專利名稱：ε-聚賴氨酸綴合物及其用途的制作方法
ε“聚賴氨酸綴合物及其用途本發(fā)明涉及ε (伊普西隆)-聚賴氨酸綴合物，尤其是ε-聚賴氨酸與攜帶羧基的化合物的綴合物，以及其制備和在靶向于腎臟中的用途。腎臟是重要的器官，尤其是對(duì)于各種物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和排泄以及激素的產(chǎn)生而言。腎臟的一個(gè)功能是排泄代謝的終產(chǎn)物(即所謂的尿返物質(zhì))以及通過(guò)形成尿而從身體排出毒素，尿最終由尿道排出人體。腎臟調(diào)節(jié)水平衡并因此用于長(zhǎng)期的血壓調(diào)節(jié)。其通過(guò)控制尿的組成調(diào)節(jié)電解質(zhì)平衡和酸堿平衡。此外，腎臟是體內(nèi)中間代謝的重要器官(其影響糖原異生作用)。腎臟產(chǎn)生激素，例如促紅細(xì)胞生成素用于造血，并且也是肽激素降解的部位。 然而，腎臟本身的許多功能同樣受激素控制。因此腎臟是對(duì)生命很重要的器官，針對(duì)其已經(jīng)開發(fā)了許多診斷和治療方法。例如， 免疫抑制劑、細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑、免疫治療劑、消炎藥、抗生素、抑制病毒生長(zhǎng)劑、抗高血壓藥、 排尿酸劑或利尿劑已用于腎臟的治療或影響腎臟的功能。這里尤其重要的是藥物以盡可能靶向的方式到達(dá)腎臟。同樣，腎臟在成像方法中的表現(xiàn)也很重要。在已建立的核醫(yī)學(xué)和放射學(xué)方法，例如SPECT、PET、超聲和MRT的幫助下，除了形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)以外的酶加工、代謝過(guò)程、特定基因的表達(dá)和分子反應(yīng)均可通過(guò)所謂的分子成像描述。如果需要的話，上述提到的顯像模式可進(jìn)一步通過(guò)計(jì)算機(jī)斷層攝影和視覺(jué)成像方法補(bǔ)充(近紅外成像、熒光斷層攝影)。目前，“分子成像”的焦點(diǎn)仍然在于癌癥的診斷、神經(jīng)問(wèn)題和基因治療的監(jiān)測(cè)，但在將來(lái)會(huì)擴(kuò)展至需要盡早發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變化的所有領(lǐng)域。作為成像方法的信號(hào)源，“信號(hào)分子”通常與“載體分子”偶聯(lián)?！拜d體分子”保證了高度特異性的靶向，其通過(guò)例如特異性結(jié)合靶細(xì)胞或被捕獲入其中進(jìn)行。例如，載體分子可以是受體的配體或酶的底物?！靶盘?hào)分子”可以通過(guò)一種或多種成像技術(shù)可見(jiàn)。信號(hào)分子的實(shí)例有，例如絡(luò)合劑或螯合劑，其金屬離子可通過(guò)成像技術(shù)檢測(cè)。包含信號(hào)分子和載體分子的化合物或綴合物稱為“診斷試劑”。下文將詳細(xì)討論各種成像技術(shù)。計(jì)算機(jī)體層掃描攝影術(shù)(CT)在經(jīng)典的放射照相術(shù)中，X射線的組織特異性衰減在X射線膠片上顯示。與諸如脂肪和肌肉的“軟”組織相反，諸如骨骼的“硬組織”吸收大量的輻射。所使用的X-射線造影劑是含有高原子序數(shù)的物質(zhì)，例如用于血管造影術(shù)的含碘的分子。隨著進(jìn)一步發(fā)展，放射照相術(shù)提供了切面顯像。在CT中，通過(guò)傳感器(檢測(cè)器)從不同的方向記錄放射圖片，并經(jīng)計(jì)算機(jī)再現(xiàn)為三維照相術(shù)。由于CT的廣泛應(yīng)用，該方法被稱為“經(jīng)典放射學(xué)的主力軍”。 然而，該方法的低靈敏度限制了其作為分子成像方法的用途。單光子發(fā)射計(jì)算體層攝影(SPECT)閃爍照相術(shù)使用放射性標(biāo)記物(放射性示蹤劑)的Y輻射，其由短半衰期的放射性核素發(fā)射。它們特異性地蓄積在人體的靶組織中。在Y照相機(jī)的幫助下，釋放的輻射被記錄并轉(zhuǎn)化為圖像。單光子發(fā)射計(jì)算體層攝影(SPECT)是閃爍照相術(shù)的三維變體。在SPECT 中，如CT那樣從不同的角度記錄輻射，并在計(jì)算機(jī)中獲得三維圖像。在靜態(tài)SPECT中，放射性示蹤劑的濃度在特定的時(shí)間點(diǎn)被測(cè)定。在動(dòng)態(tài)SPECT中，所述測(cè)定在特定的時(shí)間間隔重復(fù)。由此可研究蓄積的變化。ιΗ電子發(fā)射斷層攝影(PET)在臨床應(yīng)用中，PET提供了更加結(jié)構(gòu)性導(dǎo)向的放射診斷學(xué)成像方法。正電子發(fā)射斷層攝影(PET)是現(xiàn)代的功能性成像方法。在發(fā)射正電子的原子的幫助下，其在檢測(cè)放射性同位素中能夠獲得良好的分辨率(現(xiàn)代的PET儀器能獲得2-3mm的分辨率，即使在整體斷層攝影中)。如果這些放射性同位素，例如68Ga被用于標(biāo)記生物分子，則可以成像有機(jī)體的單個(gè)器官中的生化過(guò)程。核醫(yī)學(xué)方法的一個(gè)基本優(yōu)點(diǎn)是高靈敏度，從而可以僅僅使用少量的示蹤劑(納克級(jí))。