專(zhuān)利名稱(chēng)：用于再生牙齒的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明關(guān)于一種用于再生牙齒的組合物，尤其關(guān)于一種與脂肪干細(xì)胞并用以再生牙齒的組合物。
背景技術(shù)：
于牙科治療中，當(dāng)牙齒因蛀牙、年齡增長(zhǎng)、齒列矯正手術(shù)等因素而有缺損或經(jīng)拔除時(shí)，一般會(huì)以補(bǔ)牙、植牙或假牙重建等方式進(jìn)行治療。不論是補(bǔ)牙、植牙或假牙重建，目前皆是使用人工材質(zhì)來(lái)取代原本的牙齒成分，例如鈦金屬、瓷、或復(fù)合樹(shù)脂等。然而，人體對(duì)于人工材質(zhì)可能產(chǎn)生排異性，且人工材質(zhì)易因不耐磨損而需要重復(fù)修補(bǔ)，甚至失去整顆牙齒。因此，若可使牙齒自然地再生，則可避免因使用人工材質(zhì)治療或重建牙齒而產(chǎn)生的各種問(wèn)題。再生醫(yī)學(xué)的技術(shù)包含使干細(xì)胞分化為特定的細(xì)胞種類(lèi)，并結(jié)合組織工程，使其生長(zhǎng)為新的組織或器官以取代損壞的組織或器官，從而發(fā)揮正常的生理功能。就牙齒再生醫(yī)學(xué)而言，目前業(yè)已使用牙髓干細(xì)胞、牙周韌帶干細(xì)胞及骨髓間質(zhì)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的來(lái)源以進(jìn)行研究，其中，盡管牙髓干細(xì)胞及牙周韌帶干細(xì)胞可作為牙齒再生的最直接的細(xì)胞來(lái)源，但是，因其于人體內(nèi)的存在量稀少，故難以取得足夠的量而進(jìn)行治療；而骨髓間質(zhì)干細(xì)胞除具有可獲得量稀少的缺點(diǎn)外，又易因年齡增長(zhǎng)而老化，且須以抽取骨髓的方式獲得，故于實(shí)際應(yīng)用上多有局限。另一方面，除了干細(xì)胞來(lái)源外，如何選用合適的生長(zhǎng)激素和細(xì)胞支架(scaffold)成分，以使干細(xì)胞分化、并進(jìn)一步生長(zhǎng)為結(jié)構(gòu)健全且功能完整的牙齒，亦為牙齒再生醫(yī)學(xué)的關(guān)鍵所在。因此，為了使再生醫(yī)學(xué)可實(shí)際應(yīng)用于臨床的牙科治療上，需要一種穩(wěn)定、豐富且易于取得的干細(xì)胞來(lái)源。本發(fā)明即針對(duì)上述需求所為的研究，本案發(fā)明人發(fā)現(xiàn)使用脂肪干細(xì)胞(adipose stem cell)與生長(zhǎng)激素及生醫(yī)材料的組合物，可成功使牙齒再生，且再生的牙齒具有健全的結(jié)構(gòu)與功能。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一目的在于提供一種與脂肪干細(xì)胞并用以再生牙齒的組合物，其包含生長(zhǎng)激素及人工及/或天然的聚合物。本發(fā)明的另一目的在于提供一種用于再生牙齒的組合物，其包含脂肪干細(xì)胞、生長(zhǎng)激素及人工及/或天然的聚合物。本發(fā)明的詳細(xì)技術(shù)及較佳實(shí)施方式，將描述于以下內(nèi)容中，以供本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域具通常知識(shí)者據(jù)以明了本發(fā)明的特征。


圖1為本發(fā)明的用于再生牙齒的組合物的制備及移植的流程圖；圖2為兔子牙髓干細(xì)胞與兔子脂肪干細(xì)胞的光學(xué)顯微鏡圖；圖3A為兔子上門(mén)牙及下門(mén)牙的齒槽的X光攝影圖;3B為兔子上門(mén)牙及下門(mén)牙的齒槽的解剖圖；圖4A至圖4C為兔子新生牙齒組織與正常牙齒組織的H&E組織染色圖；以及圖5A及圖5B為兔子新生牙齒組織與正常牙齒組織的綠色免疫熒光組織染色圖。
