專利名稱：白花蛇舌草注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及白花蛇舌草注射液的制備方法。
背景技術(shù)：
白花蛇舌草(Oldenlandia diffusa(Willd)Roxb)始載于《廣西中藥志》，為茜草科 植物白花蛇舌草的帶根全草。廣泛分布于長江流域及以南，主產(chǎn)福建、廣東、廣西等地，其味 苦、甘、寒，入心、肝、脾三經(jīng)，有清熱解毒，活血化瘀，消炎止痛等功效?，F(xiàn)代藥理研究表明白 花蛇舌草具有抗菌消炎、清熱解毒、活血化瘀、利水通淋及抗腫瘤等作用，可用于治療胃癌、 食管癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、肺癌、肝癌、子宮頸癌、卵巢癌、膀胱癌等，臨床應(yīng)用廣泛。白花 蛇舌草中的黃酮類、三萜混合酸，香豆素類和多糖類為其抗癌的主要有效成分。溶劑提取法是根據(jù)中草藥中各種成分在溶劑中的溶解性質(zhì)，選用對(duì)活性成分溶解 度大，對(duì)不需要溶出成分溶解度小的溶劑，而將有效成分從藥材組織內(nèi)溶解出來的方法。當(dāng) 溶劑加到中草藥原料(需適當(dāng)粉碎)中時(shí)，溶劑由于擴(kuò)散、滲透作用逐漸通過細(xì)胞壁透入 到細(xì)胞內(nèi)，溶解了可溶性物質(zhì)，而造成細(xì)胞內(nèi)外的濃度差，于是細(xì)胞內(nèi)的濃溶液不斷向外擴(kuò) 散，溶劑又不斷進(jìn)入藥材組織細(xì)胞中，如此多次往返，直至細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡 時(shí)，將此飽和溶液濾出，繼續(xù)多次加入新溶劑，就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部 溶出。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種白花蛇舌草注射液的制備方法，目的是提供一種總黃酮含量高 的白花蛇舌草注射液。本發(fā)明所提供的一種白花蛇舌草注射液的制備方法，用60%的乙醇加熱回流提取 白花蛇舌草，濾過，得到乙醇提取液和濾渣，所述濾渣用水提取，濾過，得到水提取液，將所 述乙醇提取液和所述水提取液合并，用石炭水調(diào)PH至12，冷藏，濾過，濾液用50%硫酸溶液 調(diào)節(jié)PH值為3，靜置，濾過，濾液再用40%氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，加入乙醇，冷藏，濾過，濾 液加入適量活性炭，攪拌，濾過，濾液用40%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6. 5 7. 0，加入聚 山梨酯和亞硫酸氫鈉，攪拌，濾過，加注射用水，灌封，滅菌，獲得白花蛇舌草注射液。其中，所述乙醇加熱回流進(jìn)行三次，每次提取時(shí)間分別為2、1和1小時(shí)。所述水提取2次，每次提取的時(shí)間為2和1小時(shí).所述乙醇提取液濃縮至相對(duì)密度為1. 23-1. 25。所述乙醇提取液和所述水提取液合并后的溶液濃縮至相對(duì)密度為1. 20-1. 25。本發(fā)明的白花蛇舌草注射液中有效成分的總黃酮比滲漉提取的白花蛇舌草注射 液中的有效成分高出一倍。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1、白花蛇舌草注射液
取IOOOg的經(jīng)陰干呈鮮綠色的廣西白花蛇舌草全草，置提取罐中，以60%乙醇加 熱回流提取3次，每次提取時(shí)間分別為2、1、1小時(shí)，合并提取液、濾過、濾液濃縮至相對(duì)密度 1. 23-1. 25備用。藥渣再置另一個(gè)提取罐中以5倍白花蛇舌草全草質(zhì)量的水提取2次，每次 提取的時(shí)間為2和1小時(shí)，合并提取液，濾過，濃縮至相對(duì)密度1. 20-1. 25后，將兩濃縮液合 并，用石灰水調(diào)pH至12，冷藏12小時(shí)，濾過，濾液用50%硫酸溶液調(diào)節(jié)pH值為3，靜置12 小時(shí)，濾過，濾液再用40%氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，加入乙醇2000ml，冷藏24小時(shí)，濾過，濾 液減壓濃縮至250ml，加水至500ml，加入適量活性炭，攪勻，濾過，濾液用40%氫氧化鈉溶 液調(diào)節(jié)PH值為6. 5 7. 0，加入IOg聚山梨酯80、Ig亞硫酸氫鈉，充分?jǐn)噭?