專利名稱：：Cxcr2或cxcr1與cxcr2兩者的選擇性拮抗劑的藥物制劑和組合物及其用于治療炎性疾病...的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明提供基于CXCR2或CXCR1與CXCR2兩者的選擇性拮抗劑的組合物以及藥盒和治療方法，用于治療炎性疾病(例如急性炎性疼痛、關節(jié)炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、銀屑病、嗜喘(包括嗜中性粒細胞性哮喘))。
背景技術：
：多形核(PMN)白細胞(主要為嗜中性粒細胞)是為數(shù)最多的白細胞，也是最先募集到發(fā)炎部位的細胞，其在發(fā)炎部位釋放蛋白酶、活性氧中間體及有效的炎性介質(zhì)。具有ELRCXC基序的趨化因子是嗜中性粒細胞趨化性的主要介質(zhì)并共享兩種不同受體即CXCR1和CXCR2。因此，證實了CXCR1和CXCR2之一或兩者的選擇性拮抗劑可用于治療炎性疾病，而沒有現(xiàn)行療法相關的毒副作用。需要CXCR1和CXCR2之一或兩者的選擇性拮抗劑的組合物。例如，需要適于大規(guī)模生產(chǎn)并具有包括即釋溶出曲線以及顏色穩(wěn)定性在內(nèi)的某些所需特征的組合物。發(fā)明概述本發(fā)明提供基于CXCR2的選擇性拮抗劑的組合物和藥盒及其使用方法，用于治療炎性疾病。本發(fā)明也提供基于CXCR1和CXCR2兩者的選擇性拮抗劑的組合物和藥盒及其使用方法，用于治療炎性疾病。通常，使用CXCR2或CXCR1與CXCR2兩者的選擇性拮抗劑可減少CXCR1和/或CXCR2的非選擇性拮抗劑相關的毒副作用。值得注意的是，提供適于大規(guī)模生產(chǎn)并具有包括有利的溶出曲線以及顏色穩(wěn)定性在內(nèi)的某些特征的組合物。在優(yōu)選的實施方案中，CXCR2或CXCR1與CXCR2兩者的選擇性拮抗劑是2-羥基-N，N-二曱基-3-[[2-[[l(R)-5-曱基-2-呋喃基)丙基]氨基]-3,4-二氧代-l-環(huán)丁烯-l-基]氨基]苯曱酰胺，在本文中稱為化合物I,見以下化學結構或其藥學上可接受的鹽。在一個實施方案中，化合物I是一水合物。在一個實施方案中，化合物I或其藥學上可接受的鹽按其選擇性拮抗CXCR2的治療有效量來給予。在一個優(yōu)選的實施方案中，選擇性拮抗CXCR2的化合物I的治療有效量范圍為約3mg/天至約50mg/天。在另一個實施方案中，按選擇性拮抗CXCR1和CXCR2兩者的治療有效量給予化合物I或其藥學上可接受的鹽。在優(yōu)選的實施方案中，化合物I的藥學上可接受的鹽由選自以下酸的藥學上可接受的酸加成鹽來制備乙酸、苯磺酸、苯曱酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸和對曱苯磺酸。本發(fā)明提供包含CXCR2選擇性拮抗劑和至少一種藥學上可接受的賦形劑的組合物。本發(fā)明也提供包含CXCR1和CXCR2兩者的選擇性拮抗劑和至少一種藥學上可接受的賦形劑的組合物。在一個優(yōu)選的實施方案中，CXCR1和CXCR2兩者的選擇性拮抗劑是化合物I或其7藥學上可接受的鹽。本發(fā)明提供包含化合物I或其藥學上可接受的鹽和至少一種藥學上可接受的賦形劑的組合物，當在37°C士0.5。C使用槳葉速度設定在75RPM的USPII槳式攪拌器裝置測試時，該組合物在5分鐘內(nèi)釋放至少約83%的化合物I,其中該裝置裝有卯0mL由pH6.8的磷酸鈉緩沖液緩沖的0.5%十二烷基硫酸鈉溶液組成的溶出介質(zhì)(dissolutionmedium)。優(yōu)選組合物在15分鐘內(nèi)釋放至少約99°/。的化合物I。在一個實施方案中，至少一種藥學上可接受的賦形劑是一種或多種潤濕劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑或者一種或多種崩解劑。