專利名稱：含有三取代甘油化合物的口服劑型的制作方法
專利說明含有三取代甘油化合物的口服劑型 本發(fā)明涉及含有三取代甘油化合物或其可藥用鹽的口服給藥的藥物固體劑型。本發(fā)明還涉及制備這樣劑型的相應(yīng)方法，以及它們作為藥物在癌癥和免疫疾病治療中的應(yīng)用。
本發(fā)明中使用的三取代甘油化合物屬于合成的醚連接的烷基溶血磷脂類別。因為這些脂類已知具有抗致癌活性，它們也被合稱為“抗腫瘤醚脂”(綜述參見例如Arthur，G.和Bittman，R.(1998)Biochim.Biophys.Acta 1390，85-102；Jendrossek，V.和Handrick，R.(2003)Curr.Med.Chem.Anti-Canc.Agents 3，343-353；Mollinedo，F(xiàn).等，(2004)Curr.Med.Chem.11，3163-3184)。
除了它們的抗腫瘤活性之外，這些醚脂被認(rèn)為參與了各種不同的其它生理過程，例如炎癥、免疫應(yīng)答或過敏反應(yīng)。在本技術(shù)領(lǐng)域中已確定這些醚脂可以用作治療各種免疫疾病的藥物(分別參見例如國際專利申請WO 87/01257和WO 90/14829)。
1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿(也被稱為ET-18-OCH3、AP-121或依地福新)被認(rèn)為是抗腫瘤醚脂的原型。1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿代表了血小板活化因子(PAF；1-O-烷基-2-乙?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿)的合成類似物，血小板活化因子是許多白細(xì)胞功能包括血小板凝集、炎癥和過敏性反應(yīng)的強(qiáng)有力的磷脂活化劑和介導(dǎo)物。與大多數(shù)常用的化療藥物不同，抗腫瘤醚脂不直接靶向細(xì)胞DNA，而是影響質(zhì)膜的脂類組成和/或干擾各種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。迄今已經(jīng)鑒定了1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的兩種主要的細(xì)胞靶，即CTP磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶(CCT；EC 2.7.7.15)和死亡受體Fas(也稱為APO-1或CD95)。在最近的研究中，1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿已經(jīng)被進(jìn)一步證實(shí)以細(xì)胞類型依賴性的方式靶向兩種不同的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，即白細(xì)胞中的細(xì)胞表面脂筏和實(shí)體腫瘤細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，并被證實(shí)影響了這兩種結(jié)構(gòu)中發(fā)生的過程，最終分別誘導(dǎo)了脂筏和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)介導(dǎo)的細(xì)胞死亡(Nieto-Miguel，T.等，(2006)J.Biol.Chem.281，14833-14840)。
癌癥化療一般來說目的在于減緩癌細(xì)胞的生長或破壞癌細(xì)胞，同時避免連帶損傷到周圍的細(xì)胞和組織。因此，最有效的抗癌癥藥劑是能夠選擇性靶向癌細(xì)胞、同時使正常細(xì)胞相對不受影響的藥劑。合成的醚脂已顯示出可有效作為腫瘤藥劑，以便例如在哺乳動物中降低或終止腫瘤的發(fā)展，即穩(wěn)定病癥的“現(xiàn)狀”，甚或減小腫瘤的尺寸。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿特別適合治療不同類型的腫瘤，例如腦腫瘤或乳房癌(分別參見例如德國專利DE 2619686，以及國際專利申請WO 99/59599和WO 00/01392)。
對于醚脂對癌細(xì)胞的毒性已經(jīng)提出了幾種作用機(jī)制，包括細(xì)胞缺少烷基裂解酶。由此導(dǎo)致的醚脂不能水解使得它們在細(xì)胞內(nèi)積累，從而破壞細(xì)胞膜的脂類組織。醚脂作用的其它可能機(jī)制包括對細(xì)胞內(nèi)蛋白磷酸化水平的影響和破壞細(xì)胞脂類代謝。正常細(xì)胞一般具有避免或克服醚脂的潛在毒性作用的手段，而癌細(xì)胞不具有。
這些合成醚脂的抗腫瘤活性已經(jīng)在幾種動物腫瘤模型中得到了實(shí)驗證明。但是，它們的臨床使用經(jīng)常被全身細(xì)胞毒性作用包括溶血作用(特別是在胃腸道觀察到，但是此外也在肺、肝或腎中觀察到)所阻礙。
1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿和其它合成的醚脂可以通過采用靜脈內(nèi)途徑給藥于患者。在這種情況下，發(fā)現(xiàn)靜脈內(nèi)施用脂質(zhì)體制劑是有利的，以便改進(jìn)治療功效同時顯著降低體內(nèi)非特異性毒性(參見例如Ahmad，I.等，(1997)Cancer Res.57，1915-1921)。
國際專利申請WO 91/09590描述了用于靜脈內(nèi)給藥的1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的藥物制劑，其含有親脂性的水包油乳液，可用于施用高劑量化合物而沒有不良副作用。
但是，在本技術(shù)領(lǐng)域中也已經(jīng)知道，某些醚磷脂和氨甲?；}在單次或重復(fù)注射時盡管對患者展現(xiàn)出作為PAF或腫瘤生長的競爭性抑制劑的益處，但會在注射區(qū)域造成有害作用。這些有害作用表現(xiàn)為血紅細(xì)胞裂解、嚴(yán)重水腫、炎癥和注射部位壞死。這些不良作用也被稱為“去污劑”效應(yīng)。當(dāng)需要重復(fù)注射時，這些有害作用特別不利，因為它們使得給藥位置變得不適合而需要新的位置。由于患者上合適位置的數(shù)量有限，因此非常希望避免與1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的靜脈內(nèi)給藥有關(guān)的所述有害作用。
更近些時候，已經(jīng)顯示出將1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿與液態(tài)可飲用介質(zhì)一起口服給藥也是可能的。在國際專利申請WO99/59599中，描述了1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿可以與含有至少3％(w/w)脂肪和/或蛋白例如湯(特別增稠的湯)、蛋酒和其它常規(guī)飲料的基于水的介質(zhì)一起給藥?；谂Ｄ痰慕橘|(zhì)也是適合的，例如牛奶、牛奶替代品、酸奶、酸奶酒等。一種有吸引力的推測是1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿與蛋白和/或其它脂類的有效結(jié)合“屏蔽”了醚脂，從而導(dǎo)致不量副作用減少。
然而，在用這種基于水和/或基于牛奶的介質(zhì)治療的患者中，有10-20％觀察到了與食欲喪失、惡心和/或嘔吐、腹瀉、便秘等有關(guān)的明顯的胃腸道不相容性(分別對應(yīng)于WHO毒性級別III級和IV級)(參見例如Drings，P.等，(1992)Onkologie 15，375-382)。
此外，除了有食物過敏(例如乳糖不相容性)的其它問題之外，患者每天幾次隨著相當(dāng)量的食物或飲料一起服用藥物，也是不方便的。此外，顯然例如基于牛奶的藥物需要每次在用藥前即時制備。這不僅耗時和不實(shí)用，而且對于劑量也可能是不確定因素，因為藥物的配制需要精確的稱重和劇烈的混合。最后，還必須確?；颊邔⑺幬锿耆?，以確保攝入了完整的劑量。
因此，對于克服上述限制的含有1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿或相關(guān)的三取代甘油化合物的可替代口服劑型，仍然存在著需求。具體來說，需要一種劑型，它是固體形式，允許容易和方便地施用，并對癌癥和其它疾病的治療提供所需的藥效。因為1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿或相關(guān)的三取代甘油化合物的攝取發(fā)生在結(jié)腸中，因此，最想要的是能夠通過胃而不被分解的固體腸溶藥物劑型。
因此，本發(fā)明的一個目標(biāo)是提供這種用于口服給藥的藥物固體劑型。
