專利名稱：一種車前子有效部位及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種車前子有效部位及其制備方法和應(yīng)用，具體說，是涉及一種用于治療糖尿病和高血壓的車前子有效部位及其制備方法和在制備糖尿病和高血壓藥物中的應(yīng)用，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
當(dāng)前，糖尿病和高血壓已成為嚴(yán)重危害現(xiàn)代人類健康的慢性疾病，其發(fā)病原因和機(jī)理目前并不是十分清楚，但有一點(diǎn)是比較公認(rèn)的，即高血壓和糖尿病均是多原因的慢性終身性疾病，是體內(nèi)幾個(gè)系統(tǒng)代謝發(fā)生紊亂的結(jié)果。目前用于治療糖尿病和高血壓的藥物主要是化學(xué)合成藥物，這些藥物對(duì)糖尿病和高血壓具有一定的治療作用，但同時(shí)也伴隨著許多副作用，如消化道的不良反應(yīng)、血脂和血糖水平的異常、心率過緩以及咳嗽哮喘、一定的器官毒性等。同時(shí)，由于糖尿病和高血壓的發(fā)生往往是相關(guān)的，需要長(zhǎng)期跟蹤治療，這樣就給予政府和患者以巨大的精神和物質(zhì)壓力。因此，從中藥中尋找治療糖尿病和高血壓的新辦法，將會(huì)產(chǎn)生良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。車前子為常用中藥，《中國藥典》QOlO版)以車前科車前屬植物車前Plantago asiatica L.或平車前Plantago depressa Willd.的干燥成熟種子作為車前子的基源，具有清熱利尿，滲濕通淋，明目祛痰等功效，傳統(tǒng)上用于治療急性腎小球腎炎、咳喘和黃疸性肝炎等。車前子也可配伍其他中藥使用，例如復(fù)方龍膽瀉肝湯中配伍車前子起到清熱利濕的作用。但目前還沒有關(guān)于車前子提取物用于治療糖尿病和高血壓的有效部位及其制備方法的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于治療糖尿病和高血壓的車前子有效部位及其制備方法和其在制備糖尿病和高血壓藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的車前子有效部位，是車前子乙醇提取物經(jīng)過大孔樹脂分離純化得到，含有車前素A和麥角留苷，且車前素A與麥角留苷的重量之比為1 1 1 5，兩者重量之和占有效部位總重量的40 80%。進(jìn)一步，所述的車前素A與麥角甾苷的重量之比為1 2 1 4，兩者重量之和占有效部位總重量的50 70%。所述的車前子乙醇提取物推薦為車前子經(jīng)過2 6倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次得到的提取物；優(yōu)選為車前子經(jīng)過3 5倍體積的體積分?jǐn)?shù)為70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次得到的提取物。所述的車前子有效部位的制備方法，包括如下具體步驟a)將車前子用2 6倍(優(yōu)選3 5倍)體積的體積分?jǐn)?shù)為60 90 % (優(yōu)選 70 80% )的乙醇水溶液回流提取2 6次(優(yōu)選3 5次)，收集提取液，過濾、濃縮干溶劑；
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b)將步驟a)制備的濃縮提取液用5 1 1 5(優(yōu)選為3 1 1 3)的重量/體積比的水稀釋得到的混懸水溶液加入HPD-100大孔樹脂柱，再用體積分?jǐn)?shù)為20 60% (優(yōu)選30 50%)的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干溶劑。所述的車前子推薦為車前科植物車前(Plantago asiatica L.)和/或平車前 (Plantago depressa ffilld.)的干燥成熟種子。所述的車前子推薦粉碎成直徑小于或等于6mm的顆粒。所述的車前子有效部位在制備治療糖尿病和/或高血壓藥物制劑中的應(yīng)用。所述的車前子有效部位與藥學(xué)上可接受的藥物載體組成的組合物在制備治療糖尿病和/或高血壓藥物制劑中的應(yīng)用。所述的藥物制劑形式可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、 薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴劑、貼劑；優(yōu)選口服劑型，如膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、丹劑、膏劑等。所述的口服劑型可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色齊U、調(diào)味劑和濕潤(rùn)劑，必要時(shí)可對(duì)片劑進(jìn)行包衣。適宜的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑；適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉；適宜的潤(rùn)滑劑包括，例如硬脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤(rùn)劑包括十二烷基硫酸鈉。本發(fā)明得到的車前子有效部位可以促進(jìn)胰島素分泌，降低空腹血糖，同時(shí)可有效降低動(dòng)物血壓值，降低血清中血管緊張素II的含量，顯示出良好的治療糖尿病和高血壓的藥用價(jià)值。