在另一個實施方案中，至少一種藥學上可接受的賦形劑是一種或多種潤濕劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑和一種或多種崩解劑。在又一個實施方案中，至少一種藥學上可接受的賦形劑是潤濕劑、粘合劑、稀釋劑或崩解劑，或其兩種或更多種的任意組合。在一個實施方案中，將化合物I、一種或多種潤濕劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑和一種或多種崩解劑在流化床上混合所獲得的第一樣品的顏色，與在70。C的進風溫度下干燥失重達到^4。/o且在70。C的進風溫度下繼續(xù)干燥至少80分鐘后所獲得的第二樣品的顏色進行比較而評價該組合物顏色穩(wěn)定性。在組合物的一個實施方案中，一種或多種潤濕劑的含量為約0.1-8%(重量)。在一個實施方案中，一種或多種潤濕劑是十二烷基石克酸鈉，十二烷基硫酸鈉與化合物I的比例為約1:10。在一個實施方案中，一種或多種潤濕劑是十二烷基硫酸鈉，其含量范圍為約0.1%至約5%(重量)。優(yōu)選的一種或多種潤濕劑是十二烷基^^危酸鈉，其含量范圍為約0.1%至約2%(重量)，更優(yōu)選為約1.5%(重量)。本發(fā)明還提供包含化合物I或其藥學上可接受的鹽和至少一種藥學上可接受的賦形劑的組合物，當在37°C士0.5。C使用槳葉速度設定在75RPM的USPII槳式攪拌器裝置測試時，該組合物在15分鐘內(nèi)釋放至少約92%的化合物I,其中該裝置裝有900mL由pH7.4的磷酸鈉緩沖液緩沖的0.2%SLS溶液組成的溶出介質(zhì)。優(yōu)選組合物在30分鐘內(nèi)釋放至少約96%的化合物I。在一個實施方案中，至少一種藥學上可接受的賦形劑是一種或多種潤濕劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑或者一種或多種崩解劑。在另一個實施方案中，至少一種藥學上可接受的賦形劑是一種或多種潤濕劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑和一種或多種崩解劑。在又一個實施方案中，至少一種藥學上可接受的賦形劑是潤濕劑、粘合劑、稀釋劑或崩解劑，或其兩種或更多種的任意組合。在組合物的一個實施方案中，一種或多種潤濕劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑和一種或多種崩解劑在流化床上混合。在一個實施方案中，一種或多種潤濕劑是泊洛沙姆，泊洛沙姆與化合物I的比例介于約0.3:1至約1.2:1之間。優(yōu)選泊洛沙姆與化合物I的比例為約1.2:1。在一個實施方案中，一種或多種潤濕劑是泊洛沙姆，其含量為約0.1-8%(重量)。在一個實施方案中，一種或多種粘合劑的含量為約0.1%至約20%(重量)。在一個優(yōu)選的實施方案中，一種或多種粘合劑是聚維酮(povidone),聚維酮與化合物I的比例介于約0.18:1至約1.8:1之間。在另一個優(yōu)選的實施方案中，聚維酮與化合物I的比例為約0.66:1。在一個實施方案中，一種或多種粘合劑是聚維酮，其含量為約0.3%至約5%(重量)。在一個實施方案中，一種或多種粘合劑是聚維酮，其含量為約2%至約3%(重量)。在一個實施方案中，當包裝在高密度聚乙烯(HDPE)瓶中時，在至少6個月內(nèi)在4(TC/75。/o相對濕度(RH)下，組合物保持穩(wěn)定。優(yōu)選當包裝在高密度聚乙烯(HDPE)瓶中時，在至少18個月內(nèi)在25'C/60。/。相對濕度(RH)下，組合物保持穩(wěn)定。在一個實施方案中，一種或多種粘合劑是預膠化淀粉，其含量為約0.1%至約20%(重量)。在一個優(yōu)選的實施方案中，預膠化淀粉的含量為預膠化淀粉與化合物I的比例介于約0.3:1至約1.2:1之間。在另9一個優(yōu)選的實施方案中，預膠化淀粉的含量為約6%至約7%(重量)。在一個實施方案中，一種或多種稀釋劑的含量為約10%至約90%(重量)。