專利名稱：治療心腦血管疾病的藥物組合物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療心腦血管疾病的藥物組合物，特別是一種由天然藥物的有效 成分組成的藥物組合物，及其制備方法。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病是一種常見和多發(fā)性病，尤以中老年人群的發(fā)病率高，嚴(yán)重危害中 老年人的身體健康和生活質(zhì)量。傳統(tǒng)的單味中藥及其復(fù)方藥物對心腦血管疾病有較好的 預(yù)防和治療作用，如丹參具有祛瘀止痛，活血通經(jīng)，清心除煩之功效，常被用于心腦血管疾 病的預(yù)防和治療，其水溶性有效成分為包括丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C等多種丹參酚酸成 分(杜冠華等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2000 ； (5) 10)，其中丹酚酸B含量最高(丹參中含量約為 4%)0丹參酚酸及其主要成分對心腦血管的保護(hù)作用主要表現(xiàn)為(1)對腦缺血再灌注引 起的腦損傷有保護(hù)作用，可以減少腦組織中MDA含量，對腦缺血再灌注引起的記憶功能障 礙有明顯的改善作用。( 對心肌缺血再灌注引起的心肌細(xì)胞損傷和心律失常有顯著的保 護(hù)作用，對實(shí)驗(yàn)性在體血栓形成有劑量依賴性抑制作用，對多種因素引起的血小板聚集均 有顯著的抑制作用。丹參脂溶性有效成分為包括丹參酮I、丹參酮IIA、丹參酮IIB、隱丹參 酮等多種丹參酮成分，其中以丹參酮IIA含量最高。藥理實(shí)驗(yàn)和臨床觀察的研究證明丹參 酮對心腦血管疾病有確切的療效，主要作用有(1)抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖，( 抑制血 管內(nèi)膜增生，( 改善冠狀動脈，(4)減輕心肌缺血再灌注損傷，( 防止心肌肥厚，(6)防 治心率失常，(7)減輕腦缺血缺氧損傷，(8)防治腦缺血再灌注損傷等(譚為華等貴陽中 醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007 ;29 (3) 52-54) 川芎具有活血行氣，祛風(fēng)止痛之功效，主要有效成分為川芎揮發(fā)油、酚酸類等成 分。文獻(xiàn)報(bào)道川芎揮發(fā)油具有改善微循環(huán)，增加腦血流量的作用，可使微血管解痙，增加毛 細(xì)血管開放數(shù)目，加快血流速度，使聚集的紅細(xì)胞解聚等。川芎揮發(fā)油主要成分包括藁本 內(nèi)酯、丁基苯酞、丁烯基苯酞等，其中藁本內(nèi)酯含量最高，川芎藥材和川芎油中藁本內(nèi)酯的 含量分別約為1.5%、20-50%。酚酸類成分也是川芎中重要的活性成分，具有抗血栓、降血 脂，防治冠心病等藥理活性，其中阿魏酸具有抗動脈粥樣硬化，抗血小板聚集，抗氧化，抗菌 消炎等活性(張玲等現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2009，23 ) :41)，川芎酚酸主要代表性成分為 阿魏酸、阿魏酰奎尼酸、綠原酸、咖啡酸等。葛根具有解肌退熱，生津，透疹，升陽止瀉之功效，葛根有效成分包括葛根素、大豆 苷、大豆苷元、3’ -羥基葛根素、3’ -甲氧基葛根素等黃酮類成分，對高血鉀和去甲腎上腺 素引起的血管痙攣有明顯的松弛作用，能顯著對抗反復(fù)性腦缺血腦組織含水量、Ca2+及丙二 醛的含量升高，抑制Ca2+-AIPase及超氧化物歧化酶活性的降低，顯著延長小鼠斷頭后的呼 吸持續(xù)時(shí)間，對腦缺血有保護(hù)作用。葛根素具有降血脂、保護(hù)心肌、改善微循環(huán)、抗氧化等作 用?！吨腥A人民共和國藥典》2010年版一部收載的愈風(fēng)寧心片，即為單味葛根原料經(jīng)加工制 成的藥品，具有解痙止痛，增強(qiáng)腦及冠脈血流量的作用；此外，葛根素注射液是治療心腦血 管疾病的常用藥物?！