該目標(biāo)通過具有獨(dú)立權(quán)利要求1的特點(diǎn)的藥物劑型來實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明的一些優(yōu)選實(shí)施方案由獨(dú)立權(quán)利要求的主題來限定。
按照本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，配制含有三取代甘油化合物例如1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的固體口服劑型是可能的，這種劑型適合治療癌癥或免疫疾病，并允許藥物精確計量和方便服用。本發(fā)明的口服劑型當(dāng)給藥于患者時，提供了活性藥劑的所需功效或所需的生物利用度。
在本發(fā)明的背景下，顯示的任何數(shù)值一般都與精確度的區(qū)間相關(guān)聯(lián)，本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員將會理解該區(qū)間仍然確保了所討論特點(diǎn)的技術(shù)效果。在本文中使用時，顯示的數(shù)值的偏差在±10％的范圍內(nèi)，優(yōu)選在±5％的范圍內(nèi)。
第一方面，本發(fā)明涉及用于口服給藥的藥物固體劑型，含有式(I)的三取代甘油化合物
或其對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體或可藥用的鹽，以及至少一種可藥用賦形劑，其中 X選自磷酸根(phosphate)和硫酸根(sulphate)； R1選自C16-C20烷基； R2選自C1-C3烷基和C1-C3羥基烷基； R3選自氫和C1-C3烷基； R4選自C1-C3烷基和C3-C6環(huán)烷基；以及 R5選自氫和甲基。
三取代甘油化合物可以以無定形或結(jié)晶形式存在。本文使用的術(shù)語“無定形”是指其中原子的位置不是長程有序的固體，即非結(jié)晶物質(zhì)。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，三取代甘油化合物以結(jié)晶形式存在。
本文使用的術(shù)語“Cn烷基”、“Cn羥基烷基”和“Cn環(huán)烷基”分別是指具有n個碳原子的烷基基團(tuán)、羥基烷基基團(tuán)或環(huán)烷基基團(tuán)。例如，術(shù)語“C18烷基”是指具有18個碳原子的烷基基團(tuán)。本發(fā)明的烷基基團(tuán)或羥基烷基基團(tuán)可以是直鏈的或支鏈的。
式(I)的三取代甘油化合物具有一個或多個不對稱中心，因此它們可以作為對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體存在。因此，本發(fā)明的藥物固體劑型可以含有任何一種或多種不同的個體異構(gòu)體(例如L型和D型)或異構(gòu)體的混合物，優(yōu)選為外消旋混合物。
在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，式(I)的三取代甘油化合物作為可藥用的鹽存在于劑型中。這樣的鹽可以包含任何可藥用的陰離子以“中和”氮的正電荷(例如氯化物、溴化物或碘化物)，或任何可藥用的陽離子以“中和”磷酸根或硫酸根部分的負(fù)電荷(例如鈉或鉀陽離子)。
在本發(fā)明的特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥物固體劑型包含式(I)的三取代甘油化合物，其中X是磷酸根，R1是-(CH2)17-CH3，R2是CH3，R3是H，R4是-(CH2)2-，R5是CH3。
根據(jù)本發(fā)明，應(yīng)該理解，三取代甘油化合物存在于固體劑型中的量是在給患者施用時有效實(shí)現(xiàn)所需藥效例如終止腫瘤發(fā)展或在腫瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)凋亡效應(yīng)的任何量。有效量通常根據(jù)多種因素進(jìn)行選擇，例如患者的年齡、身材和總體情況以及所治療的醫(yī)學(xué)病癥，并且通過本技術(shù)領(lǐng)域的普通專業(yè)人員所熟知、并在得到本發(fā)明教導(dǎo)后容易實(shí)踐的各種方法來確定，例如劑量范圍試驗。
通常，在本發(fā)明的藥物劑型中，式(I)的三取代甘油化合物的量少于400mg，優(yōu)選在30到250mg的范圍內(nèi)，最優(yōu)選在50到150mg的范圍內(nèi)。在本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，式(I)的三取代甘油化合物的量分別為75mg和100mg。
給患者施用的三取代甘油化合物的日劑量少于1200mg，一般少于900mg，優(yōu)選在30到600mg的范圍內(nèi)，更優(yōu)選在40到400mg的范圍內(nèi)，最優(yōu)選在50到350mg的范圍內(nèi)。在具體的實(shí)施方案中，日劑量為75、100、150、200、225和300mg。優(yōu)選將三取代甘油化合物的日劑量作為單劑給藥，例如以1到最多4片或膠囊的形式。但是，也可以分多劑施用化合物，例如在一天中分2到3個劑給藥，例如在早晨、中午和晚上。
通常，本發(fā)明的藥物固體劑型的總重量最終為1600mg。優(yōu)選情況下，劑型的總重量在200到1200mg的范圍內(nèi)，更優(yōu)選在250到1000mg的范圍內(nèi)，最優(yōu)選在300到800mg的范圍內(nèi)。固體劑型的直徑通常最終為17mm。優(yōu)選情況下，劑型的直徑在9到15mm的范圍內(nèi)，特別優(yōu)選在11到12mm的范圍內(nèi)。
式(I)的三取代甘油化合物可以作為單一活性成分、或與至少一種其它活性成分例如化療劑或單克隆抗體相組合，存在于藥物固體劑型中。
此外，已經(jīng)了解，當(dāng)口服用藥時，任何具體治療藥劑的吸收和生物利用度可受到多種因素的影響。這些因素包括胃腸(GI)道中存在的食物，因為一般來說，在存在食物的情況下，藥物的胃滯留時間通常明顯長于禁食狀態(tài)下的時間。如果由于GI道中食物的存在使藥物的生物利用度受到的影響超出某個點(diǎn)，則藥物被說成是表現(xiàn)出了“食物效應(yīng)”或顯示出藥物/食物相互作用。在選擇藥劑量時應(yīng)該考慮這種因素。
術(shù)語“可藥用的賦形劑”在本發(fā)明中的意思可以是用于制備藥物劑型的任何物質(zhì)，例如包衣材料、成膜材料、填充劑、崩解劑、釋放調(diào)節(jié)材料、載體材料、稀釋劑、粘合劑和其它佐劑。
本發(fā)明的術(shù)語“口服使用的藥物固體劑型”是指任何適合口服使用的藥物制劑。這樣的劑型的例子尤其包括片劑、丸劑、膠囊、顆粒、球丸、粉末、多顆粒制劑(例如珠子、顆?；蚪Y(jié)晶)和糖衣丸。
所有這些劑型在本技術(shù)領(lǐng)域中都是沿用已久的(參見例如Gennaro，A.L.和Gennaro，A.R.(2000)《雷氏藥物學(xué)與實(shí)踐》(RemingtonTheScience and Practice of Pharmacy)，第20版，Lippincott Williams&Wilkins，Philadelphia，PA；Ritschel，W.A.&Bauer-Brandl，A.(2002)《片劑開發(fā)、制造和質(zhì)量保證手冊》(Die TabletteHandbuch derEntwicklung，Herstellung und

).Editio-Cantor Verlag，Aulendorf，Germany；Crowder，T.M.等，(2003)《藥物造粒學(xué)指導(dǎo)》(AGuide to Pharmaceutical Particulate Science).Interpharm/CRC，BocaRaton，F(xiàn)L；Niazi，S.K.(2004)《藥物生產(chǎn)制劑手冊》Handbook ofPharmaceutical Manufacturing Formulations，CRC Press，Boca Raton，F(xiàn)L)。
在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，藥物固體劑型選自片劑、丸劑、膠囊和顆粒，其中片劑是特別優(yōu)選的。
在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實(shí)施方案中，固體劑型是腸溶劑型，即該劑型在胃中、即高度酸性環(huán)境中保持穩(wěn)定。這可以通過提供含有薄膜包衣的固體劑型來實(shí)現(xiàn)。
因此，在本發(fā)明的其它實(shí)施方案中，固體劑型含有薄膜包衣。例如，本發(fā)明的劑型可以是所謂薄膜片劑的形式。本發(fā)明的藥劑可以含有兩個或多個薄膜包衣層。相應(yīng)的劑型可以是雙層或多層片劑。薄膜包衣的厚度可以為大約20微米到大約1200微米。
