專利名稱：：三七及其提取物在制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及三七、三七提取物、三七總皂苷以及三七總皂苷組合物的新用途，特別是在制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物方面的新用途。
背景技術(shù)：
：近年來，隨著我國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，心腦血管疾病的發(fā)病率和死亡率逐年增加，已被稱為危害人類健康和生命的頭號(hào)殺手。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化(統(tǒng)稱冠狀動(dòng)脈性心臟病，簡稱冠心病)是一組動(dòng)脈硬化的血管病中常見的最重要的一種，其特點(diǎn)是受累動(dòng)脈病變從內(nèi)膜開始。一般先有脂質(zhì)和復(fù)合糖類積聚、出血及血栓形成，纖維組織增生及鈣質(zhì)沉著，并有動(dòng)脈中層的逐漸蛻變和鈣化，病變常累及彈性及大中等肌性動(dòng)脈，一旦發(fā)展到足以阻塞動(dòng)脈腔，則該動(dòng)脈所供應(yīng)的組織或器官將缺血或壞死。由于在動(dòng)脈內(nèi)膜積聚的脂質(zhì)外觀呈黃色粥樣，因此稱為動(dòng)脈粥樣硬化。動(dòng)脈粥樣硬化就是動(dòng)脈壁上沉積了一層像小米粥樣的脂類，使動(dòng)脈彈性減低、管腔變窄的病變。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化是西方發(fā)達(dá)國家的主要死亡原因。隨著我國人民生活水平提高和飲食習(xí)慣改變，該病也成為我國主要死亡原因。動(dòng)脈粥樣硬化始發(fā)兒童時(shí)期而持續(xù)進(jìn)展，通常在中年或者中老年出現(xiàn)癥狀。三七是五加科植物，具有活血、散瘀、消炎、鎮(zhèn)痛的功效。除有上述作用外，還具有降低人體凝血因子的特殊作用。fg是肝臟合成的一種血漿球蛋白。其主要功能為參與凝血過程。fg升高可增高心、腦血管病發(fā)生率?？诜叻勰芙档蚮g水平，有利于控制心、腦血管病的發(fā)生。《中草藥》2008年05期刊登的中國澳門大學(xué)中華醫(yī)藥研究院的王楠、萬建波、李銘源、王一濤有關(guān)《三七治療動(dòng)脈粥樣硬化的研究進(jìn)展》一文指出動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致心腦血管事件發(fā)生的關(guān)鍵因素，為多種心腦血管疾病共同的病理生理基礎(chǔ)。其癥候、病機(jī)等屬于中醫(yī)理論的〃血瘀證〃。而三七自古便是歷代醫(yī)家常用的活血化瘀之要藥。換而言之，三七在防治動(dòng)脈粥樣硬化方面有其神奇之處。三七總皂苷是從三七植物總提取的有效物質(zhì)，三七藥物植物的化學(xué)成分較多，主要由四環(huán)三萜達(dá)瑪烷型原人參二醇組皂苷和四環(huán)三萜達(dá)瑪烷型原人參三醇組皂苷組成。三七總皂苷對(duì)高脂血癥、高粘血癥、高血壓、心肌缺血、心律失常、動(dòng)脈粥樣硬化等癥狀均有一定療效，而且還具有防止血栓形成、改善微循環(huán)、抗心腦缺血、促進(jìn)造血細(xì)胞、抗纖維化、對(duì)神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。由上所述，使用三七總皂苷為原料做成的三七總皂苷注射制劑是一種獨(dú)具多功能的注射劑，而且這些功效都具有獨(dú)立性，集若干重要生物活性，能發(fā)揮若干種臨床功能于一藥。所有的這些功能里，有的功能是相對(duì)立的，矛盾的。由于三七總皂苷中成份十分復(fù)雜，目前尚未能真正明確具體什么成份起主要治療作用，成份之間的作用機(jī)理也沒有人作過全面的研究。
發(fā)明內(nèi)容根據(jù)冠狀動(dòng)脈病變的部位、范圍、血管阻塞程度和心肌供血不足的發(fā)展速度、范圍和程度的不同，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化可分為五種臨床類型無癥狀型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、心絞痛型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、缺血性心肌病型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、猝死型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化。以上五種類型的冠狀動(dòng)脈粥樣硬化可以合并出現(xiàn)。中醫(yī)中藥治療對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化有治標(biāo)和治本兩法。治標(biāo)，主要在疼痛期應(yīng)用，以"通"為主，有活血、化瘀、理氣、通陽、化痰等法；；治本，一般在緩解期應(yīng)用，以調(diào)整陰陽、臟腑、氣血為主，有補(bǔ)陽、滋陰、補(bǔ)氣血、調(diào)理臟腑等法。"活血化瘀"法和"芳香溫通"法最為常用。根據(jù)我公司對(duì)三七總皂苷的臨床研究和藥效學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)三七總皂苷可用于預(yù)防和治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化各種臨床類型，特別是用于治療心絞痛型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、缺血性心肌病型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化及心肌缺血引起的心力衰竭型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化有明顯療效?，F(xiàn)有對(duì)本專利用于治療以上各病癥的藥理簡要說明如下—、心絞痛型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心絞痛是指冠狀動(dòng)脈供血不足，心肌急劇的、暫時(shí)的缺血與缺氧所引起的臨床綜合征。動(dòng)脈粥樣硬化而致冠狀動(dòng)脈狹窄或部分分支閉塞時(shí)，其擴(kuò)張性減弱，血流量減少，且對(duì)心肌的供血量相對(duì)地比較固定。心肌的血液供應(yīng)如減低至尚能應(yīng)付心臟平時(shí)的需要，則休息時(shí)可無癥狀。一旦心臟負(fù)荷突然增加，如勞累、激動(dòng)、左心衰竭等，使心肌張力增加，心肌收縮力增加和心率增快等而致心肌氧耗量增加時(shí)，心肌對(duì)血液的需求增加；或當(dāng)冠狀動(dòng)脈發(fā)生痙攣時(shí)，冠狀動(dòng)脈血流量進(jìn)一步減少；或在突然發(fā)生循環(huán)血流量減少的情況下，冠狀動(dòng)脈血流量突降，心肌血液供求之間矛盾加深，心肌血液供給不足，遂引起心絞痛。本專利藥有效成分是三七總皂苷，有活血祛瘀、通脈活絡(luò)之功效，正合了"活血化瘀"法，具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增強(qiáng)冠脈流量，降低心肌耗氧量，改善心肌缺氧狀況的作用。而且顯著降低全血比濃度，血漿比黏度，纖維蛋白原，紅細(xì)胞壓積指數(shù)，縮短紅細(xì)胞和血小板電泳時(shí)間，血黏度降低和紅細(xì)胞表面電荷增加使紅細(xì)胞均勻分散在血漿中，有利于血管中的流動(dòng)，血小板表面電荷的增加不容易發(fā)生黏附、聚集，因此可改善微循環(huán)，降低血液黏度，減少血小板聚集，而有利于防止血栓的形成和血栓再發(fā)，可有效防止心絞痛的發(fā)作。臨床研究發(fā)現(xiàn)，患者應(yīng)用本發(fā)明專利制劑后，降低了心絞痛的發(fā)作次數(shù)及持續(xù)時(shí)間，也減少了心肌耗氧量，同時(shí)降低了血液黏度，與對(duì)照組治療后比較差異均有顯著性。二、心肌梗死型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心肌梗死基本病因是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化(偶為冠狀動(dòng)脈栓塞、炎癥、先天性畸形、痙攣和冠狀動(dòng)脈口阻塞所致)，造成管腔嚴(yán)重狹窄和心肌血供不足，而側(cè)支循環(huán)未充分建立。在此基礎(chǔ)上，一旦血供進(jìn)一步急劇減少或中斷，使心肌嚴(yán)重而持久地急性缺血達(dá)1小時(shí)以上，即可發(fā)生心肌梗死。心肌梗死往往在飽餐特別是進(jìn)食多量脂肪后，晨6時(shí)至12時(shí)用力大便時(shí)發(fā)生。這與餐后血脂增高，血粘稠度增高，血小板粘附性增強(qiáng)，局部血流緩慢，血小板易于集聚而致血栓形成；上午冠狀動(dòng)脈張力高，機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)性又增強(qiáng)，易使冠狀動(dòng)脈痙攣；用力大便時(shí)心臟負(fù)荷增加等有關(guān)。盡快使閉塞的冠狀動(dòng)脈再通，心肌得到再灌注，瀕臨壞死的心肌可能得以存活或使壞死范圍縮小，預(yù)后改善，是一種積極的治療措施。本發(fā)明專利在疏通被阻塞血管、改善血管滲透性等方面有明顯的作用，因此能擴(kuò)張冠脈，增加冠脈血流量，增加血氧供應(yīng)，使心肌得到再灌注。同時(shí)可以減少血細(xì)胞內(nèi)磷酸肌酸激酶(CPK)的生成，能提高心肌細(xì)胞耐缺氧的能力及對(duì)抗再灌注造成損傷。三、缺血性心肌病型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化缺血性心肌病型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的病理基礎(chǔ)是心肌纖維化。為心肌的血供長期不足，心肌組織發(fā)生營養(yǎng)障礙和萎縮，以致纖維組織增生所致?；颊叩墓跔顒?dòng)脈多呈廣泛而嚴(yán)重的粥樣硬化，管腔明顯狹窄，但可無閉塞。纖維組織在心肌也可呈灶性、散在性或不規(guī)則分布，此種情況常由于大片心肌硬死或多次小灶性心肌梗死后的瘢痕形成，心肌細(xì)胞減少而纖維組織增多所造成，此時(shí)冠狀動(dòng)脈則可有閉塞性病變。治療在于改善冠狀動(dòng)脈供血和心肌的營養(yǎng)，控制心力衰竭和心律失常。本發(fā)明專利采用獨(dú)特提取、純化工藝，所得制劑純度高、水溶性好，有效成分的生物活性強(qiáng)。具有抗血小板聚集、降低血液黏度、抗血栓形成、擴(kuò)張心腦血管、降低心臟后負(fù)荷、減少心肌耗氧量從而改善心肌缺血的作用。