吨腥A人民共和國藥典》2010年版一部收載的葛根分為野葛和粉葛二種，其中野葛中葛根素(大于2. 4%)和總黃含量很高，粉葛中葛根素(大于0.3%)和總 黃含量較低，故一般提取葛根素和黃酮類成分首選野葛投料。以上述丹參、川芎、葛根為原料制備的“通脈制劑”(通脈沖劑和通脈口服液)，收 載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第四冊和第二十冊，臨床中已廣泛使用，主要藥效作用 有(1)抗血栓，(2)擴(kuò)張冠狀動脈、抗心肌缺血，(3)解痙、改善微循環(huán)，(4)抗腦缺血、缺氧 等。通脈制劑的處方為丹參500g、川芎500g、葛根500g，以上三味藥材，加水煎煮二次，第 一次1. 5小時(shí)，第二次1小時(shí)，趁熱濾過，合并濾液，按常規(guī)方法制成沖劑或口服液。公開號CN1839931A中國專利報(bào)道了一種治療心腦血管疾病的藥物組合物，由丹 參總酚酸、川芎揮發(fā)油和葛根總黃酮組成，其提取原料分別為丹參、川芎和葛根，其中，丹參 和葛根分別采用水提、大孔吸附樹指法分離得到丹參酚酸提取物和葛根黃酮提取物，川芎 采用超臨界二氧化碳萃取得到川芎揮發(fā)油提取物。試驗(yàn)顯示，上述藥物的組成仍分別存在一些不足之處，不僅影響了藥物有益療效 的充分發(fā)揮，也導(dǎo)致了藥用原料的浪費(fèi)。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述情況，本發(fā)明首先提供一種以上述組合方式為基礎(chǔ)，能有利于藥物療效 充分發(fā)揮的治療心腦血管疾病的藥物組合物，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步提供該藥物組合物的制 備方法。本發(fā)明治療心腦血管疾病的藥物組合物，以丹酚酸B、丹參酮IIA、阿魏酸、藁本內(nèi) 酯、葛根素為有效成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成。所說有效成分的重 量組成為丹酚酸B 2 10份，丹參酮IIA 0. 1 0.5份，阿魏酸0. 1 0.5份，藁本內(nèi)酯 0.4 2份，葛根素2 10份。上述的藥物組合物中，所說有效成分的優(yōu)選重量組成是丹酚酸B 6份，丹參酮 IIA 0. 4份，阿魏酸0. 2份，藁本內(nèi)酯1份，葛根素5份。在藥物組合物的組成中，所說的有效成分丹酚酸B、丹參酮IIA、阿魏酸、藁本內(nèi) 酯、葛根素，可以為購自于市售相應(yīng)商品的單一純品形式的成分，也可以按目前已有文獻(xiàn)報(bào) 道的方法提取或制備得到。例如，目前對阿魏酸的全化學(xué)合成方式已有報(bào)道和/或使用；由 適當(dāng)?shù)奶烊凰幱迷咸崛〉し铀酈、丹參酮IIA、阿魏酸、藁本內(nèi)酯、葛根素等成分的方法目 前也已有報(bào)道和/使用，且后者的提取方式通常可以更為簡便和常用。例如，所說有效成分 丹酚酸B允許采用含有所說量的來自藥用原料丹參的丹參酚酸提取物替換；有效成分丹參 酮IIA允許采用含有所說量的來自藥用原料丹參的丹參酮提取物替換；有效成分阿魏酸允 許采用含有所說量的來自藥用原料川芎的川芎酚酸提取物替換；有效成分藁本內(nèi)酯允許采 用含有所說量的來自藥用原料川芎的川芎揮發(fā)油提取物替換；有效成分葛根素允許采用含 有所說量的來自藥用原料葛根的葛根黃酮提取物替換。這里所說的替換，在實(shí)際應(yīng)用中，可 以根據(jù)實(shí)際情況，只針對其中的一種或幾種有效成分的替換，也可以是針對全部有效成分 的替換。進(jìn)一步，在采用由天然藥用原料提取物進(jìn)行替換時(shí)，對所用的提取物除可以采用 目前已知的相應(yīng)方法進(jìn)行純化后得到的單一純凈形式的所說有效成分外，還允許采用在含 有所說有效成分的同時(shí)，還含有主要存在于其提取物中的同類成分和/或?qū)Ρ景l(fā)明組合物藥效作用無不利影響的其它成分或雜質(zhì)。