，濾過，加注射用 水至1000ml，灌封，滅菌，即得白花蛇舌草注射液。白花蛇舌草注射液為棕黃色的澄明液體。取白花蛇舌草注射液30ml，加于已處理好的聚酰胺柱(50目，2g，內(nèi)徑12 15mm， 濕法裝柱)上，用50ml水洗脫，棄去水液，用70%乙醇洗脫，自黃色色帶流出時(shí)開始收集洗 脫液5ml，作為供試品溶液。取供試品溶液數(shù)滴，點(diǎn)于濾紙上，晾干，滴加5%三氯化鋁乙醇 溶液，晾干，置紫外光燈(365nm)下觀察，顯黃綠色熒光。精密稱取在120°C減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品10mg，置50ml量瓶中，加適量 70%乙醇，置水浴上微熱使溶解，放冷，加70%乙醇至刻度，搖勻，即得(每Iml中含無水蘆 丁 0. 2mg)對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液0. O、1. O、2. O、3. O、4. O、5. O與6. 0ml，分別置25ml量瓶中， 各加70%乙醇至6ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液1ml， 搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加乙醇至刻度，搖勻，放置15分鐘，照分光光度 法，在507nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。精密量取白花蛇舌草注射液IOml，加于已處理好的聚酰胺柱(50目，2g，內(nèi)徑12 15mm,濕法裝柱)上，用50ml水洗脫，棄去洗脫液，用70%乙醇洗脫，收集洗脫液約25ml，置 25ml量瓶中，加70 %的乙醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取5ml，置甲、乙兩個(gè)25ml量瓶 中，甲瓶中加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置 6分鐘，在甲、乙兩瓶中各加氫氧化鈉試液10ml，再加乙醇稀釋至刻度，搖勻，放置15分鐘， 照分光光度法，以乙瓶為空白，在507nm的波長處測定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出白花蛇舌 草注射液中蘆丁的量，計(jì)算。8份白花蛇舌草注射液中以蘆丁計(jì)每毫升含總黃酮的量分別為0. 59,0. 56,0. 61、 0. 58,0. 52,0. 50,0. 54 和 0. 62mg。對(duì)比例、取白花蛇舌草lOOOg，粉碎成粗粉，用80%乙醇作溶劑，浸漬24小時(shí)，緩緩滲漉，漉 液濃縮至約250ml，用石灰乳調(diào)節(jié)pH值至12，冷藏12小時(shí)，濾過，濾液用50%硫酸溶液調(diào)節(jié) PH值為3，靜置12小時(shí)，濾過，濾液再用40%氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，加入乙醇2000ml，冷 藏24小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮至250ml，加水至500ml，加入適量活性炭，攪勻，濾過，濾液 用40%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6. 5 7. 0，加入IOg聚山梨酯80、Ig亞硫酸氫鈉，充分 攪勻，濾過，加注射用水至1000ml，灌封，滅菌，即得白花蛇舌草注射液。白花蛇舌草注射液為棕黃色的澄明液體。取白花蛇舌草注射液30ml，加于已處理好的聚酰胺柱(50目，2g，內(nèi)徑12 15mm，濕法裝柱)上，用50ml水洗脫，棄去水液，用70%乙醇洗脫，自黃色色帶流出時(shí)開始收集洗 脫液5ml，作為供試品溶液。取供試品溶液數(shù)滴，點(diǎn)于濾紙上，晾干，滴加5%三氯化鋁乙醇 溶液，晾干，置紫外光燈(365nm)下觀察，顯黃綠色熒光。精密稱取在120°C減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品10mg，置50ml量瓶中，加適量 70%乙醇，置水浴上微熱使溶解，放冷，加70%乙醇至刻度，搖勻，即得(每Iml中含無水蘆 丁 0. 2mg)對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液0. O、1. O、2. O、3. O、4. O、5. O與6. 