本發(fā)明專利對(duì)缺血性心肌病型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的療效基于以下三個(gè)方面①保護(hù)心肌細(xì)胞，三七皂苷(PNS)可減慢心肌細(xì)胞搏動(dòng)頻率，減少心肌細(xì)胞缺血損傷時(shí)細(xì)胞內(nèi)酶的釋放，減輕細(xì)胞形態(tài)的改變，維持DNA的合成，對(duì)心肌細(xì)胞缺血損傷具有直接的保護(hù)作用。②對(duì)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)作用在心腦缺血等諸多因素剌激下，可以啟動(dòng)造成心腦血管細(xì)胞主動(dòng)的程序性壞死的遺傳控制過程，對(duì)心腦血管的凋亡過程起到調(diào)節(jié)作用，對(duì)損傷組織的修復(fù)有重大意義；③通過抗炎作用，減少白細(xì)胞釋放氧自由基。PNS能減輕缺血再灌注心肌細(xì)胞內(nèi)鈣蓄積。此外，PNS能抑制血小板聚集、減少微血栓形成，減輕白細(xì)胞粘附于損傷血管內(nèi)皮導(dǎo)致的毛細(xì)血管阻塞，因而能減輕缺血再灌注心肌不能恢復(fù)灌流即"無再灌流現(xiàn)象"的程度，更有利于心肌代謝活動(dòng)和心功能恢復(fù)。四、心肌缺血引起的心力衰竭型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化缺血性心臟病可因多種原因而發(fā)生心力衰竭，它可以是急性心肌梗死或早先心肌梗死的并發(fā)癥，或可由心絞痛發(fā)作或心律失常所誘發(fā)。心力衰竭的發(fā)生發(fā)展機(jī)制是神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞因子系統(tǒng)的長期、慢性激活，促進(jìn)心肌重塑，加重心肌損傷和心功能惡化，又進(jìn)一步激活神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞因子，形成惡性循環(huán)。心力衰竭多逐漸發(fā)生，大多先呈左心衰竭，然后繼以右心衰竭，出現(xiàn)相應(yīng)的癥狀。治療方法主要是治療急性左心衰竭，可選用血管擴(kuò)張劑減輕左心室的負(fù)荷。中醫(yī)認(rèn)為，氣虛、陽虛致血疲、水泛為心衰基本病機(jī)。目前已明確，慢性充血性心力衰竭患者腎素一血管緊張素一醛固酮系統(tǒng)激活，致血管緊張素-II(AngII)增高，AndII增高又致PAI-l增高，而PAI-l對(duì)tPA具有抑制作用。tPA可使PLC激活，轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶，纖溶酶可使纖維蛋白(原)溶解。另有研究發(fā)現(xiàn)，慢性心衰患者血漿ET-1水平升高，而ET-1是一種強(qiáng)效縮血管物質(zhì)，可直接參與心肌重構(gòu)和心衰的發(fā)展過程，與心衰的嚴(yán)重程度成正相關(guān)。心衰時(shí)血漿FIB和ET-1升高可進(jìn)一步加重其微循環(huán)障礙。研究顯示，本發(fā)明專利可明顯降低血漿PAI，F(xiàn)IB，PLG和ET_I水平，與對(duì)照組比較差異顯著，這與既往報(bào)道相同；它可明顯升高tPA水平，但與對(duì)照組比較無顯著性差異。PAI下降減少了對(duì)tPA的抑制，從而有效地激活了PLG，進(jìn)而使FIB下降，通過反饋?zhàn)饔肞LG亦下降。隨著PAI，F(xiàn)IB和ET-1下降，與對(duì)照組相比，LVESV明顯下降(P<0.05)，LVEF明顯提高(P<0.05)，從而心功能得到明顯改善，總有效率明顯提高(P<0.05)。因此，本發(fā)明專利治療充血性心力衰竭有明顯療效。本發(fā)明專利臨床應(yīng)用的安全性較高，在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的藥物治療中不失為一種好藥，其拓寬了中藥制劑治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的新方法，在不能開展介入治療的基層醫(yī)院尤為適用。因此，申請(qǐng)人提供一種制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物方面的新用途。本發(fā)明公開了一種制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物方面的新用途，其特征在于所述三七總皂苷組合物中含有活性成份，該活性成份由三七提取的三七總皂苷活性成份組成，其中三七皂苷&含量大于8.0%、人參皂苷Rgl含量大于25%、人參皂苷Re含量大于4.0%、人參皂苷含量大于25%，三七皂苷&、人參皂苷Rgl、人參皂苷Re與人參皂苷Rt^的總重量不低于活性成份總重量的75%。優(yōu)選地，Rb!:Rg!為l.O:0.52.0。優(yōu)選地，所述的有效成分組合物的含量是三七皂苷&含量大于8.0%、人參皂苷Rgi含量大于25X、人參皂苷Rbi含量大于25X、人參皂苷Re含量大于4.0X，且Rbi:Rgl為i.o:i.oi.8;更優(yōu)選地，所述的有效成分組合物的含量是三七皂苷&含量大于8.0%、人參皂苷R&含量大于25X、人參皂苷Rl^含量大于25X、人參皂苷Re含量大于4.0X，且Rl^:Rgl為1.0:1.41.6;優(yōu)選地，三七皂苷Rp人參皂苷Rbp人參皂苷Rgl與人參皂苷Re的總重量大于活性成份總重量的85%;更優(yōu)選地，三七皂苷Rp人參皂苷Rbp人參皂苷Rgl與人參皂苷Re的總重量大于活性成份總重量的90%;優(yōu)選地，所述的有效成分組合物的含量是其中三七皂苷&含量為8%15%、人參皂苷R&含量為35%52%、人參皂苷Re含量為4%10%、人參皂苷Rl^含量為25%40%。本發(fā)明三七總皂苷活性成份組合物的劑型可以制成各種劑型，如制成注射液、注射用粉針劑，注射用凍干粉針劑、片劑、丸劑、散劑、顆粒劑、合劑、糖漿劑、膠囊劑、滴丸劑制劑，優(yōu)選制成注射液、注射用凍干粉針劑。以下是本發(fā)明中藥制劑的藥材來源三七為五加科植物的干燥根。申請(qǐng)人:還提供了一種制備所述的三七總皂苷活性成份組合物的方法，它包括如下步驟(1)取三七粉碎成粗粉1000g，加體積比為5-30倍的45-95%的乙醇提取0.5IO小時(shí)，收集提取液，過濾；(2)取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.5g生藥的溶液；(3)溶液通過D型大孔樹脂柱吸附，用乙醇_水的混合液進(jìn)行梯度洗脫，流速按每小時(shí)樹脂體積的倍數(shù)計(jì)為4.5BV/h，洗脫液中乙醇濃度逐步由5%調(diào)整至95%，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至在6(TC下相對(duì)密度為1.101.20的清膏，低溫干燥得三七總皂苷組合物。優(yōu)選地，步驟(1)中加入7倍的乙醇；加入的乙醇濃度為65%;提取時(shí)間為7小時(shí)。將三七總皂苷活性成份組合物根據(jù)制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法，制成各種制劑。上述過程獲得的三七總皂苷活性成份組合物中各成份含量約為三七皂苷I^含量大于8.0%、人參皂苷Rgl含量大于25%、人參皂苷Re含量大于4.0%、人參皂苷Rl^含量大于25X，且Rgi:R^為1.0-1.2:1.5，三七皂苷Rp人參皂苷Rgp人參皂苷Re與人參皂苷Rt^的總重量大于活性成份總重量的75%?；谏鲜鋈呖傇碥战M合物，本發(fā)明的目的是提供該組合物的一種新用途，即在制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用。它可以制成膠囊、注射劑、片劑、栓劑或口服液等可使用的制劑。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。以下實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明了該組合物的新藥效，表明了本發(fā)明的有益效果。根據(jù)上述三七總皂苷組合物制備的注射液對(duì)家兔冠狀動(dòng)脈粥樣硬化(冠心病)的治療和/或預(yù)防作用實(shí)驗(yàn)。1.實(shí)驗(yàn)材料1.1.實(shí)驗(yàn)藥物根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例1制備的樣品；洛伐他汀片(北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H10970092，批號(hào)20070609);阿樂(北京嘉林藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H19990258，批號(hào)061108)。1.2.試劑血清總膽固醇(totalcholesterol,TC)測(cè)定試劑盒(中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)070471);甘油三酯(triglyceride,TG)測(cè)定試劑盒(中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)072011);低密度脂蛋白(LDL-C)測(cè)定試劑盒(中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)070122)。甲醛北京市旭東化工廠生產(chǎn)，批號(hào)20061201;乙醇北京化工廠生產(chǎn)，批號(hào)20070305;二甲苯北京化工廠生產(chǎn)，批號(hào)20061023;蘇木精北京捷康科貿(mào)公司；伊紅北京捷康科貿(mào)公司；切片石蠟58-6(TC:廣東省茂名市順和特種蠟生產(chǎn)廠；酸性復(fù)紅，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20060627;麗春紅，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)F20061109;橘黃G，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)F20070126;亮綠，JBN公司，進(jìn)口分裝，批號(hào)999/13258;鐵蘇木素，北京化學(xué)試劑公司，批號(hào)20060616;三氯化鐵，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)F20061208;碘化鉀，北京化學(xué)試劑公司，批號(hào)20060606;碘，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20071127。1.3.