制備薄膜包衣劑型的方法在本技術(shù)領(lǐng)域中是已經(jīng)建立的(參見例如Gennaro，A.L.和Gennaro，A.R.(2000)《雷氏藥物學(xué)與實(shí)踐》(RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy)，第20版，Lippincott Williams&Wilkins，Philadelphia，PA；Ritschel，W.A.&Bauer-Brandl，A.(2002)《片劑開發(fā)、制造和質(zhì)量保證手冊》(DieTabletteHandbuch der Entwicklung，Herstellung und

).Editio-Cantor Verlag，Aulendorf，Germany；Crowder，T.M.等，(2003)《藥物造粒學(xué)指導(dǎo)》(A Guide to Pharmaceutical Particulate Science).Interpharm/CRC，Boca Raton，F(xiàn)L；Niazi，S.K.(2004)《藥物生產(chǎn)制劑手冊》(Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulation)s，CRCPress，Boca Raton，F(xiàn)L)。如何提供具有特殊性質(zhì)的薄膜包衣，例如腸溶包衣、接觸體液后溶解的薄膜包衣、受控釋放的包衣、遮掩味道的包衣或崩解性包衣，在本技術(shù)領(lǐng)域中也是眾所周知的。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的固體劑型含有腸溶包衣。
通常，薄膜包衣含有至少一種成膜材料，其量為薄膜包衣總重量的最多85％(w/w)。在優(yōu)選實(shí)施方案中，成膜材料選自丙烯酸樹脂例如EudragitTM聚合物(

GmbH&Co.KG，Darmstadt，德國)、聚甲基丙烯酸衍生物、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素乙酸琥珀酸酯、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、乙酸鄰苯二甲酸酯纖維素和聚乙酸乙烯鄰苯二甲酸酯，或其混合物，其中特別優(yōu)選羥丙基甲基纖維素乙酸琥珀酸酯、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、纖維素乙酸鄰苯二甲酸酯、聚乙烯鄰苯二甲酸乙酯、丙烯酸樹脂和EudragitTM聚合物。優(yōu)選的EudragitTM聚合物選自EudragitTM L30D-55、L100-55、L100、L12.5、S100和S12.5。
本發(fā)明的薄膜包衣或薄膜包衣材料可以含有至少一種增塑劑。薄膜包衣材料中增塑劑的量一般在薄膜包衣總重量的大約3％(w/w)到30％(w/w)范圍內(nèi)。本發(fā)明中合適的增塑劑選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷和檸檬酸三乙酯。
薄膜包衣還可以包含至少一種穩(wěn)定劑。通常情況下，穩(wěn)定劑是潤濕劑例如山梨糖醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮或去污劑例如十二烷基硫酸鈉，例如Texapon K12(Cognis Deutschland GmbH&Co.KG，Düsseldorf，德國)。薄膜包衣材料中包含的穩(wěn)定劑的量一般為薄膜包衣總重量的大約1％(w/w)到5％(w/w)。
此外，薄膜包衣還可以包含至少一種分離劑或抗粘附劑。通常情況下，分離劑是惰性化合物，例如硅酸鎂/硅酸鋁，或金屬皂例如滑石和硬脂酸鎂。通常情況下，薄膜包衣材料中分離劑的量在薄膜包衣總重量的大約1％(w/w)到5％(w/w)的范圍內(nèi)。
任選，薄膜包衣還可以含有用于著色的顏料，例如氧化鈦、紅色氧化鐵或黃色氧化鐵。通常，薄膜包衣材料中存在的這些顏料的量最多為包衣總重量的1％(w/w)。
在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實(shí)施方案中，藥物固體劑型的腸溶薄膜包衣在pH≥6.8時、優(yōu)選在pH≥5.5時是可溶的。還優(yōu)選藥物固體劑型按照美國藥典XXIX<701>的規(guī)定，在≥6.8的pH范圍內(nèi)、在最終30分鐘的接觸時間內(nèi)(即與腸液接觸時)崩解，優(yōu)選在最終15分鐘的接觸時間內(nèi)崩解。
此外，優(yōu)選藥物固體劑型按照美國藥典XXIX<701>的規(guī)定，在≤2.5的pH范圍內(nèi)，在至少120分鐘的接觸時間內(nèi)(即與胃液接觸時)不會崩解。
按照本發(fā)明，固體劑型可以含有最多50％(w/w)的至少一種賦形劑，其中所述賦形劑優(yōu)選含有至少一種填充劑、至少一種粘合劑、至少一種崩解劑、至少一種流動性控制劑和至少一種潤滑劑。
本文使用的術(shù)語“填充劑”是指惰性化合物，它們在本發(fā)明的藥物固體劑型中的存在量最高為劑型總重量的70％(w/w)。適合的填充劑的例子特別包括乳糖、葡萄糖、果糖、磷酸氫鈣(二水合)、果膠、藻酸鹽、淀粉(例如玉米淀粉)、微晶纖維素，以及乳糖、磷酸氫鈣、微晶纖維素和玉米淀粉中每兩種分別1∶1的混合物。
本文中使用的術(shù)語“粘合劑”是指賦形劑，其適合將其它成分互相粘附在一起。適合的粘合劑特別包括葡萄糖、糊精、麥芽糖糊精、甲基纖維素、乙基纖維素、羥基乙基纖維素、硅酸鎂鋁、瓜耳膠、聚乙烯吡咯烷酮、聚環(huán)氧乙烷、明膠、藻酸鈉和氫化植物油。這樣的粘合劑在本發(fā)明劑型中的存在量為劑型總重量的1％(w/w)到15％(w/w)。
此外，本發(fā)明的劑型還可以含有一種或多種潤滑劑(助流劑)，例如硬脂酸鎂、硬脂基延胡索酸鈉、硬脂酸和棕櫚酸硬脂酸甘油酯，其量最多為劑型總重量的1％(w/w)。
劑型還可以含有至少一種崩解劑，例如交聯(lián)的羧甲基纖維素鈉(交聯(lián)羧甲纖維素鈉)、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、玉米淀粉和乙二醇淀粉鈉。這些崩解劑在劑型中存在量在劑型總重量的0.5％(w/w)到4％(w/w)的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的劑型還可以包含一種或多種流動性控制劑。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，流動性控制劑選自分散體或膠體二氧化硅例如AerosilTM 200或SyloidTM 244(都來自Degussa AG，Düsseldorf，德國)、硬脂酸鎂、花生酸鈣(calcium arachinate)、鯨蠟醇、肉豆蔻醇及其混合物，其中二氧化硅是特別優(yōu)選的。這樣的流動性控制劑在劑型中的存在量最多為劑型總重量的1％(w/w)。
在本發(fā)明的特別優(yōu)選實(shí)施方案中，三取代甘油化合物與至少一種流動性控制劑之間的比例是一重量份的三取代甘油化合物比0.01-0.1重量份的流動性控制劑。
此外，可能希望提供能夠在確定的時段內(nèi)以恒定速度釋放三取代甘油化合物的受控釋放劑型。有多種形成基質(zhì)的天然和合成的聚合物可用于延長或修改藥物的釋放，例如黃原膠、半乳甘露聚糖聚合物、藻酸鹽、纖維素衍生物(甲基纖維素、羥丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素等)、丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物及其組合。該范圍的聚合物能夠使配方者獲得所需的釋放情況。
或者，本發(fā)明的劑型可以包含一種或多種適合調(diào)節(jié)或修飾本發(fā)明的三取代甘油化合物釋放的賦形劑。適合調(diào)節(jié)或修飾三取代甘油形式釋放的賦形劑是疏水性釋放控制劑和/或親水性聚合物。
疏水性釋放控制劑優(yōu)選可以選自甲基丙烯酸銨共聚物、甲基丙烯酸共聚物、聚丙烯酸、聚乙酸乙烯酯、乙基纖維素、纖維素乙酸酯、纖維素丙酸酯、纖維素乙酸丙酸酯、纖維素乙酸丁酸酯、纖維素乙酸鄰苯二甲酸酯、纖維素三乙酸酯、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸異丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸異癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸異丙酯)、聚(丙烯酸異丁酯)、聚(丙烯酸十八烷基酯)、蠟、脂肪醇、脂肪酸酯和氫化蓖麻油。
本發(fā)明的劑型還可以含有具有親水性聚合物的緩釋聚合物層，親水性聚合物選自羧甲基纖維素、瓜耳膠、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素和聚維酮。或者，劑型可以含有具有疏水性材料的緩釋聚合物層，疏水性材料選自巴西棕櫚蠟、乙基纖維素、棕櫚酸硬脂酸甘油酯、氫化蓖麻油、氫化植物油、微晶蠟、聚甲基丙烯酸酯和硬脂酸。
