專利名稱：一種用于抗輻射的復(fù)合多糖的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于抗輻射的復(fù)合多糖，適用于腫瘤病人的放化治療。
背景技術(shù)：
目前的化療藥物大多為細(xì)胞毒性藥物，該類藥物的缺點(diǎn)是在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí) 也會(huì)殺傷正常的組織細(xì)胞，這不僅制約了藥物的劑量和療效，同時(shí)也會(huì)降低患者的生理免 疫功能，不能有效阻止腫瘤的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)，成為治療中的“瓶頸”，因此，拓寬對(duì)化學(xué)治療不敏 感的腫瘤細(xì)胞的治療途徑，解脫毒害作用研究已引起學(xué)術(shù)界的廣為關(guān)注。從天然藥物中提 取分離的多糖是一種天然的免疫促進(jìn)劑，大量研究表明多糖抗腫瘤活性主要是通過(guò)增強(qiáng)免 疫調(diào)節(jié)功能及宿主介導(dǎo)抗腫瘤活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的，這一點(diǎn)顯然優(yōu)于細(xì)胞毒性抗腫瘤藥物。近十 多年來(lái)，人們對(duì)于許多單味天然多糖的免疫功能做了大量的研究，本申請(qǐng)人從2003年起也 圍繞著這一課題進(jìn)行了多次專項(xiàng)試驗(yàn)。在試驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)，單味天然多糖藥物的生物活性往往是單一或是側(cè)重于某一生 物活性的，一些多糖配伍具有比單味多糖更好的生物活性，不同的多糖由于化學(xué)組成及結(jié) 構(gòu)不同，激活免疫系統(tǒng)的途徑也不同，因此各種多糖之間存在復(fù)雜的協(xié)同關(guān)系，如果配合得 當(dāng)往往會(huì)產(chǎn)生更強(qiáng)的免疫效果。當(dāng)使用一定配比的復(fù)合多糖時(shí)，可協(xié)同增強(qiáng)小鼠的脾淋巴 細(xì)胞活性，對(duì)S18tl腫瘤的生長(zhǎng)有一定的抑制作用。在新近的研究中我們還意外地發(fā)現(xiàn)并證實(shí)，利用復(fù)合多糖還可以增加Y射線照 射后小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)，增加骨髓的DNA含量，對(duì)輻射損傷有良好的保護(hù)作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種用于抗輻射的復(fù)合多糖，該復(fù)合多糖可以顯 著地增加Y射線照射后小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)，增加骨髓的DNA含量，對(duì)輻射損傷有良好的 保護(hù)作用。本發(fā)明復(fù)合多糖原料中的有效成分及重量份配比如下 香菇多糖 30-80重量份
姬松茸多糖 5-55重量份 茯苓多糖 15-65重量份。本發(fā)明復(fù)合多糖原料中的有效成分及重量份優(yōu)選配比如下 香菇多糖 35-65重量份
姬松茸多糖 10-40重量份 茯苓多糖 20-50重量份。上述的香菇多糖、姬松茸多糖、茯苓多糖的含量不低于提取物的50%。以下是為制備發(fā)明產(chǎn)品所使用的三種多糖原料的各自特性。香菇多糖香菇(Lentinula edodes Pegler)是中國(guó)傳統(tǒng)的藥食兩用真菌，香菇多 糖是由香菇子實(shí)體中提取，其提取的多糖成分中以葡聚糖為主，含有少量的木糖
3和甘露糖。香菇多糖對(duì)免疫系統(tǒng)的作用主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面①激活T細(xì)胞和B細(xì)胞， 促進(jìn)特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(CTL)的產(chǎn)生，并提高TCL的殺傷活性；②激活巨噬細(xì)胞，并 增加其絕對(duì)數(shù)量；③促進(jìn)白細(xì)胞介素(IL)和干擾素(IFN)等細(xì)胞因子的生成；④激活補(bǔ)體 系統(tǒng)。姬松茸多糖姬松茸(Agaricus blazei )，因原產(chǎn)巴西，故又名巴西蘑菇，也稱小松 菇，是九十年代食用菌界新開發(fā)、口感極佳的稀有真菌。姬松茸的主要成分是多糖類和甾醇 類，經(jīng)熱水提取的姬松茸β葡聚糖有較強(qiáng)的抗癌活性，有對(duì)人體增強(qiáng)精力的功效，并能抑 制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，具有抗腫瘤作用，對(duì)致癌物質(zhì)有吸收、排泄作用，其還具有降血糖、改善 糖尿病、降膽固醇、改善動(dòng)脈硬化的作用。茯苓多糖茯苓(Poria cocos Polysaccaride)俗稱云苓、松苓、茯靈，為寄生 在松樹根上的菌類植物，藥食兩用。茯苓多糖是從茯苓菌核中提取的，主要有茯苓聚糖 (pachy-man )、茯苓次聚(Pachymaran )及高度(1，3 )、( 1，6 )、分支的 β _D_ 葡聚糖 Hl 1 (gluan H11)。