專利名稱：：應(yīng)用磺化去氫松香酸二鈉鹽治療胃酸過多型消化性潰瘍和胃腸道炎癥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及已知的預(yù)防和治療消化性炎癥和潰瘍藥物，即磺化去氫松香酸及其鹽中的二鈉鹽，磺化去氫松香酸二鈉鹽用于治療胃酸過多型的胃腸道炎癥和消化性潰瘍新的治療應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：消化性潰瘍是常見多發(fā)病之一，其中以胃、十二指腸潰瘍病最為常見。消化性潰瘍主要病因是由于胃和十二指腸黏膜有損害作用的侵襲因素與黏膜自身防御因素之間失去平衡的結(jié)果。胃酸和胃蛋白酶是胃液的主要成分，是對胃和十二指腸黏膜有侵襲作用的主要因素。即所謂"無酸無潰瘍"。消化性潰瘍患者的平均基礎(chǔ)胃酸排出量和食物、五肽胃泌素等刺激后的酸排出量常大于正常人，十二指腸潰瘍患者的夜間胃酸分泌顯著高于正常人。胃酸分泌不正常及胃酸的存在是導(dǎo)致消化性潰瘍的基本因素。正常時胃酸并不損傷黏膜，主要因黏膜防御屏障阻止了H+的反彌散，只是在黏膜因某種情況發(fā)生病損后黏膜自身防御能力削弱的情況下，胃酸/胃蛋白本酶才起自身消化作用。胃酸分泌在正常范圍的消化性潰瘍患者，侵襲力即使沒有明顯的增加黏膜防衛(wèi)力減弱時也能產(chǎn)生潰瘍。而使黏膜防衛(wèi)力削弱的主要因素為幽門螺旋桿菌感染。由于幽門螺旋桿菌感染引起十二指腸球炎可破壞黏膜屏障，促進H+的反彌散，并進一步加強炎癥反應(yīng)，炎性細胞的溶酶和所產(chǎn)生的氧自由基，可加重損傷。同時幽門螺旋桿菌在胃竇的寄生并導(dǎo)致胃竇炎是胃潰瘍患者黏膜抵抗力削弱的重要因素，常同時伴有十二指腸內(nèi)容物的反流，加重了潰瘍。因此，消化性潰瘍治療主要是抗酸治療和根除幽門螺旋桿菌?？顾嶂委熤饕菧p少胃酸，減少胃酸的藥物主要為抗酸藥?？顾崴帪橐活惾鯄A藥物，口服后能與胃酸反應(yīng)，形成鹽和水，從而使胃液pH升高，胃液pH通常為1.5-2.5，應(yīng)用抗酸藥使胃酸保持pH在4以上，才能有效地緩解消化性潰瘍患者上腹疼痛，并促進潰瘍愈合。傳統(tǒng)的抗酸藥如可溶性抗酸藥，碳酸氫鈉，能很快溶解，并與胃酸迅速起反應(yīng)，從而能迅速止痛，但它們易于自小腸吸收，可導(dǎo)致堿中毒和鈉儲留；另一類為不溶性抗酸藥如碳酸鈣，口服后在胃內(nèi)滯留時間長，中和胃酸作用時間也較長，與胃酸反應(yīng)后，形成水和氯化鈣，但可引起高鈣血癥、胃酸反跳性升高及便秘等?？顾釀┦褂眠^多則易引起胃酸的過少，從而明顯影響胃蛋白酶的消化活性，引起消化不良；且pH值過高又可引起繼發(fā)性胃酸分泌過多潰瘍面保護劑如生胃酮具有類腎上腺皮質(zhì)激素的作用，故可引起水鈉儲留，出現(xiàn)水腫、血壓升高、低血鉀等癥。各種抗生素雖然在體外對幽門螺旋桿菌都具有較強的抑制作用，但臨床上即使與質(zhì)子泵類藥物聯(lián)合使用效果也不十分理想。這是因為一方面大多數(shù)抗生素在胃酸環(huán)境中不穩(wěn)定，在胃粘膜表面很難達到有效的治療濃度;另一方面易產(chǎn)生耐藥性。因此，廣泛推薦的二聯(lián)、三聯(lián)療法也很難根除幽門螺旋桿菌的感染，且易復(fù)發(fā)。而一旦復(fù)發(fā)，則更會加速消化道癌變等其它疾病的發(fā)生。因此，繼續(xù)研究開發(fā)新型既有強抑酸效果又有優(yōu)良根除幽門螺旋桿菌的預(yù)防和治療胃酸過多型消化性潰瘍藥物十分必要。1982年美國專利局公開了田邊制藥株式會社的專利申請文件US4529602A，其中公開了磺化去氫松香酸單鈉鹽與二鈉鹽具有相同預(yù)防和治療消化性潰瘍的效果，并進一步指出磺基脫氫松香酸的單鈉鹽比二鈉鹽更有優(yōu)勢，因前者更不易吸濕和更穩(wěn)定。相繼有磺化去氫松香酸單鈉鹽藥物即磺化去氫松香酸鈉顆粒(蓋爽)上市，用于預(yù)防和治療消化性潰瘍，然而在其使用說明書中明確指出胃潰瘍活動期宜與胃酸抑制合用，因為磺化去氫松香酸單鈉鹽在水中呈弱酸性，在治療胃酸過多型消化性潰瘍時必需與胃酸抑制劑如法莫替丁，雷尼替丁等聯(lián)合用藥才能起到有效的治療作用。因此對胃酸過多型消化性潰瘍并不是目前最優(yōu)選藥物。2003年4月30日中國專利局公開了田邊制藥株式會社的專利申請文件，發(fā)明名稱為"預(yù)防或治療炎癥性腸道疾病的藥物"(申請?zhí)?0818150.0)，在權(quán)利要求l中提出了該藥物含有作為有效成分的化合物結(jié)構(gòu)式H3CCOOH或其藥學(xué)上可接受的鹽。在權(quán)利要求2中對權(quán)利要求1作了限定在藥學(xué)上可接受的鹽是磺基脫氫松香酸單鈉鹽。在說明書中指出，藥學(xué)上可接受的鹽中優(yōu)選的鹽是鈉鹽，尤其是單鈉鹽，并進一歩指出磺基脫氫松香酸的單鈉鹽比二鈉鹽更有優(yōu)勢，因前者更不易吸濕和更穩(wěn)定。由此可知，上述申請保護范圍很寬，在治療炎癥類腸道疾病時，凡是具有磺化去氫松香酸的鹽類都是屬于其保護范圍，但是如此寬廣的保護范圍中，能得到說明書支持的僅是磺基脫氫松香酸單鈉鹽，至于磺基脫氫松香酸的其它鹽類沒有得到說明書的支持，它們的藥理作用、臨床應(yīng)用情況如何，還值得進一步研究。