如，在丹參酚酸提取物中，除丹酚酸B外，還允許 含有如丹酚酸A、丹參酸C等其它成分；在丹參酮提取物中除丹參酮IIA外，還允許含有如 丹參酮I、丹參酮IIB、隱丹參酮等其它成分；在川芎酚酸提取物中，除阿魏酸外，還允許含 有如阿魏?？崴帷⒖Х人?、生物堿等其它成分；在川芎揮發(fā)油提取物中，除藁本內(nèi)酯外，還 允許含有如川芎內(nèi)酯、丁苯酞等苯酞類成分和脂肪油類成分等其它成分；葛根黃酮提取物 中除葛根素外，還允許含有如大豆甙、3'-羥基葛根素、3'-甲氧基葛根素等其它成分。試 驗(yàn)顯示，在本發(fā)明的上述藥物組合物中，采用以含有所說比例量的丹酚酸B、丹參酮IIA、阿 魏酸、藁本內(nèi)酯、葛根素有效成分，或同時(shí)還存在有所說其它成分的相應(yīng)丹參酚酸提取物、 丹參酮提取物、川芎酚酸提取物、川芎揮發(fā)油提取物、葛根黃酮提取物進(jìn)行替換，一般不會 對所說藥物有效成分的藥效作用有明顯的干擾或不利影響，可以具有同樣的效果。本發(fā)明上述的藥物組合物，優(yōu)選的是以所說的有效成分，與口服藥物中可以接受 的常規(guī)輔助添加成分制備而成的相應(yīng)口服藥物制劑。例如，與在口服制劑中可以被接受的 崩解劑、賦形劑、潤滑劑、粘合劑、填充劑等常用的輔助添加成份混合后，按相應(yīng)的常規(guī)工藝 方法處理，制成的片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊劑或適當(dāng)形式的緩釋劑、控釋劑等固體制劑形式 的口服藥物；或是與常用的增溶劑、乳化劑、潤濕劑、起泡或消泡劑等表面活性劑、稀釋劑、 防腐劑、穩(wěn)定劑、矯味劑、增稠劑等混合，按相應(yīng)的常規(guī)工藝方法處理，制成為水劑、糖漿等 液體制劑形式的口服藥物。其中，填充劑可以包括如常用的淀粉、糊精、糖粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、葡萄糖、微晶 纖維素、碳酸鈣、硫酸鈣、碳酸氫鈣等；黏合劑可以包括如常用的羥丙甲纖維素、聚維酮、淀粉漿、糊精漿、糖漿、膠漿、海 藻酸鈉、聚乙二醇、桃膠、阿拉伯膠等；崩解劑可以包括如常用的交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮、羧甲基淀粉鈉、羥丙 基淀粉、低取代羥丙基纖維素檸檬酸、酒石酸、酸酐、碳酸氫鈉、碳酸鈉等；潤滑值劑可以包括如常用的硬脂酸鎂(鈉)、滑石粉、微粉硅膠、液體石蠟、聚乙二
醇等；軟膠囊劑中的基質(zhì)可以包括如常用的植物油(如色拉油、蓖麻油、氫化大豆油 等)、聚乙二醇(如PEG 300、PEG 400、PEG 6000等)；以及常用的亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、 焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、抗壞血酸、半胱氨酸、叔丁基對羥基茴香醚、二丁甲苯酚、維生素E 等抗氧化劑；口服緩控釋制劑中的阻滯劑可包括如常用的蜂蠟、巴西棕櫚蠟、氫化植物油、硬脂 醇、單硬脂酸甘油酯、醋酸纖維素酞酸酯、L-或S-丙烯酸樹脂、羥丙甲纖維素酞酸酯、醋酸 羥丙甲纖維素琥珀酸酯、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙甲纖維素、聚維酮、卡波普、海 藻酸鈉、脫乙酰殼聚糖、乙基纖維素、聚甲基丙烯酸酯、無毒聚氯乙烯、聚乙烯、乙烯-醋酸 乙烯共聚物、硅橡膠；以及如明膠、聚維酮、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯醇、右旋糖酐等常用的 增稠劑；以及必要時(shí)所用的環(huán)糊精包合物，表面活性劑等常用的穩(wěn)定劑，和/或如檸檬酸、 富馬酸、谷氨酸、L-天冬氨酸、乳酸、乳糖酸、半乳糖酸、葡萄糖醛酸、抗壞血酸、鹽酸、醋酸等 常用的生理可用的PH值調(diào)節(jié)劑等。這些常規(guī)使用的輔助添加成分，可以根據(jù)不同制劑和/ 或需要選擇使用。
