專利名稱：：一種治療心腦血管病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥物組合物領(lǐng)域，具體涉及一種治療心腦血管病的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：心腦血管病是指由于腦血管破裂出血或形成血栓而引起的以腦缺血性損傷癥狀為主要臨床表現(xiàn)的疾病，又稱腦血管意外或腦卒中，俗稱為腦中風(fēng)。該病常見于中年以上人群的急性發(fā)作，其中70%80%的病人是由于腦動脈硬化等原因使腦動脈管腔狹窄，血流減少或完全阻塞，腦部血液循環(huán)障礙，腦組織受損而引生的一系列癥狀(如缺血性腦血管病)，嚴重者可發(fā)生意識障礙和肢體癱瘓，是目前造成人類死亡和殘疾的主要疾病。血栓的形成主要有三大要因，即血管壁、血流及血液的病理改變，臨床上動脈血栓幾乎均是在動脈硬化或動脈粥樣硬化的基礎(chǔ)上形成的。血液中存在凝固與抗凝固成分，纖溶與抑纖溶成分，當其出現(xiàn)失衡，就會造成已形成的血栓不溶解，持續(xù)存在。另外，心血管系統(tǒng)疾病及高血糖、高血脂癥均會導(dǎo)致血液粘度增高，加大血流阻力使血流緩慢，極易形成血栓。血栓形成導(dǎo)致血管栓塞，以致腦梗塞、心肌梗塞、冠心病、心絞痛等。針對心腦血管病的形成原因，現(xiàn)有的治療方法主要為溶栓療法及腦保護治療法，但血栓溶解，恢復(fù)組織器官血流的同時，將會不同程度的發(fā)生再灌注損傷，導(dǎo)致更嚴重的后果。而目前常用的西藥制劑主要是抗凝制劑(以阿斯匹林為代表)和促纖溶制劑(如各種纖溶酶，尿激酶，t-PA等)，中藥制劑雖然對心腦血管系統(tǒng)疾病有一定的療效，但僅對新鮮血栓有較好的療效，對陳舊性血栓尤其伴有后遺癥者，療效并不是很理想，并且均無法較好的解決溶栓同時所產(chǎn)生的再灌注損傷。銀杏葉為銀杏科植物銀杏Ginkgobiloba的葉，性味苦、澀、平，主要功能為活血化淤、通絡(luò)活絡(luò)。銀杏葉提取物被廣泛用于治療心腦血管疾病及其后遺癥等。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，銀杏葉提取物具有改善微循環(huán)及代謝，清除自由基和抗氧化作用，抗血小板活化因子，抗感染等作用。銀杏內(nèi)酯B(ginkgolideB，GB)是銀杏葉提取物的主要活性成分之一，是一類強特異性的血小板活化因子(PAF)拮抗劑，通過抑制PAF功能而抑制缺血所導(dǎo)致的各類異常炎性反應(yīng)及栓塞形成，抑制自由基的釋出，從而保護脊髓組織免受損傷。另外，研究表明，GB可能具有類似生長因子的作用，促進神經(jīng)細胞的自然生長，并且在許多病理情況下還能減輕神經(jīng)細胞的損傷和凋亡，發(fā)揮明顯的神經(jīng)保護作用。可見，銀杏內(nèi)酯B既能控制炎癥又可促進神經(jīng)再生。三七[Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen]始載于《本草綱目》，其主要有效成分為三七總皂苷，具有散瘀止血，消腫定痛的功效，可用于治療咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外傷出血、胸腹剌痛、跌腫痛等。隨著現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)研究的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)三七不僅具有良好的止血、活血化瘀、通脈活絡(luò)雙向藥理作用，還具有明顯的補血作用，能促進血液中紅細胞、白細胞、血小板等各類血液細胞分裂生長，增加數(shù)目，保持正常水平的作用，同時具有抗血栓、保護心肌和防止腦組織損傷以及擴血管、增加腦及冠脈血流量、降血脂、降血壓、鎮(zhèn)痛、抗炎、清除自由基等多種藥理作用。阿司匹林(Aspirin)又名乙酰水楊酸，是常用的歷史悠久的非甾體類抗炎藥，具有解熱鎮(zhèn)痛，消炎抗風(fēng)濕和抗血小板凝集作用，早期臨床用于頭痛、風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、和痛風(fēng)癥，后來臨床上拓展成用于心腦血管病一級預(yù)防的抗血小板藥物，同時對于心肌梗死和缺血性血管病的二級預(yù)防也有效。