在本發(fā)明的特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥物固體劑型在溶解和/或崩解后提供三取代甘油化合物的立即釋放。希望的是本發(fā)明的藥物劑型提供確定的、優(yōu)選快速的釋放情況。更準(zhǔn)確來說，本發(fā)明的劑型可以被配制成當(dāng)在1型溶出裝置(槳式)中按照美國藥典XXIX<724>的描述在37℃±0.5℃、pH 6.8緩沖狀態(tài)下和每分鐘75轉(zhuǎn)下測定時，劑型中包含的三取代甘油化合物總量的至少80％、優(yōu)選至少85％在45分鐘內(nèi)、優(yōu)選在30分鐘內(nèi)從劑型中釋放，和/或可以配制成當(dāng)在1型溶出裝置(槳式)中按照美國藥典XXIX<724>的描述在37℃±0.5℃、pH 1.2的酸性狀態(tài)下和每分鐘75轉(zhuǎn)下測定時，劑型中包含的三取代甘油化合物在2小時內(nèi)從劑型中釋放的不超過總量的10％。
按照本發(fā)明的另一個方面，活性劑三取代甘油化合物可以被包含或分散在作為劑型的一部分的基質(zhì)中。本發(fā)明劑型的基質(zhì)優(yōu)選可以是立即釋放的基質(zhì)，盡管也可以使用具有控制藥物釋放的包衣的正常釋放或受控釋放的基質(zhì)。
適合用于受控釋放的基質(zhì)或包衣的材料包括 (i)親水性聚合物，例如樹膠、纖維素醚、丙烯酸樹脂和蛋白來源的材料。在這些聚合物中，纖維素醚，特別是羥烷基纖維素和羧烷基纖維素，是優(yōu)選的。劑型可以包含1％到80％(重量)之間的至少一種親水性或疏水性聚合物。
(ii)可消化的、長鏈(C8-C50，特別是C12-C40)、取代的或未取代的碳?xì)浠衔?，例如脂肪酸、脂肪醇、脂肪酸的甘油酯、礦物油和植物油以及蠟。優(yōu)選熔點(diǎn)在25℃到90℃之間的碳?xì)浠衔?。脂?脂肪族的)醇是特別優(yōu)選的。劑型可以含有最多60％(重量)的至少一種可消化的長鏈碳?xì)浠衔铩?br> (iii)聚烷撐二醇。劑型可以含有最多60％(重量)的至少一種聚烷撐二醇。
或者，本發(fā)明的劑型可以含有正常釋放的基質(zhì)，所述基質(zhì)具有控制三取代甘油化合物釋放的包衣。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，劑型可以含有薄膜包被的球?；蝾w粒，其中含有三取代甘油化合物和非水溶性成球劑(spheronising agent)。術(shù)語“球?！痹谒幬镱I(lǐng)域中是已知的，是指直徑在0.5mm到2.5mm之間、特別是0.5mm到2mm之間的球形顆粒。
根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，劑型可以是含有多顆粒的制劑。然后可以將多顆粒的單位劑量摻入到藥物固體劑制劑中，例如通過壓縮或形成片劑，或通過將必需的量放置在明膠膠囊中。多顆粒劑型可以含有包被的微粒，例如結(jié)晶、顆粒、球丸或珠子。
在第二個方面，本發(fā)明涉及將本文定義的三取代甘油化合物用作口服給藥的藥物固體劑型。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，三取代甘油化合物用于治療癌癥或用于治療免疫疾病(也參見下面顯示的定義)。
在第三個方面，本發(fā)明涉及制備本文定義的藥物固體劑型的方法，方法包括將三取代甘油化合物與至少一種賦形劑混合。
在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，方法還包括將混合物干燥。在另一個實(shí)施方案中，方法還包括將獲得的混合物造粒。
在本發(fā)明涉及片劑制備的優(yōu)選實(shí)施方案中，方法還包括通過使用適合的壓片機(jī)壓縮任選成粒的混合物。特別優(yōu)選的是在最終200Mpa的壓力下進(jìn)行顆粒壓縮。
優(yōu)選，包括填充劑、粘合劑、崩解劑、流動性控制劑、潤滑劑和/或其它添加劑的至少一種賦形劑，以預(yù)先成粒的形式存在。對于本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員來說，如何制備預(yù)先成粒的添加劑是眾所周知的(也參見下面引用的參考文獻(xiàn))。
藥物固體制劑的制造通常在15℃到26℃之間的溫度下進(jìn)行，優(yōu)選在18℃到22℃之間。生產(chǎn)間的相對濕度在55％以下，優(yōu)選40％以下。
在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實(shí)施方案中，最終混合物在干燥和/或造粒后的殘留水分分別在混合物總重量的1.5％(w/w)以下、特別優(yōu)選1.0％(w/w)以下、最優(yōu)選0.5％(w/w)以下。
本發(fā)明的方法還優(yōu)選包括用薄膜包衣材料包被獲得的藥物制劑，特別優(yōu)選使用腸溶薄膜包衣材料。
制備本發(fā)明的藥物固體劑型的方法在本技術(shù)領(lǐng)域中是眾所周知的(參見例如Gennaro，A.L.和Gennaro，A.R.(2000)《雷氏藥物學(xué)與實(shí)踐》(RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy)，第20版，Lippincott Williams & Wilkins，Philadelphia，PA；Ritschel，W.A.&Bauer-Brandl，A.(2002)《片劑開發(fā)、制造和質(zhì)量保證手冊》(DieTabletteHandbuch der Entwicklung，Herstellung und

).Editio-Cantor Verlag，Aulendorf，Germany；Crowder，T.M.等，(2003)《藥物成粒學(xué)指導(dǎo)》(A Guide to Pharmaceutical Particulate Science).Interpharm/CRC，Boca Raton，F(xiàn)L；Stricker，H.(2003)(劑型開發(fā))(Arzneiformenentwicklung)，Springer Verlag，Berlin，Germany；Niazi，S.K.(2004)《藥物生產(chǎn)制劑手冊》(Handbook of PharmaceuticalManufacturing Formulations)，CRC Press，Boca Raton，F(xiàn)L)。
在第四個方面，本發(fā)明涉及本文定義的藥物固體劑型作為治療癌癥或治療免疫疾病的藥物的應(yīng)用。
本文使用的術(shù)語“癌癥”是指任何類型或形式的細(xì)胞或組織惡性生長，尤其包括乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、黑素瘤和肺癌。在本發(fā)明的范圍內(nèi)，術(shù)語“癌癥”是指一類疾病，其中細(xì)胞是攻擊性的(即它們的生長和分裂不受正常限制)、侵潤性的(即它們侵入并破壞鄰近的組織)和轉(zhuǎn)移性的(即它們擴(kuò)散到身體的其它位置)。癌癥的這三種“惡性性質(zhì)”將它們與自限性生長且不侵入或轉(zhuǎn)移的良性腫瘤區(qū)分開來(盡管某些良性腫瘤類型能夠變成惡性)。
本文使用的術(shù)語“免疫疾病”是指任何免疫系統(tǒng)的疾病。這樣的免疫疾病的例子尤其包括免疫缺陷(即先天的或獲得性的疾病，其中免疫系統(tǒng)對抗感染性疾病戰(zhàn)斗的能力受到損害或完全缺失，例如AIDS或SCID)、過敏(例如過敏或哮喘的形式)以及自身免疫疾病。術(shù)語“自身免疫疾病”應(yīng)該被理解為是指由于身體對內(nèi)源物質(zhì)或組織的過分活躍的免疫反應(yīng)而產(chǎn)生的任何疾病，其中身體攻擊它自己的細(xì)胞。自身免疫疾病的例子尤其包括多發(fā)性腦硬化、克羅恩氏(Crohn’s)病、紅斑狼瘡、重癥肌無力、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性關(guān)節(jié)炎。
下面的圖和實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，它們的目的僅僅是說明本發(fā)明的具體實(shí)施方案，而不應(yīng)該被解釋為以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
在下面的試驗中使用的材料或是可商購的，或是本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員容易從可商購的材料制備的。
附圖

圖1描繪了用于確定賦形劑相容性的差示掃描量熱法(DCS)分析的結(jié)果，使用Netzsch DSC 204裝置(Netzsch