如上述，在制備本發(fā)明所述的藥物組合物時(shí)，所說的有效成分可以采用含有所說 比例量的丹酚酸B、丹參酮IIA、阿魏酸、藁本內(nèi)酯、葛根素的相應(yīng)提取物替換。所說的這些 提取物可以采用下述方式提取得到。例如所說有效成分中的丹參酮提取物采用下述方式之一制備得到方法1 以超臨界二氧化碳循環(huán)逆流方式對粉碎后的丹參進(jìn)行萃取后分離，得到 有效成分丹參酮提取物；方法2 用體積含量> 80%的乙醇溶液對粉碎后的丹參進(jìn)行提取后，提取液除去 乙醇，沉淀，過濾，得到有效成分丹參酮提取物；方法3 用體積含量> 80%的乙醇溶液對粉碎后的丹參進(jìn)行提取，提取液除去乙 醇，濃縮，干燥，得到有效成分丹參酮提取物。所說有效成分中的丹參酚酸提取物采用下述方式之一制備得到方法1 由藥用原料丹參提取丹參酮提取物后，剩余物經(jīng)水或體積含量< 80%的 乙醇-水混合溶劑提取，回收溶媒，濃縮，干燥，得到有效成分丹參酚酸提取物；方法2 由藥用原料丹參提取丹參酮提取物后，剩余物經(jīng)水或體積含量< 80%的 乙醇-水混合溶劑提取，水提液或除去乙醇后的提取液，經(jīng)大孔樹脂柱吸附和水洗滌除雜 后，用乙醇體積含量為40 80%的醇-水混合液洗脫，收集洗脫液并除去乙醇，濃縮，干燥， 得到有效成分丹參酚酸提取物。所說有效成分中的川芎揮發(fā)油提取物采用下述方式之一制備得到方法1 以超臨界二氧化碳循環(huán)逆流方式對粉碎后的川芎進(jìn)行萃取后，分離，得到 有效成分川芎揮發(fā)油提取物；方法2 取川芎，粉碎，用低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑提取，分離除去提取有機(jī)溶劑后，得到 有效成分川芎揮發(fā)油提取物，所說的提取溶劑為石油醚、汽油、6號溶劑油、正己烷和環(huán)己烷 中的至少一種；方法3:取川芎，用體積含量>80%的乙醇溶液進(jìn)行提取，提取液除去乙醇，濃縮， 干燥，得到有效成分川芎揮發(fā)油提取物。所說有效成分中的川芎酚酸提取物采用下述方式之一制備得到方法1 由藥用原料川芎提取川芎揮發(fā)油提取物后，剩余物以水或體積含量 < 80%的乙醇-水混合溶劑提取，回收溶媒，濃縮，干燥，得到有效成分川芎酚酸提取物；方法2 由藥用原料川芎提取川芎揮發(fā)油提取物后，剩余物以水或體積含量 <80%的乙醇-水混合溶劑提取，水提液或除去乙醇后的提取液，經(jīng)大孔樹脂柱吸附和水 洗滌除雜后，用乙醇體積含量為30 70%的醇-水混合液洗脫，收集洗脫液并除去乙醇，濃 縮，干燥，得到有效成分)11芎酚酸提取物。所說有效成分中的葛根黃酮提取物采用下述方式之一制備得到方法1 葛根粉碎，水煎煮后過濾，濾液經(jīng)大孔樹脂柱吸附和水洗滌除雜后，用乙 醇體積含量為60 80%的醇-水混合液洗脫，收集洗脫液并除去乙醇，濃縮，干燥，得到有 效成分的葛根黃酮提取物；方法2 葛根粉碎，用水或體積含量< 80 %的乙醇-水混合溶劑提取，回收溶媒，濃 縮，干燥，得到有效成分的葛根黃酮提取物。上述提取制備過程中所說的上述所說的大孔樹脂柱中所用的大孔樹脂，一般可以選擇目前使用最為廣泛的HPD-100或DlOl型號的樹脂。中藥復(fù)方藥物的獨(dú)特療效優(yōu)勢，體現(xiàn)在其復(fù)方中多成分、多靶點(diǎn)的協(xié)同整合作用。 本發(fā)明上述的藥物組合物是用丹參、川芎、葛根各自的主要有效成分丹酚酸B、丹參酮IIA、 阿魏酸、藁本內(nèi)酯、葛根素為有效成分，完全克服了目前雖采用同類或相似的藥用原料、但 由于損失或完全丟失了其中的一種或幾種有效成分的同類藥物的缺陷，使藥用原料中的各 種有效成分能充分發(fā)揮其各自及其協(xié)同的有益效果，顯著提高了療效，也大大提高了藥用 原料的利用率，減少了藥用原料的浪費(fèi)。以下通過實(shí)施例的具體實(shí)施方式