一般小劑量的阿司匹林可用于預(yù)防心腦血管病和短暫性缺血性疾病的發(fā)作，如腦血栓、冠心病、心肌梗死等。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種治療心腦血管病的藥物組合物，利用銀杏葉提取物、三七提取物和阿司匹林三者的協(xié)同作用，能有效改善腦梗塞、心肌梗塞后的心腦血管循環(huán)，擴張心腦血管，增加心腦血流量，同時能有效改善微循環(huán)，減輕腦梗塞，心肌梗塞后缺血再灌注引起的損傷?！N治療心腦血管病的藥物組合物，由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物0.1%99.8%、三七提取物0.1%99.8%和阿司匹林0.1%99.8%。為了達到更好地治療效果，優(yōu)選所述的治療心腦血管病的藥物組合物優(yōu)選由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物15%35%、三七提取物15%35%和阿司匹林30%70%;進一步優(yōu)選由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物15%、三七提取物15%和阿司匹林70%，或者由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物33.0%、三七提取物34.0%和阿司匹林33.0%，或者由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物26%、三七提取物26%和阿司匹林48%。所述的銀杏葉提取物中總黃酮的重量百分含量為24%90%，白果總內(nèi)酯的重量百分含量6%50%，總銀杏酸重量含量小于10卯m。所述的銀杏葉提取物可采用市售產(chǎn)品，也可自行制備，其制備方法可參照2005版《中華人民共和國藥典》中的記載，具體包括步驟取銀杏葉粉碎后用乙醇提取，提取液回收乙醇并濃縮后加于大孔吸附樹脂柱上，依次用水和乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，干燥，即得銀杏葉提取物。所述的三七提取物中三七總皂甙的重量百分含量為55%90%。所述的三七提取物可采用市售產(chǎn)品，也可自行制備，其制備方法，包括步驟取三七粉碎，用乙醇提取，提取液回收乙醇后加水，冷藏24小時，濾過，濾液加于用乙醇浸泡處理好的大孔吸附樹脂柱上，依次用水和乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，干燥，即得三七提取物。所述的治療心腦血管病的藥物組合物可以按照現(xiàn)有技術(shù)制備成片劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、栓劑等現(xiàn)有藥物劑型中的任何一種劑型。所述的阿司匹林符合《中華人民共和國藥典》中阿司匹林的質(zhì)量標準即可。本發(fā)明具有如下有益效果與現(xiàn)有的治療心腦血管病的藥物相比，本發(fā)明的藥物組合物利用銀杏葉提取物、三七提取物和阿司匹林三者的協(xié)同作用，具體來講，是將銀杏葉中的總黃酮、白果總內(nèi)酯等成分，三七中的三七總皂甙等成分加阿司匹林能充分發(fā)揮中藥復(fù)方多途徑，多靶點的協(xié)同作用，能有效改善腦梗塞、心肌梗塞后心腦血管循環(huán)，擴張心腦血管，增加心腦血流量，同時能有效改善微循環(huán)，減輕腦梗塞，心肌梗塞后缺血再灌注引起的更嚴重的損傷。經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)，在服用劑量下降一倍的情況下，本發(fā)明的藥物組合物比單用同劑量銀杏葉提取物、單用同劑量三七提取物、單用同劑量阿司匹林、單用同劑量銀杏葉提取物加三七提取物、單用同劑量銀杏葉提取物加阿司匹林或單用同劑量三七提取物加阿司匹林對腦缺血腦梗塞的治療效果均有很大提高，可見，將銀杏葉提取物、三七提取物和阿司匹林配伍合用有很好的協(xié)同作用，療效得到顯著提高。另外，本發(fā)明的藥物組合物在增強療效的同時，服用劑量大大減少，降低了藥物的毒性，增加了用藥的安全性。具體實施例方式實施例16取干燥的銀杏葉粉碎后用乙醇提取，提取液回收乙醇并濃縮后加于用乙醇浸泡處理過的大孔吸附樹脂柱上，依次用水和乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，干燥，即得銀杏葉提取物。