茯苓多糖能激活局部新體，使腫瘤附近區(qū)域被激活的新體影響巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞或 其他細(xì)胞及體液因子，從而協(xié)同殺傷腫瘤細(xì)胞。茯苓多糖還能激活對(duì)腫瘤的免疫監(jiān)測(cè)系統(tǒng)， 調(diào)節(jié)免疫、保肝降酶、間接抗病毒、誘生和促誘生干擾素、減輕放射副反應(yīng)、誘生和促誘生白 細(xì)胞調(diào)節(jié)素等生理活性。本發(fā)明復(fù)合多糖可以制成各種劑型，如軟硬膠囊劑、片劑、丸劑或顆粒劑。本發(fā)明的復(fù)合多糖不僅能夠明顯地提高小鼠免疫力，而且還能增加對(duì)經(jīng)Y射線 照射后的小鼠的白細(xì)胞數(shù)、骨髓細(xì)胞DNA含量，因此本發(fā)明的組方具有更強(qiáng)的抗輻射效果， 特別適用于腫瘤疾病放、化療或腫瘤病術(shù)后的輔助治療。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
實(shí)施例2
制備本發(fā)明產(chǎn)品軟膠囊劑型的具體方法
按配方量稱取上述多糖，混合均勻，加入配方量使用色拉油混懸均勻，裝入軟膠囊 機(jī)中壓制成囊即得。
實(shí)施例3
制備本發(fā)明產(chǎn)品1000片片劑的原料配比
實(shí)施例4
制備本發(fā)明產(chǎn)品片劑的具體方法
按配方量稱取上述多糖，干燥、粉碎，過(guò)80目篩，與微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉過(guò)80目 篩混合均勻，以5%PVP制粒或干法制粒，整粒，加入硬脂酸鎂，壓片，包衣，即得。為更好的理解本發(fā)明的抗輻射效果，下面用復(fù)合多糖能增加對(duì)經(jīng)Y射線照射后 的小鼠的白細(xì)胞數(shù)、骨髓細(xì)胞DNA含量的實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明。下列實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均通過(guò)SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行行統(tǒng)計(jì)處理7 < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)
眉、ο實(shí)施例5
本發(fā)明產(chǎn)品的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn) (一)原理
外周血白細(xì)胞數(shù)減少時(shí)一次性全身Y射線引起輻射損傷的表現(xiàn)之一，在一定范圍內(nèi)， 照射劑量與外周血中白細(xì)胞數(shù)成反比，恢復(fù)時(shí)間與外周血中白細(xì)胞數(shù)成正比，外周血中白 細(xì)胞數(shù)可代表血液系統(tǒng)受損狀況。(二)儀器和試劑
20 μ L定量取血管、血球計(jì)數(shù)板、顯微鏡、1%鹽酸等。(三)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
昆明種小鼠，18 22g，健康，雌性，每組10只。(四)試驗(yàn)方法
1.實(shí)驗(yàn)分組分受試樣品組與對(duì)照組。受試樣品于照射前給予20天，照 射后仍然給予受試物，至照射后14天取樣。2.受試樣品低劑量組300mg/kg，中劑量組600mg/kg，高劑量組1200mg/kg，各 劑量組中，香菇多糖占40重量份，姬松茸多糖占20重量份；茯苓多糖占40重量份。3.操作步驟于照射前后經(jīng)口連續(xù)給予受試樣品。各劑量組與輻射模型 對(duì)照組均以同一劑量Y射線全身照射一次，照射劑量為3Gy。分別于照射前、后第3
天、照射后第14天三次采末梢血20 μ L，加入30mLl%鹽酸中，混勻后，加入血球計(jì)數(shù)板中，計(jì) 算計(jì)數(shù)池中四個(gè)大方格中白細(xì)胞總數(shù)。
(五)試驗(yàn)結(jié)果受試物對(duì)輻照后小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)的影響結(jié)果見(jiàn)表1、表2、表3。 將上表輻照前小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)在各劑量組與模型對(duì)照組間比較，P > 0.05 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即分組時(shí)小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)在各組間較為均衡。
將表2模型組小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)在輻照前后比較，P < 0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 即以3Gy劑量射線對(duì)小鼠進(jìn)行全身一次性照射建立的外周血白細(xì)胞數(shù)損傷模型成立。 將表3各劑量組白細(xì)胞數(shù)與模型對(duì)照組比較，低劑量組P > 0. 05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué) 意義，中劑量組和高劑量組P < 0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即中劑量與高劑量組均能逆轉(zhuǎn) 3Gy劑量射線對(duì)小鼠進(jìn)行全身一次性照射造成的外周血白細(xì)胞數(shù)損傷。實(shí)施例6