再對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但 不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。在不脫離本發(fā)明上述技術(shù)思想 情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識和慣用手段做出的各種替換或變更，均應(yīng)包括在本發(fā)明 的范圍內(nèi)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1分別稱取市購單一純品成分形式的商品丹酚酸B 60g、阿魏酸2g、葛根素50g，丹 參酮IIA 4g、藁本內(nèi)酯IOg和藥用輔料適量作為原料。丹酚酸B、阿魏酸和葛根素加入藥用 PEG400溶解后，再加入丹參酮IIA、藁本內(nèi)酯和藥用輔料，混勻，備用。按體積比3 1. 2 3 取藥用明膠、甘油和水，制成囊材后，將上述備用藥液和囊材在軟膠囊壓制機(jī)上壓制成軟膠 囊，每粒重0. 5g，即為本發(fā)明的膠囊劑藥物。實(shí)施例2分別將同樣的丹酚酸B 20g、丹參酮II A lg、阿魏酸5g、葛根素20g，微粉化，加入 到PEG-6000熔融液中，再加入藁本內(nèi)酯20g，攪拌混勻，在滴丸機(jī)中制成1000粒滴丸，即為 本發(fā)明的滴丸劑藥物。實(shí)施例3分別稱取同樣的丹酚酸B 100g、阿魏酸lg、葛根素100g、丹參酮IIA 5g和藁本內(nèi) 酯4g，加藥用輔料適量，按常規(guī)方法壓片，制成1000片，包薄膜衣，即為本發(fā)明的片劑藥物。實(shí)施例4取藥用原料丹參的粗粉100kg，采用超臨界流體CO2循環(huán)逆流萃取、分離，萃取壓力 35MPa，萃取溫度50°C，夾帶劑為95%乙醇，萃取時(shí)間4小時(shí)，分離器解析壓力lOMpa，解析 溫度30°C，得到含有效成分的丹參酮提取物。提取后的丹參藥渣再分別加水8倍、6倍和6 倍，于70°C動態(tài)攪拌溫浸提取3次，過濾，濾液通過裝有150立升HPD-100大孔樹脂(河北 滄州寶恩化工有限公司生產(chǎn))吸附柱，用300立升水洗滌除雜，再用450立升50% ν/ν乙 醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮至稠膏，于65°C減壓干燥，得到丹參酚酸提取 物。取藥用原料川芎的粗粉100kg，超臨界流體CO2循環(huán)逆流萃取和分離，萃取壓力 40MPa，萃取溫度60°C，萃取劑(X)2用量1000公斤/時(shí)，萃取時(shí)間5小時(shí)，分離器解析壓力 lOMpa，解析溫度50°C，得到川芎揮發(fā)油提取物。其川芎藥渣再分別加水12、10倍，回流提取 2次，過濾，濾液通過裝有120立升HPD-100大孔樹脂吸附柱，用200立升水洗滌除雜，再用 350立升50% ν/ν乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得到川芎酚酸提取物。取藥用原料葛根(野葛)的粗粉100kg，分別加水10、8、6倍，煎煮3次，過濾，濾液 調(diào)節(jié)PH值至4 5，通過裝有200立升D141大孔樹脂(中藍(lán)晨光化工研究院生產(chǎn))吸附 柱，用300立升水洗滌除雜，再用500立升70% ν/ν乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙 醇，濃縮至稠膏，干燥，得到葛根黃酮提取物。分別稱取含丹酚酸B 50g的上述丹參酚酸提取物、含阿魏酸3g的川芎酚酸提取 物、含葛根素60g的葛根黃酮提取物、含丹參酮II A 3g的丹參酮提取物，和含藁本內(nèi)酯4g 的川芎揮發(fā)油提取物，加藥用輔料適量，按常規(guī)方法壓片，制成3000片，包薄膜衣，即為本 發(fā)明的片劑藥物。實(shí)施例5取藥用原料丹參的粗粉100kg，用體積含量95%的乙醇回流提取2次，提取液回收 乙醇，濃縮，干燥，得到含有效成分丹參酮的提取物。經(jīng)上述乙醇提取后的丹參藥渣再用體 積含量60%的乙醇回流提取，減壓回收溶媒，濃縮，干燥，得到含有效成分丹參酚酸的提取 物。取藥用原料川芎的粗粉100kg，用體積含量95%的乙醇回流提取3次，提取液回收 乙醇，濃縮，干燥，得到含有效成分川芎揮發(fā)油的提取物。