經(jīng)檢測，銀杏葉提取物中總黃酮的重量百分含量為26%，白果總內(nèi)酯的重量百分含量6.5%，總銀杏酸的重量百分含量為5ppm。取三七粉碎，加乙醇，回流提取3次，每次2小時，提取液回收乙醇至無乙醇味，加水至每毫升相當于2克原藥材，冷藏24小時，濾過，濾液加于已用乙醇浸泡處理好的大孔吸附樹脂柱上，處理過程為用乙醇浸泡48小時，裝柱，用乙醇洗脫至洗脫液加5倍量水不出現(xiàn)混濁。依次用水和乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，干燥，即得三七提取物。經(jīng)檢測，三七總皂甙的重量百分含量為58%。將上述銀杏葉提取物、三七提取物和阿司匹林按表1中的配比混合均勻后即得治療心腦血管病的藥物組合物。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>銀杏葉提取物、三七提取物和阿司匹林配伍對大鼠腦缺血再灌注保護作用的實驗研究根據(jù)腦中風(fēng)中藥新藥藥效學(xué)研究指南原則的要求，需要進行與功能主治有關(guān)的主要藥效學(xué)試驗以大鼠大腦局灶性腦缺血損傷再灌注模型，確定銀杏葉提取物、三七提取物和阿司匹林組分的最佳配伍劑量，證明其對心腦血管病的治療協(xié)同作用。1.材料1.l試驗動物SD大鼠，清潔級，雄性，體重240士20g，由浙江省實驗動物中心提供，合格證號SCXK(浙)2008-0033。1.2藥品與試劑1號組銀杏葉提取物，按SD大鼠的服用劑量分為30.0mg/kg、15.0mg/kg，2個劑量組；2號組三七提取物，按SD大鼠的服用劑量分為30.0mg/kg、15.0mg/kg，2個劑量組；3號組阿司匹林，按SD大鼠的服用劑量分為15.0mg/kg、7.5mg/kg，2個劑量組；4號組銀杏葉提取物和三七提取物(重量比為1:1)的混合物，按SD大鼠的服用劑量設(shè)置15mg/kg，1個劑量組；5號組銀杏葉提取物和阿司匹林(重量比為l:1)的混合物，按SD大鼠的服用劑量設(shè)置15mg/kg，1個劑量組；6號組三七提取物和阿司匹林(重量比為l:1)的混合物，按SD大鼠的服用劑量設(shè)置15mg/kg，1個劑量組；實施例1組取實施例1制備的藥物組合物，按SD大鼠的服用劑量設(shè)置15mg/kg1個劑量組；實施例2組取實施例2制備的藥物組合物，按SD大鼠的服用劑量設(shè)置15mg/kg1個劑量組；實施例3組取實施例3制備的藥物組合物，按SD大鼠的服用劑量設(shè)置15mg/kg1個劑量組。紅四氮唑(TTC)，華東師范大學(xué)化工廠生產(chǎn)，批號20081217;K2HP04，成都東金化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，批號20070615;水合氯醛，國藥集團化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，批號T20070919;甲醛，衢州巨化試劑有限公司生產(chǎn)，批號20080401;碘伏消毒液，南昌健寶防疫用品廠生產(chǎn)，批號20080908。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供，批號分別為20090924，20090924。1.3實驗儀器HZ-9212S恒溫振蕩器，太倉市科教器材廠產(chǎn)品；PB1501-L型電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司產(chǎn)品；AL104型電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司產(chǎn)品。2.試驗方法參照新藥藥理學(xué)研究方法(呂秋軍主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2007，239-240)和常用醫(yī)藥研究動物模型(苗明三、朱飛鵬主編，人民衛(wèi)生出版社，2007，111-112)。2.1分組與給藥將SD大鼠隨機分為14組，每組10只即假手術(shù)組，模型組，1號組30mg/kg組、1號組15mg/kg，2號組30mg/kg、2號組15mg/kg，3號組15mg/kg、3號組7.5mg/kg，4號組，5號組，6號組，實施例1組，實施例2組及實施例3組。灌胃給藥，每日一次，給藥3次后lh造模，造模后再給藥一次，假手術(shù)組與模型組給予等容量的蒸餾水。