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的為提供一種療效高、見效快、安全性高的防治胃酸過多型消化道炎癥和消化性潰瘍的藥物磺化去氫松香酸二鈉。實現(xiàn)上述發(fā)明的技術(shù)方案如下磺化去氫松香酸二鈉在醫(yī)藥上的應(yīng)用是用于防治胃酸過多型胃潰瘍、急性胃炎、慢性胃炎急性發(fā)作、腸炎、十二指腸潰瘍等的藥物。給藥時采用口服或非口服藥，口服給藥的制劑形式有片劑、膠囊、散劑、顆粒劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑等劑型，在各劑型中加入藥學(xué)上可接受的相應(yīng)的輔料及佐劑?；腔渌上闼岫c的分子結(jié)構(gòu)式為其中，R=2Nan=0藥學(xué)研究、藥效學(xué)研究、毒理學(xué)研究、實施例。本發(fā)明藥物磺化去氫松香酸二鈉顆粒和磺化去氫松香酸單鈉顆粒體外制酸效果比較研究比較磺化去氫松香酸二鈉顆粒和磺化去氫松香酸單鈉顆粒的酸堿度和消耗人工胃液(0.lmol/L鹽酸)的量，以此確定二者用于胃酸過多所致的胃潰瘍時的制酸能力。測定磺化去氫松香酸二鈉顆粒和磺化去氫松香酸單鈉顆粒的原始pH值，再逐次加入等量0.1mol/L的鹽酸混勻后測定pH值?；腔渌上闼岫c顆粒浙江愛生藥業(yè)有限公司2.0g/袋(含磺化去氫松香酸二鈉l.Og)，一次一袋，一日兩次；方法:1、樣磺化去氫松香酸單鈉顆粒田邊制藥株氏會社1.5g/袋(含磺化去氫松香酸單鈉1.0g),一次一袋，一日兩次。2、制備磺化去氫松香酸二鈉顆粒2袋加新沸冷蒸餾水40ml溶解(l#3.9934g，2#4.0777g);磺化去氫松香酸單鈉顆粒2袋加新沸冷蒸餾水40ml溶解(3#3.0009g，4#3.0252g);O.lmol/L鹽酸取濃鹽酸9ml加蒸餾水稀釋至1000ml即得。3、儀器校正儀器型號pHS-3C型酸度計環(huán)境溫度26°C標(biāo)準(zhǔn)緩沖液鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(PH4.00)磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(pH6.86)三、結(jié)果(見表l)表1磺化去氫松香酸單鈉和磺化去氫松香酸二鈉對人工胃液酸度的影響(初步試驗)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>磺化去氫松香酸二鈉顆粒在O.lmol/L鹽酸加入量為31m:至41ml之間、磺化去氫松香酸單鈉顆在0.1mo/L鹽酸加入量為2ml至4ml之間pH值有一個突變，說明其存在一個中和反應(yīng)的終點。于是再次進行試驗，以少量多次滴加的方法來測定0.1mol/L鹽酸加入量與pH值之間的關(guān)系，最終確定其精確的反應(yīng)終點。以磺化去氫松香酸二鈉和單鈉鹽分別進行對人工胃液酸度的影響試驗方法同上。樣品磺化去氫松香酸二鈉顆粒l斜.0838g2#3.9987g磺化去氫松香酸單鈉顆粒3#3.0099g4#3.0131g結(jié)果見表2、表3。表2磺化去氫松香酸二鈉對人工胃液酸度的影響序號每次加0.1N鹽酸量(ml)累計加入鹽酸量(ml)1#2#pH值pH變化值pH值pH變化值1006.196.17225.020.05.330.865.310.8635.030.04.930.404.860.4541.031.04.760.174.690.170.2031.204.740.024.670.0260.2031.404.700.044.610.0670.2031.604.630.074.560.0580.2031.804.610.024.540.0290.2032.004.580.034.500.04100.2032.204.540.044.460.04110.5032.704.430.114.350.11120.5033.204.330.104.240.11130.5033.704.220.114.110.13140.5034.204.090.133.980.13150.5034.703.950.153.830.15160.5035.203.800.153.700.13170.5035.703.670.133.550.15<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從表3分析，對于磺化去氫松香酸單鈉顆粒溶液，當(dāng)累計加入的鹽酸量達到3.00~4.251111時，pH值開始發(fā)生急劇下降，最大pH值下降達到0.53，當(dāng)達到4.75ml時，pH值下降趨于平緩，因此，可以判定終點應(yīng)在4.251111左右，此時溶液pH值為2.732.80。為使有效地緩解消化性潰瘍患者上腹疼痛，并促進潰瘍愈，胃酸PH必需保持在4以上，由表3可看出，使胃酸保持PH在4以上，累計加入鹽酸量僅為3.00ml,即單鈉鹽只能中和3.00ml胃酸。從表2分析，對磺化去氫松香酸二鈉顆粒溶液，在加入鹽酸的整個過程中，并未出現(xiàn)pH值的急劇下降點，各點測得的pH值最大下降值不超過0.15,因此，證明磺化去氫松香酸二鈉顆粒溶液具有較強的緩沖能力。當(dāng)pH值達到磺化去氫松香酸單鈉顆粒溶液終點的2.732.80時，所消耗的人工胃液達40.70ml，相當(dāng)于單鈉的9.57倍(約10倍)。