專利名稱：：用于毛霉病和其它真菌疾病治療的組合物及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明一般地涉及感染性疾病的治療，并且更特別地，涉及機會性真菌疾病的有效治療。
背景技術(shù)：
：毛霉病(Mucormycosis)是由接合菌綱(Zygomycetes)，毛霉目(Mucorales)的真菌引起的威脅生命的感染。屬于毛霉目的真菌被分為六個科，它們?nèi)慷寄軌蛞鹈共?Ibrahim等，Z膽owyco^，p.241-251，InW,E.Dismukes,P.G.Pappas，禾卩J.D.Sobel(ed.)，C7/w/ca/Afyco/ogv,OxfordUniversityPress,NewYork(2003);Kwon-Chung,K.丄禾卩J.E.Bennett,她co考myz;y，p.524-559，Me血a/Myco/ogy,Lea&Febiger,Philadelphia(1992)禾口Ribes等，Zygom戸fesH薩anLfeea",ClinMicrobiolRevB:236-301(2000))。然而，屬于毛霉科(Mwcwaceae)的真菌，和特別地米根霉(WWzopi^wyzae)(少根根霉(六Wzo/war/^w))禾中，是目前最常見的感染病因(Ribes等，上文)。由于小克銀漢霉科中的小克銀漢霉屬某些種(Cwmw'"g/awe//(3ceaewp.)的感染，不斷增加的毛霉病病例也己經(jīng)被報道(Cohen-Abbo等，C7/"/ca//"/ec"ow17:173-77(1993);Kontoyianis等，C//m'ca//"/e"/owsD&eosw18:925-28(1994);Kwon-Chung等，爿wen'ca"Jowr"a/o/C//m'ca/Pa,/w/ogF64:544-48(1975)和Ventura等，Cancer58:1534-36(1986))。毛霉目剩下的四個科是較不常見的疾病病因(Bearer等，Jowr"a/o/C/i"/ca/M^oWo/ogy32:1823-24(1994);Kamalam和Thambiah,Sa^wrawc//"18:19-20(1980);Kemna等，/ow""/o/C7/",'co/M/cro6/o/ogy32:843-45(1994);Lye等，尸W/zo/ogy28:364-65(1996)，和Ribes等，(上文))。毛霉病的媒介物是機會病原體，它們幾乎一致地影響免疫受損的宿主(Spellberg等，C/f".M/craWo/.18:556-69(2005))。糖尿病性酮酸中毒的患者特異地對毛霉病易感，并且發(fā)生這些感染比其它真菌引起的感染更常見。相反，當(dāng)碰到使患者容易發(fā)生毛霉病的其它免疫損害——包括中性白細胞減少癥和皮質(zhì)激素療法一一的情況時，毛霉病比其它機會性真菌感染，例如由假絲酵母(C""力必)和曲霉屬某些種(A^"g///w"pp.)引起的那些真菌感染較不常見?？偟膩碚f，最近基于人群的研究估計毛霉病的發(fā)生率為每年每百萬人1.7例，這表示在美國每年約500例(Rees等，C/i"Zca//"/ecriowZfee氾e27:1138-47(1998))。但是，在高風(fēng)險的患者中，例如進行異體骨髓移植的那些患者，毛霉病的患病率已經(jīng)被描述為高達2-3%(Maertens等，M",towrmm^/a"/Wio"24:307-12(1999);Marty等，A^"g〃MW350:950-52(2004))。此外，一篇最近的綜述發(fā)現(xiàn)在過去的20年間毛霉病發(fā)病率有顯著增加(Gleissner等，丄e^Aymp/ww"45:351-60(2004))。相似的增長已經(jīng)被主要的干細胞移植中心報告。例如，報告描述了在過去的20年間，毛霉病發(fā)生率高于兩倍(Marr等，C//"/n/e"34:909-17(2002);Kontoyianis等，C//"/"/e"￡fc30:851-56(2000))?？紤]到糖尿病、癌癥和器官移植在美國老年人群中增高的發(fā)生率，預(yù)期毛霉病發(fā)病率在可預(yù)見的將來會持續(xù)上升。侵襲性毛霉病的可用療法包括逆轉(zhuǎn)潛在易感因素的嘗試，被感染區(qū)域緊急且廣泛的手術(shù)清創(chuàng)術(shù)，和輔助抗真菌療法(Edwards,J.，Jr.,Zygomycosis,p.1192-1199.P.Hoeprich和M.Jordan(ed.),/"/ec"owIfceiwe,第4版，J.B.LippincottCo.,Philadelphia(1989);Ibrahim等，(2003),上文；Kwon-Chung和Bennett,上文；Sugar,A.M.，AgentofMucormycosisandRelatedSpecies,p.2311-2321.G.Mandell,J.Bennett,禾口R.Dolin(ed.),W"c^p/esandPrac"ces0/7一c"'omsD&eases,第4版，ChurchillLivingstone,NewYork(1995))。兩性霉素B(AmB)仍是被批準(zhǔn)用于侵襲性毛霉病治療的唯一抗真菌劑(/cO。因為真菌對AmB相對抵抗，需要高劑量，這經(jīng)常引起腎毒性和其它不良效果(Sugar,上文)。并且，在不進行手術(shù)去除感染病灶的情況下(例如切除鼻腦型毛霉病患者的眼睛)，單獨的抗真菌療法很少有療效(Edwards,J.(1989),上文；Ibrahim等，(2003),上文)。即使當(dāng)手術(shù)清創(chuàng)術(shù)與高劑量AmB結(jié)合時，與毛霉病相關(guān)的死亡率超過50%(Sugar,上文)。在患有彌散性疾病的患者中，死亡率接近100%(Husain等，C//"/"/e"37:221-29(2003))。由于不可接受的高死亡率，和高度毀容的手術(shù)療法的極端發(fā)病率，開發(fā)治療和預(yù)防入侵性毛霉病的新策略是迫在眉睫的。AmB的腎毒性促使醫(yī)生在實踐中采用AmB的脂質(zhì)制劑，其比AmB的腎毒性低，并能夠以更高的劑量在更長的時期內(nèi)給藥(Ibrahim等，(2003),上文)?；加忻共』颊叩娜舾刹±龍蟾嬉呀?jīng)記載了用高達15mg/kg/d的兩性霉素脂質(zhì)制劑成功的治療(Cagatay等，5M7/"/e"1:22(2001);Ericsson等，C//"/w//f/ec"'owsD&簡es16:585-56(1993);Walsh等，X""附/croZJge""C/7ewW/7"45:3487-96(2001))。但是，用兩性霉素的脂質(zhì)制劑治療患者的死亡率仍然高，這強調(diào)了用于這些致死性疾病的新治療劑的需要。鐵本質(zhì)上被所有微生物病原體需要，用以生長和毒性(Howard,D.H.,C//"M'cro6/o//ev12:394-404(1999))。在哺乳動物宿主中，非常少量的血清鐵可被微生物利用，因為其高度結(jié)合于載體蛋白，如轉(zhuǎn)鐵蛋白(Artis等，Z)/Weto31:1109-14.(1982))。特別地，血清鐵的螯合是對抗米根霉(兄o"加e)的主要宿主防御機理(Artis等，上文)。生物體在血清中生長較差，并且當(dāng)加入外源鐵時，該生長抑制被逆轉(zhuǎn)(Artis等，上文；Boelaert等，Jowma/o/C/!'m'ca//m^s"g加'cw91:1979-86(1993))。有提高的可用血清鐵水平的患者特別容易被米根霉和其它接合菌感染，但是對其它病原真菌，如假絲酵母和曲霉的易感性程度較低(Ibmhim等,(2003),上文；Sugar,上文)。例如，用鐵螯合劑，去鐵敏(deferoxamine)治療的患者具有顯著增高的侵襲性毛霉病的發(fā)病率，這與這些病人中>80%的致死率相關(guān)(Boelaert等，《W"^/"/^77油'o"a/45:667-71(1994))。盡管去鐵敏對于人宿主發(fā)揮鐵螯合劑的作用，其對米根霉的影響似乎是恰好相反。去鐵敏通過發(fā)揮鐵載體(siderophore)的作用使病人易受根霉感染，其向真菌提供了先前不可用的鐵(Bodaert等,(1993),上文)。根霉通過細胞內(nèi)運輸還原鐵從鐵-去鐵敏復(fù)合體中獲得鐵，而不發(fā)生去鐵敏的內(nèi)化(deLocht等，5Zoc/^m/ca/尸/zflm^co/ogy47:1843-50(1994))。這一運輸可能由高親和性鐵通透酶介導(dǎo)。因此，提高的可用血清鐵是毛霉病發(fā)病機理的風(fēng)險因素。然而，鐵螯合化合物可以發(fā)揮病原體的鐵載體的功能，并且因此可能無法被普遍地應(yīng)用于治療處理。因此，存在對能夠降低毛霉病發(fā)病機理的風(fēng)險并提供有效治療處理的化合物和方法的需求。本發(fā)明滿足這些需求，并且也提供了相關(guān)的優(yōu)點。發(fā)明概述本發(fā)明提供了組合物，其包括至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。該組合物可以包括鐵螯合化合物去鐵酮(deferiprone)或地拉羅司(deferasirox)。該組合物中包含的抗真菌劑可以包括多烯抗真菌劑，吡咯抗真菌劑或棘白菌素(echinocandinantifungalagent)抗真菌劑。本發(fā)明也提供了治療或預(yù)防真菌病癥的方法。該方法包括給予患有或易患真菌病癥的個體治療有效量的至少一種鐵螯合化合物一段足夠的時間，以降低真菌病癥的嚴(yán)重性，其中所述鐵螯合化合物包含與該真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體(non-xenosiderophore)。由本發(fā)明提供的治療或預(yù)防真菌病癥的方法也可以包括給予患有或易患真菌病癥的個體治療有效量的至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。本發(fā)明進一步提供了一種方法，其包括在真菌病癥發(fā)作之前，預(yù)防性給予至少一種鐵螯合化合物，或至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。附圖簡述圖1顯示了Def和鐵與用米根霉感染的DKA小鼠存活之間的關(guān)系。小鼠(在每個治療中論20)用去鐵酮(Def)或Def+FeCl3(60mg/kg)處理，以逆轉(zhuǎn)鐵螯合的作用。LAmB處理的臂被包括作為對照。治療在感染后24小時開始。*p<0.003，與感染未處理或未感染未處理+FeCl3比較。圖2顯示了Exjade701(地拉羅司)提高了用米根霉感染的糖尿病酮癥酸中毒小鼠的存活率。小鼠(安慰劑11=6，Exjaden=7)通過尾靜脈注射2.2x104個米根霉99-892(從感染患者肺部獲得的臨床分離物)孢子被感染。感染后24小時，小鼠用安慰劑，1、3或10mg/kg的Exjade⑧通過口腔管飼法一日兩次連續(xù)治療7天。與安慰劑相比，*;<0.05。圖3顯示了用米根霉感染并用不同的Def治療方案處理的DKA小鼠的存活率。小鼠(每組n=6)在感染后24小時用Def以50、100或200mg/kg每日一次(qd)或隔日一次(qod)的劑量治療，總共4個劑量。與感染未治療相比，*p<0.05。圖4顯示了用Def和LAmB的組合治療實驗性的毛霉病。小鼠(對于感染未處理和Def，n=ll，對LAmB和Def+LAmB，n=6)用米根霉感染，24小時后，接著用Def、LAmB或兩種藥物的組合治療，共4個劑量。與感染未治療的小鼠相比，*p<0.005。圖5顯示了用米根霉感染并用Def、LAmB或兩者預(yù)防的嗜中性白血球減少癥的小鼠的存活率。小鼠(n=9)在第-l天用Def隔日一次、LAmB每日一次和兩者治療，共四個劑量。相對感染未處理，對于LAmB或LAmB+Def，*p<0.05。圖6顯示了用去鐵酮、LAmB或安慰劑處理的DKA小鼠(n=6)的腦部米根霉負荷。小鼠用3.8"03個孢子感染，并且在用任一藥物治療兩劑后54小時收集腦。數(shù)據(jù)被顯示為中位數(shù)+四分位數(shù)間距(medians+interquartilerange)。y軸表示試驗檢測的下限。相對安慰劑，*P<0.036，通過用于多重比較的Steel檢驗。圖7顯示了用銀甲烷銨(silvermethanamine)染色的壞死鼻粘膜的冷凍切片，其顯示了具有與毛霉菌一致的寬的、帶狀無隔膜菌絲的真菌。840x放大倍數(shù)。圖8顯示了地拉羅司在米根霉中誘導(dǎo)W77/基因表達。特別地，圖8(a)顯示了從在鐵充足、鐵螯合(地拉羅司)或鐵螯合逆轉(zhuǎn)(用氯化鐵飽和地拉羅司)的條件下溫育的米根霉菌絲中r尸777基因的RTPCR檢測到的表達。18srDNA的表達被包括，以證實RNA提取物的量。圖8(b)示出圖表，其顯示了用于構(gòu)建米根霉GFP表達載體的策略。啟動子表示rFtrlp或ACTlp。圖8(c)顯示了由米根霉rFtrlp或ACTlp驅(qū)動的米根霉中GFP的表達(通過共聚焦顯微鏡和流式細胞儀確定)，所述米根霉生長在鐵充足、含地拉羅司或含用氯化鐵飽和的地拉羅司的培養(yǎng)基中。GFP表達通過綠色熒光細胞由共聚焦顯微鏡揭示，并且通過通道FL1(y軸)中熒光細胞的百分?jǐn)?shù)由流式細胞儀揭示。圖9(a)顯示了用米根霉99-892(2.2><104)感染并用不同劑量的地拉羅司治療的糖尿病酮癥酸中毒小鼠(每組11>7)的存活率。小鼠用安慰劑(羥丙基纖維素載體)、地拉羅司或地拉羅司加鐵(FeCl3,10mg/kg)治療，以逆轉(zhuǎn)鐵螯合的作用。對于存活率，*P<0.05。圖9(b)顯示了用米根霉99-880(平均接種1.3xW個孢子)感染，并在感染24小時后，用10mg/kg的地拉羅司一日兩次(bid)治療7天的糖尿病酮癥酸中毒小鼠(n=24，來自具有相似結(jié)果的三次獨立實驗)的存活率。與安慰劑相比，*尸<0.003。圖10(a)顯示了用米根霉99-892(4.2x104個孢子)感染，并用安慰劑、地拉羅司(10mg/kg，一日兩次)或地拉羅司加鐵治療的糖尿病酮癥酸中毒小鼠(每組11=11)的腦和腎臟中的真菌負荷。接受3天的每日治療后，在第4天收集器官。數(shù)據(jù)被顯示為中位數(shù)+四分位數(shù)間距。y軸表示試驗檢測的下限。圖10(b)顯示了如10(a)中提到的，用米根霉99-892感染，并用地拉羅司、地拉羅司加氯化鐵或安慰劑治療的糖尿病酮癥酸中毒小鼠的蘇木精(hematoxylin)和伊紅染色的腎臟切片。箭頭表示組織中的米根霉菌絲。放大倍數(shù)X400。與安慰劑或地拉羅司加氯化鐵比較，對于組織真菌負荷，*P<0.002。圖11顯示，與鐵過負荷的小鼠相比，鐵螯合提高了脾臟Thl和Th2淋巴細胞的頻率，并且提高了促炎性細胞因子的水平。