圖1為本發(fā)明得到的車前子有效部位在正離子模式下得到的指紋圖譜。圖2為本發(fā)明得到的車前子有效部位在正離子模式下得到的質(zhì)譜圖。圖3為車前素A的化學(xué)結(jié)構(gòu)式圖。圖4為本發(fā)明得到的車前子有效部位在負(fù)離子模式下得到的指紋圖譜。圖5為本發(fā)明得到的車前子有效部位在負(fù)離子模式下得到的質(zhì)譜圖。圖6為麥角甾苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)式圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)、完整的說明。實(shí)施例1將車前子粉碎成平均直徑為4mm的顆粒，過篩，用4倍體積的體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇水溶液回流提取4次，收集提取液，過濾、濃縮干溶劑；用1 1重量/體積比的水稀釋上述濃縮提取液，得到混懸水溶液；將得到的混懸水溶液加入HPD-100大孔樹脂柱，用體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干溶劑，即得車前子有效部位。稱取制得的車前子有效部位樣品適量，用0.1% (V V)甲酸的水溶液與甲醇按
4體積比為90 10混合的溶液溶解在容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，制成每ImL溶液含Ig樣品，并利用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(UPLC-MQ進(jìn)行指紋圖譜分析，分析條件如下色譜條件Waters，Acquity UPLC BEH C18 (50 X 2. 1謹(jǐn))色譜柱；流動(dòng)相A相為含 0. 1% (V V)甲酸的水溶液；流動(dòng)相B相為甲醇；流速為OJmin;柱溫為40°C ；進(jìn)樣量為 2μ L ；檢測(cè)模式為正負(fù)離子全掃描監(jiān)測(cè)。質(zhì)譜條件采用電噴霧離子源，正離子全掃描檢測(cè)模式進(jìn)行數(shù)據(jù)采集時(shí)，離子源溫度為120°C ；去溶劑溫度為300°C ；氮?dú)鉃槿ト軇┖湾F孔氣，流速分別為500L/h和50L/h ；毛細(xì)管電壓為2. 2千伏；錐孔電壓為23伏。負(fù)離子全掃描檢測(cè)模式進(jìn)行數(shù)據(jù)采集時(shí)，離子源溫度為120°C ；去溶劑溫度為300°C ；氮?dú)鉃槿ト軇┖湾F孔氣，流速分別為500L/h和50L/h ； 毛細(xì)管電壓為2. 5千伏；錐孔電壓為32伏。圖1為得到的車前子有效部位在正離子模式下得到的指紋圖譜，圖2為得到的車前子有效部位在正離子模式下得到的質(zhì)譜圖；結(jié)合圖1和圖2可見得到的車前子有效部位中含有車前素A(其化學(xué)結(jié)構(gòu)式圖見圖3所示)。圖4為得到的車前子有效部位在負(fù)離子模式下得到的指紋圖譜，圖5為得到的車前子有效部位在負(fù)離子模式下得到的質(zhì)譜圖；結(jié)合圖4和圖5可見得到的車前子有效部位中含有麥角甾苷(其化學(xué)結(jié)構(gòu)式圖見圖6所示)。另外，分析測(cè)得本實(shí)施例制備的車前子有效部位中含有的車前素A與麥角留苷的重量之比為1 3，兩者重量之和占有效部位總重量的60%。實(shí)施例2將車前子粉碎成平均直徑為Imm的顆粒，過篩，用3倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇水溶液回流提取5次，收集提取液，過濾、濃縮干溶劑；用1 3重量/體積比的水稀釋上述濃縮提取液，得到混懸水溶液；將得到的混懸水溶液加入HPD-100大孔樹脂柱，用體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干溶劑，即得車前子有效部位。經(jīng)分析得知本實(shí)施例所制備的車前子有效部位中含有的車前素A與麥角留苷的重量之比為1 2，兩者重量之和占有效部位總重量的50%。實(shí)施例3將車前子粉碎成平均直徑為6mm的顆粒，過篩，用5倍體積的體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇水溶液回流提取3次，收集提取液，過濾、濃縮干溶劑；用1 2重量/體積比的水稀釋上述濃縮提取液，得到混懸水溶液；將得到的混懸水溶液加入HPD-100大孔樹脂柱，用體積分?jǐn)?shù)為30%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干溶劑，即得車前子有效部位。經(jīng)分析得知本實(shí)施例所制備的車前子有效部位中含有的車前素A與麥角留苷的重量之比為1 4，兩者重量之和占有效部位總重量的70%。實(shí)施例4選用健康雄性小鼠，(22±》g，隨機(jī)分為正常組和造模組，造模組腹腔注射鏈脲佐菌素150mg/kg，4a!后剪尾測(cè)隨機(jī)血糖，篩選血糖值超過10. lmmol/1的小鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)，并分為模型組和給藥組。給藥組每日給藥車前子有效部位90mg/kg。連續(xù)口服灌胃給藥4周，給藥結(jié)束后，測(cè)定小鼠血清胰島素和空腹血糖值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，結(jié)果以χ士s表示。