經(jīng)該乙醇提取后的川芎藥渣再用 體積含量70%的乙醇回流提取，減壓回收溶媒，濃縮，干燥，得到含有效成分川芎酚酸的提 取物。取藥用原料葛根的粗粉100kg，用體積含量70%的乙醇回流提取3次，回收溶媒， 濃縮，干燥，得到含有效成分葛根黃酮的提取物。分別稱取上述丹參酚酸提取物100g(以丹酚酸B計(jì))、川芎酚酸提取物5g(以阿魏 酸計(jì))、葛根黃酮提取物20g(以葛根素計(jì))、丹參酮提取物5g(以丹參酮IIA計(jì))和川芎揮 發(fā)油提取物10g(以藁本內(nèi)酯計(jì))，加藥用輔料適量，按常規(guī)方法制成膠囊5000粒，即為本發(fā) 明的膠囊劑藥物。實(shí)施例6將藥用原料丹參粗粉100kg，用體積含量90%的乙醇回流提取3次，提取液除去乙 醇，靜置沉淀、過濾，得到含有效成分丹參酮的提取物，過濾母液備用。上述經(jīng)乙醇提取后的 丹參藥渣再用體積含量50%的乙醇回流提取2次，提取液除去乙醇，與備用的丹參酮過濾 母液合并，經(jīng)DlOl大孔樹脂柱吸附和水洗滌除雜后，用體積含量為70%的乙醇洗脫，收集 洗脫液并除去乙醇，濃縮，干燥，得到含有效成分丹參酚酸的提取物。將藥用原料川芎粗粉100kg，用石油醚或6號溶劑油回流提取3次，分離除去溶媒 得到含有效成分川芎揮發(fā)油的提取物；上述經(jīng)石油醚或6號溶劑油提取后的川芎藥渣再以 水回流提取3次，水提液經(jīng)DlOl大孔樹脂柱吸附和水洗滌除雜后，用體積含量為60%的乙 醇洗脫，收集洗脫液并除去乙醇，濃縮，干燥，得到含有效成分川芎酚酸的提取物。 將藥用原料葛根粗粉IOOkg用水煎煮提取2次，過濾，水提液經(jīng)HPD-100大孔樹脂 柱吸附和水洗滌除雜后，用體積含量為70%的乙醇洗脫，收集洗脫液并除去乙醇，濃縮，干 燥，得到含有效成分葛根黃酮的提取物。 分別稱取上述丹參酚酸提取物20g(以丹酚酸B計(jì))、川芎酚酸提取物lg(以阿魏 酸計(jì))、葛根黃酮提取物IOOg (以葛根素計(jì))、丹參酮提取物Ig (以丹參酮IIA計(jì))，微粉化，加入到PEG-6000熔融液中，再加入川芎揮發(fā)油提取物20g (以藁本內(nèi)酯計(jì))，攪拌混勻，在滴 丸機(jī)中制成5000粒滴丸，即為本發(fā)明的滴丸劑型藥物。以丹酚酸B、丹參酮IIA、阿魏酸、藁本內(nèi)酯、葛根素為主要有效藥用成分制成的本 發(fā)明藥物組合物作為試驗(yàn)藥物進(jìn)行的下述實(shí)驗(yàn)，可以表明本發(fā)明藥物組合物所具有的有益 效果。實(shí)驗(yàn)1對內(nèi)皮細(xì)胞和神經(jīng)元缺氧再給氧的保護(hù)作用1、實(shí)驗(yàn)方法參見鄂征主編的《組織培養(yǎng)和分子生物細(xì)胞學(xué)技術(shù)》，北京北京出 版社，1994年12月，438頁。(I)MTT法測定內(nèi)皮細(xì)胞存活率致密單層細(xì)胞經(jīng)藥物作用后，用冰冷的PBS溶液洗滌2次，加入0. 5mg/ml MTT溶 液100 μ 1，37°C摻入4小時(shí)，吸去殘留液體，加入酸化異丙醇顯色溶液100 μ 1，30分鐘內(nèi)在 波長595nm處用酶標(biāo)儀測吸光度A值。觀察試驗(yàn)藥物對培養(yǎng)細(xì)胞生存的影響。(2) MTT法測定神經(jīng)元存活率細(xì)胞培養(yǎng)10天后，向每孔加入0. 5%的MTT 10 μ 1繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)，吸棄培養(yǎng)液， 加入二甲亞砜(DMSO) 200 μ 1/孔，待顆粒溶解后置于酶標(biāo)儀上，在波長570nm處檢測各孔的 吸光度A值。觀察試驗(yàn)藥物對培養(yǎng)神經(jīng)元生存的影響。(3)培養(yǎng)細(xì)胞缺氧/再給細(xì)氧模型正常培養(yǎng)基用95%隊(duì)和5% CO2混合氣體平衡30分鐘后，獲得缺氧培養(yǎng)基。