專(zhuān)利名稱(chēng)：刺五加總苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥提取領(lǐng)域，涉及一種提取刺五加總苷的方法。
背景技術(shù)：
刺五加為五加科植物，它的根、根莖和莖，莖葉、果實(shí)均可作藥用。又名五加參、刺拐棒，主要分布在我國(guó)東北、華北地區(qū)，以及朝鮮、日本及俄羅斯等地，在祖國(guó)醫(yī)學(xué)中作為藥物廣泛應(yīng)用已有悠久的歷史。具有益氣健脾、補(bǔ)腎安神的功效，用于脾腎陽(yáng)虛，體虛乏力，食欲不振，腰膝酸痛，失眠多夢(mèng)。刺五加根和根莖的主要成分之一總苷為酚苷和黃酮苷類(lèi)化合物，它是其生物活性成分之一?？傑赵诟透o中的含量分別占干藥材重量的0.69Γ0.9%和0.69Tl.5%。從文獻(xiàn)資料上知刺五加苷能改善衰老大鼠免疫功能，延緩免疫衰老；刺五加總皂苷具有改善家兔血液流變性、抑制血栓形成作用，而此作用是通過(guò)解聚紅細(xì)胞聚集性、降低全血黏度完成的；刺五加總皂苷對(duì)犬急性心肌缺血有較好的保護(hù)作用，此外還有抗疲勞、抗腫瘤及抗炎等作用?，F(xiàn)有技術(shù)中，從刺五加浸膏中純化制得總苷類(lèi)有效成分主要是采用大孔吸附樹(shù)脂的方法，大孔吸附樹(shù)脂是一類(lèi)不含交換基團(tuán)且有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附樹(shù)脂，具有良好的大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和較大的比表面積，可以通過(guò)物理吸附從水溶液中有選擇地吸附有機(jī)物。大孔樹(shù)脂通常分為非極性、弱極性、中極性和強(qiáng)極性，物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸、堿及有機(jī)溶劑，對(duì)有機(jī)物選擇性良好，不受無(wú)機(jī)鹽類(lèi)和強(qiáng)離子、低分子化合物存在的影響。采用大孔吸附樹(shù)脂純化刺五加總苷類(lèi)有效成分，具有快速、便捷的優(yōu)點(diǎn)。專(zhuān)利號(hào)為200710301682. X的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利公開(kāi)了一種刺五加提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將刺五加水浸膏溶解于水中，加入沉淀溶劑，沉淀，靜置，過(guò)濾，濾液備用；沉淀物用上述沉淀溶劑洗滌，洗滌液與濾液合并，回收溶劑，得粗提取藥液，將粗提取藥液攪拌，過(guò)濾，得到濾液，備用；(2)將過(guò)濾液的ρΗ值調(diào)整為2 9，通過(guò)弱極性或非極性大孔吸附樹(shù)脂層析進(jìn)行吸附，首先，將水或能與水以任意比例相溶的低濃度有機(jī)溶劑PH值調(diào)整為2 9，以此為第1種洗脫溶劑，流經(jīng)樹(shù)脂柱，進(jìn)行洗脫；所述低濃度有機(jī)溶劑選自 0 20%的甲醇水溶液，0 20%的乙醇水溶液或0 20%的丙酮水溶液；(3)將能與水以任意比例相溶的較高濃度的有機(jī)溶劑的PH值調(diào)為2 10，以此為第2種洗脫溶劑，流經(jīng)樹(shù)脂柱，接取第2種洗脫液的餾分并將其濃縮成稠膏，即得所述刺加五提取物；所述較高濃度有機(jī)溶劑選自20 60%的甲醇水溶液，20 60%的乙醇水溶液或20 60%的丙酮水溶液。 上述方法相對(duì)較復(fù)雜。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的發(fā)明目的是提供一種刺五加總苷的制備方法。為達(dá)到上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種刺五加總苷的制備方法，包括以下步驟(1)將刺五加水浸膏用甲醇溶解，超聲，使溶解均勻，用微孔濾膜過(guò)濾，所得濾液備
用；
(2)采用大孔樹(shù)脂柱層析法分離步驟(1)所得濾液，其中，固定相為HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂，洗脫溶劑1為體積百分?jǐn)?shù)小于30%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2為體積百分?jǐn)?shù)在30% 以上(包括30%)的乙醇濃度水溶液；先使用3飛倍柱體積的洗脫溶劑1洗脫，然后使用3 6倍柱體積的洗脫溶劑2進(jìn)行洗脫，并收集洗脫溶劑2對(duì)應(yīng)的洗脫液。上述技術(shù)方案中，步驟(1)所述微孔濾膜的微孔孔徑為0. 4 0. 5 μ m，優(yōu)選 0. 45 μ m0優(yōu)選的技術(shù)方案中，步驟( 中，洗脫溶劑1選自體積百分?jǐn)?shù)If 2 的乙醇水溶液，洗脫溶劑2選自體積百分?jǐn)?shù)觀 32%的乙醇水溶液；更優(yōu)選的技術(shù)方案中，洗脫溶劑 1選自體積百分?jǐn)?shù)20%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2選自體積百分?jǐn)?shù)30%的乙醇水溶液，采用體積百分?jǐn)?shù)30%的乙醇水溶液作為洗脫溶劑可以將所需成分充分洗脫，而且相對(duì)較低濃度的乙醇水溶液成本較低，在工業(yè)中大規(guī)模應(yīng)用時(shí)更加經(jīng)濟(jì)。