi)膜萎縮。因其不良反應(yīng)重，臨床應(yīng)用逐漸減少。適用于中度子宮內(nèi)膜異位癥患者。主要副作用有起斑，痔瘡，油性皮膚，液體滯留，體重增加，多毛癥，嗓音改變，短暫的肝臟氨基轉(zhuǎn)移酶升高，頭痛，胃腸道功能紊亂，性欲減退，潮熱，乳房縮小，緊張，抑郁，痙攣性疼痛，食欲改變。
4)孕三烯酮是合成的19 一去甲睪酮衍生物一三烯炔諾酮，國產(chǎn)者藥物名為孕三烯酮。具有抗雌激素、抗孕激素和抗促性腺激素的作用，能使異位的子宮內(nèi)膜萎縮。其作用減少下腦及垂體軸的促性腺激素的分泌，控制異位內(nèi)膜的生長，直接作用于異位病灶，使其萎縮退化。其不良反應(yīng)發(fā)生率和達(dá)那唑相似，唯程度較輕。5)促性腺激素釋放激素類似物(GnRH-a):是三線治療子宮內(nèi)膜異位癥疼痛患者選擇藥物，適用于中、重度子宮內(nèi)膜異位癥患者。雖然GnRH-a可顯著緩解子宮內(nèi)膜異位癥患者癥狀，但由于其嚴(yán)重的低雌激素副反應(yīng)而限制其長期連續(xù)治療。并且價格較高。6)GnRH-a+反向添加療法應(yīng)用GnRH_a與另一種或幾種藥物合用，如甾體激素、降鈣素、雙磷酸鹽等以防治其不良反應(yīng)，即為反向添加療法。對于不能耐受的患者，如未行子宮切除，則可放置左炔諾酮宮內(nèi)節(jié)育器(曼月樂)作長期治療。7)米非司酮是孕激素拮抗劑，連續(xù)服用可降低FSH和LH，進(jìn)而抑制排卵，還能通 過競爭性占據(jù)子宮內(nèi)膜孕酮受體而產(chǎn)生較強(qiáng)孕激素拮抗作用，使子宮內(nèi)膜腺體分泌活性減少，進(jìn)而萎縮。長期服用可導(dǎo)致不排卵，故青春期婦女均不適選用。部分患者有輕度潮熱、出汗、小關(guān)節(jié)痛和下腹痛等。8)芳香化酶抑制劑子宮內(nèi)膜異位癥是雌激素依賴性疾病，芳香化酶是雌激素合成的關(guān)健，故芳香化酶的研究成為子宮內(nèi)膜異位癥的一個新領(lǐng)域，芳香化酶抑制劑對常規(guī)治療失敗的子宮內(nèi)膜異位癥患者可以獲得良好的療效，是有前景的治療藥物。目前常用的代表藥有阿那曲唑和來曲唑。但臨床還沒有普遍使用。價格較高。目前，在子宮內(nèi)膜異位癥的治療方面缺乏標(biāo)準(zhǔn)化的治療規(guī)范，每種方法治療都存在一定程度的缺陷。手術(shù)治療有創(chuàng)傷，并且復(fù)發(fā)率較高；對于中重度的子宮內(nèi)膜異位癥患者藥物治療價格昂貴，副作用大，療效有限。因此，有必要尋找治療子宮內(nèi)膜異位癥無創(chuàng)、有效、廉價的方法和藥物。三磷酸腺苷是一種高能化合物，由I分子腺苷、I分子核糖和3分子磷酸組成，簡稱ATP。目前臨床上常用的三磷酸腺苷二鈉片和注射液主要用于補(bǔ)充能量，用于進(jìn)行性肌萎縮，腦出血后遺癥、心功能不全、心肌疾患及肝炎等的輔助治療。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及三磷酸腺苷(ATP)或其可藥用鹽在制備用于治療子宮內(nèi)膜異位癥的藥物中的應(yīng)用。在一個實(shí)施方案中，所述可藥用鹽為鈉鹽。在一個實(shí)施方案中，所述藥物為口服制劑、注射制劑或局部施用制劑。在一個實(shí)施方案中，所述藥物用于以2-7mg/kg的劑量施用。


圖1為子宮內(nèi)膜異位癥的組織形態(tài)學(xué)變化。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
建立子宮內(nèi)膜異位癥動物模型