特別地，圖ll(a)顯示了用米根霉99-892的3.1><104個孢子感染，并在24小時后，用安慰劑、地拉羅司或地拉羅司加氯化鐵治療的糖尿病酮癥酸中毒小鼠(n=ll)中脾臟Thl和Th2淋巴細胞的頻率。圖ll(b)顯示了ll(a)中提到相同的小鼠(n=ll)，在感染4天后殺死并收集脾臟和腎臟，通過CytometricBeadArrayTM得到的全器官細胞因子分析的結(jié)果。ll(a)和U(b)中的數(shù)據(jù)都被顯示為中位數(shù)+四分位數(shù)間距(interquartilerange)。與安慰劑或地拉羅司加氯化鐵相比，*尸<0.02;與地拉羅司加氯化鐵相比，**尸<0.05且￥戶<0.07。圖12顯示了僅地拉羅司、僅LAmB和地拉羅司與LAmB組合對抗毛霉病的效力。該圖特別顯示了用米根霉99-880(平均接種L5xl(^個孢子)感染，并用單一的地拉羅司、單一的LAmB和地拉羅司(10mg/kg—日兩次進行7天)與LAmB(15mg/kg，進行4天)組合治療的糖尿病酮癥酸中毒小鼠(n>16,來自具有相似結(jié)果的兩次獨立實驗)的存活率。圖13顯示了僅地拉羅司、僅LAmB和地拉羅司與LAmB組合降低靶器官感染的效力。更特別地，該圖示出了用米根霉99-880感染的小鼠(n>7)的腦和腎臟中的組織米根霉負荷。在這些小鼠中，治療在感染24小時后開始，并且包括安慰劑、地拉羅司(10mg/kg，一日兩次)、LAmB(15mg/kg/d)或兩種藥物的組合。接受2天的每日治療后，在第3天收集器官。數(shù)據(jù)被顯示為中位數(shù)+四分位數(shù)間距(interquartilerange)。y軸表示試驗檢測的下限。與安慰劑相比，*PO.003;與安慰劑、地拉羅司或LAmB相比，**<0.003;與安慰劑或地拉羅司相比'￥尸<0.01。圖14示出了地拉羅司在嗜中性白細胞減少癥小鼠中治療米根霉感染的效力。環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide)治療的小鼠(n=19，來自具有相似結(jié)果的兩次獨立實驗)用米根霉99-892的2.7xl(^個孢子感染。小鼠在感染24小時后，用安慰劑或地拉羅司(10mg/kg)每天(qd)或每隔一天(qod)給藥治療，共5個劑量。與安慰劑相比，*尸=0.037。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及鐵螯合化合物的使用，其用于治療或減輕真菌病狀的嚴(yán)重程度。鐵螯合化合物被選擇為，相對于靶向的真菌病狀具有低的鐵載體或異鐵載體(xenosiderophore)活性。在一些實施方式中，鐵螯合化合物被選擇為，相對于靶向的真菌病狀基本沒有鐵載體或異鐵載體活性。與充當(dāng)鐵載體或異鐵載體的鐵螯合劑相反一一它們向真菌提供先前不可用的鐵，非鐵載體和非異鐵載體鐵螯合化合物化合物缺少這樣的輔助或運輸活性。因此，本發(fā)明所述的鐵螯合劑可以被用于鐵從周圍環(huán)境的去除。用于抗真菌療法的鐵螯合作用的一個好處在于其降低了重要礦物質(zhì)的可用性，該礦物質(zhì)被多種微生物病原體需要，用以生長和/或毒性。在一種實施方式中，本發(fā)明涉及含有鐵螯合化合物和抗真菌劑的治療組合物。所述鐵螯合化合物可以是去鐵酮(1,2二甲基-3-羥基吡啶-4-l)或地拉羅司(4-[3，5-雙(2-羥基苯基)-lH-l,2，4-三唑-l-基]-苯甲酸)。去鐵酮和地拉羅司己經(jīng)被用在治療鐵過量狀況的治療情況中，并且因此對于治療或預(yù)防真菌病癥是安全且有效的鐵螯合療法。本領(lǐng)域已知的抗真菌劑可被選擇用于與本發(fā)明的鐵螯合劑組合。該組合對于治療或預(yù)防真菌病癥的應(yīng)用是有益的。在另一實施方式中，本發(fā)明也涉及治療或預(yù)防真菌病癥的方法。該方法包括給予個體一種或多種鐵螯合化合物，該化合物對靶向的真菌種顯示出非鐵載體或非異鐵載體的鐵螯合活性。該方法也可以包括共同給予抗真菌劑，以達到與單一鐵螯合劑相比增強的效力。鐵螯合化合物可以是去鐵酮、地拉羅司或選自本領(lǐng)域己知的其它鐵螯合化合物。本發(fā)明所述的方法對治療和預(yù)防性處理特別有益，因為鐵螯合的目標(biāo)是去除對真菌病原性重要的礦物質(zhì)。本發(fā)明提供了一種組合物，其包括至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。鐵被大多數(shù)真菌系統(tǒng)需要，用以生長、存活和/或毒性。真菌已經(jīng)發(fā)展了多種用于獲得、攝取的機理以及儲存的方法，以確保這一重要金屬的充足供應(yīng)。本發(fā)明的組合物靶向這一重要的礦物質(zhì)從宿主環(huán)境中的去除，以抑制真菌病原體。本發(fā)明的組合物包括鐵螯合化合物，用以耗盡真菌病原體可用的鐵并抑制其生長、存活和/或毒性。本發(fā)明的組合物包括至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑的組合。對鐵螯合化合物和抗真菌劑兩者的包含結(jié)合了靶向兩條不同途徑的抗真菌活性，這兩條途徑被真菌用于生長、存活或毒性。由于兩條被靶向途徑的病原躲避(pathogenicevasion)的可能性低，耙向兩條或多條不同的真菌途徑提供了針對真菌病癥有效的治療處理。用在這里，術(shù)語"鐵螯合化合物"或"鐵螯合劑"意欲表示在兩個或多個獨立的結(jié)合位點之間結(jié)合鐵，以便形成螯合環(huán)(chelatering)或多個環(huán)(rings)的化合物。鐵螯合化合物與鐵結(jié)合或絡(luò)合在本文中稱為鐵螯合。鐵螯合化合物可以是二配位基(bidentate)(或雙配位基(didentate)),它們用兩個獨立的結(jié)合位點結(jié)合鐵。本發(fā)明的鐵螯合化合物也可以是三配位基(tridentate)、四配位基(tetradentate)或更高數(shù)量級的多配位基鐵螯合化合物，它們分別用三個、四個或更多個獨立的結(jié)合位點結(jié)合鐵。本發(fā)明的鐵螯合化合物包括可以結(jié)合所有氧化態(tài)鐵的螯合化合物，所述氧化態(tài)的鐵包括，例如鐵(-II)態(tài)、鐵(-I)態(tài)、鐵(0)態(tài)、鐵(I)態(tài)、鐵(II)態(tài)(亞鐵)、鐵(III)態(tài)(三價鐵)、鐵(IV)態(tài)(高鐵(ferryl))和/或鐵(V)。鐵螯合療法指的是使用鐵螯合劑與體內(nèi)的鐵結(jié)合形成鐵螯合物，以便鐵失去其毒性作用或逆轉(zhuǎn)生理活性?？蛇x地，螯合的鐵對感染的生物體不可用。用在本發(fā)明組合物中的鐵螯合化合物可以包括任何螯合劑或能夠結(jié)合并防止鐵被靶向的真菌或多種真菌使用的其它分子。本發(fā)明的組合物中包含的鐵螯合化合物的具體實例包括，例如去鐵酮和地拉羅司。這些示例性的鐵螯合化合物特別有用，因為它們己經(jīng)在多個國家被批準(zhǔn)用作與真菌病癥不相關(guān)的治療適應(yīng)癥，并且因此被良好表征，在人類中是安全且無毒的。術(shù)語"去鐵酮"，用在本文意欲表示具有1,2二甲基-3-羥基吡啶-4-1(1,2dimethyl-3-hydroxypyrid-4-l)結(jié)構(gòu)的螯合化合物。去鐵酮(Def)在本領(lǐng)域內(nèi)也為稱為L1、CP20、Ferriprox或Kelfer。去鐵酮是a-酮羥基吡啶類鐵螯合劑的成員，并且可從例如，Apotex，Inc.(Weston,Ontario,加拿大)商業(yè)獲得。術(shù)語"地拉羅司"，用在本文意欲表示具有4-[3，5-雙(2-羥基苯基)-lH-l,2,4-三唑-l-基]-苯甲酸結(jié)構(gòu)并具有373.4道爾頓分子量的鐵螯合化合物。地拉羅司，在本領(lǐng)域內(nèi)也為稱為Exjade⑥或ICL670，是三配位基鐵螯合劑類別的成員，所述三配位基鐵螯合劑類別稱為N-取代的雙-羥基苯基-三唑。地拉羅司可從，例如Novartis,Corp.(Basel,瑞士)，以例如Exjade⑧的商標(biāo)商業(yè)獲得。依據(jù)本發(fā)明，術(shù)語"地拉羅司"、"ICL670"、"Exjade⑧"意欲表示活性成分4-[3,5-雙(2-羥基苯基)-lH-l,2,4-三唑-l-基]-苯甲酸，例如4-[3，5-雙(2-羥基苯基)-lH-l,2,4-三唑-l-基]-苯甲酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。地拉羅司，其生產(chǎn)方法及其用途在，例如美國專利號6,465,504Bl和6,595,750B2中，并在歐洲專利號EP0914118中描述。含有4-[3,5-雙(2-羥基苯基)-lH-l,2，4-三唑-l-基]-苯甲酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物制劑在例如，國際專利申請WO2004/035026中描述。其它鐵螯合化合物也可以被包含在本發(fā)明的組合物中。這些其它鐵螯合化合物在本領(lǐng)域內(nèi)被公知并且包括，例如，天然存在的鐵載體和異鐵載體，例如下文所述的那些，以及非天然存在的化合物，如去鐵酮和地拉羅司。非天然存在的鐵螯合化合物由羥基吡啶-4-酮(HPO)類螯合劑的成員，如去鐵酮；N-取代的雙羥基苯基-三唑類螯合劑的成員，如地拉羅司；二(-l,2)亞乙基三胺五乙酸(DTPA)和去鐵胺示例。去鐵酮、地拉羅司和任意上述示例性的鐵螯合化合物，以及本領(lǐng)域公知的其它螯合劑可以被包括在本發(fā)明的包含鐵螯合化合物的組合物中?！?035]鐵載體和異鐵載體包括，例如，異羥躬酸酯(hydroxamate)和聚羧酸酯(polycarboxylate)。異羥肟酸酯包含N-5-羥基鳥氨酸(hydroxyomithine)部分，并且一般地被分為四個示例性的家族。一個類別包括紅酵母酸，它是N-S-乙?；?L-NS-羥基鳥氨酸的二酮哌嗪。包括在本類別中的有衍生物，如被稱為dimemmaeid的二異羥月虧酸(dihydroxamate)。第二類包括糞生素，其包含！^-5-?；?>^5-羥基-L-鳥氨酸部分。糞生素也可以被認(rèn)為是具有線性結(jié)構(gòu)的紅酵母酸的三異羥肟酸衍生物。第三類包括鐵色素，其包括含有N-S-?；?N-5-羥基鳥氨酸和甘氨酸、絲氨酸或丙氨酸組合的三肽的環(huán)肽。第四個示例性的類別包括鐮刀霉氨酸，也被稱為梭原素(fusigen)，其可以是線性或環(huán)狀異羥肟酸酯。鐮刀霉氨酸是由被甲羥戊酸酐(anhydromevalonicacid)N-酰化的N-羥基鳥氨酸表征的化合物。聚羧酸酯包括含有檸檬酸的聚羧酸酯，被稱為rhizoferrin。該分子含有兩個連接到二氨基丁烷上的檸檬酸單元。Rhizoferrin廣泛分布在接合菌門(Zygomycota)的成員中，已經(jīng)在毛霉目和蟲霉目(Entomophthorales)中觀察到。用作本發(fā)明組合物中的鐵螯合化合物的其它類的鐵載體包括，例如，酚鹽-兒茶酚鹽(catecholate)類鐵載體、氯高鐵血紅素和P-酮醛植物毒素。本發(fā)明組合物中包含的鐵螯合化合物的量可以變化，但是一般地為治療有效量或可以被重構(gòu)或稀釋到治療有效量的量。例如，有效量的本發(fā)明所述鐵螯合化合物在下文針對本發(fā)明的方法進一步描述。一定量的一種、一些或所有鐵螯合化合物可以被配制在本發(fā)明的組合物中，以對應(yīng)這些示例性的有效量。鐵螯合化合物也可以以高于治療有效量的量被配制在本發(fā)明的組合物中，用于短期或長期儲存，并且終端用戶可以在使用前稀釋該制劑到期望的治療有效量。可選地，本發(fā)明組合物中包含的鐵螯合化合物可以被凍干或以粉末或其它固體形式生產(chǎn)，并且終端用戶可以在使用前將該干燥制劑重構(gòu)到期望的治療有效量。干燥或濃縮的制劑或含有有效量成分的制劑可以僅包含鐵螯合化合物和抗真菌劑，或包含鐵螯合化合物和抗真菌劑與任何期望的賦形劑、表面活性劑、張力劑(tonicifier)、鹽或緩沖劑。稀釋或重構(gòu)可以在藥學(xué)上可接受的介質(zhì)中進行，所述介質(zhì)調(diào)節(jié)該制劑為期望治療有效量的至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑，并且包括任何其它賦形劑、表面活性劑、張力劑、鹽或緩沖劑。藥物制劑被公知并且在藥學(xué)中實施。任何這樣的公知制劑和藥物制劑組分可與本發(fā)明的組合物一起使用。藥物制劑、賦形劑、它們的用途、制劑和性質(zhì)在本領(lǐng)域中是公知的，并且可以發(fā)現(xiàn)在，例如，ie/m'wgto":7Tze5We"ce尸mc"ceo/尸/wrwac乂13上文；Williams等,Foyek尸n'"c^/e51o/A/eWc/wa/C7^w/W7,5thEd.,LippincottWilliams&Wilkins(2002);Allen等，爿騰/sP/wraflc贈'ca/Fomwcr"c/Z)，8thEd.,LippincottWilliams&Wilkins(2004)中描述。相似地，表面活性劑、它們的用途、制劑和性質(zhì)在本領(lǐng)域中是公知的，并且可以發(fā)現(xiàn)在，例々口,Holmberg等，Sw;/ac/awAawt/尸ofy附ery/"jgi/eowsSb/w"'o",上文；Swr/actowh..爿尸m"/a//Zfo"c/6ooA;,K.RobertLange,ed.,上文禾口Vogel,A.I.,Foge/rex/6ooAo//mc/Zc"/Orgam'cC/2e/m'Wr乂上文中描述。本發(fā)明所述的組合物也包括至少一種抗真菌劑。術(shù)語"抗真菌劑"或"抗真菌"，用在本文意欲表示殺死真菌，或抑制或預(yù)防真菌生長、存活和/或毒性的藥劑?？拐婢鷦┦纠缘念悇e包括多烯抗真菌劑、吡咯抗真菌劑和棘白菌素(echinocandin)抗真菌劑。多烯抗真菌劑的具體實例包括兩性霉素B脫氧膽酸鹽、脂質(zhì)體兩性霉素B、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體和兩性霉素B硫酸膽甾醇酯(amphotec)。吡咯抗真菌劑的具體實例包括泊沙康唑(posaconazole)、伏立康唑(voriconazole)、氟康唑(fluconazole)和伊曲康唑(itraconazole)。棘白菌素抗真菌劑的具體實例包括醋酸卡泊芬凈(caspofonginacetate)和米卡芬凈(micafimgin)。大量的其它抗真菌劑在本領(lǐng)域內(nèi)被公知，并且被包括在如本文所用的術(shù)語的含義中。至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑的組合依賴于待靶向的真菌病癥被選擇。