細(xì)胞 用缺氧培養(yǎng)基懸浮后置培養(yǎng)板，放入缺氧倉內(nèi)(持續(xù)通入95% N2和5% CO2混合氣體為此 缺氧環(huán)境)，37°C孵育2小時(shí)(缺氧時(shí)間)后，立即更換正常的培養(yǎng)基，再孵育4小時(shí)(再給 氧)。以未經(jīng)處理細(xì)胞作為對照。(4)藥物給予方法試驗(yàn)藥物用培養(yǎng)基配制成lOug/ml的濃度，缺氧期間藥物用缺氧培養(yǎng)基配制，再 給氧期間藥物用普通培養(yǎng)基配制。2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)對內(nèi)皮細(xì)胞缺氧2小時(shí)再給氧4小時(shí)損傷的保護(hù)作用新生牛腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)缺氧2小時(shí)再給氧4小時(shí)后，產(chǎn)生明顯的死亡現(xiàn)象， MTT檢測表明，缺氧再給氧(H/R)組細(xì)胞吸光度明顯減小，經(jīng)試驗(yàn)藥物保護(hù)的細(xì)胞均呈現(xiàn)出 非常明顯的保護(hù)作用，與對照組比較P < 0. 01，如表1所示。此外，由表1還可以清楚地看 出本發(fā)明藥物組合物以重量配比6 0.4 0.2 1 5比例配伍對內(nèi)皮細(xì)胞缺氧再給 氧(H/R)的保護(hù)作用最佳。(2)對培養(yǎng)神經(jīng)元缺氧2小時(shí)再給氧4小時(shí)損傷的保護(hù)作用新生大鼠腦神經(jīng)元經(jīng)缺氧2小時(shí)再給氧4小時(shí)后，產(chǎn)生明顯的死亡現(xiàn)象，MTT檢測 表明，缺氧再給氧(H/R)組細(xì)胞吸光度明顯減小，經(jīng)試驗(yàn)藥物保護(hù)的細(xì)胞均呈現(xiàn)出非常明 顯的保護(hù)作用，與對照組比較P < 0. 01，如表2所示。此外，由表2還可以清楚地看出本 發(fā)明藥物組合物以6 0.4 0.2 1 5比例配伍對神經(jīng)元缺氧再給氧(H/R)的保護(hù)作 用最佳。表1本發(fā)明藥物組合物對內(nèi)皮細(xì)胞缺氧再給氧(H/R)的保護(hù)作用
權(quán)利要求
1.治療心腦血管疾病的藥物組合物，其特征是以丹酚酸B、丹參酮IIA、阿魏酸、藁本 內(nèi)酯、葛根素為有效成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成，所說有效成分的重 量組成為丹酚酸B 2 10份，丹參酮IIA 0. 1 0.5份，阿魏酸0. 1 0.5份，藁本內(nèi)酯 0.4 2份，葛根素2 10份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征是所說的有效成分的重量組成為丹酚酸B 6份，丹參酮IIA 0. 4份，阿魏酸0. 2份，藁本內(nèi)酯1份，葛根素5份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其特征是所說有效成分丹酚酸B允許采用含 有所說量的來自藥用原料丹參的丹參酚酸提取物；和/或，有效成分丹參酮IIA允許采用含有所說量的來自藥用原料丹參的丹參酮提取物；和/或，有效成分阿魏酸允許采用含有所說量的來自藥用原料川芎的川芎酚酸提取物；和/或，有效成分藁本內(nèi)酯允許采用含有所說量的來自藥用原料川芎的川芎揮發(fā)油提取物；和/或，有效成分葛根素允許采用含有所說量的來自藥用原料葛根的葛根黃酮提取物。
4.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其特征是為口服制劑。
5.制備權(quán)利要求1至4之一所述治療心腦血管疾病的藥物組合物的方法，其特征是分 別由藥用原料丹參、川芎和葛根得到所說的有效成分后，按所說比例與藥物中可以接受的 輔助添加成分制備而成。