實(shí)驗(yàn)儀器自清洗旋轉(zhuǎn)式粘度計(jì)(LBY-W6A，北京普利生公司)；毛細(xì)管粘度計(jì)(LBY-麗1，北京普利生公司)；血凝儀(C2000-4，北京普利生公司)；微量毛細(xì)管離心機(jī)(KKH-120A，日本)；離心機(jī)(LXJ-II，上海醫(yī)用分析儀器廠)；切片機(jī)(德國Leica);包埋機(jī)(德國Leica);展片機(jī)(德國Leica);烤片機(jī)(德國Leica);光學(xué)顯微鏡(日本Olympus);半自動(dòng)生化測(cè)定儀(Microlab300，VitalScientificInc.)。1.4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物日本大耳白兔61只，雄性，體重約2.5kg。2.實(shí)驗(yàn)方法2.1.家兔冠狀動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，動(dòng)物統(tǒng)一標(biāo)號(hào)后耳緣靜脈采血，離心取血清，測(cè)定血脂指標(biāo)。隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、阿樂組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組、實(shí)施例1中劑量組和實(shí)施例1低劑量組。正常對(duì)照組僅喂基本顆粒飼料，其余動(dòng)物每天喂膽固醇飼料(根據(jù)文獻(xiàn)資料確定1%膽固醇，10%蛋黃粉，2%豬油，87%基礎(chǔ)飼料混合制成)，喂食根據(jù)動(dòng)物體重進(jìn)行，每周測(cè)體重1次，根據(jù)體重調(diào)整進(jìn)食量。每日根據(jù)體重給予一定量的高脂飼料，待動(dòng)物食用完畢后再補(bǔ)充普通飼料。動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，自由飲水，喂養(yǎng)12周。2.2.實(shí)驗(yàn)分組劑量設(shè)置(1)根據(jù)本發(fā)明制備的實(shí)施例1:人的臨床用藥量為300mg/60kg/d，im。家兔用藥量為人臨床用藥量的3倍。故而實(shí)驗(yàn)設(shè)置3個(gè)劑量組高劑量組(臨床等效劑量的2倍)30mg/kg/d;中劑量組(臨床等效劑量)15mg/kg/d;低劑量組(臨床等效劑量的1/2)7.5mg/kg。(2)阿樂人的臨床用法用量為，口服，一次l-2片(10mg/片)，l次/日。選定人的臨床用藥量為20mg/60kg/d。家兔用藥量為人臨床用藥量的3倍，故而阿樂家兔給藥量為lmg/kg/d。(3)洛伐他汀片人的臨床用法用量為，口服，一次1片(20mg/片)，l次/日。選定人的臨床用藥量為20mg/60kg/d。家兔用藥量為人臨床用藥量的3倍，故而洛伐他汀片家兔給藥量為lmg/kg/d。2.3.實(shí)驗(yàn)分組及給藥動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)l周，耳緣靜脈采血，離心取血清，測(cè)定血脂指標(biāo)。隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、阿樂組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組、實(shí)施例1中劑量組和實(shí)施例1低劑量組。正常對(duì)照組僅喂基本顆粒飼料，其余動(dòng)物每天喂膽固醇飼料，然后給予相應(yīng)藥物干預(yù)如下分組動(dòng)物數(shù)(只)劑M:(mgAg/d)給藥時(shí)間(周)空白對(duì)照組8鄰體積NSim12模辯組9等體稱NSim12阿樂組91i誦12'洛伐他汀織soIi羅12實(shí)施飼1劑黹組830i隨12實(shí)施飼i中劑豫a1015i廳12實(shí)施銅i低劑髮組97.5i誦122.4.血脂測(cè)定每組動(dòng)物在給藥前、給藥4周后、給藥8周后和給藥12周后均禁食12h，經(jīng)耳緣靜脈取血，常規(guī)生化測(cè)定TC、TG、LDL-C。2.5.組織取材及病理學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)前禁食16h。末次給藥后lh，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物空氣栓塞處死后解剖，立即摘取主動(dòng)脈和心臟，固定于10%甲醛溶液中。組織病理學(xué)檢查方法固定降主動(dòng)脈的一段取材并修塊、心臟冠狀動(dòng)脈溝下約0.4cm左右取材、左心室(做一包埋塊)、右心室和室間隔(做一包埋塊)，梯度酒精脫水，石蠟包埋，切片厚度5um，行HE、Masson、鐵蘇木素染色。光鏡檢查心臟冠狀動(dòng)脈阻塞發(fā)生率(阻塞發(fā)生率=一個(gè)心臟標(biāo)本兩片有阻塞的血管數(shù)/一個(gè)心臟標(biāo)本兩片所有冠狀動(dòng)脈數(shù)X100%)和降主動(dòng)脈病理改變情況并附顯微照相彩色照片，采用圖像分析儀測(cè)量內(nèi)膜厚度和中膜厚度、內(nèi)膜厚度/中膜厚度。按動(dòng)脈粥樣硬化基本病變分為脂紋期(i期)、纖維斑塊期(n期)、粥樣斑塊期(in期)，按照病變程度由輕到重分級(jí)為-、±、+、++、+++、++++，對(duì)加權(quán)數(shù)(加權(quán)數(shù)=分期X分級(jí))進(jìn)行積分統(tǒng)計(jì)；中膜病變按萎縮和變性作積分，彈力膜按溶解和斷裂作積分，膠原纖維按增生程度分級(jí)(如上)作積分，求出各組積分平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x士s)，經(jīng)t檢驗(yàn)，p<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.6.血液流變學(xué)檢測(cè)末次給藥后lh，耳中央動(dòng)脈取血，3.8%枸櫞酸鈉抗凝(1:9)，全自動(dòng)血液流變儀測(cè)定高、中、低切變率下的全血黏度，以及紅細(xì)胞壓積、纖原含量、血漿粘度等血液流變學(xué)指標(biāo)指標(biāo)。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1.實(shí)施例1預(yù)防性給藥對(duì)As模型家兔血脂的影響給藥前，各組家兔的血脂水平無明顯差異(見下表)。給藥前家兔的血脂水平(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與空白組比較△P<0.05，△△P<0.01，△△△P<0.001;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。給藥4周后，模型組、阿樂組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組、中劑量組、低劑量組的CH0水平均有所升高，除實(shí)施例1高劑量組外，其余各組與空白對(duì)照組相比均有顯著差異；阿樂組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組明顯低于模型組水平。模型組TG水平明顯高于空白對(duì)照組，其余各組的TG水平與空白對(duì)照組相比均無明顯差異。模型組、阿樂組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組、中劑量組、低劑量組的LDL-C水平均有所升高，除實(shí)施例1高劑量組外，其余各組與空白對(duì)照組相比均有顯著差異；各組LDL-C水平均明顯低于模型組水平。實(shí)施例1給藥4周后對(duì)家兔血脂水平的影響(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與空白組比較AP<0.05，AAP<0.01，AAAP<0.001;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。給藥8周后，各組CH0水平均有所升高，與空白對(duì)照組相比均有顯著差異；阿樂組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組與模型組相比有極顯著差異，實(shí)施例1中劑量組明顯低于模型組水平，實(shí)施例1低劑量組與模型組相比無明顯差異。模型組、實(shí)施例1低劑量組的TG水平與空白對(duì)照組相比有極顯著差異，實(shí)施例1中劑量組的TG水平明顯高于空白對(duì)照組；各組TG水平均顯著低于模型組。各組LDL-C水平均顯著高于空白對(duì)照組水平；除實(shí)施例1低劑量組外，其余各組與模型組相比均有極顯著差異。實(shí)施例1給藥8周后對(duì)家兔血脂水平的影響(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與空白組比較AP<0.05，AAP<0.01，AAAP<0.001;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。給藥12周后，各組CH0水平均有所升高，與空白對(duì)照組相比均有顯著差異；阿樂組、實(shí)施例1高劑量組與模型組相比有極顯著差異，實(shí)施例1中劑量組與模型組相比有明顯差異，洛伐他汀組、實(shí)施例l低劑量組與模型組相比無明顯差異。模型組、洛伐他汀組、實(shí)施例1低劑量組的TG水平明顯高于空白對(duì)照組；各組TG水平均顯著低于模型組水平。各組LDL-C水平均明顯高于空白對(duì)照組水平，其中實(shí)施例1高劑量組與空白對(duì)照組相比有明顯差異，其余各組與空白對(duì)照組相比均有極顯著差異；除洛伐他汀組外，其余各組LDL-C水平均明顯低于模型組，其中實(shí)施例1高劑量組、實(shí)施例1中劑量組與模型組相比有極顯著差異，阿樂組與模型組相比有顯著差異，實(shí)施例1低劑量組與模型組相比有明顯差異。實(shí)施例1給藥12周后對(duì)家兔血脂水平的影響(x±s)分組給藥劑錄CHOTG空白對(duì)照組—1.4歸.8『'0,87±0.4'"Ll歸,85糊0.86±0.38"'模型組30.89*7.37'''3.8l士2.276"*直6,!1±1"*3,8歸,8》'.阿樂組1雄綠5,01"，畫.43土0.8S"'9.21土3.80…"3,6麵0,懇…洛伐他汀組25.69士3,粉…2.21:1.14.'4.12±4.56*"4.62±0.85*。*'實(shí)施例1高劑徵301§,58±4.85"'"'1.2跳54"'6.43±2.銀."3.4±0.66"'實(shí)施例〗中劑燈524,69土6.9…'1,50士0.67'"8.91土3.57…'"3,65土0.58"'實(shí)施例1低劑《7.530.07士6.73'。2息1.35,10.