在一個優(yōu)選的實施方案中，一種或多種稀釋劑是微晶纖維素和乳糖。在一個實施方案中，一種或多種崩解劑的含量為約2%至約30%(重量)。在一個優(yōu)選的實施方案中，一種或多種崩解劑是交聚維酮(crospovidone)。在一個實施方案中，組合物還包含一種或多種助流劑。在一個優(yōu)選的實施方案中，一種或多種助流劑的含量為約0.1%至約5%(重量)。在一個優(yōu)選的實施方案中，一種或多種助流劑是二氧化硅。在一個實施方案中，組合物還包含一種或多種潤滑劑。優(yōu)選一種或多種潤滑劑的含量為約0.2%至約5%(重量)。在一個優(yōu)選的實施方案中，一種或多種潤滑劑是硬脂酸鎂。本發(fā)明也提供包含下列組分的組合物:組分mg/單位劑量的纟且合物化合物I3乳糖一水合物115.72微晶纖維素35.2交聚維酮16.5聚維酮5.28十二烷基辟u酸鈉0.3在一個實施方案中，組合物還包含下列組分:組分mg/單位劑量的組合物微晶纖維素24.2交聚維酮16.5齊一個實施方案中，組合物還包含下列組分:10組分mg/單位劑量的組合物二氧化硅2.2硬脂酸鎂1.1本發(fā)明還提供包含下列組分的組合物:組分mg/單位劑量的組合物化合物I10乳糖一水合物108.02微晶纖維素35.2交聚維酮16.5聚維酮5.28十二烷基硫酸鈉1在一個實施方案中，組合物還包含下列組分:組分mg/單位劑量的組合物微晶纖維素24.2交聚維酮16.5在一個實施方案中，組合物還包含下列組分:組分mg/單位劑量的組合物二氧化硅2.2硬脂酸鎂1.1本發(fā)明還提供包含下列組分的組合物:組分mg/單位劑量的組合物化合物I30乳糖一水合物86.02孩史晶纖維素35.211<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>在一個實施方案中，組合物還包含下列組分:<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>在一個實施方案中，組合物還包含下列組分:<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>本發(fā)明還提供包含下列組分的組合物:<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>在一個實施方案中，組合物還包含下列組分:<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>交聚維酮12.2在一個實施方案中，組合物還包含下列組分is.組分mg/單位劑量的組合物二氧化硅2硬脂酸鎂1本發(fā)明還提供包含下列組分的組合物:組分mg/單位劑量的組合物化合物I10乳糖一水合物56.4《敖晶纖維素28交聚維酮28泊洛沙姆18812聚維酮6.6二氧化硅1fe—個實施方案中，組合物還包含下列組分組分mg/單位劑量的組合物乳糖一水合物58微晶纖維素8交聚維酮10在一個實施方案中，組合物還包含下列組》、.組分mg/單位劑量的組合物二氧化硅1硬脂酸鎂113本發(fā)明還提供包含下列組分的組合物組分mg/單位劑量的組合物化合物I10乳糖一水合物57.5微晶纖維素28.8交聚維酮28預膠化淀粉12泊洛沙姆18812在一個實施方案中，組合物還包含下列組々組分mg/單位劑量的組合物微晶纖維素28.8交聚維酮8預膠化淀粉12在一個實施方案中，組合物還包含下列組分組分mg/單位劑量的組合物二氧化硅2硬脂酸鎂1本發(fā)明還提供包含下列組分的組合物:組分mg/單位劑量的纟且合物化合物I50乳糖一水合物55.3微晶纖維素25.1交聚維酮32.5預膠化淀粉15泊洛沙姆1881514在一個實施方案中，組合物還包含下列組分:組分mg/單位劑量的組合物微晶纖維素25.1交聚維酮12.5預膠化淀粉15在一個實施方案中，組合物還包含下列組分:組分mg/單位劑量的組合物二氧化硅3硬脂酸鎂1.5在一個實施方案中，在將30mg化合物I單劑量口服給予人之后，組合物表現(xiàn)出化合物I的平均AUC介于約484ng.hr/ml至約489ng.hr/ml之間。