例如，兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體可以是對抗，例如接合菌病(zygomycosis)、毛霉病、曲霉病(aspergillosis)禾口/或念珠菌病(candidiasis)的良好的抗真菌劑，并且可以與諸如去鐵酮或地拉羅司的鐵螯合化合物組合。相似地，上文示例的抗真菌劑之一或本領(lǐng)域公知的另一種藥劑在對抗另一目標(biāo)病癥方面可以是有效的或治療上理想的，并且這些其它抗真菌劑之一可以與鐵螯合化合物組合，以產(chǎn)生本發(fā)明的組合物。因此，本發(fā)明所述的組合物在它們鐵螯合化合物成分和抗真菌劑成分方面都是靈活的，并且允許至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑的任意或全部組合及改變被合并為，例如，單一制劑。因此，在一種實施方式中，本發(fā)明提供了一種組合物，其包括至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。所述鐵螯合化合物可以選自，例如，由羥基妣啶-4-酮(HPO)類螯合劑的成員，如去鐵酮；N-取代雙羥基苯基-三唑類螯合劑的成員，如地拉羅司；二(-l,2)亞乙基三胺五乙酸(DTPA)和去鐵胺示例的前述非天然存在的鐵螯合化合物。鐵螯合化合物也可以選自，例如，由例如前述異羥肟酸酯、聚羧酸酯、酚鹽-兒茶酚鹽類鐵載體、氯高鐵血紅素或P-酮醛植物毒素示例的鐵載體和/或異鐵載體。所述抗真菌劑可以選自，例如，多烯抗真菌劑，如兩性霉素B脫氧膽酸鹽、脂質(zhì)體兩性霉素B、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體或兩性霉素B硫酸膽甾醇酯(amphotec)。所述抗真菌劑也可以選自，例如，吡咯抗真菌劑，如泊沙康唑、伏立康唑、氟康唑或伊曲康唑。所述抗真菌劑也可以另外地選自，例如，棘白菌素抗真菌劑，如醋酸卡泊芬凈或米卡芬凈。示例性的本發(fā)明的組合物可以是地拉羅司和兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體，該組合物對于至少一種鐵螯合化合物具有一種鐵螯合化合物，并且對于至少一種抗真菌劑具有一種抗真菌劑。對于本發(fā)明組合物中包含的鐵螯合化合物的量，該組合物中包含的抗真菌劑的量也可以變化，但是一般地為治療有效量或可以被重構(gòu)或稀釋到治療有效量的量。例如，本發(fā)明所述抗真菌劑的有效量在下文進一步描述，并且參考多烯抗真菌劑示例。一定量的一種、一些或所有抗真菌劑可以被配制進本發(fā)明的組合物中，以對應(yīng)于多烯抗真菌劑的這些示例性的有效量，或?qū)?yīng)于其它抗真菌劑，如吡咯抗真菌劑或棘白菌素抗真菌劑公知的有效量。相似地，并且如前文關(guān)于本發(fā)明組合物中包含的鐵螯合化合物所述，抗真菌劑也可以以用于短期或長期儲存的濃縮形式被配制進本發(fā)明的組合物中，并且終端用戶可以在使用前稀釋該制劑到期望的治療有效量。此外，本發(fā)明組合物中包含的抗真菌劑可以以凍干、粉末或其它固體的形式被生產(chǎn)，并且終端用戶可以在使用前重構(gòu)該干燥制劑到期望的治療有效量。干燥或濃縮的制劑或含有有效量成分的制劑可以僅包含鐵螯合化合物和抗真菌劑，或包含鐵螯合化合物和抗真菌劑與任何期望的賦形劑、表面活性劑、張力劑(tonicifier)、鹽或緩沖劑。稀釋或重構(gòu)可以按前文所述進行，并且在，例如，7em/"gto":77zeSc/e"cea"t/戶rac"'ceo/尸A"rmo^y,上文；Williams等，F(xiàn)oye、iV/"c^/eso/MetZ/d"a/C/7em/W/7,第5版,LippincottWilliams&Wilkins(2002);Allen等，v4朋e/s/7w/7nacew"'ca/Z)o鄉(xiāng)eZ)rwgZ)eZ/veAy5)^/e柳，第8版，LippincottWilliams&Wilkins(2004);Holmberg等，5W/fl"a脅"尸o/，e/^v4拜ows5b/Wo",上文；SW/a"a她爿Prac"'ca/T/a"必ooA:,K,RobertLange,ed.,上文和Vogel,A丄，7oge/'srexAoc^o/Pracrica/(>gam'cC/7em"^y,上文'中被示例。本發(fā)明的組合物可以額外地包含兩種或更多種鐵螯合化合物。兩種或更多種鐵螯合化合物的包含允許靶向多種真菌病癥和/或在該組合物的鐵螯合組分中提供包含一系列鐵親和性。具有不同鐵親和性的鐵螯合化合物的包含可以是治療有益的，以進一步預(yù)防真菌病原體的逃避。本發(fā)明的組合物一般地包含約l-8種之間，特別地約2-7種之間，更特別地約3-6種之間，或甚至更特別地約4-5種之間的鐵螯合化合物。超出這些范圍或在這些范圍之間中的鐵螯合化合物也可以用在本發(fā)明的組合物中。例如，本發(fā)明的組合物可以被生產(chǎn)為含有基本上任意期望數(shù)量的不同種鐵螯合化合物，包括，例如l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12或更多種。本發(fā)明所述的組合物可以額外地包含兩種或更多種抗真菌劑。與包含兩種或更多種鐵螯合化合物一樣，包含兩種或更多種抗真菌劑也允許靶向多種真菌病癥和/或提供靶向用于生長、存活或毒性的不同真菌機理。多種抗真菌劑的包含可以相似地是治療上有益的，以進一步防止真菌病原體的逃避。相似地，本發(fā)明的組合物一般地包含約l-8種之間，特別地約2-7種之間，更特別地約3-6種之間，或甚至更特別地約4-5種之間的抗真菌劑。超出這些范圍或在這些范圍之間中的抗真菌劑也可以用在本發(fā)明的組合物中。因此，本發(fā)明的組合物可以被生產(chǎn)為含有基本上任意期望數(shù)量的不同抗真菌劑，包括，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12或更多種。示例性的組合物包括地拉羅司；和兩性霉素B脫氧膽酸鹽、脂質(zhì)體兩性霉素B、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體、兩性霉素B硫酸膽甾醇酯(amphotec)、泊沙康唑、伏立康唑、氟康唑、伊曲康唑、醋酸卡泊芬凈或米卡芬凈中任意的一種或多種。地拉羅司和去鐵酮，以及兩性霉素B脫氧膽酸鹽、脂質(zhì)體兩性霉素B、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體、兩性霉素B硫酸膽甾醇酯、泊沙康唑、伏立康唑、氟康唑、伊曲康唑、醋酸卡泊芬凈或米卡芬凈中任意的一種或多種。特別有用的組合物包括，例如地拉羅司和/或去鐵酮，和一種、兩種或三種或更多種抗真菌劑，其選自對應(yīng)于多烯抗真菌劑、吡咯抗真菌劑和棘白菌素抗真菌劑的每一類別。因此，本發(fā)明提供了1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12或更多種鐵螯合化合物的任意組合與l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12或更多種抗真菌劑的任意組合。含有多種鐵螯合化合物和/或多種抗真菌劑的這些組合物可以按前文所述配制。本發(fā)明的組合物也包括藥學(xué)上可接受的介質(zhì)。用在這里，術(shù)語"藥學(xué)上可接受的介質(zhì)"意欲表示與本發(fā)明的鐵螯合化合物混合的介質(zhì)的純度和質(zhì)量足以用于人體。藥學(xué)上可接受的介質(zhì)包括基本不含污染顆粒和生物體的制劑。因此，該術(shù)語意欲包含與本發(fā)明的鐵螯合化合物相容，并且在給予人體時安全且無毒的介質(zhì)。這樣的藥學(xué)上可接受的介質(zhì)在本領(lǐng)域內(nèi)被公知。本發(fā)明也提供了治療或預(yù)防真菌病癥的方法。該方法包括給予患有或易患真菌病癥的個體治療有效量的至少一種鐵螯合化合物充足的時間，以降低真菌病癥的嚴(yán)重性，其中所述鐵螯合化合物包含與該真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體。本發(fā)明額外地提供了治療或預(yù)防真菌病癥的方法，其包括給予患有或易患真菌病癥的個體，治療有效量的至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑充足的時間，以降低真菌病癥的嚴(yán)重性，其中所述鐵螯合化合物包含與該真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體。本發(fā)明的方法包括僅使用鐵螯合療法或使用鐵螯合療法與抗真菌療法組合。在前者的方法中，包含至少一種鐵螯合化合物的制劑被施用。在后者的方法中，包含至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑的制劑被施用。這樣的制劑按前文關(guān)于本發(fā)明組合物所述進行選擇和制備。因此，本發(fā)明的組合物可以16在沒有至少一種抗真菌劑的情況下被制備，用于僅使用鐵螯合療法的用途中；或其可以與至少一種抗真菌劑一起制備，用在鐵螯合與抗真菌療法組合的用途中。本發(fā)明的第一種組合物可以在沒有至少一種抗真菌劑的情況下被制備，并且本發(fā)明的第二種組合物可以在沒有鐵螯合化合物的情況下被制備。第一種和第二種制劑可以隨后被同時、順序使用，或可選地用于鐵螯合和抗真菌療法的組合。因此，前文關(guān)于本發(fā)明組合物的教導(dǎo)和指導(dǎo)可以被相似地采用，用于選擇和制備僅含有至少一種鐵螯合化合物的制劑，含有至少一種抗真菌劑的制劑，或含有兩者的制劑。對于本發(fā)明方法的使用，含有至少一種鐵螯合化合物的制劑中的鐵螯合化合物，含有至少一種鐵螯合化合物的第一或第二種制劑和/或本發(fā)明的組合物被選擇，以便包含與真菌病癥或引起該病癥的真菌試劑相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體。術(shù)語"鐵載體"，用在本文意欲表示促進鐵被生物體聚集的鐵螯合劑。例如，在鐵缺乏的情況下，許多真菌合成鐵載體，其通過鐵結(jié)合和攝入在鐵聚集中發(fā)揮作用。鐵載體通常是低分子量的化合物(如，小于約2,000MW)，并且可以顯示出細胞攝取和/或鐵儲存功能的一種或兩種。鐵載體由利用中的生物體合成。與通常在不提及生物或種特異性的情況下使用的術(shù)語"鐵螯合劑"相比，術(shù)語"鐵載體"用在本文表示與生成和利用鐵載體的生物體或種相關(guān)或關(guān)聯(lián)的鐵螯合劑。因此，盡管鐵螯合的鐵載體結(jié)合并降低來自細胞外環(huán)境中的鐵水平，因為它們促進鐵攝取并被病原體使用，當(dāng)用于鐵螯合療法中靶向由生成鐵載體的生物體產(chǎn)生的病癥時，它們具有減小的治療價值。鐵載體的合成和使用可以被在發(fā)現(xiàn)，例如，Howard,D.H.,C/z'w'ca/Mz.cro6/o/ogyWev/ews12:394-404(1999)中描述。術(shù)語"異鐵載體"，用在本文意欲表示并非由利用的真菌或生物體產(chǎn)生的鐵載體。術(shù)語"異鐵載體"表示與利用異鐵載體的生物體或種關(guān)聯(lián)或相關(guān)的鐵螯合劑。與鐵載體類似，當(dāng)用于靶向由非利用生物體引起的病癥的鐵螯合療法時，異鐵載體顯示出治療價值。鐵載體和異鐵載體的合成和使用可以被發(fā)現(xiàn)在，例如，Howard,D.H.，F(xiàn)￡MS/mww"o/ogyMa/z'ca/Mz'cro6/o/ogy40:95-100(2004)中描述。因此，對應(yīng)于與靶向的真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體的鐵螯合化合物指的是并非由引起該真菌病癥的真菌試劑產(chǎn)生或利用的鐵載體，或指的是并非由引起該真菌病癥的真菌試劑利用的異鐵載體。本發(fā)明所述的包含第一和第二成分制備物的鐵螯合制劑、組合物和方法應(yīng)用于治療、降低嚴(yán)重性、防止或治愈真菌病癥。本發(fā)明所述的鐵螯合制劑、組合物和方法的特別有用的應(yīng)用包括在真菌病癥發(fā)病前預(yù)防性的給藥。術(shù)語"治療(treating)"或"治療(treatment)"，用在本文意欲指表示真菌病癥的臨床癥狀的緩解。臨床癥狀的緩解包括，例如，與治療前水平相比或與患有真菌病癥的個體相比，在治療的個體中真菌病癥的至少一種癥狀的減輕或降低。術(shù)語"治療"也意欲包括病理狀態(tài)、慢性并發(fā)癥或與真菌病癥相關(guān)的機會性真菌感染的嚴(yán)重程度的降低。這樣的病理狀態(tài)、慢性并發(fā)癥或機會性感染在下文關(guān)于毛霉病示例。毛霉病和其它這樣的病理狀態(tài)、慢性并發(fā)癥和機會性感染也可以被發(fā)現(xiàn)描述在，例如，MerckManual,SixteenthEdition,1992和Spellberg等，C//m.M/cwWo.18:556-69(2005)中。可通過本發(fā)明的方法緩解的真菌病癥的癥狀包括，例如，發(fā)熱，寒戰(zhàn)，盜汗，厭食癥，體重減輕，不適，抑郁和肺部、皮膚或其它損害。其它癥狀或典型的表現(xiàn)包括，例如，從原發(fā)病灶的擴散、急性或亞急性發(fā)作(presentation)、進行性肺炎、真菌血癥、肺外擴散的表現(xiàn)、慢性腦膜炎、廣泛涉及網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(肝臟、脾臟、骨髓)的進行性擴散的組織胞漿菌病，和單發(fā)或多發(fā)皮膚損傷的芽生菌病?；加姓婢“Y的個體的有效治療，例如，將在被治療的個體中產(chǎn)生一種或多種這些癥狀的減輕。真菌病癥的多種其它臨床癥狀在本領(lǐng)域內(nèi)被公知，并且也可以用作使用本文所述的發(fā)明方法后，真菌病癥嚴(yán)重性緩解或降低的量度。真菌病癥的診斷可以通過從，例如，唾液、尿液、血液、骨髓或來自被感染組織的樣品中分離成因性真菌來證實。例如，真菌感染可以基于侵入真菌的獨特形態(tài)特征和/或通過免疫組化和對識別抗原的相似選擇，以高度可靠性通過組織病理學(xué)方法進行診斷。感染活性的評估也可以基于從多個不同位點采集的培養(yǎng)物、發(fā)熱、白細胞數(shù)、與具體涉及器官相關(guān)的臨床和實驗室參數(shù)(如肝功能測試)和免疫血清學(xué)檢測。陽性唾液培養(yǎng)的臨床意義也可以通過組織侵染(tissueinvasion)的證實而確認(rèn)。這樣的確認(rèn)對共生的生物，如白色念珠菌(Omc^faa/Wcww)或?qū)Νh(huán)境中普遍的那些生物體，如曲霉屬某種(A/^g!7/^平)特別有益。術(shù)語"預(yù)防(preventing)"或"預(yù)防(prevention)"，用在本文意欲指對表示真菌病癥的臨床癥狀的預(yù)先防止。