GmbH，Selb，德國)，加熱速度為5K/分鐘，直至300℃，冷卻速度為1K/分鐘，低至-30℃(初始溫度為室溫(大約20℃))。試驗了下面提到的樣品單獨(dú)的結(jié)晶1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿(黑色曲線)，單獨(dú)的下列賦形劑(紅色曲線)乳糖(圖1A)、交聯(lián)聚維酮(圖1B)、淀粉1500(圖1C)、二氧化硅(圖1D)，以及硬脂酸鎂(圖1E)，和1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿與每種賦形劑的二元混合物(綠色曲線)。
圖2描繪了含有本發(fā)明的1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的片劑。圖2A顯示了按照實(shí)施例6中的描述制備的顆粒片劑。片劑在Korsch偏心壓力機(jī)EKO或XP1(Korsch AG，Berlin，德國)中壓成不同的硬度級別(即碎裂強(qiáng)度)，即硬度為30N(左)和硬度為90N(右)。片劑中1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的量為片劑總重量的20％(w/w)。圖2B顯示了按照實(shí)施例4中的描述通過直接壓縮獲得的片劑。片劑中1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的量為片劑總重量的15％(w/w)。片劑在Korsch偏心壓力機(jī)EKO或XP1(Korsch AG，Berlin，德國)中壓成90N的硬度級別。
圖3描繪了1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿(終濃度10μM)、(電離)輻射(吸收劑量為5Gray單位，表示為“RT”)及其組合對LNCaP雄激素敏感性人類前列腺腺癌細(xì)胞的程序化細(xì)胞死亡(凋亡)和存活率的體外效應(yīng)。凋亡使用Apo-ONETM同源胱天蛋白酶-3/7分析，Promega，Inc.，Madison，WI，USA，按照制造商的說明書來測定。活的癌細(xì)胞百分率按照文獻(xiàn)中記載的錐蟲藍(lán)染料排斥法來估算(Freshney，R.I.(1994)《動物細(xì)胞的培養(yǎng)基本技術(shù)手冊》第三版(Culture of Animal CellsA Manual of Basic Technique.3rd Ed).Wiley-Liss.New York.USA)。將細(xì)胞在1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿給藥后6小時(圖3A)、給藥同時(圖3B)和給藥前6小時(圖3C)暴露于輻射。胱天蛋白酶分析在暴露于輻射后12小時進(jìn)行。顯示的相應(yīng)數(shù)據(jù)代表了兩次獨(dú)立實(shí)驗的平均值。
Figure 4描繪了1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿(以30mg/kg體重/天腹膜內(nèi)給藥15天；圖4A)、(電離)輻射(吸收劑量為5Gray單位，在第7天施用；圖4C)及其組合(圖4B)對在裸鼠(7只小鼠/組)前列腺中原位生長的LNCaP細(xì)胞的體內(nèi)效應(yīng)。腫瘤的生長通過使用可商購的測試試劑盒測定前列腺特異性抗原(PSA)的血清水平和通過磁共振成像測定腫瘤的體積來評估。
實(shí)施例 制備本發(fā)明的藥物固體劑型的方法按照藥物技術(shù)領(lǐng)域中眾所周知的已建立的標(biāo)準(zhǔn)方法來進(jìn)行(參見例如下列教科書Gennaro，A.L.和Gennaro，A.R.(2000)《雷氏藥物學(xué)與實(shí)踐》(RemingtonThe Scienceand Practice of Pharmacy)，第20版，Lippincott Williams & Wilkins，Philadelphia，PA；Ritschel，W.A.& Bauer-Brandl，A.(2002)《片劑開發(fā)、制造和質(zhì)量保證手冊》(Die TabletteHandbuch der Entwicklung，Herstellung und

).Editio-Cantor Verlag，Aulendorf，Germany；Crowder，T.M.等，(2003)《藥物成粒學(xué)指導(dǎo)》(A Guide toPharmaceutical Particulate Science).Interpharm/CRC，Boca Raton，F(xiàn)L；Stricker，H.(2003)(劑型開發(fā))(Arzneiformenentwicklung)，SpringerVerlag，Berlin，Germany；Niazi，S.K.(2004)《藥物生產(chǎn)制劑手冊》(Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations)，CRC Press，Boca Raton，F(xiàn)L)。
實(shí)施例1通過直接壓縮制備本發(fā)明的片劑 為了通過直接壓縮制備本發(fā)明的片劑，將下列成分混合(每劑量形式) 75.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 325.0mg 乳糖 20.0mg KollidonTM VA 64(BASF，Ludwigshafen，德國) 4.0mgAerosilTM 200(Degusta，Düsseldorf，德國) 2.4mg硬脂酸鎂 6.0mg硬脂酸 4.0mg玉米淀粉 然后，將混合物在壓片機(jī)中直接壓縮。
實(shí)施例2通過直接壓縮制備本發(fā)明的片劑 為了通過直接壓縮制備本發(fā)明的片劑，將下列成分混合(每劑量形式) 90.7mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 1.4mg酪蛋白甲醛 1.4mg土豆淀粉 1.4mg來自紅藻的凝膠形成劑 1.4mg乙二醇纖維素鈉 3.2mg 硬脂滑石 0.5mg AerosilTM 200(Degusta，Düsseldorf，德國) 然后，將混合物在壓片機(jī)中直接壓縮。
實(shí)施例3通過直接壓縮制備本發(fā)明的片劑 為了通過直接壓縮制備本發(fā)明的片劑，將下列成分混合(每劑量形式) 75.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 200.3mg 磷酸氫鈣 200.3mg 微晶纖維素 15.0mg KollidonTM CL(BASF，Ludwigshafen，德國) 9.4mg硬脂酸鎂 然后，將混合物在壓片機(jī)中直接壓縮。
實(shí)施例4通過直接壓縮制備本發(fā)明的片劑 為了通過直接壓縮制備本發(fā)明的片劑，將下列成分混合(每個劑量形式) 75.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 196.3mg 磷酸二鈣 196.3mg AvicelTM PH-102(FMC BioPolymer，Philadelphia，USA) 20.0mg 聚乙烯聚吡咯烷酮(CrospovidoneTM)(BASF，Ludwigshafen，德國) 12.4mg 硬脂酸鎂 將1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿、Avicel和磷酸二鈣通過IV號孔徑(大約1mm)的篩網(wǎng)，并完全混合。交聯(lián)聚維酮和硬脂酸鎂也過篩并混合。然后，在Korsch偏心壓力機(jī)EKO或XP1(KorschAG，Berlin，德國；使用的壓縮力在5kN到20kN之間)中壓縮成90N的硬度級別(即碎裂強(qiáng)度)。
片劑中1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的量為片劑總重量(即500mg)的15％(w/w)(即75mg)。類似地，制備了總重量為例如300mg、350mg、375mg、400mg和450mg的片劑(未顯示)。片劑的平均直徑為大約12mm，平均厚度為大約3mm到大約5mm。獲得的片劑顯示在圖2B中。
實(shí)施例5制備本發(fā)明的顆粒片劑 為了制備本發(fā)明的顆粒片劑，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 75.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 357.7mg 乳糖 40.0mg PolyplasdoneTM XL(BASF，Ludwigshafen，德國) 2.4mg硬脂酸鎂 然后，將混合物在壓片機(jī)中壓縮。
