專利名稱：一種具有降血糖作用的制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有降血糖作用的制劑及其制備方法，具體是一種由日本毛連菜 制成的降血糖藥物的制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
毛連菜屬植物包括日本毛連菜、毛連菜(原亞種毛連菜、單毛毛連菜)、滇苦菜、新 疆毛連菜，一年生、兩年生、多年生分枝草本。日本毛連菜G0Zcri1S japoncia Thunb)為菊科植物，又名槍刀菜。在我國主要分 布于河北、山西、陜西、吉林、黑龍江等地，其中山西主要分布在太原及周邊縣市，交城，五臺 等地區(qū)。生于山坡草地、灌叢中或田邊、河邊，海拔650 3650米。日本及俄羅斯也有分布。 全草入蒙藥，具有清熱、消腫及止痛作用。目前還未見將日本毛連菜用于降血糖的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種降血糖作用的制劑及其制備方法。解決上述問題，本發(fā)明所述的制劑是由日本毛連菜的水提物制成。上述具有降血糖作用的制劑的制備方法是將日本毛連菜洗凈，晾干，切成小段，加 蒸餾水浸泡后，提取2-3次，每次2-池，過濾提取液，收集濾液、合并濾液，離心，取上清，減 壓濃縮至稠膏A ；將日本毛連菜洗凈，晾干，切成小段，粉碎，過60目的篩，得粉末B，將日本 毛連菜水提物稠膏A與適量日本毛連菜生藥材粉末B充分混勻，A與B的質(zhì)量混合比例為 8.5 :1 13.5 :1，于60°C以下干燥，粉碎，得生藥材和藥材提取物的混合粉末C，再制備成 制劑。日本毛連菜生藥材粉末B的選擇通過考察不同粒度的生藥材粉末與水提取物稠 膏A混合的均勻性和分散性，確定留取可以過60目篩的粉末，使得在使用盡可能少的粉末 的情況下達到適宜的分散效果。未能通過60目篩的粉末可以進一步的粉碎，這么作可以最 大限度的節(jié)約生藥材。干燥條件的選擇生藥材粉末B與提取物稠膏A混合后，在干燥過程中通過對溫 度和時間的考察，最終確定為于60°C以下真空干燥箱中干燥90min-120min，這樣既可以充 分去除水分和降低粘度，又可以保證其適宜的硬度，易于粉碎。日本毛連菜水提取以前，加入日本毛連菜質(zhì)量15-20倍的蒸餾水浸泡，使藥材全 部被水淹沒。但是，日本毛連菜生藥材在清洗的過程要采用活水快速沖洗，不可浸泡，以免 損失水溶性的成分。提取方式可以是回流提取或溫浸提取或超聲提取。所述的稠膏A在80-85°C測定的比重為1. 20-1. 34，大約是將IOOg生藥材的提取 物減壓濃縮至20-40ml，這樣既保證了當使用日本毛連菜生藥材粉末與稠膏A混合時，盡可 能使用較少的生藥材粉末即可混合均勻，又可以有適宜的分散性，這一步對日本毛連菜粉 末C的制備極其重要。利用混合粉末C，采用公知的方法可以制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑或口服液。在制顆粒劑的過程中，通過對溫度的考察，最終確定為80°C以下真空干燥箱中干燥，這樣 既可以保證其硬度且穩(wěn)定其中的藥用成分，又有適宜的溶解性。日本毛連菜水提取物含有 較多的水溶性成分，糖分含量較高，醇度小，不易降低提取物的粘度；醇度大，導致分散性太 大，都不適宜制粒，最終確定的方案為首先用適量的95%乙醇將混合的粉末C浸潤，再加適 量蒸餾水混勻，過20目篩制粒，于80°C以下干燥，整粒，分裝，即得日本毛連菜水提物顆粒 劑。本發(fā)明所述的日本毛連菜水提物具有降血糖功效，可用于制備降血糖藥物，其有 效成分測定及降血糖作用的確立方法如下
1.日本毛連菜水提取物中多糖及黃酮的含量測定
多糖含量測定
1)葡萄糖對照品溶液的制備