今天，PET照相機(jī)已整合了 CT裝置(其提供了小于約Imm的高局部分辨率)。PET/CT技術(shù)近年來(lái)引起了診斷學(xué)的革命。因此，在單次呈現(xiàn)中即可獲得同一解剖學(xué)結(jié)構(gòu)的PET功能顯像和CT形態(tài)學(xué)信息。腎臟是醫(yī)學(xué)診斷中經(jīng)常和廣泛研究的器官。這里最常用的研究方法是腎閃爍照相術(shù)。腎閃爍照相術(shù)腎閃爍照相術(shù)是允許從靜態(tài)和動(dòng)態(tài)的角度評(píng)價(jià)腎功能的核醫(yī)學(xué)研究方法。這里評(píng)估的是每個(gè)腎的供血、功能和排泄。它是用于了解薄壁組織瘢痕化的公認(rèn)方法，尤其是對(duì)兒童而言，并且還用于評(píng)價(jià)區(qū)域和分側(cè)的腎功能。兩種形式的腎閃爍照相術(shù)之間存在差異靜態(tài)腎閃爍照相術(shù)在靜態(tài)腎閃爍照相術(shù)中，功能性腎組織使用放射性核素99mTc標(biāo)記。這里锝以絡(luò)合的形式與例如2，3-二巰基丁二酸(DMSA)結(jié)合。因此靜態(tài)的腎閃爍照相術(shù)主要適用于描述具有異常(例如萎縮癥、馬蹄腎等)或炎癥后狀態(tài)的腎。動(dòng)態(tài)腎閃爍照相術(shù)相反，動(dòng)態(tài)腎閃爍照相術(shù)研究腎功能。因此，可針對(duì)腎功能及其清除研究腎小球?yàn)V過(guò)率、腎血流量(RBF)和腎小管分泌。目前使用的放射性藥物如下· "mTc-MAG3 巰基乙?；拾彼? 99mTc-DMSA 2，3_ 二巰基丁二酸· 99mTc-DTPA 二乙烯三胺五乙酸· 123I-OIH 希普蘭(鄰碘馬尿酸)圖3顯示了 MAG3、DMSA和DTPA的化學(xué)結(jié)構(gòu)。腎功能閃爍照相術(shù)(=動(dòng)態(tài)腎閃爍照相術(shù))用于以下適應(yīng)癥 用于在腎臟疾病中鑒別分側(cè)的腎功能，例如腎結(jié)石(腎石病)、腎臟腫瘤、營(yíng)養(yǎng)不良(不正確定位)的腎臟或發(fā)育不良(畸形)的腎臟·用于研究雙腎的部分功能·用于研究尿路疾病·用于鑒別膀胱腎的返流(尿道異常)·如果懷疑為腎血管性高血壓·用于在活體腎捐獻(xiàn)前檢查腎功能·用于手術(shù)修復(fù)的血管縮窄或梗阻的進(jìn)程控制
·用于評(píng)估移植的腎·在懷疑腎損傷(腎創(chuàng)傷)的急診中·在突發(fā)性尿液分泌大量減少(無(wú)尿癥)的情況下，排除腎栓塞或急性尿路梗阻·用來(lái)確定總清除率·用來(lái)檢測(cè)或排除尿滲漏目前，腎功能閃爍照相術(shù)通常通過(guò)SPECT方式進(jìn)行，因?yàn)檎J(rèn)可的示蹤劑MAG3和 DMSA僅可用SPECT核素99mTc標(biāo)記。因此，目前還不能使用顯著改善腎功能診斷的PET和 PET/CT。如果腎臟靶向改善，同樣有助于治療目的。今天約有2. 8億人患有慢性腎臟疾病。 用于治療腎臟疾病的藥物的應(yīng)用或劑型經(jīng)常受到其副作用的限制。如果能開發(fā)靶向的藥物，由此將已知的或新的藥物以靶向的方式到達(dá)腎臟，則腎臟疾病的治療將得到顯著改善。WO 03/086293描述了通過(guò)與聚賴氨酸或聚精氨酸形成復(fù)合物改善藥物性質(zhì)的方法。這里的復(fù)合物由有機(jī)鹽構(gòu)成，即，聚賴氨酸/聚精氨酸和藥物之間沒(méi)有任何共價(jià)鍵，而代之以離子鍵。未公開任何關(guān)于該聚賴氨酸綴合物在藥物靶向于腎臟中的可能用途。Ing-Lung Shih 等，Bioresource Technology 97 (2006) 1148-1159 披露了 ε-聚賴氨酸在藥物靶向中的用途。其提出聚賴氨酸與活性化合物共價(jià)結(jié)合。所述的研究的目的是增加細(xì)胞中的吸收率。未針對(duì)或解決對(duì)特定組織的特異性問(wèn)題。因此本發(fā)明的目標(biāo)是提供用于治療劑或診斷劑的載體或載體分子，其對(duì)于腎臟具有最高的可能的親和性和選擇性。令人驚訝地，已發(fā)現(xiàn)ε -聚賴氨酸或ε -聚賴氨酸衍生物與攜帶羧基的化合物的綴合物對(duì)于腎臟具有非常高的選擇性。這表示事實(shí)上這些綴合物被腎臟組織排他性地吸收。這些與信號(hào)分子(例如放射性同位素和/或活性化合物)偶聯(lián)的綴合物可用于腎臟的診斷和/或治療。本發(fā)明因此涉及綴合物，其包含至少一種攜帶羧基的化合物和線性或支鏈的寡聚物，該寡聚物由肽鍵連接的單體單元組成，其總體上由50%以上(基于單體單元數(shù)目)的 ε-賴氨酸單體單元構(gòu)成，或包含至少10個(gè)連續(xù)的由至少70%的(基于單體單元數(shù)目) ε _賴氨酸單體單元構(gòu)成的單體單元。優(yōu)選使用這類攜帶羧基的化合物其中羧基在攜帶羧基的化合物中的摩爾質(zhì)量比例大于30%、尤其優(yōu)選大于40%。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，特別是用于治療應(yīng)用，所述綴合物還包括至少一種活性化合物，優(yōu)選是共價(jià)結(jié)合的。