實(shí)施例6制備本發(fā)明的顆粒片劑 為了制備本發(fā)明的顆粒片劑，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 75.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 249.5mg 微晶纖維素 12.5mg KollidonTM 25(BASF，Ludwigshafen，德國) 30.0mg CrospovidoneTM(BASF，Ludwigshafen，德國) 8.0mg硬脂酸鎂 將1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿和微晶纖維素通過IV號孔徑(大約1mm)的篩網(wǎng)，并完全混合。加入Kollidon的20％(w/v)異丙醇溶液并造粒。成粒的混合物(代表了片劑的內(nèi)部相)干燥到殘留水分少于混合物總重量的3％(w/w)(使用Ohaus水分分析儀(OhausCorp.，Pine Brook，NJ，USA)測定)。
加入交聯(lián)聚維酮和硬脂酸鎂(代表片劑的外部相)。然后，在Korsch偏心壓力機(jī)EKO或XP1(Korsch AG，Berlin，德國；使用的壓縮力在5kN到20kN之間)中壓縮成30N(左)和90N(右)的不同硬度級別(即碎裂強(qiáng)度)。
片劑中1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的量為片劑總重量(即300-350mg)的20％(w/w)。類似地，制備了總重量為例如400mg、450mg、500mg、600mg、700mg和750mg的片劑(未顯示)。片劑的平均直徑為大約12mm，平均厚度依賴于硬度級別為大約3mm到大約5mm。獲得的片劑顯示在圖2A中。
實(shí)施例7制備本發(fā)明的顆粒片劑 為了制備本發(fā)明的顆粒片劑，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 150.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 (30.0％w/w) 158.8mg FlowLacTM 100(Meggle Pharma，Wasserburg，德國) (31.5％w/w) (乳糖一水合物) 158.8mg AvicelTM PH-102(FMC BioPolymer，Philadelphia，USA) (31.5％w/w) (微晶纖維素) 20.0mg CrospovidoneTM(BASF，Ludwigshafen，德國) (4.0％w/w) 12.4mg 硬脂酸鎂 (3.0％w/w) 片劑的制備類似實(shí)施例6。片劑中1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的量為片劑總重量(即500mg)的30％(w/w)。片劑的平均硬度級別(即碎裂強(qiáng)度)為大約85N，平均直徑為大約12mm，平均厚度為大約5.6mm。
為了制備本發(fā)明的備選顆粒片劑，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 150.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 (25.0％w/w) 205.5mg FlowLacTM 100(Meggle Pharma，Wasserburg，德國) (34.0％w/w)(乳糖一水合物) 205.5mg AvicelTM PH-102(FMC BioPolymer，Philadelphia，USA) (34.0％w/w)(微晶纖維素) 24.0mg CrospovidoneTM(BASF，Ludwigshafen，德國) (4.0％w/w) 15.0mg 硬脂酸鎂 (3.0％w/w) 片劑的制備類似實(shí)施例6。片劑中1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的量為片劑總重量(即600mg)的25％(w/w)。片劑的平均硬度級別(即碎裂強(qiáng)度)為大約86N，平均直徑為大約13mm，平均厚度為大約6.1mm。
實(shí)施例8制備本發(fā)明的顆粒片劑 為了制備本發(fā)明的顆粒片劑，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 20.0％(w/w) 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 補(bǔ)足 100.0％(w/w)乳糖 9.2％(w/w)AvicelTM PH-101(FMC BioPolymer，Philadelphia，USA) 15.0％(w/w) 蔗糖 適量(quantum statis) 15％(w/v)明膠 0.5％(w/w) 硬脂酸鎂 2.0％(w/w) 乙二醇淀粉鈉 然后，將混合物在壓片機(jī)中壓縮。
實(shí)施例9制備本發(fā)明的顆粒片劑 為了制備本發(fā)明的顆粒片劑，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 20.0％(w/w) 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 補(bǔ)足100.0％ (w/w)乳糖 30.0％(w/w) AvicelTM PH 101(FMC BioPolymer，Philadelphia，USA) 10.0％(w/w) 玉米淀粉 適量 10％(w/v)KollidonTM 25(BASF，Ludwigshafen，德國) 1.0％(w/w) KollidonTM CL(BASF，Ludwigshafen，德國) 2.0％(w/w) 硬脂酸鎂 然后，將混合物在壓片機(jī)中壓縮。
實(shí)施例10制備本發(fā)明的顆粒片劑 為了制備本發(fā)明的顆粒片劑，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 75.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 275.0mg 乳糖 25.0mg 玉米淀粉 適量 10％(w/v)KollidonTM 25(BASF，Ludwigshafen，德國) 1.5mgAerosilTM 200(Degusta，Düsseldorf，德國) 3.0mg硬脂酸鎂 然后，將混合物在壓片機(jī)中壓縮。
實(shí)施例11制備本發(fā)明的顆粒片劑 為了制備本發(fā)明的顆粒片劑，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 75.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 250.0mg 乳糖 25.0mg 乙二醇淀粉鈉 適量 10％(w/v)KollidonTM 25(BASF，Ludwigshafen，德國) 0.5mgAerosilTM 200(Degusta，Düsseldorf，德國) 0.5mg硬脂酸鎂 然后，將混合物在壓片機(jī)中壓縮。
實(shí)施例12制備本發(fā)明的腸溶球粒 為了制備腸溶球粒，將下列成分混合并造粒(每劑量形式) 75.0mg 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿 187.0mg AvicelTM PH 101(FMC BioPolymer，Philadelphia，USA) 13.0mg GranuLacTM 140(Meggle Pharma，Wasserburg，德國) 35.0mg EugraditTM L30D-55(

GmbH&Co.KG，Darmstadt，德國) 3.4mg檸檬酸三乙酯 17.0mg 硬脂酸鎂 實(shí)施例13制備本發(fā)明的腸溶片劑 使用本技術(shù)領(lǐng)域眾所周知的已建立的標(biāo)準(zhǔn)方法(參見前面引用的參考文獻(xiàn))，將按照實(shí)施例1到9制備的片劑用腸溶薄膜包衣進(jìn)行包裹。使用了下面的薄膜包衣(相應(yīng)成分的量單位為mg，分別針對總重量為300、400、500、600、700和800mg的片劑) 包衣1 包衣2 包衣3 包衣4 包衣5 包衣6 包衣7 包衣8 實(shí)施例14差示掃描量熱法(DCS) 進(jìn)行差示掃描量熱法(DCS)分析以確定不同賦形劑對于配制本發(fā)明片劑的相容性。
DSC是一種熱學(xué)分析技術(shù)，其中以測量增加樣品和參比的溫度所需的熱量差異作為溫度的函數(shù)。在整個實(shí)驗過程中，樣品和參比都維持在幾乎同樣的溫度。一般來說，設(shè)計DSC分析的溫度程序，使溫度作為時間的函數(shù)線性增加或降低。
分析使用Netzsch DSC 204裝置(Netzsch

GmbH，Selb，德國)來進(jìn)行。使用的加熱速度是5K/分鐘，高到300℃的溫度，冷卻速度是1K/分鐘，低到-30℃的溫度。起始溫度為室溫(大約20℃)。