為使胃酸保持PH在4以上，累計加入鹽酸量為34.20ml，相當(dāng)于單鈉的ll倍。四、結(jié)論磺化去氫松香酸二鈉顆粒溶液中和人工胃液的終點為pH值2.73~2.80，消耗人工胃液為4.25ml，但磺化去氫松香酸二鈉顆粒溶液在中和人工胃液的過程中，沒有出現(xiàn)明顯的終點，當(dāng)其pH值達到磺化去氫松香酸單鈉溶的終點pH值時，所消耗的人工胃液達40.70ml，約10倍于磺化去氫松香酸單鈉顆粒溶液所消耗的人工胃液量。為保持胃酸PH在4以上，雙鈉所消耗的人工胃液達34.20ml，單鈉僅為3.00ml，雙鈉約單鈉的11倍。因此，磺化去氫松香酸二鈉顆粒較磺化去氫松香酸單鈉顆粒，具有更加明顯的制酸能力。五、討論a)在制備樣品溶液時，磺化去氫松香酸二鈉顆粒較易溶解于水，磺化去氫松香酸單鈉顆粒較難溶于水；磺化去氫松香酸二鈉顆粒溶液呈透明狀液體，磺化去氫松香酸單鈉顆粒溶液呈乳白色混懸液。b)磺化去氫松香酸二鈉顆粒溶液pH值6.2，磺化去氫松香酸單鈉顆粒溶液pH值5.0，前者比后者pH值高約1.2，前者呈近中性，后者呈弱酸性。因此，在制酸力方面，磺化去氫松香酸二鈉顆粒比磺化去氫松香酸單鈉顆粒具有先天的優(yōu)勢，當(dāng)pH值達到磺化去氫松香酸單鈉顆粒溶液本身的pH值時，磺化去氫松香酸二鈉顆粒溶液可消耗人工胃液30ml左右，相當(dāng)于磺化去氫松香酸單鈉顆粒中和胃酸達到終點時消耗的人工胃液量的7倍。c)磺化去氫松香酸二鈉顆粒在中和酸的整個過程中pH值變化趨勢是平緩的，對胃作用較溫和；而磺化去氫松香酸單鈉顆粒在中和胃酸過程中，其中和胃酸量僅4ml左右，溶液很快呈強酸性環(huán)境。d)正常胃液pH值為1.52.5，當(dāng)pH值為4.0以上時，才能有效緩解消化性潰瘍患者上腹疼痛，并促進潰瘍愈合，正?？崭?2小時后胃液量為3050ml?；腔渌上闼岫c顆粒每次服用量可以中和人工胃液約30ml左右，使其pH保持在4以上，即能有效緩解消化性潰瘍患者上腹疼痛，并促進潰瘍愈合。而單鈉保持PH在4以上，僅能中和3ml胃酸。在治療消化性潰瘍時，單鈉必須與胃酸抑制劑聯(lián)合用藥才能有效緩解患者上腹疼痛，而用雙鈉并不需加任何抗酸藥，其自身就有很強的抗酸能力。綜上實驗研究所述，磺化去氫松香酸二鈉顆粒比磺化去氫松香酸單鈉顆粒能更好地中和胃酸，從而保護胃組織，用于胃酸過多引起的胃炎、胃潰瘍，必將發(fā)揮更加優(yōu)異的臨床療效。本發(fā)明藥物磺化去氫松香酸二鈉和磺化去氫松香酸單鈉溶出度比較研究一、磺化去氫松香酸單鈉鹽和二鈉鹽在人工胃液中的溶出度測定1.溶出介質(zhì)人工胃液(稀鹽酸16.4ml加水約800ml，胃蛋白酶10g搖勻后，加水稀釋成1000ml，即得。)2.其他條件900ml，槳法，50轉(zhuǎn)/分鐘，37.(TC，751GW分光光度計檢測波長270nm。3.對照磺化去氫松香酸二鈉11.5mg加人工胃液定溶至10ml，再加0.lmol/L的NaOH至50mL4.樣品-A:磺化去氫松香酸單鈉顆粒(1.5g/袋，含磺化去氫松香酸單鈉l.Og)。取20ml過濾取續(xù)濾液5ml，加0.lmol/L的NaOH定溶至25ral。B:磺化去氫松香酸二鈉顆粒(2.0g/袋，含磺化去氫松香酸二鈉1.0g)。取20ml過濾取續(xù)濾液5ml，加0.lmol/L的NaOH定溶至25ml。5.試驗結(jié)果見下表4，表5表4磺化去氫松香酸單鈉顆粒在人工胃液溶出度(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表5磺化去氫松香酸二鈉顆粒在人工胃液溶出度(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由上表可以看出，磺化去氫松香酸單鈉顆粒在人工胃液中5mins溶出55.8%，10mins溶出72.5%，20mins溶出94.2%,30mins溶出98.7%，45mins完全溶出，其溶出過程比較緩慢。而磺化去氫松香酸二鈉顆粒人工胃液中5mins即溶出95.2%,10mins溶出98.3%，20mins完全溶出，其溶出過程非常迅速，5mim內(nèi)即有絕大部分溶質(zhì)溶出，溶解速度快使其能與胃酸迅速反應(yīng)，從而能迅速止痛。因此其在胃內(nèi)發(fā)揮療效非常迅速。二、磺化去氫松香酸單鈉鹽和二鈉鹽在人工腸液中的溶出度測定1、溶出介質(zhì)人工腸液(磷酸二氫鉀6.8g，加水500ml使溶解，用0.4%的NaOH調(diào)pH至6.8;另取胰酶10g，加水適量使溶解；將兩液混合后，加水稀釋成1000ml，即得。)2、其他條件卯Oml，槳法，50轉(zhuǎn)/分鐘，37.0°C，75IGW分光光度計檢測波長270nm。3、對照磺化去氫松香酸二鈉11.3mg加人工腸液定溶至10ml，再加O.lmol/L的NaOH至50ml。4、樣品A:磺化去氫松香酸單鈉顆粒(1.5g/袋，含磺化去氫松香酸單鈉l.Og)。取20ml過濾取續(xù)濾液5ml，加O.lmol/L的NaOH定溶至25ml。B:磺化去氫松香酸二鈉顆粒(2.0gZ袋，含磺化去氫松香酸二鈉l.Og)。取20ml過濾取續(xù)濾液5ml,力nO.lmol/L的NaOH定溶至25ml。