6.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所說有效成分中的丹參酮提取物采用下述 方式之一制備得到方法1 以超臨界二氧化碳循環(huán)逆流方式對粉碎后的丹參進(jìn)行萃取后分離，得到有效 成分丹參酮提取物；方法2 用體積含量> 80%的乙醇溶液對粉碎后的丹參進(jìn)行提取后，提取液除去乙醇， 沉淀，過濾，得到有效成分丹參酮提取物；方法3 用體積含量> 80%的乙醇溶液對粉碎后的丹參進(jìn)行提取，提取液除去乙醇，濃 縮，干燥，得到有效成分丹參酮提取物。
7.如權(quán)利要求5或6所述的制備方法，其特征是所說有效成分中的丹參酚酸提取物采 用下述方式之一制備得到方法1 由藥用原料丹參提取丹參酮提取物后，剩余物經(jīng)水或體積含量< 80%的乙 醇-水混合溶劑提取，回收溶媒，濃縮，干燥，得到有效成分丹參酚酸提取物；方法2:由藥用原料丹參提取丹參酮提取物后，剩余物經(jīng)水或體積含量< 80%的乙 醇-水混合溶劑提取，水提液或除去乙醇后的提取液，經(jīng)大孔樹脂柱吸附和水洗滌除雜后， 用乙醇體積含量為40 80%的醇-水混合液洗脫，收集洗脫液并除去乙醇，濃縮，干燥，得 到有效成分丹參酚酸提取物。
8.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所說有效成分中的川芎揮發(fā)油提取物采用 下述方式之一制備得到方法1 以超臨界二氧化碳循環(huán)逆流方式對粉碎后的川芎進(jìn)行萃取后，分離，得到有效 成分川芎揮發(fā)油提取物；方法2 取川芎，粉碎，用低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑提取，分離除去提取有機(jī)溶劑后，得到有效 成分川芎揮發(fā)油提取物，所說的提取溶劑為石油醚、汽油、6號溶劑油、正己烷和環(huán)己烷中的 至少一種；方法3 取川芎，用體積含量> 80%的乙醇溶液進(jìn)行提取，提取液除去乙醇，濃縮，干 燥，得到有效成分川芎揮發(fā)油提取物。
9.如權(quán)利要求5或8所述的制備方法，其特征是所說有效成分中的川芎酚酸提取物采 用下述方式之一制備得到方法1 由藥用原料川芎提取川芎揮發(fā)油提取物后，剩余物以水或體積含量< 80%的 乙醇-水混合溶劑提取，回收溶媒，濃縮，干燥，得到有效成分川芎酚酸提取物；方法2 由藥用原料川芎提取川芎揮發(fā)油提取物后，剩余物以水或體積含量< 80%的 乙醇-水混合溶劑提取，水提液或除去乙醇后的提取液，經(jīng)大孔樹脂柱吸附和水洗滌除雜 后，用乙醇體積含量為30 70%的醇-水混合液洗脫，收集洗脫液并除去乙醇，濃縮，干燥， 得到有效成分)11芎酚酸提取物。
10.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所說有效成分中的葛根黃酮提取物采用 下述方式之一制備得到方法1 葛根粉碎，水煎煮后過濾，濾液經(jīng)大孔樹脂柱吸附和水洗滌除雜后，用乙醇體 積含量為60 80%的醇-水混合液洗脫，收集洗脫液并除去乙醇，濃縮，干燥，得到有效成 分的葛根黃酮提取物；方法2 葛根粉碎，用水或體積含量< 80%的乙醇-水混合溶劑提取，回收溶媒，濃縮， 干燥，得到有效成分的葛根黃酮提取物。
全文摘要
治療心腦血管疾病的藥物組合物及制備方法。該藥物組合物以丹酚酸B、丹參酮IIA、阿魏酸、藁本內(nèi)酯、葛根素為有效成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成，有效成分的重量組成為丹酚酸B 2～10份，丹參酮IIA 0.1～0.5份，阿魏酸0.1～0.5份，藁本內(nèi)酯0.4～2份，葛根素2～10份。試驗(yàn)顯示，該藥物組合物可明顯縮小腦缺血再灌注損傷引起的腦組織出血壞死灶、減輕神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)纖維的損傷。
文檔編號A61P9/00GK102068440SQ20111000903
公開日2011年5月25日 申請日期2011年1月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月17日
發(fā)明者劉云華, 劉倩伶, 劉玉紅, 易進(jìn)海, 陳燕, 黃志芳 申請人:四川省中醫(yī)藥科學(xué)院