專(zhuān)利名稱(chēng)：萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖支架的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥品技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖支架的制備方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代生活中交通傷和高能量損傷比較常見(jiàn)，此類(lèi)損傷的骨折粉碎程度和周?chē)浗M織破壞范圍更為嚴(yán)重復(fù)雜，骨髓炎不僅發(fā)生率增加，而且多伴有骨缺損，治療難度更大。另一方面，金屬物植入骨內(nèi)如內(nèi)固定、人工關(guān)節(jié)等感染導(dǎo)致慢性骨髓炎也十分常見(jiàn)。因此，慢性骨髓炎的防治仍是臨床工作中比較棘手的難題之一。生物膜細(xì)菌是由粘附于實(shí)體表面的細(xì)菌細(xì)胞和細(xì)菌自身分泌的聚合性粘多糖包裹細(xì)菌所組成的結(jié)構(gòu)性細(xì)菌群落。Conterton等人發(fā)現(xiàn)生物膜細(xì)菌是慢性頑固性細(xì)菌感染的主要原因，并提出骨髓炎中形成生物膜的細(xì)菌主要為陽(yáng)性球菌。由于生物膜對(duì)細(xì)菌具有很強(qiáng)的保護(hù)作用，研究表明，生物膜細(xì)菌對(duì)抗生素的抗藥性比浮游的非生物膜細(xì)菌強(qiáng)100 1000倍，因此，一旦細(xì)菌生物膜在死骨、內(nèi)固定、人工關(guān)節(jié)表面滋生，將導(dǎo)致慢性骨髓炎的反復(fù)發(fā)作，需要手術(shù)清除死骨及周?chē)腥窘M織或取出植入物，并于術(shù)后進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間抗感染治療。脂質(zhì)體是磷脂分散在水中定向排列而形成的具有單室或多室膜結(jié)構(gòu)的囊泡，它可以包封脂溶性或水溶性藥物，其結(jié)構(gòu)類(lèi)似于生物膜。脂質(zhì)體可降解，且基本無(wú)毒，以脂質(zhì)體為載體制成的脂質(zhì)體抗生素具有良好的靶向細(xì)菌生物膜作用，協(xié)助抗生素穿透生物膜，從而增強(qiáng)抗生素的活性。研究表明:以脂質(zhì)體為載體制成的脂質(zhì)體抗生素具有良好的靶向細(xì)菌生物膜作用，顯著增強(qiáng)抗生素的活性。同時(shí)，脂質(zhì)體還可緩和高濃度抗生素毒性，研究證實(shí)高濃度抗生素可抑制內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)。因此高濃度抗生素可影響骨折愈合初期骨折斷端肉芽組織的形成，延長(zhǎng)骨折愈合時(shí)間。脂質(zhì)體還具有延長(zhǎng)藥物療效，避免耐藥性和改變給藥途徑等優(yōu)點(diǎn)。目前，脂質(zhì)體抗生素系統(tǒng)的應(yīng)用已十分廣泛。Ashraf 等人研究證實(shí)靜脈注射脂質(zhì)體抗生素可有效治療兔慢性骨髓炎。但是脂質(zhì)體本身具有不穩(wěn)定性和聚集融合性等缺點(diǎn)。并且人體網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)中的肝臟枯否細(xì)胞及脾臟巨噬細(xì)胞對(duì)靜脈注射的脂質(zhì)體抗生素具有很強(qiáng)的清除作用，大大降低了抗生素到達(dá)骨組織感染灶的濃度?？股鼐忈屜到y(tǒng)的應(yīng)用曾使大量慢性感染性骨缺損患者達(dá)到臨床治愈，而且選擇合適的骨替代材料作為載體不僅可以治療感染，還可促進(jìn)骨缺損的愈合。因此，將脂質(zhì)體抗生素負(fù)載于骨替代材料中，手術(shù)清創(chuàng)后植入局部一方面可抗細(xì)菌生物膜感染，另一方面還可治療骨缺損，從而為細(xì)菌生物膜感染的防止提供新的思路?？股貜?fù)合支架在局部治療感染，特別是深部骨感染方面具有顯著療效。但是，在諸如骨髓炎等頑固性感染病例中，常常由格蘭氏-陽(yáng)性球菌造成并容易形成具有耐藥能力的生物膜，抗生素復(fù)合支架的療效受到了限 制。國(guó)內(nèi)外研究證實(shí)，脂質(zhì)體對(duì)生物膜具有很強(qiáng)的吸附親和力，脂質(zhì)體比同等含量的游離藥對(duì)金黃色葡萄球菌生物膜的生長(zhǎng)具有更強(qiáng)的抑制作用。有理由認(rèn)為，抗生素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合的支架，為治療深部頑固性骨感染提供了一條嶄新的思路。但是在目前常用的支架中，例如玻璃珠或骨陶瓷等，他們的制備過(guò)程常常需要很高的溫度或者熱壓燒結(jié)；而另外一些如丙烯酸骨水泥則需要用到有機(jī)溶劑，這樣使藥物或脂質(zhì)體與其復(fù)合，只能在空白支架制成后采用浸泡或真空負(fù)壓法，容易造成脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)的破壞并且不能保證脂質(zhì)體在其中能夠均勻分布。納米輕基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖(Nano-hydroxyapatite/chitosan/konjac glucomannan, n-HA/CS/KGM)支架,其內(nèi)在的諸如良好的生物相容性和生物活性等骨生物特性，使其特別適合于骨科應(yīng)用，更為重要的是，他的制備可以在室溫下進(jìn)行，這樣脂質(zhì)體成分可以在其制備過(guò)程中直接加入并能保護(hù)脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)，也能使脂質(zhì)體在該支架的均勻分布。