具體實(shí)施例方式如上述，目前補(bǔ)牙、植牙或假牙重建皆是使用人工材質(zhì)作為自然牙齒成分的替代品，但是，其具有產(chǎn)生排異性或因磨損而須重復(fù)修補(bǔ)的缺點(diǎn)，而牙齒再生醫(yī)學(xué)可解決此問(wèn)題。然而，目前研究的牙髓干細(xì)胞、牙周韌帶干細(xì)胞或骨髓間質(zhì)干細(xì)胞并無(wú)法作為穩(wěn)定且豐富的干細(xì)胞來(lái)源。脂肪干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞(adult stem cell)，具有不易老化的特性，且可利用一般抽脂手術(shù)而大量取得，故可作為穩(wěn)定且豐富的干細(xì)胞來(lái)源。此外，脂肪干細(xì)胞的免疫排異性低，故可進(jìn)行同種動(dòng)物間的脂肪干細(xì)胞的異體移植，而不限于自體移植，因此，其具有高度的運(yùn)用彈性。有鑒于此，本發(fā)明將脂肪干細(xì)胞運(yùn)用于牙齒再生醫(yī)學(xué)，而提供一種與脂肪干細(xì)胞并用以再生牙齒的組合物，且該組合物包含生長(zhǎng)激素及人工及/或天然的聚合物。于本發(fā)明的組合物中，可使用選自以下群組的生長(zhǎng)激素成骨蛋白(bone morphogenetic protein, BMP)、齒質(zhì)基質(zhì)蛋白(dentinmatrix protein, DMP)、生長(zhǎng)分化因子(Growth/differentiation factor, Gdf)或前述的組合。該生長(zhǎng)激素作為一種信息分子，促使脂肪干細(xì)胞進(jìn)行分化，并進(jìn)而形成牙齒組織。成骨蛋白亦稱(chēng)為骨形態(tài)發(fā)生蛋白，目前已知有二十種不同的成骨蛋白，其為一種轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(transforming growth factor)，可誘導(dǎo)未分化的間質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell)分化成軟骨細(xì)胞或成骨細(xì)胞并促使其增生，故成骨蛋白參與軟骨及成骨的生長(zhǎng)發(fā)育及修復(fù)重建過(guò)程。成骨蛋白除可促進(jìn)軟骨和成骨的形成，亦可調(diào)節(jié)組織或器官的胚胎細(xì)胞的發(fā)育與形態(tài)發(fā)生。齒質(zhì)基質(zhì)蛋白或稱(chēng)為牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白，是一種參與骨骼及牙齒鈣化過(guò)程的非膠原性蛋白質(zhì)，其由骨細(xì)胞或齒質(zhì)母細(xì)胞分泌至細(xì)胞外，以促進(jìn)骨生成或齒質(zhì)形成。生長(zhǎng)分化因子則是細(xì)胞發(fā)育的重要生物信息分子，可促進(jìn)軟骨細(xì)胞增生及牙周組織形成。較佳地，本發(fā)明組合物可包含選自以下群組的生長(zhǎng)激素成骨蛋白-2(BMP-2)、成骨蛋白-4(BMP-4)、成骨蛋白-7 (BMP-7)、成骨蛋白-11 (BMP-Il)、齒質(zhì)基質(zhì)蛋白_1 (DMP-I)、 生長(zhǎng)分化因子-11 (Gdf-Il)及前述生長(zhǎng)激素的組合。最佳地，該組合物包含成骨蛋白_2。 成骨蛋白-2是一種分子量為約30千道爾頓(kDa)的雙硫鍵同型二聚體蛋白質(zhì)，其可自動(dòng)物體內(nèi)純化而取得，或利用人工基因選殖的方式制得。然而，由于成骨蛋白-2于動(dòng)物體內(nèi)的含量甚少，且不同個(gè)體來(lái)源的成骨蛋白-2對(duì)于誘導(dǎo)干細(xì)胞分化的活性差異度甚大，故通常是使用人工基因選殖的成骨蛋白_2。于本發(fā)明的一實(shí)施方式中，是使用基因重組的人類(lèi)成骨蛋白-2 (recombinant human BMP-2)。于本發(fā)明的組合物中，包含一聚合物，以作為脂肪干細(xì)胞分化、并進(jìn)而形成牙齒組織時(shí)的支架(scaffold)或骨干，使細(xì)胞形成并維持三維空間的結(jié)構(gòu)?？捎诒景l(fā)明組合物使用選自以下群組的聚合物膠原蛋白、聚麩胺酸(polyglutamic acid, PGA)、聚乳酸交酉旨一乙醇酸(poly lactide-glycolic acid,PLGA)、聚憐酸 丐(calciumpolyphosphate)、六氟異丙醇絲(hexafluoroisopropanol silk, HFIPsilk)或前述的組合。較佳地，于本發(fā)明組合物中使用膠原蛋白。