專利名稱：一種具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種中藥復(fù)方，具體涉及ー種具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方及其在制備治療舌磷癌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
舌癌是口腔癌中最常見的惡性腫瘤之一?？谇话┘窗l(fā)生在口腔的惡性腫瘤之總稱，是頭頸部較常見的惡性腫瘤之一，在全世界是居第六位的常見腫瘤，大部份屬于鱗狀上皮細(xì)胞癌，所謂的黏膜發(fā)生變異。近年來，舌癌的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，雖然現(xiàn)在舌癌的診斷和治療水平已有很大提高，但由于舌體活動頻繁，舌組織淋巴及血運(yùn)豐富，因而愈后 較差，其生存率仍不高。目前治療口腔黏膜惡性腫瘤國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界常規(guī)采用的治療方案為化學(xué)藥物治療、放射治療及手術(shù)切除等，這些方案在取得一定臨床療效的同時(shí)，隨著針對舌癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移機(jī)制的深入研究，也因化學(xué)藥物的毒副作用、放療造成的輻射傷害，以及手術(shù)方案性器官的全切或部分切除等導(dǎo)致的醫(yī)源性問題和相應(yīng)疾病，給患者帶來了巨大的痛苦，嚴(yán)重影響著患者的生命健康和生活質(zhì)量。因此很有必要在傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，研究開發(fā)出ー種抗舌鱗癌效果好，不良反應(yīng)低，易推廣應(yīng)用的中藥復(fù)方制劑。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供ー種抗舌鱗癌效果好，副作用小、服用方便的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，本發(fā)明的另ー個(gè)目的是提供從該中藥復(fù)方的制備方法和其在制備治療舌鱗癌藥物中的應(yīng)用。技術(shù)方案為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明提供的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，它是由下列重量份數(shù)的原料制成
冬瓜子10 20份、法半夏12 24份、膽南星10 20份、山茨菇12 24份、貓爪草10 20份、金蕎麥1(Γ20份、魚腥草1(Γ20份，仙鶴草15 30份、蘇木12 24份、紅花15 30份、沙參10 20份、玉竹10 20份、麥冬10 20份。作為優(yōu)選方案，以上所述的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，它是由下列重量份數(shù)的原料制成
冬瓜子10份、法半夏12份、膽南星10份、山茨菇12份、貓爪草10份、金蕎麥10份、魚腥草10份，仙鶴草15份、蘇木12份、紅花15份、沙參10份、玉竹10份、麥冬10份。本發(fā)明在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，辨證施治，并結(jié)合舌鱗癌的發(fā)病機(jī)理和發(fā)病癥狀，以抗癌解毒、清熱利濕、理氣化瘀、化痰軟堅(jiān)法抗癌，組方中貓爪草為養(yǎng)陰藥，味甘、辛，微溫，歸肝、肺經(jīng)，具有化痰散結(jié)，解毒消腫的功效；山慈姑味甘，性溫，歸肝、胃、脾經(jīng)，藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明具有很好的治咽喉腫痛，瘰疬，癰疽，瘡腫，抗腫瘤的活性。冬瓜子味甘，性寒，具有清肺化痰，消癰排膿的功能；法半夏性辛、溫，歸遮、置、腦經(jīng)，具有燥濕化痰等功效；膽南星味苦、微辛，涼，歸肺、肝、脾經(jīng)，具有清熱化痰，息風(fēng)定驚，可用于痰熱咳嗽，咯痰黃稠，中風(fēng)痰迷，癲狂驚癇。金蕎麥性涼，味辛、苦，有清熱解毒、活血化瘀、健脾利濕的作用；麥門冬養(yǎng)陰潤燥。玉竹味甘，性平。歸肺；胃經(jīng)；入心、腎、肺、肝、脾五臟，具有滋陰潤肺，養(yǎng)胃生津的功效；紅花性溫，味辛，活血通徑、散瘀止痛；仙鶴草味苦、澀，平，歸心、肝經(jīng)，具有收斂止血，止痢，殺蟲等功效；整方對舌鱗癌患者濕濁熱毒痰瘀互結(jié)，肝脾兩傷，氣陰兩虛，氣血雙虧具有很好的療效。本發(fā)明所述的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方的制備方法，具體包括以下步驟