62.2大腦中動脈缺血再灌模型(MCA0)的制備大鼠腹腔注射10%的水合氯醛溶液進行麻醉(350mg/kg)，仰臥固定，分離右側(cè)頸總動脈(CCA)、頸內(nèi)動脈(ICA)及頸外動脈(ECA)，結(jié)扎ECA與CCA，用動脈夾夾閉ICA遠心端后，迅速于距ECA與ICA分叉處約0.5cm的頸總動脈處作一切口，插入一端加熱成光滑球形的尼龍線，插入深度為18±0.5mm，實現(xiàn)大腦中動脈阻塞導(dǎo)致腦缺血。結(jié)扎入口處，尼龍線外留約lcm，縫合皮膚，2小時后輕輕提拉所留線頭至略有阻力以實現(xiàn)大腦中動脈再灌注，即為腦缺血再灌模型(MCAO)組，簡稱模型組。假手術(shù)組除了只結(jié)扎右側(cè)CCA，其余操作均同模型組。2.3神經(jīng)功能評分(即神經(jīng)癥狀分值)于術(shù)后6h對大鼠行為障礙進行評分0分代表無神經(jīng)功能缺失，活動正常；1分代表不能完全伸展左側(cè)前爪；2分代表爬行時出現(xiàn)左側(cè)轉(zhuǎn)圈(追尾征)；3分代表行走時身體向右側(cè)到；4分代表不能行走，意識喪失。2.4腦缺血梗死面積測定于術(shù)后24h斷頭取腦，去掉嗅球、小腦和低位腦干后，取手術(shù)側(cè)大腦，在fC冠狀切為5片，并迅速將腦片置于TTC染液中，37t:避光溫孵30分鐘，取出后置于10%甲醛液中避光保存24h。經(jīng)染色后非梗死區(qū)為玫瑰紅色，梗死區(qū)為白色。將白色組織仔細挖下稱重，以梗死組織重量占全腦重量的百分比作為腦梗死范圍，計算公式如下腦梗死范圍(％)-(、g)x畫全腦篁重(g)2.5血清S0D、MDA測定術(shù)后24小時大鼠麻醉腹主動脈取血，3500r/min離心10min后，取上清30yL，按SOD測定試劑盒說明測定血清SOD活力。取上清0.lmL，按MDA測定試劑盒說明測定血清MDA含量。3.統(tǒng)計數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件進行分析，用；±s表示，組間比較用t檢驗進行顯著性檢驗。4.結(jié)果4.1對腦缺血再灌模型(MCAO)大鼠腦梗死范圍及神經(jīng)癥狀的影響術(shù)后6h，假手術(shù)組未見行為異常改變，MCAO模型組大鼠在術(shù)后6h，出現(xiàn)偏癱樣癥狀，主要表現(xiàn)為出現(xiàn)同側(cè)霍納綜合(Horner)征、自發(fā)癱瘓側(cè)旋轉(zhuǎn)、提起尾巴對側(cè)前肢無力屈曲、反抗力減弱等。給藥各組術(shù)后6h其神經(jīng)癥狀與模型組比較差異顯著，均有不同程度的改善，其中3號30.Omg/kg組(P<0.01)、3號15.Omg/kg組、實施例1組、實施例2組及實施例3組(P<0.05)與模型組比較差異顯著，各組癥狀結(jié)果見表2。術(shù)后24h，模型組大鼠腦組織梗塞灶(即腦梗死范圍)可達全腦重量的19.1%，與模型組相比，1號組30mg/kg、實施例1組，實施例2組及實施例3組對降低大鼠腦梗塞程度有非常顯著性差異(P<0.01)，1號組15mg/kg;3號組15.0mg/kg、7.5mg/kg;5號組、6號組對大鼠腦梗塞程度減輕具有顯著性差異(P<0.05)，結(jié)果見表2。表2對MCAO大鼠腦梗死范圍及神經(jīng)癥狀的影響G±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與模型組比較，**表示P<0.01，*表示P<0.05。結(jié)論從表2可看出，實施例1組、實施例2組和實施例3組的大鼠在服用劑量較小的前提下腦梗死范圍明顯較小，相比其它各組，其大鼠梗塞程度減輕的效果最為理想，且與模型組相比均具有顯著差異(P<0.01)。同時，從實施例1組、實施例2組和實施例3組大鼠的神經(jīng)癥狀分值也可以看出，本發(fā)明的藥物組合物對于減輕心腦血管病癥狀有很好的效果。4.2對腦缺血再灌模型(MCA0)大鼠血清S0D活力及MDA含量的影響模型組血清SOD活力與假手術(shù)組比較其活性明顯降低(P<0.05)，其他各給藥劑量組與模型組比較SOD活力明顯升高(P〈0.01或P〈0.05)。本次試驗?zāi)Ｐ徒M大鼠血清MDA含量與假手術(shù)組比較無明顯差異，其他各給藥組除4號組外與模型組比較無明顯差異，結(jié)果見表3。