膠原蛋白亦稱(chēng)為骨膠原，目前已知有二十九種不同的膠原蛋白，分別存在于動(dòng)物體內(nèi)各組織中。膠原蛋白具有特殊的三股螺旋纏繞結(jié)構(gòu)，于三條相互獨(dú)立的膠原蛋白勝肽鏈之間借助甘氨酸形成的氫鍵維持纏繞結(jié)構(gòu)，此三股螺旋結(jié)構(gòu)賦予膠原蛋白優(yōu)異的機(jī)械強(qiáng)度與彈性。此外，膠原蛋白可經(jīng)由交聯(lián)作用而形成更穩(wěn)固的結(jié)構(gòu)。由于膠原蛋白具有優(yōu)異的韌性與彈性，且具有高度生物相容性，故常運(yùn)用于組織工程中。因此，于本發(fā)明中，較佳使用膠原蛋白作為細(xì)胞支架；而在所有膠原蛋白中，第一型(type I)膠原蛋白與第二型(type II)膠原蛋白牙齒與軟骨組織中的主要成分。因此，于本發(fā)明中，更佳使用第一型或第二型膠原蛋白。本發(fā)明的組合物可呈一混合物的形式，或采各成分相互獨(dú)立的形式。原則上，只要組合物中的生長(zhǎng)激素與人工或天然聚合物不會(huì)產(chǎn)生不利地相互影響，則可呈混合物的形式 (如干粉混合物)。舉例言之，當(dāng)組合物中包含成骨蛋白與膠原蛋白時(shí)，由于二者并不會(huì)相互影響，故該組合物可為一混合物，即，將成骨蛋白與膠原蛋白混合在一起。惟，鑒于生長(zhǎng)激素與人工或天然聚合物可能需要不同的儲(chǔ)存環(huán)境(例如不同的PH值、防腐劑或含水量等)， 故本發(fā)明組合物亦可采用各成分相互獨(dú)立的形式，以維持各成分的最佳活性或狀態(tài)。另一方面，視選用的生長(zhǎng)激素與人工或天然聚合物而定，本發(fā)明組合物可呈溶液、粉末、懸浮液或其他形式。由于生長(zhǎng)激素主要為蛋白質(zhì)，故為防止生長(zhǎng)激素變性 (denature)，一般須將其置于含有鹽分的緩沖溶液中，或者，可以低溫冷凍干燥的方式將生長(zhǎng)激素制成粉末，并置于4°C以下的低溫儲(chǔ)存。此外，若選用的聚合物為蛋白質(zhì)(例如膠原蛋白或聚麩胺酸)，則其亦可依上述方式而呈溶液或粉末的形式。因此，本發(fā)明組合物中的各成分可相互混合或分離，且可同時(shí)為粉末、溶液、懸浮液或其他形式，或獨(dú)立地各別為粉末、溶液、懸浮液或其他形式，或者，采一成分溶于另一成分的方式等，而無(wú)特別限制。另外，可于本發(fā)明組合物中添加防腐劑或干燥劑，以延長(zhǎng)其保存期限。本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域具通常知識(shí)者，基于本文的教導(dǎo)，可于本發(fā)明組合物中，視選用的生長(zhǎng)激素或聚合物的種類(lèi)而調(diào)整其用量。較佳地，本發(fā)明組合物中的生長(zhǎng)激素與聚合物的重量比例約為1 1，200至1 120，000，更佳約為1 6，000至1 60，000，最佳約為 1 9，000 至 1 12，000。可將本發(fā)明組合物連同脂肪干細(xì)胞移植入一牙齒缺損或經(jīng)拔除的齒槽中，以進(jìn)行牙齒再生。于此，可視需要調(diào)整脂肪干細(xì)胞的用量，舉例言之，當(dāng)將該組合物用于部分牙齒的修補(bǔ)或再生時(shí)，脂肪干細(xì)胞的用量可較低；而將該組合物用于全牙再生時(shí)，則可增加脂肪干細(xì)胞的用量。脂肪干細(xì)胞的用量一般為約5 X IO2至約5 X IO6個(gè)每奈克生長(zhǎng)激素，較佳為約5 X IO3至約5 X IO5個(gè)，更佳為約5 X IO4至約1 X IO5個(gè)。此外，如上述，脂肪干細(xì)胞的免疫排異性低，故可進(jìn)行同種動(dòng)物間的脂肪干細(xì)胞的異體移植，因此，于本發(fā)明中，除可使用來(lái)自待移植的動(dòng)物體的脂肪干細(xì)胞之外，亦可使用來(lái)自同種的其他動(dòng)物體的脂肪干細(xì)胞。本發(fā)明亦提供另一種用于再生牙齒的組合物，其包含脂肪干細(xì)胞、生長(zhǎng)激素及人工及/或天然的聚合物。其中，該生長(zhǎng)激素及人工及/或天然的聚合物的種類(lèi)、用量與形式，以及脂肪干細(xì)胞的來(lái)源與含量，皆如上文中所定義者。此外，鑒于脂肪干細(xì)胞的高敏感性，其須儲(chǔ)存于嚴(yán)苛條件的環(huán)境中，才能維持生命力并防止污染，且為避免生長(zhǎng)激素或聚合
