專(zhuān)利名稱(chēng)：九州蟲(chóng)草鎮(zhèn)咳口服液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鎮(zhèn)咳口服液的制備方法。
背景技術(shù)：
咳嗽是影響人們健康的常見(jiàn)病和多發(fā)病，是一種呼吸道受到刺激(如炎癥， 異物)后，發(fā)出沖動(dòng)傳入延髓咳嗽中樞引起的生理反射?？人阅苡绊憘€(gè)人和周邊 人群休息和健康，使人產(chǎn)生煩躁、焦慮的等不良情緒，如不及時(shí)治療，會(huì)加重病 癥的發(fā)展或產(chǎn)生其他并發(fā)癥?，F(xiàn)有的鎮(zhèn)咳口服液有些效果不明顯且有副作用，有 時(shí)會(huì)使病癥復(fù)發(fā)。
為制備一種便捷顯效的鎮(zhèn)咳產(chǎn)品，選用具有鎮(zhèn)咳作用的九州蟲(chóng)草和四葉參進(jìn) 行組合發(fā)酵，利用發(fā)酵液的提取物進(jìn)行動(dòng)物的鎮(zhèn)咳試驗(yàn)，取得了很好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

發(fā)明內(nèi)容
為解決以上存在的問(wèn)題，本發(fā)明選用具有鎮(zhèn)咳作用的九州蟲(chóng)草和四葉參進(jìn)行 組合發(fā)酵，提供了一種九州蟲(chóng)草鎮(zhèn)咳口服液的制備方法，其所采取的技術(shù)方案是 該制備方法包括以下方法步驟
(1) 發(fā)酵液制備
首先取四葉參干粉30-50g，加蒸餾水1000-1500ml，煮沸后保持100°C 30-40min，濾出煎液備用，棄殘?jiān)?；然后取馬鈴薯800-1200g，切片后加 4000-5000ml蒸餾水，煮沸后保持100°C 4-8min，濾出煎液備用，隨后將兩種煎 液合并,加入葡萄糖80-120g、蛋白胨20-30g、磷酸二氫鉀8-12g和硫酸鎂8-12g 后煮沸使其溶化，用蒸餾水補(bǔ)足發(fā)酵液4000-6000ml，最后裝瓶滅菌即得發(fā)酵液;
(2) 發(fā)酵培養(yǎng)
將上述發(fā)酵液按100ml/瓶量裝入250ml三角燒瓶?jī)?nèi)，高壓滅菌冷卻后，無(wú)菌 條件下接入蟲(chóng)草菌種，置轉(zhuǎn)速為125-160r/min、 22。C-26。C條件下的恒溫?fù)u床中 培養(yǎng)72h;(3) 口服液制備
收集培養(yǎng)完畢的發(fā)酵產(chǎn)物，經(jīng)80-10(TC水浴加熱2-4h處理后，在離心機(jī) 5000r/min轉(zhuǎn)速下，離心20min，取上清液，減壓濃縮至原體積的1/4-1/6，冷卻 后添加占濃縮液體積5-10%的蜂蜜，混勻后灌裝到10ml的小瓶中封口滅菌，即得 該口服液。
九州蟲(chóng)草(CarayceA9 ^riAs/ we/ w's Kobayasi)是野生于泰山海拔750min 的麻櫟樹(shù)下的一種蟲(chóng)草。具有益肺腎、補(bǔ)精髓、止咳化痰等功能?？捎糜谔碉嬁取?久病體虛、腫瘤、哮喘、糖尿病、高血壓、神經(jīng)衰弱等多種疾病。
四葉參(Cot/o/ o/ w^ 7朋ceoJWa Benth. etHook. f〉為桔?？泣h參屬植物，又 名輪葉黨參、山海螺等。本品有補(bǔ)氣通乳、養(yǎng)陰潤(rùn)肺、清熱解毒、消腫排膿等作 用。民間以其根入藥，主要用于益氣體虛、肺燥干咳等癥的治療。
本發(fā)明以藥食兩用的四葉參為培養(yǎng)組分進(jìn)行九州蟲(chóng)草的組合發(fā)酵，工藝簡(jiǎn) 單，對(duì)人體安全無(wú)害，發(fā)酵產(chǎn)品止咳效果明顯，有很高的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步描述 實(shí)施例1:
九州蟲(chóng)草鎮(zhèn)咳口服液制備包括以下方法步驟
(1) 發(fā)酵液制備
首先取四葉參干粉40g，加蒸餾水1200ml，煮沸后保持100。C40min，濾出煎 液備用，棄殘?jiān)?，然后取馬鈴薯1000g，切片后加4000ml蒸餾水，煮沸后保持 100。C5min，濾出煎液備用，隨后將兩種煎液合并,加入葡萄糖100g、蛋白胨25g、 磷酸二氫鉀10g和硫酸鎂10g后煮沸，使其溶化后用蒸餾水補(bǔ)足5000ml，然后裝 瓶滅菌即得發(fā)酵液；
(2) 發(fā)酵培養(yǎng)