精密稱取105°c干燥至恒重的無水葡萄糖對照品0. 0104 g，加適量水溶解，轉(zhuǎn)移至100 ml容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得104 μδ/πι1的溶液。2)葡萄糖準曲線的制備
取葡萄糖對照品溶液0.1 ml,0.2 ml,0.4 ml,0.6 ml,0.8 ml, 1.0 ml各加蒸餾水至2.0 ml，然后各加苯酚1.0 ml，搖勻，迅速滴加濃硫酸5.0 ml，搖勻，置沸水浴中加熱15 min，然 后冷卻至室溫。在490 nm處測定吸光度值。以一系列葡萄糖對照品溶液的濃度為橫坐標， 吸光度值為縱坐標，建立標準曲線，并進行回歸處理。得葡萄糖標準曲線回歸方程式Y(jié)=0. 0156χ 一 0. 0076 (r=0. 9994)，葡萄糖在5. 2 μδ/πιΓ52 Pg/ml之間線性關(guān)系良好。3)日本毛連菜多糖含量測定
精密量取日本毛連菜總供試品溶液適量，按照標準曲線方法顯色后測定其吸光度，代 入回歸方程，計算總黃酮含量。黃酮含量測定
1)蘆丁對照品溶液的制備
精密稱取干燥至恒重的蘆丁標準品18. 60mg，用60%的乙醇(ν/ν)溶解，并轉(zhuǎn)移至100 ml容量瓶中定容，搖勻，制成0. 186mg/ml的蘆丁對照品溶液。2)蘆丁標準曲線的制備
精密吸取蘆丁標準溶液OmUO. 5ml、1. 0ml,2. 0ml,3. 0ml,4. 0ml,5. Oml分別置干燥試 管中，各加60 %乙醇至5. 0ml，加5%亞硝酸鈉溶液0. 3ml，搖勻，6 min后加10%的硝酸鋁 溶液0. 3ml，搖勻，6 min后加4 %的氫氧化鈉溶液，搖勻，加蒸餾水定容至IOml，搖勻，放 置15 min，試樣空白作參比，在波長505nm處測定其吸光度。以濃度C&g/ml)為橫坐標，吸 光度A為縱坐標得蘆丁標準曲線回歸方程Y = 0. 0146Χ-0. 0062 (r = 0. 9991)，結(jié)果顯示 蘆丁在9. 3 93Pg/ml之間線性關(guān)系良好。3)日本毛連菜總黃酮含量測定
精密量取日本毛連菜總黃酮供試品溶液適量，按照標準曲線方法顯色后測定其吸光 度，代入回歸方程，計算總黃酮含量。2.日本毛連菜水提取物降血糖作用的確立，其方法如下
對正常小鼠血糖的影響，昆明種小鼠隨機分為正常對照組，日本毛連菜總提物高、中、低劑量組，陽性對照組；連續(xù)給藥14天，于末次給藥前小鼠禁食不禁水他，給藥后繼續(xù)禁食 不禁水，眼眶后靜脈叢采血，3500r/min離心15min，取血清測各組的空腹血糖值。對四氧嘧啶致小鼠高血糖的影響，小鼠尾靜脈注射新鮮配制的四氧嘧啶造成高血 糖模型，取合格模型小鼠，隨機分為5組，陽性對照組，日本毛連菜總提物高、中、低劑量組； 糖尿病模型組；另取重量相近的正常小鼠作為正常對照組。連續(xù)給藥14天后，于末次給藥 前小鼠禁食不禁水他，給藥后繼續(xù)禁食不禁水后2h，眼眶后靜脈叢采血，測定各組的空腹 血糖值。對腎上腺素致小鼠高血糖的影響，取合格昆明種小鼠，隨機分為6組，給藥組和陽 性對照組劑量同上，模型對照組和空白對照組灌胃等體積生理鹽水，連續(xù)給藥10天。于末 次給藥前小鼠禁食不禁水他，給藥后繼續(xù)禁食不禁水后，除正常對照組外，每只小鼠腹 腔注射腎上腺素0. 2mg/kg,正常對照組則腹腔注射等容量生理鹽水。30min后，眼眶后靜脈 叢采血，各組的空腹血糖值。
四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型的建立四氧嘧啶的注射量直接關(guān)系到小鼠的成模率、死 亡率、成模后血糖值以及給藥后的降糖效果，給藥量大雖然可以使成模率升高，但是血糖值 過高，死亡率增加，完不成整個給藥過程，通過對四氧嘧啶用量的考察，最終確定為尾靜脈 注射四氧嘧啶40-60mg/kg，0. lml/10g的給藥量，成模率達到70%以上，成模后血糖值適宜、 穩(wěn)定，幾乎沒有死亡，能完成整個實驗過程，可以充分證明藥物的降糖效果。根據(jù)動物實驗，日本毛連菜水提取物能顯著降低四氧嘧啶以及腎上腺素致糖尿病 模型小鼠的血糖值，與陽性藥格列本脲的降糖效果沒有統(tǒng)計學差異。結(jié)果見表1、表2。且 對正常小鼠的血糖值沒影響，結(jié)果見表3。