按重量份數(shù)取中藥復(fù)方，加6至10倍量的水煎煮I至3次，毎次I至3小時(shí)，合并提取液，過濾，取濾液、濃縮，得濃縮液，加入正丁醇萃取 2至4次，得到正丁醇萃取液，濃縮，得到正丁醇活性部位。作為優(yōu)選方案，以上所述的具有抗舌磷癌作用的多糖提取物的制備方法，正丁醇的用量為濃縮液體積的2至5倍。本發(fā)明提供的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方在制備治療舌鱗癌藥物中的應(yīng)用，可以將中藥復(fù)方提取物和藥學(xué)上可接受的載體制成膠囊劑、微囊、片劑、顆粒劑或ロ服液劑型的藥物。 本發(fā)明提供的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方制成片劑時(shí)把抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方和載體乳糖或玉米淀粉，需要時(shí)加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，然后壓片制成片劑。本發(fā)明提供的抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方制成膠囊劑時(shí)把抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方和載體乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，然后裝膠囊制成膠囊劑。本發(fā)明提供的抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方制成顆粒劑時(shí)，把抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方和稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成顆粒劑。有益效果本發(fā)明提供的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方和現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)
(I)本發(fā)明提供的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，根據(jù)中醫(yī)藥理論和舌鱗癌的發(fā)病機(jī)制選取原料配伍組方，各組份配比科學(xué)合理，藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明提供的中藥復(fù)方具有很好的抗舌鱗癌的作用，長期使用無不良反應(yīng)，且本發(fā)明提供的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方可以方便的和藥學(xué)上可接受的載體制備成各種劑型的藥物，方便臨床服用。(2)目前研究表明PGE2可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的増殖，分化，轉(zhuǎn)移，抑制凋亡，促進(jìn)腫瘤血管生成的作用，并且與腫瘤的免疫逃避密切相關(guān)，腫瘤中許多組織PGE2的含量都明顯高于正常組。環(huán)氧合酶是前列腺素合成的關(guān)鍵酶，它介導(dǎo)由花生四烯酸合成前列腺素的起始步驟，其中PGE2是PGs的主要生物活性之一，腫瘤中增高的PGE2主要源于C0X-2途徑。舌鱗癌細(xì)胞中C0X-2表達(dá)呈強(qiáng)陽性，細(xì)胞中PGE2含量的多少與C0X-2的活性關(guān)系密切。特異性C0X-2抑制劑能夠明顯減少舌鱗癌細(xì)胞培養(yǎng)上清液中PGE2的含量和相關(guān)蛋白的表達(dá)，對舌鱗癌細(xì)胞増殖具有抑制作用。本發(fā)明使用ELASA法測定細(xì)胞中上清液中PGE2的含量，結(jié)果顯示，隨著藥物濃度的増加，舌鱗癌細(xì)胞SAS、TCA-8113細(xì)胞培養(yǎng)上清PGE2的含量減少(P〈0. 05)，結(jié)合MTT法與流式細(xì)胞術(shù)的結(jié)果，表明本發(fā)明提供的中藥復(fù)方能抑制舌鱗癌細(xì)胞PGE2的分泌與促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
具體實(shí)施方式
根據(jù)下述實(shí)施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實(shí)施例所描述的具體的物料配比、エ藝條件及其結(jié)果僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)也不會限制權(quán)利要求書中所詳細(xì)描述的本發(fā)明。實(shí)施例I