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述寡聚物鏈長(zhǎng)為10-50個(gè)單體單元。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述寡聚物僅由ε-賴氨酸單體單元組成，尤其是僅由ε-賴氨酸單元組成。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，至少一種攜帶羧基的化合物通過(guò)賴氨酸單體單元的氨基結(jié)合，即一個(gè)或多個(gè)ε -賴氨酸單體單元在其氨基上攜帶含有羧基的化合物，其直接綴合或通過(guò)間隔物綴合。在尤其優(yōu)選用于診斷應(yīng)用的實(shí)施方案中，攜帶羧基的化合物是絡(luò)合劑，尤其優(yōu)選 DOTA (= 1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-N，-N' ,-N" ,-N'‘‘-四乙酸)或 DTPA (二乙烯三胺五乙酸)。
本發(fā)明還涉及用于制備根據(jù)本發(fā)明的化合物的方法，其包括至少下列方法步驟a)提供根據(jù)本發(fā)明的寡聚物，其至少含有一個(gè)反應(yīng)性基團(tuán)，b)使至少一個(gè)任選活化的攜帶羧基的化合物與所述步驟a)的寡聚物綴合。在根據(jù)本發(fā)明的方法的一個(gè)實(shí)施方案中，如果所述綴合物包含絡(luò)合劑，則步驟b) 中獲得的化合物在步驟c)中進(jìn)一步與金屬鹽接觸，這樣所述金屬離子可通過(guò)絡(luò)合劑進(jìn)行絡(luò)合。本發(fā)明還涉及作為藥物的根據(jù)本發(fā)明的綴合物，例如尤其是作為治療組合物或增強(qiáng)成像的組合物。本發(fā)明還涉及藥物或藥物組合物，尤其是治療性或增強(qiáng)成像的組合物，其至少包含根據(jù)本發(fā)明的綴合物。本發(fā)明還涉及用于制備藥物或藥物組合物、尤其是治療性或增強(qiáng)成像的組合物的試劑盒，其至少包含根據(jù)本發(fā)明的綴合物。該綴合物能夠隨后根據(jù)應(yīng)用，例如與適當(dāng)?shù)幕钚曰衔锓磻?yīng)，用于制備治療性組合物，或者如果存在絡(luò)合劑，則與具有增強(qiáng)成像和/或治療作用的金屬離子反應(yīng)。本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的綴合物在制備大分子綴合物中的用途，其中根據(jù)本發(fā)明的兩個(gè)或多個(gè)綴合物與大分子結(jié)合，并且大分子綴合物由與大分子共價(jià)結(jié)合的至少兩個(gè)或多個(gè)根據(jù)本發(fā)明的綴合物構(gòu)成。本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的綴合物用來(lái)靶向于腎臟中的用途。這里的靶向于腎臟優(yōu)選用于在腎臟富集用于治療或診斷應(yīng)用的藥物，即，使腎臟相對(duì)于身體其余部分而言的吸收增加。

圖1顯示了在合成實(shí)施例1中獲得的根據(jù)本發(fā)明的化合物的圖解示意圖。圖2顯示了負(fù)載著111In的ε _聚賴氨酸-DOTA的器官分布。其他詳細(xì)情形在用途實(shí)施例1中給出。圖3顯示了 MAG3、DMSA和DTPA的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖4顯示了對(duì)應(yīng)于實(shí)施例7的依那普利衍生物。在某些診斷方法中，改善靶器官呈現(xiàn)的物質(zhì)作為增強(qiáng)成像的組合物或?qū)Ρ葎┗蛟鰪?qiáng)成像劑使用，其通常通過(guò)增加與環(huán)境的差別或靶器官信號(hào)相對(duì)于環(huán)境的差別而進(jìn)行。根據(jù)本發(fā)明的攜帶羧基的化合物是含有至少一個(gè)羧基(-C00H)和至少一個(gè)用于結(jié)合根據(jù)本發(fā)明綴合物的寡聚物的基團(tuán)或官能團(tuán)的化合物。與寡聚體的結(jié)合可以任何已知的方式發(fā)生，其導(dǎo)致寡聚物和攜帶羧基的化合物之間的共價(jià)結(jié)合?？山?jīng)其發(fā)生結(jié)合的官能團(tuán)的實(shí)例有-NH2, -SH、-OH、-Hal (例如-Cl、-Br、-I)、-炔基、-NCS, -NCO, -SO2Cl、-疊氮化物、“碳酸酯、_醛、-環(huán)氧化物、-C00H、-C00R，其中R優(yōu)選為鹵素或優(yōu)選為活化劑，即，好的離去基團(tuán)，例如N-羥基琥珀酰亞胺、五氟苯基或?qū)ο趸交ｊP(guān)于偶聯(lián)的可能共價(jià)類型的綜述參見(jiàn)例如"Bioconjugate Techniques，，，GregT. Hermanson, Academic Press, 1996, 137-165 頁(yè)。攜帶羧基的化合物優(yōu)選含有兩個(gè)或多個(gè)羧基。