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖支架的制備方法，該方法可以達(dá)到更好的抑菌效果，可以提高骨髓炎的治愈率。本發(fā)明的萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖支架的制備方法，其特征在于，包括1)將殼聚糖溶于3.375g/ml的檸檬酸溶液中，形成殼聚糖/檸檬酸混合液；2)將磷酸與殼聚糖檸檬酸混合液共同溶于水，配置700ml的溶液，記為溶液A ;3)將氫氧化鈣溶于水,加入氨水,是的溶液中PH值=10±0.05 ;記為溶液B ；4)控制低加速度與攪拌速率，將溶液A和溶液B以汞滴定法反應(yīng)；5)將反應(yīng)產(chǎn)物陳化7天后冷凍干燥即可得到水解動(dòng)物蛋白/殼聚糖復(fù)合粉體；6)將萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體溶液加入水解動(dòng)物蛋白/殼聚糖復(fù)合粉體，磁力攪拌至完全均勻；7)在步驟6)的溶液中加入魔芋葡苷聚糖，使其質(zhì)量含量為34.5% ±0.03%，同時(shí)繼續(xù)磁力攪拌，直至攪拌自行終止；8)將攪拌均勻的溶膠注入模具中；9)將步驟8)中的樣品與-50°C和7.9Pa真空下冷凍干燥至完全干燥；將支架取出，放置于4°C陰暗無(wú)菌環(huán)境保存。與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的有益效果為:通過(guò)上述步驟I)至9)的操作，可以作為新的載藥體在臨床抗生物膜細(xì)菌感染上起到良好作用；達(dá)到更好的抑菌效果，可以提高骨髓炎的治愈率。
具體實(shí)施例方式下面對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。 本發(fā)明的萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖支架的制備方法，其特征在于，包括1)將殼聚糖溶于3.375g/ml的檸檬酸溶液中，形成殼聚糖/檸檬酸混合液；
2)將磷酸與殼聚糖檸檬酸混合液共同溶于水，配置700ml的溶液，記為溶液A ；3)將氫氧化鈣溶于水,加入氨水,是的溶液中PH值=10±0.05 ;記為溶液B ；4)控制低加速度與攪拌速率，將溶液A和溶液B以汞滴定法反應(yīng)；5)將反應(yīng)產(chǎn)物陳化7天后冷凍干燥即可得到水解動(dòng)物蛋白/殼聚糖復(fù)合粉體；6)將萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體溶液加入水解動(dòng)物蛋白/殼聚糖復(fù)合粉體，磁力攪拌至完全均勻；7)在步驟6)的溶液中加入魔芋葡苷聚糖，使其質(zhì)量含量為34.5% ±0.03%，同時(shí)繼續(xù)磁力攪拌，直至攪拌自行終止；8)將攪拌均勻的溶膠注入模具中；9)將步驟8)中的樣品與-50°C和7.9Pa真空下冷凍干燥至完全干燥；將支架取出，放置于4°C陰暗無(wú)菌環(huán)境保存。通過(guò)上述步驟I)至9)的操作，可以作為新的載藥體在臨床抗生物膜細(xì)菌感染上起到良好作用；達(dá)到更好的抑菌效果，可以提高骨髓炎的治愈率。以上所述僅是本發(fā)明的 優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和變型，這些改進(jìn)和變型也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖支架的制備方法，其特征在于，包括 1)將殼聚糖溶于3.375g/ml的朽1檬酸溶液中，形成殼聚糖/朽1檬酸混合液； 2)將磷酸與殼聚糖檸檬酸混合液共同溶于水，配置700ml的溶液，記為溶液A; 3)將氫氧化鈣溶于水，加入氨水，是的溶液中PH值=10±0.05 ;記為溶液B ; 4)控制低加速度與攪拌速率，將溶液A和溶液B以汞滴定法反應(yīng)； 5)將反應(yīng)產(chǎn)物陳化7天后冷凍干燥即可得到水解動(dòng)物蛋白/殼聚糖復(fù)合粉體； 6)將萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體溶液加入水解動(dòng)物蛋白/殼聚糖復(fù)合粉體，磁力攪拌至完全均勻； 7)在步驟6)的溶液中加入魔芋葡苷聚糖，使其質(zhì)量含量為34.5% ±0.03%，同時(shí)繼續(xù)磁力攪拌，直至攪拌自行終止； 8)將攪拌均勻的溶膠注入模具中； 9)將步驟8)中的樣品與-50°C和7.9Pa真空下冷凍干燥至完全干燥；將支架取出，放置于4°C陰暗無(wú)菌環(huán)境保存。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥品技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖支架的制備方法；本發(fā)明的萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡苷聚糖支架的制備方法，該方法可以達(dá)到更好的抑菌效果，可以提高骨髓炎的治愈率；包括將殼聚糖溶于3.375g/ml的檸檬酸溶液中，形成殼聚糖/檸檬酸混合液后將磷酸與殼聚糖檸檬酸混合液共同溶于水，配置700ml的溶液。
文檔編號(hào)A61L31/02GK103212113SQ201210014780
公開(kāi)日2013年7月24日 申請(qǐng)日期2012年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月18日
發(fā)明者徐永清 申請(qǐng)人:徐永清