這樣的預(yù)防包括，例如，在該病癥的明顯癥狀發(fā)展之前或在該病癥的診斷之前，在有被真菌或多種真菌感染風(fēng)險的個體中維持正常的生理指征。因此，術(shù)語"預(yù)防"包括個體的預(yù)防性治療，以預(yù)防他們發(fā)生真菌病癥。在個體中預(yù)防真菌病癥也意欲包括抑制或阻止真菌病癥的發(fā)展。抑制或阻止該病癥的發(fā)展包括，例如，抑制或阻止不正常生理指征或臨床癥狀的發(fā)生，如上文所述和/或本領(lǐng)域公知的那些。因此，真菌病癥的有效預(yù)防包括維持正常的體溫、體重、生理狀態(tài)，以及在對真菌病癥易感的個體中缺少如上文所述的損傷或其它病理表現(xiàn)。對真菌病癥易感的個體包括，例如，患有AIDS、氮質(zhì)血癥、糖尿病、支氣管擴張癥、肺氣腫、TB、淋巴瘤、白血病或燒傷的個體，或有易感真菌病癥史的個體。抑制或阻止病癥的發(fā)展也包括，例如，抑制或阻止一種或多種病理狀況、慢性并發(fā)癥或?qū)εc真菌病癥相關(guān)的機會性感染的易感性的發(fā)展。本發(fā)明所述的方法用于多種真菌病癥的治療和/或預(yù)防。術(shù)語"真菌病癥"，用在本文意欲表示由真菌感染引起的異常狀況。人和動物的真菌感染或真菌病(mycoses)包括，例如，影響皮膚外層的表面真菌感染；包括口腔(真菌性口炎)、陰道和肛門區(qū)域的粘膜真菌感染，例如由白色假絲酵母引起的那些；和影響皮膚深層和內(nèi)部器官、能夠引起嚴(yán)重，通常是致死疾病的真菌感染。真菌感染在本領(lǐng)域內(nèi)己知并包括，例如，接合菌病、曲霉病、隱球菌病(cryptococcosis)、念珠菌病(candidiasis)、組織胞漿菌病、球孢子菌病(coccidiomycosis)、副球孢子菌病(paracoccidiodomycosis)、鐮刀菌病(fusariosis)(透明絲孢菌病(hyalohyphomycoses))、芽生菌病(blastomycosis)、青霉病(penicilliosis)或孢子絲菌病(sporotrichosis)。這些和其它真菌感染可以在，例如，MerckManual,SixteenthEdition,1992和Spellberg等，C7/w.M/cwZ>/o.Wev.18:556-69(2005)中找到描述。上述示例性的真菌病癥在下文進一步描述。用在這里，術(shù)語"接合菌病"意欲表示由接合菌綱，包括毛霉目和蟲霉目的真菌引起的真菌病癥。蟲霉目是已知為蟲霉菌病的皮下和粘膜皮膚感染的病因，其嚴(yán)重地折磨發(fā)展中國家的免疫活性宿主。用在這里，術(shù)語"毛霉病"意欲表示由毛霉目真菌引起的真菌病癥。毛霉病是威脅生命的真菌感染，其幾乎一致地影響發(fā)展中或工業(yè)化國家中免疫受損的宿主。屬于毛霉目的真菌被分為六個科，它們?nèi)慷寄軌蛞鹌つw和深部感染。屬于毛霉科的種比任何其它科更經(jīng)常從患有毛霉病的患者中分離。在毛霉科中，米根霉(少根根霉)是感染的常見病因。引起相似感染譜的毛霉科其它示例性的禾中包括，例如，小孢子根霉變體(T^opiw/m'cmspon'aWn'zopoA/omH'W、傘拔革J頭霉64fe/cfecw7w&/era)、雅致鱗質(zhì)霉(々op々戸o附y(tǒng)c^e/ega朋)、毛霉屬(Mwcw)的種、微小根毛霉(朋feomwcw/7歸7/M)和小克銀漢霉屬某些種(0/"m'"g/wme//a(小克銀漢霉科)。毛霉病在本領(lǐng)域內(nèi)被公知并且包括，例如，鼻腦型(rinocerebral)毛霉病、肺部毛霉病、胃腸毛霉病、彌散性毛霉病、骨毛霉病、縱膈毛霉病、氣管毛霉病、腎臟毛霉病、腹膜毛霉病、上腔靜脈毛霉病或外耳炎毛霉病。用在這里，術(shù)語"念珠菌病"意欲表示由假絲酵母屬的真菌引起的真菌病癥。念珠菌病可以發(fā)生在皮膚和口腔、呼吸道和/或陰道的粘膜中，并侵入血液，特別是在免疫受損的個體中。念珠菌病(Candidiasis)在本領(lǐng)域也被已知為念珠菌病(candidosis)或念珠菌病(moniliasis)。假絲酵母屬的示例性種包括，例如，白色假絲酵母(白色念珠菌)、克魯斯假絲酵母(Ow力Wa^T^e!')、熱帶假絲酵母(Ow^fo加/7/c"fc)、光滑假絲酵母(C"mM"g/Wrato)和近平滑假絲酵母用在這里，術(shù)語"曲霉病"意欲表示由曲霉屬引起的一組疾病。癥狀包括，例如，發(fā)熱、咳嗽、胸部疼痛和/或呼吸急促。免疫系統(tǒng)被減弱的患者或患有肺部病癥的患者對曲霉病特別易感。這些真菌病癥的示例性形式包括過敏性曲霉病，其影響哮喘、囊腫性纖維化和鼻竇炎的患者；急性侵襲性曲霉病，其在免疫力減弱的患者中，如癌癥患者，進行化療的患者和AIDS患者中顯示出增高的發(fā)病率；彌散性侵襲性曲霉病，其遍布整個身體；和機會性曲霉感染，其由炎癥和耳和其它器官的損傷表征。曲霉是約200種真菌的屬。引起侵襲性疾病的曲霉種類包括，例如，煙曲霉"^^"g/〃M/wm'gaftw)和黃曲霉(A/wg///1^/7avw;y)。引起過敏性疾病的曲霉種包括，例如，煙曲霉和棒曲霉UweW〃Mc/avato)。其它示例性的曲霉感染性種包括，例如，土曲霉U^^^/wW^Te^)和構(gòu)巢曲霉用在這里，術(shù)語"隱球菌病"意欲表示由隱球菌屬引起的真菌病癥。隱球菌病，也被稱為布-布二氏病(Busse-Buschkedisease)，通常表現(xiàn)為全身感染，其能夠影響身體的任何器官包括，例如，肺臟、皮膚或其它身體器官，但是最通常發(fā)生在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，例如腦和腦膜。盡管患有霍奇金氏病或其它淋巴瘤或結(jié)節(jié)病的患者，或接受長期皮質(zhì)甾類療法的那些患者也有增高的風(fēng)險，隱球菌病對于AIDS是機會性感染。癥狀包括，例如，胸部疼痛、干咳、腹部腫脹、頭痛、視力模糊和混亂。該真菌病癥的示例性形式包括皮膚隱球菌病，例如發(fā)生在傷口的那些，肺部隱球菌病和隱球菌腦膜炎。隱球菌腦膜炎可能起因于新型隱球菌(07^0cocc^"eo/or附a朋)的擴散，所述新型隱球菌來自通常在免疫受損患者中觀察到的或未意識到的肺部感染。格特隱球菌(C.ga衍/)通常在免疫活性人群中引起感染。通過CSF、唾液和尿液的培養(yǎng)物檢測隱球菌抗原(莢膜物質(zhì))的提供了一種有用的診斷方法。在重度感染中，血液培養(yǎng)物也可以是陽性的。用在這里，術(shù)語"組織胞漿菌病"意欲表示由組織胞漿菌屬(州加/7/"畑")引起的真菌病癥，包括吸入莢膜組織胞漿菌(///加p/cw廳ca戸w/加,)孢子的引起的感染疾病。組織胞漿菌病在本領(lǐng)域也被已知為達林氏病(Darling'sdisease)。該病癥可以是無癥狀的，但是也可以發(fā)展為急性肺炎或流感樣疾病，主要影響肺部。組織胞漿菌病也可以擴散到身體中的其它器官和系統(tǒng)。與其它彌散性形式的真菌病癥一樣，彌散性組織胞漿菌病可以是致死的。癥狀可以在暴露后3到17天之內(nèi)發(fā)生。然而，在非彌散性的形式中，常見的是感染的個體不顯示明顯的疾病效應(yīng)。急性呼吸疾病可以通過呼吸癥狀、普通病癥感覺、發(fā)熱、胸部疼痛和干咳或無痰干咳(nonproductivecough)表征。在胸部x光中也可以看到獨特的形式。慢性肺部疾病與肺結(jié)核相似，并且可以在數(shù)月或數(shù)年中惡化。用在這里，術(shù)語"球孢子菌病"意欲表示由球孢子菌(CoccWo/cfe)屬引起的真菌病癥。該術(shù)語的含義中包括由粗球孢子菌(Cocdc/!'o,'cfez7wm'to)或C./w"J"w7，特別是通過孢子的吸入引起的感染性呼吸疾病，其由發(fā)熱和多種呼吸癥狀表征。球孢子菌病在本領(lǐng)域也被已知為球孢子菌病(coccidioidomycosis)和山谷熱(valleyfever)。全身性球孢子菌病可以從呼吸道傳播到，例如，皮膚、骨骼和中樞神經(jīng)系統(tǒng)。該病癥的表現(xiàn)范圍從完全沒有癥狀到全身性感染和死亡。例如，20癥狀性感染(約40%的病例)可以存在有發(fā)燒、咳嗽、頭痛、皮疹和肌痛(肌肉痛)的流感樣癥狀。一些患者會無法康復(fù)并且發(fā)展成慢性肺部感染或廣泛彌散性感染(影響腦膜、軟組織、關(guān)節(jié)和骨骼)。嚴(yán)重的肺部疾病可以發(fā)生在，例如，HIV感染和其它免疫受損的人中。用在這里，術(shù)語"副球孢子菌病"意欲表示由副球孢子菌屬引起的真菌病癥，包括，例如由巴西副球孢子菌(ParacoccWo/^y6raw7/m^)引起的慢性真菌病。副球孢子菌病由肺部的原發(fā)損傷與擴散到多個內(nèi)部器官來表征，由臉頰和鼻粘膜的明顯潰瘍性肉芽腫病(granulomas)與向皮膚的擴散表征，以及由泛發(fā)淋巴管炎表征。副球孢子菌病(Paracoccidiomycosis)在本領(lǐng)域內(nèi)也被已知為副球孢子菌病(paracoccidioidomycosis)、阿耳梅達病、Lutz-Splendore-Almeida病、畐U球孢子菌性肉芽腫和南美芽生菌病。用在這里，術(shù)語"鐮刀菌病"或"透明絲狀霉菌病"意欲表示由鐮刀霉屬引起的真菌病癥。引起這些病癥的鐮刀霉屬的種包括，例如，腐皮鐮刀霉(F.w/a"/)、尖孢鐮刀霉(F.oxwon/m)和串珠鐮刀霉(尸.wom'/z/omze)。感染包括角膜炎、甲真菌病(onychomycosis)和偶發(fā)性腹膜炎和蜂窩組織炎。彌散性鐮刀菌病的危險因子包括嚴(yán)重的免疫抑制(嗜中性白細胞減少癥、淋巴細胞減少癥、移植物抗宿主病、皮質(zhì)激素)，群集(colonisation)和組織損傷。在免疫活性的患者中，組織損傷(由外傷、嚴(yán)重?zé)齻蛲庠次矬w引起)是鐮刀菌病的危險因子。臨床表現(xiàn)包括持續(xù)高熱、皮膚損傷和竇肺(sino-pulmonary)感染。皮膚損傷在多數(shù)患者中可以診斷到，并在約5天的時間里發(fā)生真菌血癥。彌散性鐮刀菌病可以通過，例如，血液培養(yǎng)物及上文和下文所述的其它公知方法診斷。用在這里，術(shù)語"芽生菌病"意欲表示由芽生菌屬引起的真菌病癥，其一般開始于呼吸感染，并通常擴散到肺、骨骼和皮膚。芽生菌病通過皮膚、粘膜或內(nèi)部器官的多處炎癥性損傷表征。皮炎芽生菌(別a加wyc^t/mw"加Vfo)是一種流行的致病性種。芽生菌病的癥狀包括，例如，有發(fā)熱、寒戰(zhàn)、肌肉痛、頭痛和無痰千咳的感冒樣病癥；與細菌性肺炎相似的急性疾病，具有高熱、寒戰(zhàn)、排痰性咳嗽和胸膜炎性胸痛的癥狀；與肺結(jié)核或肺癌相似的慢性疾病，具有低熱、排痰性咳嗽、盜汗和體重減輕的癥狀；表現(xiàn)為ARDS的快速、進行性且嚴(yán)重的疾病，具有發(fā)熱、呼吸短促、呼吸急促、低氧血癥和彌散性肺浸潤；皮膚損傷；骨溶解損傷(bonelyticlesions);前列腺炎，和/或涉及喉部的引起嘶啞。用在這里，術(shù)語"青霉病"意欲表示由青霉屬引起的真菌病癥。示例性的種是馬爾尼菲青霉菌(戸"/d///,,r"ei^,')，它是免疫受損個體中機會性真菌感染的主要病因。診斷可以通過鑒定來自臨床樣品的真菌進行。皮膚損傷、淋巴結(jié)和骨髓的活檢可以在組織病理學(xué)中顯示出生物體的存在。癥狀包括，例如，發(fā)熱、皮膚損傷、貧血、泛發(fā)淋巴結(jié)病和肝腫大。用在這里，術(shù)語"孢子絲菌病"意欲表示由孢子絲菌屬(SporaAn'x)，包括種申克孢子絲菌(S."/ewcyb7)引起的真菌病癥。該病癥表現(xiàn)為由淋巴結(jié)和皮膚上的結(jié)節(jié)或潰瘍表征的慢性感染。孢子絲菌病感染可以通過血液傳播到其它區(qū)域，包括，例如，關(guān)節(jié)、肺、目艮，和泌尿生殖系統(tǒng)及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的感染。一般地，彌散的孢子絲菌病發(fā)生在免疫受損的個體中，例如患有AIDS、癌癥的患者，進行化療的患者，和免疫抑制療法的移植受者。用在這里，術(shù)語"有效量"或"治療有效量"意欲表示當(dāng)施用于個體時，導(dǎo)致真菌病癥擴散程度、數(shù)量或速度降低所要求的鐵螯合化合物、抗真菌劑或鐵螯合化合物和抗真菌劑兩者的量。因此，當(dāng)用于指代鐵螯合化合物時，有效量意欲表示足以緩解至少一種與目標(biāo)真菌病癥相關(guān)的癥狀的鐵螯合化合物的量。治療有效所需要的本發(fā)明的鐵螯合化合物、抗真菌劑、或鐵螯合化合物和抗真菌劑兩者的劑量取決于，例如，待治療的真菌病癥、鐵螯合化合物對鐵的親和力、鐵的豐度和濃度水平以及該個體的體重和狀況以及先前或同時進行的治療。對于該方法的特定應(yīng)用，被認(rèn)為是有效劑量的合適量可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員使用本文提供的指導(dǎo)確定。例如，這個量可以由下述的體外或體內(nèi)試驗進行預(yù)測。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識到患者的狀況需要在整個治療的過程中被監(jiān)控，并認(rèn)識到施用的組合物的量可以根據(jù)對該治療的反應(yīng)進行調(diào)整。鐵螯合化合物示例性的有效量包括，例如從約0.3-3.0昭/ml的濃度范圍，但是也可以包括低至0.01pg/ml或更低的濃度，以及高至10pg/ml或更高的濃度。要施用的抗真菌劑的量在本領(lǐng)域內(nèi)被公知，并且被包括在本文術(shù)語"有效量"的含義中。在地拉羅司的臨床前研究中，例如，在劑量高達400mg/kg/d的鐵過載絨猿中幾乎沒有觀察到毒性(Nick等雖~.淑.扁.509:185-203(2002))。然而，在以80mg/kg的劑量長期給予非鐵過載絨猿后，觀察到了嚴(yán)重的毒性，這證明了地拉羅司在鐵不過載的宿主中(W.)耐受較差。但是，即使在鐵不過載的絨猿中，在用高達40mg/kg/d的劑量治療39周后沒有觀察到毒性，并且在亞急性治療(4周)期間，高達65mg/kg/d的劑量被良好地耐受，沒有不利作用。在鐵過載患者的臨床研究中(Nisbet陽Brown等丄朋ce/361:1597-1602(2003);Galanello等C//".尸/w醒co/.43:565-572(2003);Cappellini等別ood107:3455-3462(2006))，地拉羅司在高達40mg/kg/d的劑量下被良好地耐受達12天，并且在高達30mg/kg/d的劑量下，在長期給藥中被良好耐受數(shù)月到數(shù)年。—般地，鐵螯合化合物以約0.01-10嗎/ml、約0.1-8pg/ml、約0,2-6嗎/ml、特別地0.3-3.0嗎/ml、更特別地約0.6-2.0ng/ml、甚至更特別地約0.8-1.0昭/ml或約0.9pg/ml的濃度被包括在鐵螯合療法制劑、第一或第二成分制劑和/或本發(fā)明的組合物中。