適用于本發(fā)明的攜帶羧基的化合物實(shí)例有檸檬酸、琥珀酸、富馬酸、馬來(lái)酸、戊二酸、脂肪酸、酒石酸、草酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、脂肪酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸，相應(yīng)的支鏈的脂肪酸、馬來(lái)酸、富馬酸、環(huán)己烷二羧酸和相應(yīng)的位置異構(gòu)體以及類似的脂肪族二元酸；四氫苯二甲酸、5-降冰片烯-2，3- 二羧酸和類似的脂環(huán)二元酸；丙烷三羧酸、烏頭酸、苯均三酸和類似的三元酸；金剛烷四羧酸、 丁烷四羧酸、環(huán)戊烷四羧酸、四氫呋喃四羧酸和類似的四元酸；糖酸，尤其是醛糖二酸，例如葡糖二酸、半乳糖二酸；蘋果酸、酒石酸、檸檬酸和類似的羥基脂肪酸；偏苯三酸、苯均四酸、聯(lián)苯四羧酸、二苯酮四羧酸、二苯砜四羧酸和類似的芳族多元羧酸。根據(jù)本發(fā)明，攜帶羧基的化合物還可以是絡(luò)合劑，其含有至少一個(gè)羧基，優(yōu)選兩個(gè)或更多個(gè)羧基，以及至少一個(gè)與根據(jù)本發(fā)明的綴合物的寡聚物結(jié)合的基團(tuán)或官能團(tuán)。其實(shí)例有N0TA、TETA、EDTA，或優(yōu)選DOTA或DTPA。在此情況下，攜帶羧基的化合物同時(shí)滿足了絡(luò)合劑的功能，其在診斷應(yīng)用中是尤其有利的。優(yōu)選的攜帶羧基的化合物是與寡聚物綴合后含有兩個(gè)或更多個(gè)游離羧基的那些。已發(fā)現(xiàn)如果攜帶羧基的化合物的羧基占攜帶羧基化合物的摩爾質(zhì)量比例越大的話，腎臟的靶向特異性越高。因此優(yōu)選羧基摩爾質(zhì)量比例高于30%、優(yōu)選高于40%的攜帶羧基的化合物。例如，DOTA的摩爾質(zhì)量是 404g/mol。其四個(gè)羧基占了 180g/mol (4xC00H = 4x45g/ mol)。因此DOTA中羧基的摩爾質(zhì)量比例約為44%。檸檬酸的摩爾質(zhì)量是192g/mol。羧基占了 135g/mol (3x45g/mol)。因此檸檬酸中羧基的摩爾質(zhì)量比例約為70%。因此，根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選的攜帶羧基的化合物是那些在與寡聚物綴合后含有2個(gè)或更多個(gè)游離羧基的化合物，其中羧基的摩爾質(zhì)量比例高于30%，優(yōu)選高于40%，例如 DOTA, DTPA和檸檬酸。間隔物，通常也稱為接頭，在兩部分分子間產(chǎn)生共價(jià)鍵，在本文中例如在本發(fā)明的寡聚物和攜帶羧基的化合物或活性化合物之間。如果兩部分間不是僅通過(guò)直接化學(xué)鍵連接，而是要產(chǎn)生兩部分間的某種分離時(shí)，通常引入間隔物。同樣，間隔物能提供連接分子的不相互反應(yīng)的兩部分所必需的化學(xué)官能團(tuán)。間隔物與寡聚物、攜帶羧基的化合物或活性化合物的綴合優(yōu)選通過(guò)酰胺或酯鍵發(fā)生。間隔物可以是，例如脂肪族烴、聚醚(例如聚乙二醇)、寡肽或具有鏈結(jié)構(gòu)的類似元件。間隔物可以是穩(wěn)定的，即在生理?xiàng)l件下不能被解離，或只能被輕微解離，或者可以是不穩(wěn)定的，即至少在某些特定的生理?xiàng)l件下可以被解離?；钚曰衔?、肽類、絡(luò)合劑或其他官能團(tuán)可以與寡聚物直接結(jié)合或通過(guò)間隔物結(jié)
I=I O可發(fā)生直接結(jié)合的官能團(tuán)實(shí)例有-NH2、-SH、-OH、-Hal (例如-Cl、-Br、-I)、-炔、_ NCS、-NCO, -SO2Cl、-疊氮化物、-碳酸酯、-醛、環(huán)氧化物、-C00H、-C00R，其中R在此優(yōu)選鹵素或優(yōu)選活化劑，即，好的離去基團(tuán)，例如N-羥基琥珀酰亞胺、五氟苯基或?qū)ο趸交?。關(guān)于偶聯(lián)的可能共價(jià)類型的綜述參見(jiàn)例如“Bioconjugate Techniques”，Greg Τ. Hermanson, Academic Press, 1996,137-165 頁(yè)。例如，活性化合物可與本發(fā)明的綴合物通過(guò)可解離接頭結(jié)合。該接頭隨后在特定條件下體內(nèi)解離，例如酶促或化學(xué)解離，釋放活性化合物。適用于該目的的接頭含有羧酸酯和二硫鍵，其中前者通過(guò)酶促或化學(xué)水解，后者通過(guò)二硫化物交換解離，例如在谷胱甘肽存在下。可解離的間隔物的一個(gè)實(shí)例是能在特異性內(nèi)源性或外源性酶幫助下解離的寡肽。因此，例如肽序列DEVD(Asp-Glu-Val-Asp)在經(jīng)Caspase-3凋亡誘導(dǎo)后解離。因此，例如通過(guò)該類間隔物結(jié)合的活性化合物或攜帶羧基的化合物可以在一段保留時(shí)間后從腎臟中去除，或者可檢測(cè)腎臟相應(yīng)的功能(特定酶存在或不存在)。其他例子有肽序列 CPEN丨FFWGGGG或PENFF，其可以被基質(zhì)金屬蛋白酶-13解離。可解離的間隔物的一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)施方案是羧酸酯的形成，其可以被酯酶方便的解離?；蛘?