試驗了下述的樣品單獨(dú)的結(jié)晶1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿(黑色曲線)，單獨(dú)的下列賦形劑(紅色曲線)乳糖(圖1A)、交聯(lián)聚維酮(圖1B)、淀粉1500(圖1C)、二氧化硅(圖1D)，以及硬脂酸鎂(圖1E)，和1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿與每種賦形劑的二元混合物(綠色曲線)。
可以看出，二氧化硅沒有顯示出與1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿有任何相互作用(即代表了惰性無機(jī)材料)，而乳糖、交聯(lián)聚維酮淀粉都顯示出了這樣的相互作用。當(dāng)使用微晶纖維素、磷酸鈣和交聯(lián)羧甲基纖維素作為賦形劑時，也檢測到了相互作用(數(shù)據(jù)未顯示)。另一方面，硬脂酸鎂和硬脂基延胡索酸鈉在熱圖中占優(yōu)勢。
實(shí)施例151-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿在前列腺癌治療中的效用 前列腺癌是一種在男性生殖系統(tǒng)的腺體——前列腺中發(fā)生的癌癥。前列腺癌最通常是通過體檢或通過篩查性驗血、例如PSA(前列腺特異性抗原)檢驗發(fā)現(xiàn)的。PSA檢驗測量血液中前列腺特異性抗原的水平，這是一種類似激肽釋放酶的絲氨酸蛋白酶。它的正常功能是在射精后液化凝膠狀的精液，使得精子更容易地通過子宮頸。PSA水平高于大約4ng/ml一般被認(rèn)為是發(fā)生前列腺癌的風(fēng)險的指征。但是，PSA不是完善的PSA，因此應(yīng)該通過其它分析進(jìn)行印證，例如檢測尿液中細(xì)胞相關(guān)的PCA-3mRNA。
局部晚期的或高風(fēng)險性前列腺癌的兩種最常用的治療方法是放射療法(RT)和雄激素剝奪(AD)，后者是激素療法。
分別研究了1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿單獨(dú)以及與RT、AD或RT+AD相組合，對前列腺癌細(xì)胞的程序化細(xì)胞死亡(凋亡)程度和存活的影響。
首先，測量了1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿、(電離)輻射及其組合對LNCaP雄激素敏感性人類前列腺腺癌細(xì)胞的程序化細(xì)胞死亡(凋亡)和存活率的體外效應(yīng)。LNCaP細(xì)胞系是從腺癌的轉(zhuǎn)移灶建立起來的。細(xì)胞用終濃度為10μM的1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿和相當(dāng)于5Gray單位吸收劑量的(電離)輻射進(jìn)行處理。
凋亡使用Apo-ONETM同源胱天蛋白酶-3/7分析，Promega，Inc.，Madison，WI，USA，按照制造商的說明書來測定?；畹哪[瘤細(xì)胞的百分率利用已記載的錐蟲藍(lán)染料排斥法來估算(Freshney，R.I.(1994)《動物細(xì)胞的培養(yǎng)基本技術(shù)手冊》第三版(Culture of Animal CellsA Manualof Basic Technique.3rd Ed.)Wiley-Liss.New York.USA)。
將細(xì)胞在1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿給藥后6小時(圖3A)、給藥同時(圖3B)和給藥前6小時(圖3C)暴露于輻射。胱天蛋白酶分析在暴露于輻射后12小時進(jìn)行。顯示的相應(yīng)數(shù)據(jù)代表了兩次獨(dú)立實(shí)驗的平均值。
當(dāng)在將細(xì)胞暴露于輻射之前6小時施用1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿時，組合治療導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的存活率僅僅為大約45％，與此相比，在未處理的對照中為大約85％。因此，在處理過的細(xì)胞中，觀察到了(通過胱天蛋白酶-3/7分析測定)凋亡反應(yīng)的顯著增加(＞2-5倍)。使用輻射或1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿單個進(jìn)行處理導(dǎo)致中等水平的存活率，分別為大約75％和大約60％(圖3A)。
在對細(xì)胞同時施用輻射和1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿的情況下，測定到的存活率為大約55％，這與單獨(dú)化學(xué)處理時觀察到的范圍(大約50％)相同。細(xì)胞只暴露于輻射導(dǎo)致存活率為大約80％，與未處理的對照(大約86％)相當(dāng)。令人吃驚的是，對于單獨(dú)的和組合的處理來說，胱天蛋白酶-3/7分析的結(jié)果是相似的(圖3B)。
當(dāng)在將細(xì)胞暴露于輻射之后6小時施用1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿時，組合處理導(dǎo)致細(xì)胞的存活率為大約40％，與單獨(dú)化學(xué)處理時觀察到的范圍(大約45％)相同。將細(xì)胞只暴露于輻射導(dǎo)致存活率為大約70％。在僅暴露于化學(xué)物質(zhì)的細(xì)胞中觀察到的凋亡程度與暴露于組合處理的細(xì)胞相比，增加了大約25％(圖3C)。
根據(jù)上面的結(jié)果，看來似乎在將細(xì)胞暴露于輻射之前施用1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿，對細(xì)胞的存活率和凋亡反應(yīng)有最顯著的影響。
在另一種方法中，對LNCaP細(xì)胞同時施用10μM 1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿(終濃度；“CHEM”)和(電離)輻射(5Gray單位；“RT”)，但是隨后的溫育時間被延長到24小時。凋亡按照前面的描述使用Apo-ONETM同源胱天蛋白酶-3/7分析進(jìn)行測定，并表示成相對熒光單位(RFLU)。通過對膜聯(lián)蛋白V-PE陽性染色和7-AAD(7-氨基放線菌素D)陰性染色的細(xì)胞(都購自BD Biosciences，San Jose，CA，USA)按照已建立的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析，測定凋亡細(xì)胞的百分率。結(jié)果概述在下面的表中。數(shù)據(jù)代表三次獨(dú)立實(shí)驗的平均值±SEM。
結(jié)果的統(tǒng)計學(xué)顯著性使用單向ANOVA、LSD檢驗來計算。*分別與每種CHEM和RT個體處理相比，p＜0.0001。
在雄激素不敏感的LNCaP C4-2和LNCaP-Res細(xì)胞中，也觀察到了“CHEM+RT”處理的細(xì)胞中凋亡的增加(數(shù)據(jù)未顯示)。
接下來，研究了施用1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿(“CHEM”)和雄激素剝奪(“AD”)之間的相互作用。按照本技術(shù)領(lǐng)域熟知的已建立的方法，通過2天的血清木炭吸附，對LNCaP細(xì)胞進(jìn)行雄激素剝奪。加入CHEM至終濃度分別為5μM和10μM。此外，測試了在給藥CHEM之前兩天加入合成雄激素R1881(“R1881”)是否導(dǎo)致了效應(yīng)的逆轉(zhuǎn)。
凋亡按照前面的描述使用Apo-ONETM同源胱天蛋白酶-3/7分析進(jìn)行測定，并表示成相對熒光單位(RFLU)。按照前面的描述，通過膜聯(lián)蛋白V-PE/7-AAD染色測定了凋亡細(xì)胞的百分率。胱天蛋白酶-3/7分析和膜聯(lián)蛋白染色在CHEM處理后22小時進(jìn)行。結(jié)果概述在下面的表中。
因此，對剝奪了雄激素的LNCaP細(xì)胞施用1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿，導(dǎo)致凋亡反應(yīng)的劑量依賴性顯著增加。此外，該效應(yīng)不能通過在1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿處理前在培養(yǎng)基中加入合成雄激素來逆轉(zhuǎn)。
此外，在初步研究中，研究了1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿、(電離)輻射及其組合對在裸鼠(7只小鼠/組)前列腺中原位生長的LNCaP細(xì)胞的體內(nèi)效應(yīng)。
1-O-十八烷基-2-O-甲基-甘油-3-磷酸膽堿以30mg/kg體重/天的劑量腹膜內(nèi)給藥15天(圖4A；使用不同的給藥途徑例如口服或管飼法的研究目前正在進(jìn)行中)。對應(yīng)于5Gray單位吸收劑量的(電離)輻射在第7天施用(圖4B)。組合處理描述在圖4C中。通過使用可商購的測試試劑盒測定血清中前列腺特異性抗原(PSA)的水平，以及通過磁共振成像測量腫瘤的體積，來評估腫瘤的生長。