在子宮內(nèi)膜異位癥的研究當(dāng)中，臨床患者的子宮內(nèi)膜異位癥組織的獲取有限，因此建立子宮內(nèi)膜異位癥動物模型非常必要。自1922年Jacobson首次通過子宮內(nèi)膜組織自體移植腹腔，建立兔的子宮內(nèi)膜異位癥模型以來，子宮內(nèi)膜異位癥的動物模型已日漸成熟。目前，國內(nèi)外常用大鼠、兔、獼猴、狒狒、小鼠建立子宮內(nèi)膜異位癥模型。獼猴、狒狒因價格昂貴，限制了其在子宮內(nèi)膜異位癥模型中的應(yīng)用。鼠類與人類基因99%相同，價格便宜，容易操作與飼養(yǎng)，觀察周期短，因此成為人們建立模型的主要選擇。鼠類中大鼠生命力較強(qiáng)，激素水平較高，性周期短且規(guī)律，因此選擇大鼠建模對移植物的成活和移植后的觀察均較為有利。發(fā)明人選用36只雌性成熟的SPF級SD大鼠，建立子宮內(nèi)膜異位癥模型，經(jīng)鑒定有23只SD大鼠造模成功，成功率為64%。具體的動物實(shí)驗(yàn)步驟如下
(1)從北京大學(xué)人民醫(yī)院動物中心獲得36只性成熟的S PF級健康未交配雌性SD大鼠；
(2)1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉；
(3)常規(guī)消毒后取大鼠下腹正中、恥骨聯(lián)合上Icm做一約3cm的縱切口；
(4)進(jìn)腹腔后在膀胱背側(cè)找到子宮；
(5)游離右側(cè)子宮，近端離子宮角約Icm處結(jié)扎，遠(yuǎn)端離卵巢約Icm處結(jié)扎；
(6)切除結(jié)扎線中間的子宮組織，迅速置于盛有無菌生理鹽水的培養(yǎng)皿中，剪取5mmX5mm大小的子宮內(nèi)膜組織(含肌層)三塊；
取內(nèi)膜組織一塊，用4-0號的可吸收線以內(nèi)膜面貼于左側(cè)卵巢周圍的脂肪組織上，并且四角縫合；
再取內(nèi)膜組織一塊，用4-0號的可吸收線以內(nèi)膜面貼于右側(cè)腹壁上，并且四角縫合；
(7)縫合腹直肌切口，并向腹腔滴入40萬U/只注射用青霉素鈉；
(8)在腹壁切口右側(cè)，于腹肌的皮下筋膜層之間打一隧道，以正好能植入另一塊子宮內(nèi)膜組織為宜。取最后一塊子宮內(nèi)膜組織平整的植入右側(cè)隧道底部，使內(nèi)膜面緊貼腹?。?br> (9)剩余子宮組織置于福爾馬林溶液中；
(10)常規(guī)關(guān)腹;
(11)術(shù)后每只大鼠腹腔注射40萬U注射用青霉素鈉預(yù)防感染，連續(xù)3天；
(12)術(shù)后第5天開始，每只SD大鼠每5天肌注苯甲酸雌二醇注射液一次(0.lmg/kg),連續(xù)3次；
(13)清潔環(huán)境飼養(yǎng)，4周后剖腹觀察移植內(nèi)膜組織生長情況。(14)觀察到移植后的異位子宮內(nèi)膜生長良好，體積明顯增大，呈隆起透亮的小囊狀，內(nèi)部充滿積液，表面血管清晰可見(圖1)。形態(tài)學(xué)檢查可見子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞、腺體及間質(zhì)細(xì)胞生長，并有分泌活動以及陳舊性出血。根據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)，36只大鼠中經(jīng)過鑒定有23只建模成功，建模成功率為64%。實(shí)施例2
檢驗(yàn)ATP對子宮內(nèi)膜異位癥的治療作用 使用的藥物
孕三烯酮由北京紫竹藥業(yè)公司生產(chǎn)的孕三烯酮膠囊，用生理鹽水溶解。ATP :天津藥業(yè)焦作有限公司生產(chǎn)的三磷酸腺苷二鈉注射液，用生理鹽水稀釋。實(shí)驗(yàn)步驟