，所述間隔物可含有酸不穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，例如腙、亞胺、腙酸、縮醛或縮酮(例如參見(jiàn) Haag-R, Kratz-F, Angewandte Chemie 1218 頁(yè)(2006))。根據(jù)本發(fā)明，氨基酸是攜帶至少一個(gè)氨基和至少一個(gè)羧基的化合物。實(shí)例有天然的蛋白來(lái)源或非蛋白來(lái)源的氨基酸，其在有機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生或通過(guò)合成制備。 肽是通過(guò)連接兩個(gè)或更多個(gè)氨基酸形成的化合物。這里的單個(gè)氨基酸以限定的順序連接，形成鏈，通常是非支鏈的。肽中和較大蛋白中的氨基酸通過(guò)酰胺鍵相互連接。根據(jù)本發(fā)明，固相是有機(jī)、無(wú)機(jī)或有機(jī)/無(wú)機(jī)復(fù)合材料，其在固相合成中能用作樹脂或支持物。此外，模具表面，例如微量滴定板，或微粒材料，例如有機(jī)或無(wú)機(jī)納米顆粒、金屬顆粒等也被認(rèn)為是根據(jù)本發(fā)明的固相。根據(jù)本發(fā)明，根據(jù)德國(guó)藥品法的活性化合物或活性化合物分子是在藥物制備中用作藥用活性成分或在應(yīng)用于藥物制備中變成為藥用活性成分的物質(zhì)(德國(guó)藥品法 §4(19))?；钚曰衔锿ǔＴ谟袡C(jī)體內(nèi)產(chǎn)生特定的效果。根據(jù)本發(fā)明的活性化合物通常是藥用活性分子或藥物，例如免疫抑制劑，例如硫唑嘌呤、麥考酚酸嗎乙酯、環(huán)孢素、他克莫司、西羅莫司、芬戈莫德或雷公藤內(nèi)酯，細(xì)胞抑制劑，例如博萊霉素、更生霉素、絲裂霉素、 柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星、米托蒽醌、去氧氟尿苷、順鉬、卡鉬、奧沙利鉬、沙鉬、喜樹堿、托泊替康、伊立替康、安吖啶、依托泊苷、替尼泊苷、環(huán)磷酰胺、曲磷胺、美法侖、 苯丁酸氮芥、雌莫司汀、白消安、苯丁酸氮芥、氮芥、曲奧舒凡、卡莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、甲基芐胼、鏈佐星、達(dá)卡巴嗪、異環(huán)磷酰胺、替莫唑胺、噻替哌、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春地辛、紫杉醇、多西紫杉醇、甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞、氟尿嘧啶、卡培他濱、胞嘧啶阿拉伯糖苷、吉西他濱、硫鳥嘌呤、噴司他丁、巰嘌呤、氟達(dá)拉濱、克拉屈濱、羥基脲、米托坦、阿扎胞苷、阿糖胞苷、奈拉濱、硼替佐米、阿那格雷，尤其是蛋白激酶抑制劑，例如伊馬替尼、厄洛替尼、舒尼替尼、索拉非尼、達(dá)沙替尼、拉帕替尼或尼洛替尼，免疫治療劑，例如西妥昔單抗、阿侖珠單抗和貝伐單抗，消炎藥，例如萘普生、布洛芬、吲哚美辛、潑尼松龍、潑尼松、氫化可的松或布地奈德，抗生素，尤其是青霉素類，例如芐基青霉素、甲氧西林或阿莫西林，頭孢菌素類，例如cefuroxim、頭孢噻肟、頭孢羥氨芐或頭孢克肟，β -內(nèi)酰胺酶抑制劑， 例如克拉維酸、舒巴克坦或三唑巴坦，碳青霉烯類，例如亞胺培南或美羅培南，單菌胺類，例如氨曲南，四環(huán)素類，例如四環(huán)素、金霉素、土霉素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素或替吉環(huán)素，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，例如紅霉素Α，糖肽類抗生素，例如萬(wàn)古霉素，烯二炔類，例如卡齊霉素，病毒抑制劑，例如阿昔洛韋、伐昔洛韋、更昔洛韋、纈更昔洛韋、噴昔洛韋、泛昔洛韋、溴夫定、西多福韋、磷甲酸、碘苷或曲金剛胺，抗高血壓藥物，特別是血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，例如貝那普利、卡托普利、西拉普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利、 群多普利或佐芬普利，沙坦類，如氯沙坦、纈沙坦(balsartan)、厄貝沙坦、坎地沙坦、依普沙坦、奧美沙坦或替米沙坦，腎素抑制劑，例如，阿利吉侖，β -受體阻滯劑，例如普萘洛爾、吲哚洛爾、索他洛爾、波吲洛爾、阿替洛爾、比索洛爾、塞利洛爾、艾司洛爾、美托洛爾、奈必洛爾、氧烯洛爾、卡維地洛或拉貝洛爾，排尿酸藥，例如丙磺舒或苯溴馬隆，或利尿劑，如乙酰