5、試驗結(jié)果結(jié)果見下表6、表7表6磺化去氫松香酸單鈉顆粒在人工腸液中溶出度(％)編號1#2#3#4#5#6#平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差調(diào)整數(shù)累計溶L1樣品量g1.51611.51221.52491.53151.531.5161.52180.00815min78.782.674.978.777.274.677.7832.955387.488.389.887.589.991.689.083L64121.72920min90.790.692.892.190.491.991.4170.98273.70830min93.49693.794.597.889.794.1832.7365.7445min92.394.5969494.186.492.8833.38917.83360min95.793.793.7卯.790.791.2.92.6172.05959.897表7磺化去氫松香酸二鈉顆粒在人工腸液中溶出度(％)編號1#2#3#4#5#6#平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差調(diào)整數(shù)累計溶出樣品量g1.96551.94652.01592.03272.0172.03662.00240.03735min95.493.890.285.888.49290.9333.538790.10min95.895.294.285.488.893.892.24.1552.02194.20min95.293.291.287.888.492.491.3672.85214.0795.30min94929285.686.292.890.4333.5926.196.45min9493.491.288.889.292.491.52.16068.1199.60min92.2卯90.886.286.292.489.6332,80410.1499.由上表可以看出，磺化去氫松香酸單鈉顆粒在人工腸液中5mins溶出77.8%,10mins溶出90.8%，20mins溶出95.1%，30mins完全溶出，其溶出過程比較緩慢。而磺化去氫松香酸二鈉顆粒人工胃液中5mins即溶出90.9%，10mins溶出94.2%,45mins完全溶出，其溶出過程非常迅速，5mins內(nèi)即有絕大部分溶質(zhì)溶出，因此其在腸內(nèi)發(fā)揮療效迅速。三、結(jié)論與討論1、磺化去氫松香酸單鈉顆粒和磺化去氫松香酸二鈉顆粒在人工胃液中的溶出度試驗表明，前者溶出比較緩慢，5mins溶出55.8%,完全溶出需要45mins，后者溶出非常迅速，5mins溶出95.2%,10mins即基本完全溶出，20mins全部溶出。因此，磺化去氫松香酸二鈉鹽較單鈉鹽在胃內(nèi)的溶出速度更快，并與胃酸迅速起反應(yīng)，從而能迅速止痛，對胃炎、胃潰瘍發(fā)揮作用更迅速。2、磺化去氫松香酸單鈉顆粒和磺化去氫松香酸二鈉顆粒在人工腸液中的溶出度試驗表明，前者溶出比較緩慢，5mins溶出77.8%，完全溶出需要30mins，后者溶出非常迅速，5mins溶出90.9%，45mins全部溶出，且前者要達到后者5mins時的溶出度(約91%)需要雙倍的時間(10mins)。因此，磺化去氫松香酸二鈉鹽較單鈉鹽在腸內(nèi)的溶出速度更快，對腸炎、腸潰瘍發(fā)揮作用更迅速。本發(fā)明藥物的藥理毒理研究(-)本發(fā)明藥物磺化去氫松香酸二鈉和磺化去氫松香酸單鈉主要藥效學(xué)比較研究一、試驗內(nèi)容為考察磺化去氫松香酸二鈉(磺化去氫松香酸二鈉)對消化性潰瘍的預(yù)防和治療作用，以及對胃液分泌的影響，動物采用大鼠，選擇無水乙醇、幽門結(jié)扎、醋酸等胃潰瘍模型，以試藥的磺化去氫松香酸單鈉(磺化去氫松香酸鈉)作為陽性對照物，設(shè)計一系列劑量，觀察和比較試藥對胃粘膜的急性損傷、胃潰瘍、胃蛋白酶活性以及胃液酸度等的影響，評價其藥效學(xué)。二、試驗材料2.1實驗?zāi)康膶υ囁幍目節(jié)兓钚赃M行全面評價和比較，判定量效反應(yīng)關(guān)系并求得半數(shù)有效量。2.2試驗材料藥物磺化去氫松香酸二鈉，為白色粉末，易溶于水，由中國醫(yī)藥研究丌發(fā)中心中藥一室提供，批號20000706G1(NIPWNN48066)、20000713G1(NIPWNN48068)臨用時用0.5%甲基纖維素鈉配制成所需濃度；磺化去氫松香酸鈉，由中國醫(yī)藥研究開發(fā)中心中藥一室提供，批號20000630E1(NIPWN12441)、20000705EI(NIPWN12641)臨用時用0.5%甲基纖維素鈉配制成所需濃度。動物二級Wistar大白鼠，雌雄各半，體重180-240g，由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所繁育場提供，許可證號SCXKll-00-0006。實驗前禁食24-48小時，不禁水。試劑37-40%甲醛溶液，北京化學(xué)試劑公司產(chǎn)品，批號00408，配制成1%的溶液應(yīng)用；無水乙醇，北京化工廠生產(chǎn)，批號991016;氫氧化鈉北京化工廠生產(chǎn)，批號20000127,配制成0.01NNaOH溶液應(yīng)用；濃鹽酸北京化工廠生產(chǎn)，批號980709,配制成0.05NHCI溶液應(yīng)用；Mett管若干，采用新鮮雞蛋清白制。