小于、大于或在這些范圍內(nèi)的鐵螯合化合物的濃度和/或量也可以用在鐵螯合療法制劑、第一或第二成分制劑和/或本發(fā)明的組合物中。例如，一種或多種22鐵螯合化合物可以被包括在制劑和組合物中，其構(gòu)成小于約0.1ng/ml。相似地，制劑或組合物可以含有一種或多種濃度大于約10ng/ml的鐵螯合化合物，特別是當(dāng)為儲存而配制時。因此，用在本發(fā)明所述方法中的制劑或組合物可以被生產(chǎn)，其含有實質(zhì)上任意期望濃度或量的一種或多種鐵螯合化合物，包括，例如0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12(ag/ml或更高?？拐婢鷦┦纠缘挠行Я堪?，例如，下文關(guān)于多烯抗真菌劑中示例的那些。例如，兩性霉素B脫氧膽酸鹽一般地以，例如，低于約10mg/kg體重的劑量給藥，并且可以包括約0.25-1.0mg/kg/天的速率，用于靜脈給藥。脂質(zhì)體兩性霉素B(L-AMB)通常以，例如l-5mg/kg的劑量給藥。脂質(zhì)體兩性霉素B也可以以高達15mg/kg/天給藥，特別是在腦疾病中。兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體(ABLC)通常以5mg/kg的劑量給藥，但是可以在約0.5-15mg/kg的范圍內(nèi)。兩性霉素B硫酸膽甾醇酯(Amphotec)通常以約50-100mg的單一劑量給藥。相似地，對于使用鐵螯合化合物和抗真菌劑的組合療法，上述量可以一同施用，或化合物量和/或抗真菌劑量的任一或兩者可以被調(diào)高或調(diào)低。吡咯抗真菌劑和棘白菌素抗真菌劑的有效量相似地被本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知，并且通常包含上述范圍內(nèi)的劑量?！?084]考慮到本文提供的教導(dǎo)和指導(dǎo)，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解上文示例的有效量可以根據(jù)，例如，其它活性成分的類型和劑量被調(diào)整。例如，如果至少一種鐵螯合化合物的劑量在上文示例的高范圍中，如果希望，可以降低至少一種抗真菌劑中的一種或多種的量并同時仍獲得有效量。相似地，如果至少一種抗真菌劑的劑量在上文示例的高范圍中或高于它，如果希望，可以降低至少一種或多種鐵螯合化合物中的一種或多種的量。兩種或更多種鐵螯合化合物的劑量和/或至少一種抗真菌劑的兩種或更多種的劑量可以彼此相關(guān)地調(diào)整。這樣組合的有效量的所有其它調(diào)整可以被用在本發(fā)明所述的方法中。應(yīng)該理解本質(zhì)上不影響本發(fā)明多種實施方式的活性的修改也被包含在本文提供的本發(fā)明的定義中。因此，以下實施例意欲示例而并非限制本發(fā)明。實施例I用于減輕真菌疾病嚴(yán)重性的鐵螯合療法本實施例描述了初步的研究，其顯示出去鐵酮和ExjadeTm能夠降低毛霉病的發(fā)病機理。動物模型已經(jīng)顯示出施用去鐵胺或游離鐵使受根霉(/Wz印m)感染的動物的存活率下降，但是受白色假絲酵母感染的存活率下降較少，這強調(diào)了根霉病原性對鐵的獨特需求(Abe等，M少co/^/zo/og/a110:87-91(1990);Boelaert等,(1993)，上文；Boelaert等，(1994)，上文；VanCutsem和Boelaert,A7<iwe_y/"/em^/o""/36:1061-68(1989))。此外，在血清中從去鐵胺放射性標(biāo)記的鐵攝取的體外研究表明根霉積累比煙曲霉和白色假絲酵母分別高8倍和40倍量的鐵(Bodaert等,(1993),上文)。根霉提高的鐵攝取與其在血清中的生長線性相關(guān)(Bodaert等,(1993)，上文)。血清中提高的生長可以解釋接合菌對直接穿透血管并在血管中生長的特殊親和性，這導(dǎo)致患病期間血栓形成和組織壞死的傾向性(Edwards,(1989)，上文；Ibrahim等，(2003)，上文；Ventura等,上文)。如前文所述，患有糖尿病酮癥酸中毒的患者也有發(fā)生鼻腦型毛霉病的高風(fēng)險。這些患者也具有升高的可用血清鐵水平，相似地由于鐵在酸中毒中存在的情況下從結(jié)合蛋白的釋放(Artis等，上文)。從患有糖尿病酮癥酸中毒的患者收集的血清支持米根霉在酸性pH(7.3-6.88)，而非堿性pH(7.78-8.38)存在下的生長。不支持米根霉在酸性pH下生長的血清被發(fā)現(xiàn)具有比支持真菌生長的血清較少的可用鐵。而且，向血清中加入外源性鐵允許米根霉在酸性而非pH>7.4的條件下大量地生長。最后，模擬的酸中毒狀況降低了從正常志愿者收集的血清的鐵結(jié)合能力，表明酸中毒暫時地破壞了轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合鐵的能力。因此，患有糖尿病酮癥酸中毒的患者對毛霉病提高的易感性可能至少部分是由于糖尿病酮癥酸中毒過程中可用血清鐵的升高。毛霉病發(fā)病機理中鐵代謝的作用使得可能使得應(yīng)用有效鐵螯合劑用于真菌療法，包括作為輔助抗真菌療法。與去鐵胺相反，其它鐵螯合劑不允許生物體攝取鐵，并且不支持其在體外在鐵存在的情況下的生長(參見，例如Bodaert等,(1994),上文)。而且，當(dāng)去鐵胺使豚鼠中彌散性米根霉感染顯著惡化時，其它螯合劑之一對體內(nèi)感染沒有作用，并且其它螯合劑使受感染豚鼠的平均存活時間延長了兩倍多(表l)。表l.鐵螯合劑對米根霉感染的豚鼠存活率的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>*p<0.05對鹽水對照本文所述的體外和體內(nèi)數(shù)據(jù)表明，去鐵酮可以被用于有效地治療毛霉病感染。表1顯示了初期研究的結(jié)果，其中去鐵酮顯著地提高了受感染動物的平均存活時間。這些初始研究進一步表明去鐵酮在體外對抗米根霉中具有高度活性，在溫育24h時顯示出靜態(tài)效應(yīng)，而在溫育48h時顯示殺死效應(yīng)(cidaleffect)[48h后，對兩者，6.25嗎/ml的最低抑制濃度(MIC)和最低真菌殺死濃度(MFC)]。在被感染的DKA小鼠中，與安慰劑相比，脂質(zhì)體兩性霉素B(LAmB)——其是毛霉病的普通療法——或去鐵酮(Def)提高了28天的存活率(LamB的52%存活率對Def的30%存活率對安慰劑的0%，對于LAmB或Def對安慰劑，通過對數(shù)秩檢驗(LogRanktest),p<0.003;對于LAmB對Def，p=0.15)。Def的效力通過給予小鼠FeCl3而消除，這確認(rèn)了Def-介導(dǎo)的保護機理是鐵螯合(圖l)。后一試劑——去鐵酮，在歐洲和印度被批準(zhǔn)臨床用作鐵螯合劑，并且在同情使用(compassionateuse)的基礎(chǔ)上在美國可用于鐵過載。EXjadeTm(NoVartis)，另一種鐵螯合劑，已經(jīng)在美國被批準(zhǔn)用于臨床治療鐵過載患者。該藥物已經(jīng)針對米根霉在體外和在動物模型中測試，使用糖尿病酮癥酸中毒小鼠模型。用致死劑量米根霉感染并用ExjadeTm以1、3或10mg/kg每日兩次治療的小鼠存活比安慰劑治療的小鼠長[28天存活日，安慰劑為0%存活率對lmg/kgExjade⑧為29%存活率(p=0.03)，對用3mg/kgExjade⑧治療的小鼠40%的存活率(p=0.049)對用10mg/kgExjade⑧治療的小鼠57%的存活率(p=0.01)，通過對數(shù)秩檢驗](圖2)。這些研究顯示了使用ExjadeTm在治療毛霉病中的效力。這些研究額外地表明，上述鐵螯合劑可以應(yīng)用于其它真菌感染的治療，包括嗜中性白細胞減少癥個體中的毛霉病，以及其它真菌感染，如彌散性念珠菌病和曲霉病。實施例II用于毛霉病治療的鐵螯合療法本實施例顯示了去鐵酮與脂質(zhì)體兩性霉素B(LAtnB)治療糖尿病酮癥酸中毒(DKA)小鼠的毛霉病的效力比較，或預(yù)防嗜中性白細胞減少癥小鼠的毛霉病的效力比較?！?093]米根霉是毛霉病常見的病因(Ibrahim等，(2003),上文)。具有提高的可用血清鐵的患者，如酮癥酸中毒的糖尿病患者，有發(fā)生毛霉病感染的高風(fēng)險(Artis等，上文)。此外，去鐵胺鐵螯合療法使患者對這些感染易感。去鐵胺發(fā)揮異鐵載體的作用，向真菌提供了先前不可用的鐵(Bodaert等，(1993),上文)。因此，不能被真菌用以從宿主清除鐵的鐵螯合劑的使用被評估對抗毛霉病的效力。Def是不能被根霉用于清除鐵的鐵螯合劑(Boelaerteta1,，(1994),上文)。最初，去鐵酮對抗米根霉的體外活性在本研究中被評估。簡單地說，米根霉99-880從糖尿病患者的腦膿腫中分離。該生物體于37。C在土豆葡萄糖瓊脂(PDA)上生長3天。在一些實驗中，米根霉通過在lmM抗壞血酸和菲咯嗪(ferrozine)存在的PDA上生長來耗盡鐵。孢囊孢子被收集在含有0.01%Tween80無內(nèi)毒素的PBS中，用PBS清洗，隨后用血球計數(shù)器計數(shù)，以制備最終的接種體。對于易感性測試，通過Espinel-Ingroff的方法(/C//"M/c油'o/39:954(2001))，測定Def和去鐵胺的最低抑制濃度(MIC)和最低真菌殺死濃度(MFC)。結(jié)果顯示于下面的表2。去鐵酮在24h對米根霉是靜態(tài)的(MIC和25MFC分別為3.12和100嗎/ml)，但是在溫育48h時顯示出殺死活性(MIC和MFC=6.25pg/ml)。相反，去鐵胺，其已知向米根霉提供鐵，不抑制米根霉的生長(24或48小時后，MIC和MFO100ng/ml)，并且事實上，通過肉眼檢查，在含有去鐵胺的孔中的生長比對照孔(不含鐵螯合劑)中的生長好。表2:DEF和去鐵胺對抗米根霉的MIC卯和MFC數(shù)值用mg/ml'表示<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>已經(jīng)證實了其對抗米根霉的體外活性，我們使用DKA小鼠模型評估去鐵酮在體內(nèi)治療彌散性米根霉感染中的作用。簡單地說，對于體內(nèi)感染，在真菌攻擊前10天，通過單次腹腔注射在0.2ml檸檬酸鹽緩沖液中的210mg/kg鏈脲霉素(streptozotocin)使BALB/c雄性小鼠(>20g)患糖尿病。在鏈脲霉素處理7天后，糖尿和酮尿在所有的小鼠中得到證實。小鼠用適當(dāng)?shù)拿赘菇臃N體通過尾靜脈感染。為了證實接種體，稀釋物在PDA盤上劃線，并在室溫培養(yǎng)24小時后對菌落計數(shù)。主要的效力端點為到死亡的時間。作為第二端點，腦真菌負荷(主要的靶向器官)通過勻質(zhì)化確定，勻質(zhì)化通過在置于含有2ml鹽水的Whirl-Pak袋(Nasco,FortAtkinson,WI)的器官上搖動移液器完成。勻漿在0.85%的鹽水中連續(xù)稀釋，并隨后在PDA上定量培養(yǎng)。數(shù)值表達為logu)cfug"組織。所有涉及小鼠的步驟都由實驗動物使用與管理委員會(institutionalanimaluseandcarecommittee)，按照全國衛(wèi)生研究院對動物籠欄和看護的指導(dǎo)方針批準(zhǔn)。關(guān)于藥物和治療方案，在5°/。葡萄糖水中稀釋的LAmB從GileadSciences獲得，并且以15mg/kgqd(每天一次)的劑量通過尾靜脈靜脈給藥。去鐵酮(ApotexResearchInc.)被溶解在不含鐵的水中，并以50、100或200mg/kgqd或qod(每隔一天)的劑量腹腔內(nèi)給藥。治療開始于感染后24小時并持續(xù)共4個劑量。對照組用稀釋劑——5%的葡萄糖水——處理。在一些實驗中，飽和的無鐵藥劑與去鐵酮一起給藥，試圖逆轉(zhuǎn)鐵螯合的效力。已知去鐵酮與三價鐵(3+Fe)以鐵:去鐵酮1:3的比例形成分子復(fù)合體?；诼然F(FeCl3，分子量162.22g/mol)和去鐵酮(分子量139g/mol)已知的分子量，經(jīng)計算給予18g的小鼠60mg/kg劑量的FeCl3產(chǎn)生相比100mg/kg劑量的去鐵酮明顯過量的3+Fe:3^e摩爾數(shù)=(0.060g/kg*0.018kg[小鼠體重]/162.22g/mol)=6.5X10-6mol對去鐵酮摩爾數(shù)-(0.1g/kg*0.018kg[小鼠體重]/139g/mol)=1.3xl(T5mol比例=1:2摩爾的3+Fe比去鐵酮，這比達到1:3的飽和比例所需要的多。統(tǒng)計分析通過使用非參數(shù)的對數(shù)秩檢驗進行，用于確定小鼠存活時間的差異。被感染器官中組織真菌負荷的差異通過用于多重比較的非參數(shù)Steel檢驗(nonparametricSteeltest)比較。<0.05的尸值被認(rèn)為是顯著的。最初，使用基于來自制造商未公開的觀察的劑量(50、100或200mg/kg的去鐵酮每日或每隔一日一次給藥)進行劑量反應(yīng)。小鼠用4.3><103個米根霉孢子感染，并且在感染后24小時開始去鐵酮治療并持續(xù)共4劑。結(jié)果顯示于圖3和1，表明去鐵酮保護DKA小鼠免受米根霉感染。與安慰劑相比，100mg/kg每隔一天的去鐵酮劑量提高了DKA小鼠的存活率(;7=0.027,圖3)。更高的劑量，包括100mg/kg每天一次或200mg/kg每天一次或每隔一天一次，不提高存活率；50mg/kg每天一次或每隔一天一次的劑量也不提高存活率。如前文實施例I中所述，將去鐵酮的效力也與米根霉的普通治療——高劑量LAmB——進行比較。選擇每天一次施用15mg/kgLAmB的劑量，因為我們顯示了該劑量在DKA小鼠模型中比lmg/kg兩性霉素B脫氧膽酸酯更具保護性。而且，要證實去鐵酮的保護機理是鐵的螯合，去鐵酮加飽和劑量的(60mg/kg)FeCl3形式的游離鐵的效力也被評估。每次去鐵酮被給予動物時，F(xiàn)eCl3被靜脈給藥。100mg/kg每隔一天一次的LAmB或去鐵酮與安慰劑相比提高了28天的存活率(圖l，比安慰劑，通過對LAmB或去鐵酮的對數(shù)秩檢驗，i3〈0.003)。用LAmB治療的小鼠與用去鐵酮治療的小鼠的存活率沒有統(tǒng)計學(xué)差異(戶-0.15)。去鐵酮的效力通過施用氯化鐵完全消除(圖l)。在其它研究中，也評估了用Def和LAmB的組合對實驗性毛霉病的治療。簡單地說，小鼠(對于感染未處理和Def，n=ll;且對LAmB和Def+LamB;n=6)用米根霉感染，24小時后，接著用Def、LAmB或兩種藥物的組合治療，共4劑。結(jié)果顯示于圖4，并且表明使用兩種治療的組合增強了效力。(與感染未治療的小鼠相比，*p<0.005)相似地，也評估了用米根霉感染并用Def、LAmB或兩者預(yù)防的嗜中性白血球減少癥小鼠的存活率。小鼠(n=9)在第-l天用Def隔天一次、LAmB每天一次或兩者治療共四劑。