9唑胺、呋塞米、托拉塞米、布美他尼、吡咯他尼、阿佐塞米、依他尼酸、etozoline、氫氯噻嗪、 芐噻嗪、氯噻嗪、氯噻酮、吲達(dá)帕胺、美夫西特、美托拉宗、氯帕胺、希帕胺、氫氟噻嗪、甲氯噻嗪、泊利噻嗪、阿米洛利、氨苯蝶啶、螺內(nèi)酯、坎利酮、依普利酮或螺內(nèi)酯。其他抗腫瘤劑，例如對(duì)增殖細(xì)胞有效的試劑也是根據(jù)本發(fā)明的類似活性化合物。 抗腫瘤劑的例子包括細(xì)胞因子，例如白介素_2(IL-2)、腫瘤壞死因子等，凝集素炎癥反應(yīng)增強(qiáng)物(選擇素類)，例如L-選擇素、E-選擇素、P-選擇素等以及類似分子。根據(jù)本發(fā)明，一種或多種相同或不同的活性化合物分子可結(jié)合本發(fā)明的綴合物。同樣，特別是在大分子的情況下，例如相對(duì)大的活性化合物分子，例如蛋白質(zhì)，兩個(gè)或多個(gè)，優(yōu)選2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)本發(fā)明的綴合物可能反過(guò)來(lái)與一個(gè)活性化合物分子結(jié)合，以使得腎臟特異性積聚活性化合物。根據(jù)本發(fā)明的綴合物和大分子之間通常也發(fā)生共價(jià)結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明，大分子不僅包括大的分子，例如蛋白質(zhì)，還包括任何形式的顆粒(例如納米顆粒)、脂質(zhì)體或其他系統(tǒng)，通過(guò)這些系統(tǒng)活性化合物可以轉(zhuǎn)運(yùn)或可以與之結(jié)
I=I ο除了活性化合物分子或活性分子外，其他官能團(tuán)，例如用于診斷或成像方法的官能團(tuán)也可與本發(fā)明的綴合物結(jié)合。同樣，含氟側(cè)鏈可通過(guò)任選的間隔物作為官能團(tuán)納入。因此腎臟內(nèi)的相應(yīng)分子的積聚可以在19F核共振成像的幫助下描述。具有統(tǒng)一的共振頻率的高對(duì)稱排列的氟原子在這里特別有利。為了提高19F的信號(hào)，可使用通常用于核自旋斷層掃描的造影劑，例如釓布醇(Magnevist )。如果根據(jù)本發(fā)明的綴合物包括絡(luò)合劑，在位于本發(fā)明綴合物上的絡(luò)合劑幫助下整合入本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的釓或錳或其他強(qiáng)的順磁性金屬離子是尤其有利的。本文中適當(dāng)?shù)慕j(luò)合劑例如有DOTA和DTPA.此外，不屬于攜帶羧基的化合物的絡(luò)合劑也可被綴合，其同樣任選通過(guò)間隔物。實(shí)例有羥基喹啉、硫脲、胍、二硫代氨基甲酸鹽、異羥肟酸、酰胺肟、氨基磷酸、(環(huán))聚氨基、巰基、1，3_ 二羰基和冠醚與在某些情況下具有特定活性的金屬離子。細(xì)胞特異性靶向的官能團(tuán)，例如抗體、抗體片段或適體也可以與根據(jù)本發(fā)明的綴合物結(jié)合。熒光染料或白細(xì)胞介素如IL-2，也可以被結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明，“肽鍵連接”表示兩個(gè)單體單元間存在-NH-CO-鍵，正如肽類或蛋白質(zhì)中兩個(gè)氨基酸單體單元之間存在的那樣。這表示兩個(gè)單體單元以此方式連接，一個(gè)單體的-NH基團(tuán)與另一個(gè)單體的-C = 0基團(tuán)連接。因此產(chǎn)生以下結(jié)構(gòu) M-NH-C0-M-NH-C0-M-NH-C0-M，其中M是單體的未參與結(jié)合的部分。本發(fā)明的綴合物由至少兩個(gè)共價(jià)結(jié)合的部分組成——攜帶羧基的化合物和寡聚物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述綴合物包含寡聚物、一個(gè)或多個(gè)攜帶羧基的化合物和一個(gè)或多個(gè)活性化合物分子。在一個(gè)尤其優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的綴合物包含多個(gè)， 例如2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)相同或不同的攜帶羧基的化合物和多個(gè)，例如2、3、4、5、6、7、 8、9或10個(gè)相同或不同的活性化合物分子。已發(fā)現(xiàn)如果攜帶羧基的化合物與10-80%的單體單元共價(jià)結(jié)合的話，根據(jù)本發(fā)明的綴合物尤其特異性地在腎臟積聚。根據(jù)本發(fā)明，絡(luò)合劑是能絡(luò)合金屬離子，即與金屬離子形成金屬螯合復(fù)合物的任何分子結(jié)構(gòu)。絡(luò)合劑通常也稱為螯合劑。適用于本發(fā)明的絡(luò)合劑實(shí)例有EDTA、N0TA、TETA、 亞氨二乙酸、DOTA或DTPA。根據(jù)本發(fā)明，尤其優(yōu)選能結(jié)合可在SPECT、PET、CT或MRT測(cè)量中檢測(cè)到的金屬離子的絡(luò)合劑。優(yōu)選的絡(luò)合劑是DOTA或DTPA或其衍生物。根據(jù)本發(fā)明， 絡(luò)合劑可以是已結(jié)合金屬離子的分子或可以結(jié)合金屬離子、但在現(xiàn)階段未結(jié)合的分子。本發(fā)明中適于結(jié)合絡(luò)合劑的金屬離子有，例如Fe2+、Fe3+、Cu2+、Cr3+、Gd3+、Eu3+、Dy3+、 La3+、Yb3+和/或Mn2+或放射性核素的離子，例如Y _發(fā)射體、質(zhì)子發(fā)射體、俄歇電子發(fā)射體、α 發(fā)射體和熒光發(fā)射體，例如 51Cr、67Ga、68Ga、mIn、99mTC、14°La、175Yb、153Sm、166H0、88Y、9°Y、 ^PnKmLuJSc^Pr^GcUWBd^Se^Ru^Pdh^mRh^SOdg、21^、 169EU、2°3Pb、212Pb、64CU、67CU、188Re、186Re、198AU 和 / 或 199Ago適當(dāng)?shù)慕饘匐x子及其各自的用途的例子有.111In 用于 SPECT.68Ga 用于 PET·9°Υ用于治療· Gd，Eu，Mn 用于 MRT·鉭、鎢或其他高原子序數(shù)元素用于計(jì)算機(jī)斷層掃描根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)寡聚物被用于由寡聚物構(gòu)成的綴合物的一部分，所述寡聚物由肽鍵連接的單體單元組成。