儀器PJS-4型酸度計，上海雷磁儀器廠出品。CytopermHeraeus二氧化碳培養(yǎng)箱，德國7&口廣叩o三、試驗方法l.對幽門結(jié)扎胃液分泌的影響1.1參考文獻方法，取成年健康大鼠，體重180-220g，分別按性別、體重隨機分組。動物禁食48h，自由飲水。實驗時用乙醚將動物麻醉，打開腹腔，結(jié)扎幽門。術(shù)后立即i.g給藥，各組劑量分別為空白對照組(i.g0.5XMC)，磺化去氫松香酸二鈉(4各劑量組12.5mg/kg，25.0mg/kg，50.0mg/kg，100.0mg/kg)，陽性對照藥磺化去氫松香酸鈉(100.0mg/kg)，給藥量均為2.0ml/kg。給藥4h后，處死動物，解剖取胃(結(jié)扎幽門、賁門)，收集胃液(沿胃大彎剪開)，記錄總體積，并在2500rpm離心10min，記錄殘渣體積(ml)，計算胃液體積(ml)。取上清胃液進行胃酸和胃蛋白酶的測定。(1)胃液量和胃液酸度的測定胃液量(ml"胃液總體積(ml)—殘渣體積(ml)胃液酸度-pH(以酸度計測量)(2)胃液的酸濃度，總酸量的測定取上清胃液0.5ml，加蒸餾水20ml，搖勻，用酸度計滴定，滴定液為0.01N氫氧化鈉液，滴定至pl^7.0吋，記錄氫氧化鈉體積。胃液的酸濃度MEL=TAC+2X1000TAC相當(dāng)于用0.1N氫氧化鈉滴定時的體積。0.01N氫氧化鈉滴定0.5ml胃液轉(zhuǎn)化為0.1N氫氧化鈉滴定全部胃液所需氫氧化鈉的體積，即T，AC，計算方法V胃液量V0.5mlXO.OlNX~~~~TAO-0.1N(V0.5ml指用0.01N氫氧化鈉滴定0.5ml胃液的體積)胃液總酸量MEAH=MELX胃液量+1000(3)胃蛋白酶活性的測定(麥特毛細管法)將內(nèi)徑1.0mm粗細均勻的毛細玻璃管截成10.0cm長，洗凈烤干。取適量雞蛋清充分打勻后用紗布過濾，將上述毛細管利用虹吸作用，灌滿蛋清(管內(nèi)應(yīng)無氣泡混入)。然后放置于85"C熱蒸汽中使蛋白凝固。待冷卻后，取出用石蠟將蛋白管兩端封固，！C冰箱中備用。實驗時取胃液1.0ml放入50ml三角瓶中，加0.05N鹽酸溶液15.0ml，搖勻，放進約長2.0cm蛋白管二根。塞好瓶口，放于37'C恒溫箱中溫孵24h。用尺測量蛋白管兩端透明部分的長度(mm)以四端之值求其平均值。胃蛋白酶的單位=平均值2乂16并計算胃蛋白酶活性抑制率(％)?？瞻捉M胃蛋白酶單位一受試組胃蛋白酶單位胃蛋白酶活性抑制率(％)=-~X100%空白組胃蛋白酶單位統(tǒng)計方法各組指標(biāo)取均值進行組間t檢驗，與空白對照組比較判定顯著性差異。根據(jù)胃蛋白酶活性抑制率判斷試藥的量效關(guān)系，若量效顯著，計算其ED5值。利用孫瑞元教授主編的NDST軟件進行統(tǒng)計計算。1.2結(jié)果見表8-1、8-2。表8-l磺化去氫松香酸二鈉等對胃液酸堿m影響(X±S，n=10)組別劑量(mg/kg)酸濃度胃液總酸量胃液酸度(PH值)空白對照組0.5%MC9281.5±1321.073.6±14.31.209±0.066磺化去氫松香12.57198.0±1跳6*49.5±22.3*1.316±0.091**酸二鈉100.05098.3±1612.3**35.0±16.5**1.441±0.165**磺化去氫松香酸鈉組100.06749.0±1418.6**49.9±15.5**1.384±0.282*注與空白對照組比較f表示P0.05"表示PO.Ol與陽性對照藥磺化去氫松香酸鈉比較存表示P0.05##表示？<0.01表8-2磺化去氫松香酸等對胃蛋白酶活性及抑制率的影響組別(mg/kg)動物數(shù)(只)胃蛋白酶活性單位(x~±s)蛋白酶抑制率(%)空白對照組0.5%MC10580.2±151.8—12.510384.5±76.4**##33.7磺化去氫松香酸25.010225.9±45.3**湖61.0二鈉組50.010187.7±53.9**67.6100.01046.3±32.3**##92.0磺化去氫松香酸100.010168.6土43.6"70.91.3結(jié)論磺化去氫松香酸二鈉對胃液分泌的作用1.3.1對酸濃度、總酸量、酸度的影響磺化去氫松香酸二鈉12.5、100.0mg/kg均顯著降低胃液酸濃度、胃液總酸量、胃液的酸性,高劑量的作用更為顯著，說明試藥能夠顯著改變胃液的酸堿性，使酸性降低、總酸量下降。同樣實驗條件下，對照藥磺化去氫松香酸100.0mg/kg也能抑制胃液酸濃度、胃液總酸量、胃液的酸度，但其抑制率與磺化去氫松香酸二鈉12.5mg/kg效果相近，表明磺化去氫松香酸二鈉對胃液酸堿度的影響是單鈉的8倍以上。結(jié)果見表8-l。1.3.2對胃蛋白酶活性的作用磺化去氫松香酸二鈉12.5、25.0、50.0、100.0mg/kg對胃蛋白酶活性均有顯著的抑制作用(PO.Ol)，100.0mg/kg劑量胃蛋白酶活性抑制率達最大92.0%，并且存在顯著的量效反應(yīng)關(guān)系，ED5o值為20.8mg/kg。同樣實驗條件下，陽性對照藥磺化去氫松香酸鈉(100.0mg/kg)、也有抑制作用，胃蛋白酶活性抑制率為70.9%。與陽性藥比較，磺化去氫松香酸二鈉100.0mg/kg對胃蛋白酶活性抑制率顯著高于磺化去氫松香酸100.0mg/kg(P<0.01)，作用強度分別是單鈉的1.3倍?