5物影響脂肪干細(xì)胞，因此，于此組合物中，脂肪干細(xì)胞一般采單獨(dú)存在的形式，而于移植前才與生長(zhǎng)激素及聚合物混合。由于牙齒再生的關(guān)鍵為脂肪干細(xì)胞須成功地分化，并進(jìn)而形成牙齒組織，故維持脂肪干細(xì)胞的生命力，以及保持生長(zhǎng)激素與聚合物的活性或新鮮度，以于最佳條件下使牙齒再生為首要標(biāo)準(zhǔn)。為此，可于即將進(jìn)行移植手術(shù)之前，才依適當(dāng)比例混合脂肪干細(xì)胞、生長(zhǎng)激素、及人工及/或天然聚合物以提供本發(fā)明再生牙齒的組合物，以于組合物中各成分為高活性且新鮮的狀態(tài)下，進(jìn)行牙齒再生。于本發(fā)明的一實(shí)施方式中，于移植手術(shù)即將進(jìn)行前，才配制一包含脂肪干細(xì)胞、成骨蛋白-2、及膠原蛋白的組合物，且成骨蛋白-2與膠原蛋白的重量比例為約1 11，250， 且脂肪干細(xì)胞的用量約為5X IO4個(gè)每奈克生長(zhǎng)激素，并將其移植入動(dòng)物的齒槽內(nèi)，以進(jìn)行牙齒再生。鑒于本發(fā)明組合物可使牙齒再生，故其可運(yùn)用于牙齒的修補(bǔ)、替換、及/或重建。茲以下列具體實(shí)施方式
以進(jìn)一步例示說(shuō)明本發(fā)明。其中該些實(shí)施方式僅提供作為說(shuō)明，而非用以限制本發(fā)明的范疇。[制備例]制備用于再生牙齒的組合物參考圖1，依以下步驟及比例制備本發(fā)明的用于再生牙齒的組合物，并進(jìn)行移植。A、配置1. 35毫升的溶液A (置于冰上)，包含5. 7XDMEM(Dulbecco，s modied Eagle，s 培養(yǎng)基)0. 5 毫升4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES，0. 1摩爾濃度)0. 5毫升NaHCO3 (2. 5 重量 ％ )0. 25 毫升CaCl2 (0. 17 摩爾濃度)50 微升NaOH(1當(dāng)量濃度)50微升B、配置3. 65毫升的溶液B，包含DMEM (含23. 3重量％胎牛血清)2. 15毫升第一型膠原蛋白(3. 75毫克/毫升)1. 5毫升C、培養(yǎng)兔子脂肪干細(xì)胞(rabbit adipose tissue-derived stemcell，rADSCs)或作為正對(duì)照組的兔子牙髓干細(xì)胞(rabbit dental pulpstem cells，rDPSCs)，如圖2所示， 其會(huì)呈現(xiàn)典型的間質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)。將培養(yǎng)的兔子脂肪干細(xì)胞或兔子牙髓干細(xì)胞以胰蛋白酶作用3分鐘后，再將細(xì)胞懸浮液以1000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心5分鐘，丟棄上清液，收集定量5 X IO6個(gè)細(xì)胞并置于36. 5微升的溶液B中，以制成一細(xì)胞懸浮液。D、于步驟C制得的細(xì)胞懸浮液中加入100奈克/毫升的成骨蛋白-2 (R&D Systems Catalog Number 355-BEC)。Ε、在冰上將13. 5微升的溶液A及溶液B (包含成骨蛋白_2與脂肪干細(xì)胞或牙髓干細(xì)胞)混合均勻后，立即加入至一 48孔細(xì)胞培養(yǎng)盤(pán)中。F、將該細(xì)胞培養(yǎng)盤(pán)置于一 37°C、含有5體積％的CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中作用2小時(shí)， 待膠原蛋白聚合凝固成凝膠后，即可進(jìn)行移植。[實(shí)施例]A.移植用于再生牙齒的組合物首先，將紐西蘭大白兔(購(gòu)自臺(tái)灣，林國(guó)鈞養(yǎng)兔廠，彰化縣北斗鎮(zhèn)四維路115號(hào))麻醉后，分別拔除其一顆上門(mén)牙及一顆下門(mén)牙，并等待接受移植。將實(shí)施例1中制得的組合物凝膠(包含成骨蛋白-2與脂肪干細(xì)胞或牙髓干細(xì)胞)直接移植并置入于兔子經(jīng)拔除下門(mén)牙的齒槽中，并以縫線縫合牙齦。另外，于經(jīng)拔除上門(mén)牙的齒槽中植入含有成骨蛋白_2、 但不含任何干細(xì)胞的膠原蛋白凝膠，以作為對(duì)照組，并同樣以縫線縫合牙齦，即完成移植步