認(rèn)士2.19…'3.60土0,62'"與空白組比較AP<0.05，AAP<0.01，AAAP<0.001;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。結(jié)果表明，陽性藥阿樂和洛伐他汀能夠顯著降低As模型家兔血清CHO、TG、LDL-C水平，且阿樂作用效果優(yōu)于洛伐他汀。實(shí)施例1高劑量組能夠顯著降低AS模型家兔血清CHO、TG、LDL-C水平，作用效果與阿樂相似。實(shí)施例1中劑量組、低劑量組能夠明顯降低As模型家兔血清CHO、TG、LDL-C水平，作用效果較實(shí)施例1高劑量組差。3.2.實(shí)施例1對(duì)As模型家兔血液流變學(xué)的影響實(shí)施例1對(duì)As模型家兔血液流變學(xué)的影響(x±s)分組給藥劑m紅織胞s魏(%)纖原含量<g/L)血漿粘度(mpa-s)血漿粘度(mpa's)!0s450s—'200s"空A對(duì)照26.01:4.91"2.77逸76''.'1.41±0.12'37直士0,542.93±0.392.53±0,34綴模型綴—31.06±3.76"7.15±1.66*"1.63土0.28"4.5歸.60"3.32±0.42'2..7^fc0.37阿樂組128.44±3,，3J滅45''*4.11±0.483.15±0.272.74±0.22洛伐他汀132.76*4.27"'4.3歸63"1.43±0.29.'"5i0.70'3.2.3:土0.342.74±0.24組…實(shí)施例1離劑量組3032.i3±2."'.4.02^0.55"''"8±0.23"U0.65'3.4O±0.28.2J德2(T實(shí)施例！1530.62±3.15"4.3&r0.43…1,42±細(xì)4.35士0.81'3.36±0.43'2.92±0.31"中劑燈組…實(shí)施例1低劑M組7.532JfttL50'"4.6S±0,79"*L37±W34.40*0.46'3.4歸.2(f2.97i0.15.'與空白組比較AP<0.05，AAP<0.01，AAAP<0.001;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。模型組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組、中劑量組、低劑量組的紅細(xì)胞壓積水平均顯著高于空白對(duì)照組；各給藥組與模型組相比無明顯差異。模型組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組、中劑量組、低劑量組的纖原含量均顯著高于空白對(duì)照組；各給藥組均顯著高于模型組水平。各給藥組的血漿粘度與空白對(duì)照組水平五明顯差異；阿樂組、洛伐他汀組、實(shí)施例1低劑量組均明顯低于模型組。模型組、洛伐他汀組、實(shí)施例1高劑量組、中劑量組、低劑量組的低切水平均明顯高于空白對(duì)照組；各給藥組與模型組相比無明顯差異。模型組、阿樂組、實(shí)施例1高劑量組、中劑量組、低劑量組的中切水平均明顯高于空白對(duì)照組；各給藥組與模型組相比無明顯差異。實(shí)施例1高劑量組、中劑量組、低劑量組的高切水平均顯著高于空白對(duì)照組；各給藥組與模型組相比無明顯差異。結(jié)果表明，陽性藥阿樂和洛伐他汀能夠顯著降低As模型家兔纖原含量和血漿粘度，且阿樂作用效果優(yōu)于洛伐他汀。實(shí)施例1高劑量組能夠顯著降低As模型家兔纖原含量，作用效果與洛伐他汀相似。實(shí)施例1中劑量組能夠明顯降低As模型家兔纖原含量，作用效果較實(shí)施例1高劑量組差。實(shí)施例1低劑量組能夠明顯降低As模型家兔纖原含量和血漿粘度，作用效果與洛伐他汀相似。3.3.實(shí)施例1對(duì)As模型家兔心臟冠狀動(dòng)脈阻塞率的影響實(shí)施例1對(duì)As模型家兔心臟冠狀動(dòng)脈阻塞發(fā)生率的影響(x士s)組別側(cè)數(shù)(只)冠狀動(dòng)脈總數(shù)未全阻塞發(fā)生率完全P11塞發(fā)生率阻塞發(fā)生率(％)空白對(duì)照組8199±240,00±0,00"o扉o,o(TO.OO土O.OO"模型組9225"""'373,28±1,29簡11.54土1.44"9228-223鄰士畫J8"""1,13士1.W""5.33±1.95"",'洛伐他汀組8222±173.83土！.79一0.70士0.57。"5J3士1.95""實(shí)施例i島劑-tt組8226±254.06±1.39"""0.60進(jìn)77"4.68士1,79""實(shí)施例！中劑M組10221±245.60il.0(f""0J8士.95"6,05土1.22w4實(shí)施例1低劑歲綴9215士225.78土1.39""0.77±0.55nn"與空白對(duì)照組比較#P<0.05，##P<0.01;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01?？瞻讓?duì)照組冠狀動(dòng)脈未見病變。模型組與空白對(duì)照組比較，血管阻塞率明顯增加(p<0.01)。阿樂組、洛伐他汀組和高、中、低劑量組血管阻塞發(fā)生率與模型組和空白對(duì)照比較都有顯著差異(p<0.01)。3.4.實(shí)施例1對(duì)AS模型家兔降主動(dòng)脈病變的影響3.4.1.實(shí)施例1對(duì)AS模型家兔內(nèi)膜基本病變和中膜病變的影響實(shí)施例1對(duì)AS模型家兔降主動(dòng)脈內(nèi)膜基本病變和中膜病變作用的積分結(jié)果。實(shí)施例l對(duì)As模型家兔降主動(dòng)脈內(nèi)膜基本病變和中膜病變作用的積分結(jié)果(x±s)組別例數(shù)(只)積分結(jié)綴空白對(duì)照組80,19±0,37"模ii紐97.39±2.96"阿樂組91,綱,27*,潛ft德IT組8.38土0.95"..實(shí)施例〗高劑tt組8實(shí)施例〗中劑M組10實(shí)施例l低劑S組94.±2.27"'與空白對(duì)照組比較#P<0.05，##P<0.01;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01?？瞻讓?duì)照組見到2/8只動(dòng)物內(nèi)膜有少量脂質(zhì)沉積，表現(xiàn)為輕微的脂紋期，中膜未見改變；其它動(dòng)物降主動(dòng)脈各層均正常。模型組所有動(dòng)物內(nèi)膜有中到重度的纖維斑塊、其中半數(shù)動(dòng)物伴有輕到中度的粥樣斑塊；3/9只動(dòng)物中膜有萎縮或變性。本組內(nèi)膜基本病變和中膜病變與空白對(duì)照組比較具有顯著性差異(p<0.01)。阿樂組4/9只動(dòng)物有輕度的纖維斑塊樣改變，其中有2只動(dòng)物同時(shí)見到輕度脂紋樣改變，另有1只動(dòng)物僅見輕度的脂紋樣改變。本組內(nèi)膜基本病變和中膜病變與模型組比較明顯減輕(P〈0.01)，與空白對(duì)照組比較未見差異。洛伐他汀組有半數(shù)動(dòng)物降主動(dòng)脈內(nèi)膜有輕度的纖維斑塊樣改變，其中有3只動(dòng)物同時(shí)見到輕度脂紋樣改變，另有1只動(dòng)物僅見輕度的脂紋樣改變。本組內(nèi)膜基本病變和中膜病變與模型組比較明顯減輕(P<O.Ol)，但與空白對(duì)照組比較病變程度明顯加重(p<0.01)。高劑量組有半數(shù)動(dòng)物降主動(dòng)脈內(nèi)膜有輕微的纖維斑塊樣改變，其中有3只同時(shí)見到輕度脂紋樣改變，另有3只動(dòng)物僅見輕度的脂紋樣改變。本組內(nèi)膜基本病變和中膜病變與模型組比較明顯減輕(P〈0.01)，但與空白對(duì)照組比較病變程度有所加重(p<0.05)。中劑量組9/10只動(dòng)物降主動(dòng)脈內(nèi)膜有輕度的纖維斑塊樣改變，其中有3只同時(shí)見到輕度脂紋樣改變。本組內(nèi)膜基本病變和中膜病變與模型組比較明顯減輕(P<0.01)，但與空白對(duì)照組比較病變程度明顯加重(P<0.01)。低劑量組所有動(dòng)物降主動(dòng)脈內(nèi)膜有輕到重度的纖維斑塊樣改變，其中1只動(dòng)物同時(shí)見輕微的粥樣斑塊、2只動(dòng)物同時(shí)見到輕度脂紋樣改變。本組內(nèi)膜基本病變和中膜病變與模型組比較有所減輕(p<0.05)，但與空白對(duì)照組比較病變程度明顯加重(p<0.01)。3.4.2.實(shí)施例1對(duì)As模型家兔內(nèi)膜厚度和內(nèi)膜厚度/中膜厚度的影響(x士s)組別飼數(shù)(只)內(nèi)膜厚度內(nèi)膜厚度沖膜厚度空A對(duì)照組82.088±0.031"0,014±0.002"模型組9123,616±50.995"**0房2±0.柳*"阿樂組93.680±3.013"0.030±0.019'*'洛伐他汀組816.1lfe13.420'"0.150±0.118'"實(shí)施倒〗高劑iit組87.56U10.119"0.059±0馬"實(shí)施例l中劍量組1024,137±22.5750,211i，,1.9.2實(shí)施例l低劑W:組9額28±雄眉7翁驟轉(zhuǎn)0,38歸,國鬆驟"與空白對(duì)照組比較#P<0.05，##P<0.01;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01?？瞻讓?duì)照組內(nèi)膜厚度和內(nèi)膜厚度/中膜厚度結(jié)果見上表。模型組本組內(nèi)膜厚度和內(nèi)膜厚度/中膜厚度與對(duì)照組比較都明顯增大(p<0.01)。阿樂組本組內(nèi)膜厚度與模型組比較明顯減小(p<O.Ol)，與空白對(duì)照組比較未見明顯差異。內(nèi)膜厚度/中膜厚度與模型組比較明顯變小(P〈0.01)，與空白對(duì)照組比較有所增大(P<0.05)。洛伐他汀組本組內(nèi)膜厚度和內(nèi)膜厚度/中膜厚度與模型組比較都明顯變小(p<0.01)，與空白對(duì)照組比較都有所增大(p<0.05)。高劑量組本組內(nèi)膜厚度和內(nèi)膜厚度/中膜厚度與模型組比較都明顯變小(p<0.01)，與空白對(duì)照組比較未見明顯差異。中劑量組本組內(nèi)膜厚度和內(nèi)膜厚度/中膜厚度與模型組比較都明顯變小(p<0.01)，與空白對(duì)照組比較都有所增大(p<0.05)。小劑量組本組內(nèi)膜厚度和內(nèi)膜厚度/中膜厚度與模型組比較都明顯變小(p<0.01)，與空白對(duì)照組比較都明顯增大(p<0.01)。3.5.實(shí)施例1對(duì)As模型家兔彈力膜病理改變的影響空白對(duì)照組半數(shù)動(dòng)物可見彈力膜輕度不連續(xù)的小段溶解或斷裂。模型組可見明顯成片的中到重度溶解和斷裂，與空白對(duì)照組比較具有顯著性差異(p<0.01)。阿樂組、洛伐他汀組和高、中、低劑量組與模型組比較內(nèi)彈力膜溶解和斷裂等病理改變都明顯減輕(p<0.01);中、小劑量組與空白對(duì)照組比較病變明顯加重(中劑量p<0.05、小劑量p<0.01)(見下表)。