；腔渌上闼岫c50.0mg/kg劑量對胃蛋白酶活性抑制作用與磺化去氫松香酸100.0mg/kg作用接近組間無顯著差異(P>0.05;i。各藥物的作用比較情況見表8-2。2.在無水乙醇引起的胃粘膜損傷模型上的作用2.1取成年健康大白鼠80只，體重200-240g,雌雄各半，分別按體重隨機分組，禁食(不禁水)48h。各組劑量分別為空白對照(給予0.5%甲基纖維素，0.5%MC)、試藥磺化去氫松香酸(4個劑量組12.5、25.0、50.0、100.0mg/kg)、陽性對照藥磺化去氫松香酸(100.0mg/kg)。均采用灌胃給藥(i.g)，給藥量為2.0ml/kg,給藥40min后，i.g無水乙醇l.Oml/只鼠，lh后處死。取胃(結(jié)扎賁門和幽門)，向胃腔內(nèi)注入1%甲醛溶液8ml，將胃浸入1%甲醛溶液中，2h后沿胃大彎剪開，觀察胃潰瘍情況。胃潰瘍程度的評價方法條索狀損傷，長度大于1.0mm者，測量其長度，每1.0mm計l分，若其長度大于l者，將其計分加倍；點狀損傷的以5個點計為l分，計分總數(shù)為該動物的潰瘍指數(shù)，進行組間差異的顯著性比較，并計算損傷抑制率(％)，計算方法如下空白組潰瘍指數(shù)_受試組潰瘍指數(shù)損傷抑制率(％)=-X100%空白組潰瘍指數(shù)統(tǒng)計方法各組潰瘍指數(shù)取均值進行組間f檢驗，與空白對照組比較判定顯著性差異。根據(jù)潰瘍損傷抑制率判斷試藥的量效反應(yīng)關(guān)系，若量效顯著，計算其ED5。值。利用孫瑞元教授主編的NDST軟件進行統(tǒng)計計算。2.2結(jié)果見表9-1。表9-1.磺化去氫松香酸二鈉等對乙醇致胃粘膜損傷及抑制率的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>2.3結(jié)論磺化去氫松香酸二鈉對無水乙醇致胃粘膜損傷的預(yù)防作用磺化去氫松香酸二鈉12.5、25.0、50.0、100.0mg/kg組與空白對照組比較潰瘍指數(shù)顯著性降低，表明試藥對急性胃粘膜損傷有顯著的預(yù)防作用，100.0mg/kg劑量時粘膜損傷抑制率達最大為98.8%(P<0.01)，在12.5-100.0mg/kg劑量范圍內(nèi)存在顯著的量效關(guān)系，EDs。值為11.7mg/kg。同樣實驗條件下，對照藥磺化去氫松香酸鈉(100.0mg/kg)組對潰瘍也有抑制作用。與陽性藥組比較，磺化去氫松香酸二鈉100.0mg/kg潰瘍指數(shù)比磺化去氫松香酸鈉100.0mg/kg劑量顯著降低，作用強度是其4倍；磺化去氫松香酸二鈉50.0mg/kg對潰瘍抑制率與磺化去氫松香酸鈉100.0mg/kg作用接近，組間無顯著差異(PX).05)。各藥物的作用比較情況見表9-1。3.對幽門結(jié)扎引起的胃潰瘍的作用3.1選用成年健康大白鼠，雌雄各半，體重180-220g，隨機分組，動物禁食48h，自由飲水，用乙醚將動物麻醉，打開腹腔，結(jié)扎幽門。i.g給藥，各組劑量分別為磺化去氫松香酸二鈉(4各劑量組12.5、25.0、50.0、100.0mg/kg),磺化去氫松香酸鈉(100.0mg/kg)，空白對照組(0.5XMC)，以2.0ml/kg給藥，給藥后18h解剖取胃(結(jié)扎賁門)，向胃腔內(nèi)注入1^甲醛溶液8ml。將胃浸入1%甲醛溶液中，10min后，沿胃大彎剪開胃，觀察胃潰瘍的發(fā)生情況。潰瘍程度的評價，計數(shù)胃潰瘍的面積，以其總和作為潰瘍指數(shù)。并計算潰瘍抑制百分率(％)。對照組潰瘍指數(shù)一給藥組潰瘍指數(shù)潰瘍抑制百分率(％)=-X100%對照組漬瘍指數(shù)統(tǒng)計方法各組潰瘍指數(shù)取均值進行組間t檢驗，與空白對照組比較判定顯著性差異。根據(jù)潰瘍抑制百分率判斷試藥的量效關(guān)系，若量效顯著，計算其EDso值。利用孫瑞元教授主編的NDST軟件進行統(tǒng)計計算。3.2結(jié)果見表10-1。表10-1磺化去氫松香酸二鈉等對幽門結(jié)扎大鼠胃潰瘍的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>酸鈉組3.3結(jié)論磺化去氫松香酸二鈉對幽門結(jié)扎胃潰瘍的預(yù)防作用磺化去氫松香酸二鈉的25.0、50.0、100.0mg/kg對幽門結(jié)扎胃潰瘍均有顯著性抑制作用(P<0.05、P<0.01)，100.0mg/kg作用最為顯著性，潰瘍抑制率最大為89.3%，并且在12.5-100.0mg/kg有非常顯著量效關(guān)系，EDso值為19.3mg/kg。同樣條件下磺化去氫松香酸鈉100.0mg/kg也有顯著性差異(PO.Ol、P<0.05)。與陽性藥物作用的比較，磺化去氫松香酸二鈉100.0mg/kg對潰瘍的抑制作用顯著性高于磺化去氫松香酸鈉100.0mg/kg組(P0.05)(P<0.05)。陽性藥物磺化去氫松香酸鈉100.0mg/kg的作用強度介于磺化去氫松香酸二鈉25.0mg/kg和50.0mg/kg劑量之間結(jié)果見表10-1。4.對體外胃蛋白酶活性的影響4.1參照幽門結(jié)扎胃液分泌實驗方法，收集一定量的胃液并離心，取上清液用于該實驗。取50ml潔凈錐形瓶，分別加入0.9ml胃液，然后各瓶中加入相應(yīng)濃度的藥液0.1ml，空白對照加0.1ml0.05NHC1，37。