將上述發(fā)酵液按100ml/瓶量裝入三角燒瓶，高壓滅菌冷卻后，無(wú)菌接入蟲(chóng)草 菌種，置轉(zhuǎn)速為145r/min、 25匸溫度條件下的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)72h;
(3) 口服液制備收集培養(yǎng)完畢的發(fā)酵產(chǎn)物，經(jīng)IO(TC水浴加熱2h處理后，在離心機(jī)5000r/min 轉(zhuǎn)速下，離心20min，取上清液，減壓濃縮至原體積的1/5，冷卻后添加占濃縮液 體積10%的蜂蜜，混勻后灌裝到10ml的小瓶中封口滅菌，即得該口服液。
實(shí)施例2:
九州蟲(chóng)草鎮(zhèn)咳口服液制備包括以下方法步驟
(1) 發(fā)酵液制備
首先取四葉參干粉30g，加蒸餾水1000ml，煮沸后保持1001 30min，濾出煎 液備用，棄殘?jiān)?，然后取馬鈴薯800g，切片后加4000ml蒸餾水，煮沸后保持100°C 4min，濾出煎液備用，隨后將兩種煎液合并，加入葡萄糖80g、蛋白胨20g、磷酸 二氫鉀8g和硫酸鎂8g后煮沸，使其溶化后用蒸餾水補(bǔ)足4000ml，然后裝瓶滅菌 即得發(fā)酵液；
(2) 發(fā)酵培養(yǎng)
將上述發(fā)酵液按100ml/瓶量裝入三角燒瓶，高壓滅菌冷卻后，無(wú)菌接入蟲(chóng)草 菌種，置轉(zhuǎn)速為145r/min、 25'C溫度條件下的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)72h;
(3) 口服液制備
收集培養(yǎng)完畢的發(fā)酵產(chǎn)物，經(jīng)IO(TC水浴加熱2h處理后，在離心機(jī)5000r/min 轉(zhuǎn)速下，離心20min，取上清液，減壓濃縮至原體積的1/5，冷卻后添加占濃縮液 體積10%的蜂蜜，混勻后灌裝到10ml的小瓶中封口滅菌，即得該口服液。
實(shí)施例3:
九州蟲(chóng)草鎮(zhèn)咳口服液制備包括以下方法步驟
(1) 發(fā)酵液制備
首先取四葉參干粉50g，加蒸餾水1500ml，煮沸后保持100。C40min，濾出煎 液備用，棄殘?jiān)?，然后取馬鈴薯1200g，切片后加5000ml蒸餾水，煮沸后保持100t 8min，濾出煎液備用，隨后將兩種煎液合并，加入葡萄糖120g、蛋白胨30g、磷酸 二氫鉀12g和硫酸鎂12g后煮沸，使其溶化后用蒸餾水補(bǔ)足6000ml，然后裝瓶滅
菌即得發(fā)酵液；
(2) 發(fā)酵培養(yǎng)將上述發(fā)酵液按100ml/瓶量裝入三角燒瓶，高壓滅菌冷卻后，無(wú)菌接入蟲(chóng)草 菌種，置轉(zhuǎn)速為145r/min、 25。C溫度條件下的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)72h; (3) 口服液制備
收集培養(yǎng)完畢的發(fā)酵產(chǎn)物，經(jīng)10(TC水浴加熱2h處理后，在離心機(jī)5000r/min轉(zhuǎn) 速下，離心20min,取上清液，減壓濃縮至原體積的1/5，冷卻后添加占濃縮液體 積10%的蜂蜜，混勻后灌裝到10ml的小瓶中封口滅菌，即得該口服液。 鎮(zhèn)咳實(shí)驗(yàn)如下-
1.泰山蟲(chóng)草發(fā)酵產(chǎn)品的鎮(zhèn)咳試驗(yàn)
分組實(shí)驗(yàn)選取雌性成年小鼠(18 25g)，隨機(jī)分為五組，每組10只，依次 為空白組、高劑量組、低劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組。 給藥各組小鼠空腹24h后，按照表l灌胃給藥。
表1各組給藥情況
組別 灌胃劑量
空白組 給藥劑量0.4ml/10g
不添加四葉參發(fā)酵產(chǎn)品
藥基發(fā)酵低劑量組(Sl組)添給藥劑量0. 2ml / 10g 加四葉參發(fā)酵產(chǎn)品
藥基發(fā)酵高劑量組(S2組)添給藥劑量0.4ml / 10g 加四葉參發(fā)酵產(chǎn)品
陽(yáng)性對(duì)照組 給藥劑量0. 4ml/10g 滿(mǎn)山白止咳糖漿
陰性對(duì)照組 劑量0.4ml/10g 生理鹽水