這些結(jié)果顯示于圖5，并且也表明使用抗真菌治療結(jié)合鐵螯合的組合增強了效力(對于LAmB或LAmB+Def對感染未處理，*/<0.05)。例如，預(yù)防性的Def產(chǎn)生22%的存活率，相對于安慰劑治療的小鼠0%的存活率(/>0.05);LAmB和LAmB十Def都產(chǎn)生100%的存活率(對于兩者，對安慰劑/<0.05)。作為效力的又一標(biāo)記物，去鐵酮療法對腦真菌負荷的效果也被評估，因為腦是該動物模型中主要的靶向器官。小鼠用3.8"03個孢子感染，隨后用兩劑LAmB(每天一次)或去鐵酮(隔一天一次)治療。在上述研究中，對照小鼠在第二劑去鐵酮施用之前開始死亡。為了能夠在確定組織真菌負荷之前測試至少兩劑隔一天一次的去鐵酮，在本研究中，去鐵酮在感染后30分鐘和48小時時施用，而LAmB在感染后24和48小時時給藥。腦在感染后約54小時時收集。結(jié)果顯示于表6,并且表明與安慰劑相比，兩種藥物都降低了腦真菌負荷(P50.036)。上述結(jié)果表明Def鐵螯合療法在治療實驗性鼠類毛霉病中有效，并且也具有預(yù)防的效力，包括在嗜中性白細胞減少癥情況中。特別地，Def體外抑制米根霉的生長，而去鐵胺不抑制。Def在治療DKA模型中的毛霉病方面具有相當(dāng)?shù)男Я?，并且這種效力與LAmB的高劑量療法相當(dāng)。Def的效力可能是由于其螯合鐵的能力，因為游離鐵的施用逆轉(zhuǎn)了其保護。Def預(yù)防在毛霉病的嗜中性白細胞減少癥小鼠模型中沒有顯示出拮抗LAmB的保護作用。實施例III用于毛霉病治療性處理的地拉羅司施用本實施例示出了地拉羅司——鐵螯合試劑——的使用，用作鼻腦型毛霉病的補救療法。地拉羅司(Exjade⑧)是一種新型、一流的可口服鐵螯合劑，其最近由美國(US)食品和藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)，用于輸血依賴的貧血癥中鐵過載的治療。本研究描述了地拉羅司用作最大傳統(tǒng)抗真菌療法失敗的鼻腦型毛霉病患者的補救療法?；加刑悄虿⊥Y酸中毒的40歲男性出現(xiàn)在醫(yī)院的急診部，他有多尿、煩渴(多飲)、左眼球后疼痛和左側(cè)顱神經(jīng)(CN)VI麻痹的癥狀。頭部的計算斷層照相法(CT)掃描僅顯示左側(cè)蝶骨和篩骨鼻竇炎。該患者在前24小時中發(fā)展為完全的左側(cè)眼肌癱瘓。懷疑鼻腦型毛霉病，并對他開始5mg/kg/天的兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體(ABLC)，與經(jīng)驗性抗菌劑一起，用于鼻竇炎的治療。在醫(yī)院的第2天，他進行了內(nèi)窺鏡蝶篩(sphenooethmoid)檢查。沒有發(fā)現(xiàn)壞死組織或焦痂，并且多次活體檢查顯示非特異性炎癥。真菌培養(yǎng)為陰性并且特殊的染色沒有顯示生物體。細菌培養(yǎng)僅生長少量的產(chǎn)氣腸桿菌(￡"&ra6a"waerage"M)。在接下來的12天中，該患者發(fā)生失明并且左眼突出(proptosis)惡化。他繼續(xù)使用ABLC并沒有進行進一步的手術(shù)。眼睚和腦的系列核磁共振成像(MRI)揭示了左側(cè)全竇炎的發(fā)展，和左側(cè)眼外肌的增厚和不正常的增強。該患者于入院的第14天被轉(zhuǎn)移到我們的機構(gòu)以進一步管理。在到達后，對他立即進行了左側(cè)眼睚內(nèi)容物去臟術(shù)(exenteration)和摘除術(shù)(enucleation)，以及廣泛的鼻竇清創(chuàng)術(shù)和切除術(shù)(resection)。外科手術(shù)發(fā)現(xiàn)包括具有眼外肌廣泛外周壞死的缺血性眼球(ischemicglobe)。病理標(biāo)本顯示了毛霉的證據(jù)(圖7);真菌培養(yǎng)為陰性。開始對該患者進行15mg/kg/天的脂質(zhì)體兩性霉素B(LamB)和70mg/kg/天的卡泊芬凈治療(基于公開的小鼠數(shù)據(jù)，其顯示了多烯-棘白菌素協(xié)同效應(yīng))。在眼眶內(nèi)容物去臟術(shù)后進行的頭部CT掃描顯示左側(cè)海綿竇的血栓形成；這一發(fā)現(xiàn)在后續(xù)MRI中被證實。盡管沒有新的神經(jīng)學(xué)發(fā)現(xiàn)，就醫(yī)36天時的MRI顯示出左側(cè)海綿竇血栓形成的發(fā)展和左頸內(nèi)動脈流動緩慢，和與進行性毛霉病一致的新的CNV增強。繼續(xù)抗真菌療法。入院第71天，腦MRI顯示了碟鞍上腦池(suprasellarcistern)中新的增強，并且第一次在腦橋中顯示出腦干的損傷和周圍水腫。考慮到損傷的位置在腦橋的表面方位，施用了一劑腦池內(nèi)兩性霉素，但是該患者拒絕進一步的劑量。該患者在臨床上和神經(jīng)學(xué)上保持不變。由于后續(xù)成像的穩(wěn)定，他在入院第86天轉(zhuǎn)出，以繼續(xù)門診LAmB單一療法每周三次。他的疾病在臨床上和射線照相上保持穩(wěn)定數(shù)個月。由于出院后10周腎功能不全的惡化(Cr3.5-4.0,從0.8的基線)，LAmB的劑量被減少到10mg/kg每周兩次，并接著在出院后4個月降到每月一次。一個月后，重復(fù)MRI顯示左中小腦腳(cerebellarpeduncle)中外周水腫新的增強，并且左小腦腦橋角與進行性疾病一致?；趤碜詫嶒炐澡F螯合劑——去鐵酮——的數(shù)據(jù)，以及地拉羅司在小鼠中的未公開的觀察，地拉羅司以1000mg的劑量每天一次(口服)給藥7天。繼續(xù)LAmB。在地拉羅司治療的最后一天，患者發(fā)生紅斑性的輕度瘙癢癥，在軀干和肢體四肢爆發(fā)融合性斑丘疹，與可能的藥疹一致。瘙癢癥用苯海拉明治療。沒有觀察到其它不良事件。地拉羅司治療后一周，腦部的重復(fù)MRI顯示出左側(cè)小腦腳中水腫的消退。五周后的跟蹤成像顯示沒有新的損傷。由于腎功能不全的惡化(Cr5.5)，以及在重復(fù)成像上放射照相發(fā)現(xiàn)的穩(wěn)定性的情況中，LAmB治療中斷。他初始診斷10個月后，該患者保持無癥狀且神經(jīng)學(xué)上完整。盡管進行大量的手術(shù)和數(shù)月的抗真菌治療，這里所述的患者明顯沒有被治愈他的侵襲性毛霉病，因為他在用最高耐受劑量LamB治療7個月后，出現(xiàn)了與進行性毛霉病一致的新的放射照相發(fā)現(xiàn)。然而，用地拉羅司治療7天后，注意到了本質(zhì)的放射照相的改善。施用地拉羅司兩個月后，所有的抗真菌療法被中斷。該患者后來保持臨床無癥狀和放射照相穩(wěn)定，沒有疾病發(fā)展的跡象。除了微弱的藥物反應(yīng)外，該患者耐受地拉羅司良好，這可能歸因于螯合劑。這里我們描述了晚期(advanced)毛霉病的病例，其在適當(dāng)?shù)氖中g(shù)明顯延誤后涉及腦干和海綿竇，在使用地拉羅司補救治療后具有明顯成功的結(jié)果。地拉羅司治療的準(zhǔn)確效果有些與同時的多烯治療混淆。但是，在加入地拉羅司之前，非常積極的多烯療法對該患者明顯失敗?？紤]到該病例令人鼓舞的結(jié)果，和有限的選擇及毛霉病較差的預(yù)后——盡管有當(dāng)前的抗真菌治療，毛霉病治療中鐵螯合的其它研究是有理由進行的。實施例IV地拉羅司對體外毛霉的作用29本實施例顯示了地拉羅司對米根霉中高親和性鐵通透酶基因(rFTRl)表達的作用。本實施例也顯示了毛霉多個臨床分離物的地拉羅司敏感性。以下描述了本實施例或后續(xù)實施例中所述程序中使用的材料和方法。籍霍浙線殺伴米根霉99-880是來自糖尿病患者的腦膿腫的臨床分離物。米根霉99-892是臨床的肺部分離物。米根霉M16是通過化學(xué)誘變從米根霉99-880產(chǎn)生的PWF無效突變體(;j^F編碼乳清酸核苷5'-磷酸鹽脫羧酶，它是尿嘧啶合成需要的一種酶)。即使當(dāng)以多于1><109個孢子鋪板時，該突變體顯示出對尿嘧啶營養(yǎng)缺陷型穩(wěn)定的表現(xiàn)型。生物體在37'C生長在土豆葡萄糖瓊脂(PDA)[制劑/升；土豆淀粉4g，葡萄糖20g，瓊脂15g]上4天。對于M16，PDA用100嗎/ml尿嘧啶補充。在一些實驗中，米根霉通過在lmM抗壞血酸和菲咯嗪存在下在酵母氮源(YNB)(Difco/BectonDickinson,Sparks,MD)上生長被耗盡鐵，所述酵母氮源用不含尿嘧啶的完全補充培養(yǎng)基(CSM-URA)補充，(YNB+CSM-URA)[制劑/100ml，1.7g無氨基酸的YNB，20g葡萄糖，0.77gCSM-URA]。孢囊孢子被收集在含有0.01%Tween80無內(nèi)毒素的PBS中，用PBS清洗，并用血球計數(shù)器計數(shù)，以制備最終的接種體。籍霉蘇,絲鐵遞透艨基厲6"F節(jié)游教藩從匯合的PDA板上采集的米根霉99-880孢塞(plugs)于37。C在土豆葡萄糖培養(yǎng)液中搖動生長過夜。通過無菌的方法收集菌絲，并轉(zhuǎn)移到含有350pM氯化鐵的新PDB燒瓶中(以抑制^77/的表達)。350pM氯化鐵加2mM地拉羅司以測試鐵螯合，或2mM地拉羅司加6mM氯化鐵使加入的地拉羅司過飽和。燒瓶在37。C搖動溫育1小時。菌絲體通過過濾收集，并使用臼和杵在液氮中研磨。總RNA使用含有RLC緩沖液的RNeasyPlabtMiniTM試劑盒(Qiagen⑧)提取。所述RNA使用SuperscriptTM第一鏈合成系統(tǒng)(First-StrandSynthesisSystem)(Invitrogen)用寡聚(dT)(oligo(dT))引物反轉(zhuǎn)錄，以生成第一鏈cDNA。該產(chǎn)物被稀釋并用于PCR，以檢測米根霉F77/和18srDNA基因的表達。PCR引物的序列如下用于米根霉rFTRl擴增的有義引物5'-TCAGAGAAGGACTTGAAGC-3'禾口反義弓l物5'-TAAGTAGCCGTATTGTTCC-3';以及用于18srDNA基因的有義引物5'-CATGGTTGAGATTGTAAGATAG-3'和反義弓l物5'-AGTCAATGGACGTGGAGTC-3'。該PCR產(chǎn)物在含有0.1ng/ml溴化乙錠的2%瓊脂糖凝膠上分離。兩個引物對被設(shè)計為擴增400bp的條帶。綠色^^^歪A叛遭基像粼試^Ti70RF上游的1.5kb片段使用以下引物對被PCR擴增有義引物305'-GCTCTAGATCAGTCTCAACACCATCAATT-3';禾卩反義弓|物5'隱TGCGGCCGTGCTTTTTAGTTCTCCTTGGA陽3'。含有組成型表達的肌動蛋白啟動子的2.1kb片段也被PCR擴增用作對照，擴增使用以下引物對有義引物5'-GCTCTAGATGGTATTATCGATTTAGA-3';禾卩反義弓l物5'-TACGGCCGCATACCGGAACCGTTATCG-3'。擴增的片段被連接進質(zhì)粒pyr225b(35)的和位點。GFP從pGFPB21-43.31(36)中擴增，并且克隆進入質(zhì)粒的任一啟動子下游的五flg7-Sac/位點。最后，代表^rF的ORF的2.1kb片段及其天然啟動子被克隆進質(zhì)粒的^e7-C/"/位點，以發(fā)揮選擇性標(biāo)記的作用。含有被rFTRlp或ACTlp任一驅(qū)動的GFP的質(zhì)粒用微粒粒子轟擊(Biorad⑧)被轉(zhuǎn)化進入米根霉M16。轟擊后于37'C在YNB+CSM-URA平板上生長5-7天，選擇轉(zhuǎn)化體。然后通過使轉(zhuǎn)化體在含有無尿嘧啶的基礎(chǔ)培養(yǎng)基的平板上傳代并在37。C溫育該平板，測試分離物的尿嘧啶營養(yǎng)缺陷型。在尿嘧啶陰性平板上選擇得到的純化的轉(zhuǎn)化體通過DNA印跡法分析。rFTRlp和ACTlp的表達在生長于鐵充分的培養(yǎng)基上(即YNB+CSM-URA)或鐵耗盡條件下(即，用2mM地拉羅司補充的YNB+CSM-URA)的轉(zhuǎn)化體中被研究。此外，要逆轉(zhuǎn)地拉羅司的作用，將轉(zhuǎn)化體生長在用2mM地拉羅司補充并用6mM氯化鐵過飽和的YNB+CSM-URA中。最后，帶有空質(zhì)粒的M16轉(zhuǎn)化體(沒有GFP的pyr225b-pyrF)被用作陰性對照。孢子(lxl0"ml)被接種在上述培養(yǎng)基中并在37。C溫育過夜。一滴培養(yǎng)物被加樣到載玻片上，并用488nm的激發(fā)波長用LeicaDMRXE共聚焦顯微鏡觀察米根霉中的GFP表達。此外，使用裝備有在488nm發(fā)射的氬激光器的FACSCaliber(BectonDickinson⑧)儀器，每個培養(yǎng)物中l(wèi)ml的樣品也被用于量化熒光發(fā)射。孢子通過前向和側(cè)向散射被閘控(gated)，并且熒光在FL1測量。最低抑制濃度(MIC)和最低真菌殺死濃度(MFC)通過Espinel-Ingroff的方法，使用鐵耗盡的米根霉孢子對地拉羅司進行確定(Espinel-Ingroff,(2001),上文)。致死率被定義為MIC和MFC之間的差異小于等于4倍。地拉羅司(NovartisPharmaceuticals,Basel,瑞士)懸浮在0.5%羥丙基纖維素(Klucel)中，并通過口服管飼法以l、3或10mg/kg每天(qd)或每隔一天(qod)兩次施用。治療開始于感染后24小時并持續(xù)共5或7劑。對照組用稀釋劑——5。/。的葡萄糖水和0.5。/。Klucel——處理。在一些實驗中，飽和劑量的游離鐵與地拉羅司一起給藥。已知地拉羅司與三價鐵(3+Fe)以鐵:地拉羅司1:2的比例形成分子復(fù)合體?；诼然F(FeCl3，分子量162.22g/mol)和地拉羅司(分子量373.4g/mol)已知的分子量，經(jīng)計算給予18g的小鼠2.8mg/kg劑量的FeCl3產(chǎn)生相比10mg/kg劑量的地拉羅司明顯過量的3+Fe:3+Fe摩爾數(shù)=(0.0028g/kg*0.018kg[小鼠體重]/162.22g/mol)=3xl(T7mol對地拉羅司摩爾數(shù)-(0.01g/kg*0,018kg[小鼠體重]/373.4g/mol)=5xl(T7mol，比例=1:1.7摩爾的3+Fe比去鐵酮，這比達到飽和1:2比例所需要的多。稀釋于5%葡萄糖水中的LAmB從GileadSciences(Fostercity,CA)獲得，并以每天(qd)15mg/kg的劑量通過尾靜脈給藥4天。非參數(shù)對數(shù)秩檢驗被用于確定小鼠存活時間的差異。組織真菌負荷的、脾臟淋巴細胞頻率和感染器官中全器官細胞因子的差異通過魏可遜曼-惠特尼U檢驗(MannWhitneyUTest)比較。小于0.05的P值被認(rèn)為是顯著的。已經(jīng)顯示(在Fu等F五MSM/麼歸.丄饑235:169-176(2004))，鐵耗盡引起高親和性鐵通透酶基因(r尸777)在米根霉中的快速表達，這是毛霉病最常見的原因。