寡聚物通常由5-1000個(gè)單體單元組成，優(yōu)選8-100，尤其優(yōu)選 10-50個(gè)單體單元。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述寡聚物由具有8-100個(gè)單體單元的 ε -聚賴氨酸組成，尤其優(yōu)選10-50個(gè)單體單元。然而，在其他實(shí)施方案中，高達(dá)50%的ε-賴氨酸單體單元可被其他單體單元替換，和/或高達(dá)50%的賴氨酸單體單元可通過(guò)引入其他官能團(tuán)衍生化或修飾。類似的， 如果由肽鍵連接的單體單元組成的寡聚物包含至少10個(gè)連續(xù)的由至少70% (基于單體單元數(shù)目)、優(yōu)選至少80%的ε-賴氨酸單元組成的單體單元，則寡聚物可包含多個(gè)并非是 ε-賴氨酸單體單元的連續(xù)的單體單元。例如，如果存在其中沒(méi)有ε-賴氨酸單體單元的 10-20個(gè)單體單元的鏈(例如包括氨基酸)，隨后例如10個(gè)單體單元中的8個(gè)是ε -賴氨酸單體單元，2個(gè)由其他氨基酸組成，位于所述寡聚物的一端。根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)單體單元被用于與至少一個(gè)寡聚物的其他部分經(jīng)肽鍵連接的寡聚物任何部分。這里末端單體單元通常僅與一個(gè)其他單體單元經(jīng)肽鍵連接。寡聚物中間的單體單元與兩個(gè)其他單體單元經(jīng)肽鍵連接。與三個(gè)單體單元經(jīng)肽鍵連接的單體單元位于分枝點(diǎn)上。當(dāng)單體單元位于寡聚物中間時(shí)，單體單元通常一方面提供肽鍵的-NH部分，另一方面提供-CO部分。根據(jù)本發(fā)明，ε-賴氨酸單體單元是ε-賴氨酸單元、鳥氨酸單元、2，3-二氨基丙酸單元或2，4-二氨基丁酸單元。ε-賴氨酸單體單元優(yōu)選由ε-賴氨酸單元組成。術(shù)語(yǔ)單元在這里各自表示其是位于經(jīng)肽鍵連接的寡聚物中的單元或單體，而不是游離氨基酸。ε _賴氨酸單元具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.綴合物，其包含至少一種攜帶羧基的化合物和寡聚物，所述寡聚物由肽鍵連接的單體單元組成，并且由50%以上(基于單體單元數(shù)目)的賴氨酸單體單元構(gòu)成或者包含至少10個(gè)連續(xù)的由至少70%的(基于單體單元數(shù)目)賴氨酸單體單元構(gòu)成的單體單元，其特征在于對(duì)攜帶羧基的化合物而言，羧基在攜帶羧基的化合物中的分子量的比例大于 30%。
2.權(quán)利要求1的綴合物，其特征在于此外還有至少一種活性化合物與該綴合物共價(jià)連接。
3.權(quán)利要求2的綴合物，其特征在于活性化合物選自免疫抑制劑，例如硫唑嘌呤、麥考酚酸嗎乙酯、環(huán)孢素、他克莫司、西羅莫司、芬戈莫德或雷公藤內(nèi)酯，細(xì)胞抑制劑，例如博萊霉素、更生霉素、絲裂霉素、柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星、米托蒽醌、安吖啶、去氧氟尿苷、順鉬、卡鉬、奧沙利鉬、沙鉬、喜樹堿、托泊替康、伊立替康、依托泊苷、替尼泊苷、 環(huán)磷酰胺、曲磷胺、美法侖、苯丁酸氮芥、雌莫司汀、白消安、苯丁酸氮芥、氮芥、曲奧舒凡、卡莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、甲基芐胼、鏈佐星、達(dá)卡巴嗪、異環(huán)磷酰胺、替莫唑胺、噻替哌、 長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春地辛、紫杉醇、多西紫杉醇、甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞、氟尿嘧啶、卡培他濱、胞嘧啶阿拉伯糖苷、吉西他濱、硫鳥嘌呤、噴司他丁、巰嘌呤、氟達(dá)拉濱、克拉屈濱、羥基脲、米托坦、阿扎胞苷、阿糖胞苷、奈拉濱、硼替佐米、阿那格雷，尤其是蛋白激酶抑制劑，例如伊馬替尼、厄洛替尼、舒尼替尼、索拉非尼、達(dá)沙替尼、拉帕替尼或尼洛替尼，免疫治療劑，例如西妥昔單抗、阿侖珠單抗和貝伐單抗，消炎藥，例如萘普生、布洛芬、吲哚美辛、潑尼松龍、潑尼松、氫化可的松或布地奈德，抗生素，尤其是青霉素類，例如芐基青霉素、甲氧西林或阿莫西林，頭孢菌素類，例如cefuroxim、頭孢噻肟、頭孢羥氨芐或頭孢克肟，β -內(nèi)酰胺酶抑制劑，例如克拉維酸、舒巴克坦或三唑巴坦，碳青霉烯類，例如亞胺培南或美羅培南，單菌胺類，例如氨曲南，四環(huán)素類，例如四環(huán)素、金霉素、土霉素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素或替吉環(huán)素，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，例如紅霉素Α，糖肽類抗生素，例如萬(wàn)古霉素， 