在一個實施方案中，在將30mg化合物I單劑量口服給予人之后，組合物表現(xiàn)出化合物I的平均Cmax介于約122ng/ml至約147ng/ml之間。在一個實施方案中，在口服給予人之后，組合物表現(xiàn)出化合物I的中值Tmax介于約0.5小時至約2小時之間。在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供藥盒，其包含裝有治療有效量的CXCR2或CXCR1與CXCR2兩者的選擇性拮抗劑的容器；用于治療炎性疾病的說明書。在藥盒的一個實施方案中，CXCR1與CXCR2兩者的選擇性拮抗劑是化合物I或其藥學上可接受的鹽。在藥盒的另一個實施方案中，化合物I或其藥學上可接受的鹽以單位劑型的形式存在，其含有約3mg、約10mg或約30mg化合物I或其藥學上可接受的鹽。本發(fā)明也提供治療患者的炎性疾病的方法，所述方法包括給予治15療有效量的本文所述的組合物。在優(yōu)選的實施方案中，炎性疾病選自急性炎性疼痛、關節(jié)炎、COPD、銀屑病和哮喘。在一個優(yōu)選的實施方案中，炎性疾病是COPD。在另一個優(yōu)選的實施方案中，炎性疾病是銀屑病。在又一個優(yōu)選的實施方案中，炎性疾病是哮喘。在再一個優(yōu)選的實施方案中，炎性疾病是嗜中性粒細胞性哞喘。在一個實施方案中，治療有效量的化合物I或其藥學上可接受的鹽為約3mg/天至約200mg/天。在另一個實施方案中，治療有效量的化合物I或其藥學上可接受的鹽為每天約3mg至約50mg化合物I或其藥學上可接受的鹽。在又一個實施方案中，治療有效量的化合物I或其藥學上可接受的鹽是以單位劑型經(jīng)口服給藥的，其單位劑型含有約3mg、約10mg或約30mg化合物I或其藥學上可接受的鹽。附圖簡述圖1說明自裝入膠嚢中的顆粒制劑1、2和3溶出而釋放的化合物1(%)隨時間的變化。詳見下面的實施例3。圖2說明在給予健康受試者單劑量口服劑量的10mg、50mg、100mg、l50mg(單用或與非格司亭(人G-CSF)聯(lián)用)或200mg化合物I(呈含配方1的膠嚢劑形式)之后，化合物I的平均血漿濃度。具體地講，圖2A描述了對數(shù)-線性曲線圖，圖2B描繪了線性-線性曲線圖。值得注意的是，誤差條表示±1標準差。詳見下面的實施例4。圖3說明經(jīng)設計以根據(jù)在健康受試者中的兩部分、隨機、標簽公開的交叉研究來證明配方2和配方3的相對生物利用度的臨床研究示意圖。圖4說明經(jīng)設計以證明化合物I在中度至嚴重COPD患者中的作用的臨床研究示意圖。具體地講，圖4A和圖4B分別描繪了該臨床研究的部分1(涉及群組l-3)和部分2(涉及群組4)。圖5說明經(jīng)設計以證明化合物I在嚴重嗜中性粒細胞性哮喘患者中的作用的臨床研究示意圖。具體地講，圖5A描繪了該研究的步驟1和步驟2;圖5B描繪了該研究的步驟1-3。圖6說明經(jīng)設計以證明化合物I在嚴重銀屑病患者中的作用的臨床研究示意圖。具體地講，圖6A描繪了部分1和部分2;圖6B描繪了該研究的進程。發(fā)明詳述本文所用的以下術語將具有下文所給出的定義。本文所用的短語"CXCR2的選擇性拮抗劑"是指以比一種或多種其它趨化因子效力高出約IO倍以上的效能抑制CXCR2信號傳導的藥物。同樣，短語"CXCR1和CXCR2兩者的選擇性拮抗劑，，是指以比一種或多種其它趨化因子效力高出約IO倍以上的效能抑制CXCR1和CXCR2信號傳導的藥物。根據(jù)使用克隆受體、嗜中性粒細胞膜及完整的嗜中性粒細胞的大量體外分析，化合物I是人CXCR1(Kd=4nM)和人CXCR2(Kd=0.05nM)的高度選擇性、有效、非竟爭性、可逆的雙重拮抗劑?？诜o予的化合物I能有效阻斷嗜中性粒細胞響應包括LPS、五氧化二4H^、抗原及機械刺激在內(nèi)的各種攻擊而向猴子、大鼠和小鼠的肺以及大鼠和小鼠的胸膜腔募集?；衔颕與NSAID在抑制角叉菜膠誘導的大鼠腳爪水腫的能力上極其相似。