最優(yōu)選的技術(shù)方案中，步驟( 具體為采用大孔樹(shù)脂柱層析法分離步驟(1)所得濾液，其中，固定相為HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂，洗脫溶劑1為體積百分?jǐn)?shù)20%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2為體積百分?jǐn)?shù)30%的乙醇濃度水溶液；先使用3倍柱體積的洗脫溶劑1洗脫，然后使用3 6倍柱體積的洗脫溶劑2進(jìn)行洗脫，從第2個(gè)柱體積開(kāi)始，收集洗脫溶劑 2對(duì)應(yīng)的洗脫液。上述技術(shù)方案中，步驟(2)中固定相填柱時(shí)，填柱的直徑和高度的比為1 4 8。進(jìn)一步的技術(shù)方案中，可采用吸光光度法或/和高效液相色譜法對(duì)上述洗脫溶劑 1或2所產(chǎn)生的餾分進(jìn)行定性和定量分析。進(jìn)一步的技術(shù)方案中，將收集的洗脫液濃縮成稠膏，即得刺五加總苷提取物。由于上述技術(shù)方案運(yùn)用，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有下列優(yōu)點(diǎn)
1.由于本發(fā)明采用大孔樹(shù)脂柱層析法分離刺五加水浸膏的醇溶液，固定相為HPD-450 型大孔吸附樹(shù)脂，洗脫溶劑1為體積百分?jǐn)?shù)小于30%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2為體積百分?jǐn)?shù)在30%以上(包括30%)的乙醇濃度水溶液；先使用3飛倍柱體積的洗脫溶劑1洗脫，然后使用3 6倍柱體積的洗脫溶劑2進(jìn)行洗脫，并收集洗脫溶劑2對(duì)應(yīng)的洗脫液，不僅可以成功將刺五加總苷和雜質(zhì)分離，最終提取得到的總苷含量較高。2.由于本發(fā)明采用的固定相為HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂，而且使用相對(duì)較低濃度的乙醇水溶液(體積分?jǐn)?shù)30%)即可獲得理想的分離和富集的結(jié)果，例如采用本發(fā)明所述技術(shù)方案時(shí)，洗下的總苷含量為27wt%，比刺五加醇提浸膏總苷含量提高了 4. 04倍，紫丁香苷占總苷的18. 63wt% ；相對(duì)地，現(xiàn)有技術(shù)專(zhuān)利號(hào)為200710301682. X的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利的實(shí)施例4中采用DlOl樹(shù)脂洗下總苷含量為24. 57%，紫丁香苷占總苷的12. 8%，并且使用的是 60%甲醇洗脫；因此，無(wú)論是從總苷含量、紫丁香苷含量及工業(yè)成本方面考慮，本發(fā)明的技術(shù)方案具有優(yōu)越性。3.本發(fā)明采用HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂為固定相，并優(yōu)化了洗脫程序和洗溶液， 可以使用相對(duì)較簡(jiǎn)單的方法和相對(duì)較低濃度的洗脫溶液達(dá)到理想的分離和富集效果，并且重復(fù)性好。


圖1是實(shí)施例一中10%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖2是實(shí)施例一中20%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖3是實(shí)施例一中30%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖4是實(shí)施例一中40%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖5是實(shí)施例一中50%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖6是實(shí)施例一中60%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖7是實(shí)施例一中70%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖8是實(shí)施例一中80%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖9是實(shí)施例一中90%乙醇洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖； 圖10是實(shí)施例二中刺五加醇提總樣的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ； 圖11是實(shí)施例二中五加醇提總樣的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm ； 圖12是實(shí)施例二中以20%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為 203nm ；