實(shí)施例1對(duì)As模型家兔降主動(dòng)脈彈力膜溶解、斷裂病變作用的積分結(jié)果(x士s)組別例數(shù)(只)積分結(jié)果i:嵐《0,25±0,27"模謹(jǐn)組93,56±1.36阿樂組90.56逸8廣洛伐他汀組80.75土0.80"實(shí)施例！高劑量^詞80J1逸37"實(shí)麄例i中劍量親101.05土1.04'"實(shí)施倆i條劍it組9〗,5歸,50一與空白對(duì)照組比較#P<0.05，##P<0.01;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01。3.6.實(shí)施例1對(duì)As模型家兔膠原纖維病理改變的影響實(shí)施例1對(duì)As模型家兔降主動(dòng)脈膠原纖維增生作用的積分結(jié)果(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>與空白對(duì)照組比較#P<0.05，##P<0.01;與模型組比較*P<0.05，**P<0.01?？瞻讓?duì)照組膠原纖維未觀察到可見的增生。模型組降主動(dòng)脈膠原纖維增生明顯、有的可見很厚的整圈的纖維帽，與空白對(duì)照組比較具有顯著性差異(p<0.01)。阿樂組與模型組比較膠原纖維增生明顯減輕(P<0.01)、與空白對(duì)照組比較未見明顯差異；洛伐他汀組與模型組比較膠原纖維增生有所減輕(P<0.05)、與空白對(duì)照組比較膠原纖維增生較為明顯(p<0.05);高、中和小劑量組與模型組比較增生程度明顯減輕(p〈0.01)，小劑量組與空白對(duì)照組明顯加重(P<0.01)、高和中劑量與空白對(duì)照組比較未見明顯差異。4.結(jié)論4.1.高脂飲食3個(gè)月模型組大耳白兔血清中TG、TC、LDL-C的水平以及紅細(xì)胞壓積、纖原含量、血漿粘度、低切、中切水平均明顯升高，與空白對(duì)照組相比有明顯差異。心臟冠狀動(dòng)脈阻塞發(fā)生率明顯增加；降主動(dòng)脈內(nèi)膜有脂質(zhì)沉積形成斑塊，中膜有受壓萎縮、變性增厚等病理現(xiàn)象發(fā)生；內(nèi)膜厚度及內(nèi)膜厚度/中膜厚度都明顯增加；彈力膜有成片或段狀的中到重度溶解或/和斷裂；膠原纖維輕到重度增生。4.2.在高脂飲食的同時(shí)給予陽性藥干預(yù)的阿樂組和洛伐他汀組阿樂明顯降低了血清中TG、TC、LDL-C的水平和纖原含量、血漿粘度，與模型組相比有顯著差異。洛伐他汀在給藥8周時(shí)明顯降低了血清中TG、TC、LDL-C的水平，與模型組相比有顯著差異；在給藥12周時(shí)明顯降低了血清中TG的水平和纖原含量、血漿粘度，與模型組相比有顯著差異。兩種藥物明顯降低了心臟冠狀動(dòng)脈阻塞發(fā)生率，改善了降主動(dòng)脈脂質(zhì)沉積、中膜病變、彈力膜溶解和斷裂、膠原纖維增生等病變，對(duì)于減小內(nèi)膜厚度及內(nèi)膜厚度/中膜厚度都有明顯作用。組織學(xué)觀察顯示阿樂對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的治療作用比洛伐他汀略好，但未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。4.3.在高脂飲食的同時(shí)給予實(shí)施例1肌肉注射3個(gè)月的高、中、低劑量組實(shí)施例1高劑量組和中劑量組均明顯降低了血清中TG、TC、LDL-C的水平和纖原含量，與模型組相比有顯著差異，且高劑量組效果優(yōu)于中劑量組。實(shí)施例1低劑量組可明顯降低血清中TG、LDL-C的水平以及纖原含量、血漿粘度，與模型組相比有明顯差異。三個(gè)劑量組均可明顯降低心臟冠狀動(dòng)脈阻塞發(fā)生率，改善了降主動(dòng)脈脂質(zhì)沉積、中膜病變、彈力膜溶解和斷裂、膠原纖維增生等病理改變，對(duì)于減小內(nèi)膜厚度及內(nèi)膜厚度/中膜厚度都有明顯作用。其中高劑量組與陽性藥阿樂的作用效果相似，中劑量組與陽性藥洛伐他汀組相似，且高劑量組作用優(yōu)于中劑量組，低劑量較兩陽性藥差。臨床試驗(yàn)—、治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心絞痛療效觀察1、實(shí)施例1與消心痛、復(fù)方丹參片對(duì)比1.1—般治療選擇100例患者均符合冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心絞痛的診斷標(biāo)準(zhǔn)，隨機(jī)分為治療組55例，其中男35例，女20例；年齡48-70歲，平均56歲；對(duì)照組45例，男30例，女15例，年齡40-70歲，平均54歲。1.2治療方法治療組用實(shí)施例1凍干粉劑300mg加5%葡萄糖250ml靜脈滴注，消心痛10mg，復(fù)方丹參片3片，每日3次口服，2周為1療程；對(duì)照組只用消心痛10mg，復(fù)方丹參片3片，每日3次口服，2周為l療程。兩組均輔以P-受體阻滯劑、鈣拮抗劑、調(diào)脂類藥物。所有病例治療終結(jié)后復(fù)查血常規(guī)、尿常規(guī)、心電圖、肝腎功能等，對(duì)嚴(yán)重心絞痛發(fā)作者可含服硝酸日油緩解。1.3治療效果分組例數(shù)顯效有效無效有效率(％)治療組5520251081,8對(duì)照組45102015667P<0.05，兩種治療方法的總有效率差異顯著，治療組有效率明顯優(yōu)于對(duì)照組。1.4毒副作用治療觀察期間未見明顯副作用，治療終結(jié)后復(fù)查血常規(guī)、尿常規(guī)、心電圖、肝腎功能均無異常。2、實(shí)施例1與復(fù)方丹參注射液對(duì)比2.l對(duì)象與方法2.1.l研究對(duì)象選擇住院冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者80例，隨機(jī)分為兩組，每組40例，治療組用實(shí)施例l，對(duì)照組用復(fù)方丹參注射液。治療組年齡62-89歲，平均70.3歲，對(duì)照組年齡60-88歲，平均76歲。2.1.2方法治療組采用實(shí)施例1凍干粉劑420mg加5%葡萄糖250ml或生理鹽水250ml，靜脈滴注，每天1次，共用15天。對(duì)照組采用復(fù)方丹參注射液40ml加5%葡萄糖250ml或生理鹽水250ml，靜脈滴注，每天l次，共用15天。兩組治療前后抽血查肝、腎功能、血糖、血脂、血液流變學(xué)、栓溶二聚體及12導(dǎo)聯(lián)心電圖檢查，并觀測(cè)患者的血壓、心率和胸悶、心悸、胸痛等癥狀變化。以癥狀完全消失為顯效，明顯減輕或發(fā)作次數(shù)減少為有效，無改善為無效。心電圖變化以缺血性ST由用藥前下降lmm，T波倒置，治療后恢復(fù)正常為顯效，下降有改善T波變低平或雙相為有效，其余為無效。2.1.3統(tǒng)計(jì)方法治療前后采用配對(duì)t檢驗(yàn)，治療組與對(duì)照組之間采用四格表確切概率法運(yùn)算，數(shù)據(jù)采用PEMS統(tǒng)計(jì)軟件包計(jì)算。2.2結(jié)果實(shí)施例1治療組與對(duì)照組治療前后肝腎功能、血脂、血糖變化不大，均在正常范圍，栓溶二聚體在實(shí)施例1組有14例治療后降至正常，對(duì)照組11例降至正常。降血壓方面，兩組均有不同程度的降血壓作用，治療組有16例收縮壓降低，11例舒張壓降低；；對(duì)照組有2例收縮壓降低，4例舒張壓降低。治療前后血液流變學(xué)變化(x±s)分纖.全血輸度血獎(jiǎng)輸度全還原驗(yàn)度紅細(xì)跑比容纖維蛋白原治療前6.70±0.752,45±0,267.92±1.0350.23±4.34.2±1,13te療后5J5±0,421.85±0.246.07±0.9847,43±4313,24±0,83(n=40》t值6.7810.72ft,42.91433p但《扁<0.01儒i<0,額O.01餘,4.97±0.041.79±0.107.82土L1052,1±0,074.10±1.03對(duì)照組4,78士0.091.7±0.757.65土1.0147,7息074,05±0,87(n=40)t億.12,180.750.09280.250,23p值>0.05》0,05>0,05<o,oi>O.0S兩組療效比較(％心緩?fù)疮熥冃碾妶D改善組纖顯效有效^總有1a率"值P儘顯效有效總有無效效率l值P值對(duì)照組012920502,90《O扁3122.5391728303220LW>0.052.3討論實(shí)施例1粉針用于治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化療效確切，能改善患者臨床癥狀，部分恢復(fù)心電圖的ST-T改變，及心律失常；在用藥期間，實(shí)施例1的降血壓作用亦較為明顯，在降低血粘滯方而略優(yōu)于復(fù)方丹參注射液，治療期間無副作用發(fā)生。3、實(shí)施例1與復(fù)方丹參注射液對(duì)比治療老年病人冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心絞痛療效的臨床觀察l資料方法1.1病例選擇選擇武漢市同濟(jì)醫(yī)院、武漢大學(xué)人民醫(yī)院、湖北省中醫(yī)醫(yī)院共155例住院患者，年齡50-70歲，平均61.2±4.3歲，隨機(jī)分為兩組，治療組80例，其中75例有缺血性心電圖改變，采用實(shí)施例1粉針劑治療；對(duì)照組75例，其中71例有缺血性心電圖改變，采用復(fù)方丹參注射液治療。1.2方法治療組采用實(shí)施例1粉針劑500mg加入5%葡萄糖250ml或生理鹽水250ml，靜脈滴注，每天l次，共用10天。對(duì)照組采用復(fù)方丹參液40ml加入5X葡萄糖250ml或生理鹽水250ml治療，靜脈滴注，每天1次，共用10天。用藥前及療程結(jié)束時(shí)檢查心電圖、血液流變學(xué)、血脂、血糖、出凝血時(shí)間，并觀察患者血壓和癥狀變化。1.3療效判定標(biāo)準(zhǔn)心絞痛癥狀療效和心電圖療效均按1993年中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局頒布的《心血管系統(tǒng)藥物臨床研究指導(dǎo)原則》進(jìn)行評(píng)定。(1)心絞痛癥狀療效判定標(biāo)準(zhǔn)，顯效同等勞累程序不引起心絞痛或心絞痛發(fā)作次數(shù)減少80%以上，硝酸甘油耗量減少80%以上；有效心絞痛發(fā)作次數(shù)及硝酸甘油消耗量均減少50-80%;無效心絞痛發(fā)作次數(shù)及硝酸甘油消耗量均減少不到50%;加重心絞痛發(fā)作次數(shù)、程序和持續(xù)時(shí)間加重，硝酸甘油消耗量增加。