I、具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，它是由下列重量份數(shù)的原料制成
冬瓜子10份、法半夏12份、膽南星10份、山茨菇12份、貓爪草10份、金蕎麥10份、魚腥草10份，仙鶴草15份、蘇木12份、紅花15份、沙參10份、玉竹10份、麥冬10份。2、具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方的制備方法為
取冬瓜子10份、法半夏12份、膽南星10份、山茨菇12份、貓爪草10份、金蕎麥10份、魚腥草10份，仙鶴草15份、蘇木12份、紅花15份、沙參10份、玉竹10份、麥冬10份，加10 倍量的水煎煮3次，毎次2小時(shí)，合并提取液，過濾，取濾液、濃縮，得濃縮液，加入3倍正丁醇萃取4次，得到正丁醇萃取液，濃縮，得到正丁醇活性部位，加入玉米淀粉，加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，然后壓片制成片劑。實(shí)施例2
I、具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，它是由下列重量份數(shù)的原料制成
冬瓜子20份、法半夏24份、膽南星20份、山茨菇24份、貓爪草20份、金蕎麥20份、魚腥草20份，仙鶴草30份、蘇木24份、紅花30份、沙參20份、玉竹20份、麥冬20份。2、具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方的制備方法為
取冬瓜子20份、法半夏24份、膽南星20份、山茨菇24份、貓爪草20份、金蕎麥20份、魚腥草20份，仙鶴草30份、蘇木24份、紅花30份、沙參20份、玉竹20份、麥冬20份，加8倍量的水煎煮2次，毎次3小吋，合并提取液，過濾，取濾液、濃縮，得濃縮液，加入5倍正丁醇萃取4次，得到正丁醇萃取液，濃縮，得到正丁醇活性部位，加入載體乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，然后裝膠囊制成膠囊劑。實(shí)施例3抗舌磷癌實(shí)驗(yàn)研究
1、材料
1.1細(xì)胞株SAS細(xì)胞由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)鄭金華教授惠贈，舌鱗癌細(xì)胞株TCA-8113，購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫，本實(shí)驗(yàn)室傳代、保存。I. 2藥物本發(fā)明實(shí)施I提供的中藥復(fù)方提取物。1.3 主要試劑青霉素(山東魯抗)，硫酸鏈霉素(Amresco)，MTT (噻唑鹽，Genebase)，胰蛋白酶(南京生興)，EDTA(Sigma)，RPMI-1640 培養(yǎng)基(GIBC0)，碘化丙啶(PI，Sigma，美國)，RPMI-1640 (GIBC0),新生小牛血清(蘭州民海，Hyclone合資)，6孔培養(yǎng)板及24孔板(Corning產(chǎn)品)。PEG2檢測ELISA試劑盒(R&D公司)。1.4儀器超凈工作臺(蘇凈公司，SW-CJ-1F)，CO2培養(yǎng)箱(美國Thermo)，倒置顯微鏡(Olympus，X41 )，酶標(biāo)儀(Bio-Teck，P0WERWAVE340)。流式細(xì)胞儀 FAC SCantoTM 及分析軟件ModFit LT 3.0 (BD公司，美國)。2、方法
2.I細(xì)胞培養(yǎng)及傳代SAS、TCA-8113細(xì)胞株用含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液(青霉素100μ g/ml，硫酸鏈霉素100μ g/ml)，置37°C、5% CO2、100%濕度的培養(yǎng)箱常規(guī)培養(yǎng)，傳代。
2. 2 MTT法測細(xì)胞活性取對數(shù)生長期(約90%鋪滿)的SAS、TCA-8113細(xì)胞，制備細(xì)胞懸液5X 105/ml，接種于96孔板，每孔加IOOul，18 24h鋪滿后棄上清，用PBS洗2次，除盡血清，將實(shí)施提供的中藥復(fù)方提取物按生藥濃度160、80、40、20、10 mg/ml的含藥RPMI-1640液，不加藥物的RPMI-1640液作為對照，設(shè)4個(gè)重復(fù)孔。培養(yǎng)72h后，棄去培養(yǎng)上清，加入含O. 5mg/ml MTT的PBS溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄上清后，每孔加200 μ I ニ甲基亞砜(DMS0)，充分溶解甲瓚顆粒后，酶標(biāo)儀490nm檢測OD值。計(jì)算不同濃度的中藥提取物對TCA-8113和SAS細(xì)胞的增殖抑制率，試驗(yàn)重復(fù)三次，計(jì)算增殖活性抑制率。