用化合物I進行長期治療能阻斷大鼠及小鼠肺部粘蛋白的產(chǎn)生以及大鼠關節(jié)炎關節(jié)的組織學變化?；衔颕的這種活性特征表明其作為用于炎性疾病的新型有效治療的效用。WO02/083624描述了該化合物(作為實施例360.31及405)、其制備方法、以及使用該化合物對趨化因子相關疾病及癌癥的治療。同樣，WO03/080053描述了^f吏用該化合物對趨化因子相關疾病的治療。WO2004/094398描述了制備該化合物的新方法，WO2005/075447描述了該化合物的多晶型I-IV及其制備方法。在一個實施方案中，優(yōu)選多晶型III。在另一個實施方案中，優(yōu)選多晶型IV。劑的短語"治療有效量"是指在治療或處理所述炎性疾病(例如急性炎性疼痛、關節(jié)炎、COPD、銀屑病、哮喘(包括嗜中性粒細胞性哮喘))中提供治療益處的量。本文所用的短語"藥學上可接受的鹽，，是指由藥學上可接受的酸或i威(包括無機酸或無機》威，或有機酸或有機《威)制備的無毒鹽。這類無機酸的實例是鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸和磷酸。合適的有機酸例如可選自脂族類、芳族類、羧酸類和磺酸類有機酸，其實例為曱酸、乙酸、丙酸、丁二酸、乙醇酸、葡糖醛酸、順丁烯二酸、糠酸、谷氨酸、苯曱酸、鄰氨基苯甲酸、水楊酸、苯乙酸、扁桃酸、恩波酸(雙羥萘酸)、甲磺酸、乙磺酸、泛酸、苯磺酸、硬脂酸、對氨基苯磺酸、海藻酸和半乳糖醛酸。這類無機堿的實例包括由鋁、鉤、鋰、鎂、鉀、鈉及鋅制得的金屬鹽。合適的有機堿例如可選自N，N-二千基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(meglumaine)(N-曱基葡胺)、賴氨酸和普魯卡因。本文所用的短語"炎性疾病"是指涉及通過CXCR1和/或CXCR2信號傳導的炎性疾病。在更優(yōu)選的實施方案中，使用本發(fā)明的組合物、藥盒和方法治療急性炎性疼痛、關節(jié)炎、COPD、4艮屑病和哮喘(包括嗜中性粒細胞性哮喘)。本文所用的術語"治療"是指減輕或緩解哺乳動物(例如人)的炎性疾病(例如急性炎性疼痛、關節(jié)炎、COPD、銀屑病、哮喘(包括嗜中性粒細胞性哮喘))。本文所用的術語"膠嚢劑"是指用于容納或裝入包含本發(fā)明組合物和載體的組合物的由曱基纖維素、聚乙烯醇或變性明膠或淀粉制得的特殊容納物或包裹體。有軟殼凝膠膠囊劑和硬殼凝膠膠嚢劑。與軟殼凝膠膠嚢劑相比，硬殼凝膠膠嚢劑通常是由相對高凝膠強度骨和豬皮明膠的混合物制得。膠嚢本身可含有少量染料、遮光劑、增塑劑和防腐劑。本文所用的術語"片劑"是指含有包含本發(fā)明組合物和載體的組18合物以及合適稀釋劑的口服可崩解的片劑。片劑可通過軟式壓縮混合物或顆?；蛲ㄟ^凍干法來制備。本文所用的短語"口服凝膠劑"是指分散或溶解于親水性半固體基質(zhì)中的包含本發(fā)明組合物及載體的組合物。本文所用的短語"口服可消耗薄膜劑"是指包含本發(fā)明組合物和可食用薄膜載體的組合物。本文所用的短語"配制用粉劑"是指可懸浮于水或果汁中的含有本文所用的術語"稀釋劑"是指通常構成組合物主要部分的物質(zhì)。合適的稀釋劑包括糖，例如乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨醇；由小麥、玉米、大米和馬鈴薯制得的淀粉；以及纖維素，例如微晶纖維素。組合物中稀釋劑的含量范圍占總組合物的約10%至約90%(重量)，優(yōu)選為約25%至約卯％(重量)，更優(yōu)選約25°/。至約80°/。，更優(yōu)選約30%至約80%(重量)，甚至更優(yōu)選約65%至約80%(重量)。本文所用的術語"崩解劑"是指添加至組合物中以幫助組合物裂解(崩解)而釋放藥物的物質(zhì)。合適的崩解劑包括淀粉；"可溶于冷水"的改性淀粉，例如羧曱基淀粉鈉；天然和合成的樹膠，例如刺槐豆膠、刺梧桐膠、瓜爾膠、西黃蓍膠和瓊脂；纖維素衍生物，例如曱基纖維素和羧曱基纖維素鈉；微晶纖維素和交聯(lián)微晶纖維素，例如交:眹羧曱基纖維素鈉；海藻酸鹽，例如海藻酸和海藻酸鈉；粘土，例如皂土；泡騰混合物；和超崩解劑，例如乙醇酸淀粉鈉、交聚維酮和交聯(lián)羧曱基纖維素鈉。