(2)心電圖療效判定標(biāo)準(zhǔn)，顯效靜息心電圖恢復(fù)正常，次極限運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)心電圖陽性轉(zhuǎn)為陰性，或運(yùn)動(dòng)耐量上升2級(jí)；改善靜息心電圖或次極限量運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)心電圖缺血性ST段下降，治療后回升1.5mm以上，但未正常，或主要導(dǎo)聯(lián)倒置T波變淺達(dá)50X以上，或T波由平坦轉(zhuǎn)為直立，或運(yùn)動(dòng)耐量上升1級(jí)；無改變靜息心電目或次極限量運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)心電圖與治療前基本相同；加重靜息或次極限量運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)心電圖ST段較治療前下降>0.5mm，主要導(dǎo)聯(lián)倒置T波加深>0.5mm，主要導(dǎo)聯(lián)倒置T波加深>50%或直立T波變?yōu)槠教梗蚱教筎波變?yōu)榈怪没虼螛O限量運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)較治療前運(yùn)動(dòng)耐量下降1級(jí)。1.4統(tǒng)計(jì)處理應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示，根據(jù)資料特征采用t檢驗(yàn)或Ridit分析。2結(jié)果2.1臨床療效和心電圖變化實(shí)施例1粉針劑治療后，臨床總有效率為82.5%，較對(duì)照組明顯增高，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異有顯著性意義(P>0.01)。對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者缺血性改變，實(shí)施例1粉針劑具有明顯的改善作用，與對(duì)照組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異具有顯著性意義(PX).01)，見下表。兩組臨床療效和心電圖療效的比較表分組例數(shù)項(xiàng)目有效顯效無效加:i:總有效率(％)治療組80癥狀療效28386882.5心電療效2636ii2對(duì)照離75癥狀療效282217366,771心電療效2123216亂0注與對(duì)照組比，*P<0.012.2血液流變學(xué)改變實(shí)施例1粉針治療后，患者血液流變學(xué)指標(biāo)都具有明顯改善，而復(fù)方丹參僅能使部分血液流變學(xué)指標(biāo)得以改善。治療前后血液流變學(xué)變化檢測(cè)項(xiàng)目組別治療前治療后全血低切黏度治療組14,2±4,19.4土3.1《0,0i對(duì)照組15,1±3,214.7±5.2>0.05全血離切黏度治療組5,8±0.6440*3<0.05甜昭拍5.6±0.35,0土0,5>0.05血漿黏度治療組1.7±0.8o,os對(duì)照組25zii041.4±0.8<0.05紅細(xì)胞壓積德療組48.4±3.54Ut丄l<0.05對(duì)魔組47.5±2,1<0.052.3血脂、血糖的影響實(shí)施例1粉針治療組與對(duì)照組治療前后血脂、血糖及出凝血時(shí)間變化均不明顯，故數(shù)據(jù)略。3、討論根據(jù)臨床觀察，用實(shí)施例1凍干粉劑治療一般在2-3個(gè)療程內(nèi)可使甘油三脂明顯下降，心電圖STT段有所提高，且療效較復(fù)方丹參注射液好。另外，實(shí)施例1凍干粉劑能明顯改善患者血液流變學(xué)指標(biāo)，復(fù)方丹參注射液僅能改善部分血液流變學(xué)指標(biāo)。臨床研究發(fā)現(xiàn)，患者應(yīng)用實(shí)施例1凍干粉劑后，降低了心絞痛的發(fā)作次數(shù)及持續(xù)時(shí)間，也減少了心肌耗氧量，同時(shí)降低了血液黏度，與對(duì)照組治療后比較差異均有顯著性。這可能是其治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心絞痛的部分機(jī)制。二、治療心肌缺血療效觀察l資料與方法1.1—般資料通過做心電圖及活動(dòng)平板試驗(yàn)，篩選出110例不同程度的心肌缺血病例，把他們隨機(jī)分為實(shí)施例l(凍干)治療組，復(fù)方丹參注射液對(duì)照組。治療組56例，男27例，女29例；年齡5069歲；其中由高血壓引起的25例，高血脂引起的14例，糖尿病引起的12例，其他5例，病程210年。輕度心肌缺血37例，明顯心肌缺血19例。對(duì)照組54例，男25例，女29例；年齡5067歲；病程29年；其中由高血壓引起的23例，高血脂引起的15例，糖尿病引起的11例，其他5例；輕度心肌缺血36例，明顯心肌缺血18例。兩組年齡、病程、病種及病情差異無顯著性(P>0.05)。1.2治療方法治療組用實(shí)施例l(凍干)靜脈滴注治療，根據(jù)病情，每次250500mg，用5%葡萄糖液或生理鹽水注射液250500ml稀釋，每日1次；對(duì)照組用復(fù)方丹參注射液，靜脈滴注，根據(jù)病情每次610ml，用5%葡萄糖液或生理鹽水注射液250500ml稀釋，每日l次，各組均針對(duì)原發(fā)病進(jìn)行相應(yīng)治療。2周為1個(gè)療程，相隔1個(gè)月后再行第2個(gè)療程，治療共28天，兩組病例觀察期間均能接受全程治療，無中途退出者。2結(jié)果治療4周后復(fù)查活動(dòng)平板、相關(guān)血生化及血壓檢查，治療組心肌缺血明顯改善者35例，顯效率62.5%;有所改善52例，有效率92.9%。對(duì)照組心肌缺血明顯改善者23例，顯效率42.6%;有所改善42例，有效率77.8%。兩組療效比較經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異有顯著性(P<0.05)。各組原發(fā)疾病比治療前均有不同程度地好轉(zhuǎn)，這里不做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。本臨床結(jié)果提示，實(shí)施例1能有效地改善高血壓、高血脂、糖尿病及其他原因引起的心肌缺血，為臨床用藥提供了指導(dǎo)作用。三、實(shí)施例1治療心肌梗死臨床觀察1、對(duì)象入選標(biāo)準(zhǔn)長征醫(yī)院心內(nèi)科有明顯胸悶癥狀的冠狀動(dòng)脈粥樣硬化住院患者；排除標(biāo)準(zhǔn)急性心肌梗死患者或不能行走者?？偣踩脒x42例，男29例，女13例，平均年齡68±6歲。其中，38例經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影確診，4例有陳舊性心肌梗死史，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化合并高血壓及陳舊性梗死6例。2、方法隨即分為對(duì)照組20例和實(shí)驗(yàn)組22例。對(duì)照組只接受常規(guī)治療；實(shí)驗(yàn)組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上，給予注射用實(shí)施例1針劑450mg，稀釋于5%葡萄糖生理鹽水250ml靜滴，每日一次，7-10天為一療程。3、臨床觀察以胸悶癥狀及6分鐘步行距離為療效評(píng)價(jià)指標(biāo)。顯效療程結(jié)束時(shí)，胸悶癥狀完全緩解，且6分鐘步行距離較用藥前增加2倍以上；有效療程結(jié)束時(shí)，胸悶癥狀部分緩解且6分鐘步行距離增加1倍以上；無效療程結(jié)束時(shí)，胸悶癥狀無緩解且6分鐘步行距離增加不到1倍。4、結(jié)果實(shí)驗(yàn)組顯效14例(63.6%)，有效8例(36.4%)，無效0例，總有效率100%，其中，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化合并高血壓及陳舊性腦梗死的3例患者主訴癥狀的改善更為明顯。對(duì)照組顯效9例(45%)，有效10例(50%)，無效1例(5%)，總有效率95%，其中，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化合并高血壓及陳舊性腦梗死的3例患者中，2例主訴癥狀改善明顯，1例改善不滿意。療效中未見明顯副作用，病人耐受性良好。5、討論我們采用實(shí)施例1觀察了部分冠狀動(dòng)脈粥樣硬化診斷明確，患者主訴胸悶而非典型胸痛的患者。結(jié)果顯示，雖然注射用實(shí)施例1不能進(jìn)一步提高治療的總有效率，但可提高顯效病人的比例，尤其在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化合并高血壓及陳舊性腦梗死的患者。因此，在常規(guī)心血管病藥物治療基礎(chǔ)上，加用注射用實(shí)施例1靜脈滴注7-10天，可以進(jìn)一步改善冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者胸悶狀況和運(yùn)動(dòng)耐力。四、實(shí)施例1治療充血性心力衰竭1臨床資料1.1診斷標(biāo)準(zhǔn)所有病例均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)于2002年制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并按美國紐約心臟協(xié)會(huì)(NYHA)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)。1.2觀察對(duì)象90例冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(陳舊性心肌梗死)均為住院資料完整并排除合并糖尿病、肺心病及嚴(yán)重肝、腎功能損害的患者。以n、ni、iv級(jí)心功能進(jìn)行分層，然后每級(jí)按入院先后順序分2組，治療組45例；對(duì)照組45例。2組臨床資料和常規(guī)基礎(chǔ)用藥之間具有良好可比性，經(jīng)t及卡方檢驗(yàn)無顯著差異(P>0.1)。見以下兩表(兩組基礎(chǔ)用藥比較、2組臨床資料比較)表兩組基礎(chǔ)用藥比較藥物'治療綴(n=45)對(duì)照組(n=45)用藝?yán)龜?shù)纖藥量(mg》用藥例數(shù)ffl藥a(mg)洛汀新387.0±1.73366.88±1.6327■1.5.05士31315.5+3.19地戈辛0,141±0,042180,144±0,045裕潔晷13115利尿劑類44>-—,廳類30—抗生素樊-表2組臨床資料比較<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>2治療方法對(duì)照組以常規(guī)抗心衰治療(低欲飲食、吸氧、休息、利尿、抑制神經(jīng)內(nèi)分泌因子活性等)；治療組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加實(shí)施例l凍干粉劑300mg，加入5X葡萄糖注射液250ml，靜脈點(diǎn)滴，3.5h滴完，每日1次，療程14天。