2.3 ELISA檢測培養(yǎng)上清PGE2含量取用實(shí)施I提供的中藥復(fù)方提取物作用的SAS、TCA-8113細(xì)胞培養(yǎng)上清，室溫平衡Ih后，3000rpsX IOmin離心除去沉淀，留取細(xì)胞培養(yǎng)上清，嚴(yán)格按照試劑盒操作說明檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清PGE2含量。2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)用SPSS 13. O軟件進(jìn)行分析，用mean±s表示，進(jìn)行t-test檢驗(yàn),/X0. 05表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,/X0. 01表示具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3 結(jié)果
3. I對細(xì)胞増殖活性的抑制作用
不同濃度的中藥提取物能夠抑制SAS、TCA-8113細(xì)胞生長，并且抑制率與濃度呈劑量依賴關(guān)系。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表I所示
表I中藥提取物作用72h對SAS、TCA-8113細(xì)胞增殖活性的抑制作用(平均數(shù)土み
權(quán)利要求
1.一種具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，其特征在于，它是由下列重量份數(shù)的原料制成 冬瓜子10 20份、法半夏12 24份、膽南星10 20份、山茨菇12 24份、貓爪草10 20份、金蕎麥1(Γ20份、魚腥草1(Γ20份，仙鶴草15 30份、蘇木12 24份、紅花15 30份、沙參10 20份、玉竹10 20份、麥冬10 20份。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，其特征在于，它是由下列重量份數(shù)的原料制成 冬瓜子10份、法半夏12份、膽南星10份、山茨菇12份、貓爪草10份、金蕎麥10份、魚腥草10份，仙鶴草15份、蘇木12份、紅花15份、沙參10份、玉竹10份、麥冬10份。
3.權(quán)利要求I或2所述的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方的制備方法，其特征在于包括以下步驟 取權(quán)利要求I或2所述重量份數(shù)的中藥復(fù)方，加6至10倍量的水煎煮I至3次，每次I至3小時(shí)，合并提取液，過濾，取濾液、濃縮，得濃縮液，加入正丁醇萃取2至4次，得到正丁醇萃取液，濃縮，得到正丁醇活性部位。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的具有抗舌磷癌作用的多糖提取物的制備方法，其特征在于，正丁醇的用量為濃縮液體積的2至5倍。
5.權(quán)利要求I或2所述的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方在制備防治舌鱗癌藥物中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方在制備防治舌鱗癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于把中藥復(fù)方提取物和藥學(xué)上可接受的載體制成膠囊劑、微囊、片劑、顆粒劑或口服液劑型的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方及其制備方法，該中藥復(fù)方由下列重量份數(shù)的原料制成冬瓜子10~20份、法半夏12~24份、膽南星10~20份、山茨菇12~24份、貓爪草10~20份、金蕎麥10~20份、魚腥草10~20份，仙鶴草15~30份、蘇木12~24份、紅花15~30份、沙參10~20份、玉竹10~20份、麥冬10~20份。本發(fā)明提供的具有抗舌鱗癌作用的中藥復(fù)方，根據(jù)中醫(yī)藥理論和舌磷癌的發(fā)病機(jī)制選取原料配伍組方，各組份配比科學(xué)合理，藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明提供的中藥復(fù)方能明顯降低PGE2的含量，具有很好的抗舌磷癌的作用，長期使用無不良反應(yīng)，有望開發(fā)成為新一代抗舌磷癌的藥物。
文檔編號A61K36/898GK102670986SQ201210193160
公開日2012年9月19日 申請日期2012年6月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月13日
發(fā)明者馮穎, 孟玉芬, 張軍峰, 張旭, 詹瑧 申請人:南京中醫(yī)藥大學(xué)