權(quán)利要求
1.一種具有降血糖作用的制劑，其特征在于該制劑是由日本毛連菜的水提物制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有降血糖作用的制劑的制備方法，其特征在于將日 本毛連菜洗凈，晾干，切成小段，加蒸餾水浸泡后，提取2-3次，每次2_3h，過濾提取液，收集 濾液、合并濾液，離心，取上清，減壓濃縮至稠膏A ；將日本毛連菜洗凈，晾干，切成小段，粉 碎，過60目的篩，得粉末B，將日本毛連菜水提物稠膏A與適量日本毛連菜生藥材粉末B充 分混勻，A與B的質(zhì)量混合比例為8. 5 :1 13. 5 :1，于60°C以下干燥，粉碎，得生藥材和藥 材提取物的混合粉末C，再制備成制劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種具有降血糖作用的制劑的制備方法，其特征在于所述 的稠膏A在80-85°C測定的比重為1. 20-1. 34。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的一種具有降血糖作用的制劑的制備方法，其特征在于 日本毛連菜水提取以前，加入日本毛連菜質(zhì)量15-20倍的蒸餾水浸泡。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種具有降血糖作用的制劑的制備方法，其特征在于提取 方式為回流提取或溫浸提取或超聲提取。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種具有降血糖作用的制劑的制備方法，其特征在于所述 的制劑為片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑或口服液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種具有降血糖作用的制劑的制備方法，其特征在于制成 顆料劑時采用濕法制粒，首先用95%乙醇將混合的粉末C全部浸潤，再加蒸餾水混勻，過20 目篩制粒，于80°C以下干燥，整粒，分裝，即得日本毛連菜水提物顆粒劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的由日本毛連菜水提物制成的制劑在降血糖藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有降血糖作用的制劑，該制劑是由日本毛連菜的水提物制成，其制備方法是將日本毛連菜洗凈，晾干，切成小段，加蒸餾水浸泡后，提取2-3次，每次2-3h，過濾提取液，收集濾液、合并濾液，離心，取上清，減壓濃縮至稠膏A；將日本毛連菜洗凈，晾干，切成小段，粉碎，過60目的篩，得粉末B，將日本毛連菜水提物稠膏A與適量日本毛連菜生藥材粉末B充分混勻，A與B的質(zhì)量混合比例為8.51～13.51，于60℃以下干燥，粉碎，得生藥材和藥材提取物的混合粉末C，再制備成制劑。本發(fā)明將日本毛連菜水提取有效部位制備成具有降血糖作用的藥物制劑，工藝穩(wěn)定，簡單，可行。
文檔編號A61K36/28GK102085227SQ201110024179
公開日2011年6月8日 申請日期2011年1月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月21日
發(fā)明者劉先, 張志勇, 段拴貴, 高建平 申請人:山西醫(yī)科大學