在不影響治療情況下，2組用藥應(yīng)盡量保持可比性。3觀察指標(biāo)3.1療效標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》分為臨床近期治愈心功能糾正至1級(jí)，癥狀、體征基本消失，各項(xiàng)檢查基本恢復(fù)正常；顯效心功能進(jìn)步2級(jí)以上而未達(dá)到1級(jí)心功能，癥狀、體征及各項(xiàng)檢查明顯改善；有效心功能進(jìn)步1級(jí)以上而未達(dá)到1級(jí)心功能，癥狀、體征及各項(xiàng)檢查有所改善；無效心功能無明顯變化或加重或死亡。3.2左室功能采用Hp550型超聲診斷儀，3.0MHz探頭進(jìn)行檢查，采用雙平面Simpson公式法測(cè)定左室收縮末期容積(LVESV)，左室舒張末期容積(LVEDV)及射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，以上指標(biāo)均連續(xù)測(cè)定3次，取平均值。如為心房顫動(dòng)者，連續(xù)測(cè)5次LVEF取其平均值。3.3纖溶功能和內(nèi)皮素-1(ET-1)測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心(ELISA)法測(cè)定血漿組織纖溶酶原激活物(tPA)、組織纖溶酶原激活物抑制物(PA1)、ET-1，采用免疫濁度法測(cè)纖溶酶原(PLG)，采用法國STAGD-STA全自動(dòng)血凝儀測(cè)定纖維蛋白原(FIB)。試劑盒由上海太陽生物技術(shù)公司提供，嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。4統(tǒng)計(jì)方法療效比較應(yīng)用Ridit分析，計(jì)量資料采用2組比較t檢驗(yàn)。5治療結(jié)果5.12組臨床療效比較<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>2組相比，治療組總有效率優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)。5.22組治療前后纖溶系統(tǒng)比較(x士s)組纖(ng'..ml)謹(jǐn)^FIBPI-GET-l(g/L)(mg/mL)(p§M》請(qǐng)ff組潘ff"前45土2.2546.76土15.134.56±1,50302.65±78,32!6.78±5.65治療后457J2±3,0237.12土10.323,42±復(fù)，32243.54±83.14!4.12土4,69對(duì)照組滴纖456,56±2.2747.83±15.214,±1,52332,05士80.2517.32±5.71治療后457,31±2,9542.03±12.3.99±L38286避72,W歸,16±4,73注與本組治療前比較，(l)P<0.01，(2)P<0.05;與對(duì)照組治療前后比較，(3)P<0.055.32組治療前后左室功能比較(x±s)組別iiLVEDV《ml/纖2)LVESV(m!7m2)LVEF(%)治療前45193.24士W.74132.29±16.2431.84±4.47治療后45185,51±12,16U7.52土14.2036.71±6.13對(duì)照組'治療前弱195JO±13,99133.61±17.373'1654*5144188,64±12,57124.59±16.2634,02±5,56注與本組治療前比較，(l)P<0.01;與對(duì)照組治療前后比較，(2)P<0.056討論目前已明確，慢性充血性心力衰竭患者腎素-血管緊張素一醛固酮系統(tǒng)激活，致血管緊張素-II(AngII)增高，AndII增高又致PAI_l增高，而PAI-1對(duì)tPA具有抑制作用。tPA可使PLC激活，轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶，纖溶酶可使纖維蛋白(原)溶解。另有研究發(fā)現(xiàn)，慢性心衰患者血漿ET-l水平升高，而ET-l是一種強(qiáng)效縮血管物質(zhì)，可直接參與心肌重構(gòu)和心衰的發(fā)展過程，與心衰的嚴(yán)重程度成正相關(guān)。心衰時(shí)血槳FIB和ET-l升高可進(jìn)一步加重其微循環(huán)障礙。實(shí)施例1有效成分為三七總皂苷，具有活血化瘀、通脈活絡(luò)之功。本研究顯示，實(shí)施例1可明顯降低血漿PAI，F(xiàn)IB，PLG和ET-I水平，與對(duì)照組比較差異顯著，這與既往報(bào)道相同；它可明顯升高tPA水平，但與對(duì)照組比較無顯著性差異。PAI下降減少了對(duì)tPA的抑制，從而有效地激活了PLG，進(jìn)而使FIB下降，通過反饋?zhàn)饔肞LG亦下降。隨著PAI，F(xiàn)IB和ET-l下降，與對(duì)照組相比，LVESV明顯下降(P<0.05)，LVEF明顯提高(P<0.05)，從而心功能得到明顯改善，總有效率明顯提高(P<0.05)。因此，實(shí)施例1治療充血性心力衰竭有明顯療效。具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實(shí)施例是用于說明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的簡單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。除非另有說明，本發(fā)明中的百分?jǐn)?shù)是重量百分?jǐn)?shù)(乙醇為體積百分比)，BV/h表示以樹脂體積為V計(jì)，B為倍數(shù)，溶液每小時(shí)的洗脫體積為樹脂體積BXV。實(shí)施例1:取三七粉碎成粗粉1000g，加65%乙醇7000ml提取7小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每1ml含0.5g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫，乙醇濃度在6小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%，流速4.5BV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.13(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物100mg，超濾，灌裝，冷凍干燥，制成實(shí)施例1粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷&為12.47%、人參皂苷Rgl為45.12%、人參皂苷Re為6.04%、人參皂苷Rl^為29.94%，以上四成份總量為93.57%，且Rb丄:Rgl為1.0:1.51。實(shí)施例2:取三七粉碎成粗粉1000g，加50%乙醇10000ml提取6小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.4g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫(乙醇濃度在5.5小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%)，流速5.OBV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.15(60°C)的清膏，干燥，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物50mg55mg，超濾，灌裝，制成實(shí)施例1注射液。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷&為11.54%、人參皂苷Rgl為45.26X、人參皂苷Re為5.06X、人參皂苷R^為31.26%，以上四成份總量為93.12%，且Rb丄:Rgl為1.0:1.45。實(shí)施例3:取三七粉碎成粗粉1000g，加75%乙醇7500ml提取8小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.6g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫(乙醇濃度在6.5小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%)，流速4.OBV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.16(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加針用活性炭0.30%(重量比)，80°C以下保溫?cái)嚢?0分鐘，濾過，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物150mg，冷凍干燥，分裝，制成實(shí)施例1粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷&為13.3%、人參皂苷Rgl為49.lX、人參皂苷Re為5.lX、人參皂苷Rbi為30.9%，以上四成份總量為98.4%，且Rb丄:Rgl為1.0:1.59。實(shí)施例4:取三七粉碎成粗粉1000g，加80%乙醇8000ml提取6小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.5g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫，乙醇濃度在6小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%，流速4.5BV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.13(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每1ml含固形物lOOmg，超濾，灌裝，冷凍干燥，制成實(shí)施例1粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷I^為10.1%、人參皂苷Rgl為37.4X、人參皂苷Re為4.7X、人參皂苷Rl^為36.17%，以上四成份總量為88.37%，且Rb丄:Rgl為1.0:1.03。