C恒溫中溫孵20min后，每瓶中再加入0.05NHC115.0ml，3-4cm長Mett管兩根。參照文獻進行胃蛋白酶活性測定。胃蛋白酶活性測定及計算方法同上述幽門結(jié)扎胃液分泌實驗。4.2結(jié)果見表11-1。表ll-l磺化去氫松香酸二鈉等對體外胃蛋白酶活性的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>4.810213.4士82.9"37.03.810270.1±36.8*20.33.110292.3±58.613.7磺化去氫松香酸鈉組7.510198.7±55.7**41.44.3結(jié)論磺化去氫松香酸二鈉對體外胃蛋白酶活性的影響磺化去氫松香酸二鈉在體外9.4-3.8X10—5g/ml濃度下對胃蛋白酶活性有顯著的抑制作用，在高濃度下9.4X10'5g/ml最高抑制率為75.8%，半數(shù)有效濃度6.5X10'5(g/ml)，半數(shù)有效濃度6.5X10,g/ml)濃度下的磺化去氫松香酸二鈉(43.6Q/。)對胃蛋白酶活性的抑制作用高于對照藥磺化去氫松香酸鈉7.5Xl(r5(g/ml)(41.4%)。結(jié)果見表11-1。G本發(fā)明藥物毒理學(xué)實驗磺化去氫松香酸二鈉鹽給小鼠一次灌胃給藥后，7d內(nèi)動物無一死亡，其最大給藥量為8000mg/kg,約相當(dāng)于臨床擬用量的約240倍(以60kg人每日2000mg計)?；腔渌上闼岫c給小鼠一次腹腔給藥后，依劑量大小動物表現(xiàn)為活動減少、后肢僵直、易驚、抽搐而死，大體解剖肉眼觀察未見明顯異常。死亡時間在20min12h內(nèi)，腹腔注射丄D5。-378.0mg/kg,約相當(dāng)于臨床擬用量的114倍。曰本發(fā)明藥物一般藥理學(xué)研究采用小鼠及家犬對磺化去氫松香酸二鈉的一般藥理作用進行觀察，包括精神神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)，其結(jié)果如下通過小鼠口服磺化去氫松香酸二鈉系列劑量，觀察試藥對動物精祌祌經(jīng)系統(tǒng)的影響。采用小鼠口服35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg磺化去氫松香酸二鈉時，在一定的時間內(nèi)觀察小鼠一般行為。觀察結(jié)果無流涎、肌顫及瞳孔變化等現(xiàn)象出現(xiàn)，也未見異常姿勢、步態(tài)等；各劑量組與空白對照組比較，自主活動未出現(xiàn)顯著性變化。采用麻醉家犬口服磺化去氫松香酸二鈉系列劑量，觀察試藥對動物呼吸系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)的影響。家犬口服磺化去氫松香酸二鈉7.5mg/kg、15.0mg/kg、30.0mg/kg各劑量時，對呼吸、血壓、心電連續(xù)觀察3小時，采用自身前后對比，結(jié)果顯示磺化去氫松香酸二鈉口服對動物呼吸頻率及深度、動脈收縮壓及舒張壓、心電(ECGII)圖各波和心率沒有顯著性影響。結(jié)論以上結(jié)果可以認為，磺化去氫松香酸二鈉口服劑量35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg對小鼠精神、神經(jīng)系統(tǒng)無顯著性影響(P>0.05)?；腔渌上闼岫c口服劑量7.5mg/kg、15.0mg/kg、30.0mg/kg對麻醉家犬呼吸系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)無顯著性影響(P>0.05)。卿、藥理毒理研究總結(jié)論磺化去氫松香酸二鈉12.5mg/kg對胃液酸濃度、胃液總酸量、胃液酸性與磺化去氫松香酸鈉100.0mg/kg作用相當(dāng)，表明二鈉對胃液酸堿度的影響是單鈉的8倍。二鈉具有很強的抗酸能力?；腔渌上闼岫c50.0mg/kg對幽門結(jié)扎的胃蛋白酶活性抑制作用與單鈉100.0mg/kg相當(dāng)?；腔渌上闼岫c50.0mg/kg對無水乙醇致急性粘膜損傷潰瘍抑制作用與單鈉100.0mg/kg相當(dāng)?；腔渌上闼岫c12.5mg/kg和50.0mg/kg劑量間對幽門結(jié)扎型胃潰瘍抑制作用與單鈉100.0mg/kg相當(dāng)?；腔渌上闼岫c6.5X10—s(g/ml)對體外胃蛋白酶活性抑制作用高于單鈉7.5X10-5(g/ml)。由以上藥效學(xué)試驗結(jié)果表明，磺化去氫松香酸二鈉對胃酸的調(diào)節(jié)能力遠遠高于單鈉，在治療胃酸過多型消化性潰瘍時二鈉不需聯(lián)合應(yīng)用任何別的抗酸藥物即能起到很好的調(diào)節(jié)胃液酸堿度。其它在消化性潰瘍的預(yù)防和治療作用、體外作用的各個指標(biāo)觀察，二鈉均為單鈉二倍以上的療效，或高于單鈉鹽。由此藥效學(xué)試驗結(jié)果表明雙鈉鹽用于治療胃酸過多型消化性潰瘍比單鈉鹽起效更快，效果更明顯，安全性更高。本發(fā)明具有以下有益效果(1)磺化去氫松香酸二鈉在治療胃酸過多型消化性潰瘍及胃腸道炎癥時單獨用藥療效好，見效快，安全性高。(2)與磺化去氫松香酸單鈉比較，磺化去氫松香酸二鈉的制酸能力更強，不需聯(lián)合用藥便能更好地中和胃酸，保護胃腸道組織；在胃內(nèi)和腸內(nèi)的溶出速度更快，對胃、腸的潰瘍和炎癥的治療發(fā)揮更快的作用；在消化性潰瘍預(yù)防和治療方面均優(yōu)于單鈉鹽，效果更高。