馬聚οB. X光攝影及解剖分析于完成移植手術(shù)15周后，以X光攝影觀察兔子經(jīng)拔除上門(mén)牙及下門(mén)牙的齒槽，結(jié)果如圖3A所示，可以觀察到下門(mén)牙齒槽內(nèi)的經(jīng)移植處有牙齒新生，然而，于作為對(duì)照組的上門(mén)牙齒槽內(nèi)并無(wú)牙齒新生(圖3A，箭頭處)。另外，以解剖方式進(jìn)行觀察，結(jié)果如圖:3B所示，顯示經(jīng)過(guò)包含脂肪干細(xì)胞或牙髓干細(xì)胞的組合物移植的齒槽內(nèi)皆有牙齒新生，但于對(duì)照組的齒槽中則無(wú)牙齒新生(圖3B，白色箭頭處)。此試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，本發(fā)明的組合物可成功使牙齒再生。C.H&E組織染色分析以H&E染色試劑(包含蘇木素(Mayer’ s Hemalum Solution，購(gòu)自Merck )及伊紅(Eosin Y Solution Alcoholic，購(gòu)自Sigma-Aldrich ))染色兔子的再生牙齒組織與正常牙齒組織，并進(jìn)行分析比對(duì)，結(jié)果顯示于圖4A至圖4C。如圖4A所示，經(jīng)過(guò)包含牙髓干細(xì)胞或脂肪干細(xì)胞的組合物移植的齒槽中皆能再生長(zhǎng)出類(lèi)似于正常牙齒的組織結(jié)構(gòu)。此外，如圖4B所示，再生新牙的細(xì)部結(jié)構(gòu)與正常牙齒相同，都具有齒質(zhì)(D :Dentin)、齒堊質(zhì)(C =Cementum)、牙周韌帶(PDL Periodontalligament)，且于高倍率(1000X)顯微鏡的觀察下，可看見(jiàn)由牙周韌帶延伸進(jìn)入齒堊質(zhì)的Siarpey氏纖維(圖4B，白色箭頭處)。另外，如圖4C所示，再生的牙齒組織皆具有牙髓的結(jié)構(gòu)，代表再生牙齒具有自我更新的能力。D.綠色免疫熒光染色分析以綠色免疫熒光染色試劑(包含溫韋伯氏因子(von Willebrandfactor)或Beta 3-微管素(tubulin)，abeam )染色兔子的再生牙齒組織與正常牙齒組織，并進(jìn)行分析比對(duì)，結(jié)果顯示于圖5A及圖5B。如圖5A所示，經(jīng)過(guò)包含牙髓干細(xì)胞或脂肪干細(xì)胞的組合物移植所新生長(zhǎng)出來(lái)的牙髓(pulp)及牙周韌帶(PDL)中，皆有新生血管形成。另外，如圖5B所示，兔子再生的牙髓及牙周韌帶中皆有神經(jīng)纖維支配(圖5B，白色箭頭處)。上述B至C的分析結(jié)果顯示，本發(fā)明組合物可成功地使牙齒再生，且再生的新牙具有與正常牙齒相同的完整結(jié)構(gòu)，故可進(jìn)行正常的咀嚼功能。上述實(shí)施例僅用以例示說(shuō)明本發(fā)明的原理及功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟于此項(xiàng)技藝的人士均可在不違背本發(fā)明的技術(shù)原理及精神的情況下，對(duì)上述實(shí)施例進(jìn)行修改及變化。因此，本發(fā)明的權(quán)利保護(hù)范圍應(yīng)如權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種與脂肪干細(xì)胞并用以再生牙齒的組合物，其特征在于所述組合物包含生長(zhǎng)激素及人工及/或天然的聚合物。
2.如權(quán)利要求1的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素選自以下群組成骨蛋白(bone morphogenetic protein, BMP)、齒質(zhì)基質(zhì)蛋白(dentin matrixprotein, DMP)、生長(zhǎng)分化因子(Growth/differentiation factor, Gdf)或前述的組合。
