專利名稱：北蟲草寡肽組合物及其制備方法和使用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從北蟲草中提取得到納米寡肽的方法和通過(guò)該方法提取得到的 組合物。本發(fā)明還涉及從北蟲草中提取得到的含有納米寡肽的組合物在醫(yī)藥、保健品、化妝 品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
冬蟲夏草是麥角菌科蟲草真菌ifordycc印s sinensis)的子座及其寄生主蝙蝠蛾 Qieplalus armaricanus)幼蟲尸體的復(fù)合體?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)證明，冬蟲夏草具有抗衰老、提 高免疫力、抗癌、抗病毒、抗驚厥及鎮(zhèn)靜作用、雄性激素樣作用，對(duì)心腦血管系統(tǒng)也有保護(hù) 作用。由于受生長(zhǎng)條件的限制，天然蟲草產(chǎn)量有限，野生資源已受到過(guò)度的采掘，產(chǎn)量逐年 減少，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足人們生活的需要。t^M^Cordyceps militaris (L. ) Link)又稱北冬蟲夏草，俗稱蛹蟲草。目前 北蟲草液體、固體及蛹體培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成熟并進(jìn)入了工業(yè)化生產(chǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，人工培育的北 蟲草子實(shí)體中一般營(yíng)養(yǎng)成分與天然冬蟲夏草對(duì)比發(fā)現(xiàn)，蟲草素與多糖含量比野生冬蟲夏草 要高，二者的氨基酸組成完全一致、不同氨基酸的含量略有差異但總量基本相當(dāng)。藥理試驗(yàn) 證明，人工培養(yǎng)的北蟲草子實(shí)體同樣具有與天然蟲草一樣的藥理功能。北蟲草含有多種營(yíng)養(yǎng)成分。北蟲草的子實(shí)體中一般營(yíng)養(yǎng)成分如下水分2. 31%， 灰分0. 33%，粗蛋白28. 67%，粗脂肪2. 52%，粗纖維1. 6%，核苷酸1. 50%, SOD (鮮)3 .78%，蟲草多糖5. 54%。蛋白質(zhì)為蟲草中含量最多的功效成分。過(guò)去的觀點(diǎn)認(rèn)為，動(dòng)物 的消化道只能吸收游離的氨基酸，即蛋白質(zhì)必須分解成游離的氨基酸才能被吸收，近年來(lái) 的研究發(fā)現(xiàn)，寡肽可以完整的形式被吸收進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)而被組織利用。在營(yíng)養(yǎng)和化妝行業(yè)，對(duì)冬蟲夏草進(jìn)行提取處理獲得更高純度的有效成分物質(zhì)是常 用的手段。目前比較流行的蟲草的營(yíng)養(yǎng)制劑的提取方法是粗加工的方式，包括蒸煮、回流或 索氏提取等方式。這些方法獲得的蟲草制劑中含有大量不需要的物質(zhì)，另外，其有效成分物 質(zhì)的純度仍然不夠，特別是蛋白質(zhì)通常還保留幾乎完整的大分子形式。大分子形式的蛋白 質(zhì)生物利用度一般比較低，在營(yíng)養(yǎng)和化妝行業(yè)中是不利的。而多肽，特別是小分子肽有以下特點(diǎn) (1)不需消化，直接吸收。(2)吸收時(shí)不需消耗人體能量。(3)不增加人體胃腸功能負(fù)擔(dān)。(4)具優(yōu)先吸收特點(diǎn)。(5)吸收快速，比人體吸收大分子蛋白質(zhì)快129600秒鐘，較人體氨基酸快64800秒鐘。(6)以自身能量推動(dòng)吸收。(7) 100% 被吸收。(8)在人體吸收功能降低時(shí)，人體能夠被動(dòng)吸收。
(9)具有載體作用，可將人體其它營(yíng)養(yǎng)載在基體上，輸送到人體細(xì)胞組織。(10)在人體內(nèi)變成運(yùn)輸工具，將各種微量元素送到人體各部位。(11)具有極強(qiáng)的活性和生理功能多樣性。因此，人們通過(guò)各種水解方法把蛋白水解變成小的肽，以提高其生物利用度。專利CN200710030010.X中用酸解和超聲波共同處理蟲草粉，得到一種活性提取 物。專利CN200510040961.6中用單一的中性蛋白酶處理含有蟲草粉和其它如蠶蛹和 蛋等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物，得到一種保健化妝品制品。專利CN200510016899. 7中采用木瓜蛋白酶或胰蛋白酶對(duì)北蟲草菌進(jìn)行蛋白酶水 解，然后再通過(guò)納米機(jī)對(duì)水解產(chǎn)物進(jìn)行處理，得到產(chǎn)物分子量分布在100-200nm范圍。專利CN200710077253. 9中對(duì)含有包括蟲草粉在內(nèi)的三種菌類的混合物用單一的
中性蛋白酶進(jìn)行完全酶解處理，得到一種營(yíng)養(yǎng)制品。專利CN200710159152.6中對(duì)北蟲草用胃蛋白酶、HAP堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰 酶、堿性內(nèi)切蛋白酶、纖維素溶壁酶中的一種或多種進(jìn)行處理，得到一種營(yíng)養(yǎng)制品。然而，本領(lǐng)域仍然需要具有更低分子量的北蟲草小分子肽制品，例如大部分為含 有長(zhǎng)度低于十個(gè)氨基酸，優(yōu)選為兩個(gè)到五個(gè)氨基酸的小分子肽，其分子的長(zhǎng)度為0. I-IOnm 水平。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種從北蟲草中水解提取得到納米寡肽的方法，其中采用復(fù)合酶 法水解北蟲草，獲得含有小分子納米寡肽的組合物，其特征在于，所述納米寡肽的分子量主 要分布在100-1000D之間。在本發(fā)明的一個(gè)方面，所述組合物中分子量為100-500D的納米 寡肽的高斯分布峰面積百分比超過(guò)50%，優(yōu)選超過(guò)70%。在本發(fā)明的又一個(gè)方面，所述組合 物中納米寡肽的高斯分布峰值分子量約為150-500D。在本發(fā)明的又一個(gè)方面，所述組合物 中納米寡肽的分子量具有如下的高斯分布