可以看出，組合處理與任何個體處理(“PBS”代表磷酸鹽緩沖鹽水)相比，導(dǎo)致了PSA血清水平的顯著降低，證明了體外結(jié)果也可以轉(zhuǎn)移到體內(nèi)環(huán)境。
在這里示意描述的本發(fā)明，可以在不存在本文沒有具體公開的任何成分、限制的情況下，適當(dāng)?shù)貙?shí)施。因此，例如術(shù)語“包含”、“包括”、“含有”等應(yīng)該被廣義和非限制性地理解。此外，本文使用的術(shù)語和表述是用于描述的而不是限制的術(shù)語，這些術(shù)語和表述的使用不打算排除所顯示和描述的特點(diǎn)或其部分的任何等價物，但是，應(yīng)該認(rèn)識到，在要求權(quán)利的本發(fā)明范圍內(nèi)，各種不同的修改是可能的。因此，應(yīng)該理解，盡管本發(fā)明已經(jīng)以優(yōu)選的實(shí)施方案和任選的特征進(jìn)行了具體的公開，但本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員可以采取本文所公開的、其中體現(xiàn)了本發(fā)明修改和改變，這些修改和改變被認(rèn)為處于本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
所有本文引用和參考的文獻(xiàn)包括本文或本文參考的任何文獻(xiàn)中提到任何產(chǎn)品的任何制造商指示、說明、產(chǎn)品說明書以及產(chǎn)品表單，在此引為參考，并可用于本發(fā)明的實(shí)踐中。本申請中任何文獻(xiàn)的引用或鑒別并非承認(rèn)這些文獻(xiàn)被用作本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。
在本文中對本發(fā)明進(jìn)行了廣義和一般性的描述。每個屬類公開事物范圍內(nèi)的較窄的物類和亞屬類分組，也構(gòu)成了本發(fā)明的部分。這包括本發(fā)明的一般性說明帶有從屬類中除去任何主題的限制性條件或負(fù)性限制，而不論被除去的物質(zhì)是否在本文中被具體列舉了。
其它的實(shí)施方案在下面的權(quán)利要求書內(nèi)。此外，在根據(jù)馬庫什(Markush)組描述本發(fā)明的特點(diǎn)或方面的情況下，本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員將會認(rèn)識到，本發(fā)明也因此可以按照馬庫什組的任何個體成員或成員亞組進(jìn)行描述。
權(quán)利要求
1.用于口服施用的藥物固體劑型，含有式(I)的三取代甘油化合物
或其對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體或可藥用的鹽，以及至少一種可藥用賦形劑，其中
X選自磷酸根和硫酸根；
R1選自C16-C20烷基；
R2選自C1-C3烷基和C1-C3羥基烷基；
R3選自氫和C1-C3烷基；
R4選自C1-C3烷基和C3-C6環(huán)烷基；以及
R5選自氫和甲基。
2.權(quán)利要求1的藥物固體劑型，其中X是磷酸根，R1是-(CH2)17-CH3，R2是CH3，R3是H，R4是-(CH2)2-，R5是CH3。
3.權(quán)利要求1或2的藥物固體劑型，其中三取代甘油化合物以結(jié)晶形式存在。
4.權(quán)利要求1到3任一項的藥物固體劑型，其中三取代甘油化合物的量在30到250mg的范圍內(nèi)。
5.權(quán)利要求4的藥物固體劑型，其中三取代甘油化合物的量在50到150mg的范圍內(nèi)。
6.權(quán)利要求1到5任一項的藥物固體劑型，其中三取代甘油化合物的日劑量在50到350mg的范圍內(nèi)。
7.權(quán)利要求1到6任一項的藥物固體劑型，其中所述劑型選自片劑、丸劑、膠囊和顆粒。
8.權(quán)利要求1到7任一項的藥物固體劑型，其中所述劑型是腸溶劑型。
9.權(quán)利要求1到8任一項的藥物固體劑型，其中所述劑型在pH≥5.5時可溶。
10.權(quán)利要求9的藥物固體劑型，其中所述劑型在pH≥6.8時可溶。
11.權(quán)利要求9或10的藥物固體劑型，其中所述劑型按照美國藥典XXIX<701>，在pH≥6.8的范圍內(nèi)，在最終30分鐘的接觸時間內(nèi)崩解。
12.權(quán)利要求9到11任一項的藥物固體劑型，其中所述劑型按照美國藥典XXIX<701>，在pH≤2.5的范圍內(nèi)，在至少120分鐘的接觸時間內(nèi)不崩解。
13.權(quán)利要求1到12任一項的藥物固體劑型，其中所述劑型含有薄膜包衣。
14.權(quán)利要求13的藥物固體劑型，其中薄膜包衣是腸溶性薄膜包衣。
15.權(quán)利要求14的藥物固體劑型，其中腸溶性薄膜包衣含有至少一種選自丙烯酸樹脂、羥丙基甲基纖維素乙酸琥珀酸酯、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、乙酸鄰苯二甲酸酯纖維素和聚乙烯鄰苯二甲酸乙酯丙烯酸樹脂、或其混合物的成膜材料。
16.權(quán)利要求13到15任一項的藥物固體劑型，其中薄膜包衣含有至少一種增塑劑。
17.權(quán)利要求16的藥物固體劑型，其中至少一種增塑劑選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷和檸檬酸三乙酯。
18.權(quán)利要求1到17任一項的藥物固體劑型，其中至少一種賦形劑包括填充劑、粘合劑、崩解劑、流動性控制劑和潤滑劑每種至少一種。
19.權(quán)利要求18的藥物固體劑型，其中流動性控制劑選自分散體或膠體二氧化硅、硬脂酸鎂、花生酸鈣、鯨蠟醇、肉豆蔻醇及其混合物。
20.權(quán)利要求18或19的藥物固體劑型，其中三取代甘油化合物與至少一種流動性控制劑之間的比例是一重量份的三取代甘油化合物比0.01-0.1重量份的流動性控制劑。
21.權(quán)利要求1到20任一項的藥物固體劑型，其中所述劑型含有至少一種釋放控制劑。
22.權(quán)利要求1到21任一項的藥物固體劑型，其中所述劑型提供三取代甘油化合物的即刻釋放。
23.權(quán)利要求1到22任一項的藥物固體劑型，其中當(dāng)在1型溶出裝置(槳式)中按照美國藥典XXIX<724>在37℃±0.5℃下、在pH 6.8的緩沖狀態(tài)和每分鐘75轉(zhuǎn)下測定時，劑型中包含的三取代甘油化合物總量的至少75％在45分鐘內(nèi)從劑型中釋放。
24.權(quán)利要求1到23任一項的藥物固體劑型，其中當(dāng)在1型溶出裝置(槳式)中按照美國藥典XXIX<724>在37℃±0.5℃、在pH 1.2的酸性狀態(tài)和每分鐘75轉(zhuǎn)下測定時，劑型中包含的三取代甘油化合物總量的不超過10％在2小時內(nèi)從劑型中釋放。
25.權(quán)利要求1到24任一項中限定的三取代甘油化合物，用作口服施用的藥物固體劑型。
26.權(quán)利要求25的三取代甘油化合物，用于治療癌癥。
27.權(quán)利要求25的三取代甘油化合物，用于治療免疫疾病。
28.制備權(quán)利要求1到24任一項的藥物固體劑型的方法，包括
(a)將三取代甘油化合物與至少一種賦形劑混合。
29.權(quán)利要求28的方法，還包括
(b)將(a)中獲得的混合物干燥。
30.權(quán)利要求28或29的方法，還包括
(c)將(a)或(b)中獲得的混合物造粒。
31.權(quán)利要求28到30任一項的方法，其中混合物在執(zhí)行步驟(a)和/或(b)和/或(c)后殘留的水分以混合物總重量計1.5％(w/w)以下。
32.權(quán)利要求28到31任一項的方法，還包括
(d)使用適合的壓片機(jī)將混合物壓縮。
33.權(quán)利要求32的方法，其中壓縮在最終200Mpa的壓力下進(jìn)行。
34.權(quán)利要求28到33任一項的方法，還包括
(e)用薄膜包衣材料包裹獲得的藥物制劑。
35.權(quán)利要求1到24任一項的藥物固體劑型作為治療癌癥的藥物的用途。
36.權(quán)利要求1到24任一項的藥物固體劑型作為治療免疫疾病的藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及口服施用的藥物固體劑型，其中含有三取代甘油化合物或其可藥用的鹽。本發(fā)明還涉及用于制備這些劑型的相應(yīng)方法，以及它們作為藥物在癌癥和免疫疾病治療中的應(yīng)用。
文檔編號A61K9/48GK101610758SQ200780041772
公開日2009年12月23日 申請日期2007年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月10日
發(fā)明者沃爾夫?qū)だ锟颂? 盧茨·韋伯 申請人:阿爾法普托斯有限公司