弓l咳給藥后20min后，把用線(xiàn)系好的棉球懸吊于燒杯底部，膠泥固定，向 棉球中滴入1滴250mg/ml濃氨水溶液，把各組小鼠分別放入倒扣的燒杯內(nèi)，啟動(dòng) 秒表，觀察記錄各鼠咳嗽的潛伏期及2min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。
2.鎮(zhèn)咳試驗(yàn)結(jié)果表2鎮(zhèn)咳實(shí)驗(yàn)結(jié)果
組別咳嗽潛伏期(min)咳嗽次數(shù)/次
空白組21.89. 3
Sl組25.67.9
S2組38.25.8
陽(yáng)性對(duì)照組48. 36.3
陰性對(duì)照組15.911. 2
通過(guò)t-檢驗(yàn)，各組之間的關(guān)系如下表
表3統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果
考察項(xiàng)目SAKY,SJ2S2Y2KY2s2
咳嗽潛伏期P〉**P>*P>P>p〉
0. 050. 050. 050. 050. 05
咳嗽次數(shù)P>P>氺*術(shù)P>P>*氺
0. 050. 050. 050. 05
注K:空白組，SI:雙向發(fā)酵低劑量組，S2:雙向發(fā)酵高劑量組，Y1:陰性 對(duì)照組，Y2:陽(yáng)性對(duì)照組；"YiV，表示Yt組與Y2組相比較；**代0.01: *表示 代0.05。
該項(xiàng)研究表明，采用藥基發(fā)酵液的高劑量組(Sl組)、低劑量組(S2組)的 咳嗽潛伏期明顯長(zhǎng)于空白組和陰性對(duì)照組(代O.Ol),和陽(yáng)性對(duì)照組無(wú)明顯差異， 而咳嗽次數(shù)明顯低于空白組和陰性對(duì)照組(代O.Ol)，與陽(yáng)性對(duì)照組無(wú)明顯差異。 這說(shuō)明給藥組均具有較好的緩解小鼠咳嗽癥狀的作用，能使應(yīng)激小鼠咳嗽恢復(fù)為 正常。
高劑量組(Sl組)的咳嗽次數(shù)明顯低于低劑量組(S2組)的咳嗽次數(shù)，高劑 量組(Sl組)的鎮(zhèn)咳潛伏期明顯高于低劑量組(S2組)的咳嗽潛伏期，說(shuō)明且其 鎮(zhèn)咳作用與劑量呈正相關(guān)。
權(quán)利要求
1、一種九州蟲(chóng)草鎮(zhèn)咳口服液的制備方法，其特征在于包括以下方法步驟(1)發(fā)酵液制備首先取四葉參干粉30-50g，加蒸餾水1000-1500ml，煮沸后保持1000C30-40min，濾出煎液備用，棄殘?jiān)?；然后取馬鈴薯800-1200g，切片后加4000-5000ml蒸餾水，煮沸后保持1000C4-8min，濾出煎液備用，隨后將兩種煎液合并，加入葡萄糖80-120g、蛋白胨20-30g、磷酸二氫鉀8-12g和硫酸鎂8-12g后煮沸使其溶化，用蒸餾水補(bǔ)足發(fā)酵液4000-6000ml，最后裝瓶滅菌即得發(fā)酵液；(2)發(fā)酵培養(yǎng)將上述發(fā)酵液按100ml/瓶量裝入250ml三角燒瓶，高壓滅菌冷卻后，在無(wú)菌條件下接入九州蟲(chóng)草菌種，置轉(zhuǎn)速為145r/min、25℃溫度條件下的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)72h；(3)口服液制備收集培養(yǎng)完畢的發(fā)酵產(chǎn)物，經(jīng)100℃水浴加熱2h處理后，在離心機(jī)5000r/min轉(zhuǎn)速下，離心20min，取上清液，減壓濃縮至原體積的1/5，冷卻后添加占濃縮液體積10％的蜂蜜，混勻后灌裝于10ml的小瓶中封口滅菌，即得該口服液。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種九州蟲(chóng)草鎮(zhèn)咳口服液的制備方法，包括發(fā)酵液制備、發(fā)酵培養(yǎng)和口服液制備等方法步驟。本發(fā)明以藥食兩用的四葉參為培養(yǎng)組分進(jìn)行九州蟲(chóng)草的組合發(fā)酵，工藝簡(jiǎn)單，對(duì)人體安全無(wú)害，發(fā)酵產(chǎn)品止咳效果明顯，有很高的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61K9/00GK101507746SQ20091001455
公開(kāi)日2009年8月19日 申請(qǐng)日期2009年3月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月6日
發(fā)明者蘇延友, 郭明明 申請(qǐng)人:郭明明