組合物中崩解劑的含量范圍可占組合物重量的約2°/0至約30%(重量)，優(yōu)選為約4%至約22%(重量)，更優(yōu)選約4%至約17%(重量)，甚至更優(yōu)選約4%至約15%(重量)。本文所用的術語"粘合劑"是指將粉末粘合或"膠粘"在一起并通過形成顆粒使其內(nèi)聚而由此充當組合物中的"粘著劑"的物質(zhì)。粘合劑增加已在稀釋劑或填充劑中獲得的粘著強度。合適的粘合劑包括糖，例如蔗糖；由小麥、玉米、大米和馬鈴薯制得的淀粉，包括19預膠化淀粉；天然樹膠，例如阿拉伯膠、明膠和西黃蓍膠；海藻的衍生物，例如海藻酸、海藻酸鈉和海藻酸釣銨；纖維素材料，例如曱基纖維素、羧曱基纖維素鈉和羥丙基曱基纖維素；聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidinone);和無機物，例如硅酸鋁鎂。組合物中粘合劑的含量范圍可占組合物重量的約0.1%至約20%(重量),優(yōu)選為約0.3%至約10%(重量)，更優(yōu)選0.3%至約5%(重量)，甚至更優(yōu)選約0.3%至約3%(重量)。本文所用的術語"潤滑劑"是指添加至組合物中以使顆粒等在其經(jīng)壓縮后能夠通過降低摩擦或磨損而自模具或沖模中脫落的物質(zhì)。合適的潤滑劑包括金屬硬脂酸鹽，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈞或硬脂酸鉀；硬脂酸；高熔點蠟；和水溶性潤滑劑，例如氯化鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇及d'l-亮氨酸。潤滑劑通常在壓縮前的接近最后步驟中添加，因為它們必須存在于顆粒表面上并介于顆粒與壓片機部件之間。組合物中潤滑劑的含量范圍可占組合物重量的約0.2%至約5%(重量)，優(yōu)選約0.5%至約2%，更優(yōu)選約0.3%至約1.5%(重量)。本文所用的術語"助流劑"是指防止結塊并改進顆粒的流動特征以使流動平穩(wěn)且均勻的物質(zhì)。合適的助流劑包括二氧化硅和滑石粉。組合物中助流劑的含量范圍可占總組合物重量的約0.1%至約5%(重量)，優(yōu)選為約0.5%至約2%(重量)。本文所用的短語"濕潤劑"是指通過降低組合物表面張力而使組合物濕潤的物質(zhì)。濕潤劑可為陰離子型濕潤劑、陽離子型濕潤劑或非離子型濕潤劑。合適的濕潤劑包括多庫酯鈉、乳化蠟BP、自乳化單油酸甘油酯、十二烷基石克酸鈉、節(jié)索氯銨、西曲溴銨、十二烷基硫酸鈉不相容性、氯己定活性、乳化蠟、對羥基苯曱酸丁酯、乳化蠟USP、對羥基苯曱酸乙酯、單油酸甘油酯、對羥基苯曱酸曱酯、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚山梨酯80、對羥基苯曱酸丙酯、山梨酸、脫水山梨醇酯和檸檬酸三乙酯。濕潤劑的含量范圍可占組合物重量的約0.1%至約8%,更優(yōu)選為0.1%至約5%(重量)，還更優(yōu)選約0.1%至約1%。在一個實施方案中，本發(fā)明的組合物和藥盒用于口服給藥。對于口服制劑而言，組合物中還含有藥學上可接受的載體(其包括稀釋劑、賦形劑或載體材料)。對于預定給藥形式適當?shù)剡x擇載體，所述給藥形式是指口服膠嚢劑(填充固體、填充半固體(凝膠)或填充液體)、配制用粉劑、口服凝膠劑、口服可崩解片劑、口服可消耗薄膜劑、酏劑、糖漿劑、混懸劑等，且符合常規(guī)藥學實踐。例如，對于膠嚢劑形式的口服給藥而言，藥用活性劑可與任何口服無毒的藥學上可接受的惰性載體組合，所述載體例如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸4丐、甘露醇、乙醇(液體形式)等。此外，當必需或需要時，也可將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑、消毒劑和著色劑摻混到混合物中。