因此，為了證實地拉羅司有效地螯合米根霉中的鐵，我們確定了體外地拉羅司暴露對米根霉rF77/表達的影響。米根霉99-880孢子在PDB中溫育過夜。第二天，菌絲體被轉(zhuǎn)移到用350pM氯化鐵(鐵充足)、350]uM氯化鐵加2mM地拉羅司(鐵耗盡)、或2mM地拉羅司加過飽和的6mM氯化鐵補充的PDB中。RNA從在每種條件下在37。C生長1小時的孢子中提取，并且進行RT-PCR以評估基因表達。rF77/基因在地拉羅司存在的情況下表達，但是不在用氯化鐵補充的培養(yǎng)基或在地拉羅司加過飽和氯化鐵存在的情況下表達(圖8a)。為了證實螯合條件下rFTRlp表達和^77/啟動子的活性，編碼綠色熒光蛋白(GFP)的基因被克隆在rFTRl啟動子之后(圖8b)。用rFTRl::GFP構(gòu)建體或ACTlp::GFP(組成型陽性對照)轉(zhuǎn)化的米根霉M16孢子與地拉羅司、地拉羅司加過飽和氯化鐵、或鐵豐富培養(yǎng)基(鐵充足)溫育過夜。圖8c顯示了與在JC7V啟動子控制下的GFP相反，其被組成型表達而不管生長條件，在rF77/啟動子控制下的GFP僅在鐵螯合的條件(地拉羅司)下被表達或有活性。如共聚焦顯微鏡所見，用組成型ACTlp::GFP構(gòu)建體轉(zhuǎn)化的M16無論在何種生長條件下都有熒光。相反，用rFTRlp::GFP轉(zhuǎn)化的M16僅在地拉羅司存在的情況下有熒光。相似地，通過流式細胞計，小于1。/。在鐵充足條件下生長的未轉(zhuǎn)化的或rFTRlp::GFP轉(zhuǎn)化的孢子有熒光。相反，43%用rFTRlp::GFP轉(zhuǎn)化并在地拉羅司存在的情況下生長的孢子有熒光?？傊?，這些數(shù)據(jù)證實了地拉羅司誘導(dǎo)米根霉中的鐵耗盡反應(yīng)。我們接下來確定了毛霉多個臨床分離物對地拉羅司的易感性(表3)。地拉羅司抗毛霉、非米根霉種和米根霉的MIC郷為3.12到6.25嗎/ml。MFCs與MICs相似，并且地拉羅司對28/29(97%)的分離物致死。值得注意，即使在極高濃度地拉羅司的條件下，在前12小時中可見輕微生長。然而，即使在低濃度地拉羅司條件下，真菌在24小時內(nèi)死亡，這表明地拉羅司的致死性是時間依賴而非濃度依賴的。而且，當(dāng)以FDA批準(zhǔn)的起始劑量(20mg/kg/d)給藥時，地拉羅司對抗這些分離物的MICs和MFCs遠低于穩(wěn)定狀態(tài)下藥物的臨床可達到的峰血清水平(38嗎/ml)及波谷血清水平(troughserumlevel)(~17pg/ml)。除了顯示出地拉羅司誘導(dǎo)米根霉中的鐵耗盡反應(yīng)，本實施例也顯示了地拉羅司對來自毛霉科兩個不同屬的多個臨床分離物是致死的。表3:地拉羅司對毛霉的MICs和MFCs24h48h生物體MIC(fig/ml)MFC(Hg/ml)真菌致死？*MIC(fig/ml)MFC(Hg/ml)真菌致死？*毛霉97-10833.123.12Y3.123.12Y分支毛霉97-11920.780.78Y0.780.78Y毛霉屬某種99-9323.123.12Y3.123.12Y毛霉屬某些種MIC90/MFC903.123.12Y3.123.12Y小孢子根霉ATCC624170.390.39Y0.390.39Y根霉屬某種99-11506.256.25Y3.123,12Y根霉屬某種99-17006.256.25Y1.561.56Y根霉屬某種ATCC205773.126.25Y3.126.25Y非米根霉MIC90/MFC906.256.25Y3.126.25Y米根霉729-0212.512.5Y6.256.25Y米根霉99-1336.256.25Y1.566.25Y米根霉99-8803.123.12Y3.123.12Y米根霉99-8921.561.56Y1.561.56Y米根霉HUMC0212.512.5Y1.561.56Y米根霉PW/70.780.78Y0.780.78Y米根霉I型NRRL102063.123.12Y3.123.12Y米根霉I型NRRL212513.126.25Y6.256.25Y33<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>承致死率-MFC/MIC^4(37)實施例V地拉羅司對抗體內(nèi)米根霉的效力本實施例顯示了地拉羅司在治療用毛霉感染的小鼠中的體內(nèi)效力。以下描述了本實施例或后續(xù)實施例中所述程序中使用的材料和方法。嵐類微對于體內(nèi)感染，在真菌攻擊前10天，通過單次腹腔注射在0.2ml擰檬酸鹽緩沖液中的210mg/kg鏈脲霉素(streptozotocin)使BALB/c雄性小鼠(〉20g)患糖尿病。在鏈脲霉素處理7天后，糖尿和酮尿在所有的小鼠中得到證實。對于嗜中性白細胞減少癥的小鼠模型，小鼠在用米根霉感染前2天被注射單一腹腔劑量的200mg/kg環(huán)磷酰胺(cycolphosphamide)(BristolMyerSquibb)。這一處理方案在相對于感染的第-2天到第5天導(dǎo)致全血細胞減少癥，細胞數(shù)的恢復(fù)從感染后第6天開始。小鼠用適當(dāng)?shù)拿赘菇臃N體通過尾靜脈感染。為了證實接種體，稀釋物在含有0.1%triton的PDA平板上劃線，并且在37。C溫育24小時后對菌落計數(shù)。主要的效力端點為到死亡的時間。作為第二端點，腦真菌負荷(主要的耙向器官)通過勻質(zhì)化確定，勻質(zhì)化通過在置于含有l(wèi)ml鹽水的Whirl-Pa]JM袋(Nasco,FortAtkinson,WI)的器官上搖動移液器完成。勻漿在0.85%的鹽水中連續(xù)稀釋，并隨后在PDA上定量培養(yǎng)。數(shù)值表達為logH)cfug"組織。最后，對于組織病理學(xué)分析，被感染的器官從小鼠收集并固定在10%鋅福爾馬林中。固定的組織被包埋在石蠟中，并且5mm的切片用蘇木精和伊紅染色，用于光學(xué)顯微鏡檢査。所有涉及小鼠的步驟都由實驗動物使用與管理委員會，按照全國衛(wèi)生研究院對動物籠欄和看護的指導(dǎo)方針批準(zhǔn)。為了確定地拉羅司的體外活性是否轉(zhuǎn)化為體內(nèi)效力，我們使用糖尿病酮癥酸中毒小鼠中彌散性毛霉病的鼠類模型。糖尿病酮癥酸中毒小鼠用米根霉99-892的2.2xl(^個孢子通過尾靜脈感染。從感染后的第一天開始，小鼠通過口部管飼法用在0.5%羥丙基纖維素(Klucel)中的1、3或10mg/kg的地拉羅司一天兩次(bid)治療7天。陰性對照小鼠用羥丙基纖維素載體(安慰劑)或地拉羅司加飽和的氯化鐵治療(皮下給藥)。額外的陰性對照包括用氯化鐵治療的未感染小鼠。與對照相比，每天兩次l、3或10mg/kg的地拉羅司顯著地提高了存活率(圖9a)。在單獨的實驗中，地拉羅司被發(fā)現(xiàn)對抗第二種米根霉的臨床分離物——99-880分離物——有效。糖尿病酮癥酸中毒小鼠用1.3><103個更具毒性的米根霉99-880孢子通過尾靜脈感染，并如上文所述用10mg/kg地拉羅司每天兩次或安慰劑治療7天。與安慰劑相比，地拉羅司顯著地提高了由米根霉感染的小鼠到死亡的時間(圖9b)。為了確定地拉羅司對組織真菌負荷的影響，糖尿病酮癥酸中毒小鼠用4.2><104個米根霉99-892的孢子通過尾靜脈感染。小鼠用地拉羅司(10mg/kg每天兩次)、地拉羅司加飽和的氯化鐵、或安慰劑治療。治療開始于感染后16小時并且每天給藥持續(xù)3天。腎臟和腦在第四天被除去，勻質(zhì)化，并定量培養(yǎng)。與用安慰劑或地拉羅司加飽和氯化鐵治療的小鼠比較，地拉羅司產(chǎn)生腦和腎臟(主要的靶器官)真菌負荷高于IO倍的降低(圖10a)。通過組織病理學(xué)，地拉羅司治療的小鼠的腎臟沒有可見的菌絲(如圖10b中箭頭所指)，而用安慰劑或地拉羅司加飽和氯化鐵治療的小鼠的腎臟具有廣泛的有絲真菌。而且，用飽和鐵治療的小鼠在感染位點明顯沒有嗜中性白細胞流入，而嗜中性白細胞流入在用地拉羅司治療的小鼠腎臟中是顯著的(圖10b)。除了顯示出地拉羅司的直接抗真菌作用，本實施例顯示了地拉羅司的保護作用可以通過給予游離鐵逆轉(zhuǎn)，這證實了藥物的保護機理是通過鐵螯合實現(xiàn)的。實施例VI鐵螯合和過量鐵對宿主免疫反應(yīng)的作用本實施例顯示了地拉羅司和地拉羅司加氯化鐵對宿主免疫反應(yīng)作用的比較。以下描述了本實施例或后續(xù)實施例中所述程序中使用的材料和方法。搬沐纏顏稀全器諸蕭^微脾臟淋巴細胞頻率如我們先前所述確定(Spellberg等，/mwmi71:5756-5764(2003))。簡單地說，使脾臟勻漿通過70nm過濾器，接著用0.15M氯化銨RBC裂解。細胞用CytofixTM緩沖液(BDPharmingen⑧)固定，用Cytoperm緩沖液(BDPharmingen)使其通透，并用10嗎/ml的FITC-偶聯(lián)的抗-小鼠CD4(克隆RM4-5)、PE-偶聯(lián)的抗-小鼠IFN-Y(克隆XMG1.2)或同種型對照(克隆R-34)、別藻藍蛋白(APC)-偶聯(lián)的抗-小鼠IL-4(克隆11B11)或同種型對照(克隆R3-34)、或APC-偶聯(lián)的抗-小鼠IL-10(克隆JES5-16E3)或同種型對照(克隆A95-l)(所有都來自BDPharmingen)染色。在獨立的實驗中，CD4+CD25+foxp3+T-調(diào)控細胞的頻率使用小鼠調(diào)控T細胞染色TM試劑盒(MouseRegulatoryTcellStainingKit)"Bioscience)按照制造商的建議確定。程序性細胞死亡的頻率使用膜聯(lián)蛋白FITC程序性細胞死亡TM試劑盒(AnnexinFITCApoptosisTMkit)(BDPharmingen)確定。細胞被清洗，并且三色流式細胞計數(shù)在用CaliBRITETM珠(BDPharmingen)校準(zhǔn)的Becton-DickinsonFACScanTM儀上使用FACSCompTM軟件按照制造商的建議進行。在數(shù)據(jù)獲得的過程中，CD4+淋巴細胞通過前向和側(cè)向散射的拼接(concatenation),和FITC-抗-CD4抗體的熒光性質(zhì)閘控。每個樣品的數(shù)據(jù)被獲得，直到分析了10,000個CD4+淋巴細胞。全器,一智應(yīng)茵f試驗脾臟和腎臟在1ml的PBS中勻質(zhì)化。勻漿在臺式離心機中以最大速度于4'C離心。使用細胞儀珠試驗鼠類炎癥性細胞因子TM試劑盒(CytometricBeadArrayMurineInflammatoryCytokinekit)(BDPharmingen)按照制造商的說明，測試上清液中的細胞因子。由于用飽和氯化鐵對鐵螯合治療的小鼠腎臟中見到的炎癥性細胞流入的改變，在本實施例中，我們確定了地拉羅司治療對感染小鼠中Thl/Th2和炎癥性細胞因子反應(yīng)的作用。糖尿病酮癥酸中毒小鼠按上述用3."104個米根霉99-892孢子感染，并用地拉羅司、地拉羅司加氯化鐵、或安慰劑治療。在感染的第四天，脾臟和腎臟被處理，用于細胞內(nèi)和全器官細胞因子的確定。與用飽和氯化鐵或安慰劑治療的小鼠相比，地拉羅司導(dǎo)致Thl和Th2脾細胞頻率的顯著增加(圖lla)。CD4+IL-10+或CD4+CD25+foxp3+脾細胞的頻率在各組之間沒有明顯差異(數(shù)據(jù)未顯示)。脾細胞程序性細胞死亡在各組之間也沒有顯著差異(數(shù)據(jù)未顯示)o地拉羅司治療的小鼠比用飽和鐵或安慰劑治療的小鼠具有明顯更高的脾臟典型促炎性細胞因子、TNF和IFN-y水平。用地拉羅司治療的小鼠也具有明顯更高的腎臟IFN-Y水平(圖llb)。本研究顯示了地拉羅司非特異地刺激糖尿病酮癥酸中毒小鼠中被抑制的炎癥反應(yīng)，提高了Thl和Th2淋巴細胞的頻率以及脾臟和腎臟炎癥性細胞因子的水平。而且，通過給予過飽和鐵劑量的螯合的逆轉(zhuǎn)降低了在被感染腎臟中所見的嗜中性白細胞的數(shù)量。實施例VII地拉羅司(Exjade)與脂質(zhì)體兩性霉素B組合用于鼠類毛霉病的治療性處理本實施例顯示了使用鐵螯合劑、地拉羅司(Exjade)、和脂質(zhì)體兩性霉素B(LAmB)的組合療法用于毛霉病治療的效果。如上文所述，臨床和動物模型數(shù)據(jù)表明升高的可用血清鐵的存在使宿主易感毛霉病。如上文的實施例示例，地拉羅司鐵螯合療法顯示出提高用米根霉一毛霉病的最常見原因——感染的糖尿病酮癥酸中毒小鼠的存活率。為了確證結(jié)合療法中地拉羅司的效力，地拉羅司與LAmB組合的效力與用于治療動物模型鼠類毛霉病的任一單獨藥物的效力比較。方法、動物程序和試劑按前述進行和/或制備。簡單地說，具有鏈脲霉素誘導(dǎo)的DKA的BALB/c小鼠用2.0x103個米根霉孢子通過尾靜脈感染。在感染后24小時開始治療，使用(1)LAmB(15mg/kgiv)，每天一次，給藥4劑；(2)地拉羅司(10mg/kgpo)每天兩次，給藥7劑；或(3)使用上述計量的LAmB和地拉羅司兩者。安慰劑小鼠接受載體對照。端點為到死亡的時間和菌落形成單元(CFU)。上述研究的結(jié)果顯示于圖12和13。圖12顯示了僅地拉羅司和僅LAmB的單一療法，以及地拉羅司和LAmB—起的組合療法在治療毛霉病方面的效力。結(jié)果表明與安慰劑相比，兩種單一療法提高了存活率(地拉羅司和LAmB37的存活率分別為25%和28%，且安慰劑為0%，PO.003)。與所有其它組相比，組合療法顯著地提高了感染的DKA小鼠(每組n〉16)的存活時間和總體存活率(對組合療法70%的存活率，通過對所有比較的對數(shù)秩檢驗，P<0.008)。這些治療相對于靶器官的結(jié)果顯示于圖13。該結(jié)果表明與安慰劑相比，任何一種藥物單獨都不能降低腦CFUs(主要的靶器官)。然而，與所有其它臂相比，地拉羅司和LAmB兩者的組合療法降低腦CFUs兩個對數(shù)級(2logs)以上(尸<0.04)。與安慰劑治療的小鼠相比，僅LAmB和組合療法能夠降低腎臟CFU(次要耙器官)(尸<0.01)。本研究表明鐵螯合療法和高劑量LAmB在治療DKA中實驗性毛霉病方面可以同樣有效。LAmB和地拉羅司的組合療法比任一單獨藥物更有效。這些數(shù)據(jù)進一步確證了使用鐵螯合，如地拉羅司，作為與兩性霉素B的脂質(zhì)制劑的組合療法在治療毛霉病感染方面的治療效力。上述結(jié)果進一步表明當(dāng)組合使用時，鐵螯合劑地拉羅司(Exjade)和脂質(zhì)體兩性霉素B在動物模型中對毛霉病的治療產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。實施例VIH地拉羅司在嗜中性白細胞減少的感染小鼠中的效力本實施例顯示了地拉羅司在治療用米根霉感染的嗜中性白細胞減少的(neutropenic)小鼠中的效力。為了確定地拉羅司在嗜中性白細胞減少狀況中是否也有效，小鼠用環(huán)磷酰胺進行骨髓根除(myeloablated)。兩天后，小鼠用2.7><103個米根霉99-892孢子通過尾靜脈感染。