本發(fā)明產(chǎn)品的骨髓細(xì)胞DNA含量實(shí)驗(yàn) (一)原理
骨髓細(xì)胞DNA含量是一次性全身γ射線照射引起輻射損傷的表現(xiàn)之一，在一定范圍 內(nèi)，照射劑量與骨髓細(xì)胞DNA含量成反比，回復(fù)時(shí)間與骨髓細(xì)胞DNA含量成正比，骨髓細(xì)胞 DNA含量可代表造血系統(tǒng)受損狀況。(二)儀器和試劑
注射器，手術(shù)器械，紫外分光光度計(jì)，Hank' s液等。(三)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
昆明種小鼠，18 22g，健康，雌性，每組10只。(四)試驗(yàn)方法
1.實(shí)驗(yàn)分組分受試樣品組與對(duì)照組。受試樣品于照射前給予20天，照 射后仍然給予受試物，至照射后14天取樣。2.受試樣品低劑量組300mg/kg，中劑量組600mg/kg，高劑量組1200mg/kg，各
6劑量組中，香菇多糖占40重量份，姬松茸多糖占20重量份；茯苓多糖占40重量份。3.操作步驟于照射前后經(jīng)口連續(xù)給予受試樣品。各劑量組與輻射模型 對(duì)照組均以同一劑量Y射線全身照射一次，照射劑量為3Gy。于照射后第3天， 頸椎脫臼殺死小白鼠，剝離出股骨，用ImL注射器(6. 5號(hào)針頭)吸取一定體積的Hank's
液，沖出股骨中的全部骨髓細(xì)胞；最后，讓細(xì)胞懸液通過(guò)4號(hào)針頭的注射器，使細(xì)胞在懸液 中充分分散，用紫外分光光度計(jì)260nm處測(cè)定DNA含量。(五)試驗(yàn)結(jié)果
受試物對(duì)輻照后小鼠骨髓細(xì)胞DNA濃度的影響見(jiàn)表4。
將表4中的陰性對(duì)照組與模型對(duì)照測(cè)得的DNA含量進(jìn)行組間比較，P < 0.01，差異有 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即以3 Gy劑量射線對(duì)小鼠進(jìn)行全身一次性照射建立骨髓DNA濃度降低模型 成立。各劑量組與模型對(duì)照組間比較，低劑量組與中劑量的P < 0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 高劑量組與模型組的P > 0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。即低劑量與高劑量組均能逆轉(zhuǎn)3 Gy劑量射線對(duì)小鼠進(jìn)行全身一次性照射造成的 骨髓造血系統(tǒng)損傷。綜上實(shí)驗(yàn)所述，外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)和骨髓細(xì)胞DNA含量實(shí)驗(yàn)中均有兩個(gè) 劑量組與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證明實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，即本實(shí)驗(yàn)所用的復(fù)合多糖的 配比可增加小鼠一次性Y射線照射引起的周血白細(xì)胞的減少和骨髓細(xì)胞DNA含量的降低， 具有較好的輻射損傷的保護(hù)作用。
權(quán)利要求
一種用于抗輻射的復(fù)合多糖，其原料中的有效成分及重量份配比如下香菇多糖 30-80重量份姬松茸多糖5-55重量份 茯苓多糖 15-65重量份 。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于抗輻射的復(fù)合多糖，其原料中的有效成分及重量份配比 如下香菇多糖 35-65重量份 姬松茸多糖 10-40重量份 茯苓多糖 20-50重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于抗輻射的復(fù)合多糖，所述的香菇多糖、姬松茸多糖、 茯苓多糖的含量不低于提取物的50%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于抗輻射的復(fù)合多糖，其有效成分為香菇多糖、姬松茸多糖、茯苓多糖，該復(fù)合多糖不僅能夠明顯地提高小鼠免疫力，而且還能增加對(duì)經(jīng)γ射線照射后的小鼠的白細(xì)胞數(shù)、骨髓細(xì)胞DNA含量，具有更強(qiáng)的抗輻射效果。特別適用于腫瘤疾病放、化療或腫瘤病術(shù)后的輔助治療。
文檔編號(hào)A61K31/715GK101879182SQ201010243779
公開日2010年11月10日 申請(qǐng)日期2010年8月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月3日
發(fā)明者劉吉成, 韓翠艷 申請(qǐng)人:齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院