合適的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖類、玉米甜味劑、天然和合成的樹膠(例如阿拉伯膠)、海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇和蠟。合適的潤滑劑包括硼酸、苯曱酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。合適的崩解劑包括淀粉、曱基纖維素、瓜爾膠等。合適的消毒劑包括苯扎氯銨等。適當時也可包括甜味劑和矯味劑以及防腐劑。另外，可將本發(fā)明的組合物和藥盒配制成持續(xù)釋放形式以控制藥用活性劑中的任一種或多種的釋放速率，達到最佳療效。用于持續(xù)釋放的合適組合物包括層狀膠嚢劑(例如含有崩解速率不同的層或經(jīng)藥劑浸漬的控制釋放聚合基質(zhì))，其在含有這類經(jīng)浸漬或經(jīng)包裹的多孔聚合基質(zhì)的膠嚢中成形。在另一個實施方案中，本發(fā)明的組合物和藥盒是供胃腸外給藥用，例如靜脈內(nèi)、胂瘤內(nèi)、皮下或肌內(nèi)給藥。因此，為制備胃腸外注射用含水溶液劑，可使用共溶劑，例如醇(例如乙醇；或二醇，例如聚乙二醇或丙二醇；或甘油)并4壬選親水性表面活性劑(例如吐溫⑧80)。可例如通過用甘油三酯或甘油酯使活性成份溶解來制備肌內(nèi)注射用油性溶液劑。大體上非水性載體(賦形劑)可為具有生物相容性且在體溫下呈液態(tài)或足夠柔軟的任何物質(zhì)。載體通常為疏水性載體且通常為有機載體，例如植物、動物、礦物或合成來源或起源的油或脂肪。優(yōu)選但并非必需，載體包含至少一個代表"脂肪"化合物(例如脂肪酸、醇、酯等)的化學部分，即經(jīng)鏈、酯鍵或兩者。在本文中"脂肪"酸包括乙酸、丙酸和丁酸，以及含有多達30個或更多個碳原子的直鏈或支鏈有機酸。優(yōu)選地，載體不溶于水及/或溶于通常被稱為脂溶劑的物質(zhì)中。載體可以相當于這樣的一種或多種"脂肪"化合物與羥基化合物的反應產(chǎn)物，所述羥基化合物例如單羥基、二羥基、三羥基或其它多羥基醇，例如甘油、丙二醇、月桂醇、聚乙二醇或聚丙二醇等。這些化合物包括脂溶性維生素，例如生育酚及其酯，例如有時產(chǎn)生可使生育酚穩(wěn)定的乙酸酯。有時，出于經(jīng)濟原因，載體可優(yōu)選包括天然的未經(jīng)改性的植物油，例如芝麻油、大豆油、花生油、棕櫚油或未經(jīng)改性的脂肪?；蛘撸赏ㄟ^氫化或其它和本發(fā)明兼容的化學手段使植物油或脂肪改性。也包括適當使用通過合成手段制備的疏水性物質(zhì)。適用于胃腸外給藥的藥物組合物可與以下物質(zhì)在無菌注射用水中一起配制合適的緩沖液，例如Tris-HCl、乙酸鹽或磷酸鹽(例如磷酸氬二鈉/磷酸二氬鈉)緩沖液；和藥學上可接受的賦形劑(例如蔗糖)、載體(例如人血清白蛋白)、張力劑(例如NaCl)、防腐劑(例如硫柳汞、曱酚或苯曱醇)和表面活性劑(例如吐溫或聚山梨醇酯)。典型的合適注射器包括包含連接至筆型注射器(例如得自NovoNordisk的NOVOLETNovoPen)的預灌裝小瓶以及便于使用者自己注射的預灌裝筆型注射器的系統(tǒng)。其它注射器系統(tǒng)包括分裝在獨立小室中的稀釋劑和凍干粉針劑的玻璃小筒的筆型注射器。通常由主治醫(yī)師根據(jù)病例來確定待給予的CXCR1和CXCR2中的一種或兩者的選擇性拮抗劑的量。作為準則，當確定合適劑量時將考慮患者炎性疾病的程度、體重和年齡。化合物I的示例性組合物詳見下表1-4。含有化合物I的配方1膠嚢劑詳見下表1。22表l.每粒膠嚢中的量(mg)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>配方l膠嚢劑是通過使用低剪切混合過程的濕法造粒、干燥、碾磨、混合并裝入硬質(zhì)明膠膠嚢中而制造的。發(fā)現(xiàn)這樣的膠嚢劑當包裝在高密度聚乙烯(HDPE)瓶中時，在40。