3.如權(quán)利要求2的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素選自以下群組成骨蛋白_2、成骨蛋白_4、成骨蛋白_7、成骨蛋白-11、齒質(zhì)基質(zhì)蛋白-1、生長(zhǎng)分化因子-11或前述的組合。
4.如權(quán)利要求3的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素為成骨蛋白_2。
5.如權(quán)利要求1的組合物，其特征在于該聚合物選自以下群組膠原蛋白、聚麩胺酸 (polyglutamic acid, PGA)、聚乳酸交酯-乙醇酸(polylactide-glycolic acid, PLGA)、 聚石舞酸I丐(calcium polyphosphate)、六氣異丙酉享絲(hexafluoroisopropanol silk, HFIP silk)或前述聚合物的組合。
6.如權(quán)利要求5的組合物，其特征在于該聚合物為膠原蛋白。
7.如權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素與該聚合物的重量比例約為 1 1,200 至 1 120,000。
8.如權(quán)利要求7的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素與該聚合物的重量比例約為 1 6，000 至 1 60，000。
9.如權(quán)利要求8的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素與該聚合物的重量比例約為 1 9，000 至 1 12，000。
10.一種用于再生牙齒的組合物，其特征在于所述組合物包含脂肪干細(xì)胞、生長(zhǎng)激素及人工及/或天然的聚合物。
11.如權(quán)利要求10的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素選自以下群組成骨蛋白、齒質(zhì)基質(zhì)蛋白、生長(zhǎng)分化因子或前述的組合。
12.如權(quán)利要求11的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素選自以下群組成骨蛋白_2、成骨蛋白_4、成骨蛋白_7、成骨蛋白-11、齒質(zhì)基質(zhì)蛋白-1、生長(zhǎng)分化因子-11或前述的組合。
13.如權(quán)利要求12的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素為成骨蛋白_2。
14.如權(quán)利要求10的組合物，其特征在于該聚合物選自以下群組膠原蛋白、聚麩胺酸、聚乳酸交酯-乙醇酸、聚磷酸鈣、六氟異丙醇絲或前述聚合物的組合。
15.如權(quán)利要求14的組合物，其特征在于該聚合物為膠原蛋白。
16.如權(quán)利要求10至15中任一項(xiàng)的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素與該聚合物的重量比例為約1 1，200至約1 120，000，且脂肪干細(xì)胞的含量約為5X IO2至5X IO6個(gè)每奈克生長(zhǎng)激素。
17.如權(quán)利要求16的組合物，其特征在于該生長(zhǎng)激素與該聚合物的重量比例約為 1:6，000至1: 60，000，且脂肪干細(xì)胞的含量約為5X IO3至5X IO5個(gè)每奈克生長(zhǎng)激素。
18.如權(quán)利要求17的組合物，其特征在于，該生長(zhǎng)激素與該聚合物的重量比例為約 1 9，000至約1 12，000，且脂肪干細(xì)胞的含量約為5X IO4至IX IO5個(gè)每奈克生長(zhǎng)激素。
全文摘要
一種與脂肪干細(xì)胞并用以再生牙齒的組合物，其包含生長(zhǎng)激素及人工及/或天然的聚合物；將該組合物連同脂肪干細(xì)胞植入齒槽中，可使牙齒再生。
文檔編號(hào)A61K35/12GK102335457SQ20101023897
公開(kāi)日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2010年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月28日
發(fā)明者洪滿榮 申請(qǐng)人:洪滿榮, 郭山輝