實(shí)施例5:取三七粉碎成粗粉1000g，加85%乙醇8000ml提取8小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每1ml含0.5g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫，乙醇濃度在6小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%，流速4.5BV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.13(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物100mg，超濾，灌裝，冷凍干燥，制成實(shí)施例1粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷&為10.4%、人參皂苷Rgl為39.6X、人參皂苷Re為5.2X、人參皂苷Rl^為36.0%，以上四成份總量為91.2%，且Rbi:Rgl為1.0:1.10。實(shí)施例6:取三七粉碎成粗粉1000g，加75%乙醇8000ml提取7小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.5g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫，乙醇濃度在6小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%，流速4.5BV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.13(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物100mg，超濾，灌裝，冷凍干燥，制成實(shí)施例1粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷I^為13.1%、人參皂苷Rgl為41.21%、人參皂苷Re為4.9%、人參皂苷Rl^為34.23%，以上四成份總量為93.44%，且Rbi:Rgl為1.0:1.20。實(shí)施例7:取三七粉碎成粗粉1000g，加65%乙醇6000ml提取8小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.5g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫，乙醇濃度在6小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%，流速4.5BV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.12(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物100mg，超濾，灌裝，冷凍干燥，制成實(shí)施例1粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷&為9.77%、人參皂苷Rgl為44.89%、人參皂苷Re為4.41%、人參皂苷Rl^為26.01%，以上四成份總量為88.08%，且Rb丄:Rgl為1.0:1.73。實(shí)施例8:取三七粉碎成粗粉1000g，加90%乙醇10000ml提取9小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.5g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫，乙醇濃度在6小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%，流速4.5BV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.12(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物100mg，超濾，灌裝，冷凍干燥，制成實(shí)施例1粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷&為12.3%、人參皂苷Rgl為23.12X、人參皂苷Re為5.81X、人參皂苷Rbi為34.96%，以上四成份總量為76.19%，且Rbi:Rgl為1.0:0.66。實(shí)施例9:取三七粉碎成粗粉1000g，加85%乙醇9000ml提取10小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.5g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫，乙醇濃度在6小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%，流速4.5BV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.12(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物100mg，超濾，灌裝，冷凍干燥，制成實(shí)施例9粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷&為13.6%、人參皂苷Rgl為51.01X、人參皂苷Re為5.lX、人參皂苷Rbi為28.2%，以上四成份總量為97.91%，且Rb丄:Rgl為1.0:1.81。實(shí)施例10:取三七粉碎成粗粉1000g，加65%乙醇7500ml提取9小時(shí)，收集提取液，過濾，取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.5g生藥的溶液，用大孔樹脂柱(D類大孔樹脂、樹脂體積3000ml，樹脂床高與直徑比約為8)及氧化鋁吸附，用不同濃度的乙醇液進(jìn)行梯度洗脫，乙醇濃度在6小時(shí)內(nèi)由5%調(diào)整至95%，流速4.5BV/h，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至相對(duì)密度為1.13(60°C)的清膏，得三七總皂苷活性成份，加注射用水調(diào)節(jié)每lml含固形物100mg，超濾，灌裝，冷凍干燥，制成實(shí)施例10粉針劑。檢驗(yàn)結(jié)果上述提取物中各成份含量三七皂苷&為10.12%、人參皂苷Rgl為51.67X、人參皂苷Re為4.4X、人參皂苷Rl^為27.1%，以上四成份總量為93.29%，且Rb!:Rgl為1.0:1.91。權(quán)利要求三七植物在制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用。2.三七植物提取物在制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用。3.三七總皂苷在制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用。4.三七總皂苷在制備治療和/或預(yù)防心絞痛型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用。5.三七總皂苷在制備治療和/或預(yù)防心肌梗死型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用。6.三七總皂苷在制備治療和/或預(yù)防缺血性心肌病型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用。7.三七總皂苷在制備治療和/或預(yù)防心肌缺血引起的心力衰竭型冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用。8.—種三七總皂苷組合物在制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物的應(yīng)用，其特征在于所述三七總皂苷組合物中含有活性成份，該活性成份由三七提取的三七總皂苷活性成份組成，其中三七皂苷&含量大于8.0%、人參皂苷Rgl含量大于25%、人參皂苷Re含量大于4.0%、人參皂苷Rt^含量大于25%，且三七皂苷&、人參皂苷Rgl、人參皂苷Re與人參皂苷Rt^的總重量不低于活性成份總重量75%，所述組合物通過下述方法制備(1)取三七粉碎成粗粉1000g，加體積比為5-30倍的45-95X的乙醇8000ml提取0.5IO小時(shí)，收集提取液，過濾；(2)取濾液回收乙醇至無醇味，加水制成每lml含0.5g生藥的溶液；(3)溶液通過D型大孔樹脂柱吸附，用乙醇_水的混合液進(jìn)行梯度洗脫，流速按每小時(shí)樹脂體積的倍數(shù)計(jì)為4.5BV/h，洗脫液中乙醇濃度逐步由5%調(diào)整至95%，收集含乙醇濃度在30%以上至70%以下的洗脫液，棄去含乙醇濃度在30%至70%以外的洗脫液，65t:以下減壓回收溶劑并濃縮至在6(TC下相對(duì)密度為1.101.20的清膏，低溫干燥得三七總皂苷組合物。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于R^:Rgl為1.0:0.52.0。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于R^:Rgl為1.0:1.01.8。11.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于R^:R^為1.0:1.41.6。12.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于三七皂苷Rp人參皂苷Rgp人參皂苷Re與人參皂苷R^的總重量大于活性成份總重量的85%。13.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于三七皂苷Rp人參皂苷Rgp人參皂苷Re與人參皂苷R^的總重量大于活性成份總重量的90%。14.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于其中三七皂苷R1含量為8X15%、人參皂苷Rgl含量為35%52%、人參皂苷Re含量為4%10%、人參皂苷Rbl含量為25%40%15.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于步驟(1)中加入7倍的乙醇。16.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于步驟(1)中加入的乙醇濃度為65%。17.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于步驟(1)中提取時(shí)間為7小時(shí)。18.根據(jù)權(quán)利要求8-17所述的應(yīng)用，其特征在于其中的組合物可被制成注射液、注射用粉針劑、注射用凍干粉針劑、片劑、丸劑、散劑、顆粒劑、合劑、糖漿劑、膠囊劑或滴丸劑制劑。全文摘要本發(fā)明涉及三七、三七提取物、三七總皂苷以及三七總皂苷組合物的新用途，即在制備治療和/或預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化藥物方面的新用途。文檔編號(hào)A61K31/7028GK101697989SQ200910223950公開日2010年4月28日申請(qǐng)日期2009年11月20日優(yōu)先權(quán)日2009年11月20日發(fā)明者許淑清,趙學(xué)偉,陳明申請(qǐng)人:許淑清