權(quán)利要求
1. 一種從北蟲草中水解提取得到納米寡肽的方法，其中采用復(fù)合酶法水解北蟲草， 獲得含有小分子納米寡肽的組合物，其特征在于，所述納米寡肽的分子量主要分布在 100-1000D之間，優(yōu)選的，所述組合物中分子量為100-500D的納米寡肽的高斯分布峰面積 百分比超過(guò)50%，優(yōu)選超過(guò)70%，更優(yōu)選的，所述組合物中納米寡肽的分子量具有如下的高 斯分布
2.權(quán)利要求1的方法，其中水解所采用的酶是3種或3種以上水解酶的組合，所述水解 酶選自胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶、中性蛋白酶和菠蘿 蛋白酶。
3.權(quán)利要求2的方法，其特征在于，其中水解所采用的酶含有堿性蛋白酶、中性蛋白酶 和胃蛋白酶，優(yōu)選的，加入酶的順序是堿性蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶。
4.權(quán)利要求3的方法，所述方法包括以下步驟 將蟲草子實(shí)體烘干，粉碎成50-200目細(xì)粉； 將所述細(xì)粉與去離子水按1 10-1 50混合；蛋白質(zhì)變性處理，將混合液升溫至90-95°C，保持10-15min ；把所述混合液降溫至50-60°C，按子實(shí)體干重的1重量％_3重量％加入50萬(wàn)u/g堿性 蛋白酶，調(diào)節(jié)pH至8-9，50-60°C保溫2-4h ；降溫至40-50°C，按子實(shí)體干重1重量％_3重量％加入15萬(wàn)u/g中性蛋白酶，調(diào)節(jié)pH 至 7-7. 5，40-50°C保溫 2-4h ；調(diào)pH至3. 0-4. 0,按子實(shí)體干重1重量％_3重量％加入5萬(wàn)u/g胃蛋白酶，升溫至 50-60°C，保持 2-4h ；升溫至95-100°C，保持10-20min，滅酶； 粗過(guò)濾；加重量2-3重量％的活性炭，70-75°C脫色0. 5-lh ；用硅藻土過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得澄清微黃色小分子肽液體； 濃縮，進(jìn)行噴霧干燥或冷凍干燥得到淡黃色粉末。
5. 一種從北蟲草水解提取得到的組合物，所述水解為用復(fù)合酶法對(duì)北蟲草蛋白進(jìn)行水 解，其特征在于，所述組合物中含有北蟲草蛋白水解得到的小分子的納米寡肽，所述納米寡 肽的分子量主要分布在100-1000D之間，優(yōu)選的，所述組合物中分子量為100-500D的納米 寡肽的高斯分布峰面積百分比超過(guò)50%，優(yōu)選超過(guò)70%，更優(yōu)選的，所述組合物中納米寡肽 的分子量具有如下的高斯分布
6.權(quán)利要求5的組合物，其中水解所采用的酶是3種或3種以上水解酶的組合，所述水 解酶選自胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶、中性蛋白酶和菠 蘿蛋白酶。
7.權(quán)利要求6的組合物，其特征在于，其中水解所采用的酶含有堿性蛋白酶、中性蛋白 酶和胃蛋白酶，優(yōu)選的，所述水解中加入酶的順序是堿性蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶。
8.權(quán)利要求5的組合物，其中還含有其它活性成分，其為蟲草素、蛻皮酮、腺苷、蟲草多 糖、蟲草酸、麥角留醇、膽醇、甘露醇、軟脂酸脂、腺嘌呤、次黃嘌呤、胸腺嘧啶、亞油酸、黃酮 類物質(zhì)，激素樣成分，維生素以及微量元素。
9.一種化妝品組合物，其含有權(quán)利要求5-8中任一項(xiàng)的從北蟲草水解提取得到的組合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求5-8中任一項(xiàng)的從北蟲草水解提取得到的組合物在制備醫(yī)藥、保健 品、化妝品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從北蟲草中提取含有納米寡肽的組合物的方法和通過(guò)該方法提取得到的組合物。本發(fā)明采用復(fù)合酶法水解北蟲草，獲得小分子的納米寡肽，其特征在于，所述納米寡肽的分子量主要分布在100-1000D之間，優(yōu)選的，所述組合物中分子量為100-500D的納米寡肽的高斯分布峰面積百分比超過(guò)50%。本發(fā)明提供的北蟲草寡肽提取物中同時(shí)保留了其它活性成分，包括蟲草素、蛻皮酮、腺苷、蟲草多糖、蟲草酸、微量元素、各族維生素、以及游離氨基酸。本發(fā)明還涉及從北蟲草中提取得到的含有納米寡肽的組合物在制備醫(yī)藥、保健品、化妝品中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K8/64GK102000121SQ201010533520
公開(kāi)日2011年4月6日 申請(qǐng)日期2010年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月5日
發(fā)明者杜以波, 胡如桂 申請(qǐng)人:北京中生奧普寡肽技術(shù)研究所