具體實施例方式現(xiàn)通過以下實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步說明。實施例為用本發(fā)明藥治療胃酸過多型消化性潰瘍的典型病例l.王衛(wèi)國，男，44歲患者上腹部規(guī)律性疼痛13年，進食后緩解，燒心反酸，食欲減退，胃鏡檢查胃潰瘍0.3X0.45cm，診斷胃酸過多型胃潰瘍。經(jīng)多次服用法莫替丁、氫氧化鋁等中西藥物效果不明顯。患者多方求醫(yī)，都無療效。后改服本發(fā)明藥磺化去氫松香酸二鈉，不加任何抑酸藥，服藥一個療程，上述癥狀完全消失，己痊愈。電話隨訪，至今再未復(fù)發(fā)。2.陳進，男，30歲患者來時胃鏡報告1.5X1.0cm潰瘍，有凹陷，周邊糜爛，腹痛，精神差，經(jīng)單獨服本發(fā)明藥磺化去氫松香酸二鈉，不加任何抑酸藥，治療六周，胃鏡復(fù)査潰瘍消失，病人痊愈。3.楊冬亞，女，47歲。胃鏡檢查提示胃底上部可見小彎側(cè)粘膜糜爛性充血，水腫、境界不清，質(zhì)脆，觸之易出血。診斷為胃酸過多型慢性胃潰瘍，病理檢査結(jié)論相符。就診前一日曾嘔出暗紅色血液及食物殘渣，約60ml。診見雙手護腹蜷臥，面色萎黃，胃脘部持續(xù)性隱痛，時而嘈雜鈍痛，得食后稍緩解，但進食不多，干嘔惡心，頻吐清涎，大便色黑(隱血試驗+++)。中上腹偏左有局限性明顯壓痛，重按之可放射至胸脅部，并有欲噯氣、矢氣之感。不加任何抑酸藥，單用本發(fā)明藥2日后血止，大便隱血試驗陰性，余證均有明顯改善。連服一個療程后痊愈。4.王賽英，女，36歲患者胃脘痛、泛酸、噯氣反復(fù)發(fā)作已有5年。曾用中西藥間斷治療無效。來就診后，經(jīng)X鋇餐檢査，診斷為胃酸過多胃竇部小彎側(cè)黃豆大慢性潰瘍。嗜酒，近半個月來，經(jīng)常胃痛，食欲不振?；颊卟患佑萌魏我炙崴?，單服本發(fā)明藥一個療程后，疼痛消失。兩個月后到醫(yī)院復(fù)査，X鋇餐透視，小彎側(cè)龕影消失，潰瘍面愈合?；颊呷两?，電話隨訪，未見復(fù)發(fā)。5.患者劉輝，男，50歲。2006年11月30日初診。有胃痛史2年，屢治少效。經(jīng)胃鏡檢查確診為胃酸過多慢性淺表性萎縮性胃炎。不加任何抑酸藥，經(jīng)單服本發(fā)明藥一個星期，胃痛減輕，食欲轉(zhuǎn)好；服一個療程后，胃痛止，腹脹噯氣消失，自覺精神倍增，無不適感。出院后復(fù)査胃鏡和活組織檢查，表明慢性淺表性胃炎、萎縮性胃炎已獲痊愈。5.患者韓雪靜，女，23歲?；颊弑辉\斷為胃酸過多致小腸節(jié)段性腸炎，病情緩解和惡化反復(fù)，用常規(guī)藥物治療，但腸道出血和惡化未能得到控制。推薦其使用本發(fā)明藥，一天口服給藥二次，此外用該藥水溶液通過肛門一天一次直腸給藥到腸道。一療程后，病情好轉(zhuǎn)，炎癥明顯改善，給藥一年后病情未見復(fù)發(fā)惡化。6.患者劉宏力，男，45歲?；颊弑辉\斷為胃酸過多致十二指腸多發(fā)性潰瘍病變，用常規(guī)藥物治療，但未得到改善。推薦其使用本發(fā)明藥，一天口服給藥二次，不加任何抑酸藥。二療程后，病情好轉(zhuǎn)，炎癥明顯改善，給藥三年后病情未見復(fù)發(fā)。權(quán)利要求1、應(yīng)用磺化去氫松香酸二鈉鹽防治胃酸過多型消化性潰瘍和胃腸道炎癥其特征為用于防治胃酸過多型消化性潰瘍及胃腸道炎癥疾病，包括胃潰瘍、十二指腸潰瘍、急慢性胃炎、腸炎、慢性胃炎急性發(fā)作。磺化去氫松香酸二鈉的分子結(jié)構(gòu)式為其中，R＝2Nan＝02.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用磺化去氫松香酸二鈉鹽防治胃酸過多型消化性潰瘍和胃腸道炎癥，其特征為采用口服或非口服給藥，口服給藥的制劑形式有片劑、膠囊、散劑、顆粒劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑劑型，在各劑型中加入藥學(xué)上可接受的相應(yīng)的輔料及佐劑。全文摘要本發(fā)明為磺化去氫松香酸二鈉在醫(yī)藥上的應(yīng)用，涉及防治胃腸道疾病的藥物領(lǐng)域，尤其防治胃酸過多導(dǎo)致的胃腸道炎癥和潰瘍的藥物。CN00818150.0公開的專利申請認為磺基脫氫松香酸單鈉鹽比二鈉鹽更有優(yōu)勢，但沒有進一步公開試驗情況、數(shù)據(jù)結(jié)論，至于二鈉鹽的藥理作用、臨床應(yīng)用情況值得進一步研究。本發(fā)明通過對單鈉鹽與二鈉鹽的體外制酸效果比較，在人工胃液、人工腸液中溶出度比較、藥效學(xué)試驗比較對治療胃粘膜的急性損傷、胃潰瘍、胃蛋白酶活性以及胃液酸度等的影響，結(jié)果表明在治療胃潰瘍、急性胃炎及慢性胃炎急性發(fā)作時磺化去氫松香酸二鈉具有制酸能力更強、在胃內(nèi)和腸內(nèi)的溶出速度更快、療效更高、見效更快的有益效果。文檔編號A61K31/185GK101480383SQ20081011089公開日2009年7月15日申請日期2008年6月17日優(yōu)先權(quán)日2008年6月17日發(fā)明者吳海英,張平一,鄧金明申請人:浙江愛生藥業(yè)有限公司