圖13是實(shí)施例二中以20%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為 265nm ；
圖14是實(shí)施例二中以30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為 203nm ；
圖15是實(shí)施例二中以30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為 265nm ；
圖16是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖17是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖18是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖19是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖20是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖21是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖22是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖23是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖M是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖25是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖26是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖27是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖觀是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖四是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖30是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖31是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖32是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖33是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖34是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖35是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖36是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖37是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖38是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖39是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖40是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖41是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖42是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖43是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖44是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；圖45是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖46是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖47是實(shí)施例三中第1柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為；
圖48是實(shí)施例三中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖49是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；
圖50是實(shí)施例三中第3柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖，檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述
實(shí)施例一采用梯度洗脫法純化刺五加總苷，優(yōu)化洗脫液的濃度參數(shù)
(1)采用現(xiàn)有技術(shù)對(duì)^kg刺五加進(jìn)行提取，得35L刺五加提取液，即為是刺五加水浸膏，將刺五加水浸膏用少量甲醇溶解，超聲，使溶解均勻，用0. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾，所得濾液備用；
(2)常溫常壓下，以HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂為固定相，將固定相填柱，然后采用大孔樹(shù)脂柱層析法分離步驟(1)所得濾液，依次采用體積百分?jǐn)?shù)10%、20%、30%、40%、50%、60%、 70%,80%,90%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，每種濃度的乙醇水溶液的用量為3 4倍柱體積，收集每個(gè)濃度乙醇水溶液對(duì)應(yīng)的洗脫液并旋蒸至干，用少量甲醇超聲溶解，用吸管吸出，存放入小瓶中，揮干稱(chēng)重；
(3)采用高效液相色譜法測(cè)定法檢測(cè)流出的每一個(gè)濃度對(duì)應(yīng)的第一個(gè)柱體積的洗脫液，檢測(cè)波長(zhǎng)265nm，獲得的圖譜參見(jiàn)圖1 圖9，由圖可知，40%乙醇濃度之后保留時(shí)間在 5min之后沒(méi)有成分洗下，而濃度小于或等于20%的乙醇水溶液作為洗脫溶液無(wú)法將大部分刺五加總苷洗脫出來(lái)。其中，高效液相色譜法包括以下步驟
對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取刺五加苷B3mg，置50ml容量瓶中，加入甲醇至刻度，搖勻，即得。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制精密稱(chēng)取刺五加B對(duì)照品適量加甲醇溶解并定量稀釋成每毫升含刺五加苷B20，40，60，80，IOOyg的溶液，分別進(jìn)樣10 μ 1，注入色譜儀記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，求得回歸方程。供試品溶液的制備取樣品粉末0.3g，精密稱(chēng)定，置50ml容量瓶中，加入甲醇至刻度，搖勻，即得。其中，色譜柱為Waters-Cosmosil5C18-PAQ柱，流動(dòng)相為體積比15 85的乙腈和水的混合物；流速為lml/min ；柱溫為30°C ；柱壓10. 2MPa。實(shí)施例二 小試放大實(shí)驗(yàn)取HPD-450大孔樹(shù)脂5kg裝柱，經(jīng)預(yù)處理后水洗至中性，柱體積為7L。取刺五加提取液6. 5L(184. 6g醇提取物)上樣，分別依次用水、體積百分?jǐn)?shù)20%、30%的乙醇水溶液洗脫， 洗脫液的體積21L (3個(gè)柱體積)，收集各濃度乙醇水溶液對(duì)應(yīng)的洗脫液餾分。然后如實(shí)施例一，采用高效液相色譜法，對(duì)各濃度洗脫液對(duì)應(yīng)的餾分進(jìn)行分析檢測(cè)，區(qū)別在于，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm和沈5歷；結(jié)果參見(jiàn)圖10 15，由圖可知，20%乙醇還不能完全洗下所需物，事后經(jīng)過(guò)20%乙醇反復(fù)洗也得到論證。實(shí)施例三小試放大實(shí)驗(yàn)(洗脫溶液為體積分?jǐn)?shù)30%的乙醇水溶液)
取HPD-450大孔樹(shù)脂5kg裝柱，經(jīng)預(yù)處理后水洗至中性，柱體積為7L。取刺五加提取液6. 5L (184. 6g醇提取物)上樣，連續(xù)用體積百分?jǐn)?shù)30%的乙醇水溶液洗脫，分別收集每一份柱體積的洗脫液餾分，重復(fù)做了 6組；然后對(duì)各餾分進(jìn)行分析檢測(cè)，檢測(cè)方法參照實(shí)施例一，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm和^5nm，結(jié)果參見(jiàn)圖沈 50，從圖知，30%乙醇濃度洗脫具有穩(wěn)定性。對(duì)實(shí)施例中第2柱體積的30%乙醇為洗脫液對(duì)應(yīng)餾分的高效液相色譜譜圖進(jìn)行分析，采用吸光度法定量分析其中組分，然后取其平均值，可得結(jié)論HPD450樹(shù)脂具有較好的純化能力，洗下總苷含量為27%，比刺五加醇提浸膏總苷含量提高了 4. 04倍，紫丁香苷占總苷的 18. 63%。所述吸光度測(cè)定法包括以下步驟