表1車前子有效部位對(duì)I型糖尿病小鼠的降糖作用
權(quán)利要求
1.一種車前子有效部位，其特征在于由車前子乙醇提取物經(jīng)過大孔樹脂分離純化得到，含有車前素A和麥角留苷，且車前素A與麥角留苷的重量之比為1 1 1 5，兩者重量之和占有效部位總重量的40 80%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的車前子有效部位，其特征在于所述的車前素A與麥角甾苷的重量之比為1 2 1 4，兩者重量之和占有效部位總重量的50 70%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的車前子有效部位，其特征在于所述的車前子乙醇提取物為車前子經(jīng)過2 6倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次得到的提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的車前子有效部位，其特征在于所述的車前子乙醇提取物為車前子經(jīng)過3 5倍體積的體積分?jǐn)?shù)為70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次得到的提取物。
5.一種權(quán)利要求1所述的車前子有效部位的制備方法，其特征在于，包括如下具體步驟a)將車前子用2 6倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次， 收集提取液，過濾、濃縮干溶劑；b)將步驟a)制備的濃縮提取液用5 1 1 5的重量/體積比的水稀釋得到的混懸水溶液加入HPD-100大孔樹脂柱，再用體積分?jǐn)?shù)為20 60%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干溶劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的車前子有效部位的制備方法，其特征在于，包括如下具體步驟a)將車前子用3 5倍體積的體積分?jǐn)?shù)為70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次， 收集提取液，過濾、濃縮干溶劑；b)將步驟a)制備的濃縮提取液用3 1 1 3的重量/體積比的水稀釋得到的混懸水溶液加入HPD-100大孔樹脂柱，再用體積分?jǐn)?shù)為30 50%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干溶劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的車前子有效部位的制備方法，其特征在于所述的車前子為車前科植物車前和/或平車前的干燥成熟種子。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的車前子有效部位的制備方法，其特征在于所述的車前子粉碎成直徑小于或等于6mm的顆粒。
9.權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的車前子有效部位在制備治療糖尿病和/或高血壓藥物制劑中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的車前子有效部位與藥學(xué)上可接受的藥物載體組成的組合物在制備治療糖尿病和/或高血壓藥物制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種車前子有效部位及其制備方法和應(yīng)用。所述的車前子有效部位是由車前子乙醇提取物經(jīng)過大孔樹脂分離純化得到，含有車前素A和麥角甾苷，且車前素A與麥角甾苷的重量之比為1∶1～1∶5，兩者重量之和占有效部位總重量的40～80％。本發(fā)明得到的車前子有效部位可以促進(jìn)胰島素分泌，降低空腹血糖，同時(shí)可有效降低動(dòng)物血壓值，降低血清中血管緊張素II的含量，顯示出良好的治療糖尿病和高血壓的藥用價(jià)值，可單一或與藥學(xué)上可接受的藥物載體組成的組合物應(yīng)用于制備治療糖尿病和/或高血壓藥物制劑中。
文檔編號(hào)A61P9/12GK102225095SQ20111017251
公開日2011年10月26日 申請(qǐng)日期2011年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月23日
發(fā)明者季光, 楊莉, 王崢濤, 祁萌 申請(qǐng)人:上海中醫(yī)藥大學(xué)