烯二炔類，例如卡齊霉素，病毒抑制劑，例如阿昔洛韋、伐昔洛韋、更昔洛韋、纈更昔洛韋、噴昔洛韋、泛昔洛韋、溴夫定、西多福韋、磷甲酸、碘苷或曲金剛胺，抗高血壓藥物，特別是血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，例如貝那普利、卡托普利、西拉普利、依那普利、福辛普利、賴諾普禾U、培哚普利、喹那普利、雷米普利、群多普利或佐芬普利，沙坦類，如氯沙坦、纈沙坦、厄貝沙坦、坎地沙坦、依普沙坦、奧美沙坦或替米沙坦，腎素抑制劑，例如阿利吉侖，β -受體阻滯劑，例如普萘洛爾、吲哚洛爾、索他洛爾、波吲洛爾、阿替洛爾、比索洛爾、塞利洛爾、艾司洛爾、美托洛爾、奈必洛爾、氧烯洛爾、卡維地洛或拉貝洛爾，排尿酸藥，例如丙磺舒或苯溴馬隆，或利尿劑，如乙酰唑胺、呋塞米、托拉塞米、布美他尼、吡咯他尼、阿佐塞米、依他尼酸、 etozoline、氫氯噻嗪、芐噻嗪、氯噻嗪、氯噻酮、吲達(dá)帕胺、美夫西特、美托拉宗、氯帕胺、希帕胺、氫氟噻嗪、甲氯噻嗪、泊利噻嗪、阿米洛利、氨苯蝶啶、螺內(nèi)酯、坎利酮、依普利酮或螺內(nèi)酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3—項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物，其特征在于所述寡聚物的鏈長(zhǎng)為10-50個(gè)單體單元。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物，其特征在于所述寡聚物僅由ε-賴氨酸單體單元構(gòu)成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5—項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物，其特征在于所述寡聚物由聚賴氨酸構(gòu)成。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物，其特征在于與寡聚物綴合的至少一種攜帶羧基的化合物含有兩個(gè)或更多個(gè)游離羧基。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物，其特征在于至少一種攜帶羧基的化合物直接或通過(guò)間隔物結(jié)合ε_(tái)賴氨酸單體單元的氨基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物，其特征在于至少一種攜帶羧基的化合物是絡(luò)合劑。
10.制備根據(jù)權(quán)利要求1-9的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物的方法，其包括至少下列步驟a)提供由肽鍵連接的單體單元組成的寡聚物，并且其由50%以上(基于單體單元數(shù)目)的ε _賴氨酸單體單元構(gòu)成，或包含至少10個(gè)連續(xù)的由至少70%的(基于單體單元數(shù)目)ε _賴氨酸單體單元構(gòu)成的單體單元，b)使至少一個(gè)任選活化的攜帶羧基的化合物與所述步驟a)的寡聚物綴合。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-9的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物，其作為藥物。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-9的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物在靶向于腎臟中的用途。
13.大分子綴合物，其由與大分子共價(jià)結(jié)合的至少兩個(gè)根據(jù)權(quán)利要求1-9的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物構(gòu)成。
14.藥物，尤其是治療組合物或增強(qiáng)成像的組合物，其至少包括根據(jù)權(quán)利要求1-9的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物。
15.試劑盒，其用于制備藥物、尤其是治療組合物或增強(qiáng)成像的組合物，其至少包括根據(jù)權(quán)利要求1-9的一項(xiàng)或多項(xiàng)的綴合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及ε-聚賴氨酸綴合物，尤其是ε-聚賴氨酸和攜帶羧基的化合物的綴合物，及其制備和靶向于腎臟的用途。
文檔編號(hào)A61K49/08GK102470181SQ201080032712
公開日2012年5月23日 申請(qǐng)日期2010年7月9日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月20日
發(fā)明者A·庫(kù)貝爾貝克, B·貝耶爾, G·拉畢格, U·哈柏科恩, W·米耶爾 申請(qǐng)人:默克專利有限公司