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制稱(chēng)取紫丁香苷2. 03mg，用甲醇定容至50mL，精密量取1. 5,2. 0,2. 5、 3. 0,3. 5mL，分別定容至10ml，于處測(cè)定吸光度。供試品的制備刺五加-甲醇溶液稱(chēng)取刺五加提取物4. 9Img —甲醇定容至 10ml，于處測(cè)定吸光度。和現(xiàn)有技術(shù)相比，專(zhuān)利號(hào)為200710301682. X的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利的實(shí)施例4中采用 DlOl樹(shù)脂洗下總苷含量為24. 57%，紫丁香苷占總苷的12. 8%，并且使用的是60%甲醇洗脫。因此，無(wú)論是從總苷含量、紫丁香苷含量及工業(yè)成本方面考慮，本實(shí)施例的方法更有優(yōu)勢(shì)，所以其在工業(yè)領(lǐng)域具有較好的應(yīng)用前景。實(shí)施例四一種刺五加總苷的制備方法，包括以下步驟
(1)將刺五加水浸膏用甲醇溶解，超聲，使溶解均勻，用微孔濾膜過(guò)濾，所得濾液備
用；
(2)采用大孔樹(shù)脂柱層析法分離步驟(1)所得濾液，其中，固定相為HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂，洗脫溶劑1為體積百分?jǐn)?shù)20%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2為體積百分?jǐn)?shù)在30%的乙醇濃度水溶液；先使用3倍柱體積的洗脫溶劑1洗脫，然后使用3倍柱體積的洗脫溶劑2進(jìn)行洗脫，并收集洗脫溶劑2對(duì)應(yīng)的洗脫液。上述技術(shù)方案中，步驟(1)所述微孔濾膜的微孔孔徑為0.45 μ m。上述技術(shù)方案中，步驟O)中固定相填柱時(shí)，填柱的直徑和高度的比為1 6。進(jìn)一步的技術(shù)方案中，將收集的洗脫液濃縮成稠膏，即得刺五加總苷提取物。
權(quán)利要求
1.一種刺五加總苷的制備方法，包括以下步驟(1)將刺五加水浸膏用甲醇溶解，超聲，使溶解均勻，用微孔濾膜過(guò)濾，所得濾液備用；其特征在于，還包括步驟O)采用大孔樹(shù)脂柱層析法分離步驟(1)所得濾液，其中，固定相為HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂，洗脫溶劑1為體積百分?jǐn)?shù)小于30%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2為體積百分?jǐn)?shù)在30%以上的乙醇濃度水溶液；先使用3飛倍柱體積的洗脫溶劑1洗脫， 然后使用3飛倍柱體積的洗脫溶劑2進(jìn)行洗脫，并收集洗脫溶劑2對(duì)應(yīng)的洗脫液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述刺五加總苷的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，洗脫溶劑1 選自體積百分?jǐn)?shù)If 2 的乙醇水溶液，洗脫溶劑2選自體積百分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述刺五加總苷的制備方法，其特征在于，洗脫溶劑1選自體積百分?jǐn)?shù)20%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2選自體積百分?jǐn)?shù)30%的乙醇水溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述刺五加總苷的制備方法，其特征在于，步驟( 具體為采用大孔樹(shù)脂柱層析法分離步驟(1)所得濾液，其中，固定相為HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂，洗脫溶劑1為體積百分?jǐn)?shù)20%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2為體積百分?jǐn)?shù)30%的乙醇濃度水溶液；先使用3倍柱體積的洗脫溶劑1洗脫，然后使用3飛倍柱體積的洗脫溶劑2進(jìn)行洗脫，從第2 個(gè)柱體積開(kāi)始，收集洗脫溶劑2對(duì)應(yīng)的洗脫液。
全文摘要
本發(fā)明屬于中藥提取領(lǐng)域，涉及一種提取刺五加總苷的方法，包括以下步驟(1)將刺五加水浸膏用甲醇溶解，超聲，使溶解均勻，用微孔濾膜過(guò)濾，所得濾液備用；(2)采用大孔樹(shù)脂柱層析法分離步驟(1)所得濾液，其中，固定相為HPD-450型大孔吸附樹(shù)脂，洗脫溶劑1為體積百分?jǐn)?shù)小于30%的乙醇水溶液，洗脫溶劑2為體積百分?jǐn)?shù)在30%以上的乙醇濃度水溶液；先使用3~6倍柱體積的洗脫溶劑1洗脫，然后使用3～6倍柱體積的洗脫溶劑2進(jìn)行洗脫，并收集洗脫溶劑2對(duì)應(yīng)的洗脫液。本發(fā)明不僅可以成功將刺五加總苷和雜質(zhì)分離，最終提取得到的總苷含量較高，而且工業(yè)成本低。
文檔編號(hào)A61P25/20GK102232980SQ20111011211
公開(kāi)日2011年11月9日 申請(qǐng)日期2011年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月29日
發(fā)明者李海霞, 李賀然, 樊潔, 胡文 申請(qǐng)人:蘇州大學(xué)