初始劑量反應(yīng)研究表明與糖尿病酮癥酸中毒模型相反，每隔一天而非每天地拉羅司給藥達到最佳結(jié)果(數(shù)據(jù)未顯示)，如我們先前在鐵螯合劑——去鐵酮——中所述。與安慰劑相比，用地拉羅司(10mg/kg每隔一天兩次，給藥五劑，開始于感染后24小時)治療顯著改善了到死亡的時間(圖14)。相反，與安慰劑相比，地拉羅司每天兩次給藥沒有顯著改善到死亡的時間。本研究表明地拉羅司在嗜中性白細胞減少癥小鼠中的最大效力要求比糖尿病酮癥酸中毒小鼠模型中較低的給藥頻率，并且地拉羅司在糖尿病酮癥酸中毒小鼠中比在嗜中性白細胞減少癥小鼠中顯得有點更加有效。實施例IX地拉羅司在嗜中性白細胞減少癥小鼠中特異毒性的評估本實施例顯示了用每天一劑地拉羅司治療的嗜中性白細胞減少癥小鼠中的毒性評估的結(jié)果。以下描述了本實施例中所述程序中使用的材料和方法。38邀投,眾毒絲^f充地拉羅司在嗜中性白細胞減少癥小鼠中的毒性被評估。按上文所述使小鼠患上嗜中性白細胞減少癥，并用地拉羅司以10mg/kg每天兩次或每隔一天的劑量治療7天。來自三個不同組(即安慰劑，地拉羅司每天治療，和地拉羅司每隔一天治療)的小鼠在第3天和第8天被殺死，收集血液并被送往CharlesRiverLaboratories進行評估。此外，從股骨制備骨髓涂片，并且收集組織，在鋅緩沖的福爾馬林中保存，包埋在石蠟中，以5pm的厚度切片，并用蘇木精和伊紅染色。產(chǎn)生的載玻片由CharlesRiverLaboratories的委員會認(rèn)可的獸醫(yī)病理學(xué)家檢驗。因為每隔一天地拉羅司給藥在嗜中性白細胞減少癥模型中是最佳的，我們試圖鑒定在嗜中性白細胞減少癥小鼠中由地拉羅司每天給藥引起的任何潛在毒性。如前所述用環(huán)磷酰胺使小鼠患有嗜中性白細胞減少癥，但未被感染。小鼠用地拉羅司10mg/kg每天兩次治療7天，用10mg/kg每隔一天兩次治療4劑，或用安慰劑治療。最終放血在第3天或第8天進行，以測量全部血細胞數(shù)、血清化學(xué)和肝功能試驗。組織病理學(xué)在廣泛的一系列器官中進行，包括腦、心、肺、肝、膽囊、脾、腎、胃腸道(包括胃、小腸和大腸)和骨髓(涂片和核心(core))。在白細胞數(shù)、絕對嗜中性白細胞數(shù)、血小板數(shù)、血紅蛋白水平、血清化學(xué)(包括肌酸酐、血液尿素氮或電解質(zhì))或肝功能測試(包括AST、ALT或膽紅素)方面'在任意時間點三組之間沒有鑒定到差異。通過組織病理學(xué)，沒有鑒定到可歸因于地拉羅司的器官特異毒性，包括沒有血細胞生成改變的證據(jù)。特別地，沒有由化療引起的骨髓去除(ablation)的惡化或延遲恢復(fù)的證據(jù)，也沒有由實驗室檢測到的腎臟或肝臟功能異常的任何證據(jù)，也沒有通過組織病理學(xué)評估得到的任何特異性器官毒性。本研究顯示了在嗜中性白細胞減少癥小鼠中每天地拉羅司給藥減小的活性不可能是由于地拉羅司在這些小鼠中的毒性作用，原因是沒有發(fā)現(xiàn)毒性的證據(jù)。貫穿整個本申請，多篇出版物在括號中被引用。這些出版物的公開在此通過引用以其整體并入本申請中，以便更充分地描述本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)狀態(tài)。盡管本發(fā)明己經(jīng)參考公開的實施方式進行描述，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地認(rèn)識到，上文詳述的特定實施例及研究僅是本發(fā)明的示例。應(yīng)該理解，可以進行多種修改而不背離本發(fā)明的精神。因此，本發(fā)明僅由所附的權(quán)利要求書限定。權(quán)利要求1.組合物，包含至少一種鐵螯合化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，和至少一種抗真菌劑或其藥學(xué)上可接受的鹽。2.權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述鐵螯合化合物包括去鐵酮或地拉羅司。3.權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述抗真菌劑包括多烯抗真菌劑、吡咯抗真菌劑或棘白菌素抗真菌劑。4.權(quán)利要求3所述的組合物，其中所述多烯抗真菌劑選自兩性霉素B脫氧膽酸鹽、脂質(zhì)體兩性霉素B、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體或兩性霉素B硫酸膽甾醇酯。5.權(quán)利要求3所述的組合物，其中所述吡咯抗真菌劑選自泊沙康唑、伏立康唑、氟康唑或伊曲康唑。6.權(quán)利要求3所述的組合物，其中所述棘白菌素抗真菌劑選自醋酸卡泊芬凈或米卡芬凈。7.權(quán)利要求l所述的組合物，進一步包含兩種或更多種鐵螯合化合物。8.權(quán)利要求7所述的組合物，其中所述兩種或更多種鐵螯合化合物包括去鐵酮和地拉羅司。9.權(quán)利要求l所述的組合物，進一步包含兩種或更多種抗真菌劑。10.權(quán)利要求9所述的組合物，其中所述兩種或更多種抗真菌劑選自多烯抗真菌劑、吡咯抗真菌劑或棘白菌素抗真菌劑。11.權(quán)利要求10所述的組合物，其中所述多烯抗真菌劑選自兩性霉素B脫氧膽酸鹽、脂質(zhì)體兩性霉素B、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體、兩性霉素B硫酸膽甾醇酯、泊沙康唑、伏立康唑、氟康唑、伊曲康唑、醋酸卡泊芬凈或米卡芬凈。12.權(quán)利要求l所述的組合物，進一步包括治療有效量的所述鐵螯合化合物、所述抗真菌劑或兩者。13.權(quán)利要求1所述的組合物，進一步包括藥學(xué)上可接受的介質(zhì)。14.治療或預(yù)防真菌病癥的方法，其包括給予患有真菌病癥或易患真菌病癥的個體治療有效量的至少一種鐵螯合化合物，給予的時間足以降低真菌病癥的嚴(yán)重性，其中所述鐵螯合化合物包含與所述真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體。15.權(quán)利要求14所述的方法，其中所述真菌病癥包括接合菌病、曲霉病、隱球菌病、念珠菌病、組織胞漿菌病、球孢子菌病、副球孢子菌病、鐮刀菌病(透明絲孢菌病)、芽生菌病、青霉病或孢子絲菌病。16.權(quán)利要求15所述的方法，其中所述接合菌病進一步包括毛霉病。17.權(quán)利要求16所述的方法，其中所述毛霉病包括鼻腦型毛霉病、肺毛霉病、胃腸毛霉病、彌散性毛霉病、骨毛霉病、縱膈毛霉病、氣管毛霉病、腎臟毛霉病、腹膜毛霉病、上腔靜脈毛霉病或外耳炎毛霉病。18.權(quán)利要求17所述的方法，其中所述毛霉病與毛霉目中的傳染原相關(guān)。19.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述毛霉目中的傳染原選自根霉屬的種，包括米根霉(7Wzo;7^o^yzae)(少根根霉(i^/zo;^a廳Wzw))、小孢子根霉變體(i/n'zo/ws附/frospon^va廣r/n'zopo&yo7mJ)、傘豐支舉頭霄04Z^z'd/aco7m^/ena0、雅致鱗質(zhì)霉(^o//;^o附^ese/eg"似)、毛霉屬的種、微小根毛霉(W/^owMcw;wj/〃m)禾口小克銀漢霉某種(Cw朋/"g/2fl附e〃"^;)(小克銀漢霉科)。20.權(quán)利要求15所述的方法，其中所述念珠菌病與選自包括白假絲酵母(Candidaalbicans)、克魯斯假絲酵母(Ca"d由^me,')、熱帶假絲酵母(Ca"^山/ra/7/a//;》、光滑假絲酵母(Om力Wag/a6rato)和近平滑假絲酵母(Ca"力Wa/ara戸//0^)的假絲酵母屬種的傳染原相關(guān)。21.權(quán)利要求15所述的方法，其中所述曲霉病與選自包括煙曲霉04^^g///^y,'/w'gaft^)、黃曲霉0^/erg/〃wsyZavM)、土曲霉(v45pwg/〃"s^rew力、構(gòu)巢曲霉0^/7Wg/〃w"Z^/a似)和棒曲霉(A;erg/〃^c/w"r^)的曲霉屬種的傳染原相關(guān)。22.權(quán)利要求14所述的組合物，其中所述鐵螯合化合物包括去鐵酮或地拉羅司。23.權(quán)利要求14所述的方法，進一步包括兩種或更多種鐵螯合化合物，其中每種鐵螯合化合物包含與所述真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體。24.權(quán)利要求23所述的方法，其中所述兩種或更多種鐵螯合化合物包括去鐵酮和地拉羅司。25.權(quán)利要求14所述的方法，其中所述預(yù)防包括在所述真菌病癥發(fā)作之前，預(yù)防性給予所述至少一種鐵螯合化合物。26.治療或預(yù)防真菌病癥的方法，其包括給予患有真菌病癥或易患真菌病癥的個體治療有效量的至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑，給予的時間足以降低所述真菌病癥的嚴(yán)重性，其中所述鐵螯合化合物包括與所述真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體。27.權(quán)利要求26所述的方法，其中所述真菌病癥包括接合菌病、曲霉病、隱球菌病、念珠菌病、組織胞漿菌病、球孢子菌病、副球孢子菌病、鐮刀菌病(透明絲孢菌病)、芽生菌病、青霉病或孢子絲菌病。28.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述接合菌病進一步包括毛霉病。29.權(quán)利要求28所述的方法，其中所述毛霉病包括鼻腦型毛霉病、肺毛霉病、胃腸毛霉病、彌散性毛霉病、骨毛霉病、縱膈毛霉病、氣管毛霉病、腎臟毛霉病、腹膜毛霉病、上腔靜脈毛霉病或外耳炎毛霉病。30.權(quán)利要求29所述的方法，其中所述毛霉病與毛霉目中的傳染原相關(guān)。31.權(quán)利要求30所述的方法，其中所述毛霉目中的傳染原選自根霉屬的種，包括米根霉(i/u'zo;^o7zae)(少根根霉(及/2/zo/n^cttWzm))、小孢子根霉變體(i/h'zo;iw附/cnwpon^varA/zopo^/b/7wX)、傘枝犁頭霉046wW/"coow6z/era)、雅致鱗質(zhì)霉G4/70/7/2;w附j(luò);cMe/egara)、毛霉屬的種、微小根毛霉(iWzowwcor;ww'〃^)禾口小克銀漢霉某種(Cw"w'"gkwje〃fl^p)(小克銀漢霉科)。32.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述念珠菌病與選自包括白假絲酵母(Candidaalbicans)、克魯斯假絲酵母(Omc!Wafo^se/)、熱帶假絲酵母(Om^必/rop/o/的、光滑假絲酵母(Cam/!Wag/Wrato)和近平滑假絲酵母(Ca"a^aparapw7o&)的假絲酵母屬種的傳染原相關(guān)。33.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述曲霉病與選自包括煙曲霉04^^^7/^y!'mi'gafM51)、黃曲霉(^5perg!^sy7avw51)、土曲霉(乂5pergi'〃Ksferreiw)、構(gòu)巢曲霉C4^erg/〃M"/血/a"5)和棒曲霉0^;erg///^c/ava/w力的曲霉屬種的傳染原相關(guān)。34.權(quán)利要求26所述的方法，其中所述鐵螯合化合物包括去鐵酮或地拉羅司。35.權(quán)利要求26所述的組合物，其中所述抗真菌劑包括多烯抗真菌劑、吡咯抗真菌劑或棘白菌素抗真菌劑。36.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述多烯抗真菌劑選自兩性霉素B脫氧膽酸鹽、脂質(zhì)體兩性霉素B、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體或兩性霉素B硫酸膽甾醇酯。37.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述吡咯抗真菌劑選自泊沙康唑、伏立康唑、氟康唑或伊曲康唑。38.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述棘白菌素抗真菌劑選自醋酸卡泊芬凈或米卡芬凈。39.權(quán)利要求26所述的方法，進一步包括兩種或更多種鐵螯合化合物，其中每種鐵螯合化合物包含與所述真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體。40.權(quán)利要求39所述的方法，其中所述兩種或更多種鐵螯合化合物包含去鐵酮和地拉羅司。41.權(quán)利要求26所述的方法，進一步包含兩種或更多種抗真菌劑。42.權(quán)利要求41所述的方法，其中所述兩種或更多種抗真菌劑選自多烯抗真菌劑、吡咯抗真菌劑或棘白菌素抗真菌劑。43.權(quán)利要求42所述的方法，其中所述抗真菌劑選自兩性霉素B脫氧膽酸鹽、脂質(zhì)體兩性霉素B、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合體、兩性霉素B硫酸膽甾醇酯、泊沙康唑、伏立康唑、氟康唑、伊曲康唑、醋酸卡泊芬凈或米卡芬凈。44.權(quán)利要求26所述的方法，其中所述預(yù)防包括在所述真菌病癥發(fā)作之前，預(yù)防性給予所述至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。全文摘要本發(fā)明提供了組合物，其包括至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。該組合物可以包括鐵螯合化合物去鐵酮或地拉羅司。該組合物中包含的抗真菌劑可以包括多烯抗真菌劑，吡咯抗真菌劑或棘白菌素抗真菌劑。本發(fā)明也提供了治療或預(yù)防真菌病癥的方法。該方法包括給予患有或易患真菌病癥的個體治療有效量的至少一種鐵螯合化合物充足的時間，以降低真菌病癥的嚴(yán)重性，其中所述鐵螯合化合物包含與該真菌病癥相關(guān)的非鐵載體或非異鐵載體。由本發(fā)明提供的治療或預(yù)防真菌病癥的方法也可以包括給予患有或易患真菌病癥的個體治療有效量的至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。本發(fā)明進一步提供了一種方法，其包括在真菌病癥發(fā)作之前，預(yù)防性給予至少一種鐵螯合化合物，或至少一種鐵螯合化合物和至少一種抗真菌劑。文檔編號A61P31/10GK101511360SQ200780032861公開日2009年8月19日申請日期2007年7月13日優(yōu)先權(quán)日2006年7月13日發(fā)明者A·S·伊布拉伊姆,B·J·斯皮爾伯格,J·E·愛德華茲申請人:美國加州大學(xué)洛杉磯海濱分校醫(yī)學(xué)中心的洛杉磯生物醫(yī)學(xué)研究所