_表3對MCA0大鼠血清S0D活力及MDA含量的影響G±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注與模型組比較，**表示P<0.01，*表示P<0.05。5.結(jié)論上述試驗結(jié)果表明本發(fā)明的藥物組合物，在服用劑量減小一倍的情況下，比單用同劑量銀杏葉提取物、單用同劑量三七提取物、單用同劑量阿司匹林、單用同劑量銀杏葉提取物加三七提取物、單用同劑量銀杏葉提取物加阿司匹林或單用同劑量三七提取物加阿司匹林對減輕腦缺血再灌模型(MCA0)大鼠神經(jīng)癥狀損傷，減少腦梗死面積范圍，提高血清S0D活力，對腦缺血有更好的保護作用。由此可見，將銀杏葉提取物、三七提取物和阿司匹林配伍合用有很好的協(xié)同作用，對腦缺血腦梗塞的治療效果均有顯著提高。另外，本發(fā)明的藥物組合物在增強療效的同時，服用劑量大大減少，降低了藥物的毒性，增加了用藥的安全性。權(quán)利要求一種治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物0.1％～99.8％、三七提取物0.1％～99.8％和阿司匹林0.1％～99.8％。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物15%35%、三七提取物15%35%和阿司匹林30%70%。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物15%、三七提取物15%和阿司匹林70%。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物33.0%、三七提取物34.0%和阿司匹林33.0%。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物26%、三七提取物26%和阿司匹林48%。6.根據(jù)權(quán)利要求15任一項所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，所述的銀杏葉提取物中總黃酮的重量百分含量為24%90%，白果總內(nèi)酯的重量百分含量6%50%，總銀杏酸重量含量小于10卯m。7.根據(jù)權(quán)利要求15任一項所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，所述的三七提取物中三七總皂甙的重量百分含量為55%90%。8.根據(jù)權(quán)利要求15任一項所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，所述的三七提取物由三七粉碎后用乙醇提取，提取液回收乙醇并濃縮后加于大孔吸附樹脂柱上，依次用水和乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇后干燥制得。9.根據(jù)權(quán)利要求15任一項所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，所述的銀杏葉提取物由銀杏葉粉碎后用乙醇提取，提取液回收乙醇并濃縮后加于大孔吸附樹脂柱上，依次用水和乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇后干燥制得。10.根據(jù)權(quán)利要求15任一項所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物制成片劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、栓劑中的任何一種劑型。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療心腦血管病的藥物組合物，由以下重量百分比的原料組成銀杏葉提取物0.1％～99.8％、三七提取物0.1％～99.8％和阿司匹林0.1％～99.8％。該藥物組合物利用銀杏葉提取物、三七提取物和阿司匹林三者的協(xié)同作用，能有效改善腦梗塞、心肌梗塞后心腦血管循環(huán)，擴張心腦血管，增加心腦血流量，同時能有效改善微循環(huán)，減輕腦梗塞，心肌梗塞后缺血再灌注引起的損傷。文檔編號A61K36/258GK101708204SQ20091015398公開日2010年5月19日申請日期2009年11月30日優(yōu)先權(quán)日2009年11月30日發(fā)明者蔡鐘欽申請人:浙江省中醫(yī)藥研究院