0ml，分別置25ml量瓶中， 各加70%乙醇至6ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液1ml， 搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加乙醇至刻度，搖勻，放置15分鐘，照分光光度 法，在507nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。精密量取白花蛇舌草注射液10ml，加于已處理好的聚酰胺柱(50目，2g，內(nèi)徑12 15mm,濕法裝柱)上，用50ml水洗脫，棄去洗脫液，用70%乙醇洗脫，收集洗脫液約25ml，置 25ml量瓶中，加70 %的乙醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取5ml，置甲、乙兩個(gè)25ml量瓶 中，甲瓶中加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置 6分鐘，在甲、乙兩瓶中各加氫氧化鈉試液10ml，再加乙醇稀釋至刻度，搖勻，放置15分鐘， 照分光光度法，以乙瓶為空白，在507nm的波長處測定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出白花蛇舌 草注射液中蘆丁的量，計(jì)算。8份白花蛇舌草注射液中以蘆丁計(jì)每毫升含總黃酮的量分別為0. 28,0. 25,0. 29、 0. 27,0. 24,0. 23,0. 25 和 0. 29mg。
權(quán)利要求
1.一種白花蛇舌草注射液的制備方法，其特征在于用60%的乙醇加熱回流提取白花 蛇舌草，濾過，得到乙醇提取液和濾渣，所述濾渣用水提取，濾過，得到水提取液，將所述乙 醇提取液和所述水提取液合并，用石炭水調(diào)PH至12，冷藏，濾過，濾液用50%硫酸溶液調(diào)節(jié) PH值為3，靜置，濾過，濾液再用40%氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，加入乙醇，冷藏，濾過，濾液加 入適量活性炭，攪拌，濾過，濾液用40%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6. 5 7. 0，加入聚山梨 酯和亞硫酸氫鈉，攪拌，濾過，加注射用水，灌封，滅菌，獲得白花蛇舌草注射液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白花蛇舌草注射液的制備方法，其特征在于所述乙醇加熱 回流提取三次，每次提取時(shí)間分別為2、1和1小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的白花蛇舌草注射液的制備方法，其特征在于所述水提 取2次，每次提取的時(shí)間為2和1小時(shí).
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的白花蛇舌草注射液的制備方法，其特征在于所述乙醇提取 液濃縮至相對(duì)密度為1. 23-1. 25。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的白花蛇舌草注射液的制備方法，其特征在于所述乙醇提取 液和所述水提取液合并后的溶液濃縮至相對(duì)密度為1. 20-1. 25。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種白花蛇舌草注射液的制備方法，屬于中藥領(lǐng)域，用60％的乙醇加熱回流提取白花蛇舌草，濾過，得到乙醇提取液和濾渣，所述濾渣用水提取，濾過，得到水提取液，將所述乙醇提取液和所述水提取液合并，用石炭水調(diào)pH至12，冷藏，濾過，濾液用50％硫酸溶液調(diào)節(jié)pH值為3，靜置，濾過，濾液再用40％氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，加入乙醇，冷藏，濾過，濾液加入適量活性炭，攪拌，濾過，濾液用40％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6.5～7.0，加入聚山梨酯和亞硫酸氫鈉，攪拌，濾過，加注射用水，灌封，滅菌，獲得白花蛇舌草注射液。
文檔編號(hào)A61K36/74GK102078411SQ20091023851
公開日2011年6月1日 申請(qǐng)日期2009年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月30日
發(fā)明者劉鎖蘭, 王振國, 王振賢, 王磊 申請(qǐng)人:北京振國天仙生物技術(shù)有限公司, 吉林省通化振國藥業(yè)有限公司