將造模成功的23只SD大鼠隨機(jī)分為3組，即陰性對照組(生理鹽水灌服組)10只，陽性對照組(孕三烯酮灌服組，每日0. 5mg/kg) 7只，ATP灌服組(三磷酸腺苷二鈉注射液灌服組，每日3.4mg/kg)6只。對照組的生理鹽水用量與ATP灌服組使用的藥物體積相同。每天按上述劑量灌胃，連續(xù)4周。4周后再次剖腹，取相應(yīng)部位的異位內(nèi)膜組織，置于福爾馬林溶液中，石蠟包埋，切片后染色。在顯微鏡下觀察子宮內(nèi)膜形態(tài)。病理結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)
+++表示異位生長的子宮內(nèi)膜生長狀態(tài)良好，間質(zhì)比較多，可見多個腺體；
++表示異位生長的子宮內(nèi)膜生長狀態(tài)欠佳，間質(zhì)明顯減少，可見1-2個擴(kuò)張的腺腔；+ 表示異位生長的子宮內(nèi)膜呈萎縮狀態(tài)，間質(zhì)少(只有++的1/2左右)，只有I個擴(kuò)張的腺腔；
-表示未見明顯內(nèi)膜組織，腺體消失。·結(jié)果
將生理鹽水組(第I組)、孕三烯酮組(第2組)和ATP灌服組(第3組)中的效果+++、++、+、-分別評分為3、2、1、0。然后記錄每組中每種評分的數(shù)量如下表所示
I效果評分I數(shù)i I_0_0_
I — I~5
I —2~2
1—3~3
2—0 ~0 2 — I~4 2 —2 ~3
2—3~0
3—0~4 3 — I ~2 3 —2 ~0 3 丨3 |o
從上表可見，第I組(生理鹽水組)評分為0、1、2、3的大鼠分別有0、5、2和3只，說明對于異位子宮內(nèi)膜沒有作用。第2組(孕三烯酮組)評分為0、1、2、3的大鼠分別有0、4、3、0只，說明異位的內(nèi)膜組織生長欠佳或萎縮，但不存在消失的情況。第3組(ATP灌服組)評分為0的有4只，評分為I的有2只，沒有評分為2和3的。說明該組中異位的子宮內(nèi)膜組織均萎縮或消失。發(fā)明人還采用SPSS17. 0軟件，錄入上述這三組的數(shù)據(jù)，進(jìn)行了兩獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)，計算出組間P值，從而進(jìn)一步評估上述數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果如下1.陰性對照組(生理鹽水灌服組)和陽性對照組(孕三烯酮灌服組)異位子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)的變化
權(quán)利要求
1.三磷酸腺苷或其可藥用鹽在制備用于治療子宮內(nèi)膜異位癥的藥物中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述可藥用鹽為鈉鹽。
3.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其中所述藥物為口服制劑、注射制劑或局部施用制劑。
4.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其中所述藥物用于以2-7mg/kg的劑量施用。
全文摘要
本發(fā)明涉及ATP或其可藥用鹽在制備用于治療子宮內(nèi)膜異位癥的藥物中的應(yīng)用。動物模型表明，相對于孕烯三酮，ATP或其可藥用鹽能夠有效地治療子宮內(nèi)膜異位癥。
文檔編號A61P15/00GK102988401SQ20121039439
公開日2013年3月27日 申請日期2012年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月17日
發(fā)明者昌曉紅, 崔恒, 魏麗惠, 李藝, 趙旸, 劉亞南, 高麗, 葉雪, 程洪艷, 馬瑞瓊 申請人:北京大學(xué)人民醫(yī)院