C/75Q/。相對濕度(RH)下在至少6個月內(nèi)保持穩(wěn)定，而且在25。C/60。/。RH下在至少18個月內(nèi)保持穩(wěn)定。然而，配方l不適于大規(guī)模處理，因為低剪切混合過程對大規(guī)模處理并不實用。為了有助于使用濕法造粒過程擴大規(guī)^莫，用流化床方法替代低剪切混合方法。然而，由于配方1中所用的粘合劑是預膠化淀粉，它并不適用于所采用的流化床過程，所以在制造中的這種改變也需要對配方進行修改。因此，需要與流化床過程和化合物I兩者兼容的另一種粘合劑。聚維酮隨后被確定為合適的粘合劑并可替代預膠化淀粉以完全不同的濃度來使用。含有化合物I和聚維酮的配方2詳見下表2。表2.<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>乳糖一水合物50.658微晶纖維素1208交聚維酮12.210二氧化硅21硬脂酸鎂11膠嚢填充物重量200220膠嚢外殼硬質(zhì)明膠膠嚢，2號Blue6060Opaqueb總填充膠嚢重量260280a:在制造過程中蒸發(fā)掉b:含有0.8867%FD&CBlue#2、1.4393%.二氧化鈦和適量100%明膠。配方2膠嚢劑是通過使用流化床的濕法造粒、干燥、碾磨、混合并裝入硬質(zhì)明膠膠嚢中而制造的。盡管適合大規(guī)模處理，但是發(fā)現(xiàn)配方2膠嚢劑在制備過程中會變色。為提供適用于通過濕法造粒進行大規(guī)模處理且產(chǎn)生顏色穩(wěn)定性更高的產(chǎn)品的配方，按照下面的實施例l所述，詳細地研究了不同賦形劑與化合物I組合的顏色穩(wěn)定性。根據(jù)這些分析的結果，開發(fā)采用不同濃度的濕潤劑泊洛沙姆(即3%或8%)或完全不同濃度(即1.5%)的完全不同的濕潤劑十二烷基琉酸鈉(SLS)的其它配方。使用泊洛沙姆或SLS的示例性配方見下表3。25表3.<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>按照下面的實施例2中所述，詳細地研究了使用泊洛沙姆或SLS的配方的顏色穩(wěn)定性。根據(jù)采用1.5%的SLS替代3。/?；?°/。的泊洛沙姆作為濕潤劑的示例性配方B的增加的顏色穩(wěn)定性，開發(fā)出含有化合物I和SLS的配方3。配方3詳見下表4。表4.<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>純凈水(美國藥典)一a—a—a總顆粒重量176176176膠囊填充物一水合物顆粒176176176微晶纖維素24.224.224.2交聚維酮16.516.516.5二氧化硅2.22.22.2硬脂酸鎂1.11.11.1膠嚢填充物重量220220220膠嚢外殼硬質(zhì)明膠膠嚢，2號^^^BlueOpaqueb總填充膠嚢重量^^^a:在制造過程中蒸發(fā)掉b:含有0.8867%FD&CBlue#2、1.4393%二氧化鈦及適量100%明膠。配方3膠嚢劑是按照類似于配方2的方式通過使用流化床的濕法造粒、干燥、碾磨、混合并包膠嚢來制造的。實施例實施例1-評價不同賦形劑和化合物I的顏色穩(wěn)定性的研究研究了不同賦形劑和化合物I組合的顏色穩(wěn)定性，詳見以下3個實驗。實驗A-60。C保溫將裝有化合物I和賦形劑(充分混合)或僅裝有賦形劑的無蓋小瓶放入60。C烤箱中過6小時。所檢驗的小瓶中各組分的重量詳見下表5。27表5."?；衔颕SLS泊洛沙姆乳糖AvicelPVP交聚維酮拜口p(mg)(mg)(mg)(mg)(mg)(mg)(mg)Al90.391.3A291.290.3A390.791.3A491.490.4A590.290.8A69U91.0A790.9A892.0A991.4A10卯.3All90.4A1291.1A1390.7在60°C6小時后，取出小瓶，將蓋子蓋在小瓶上并記錄目測結果。各樣品的目測結果概述于下表6。表6.樣品目測結果Al白色至淺灰白色粉末A2灰白色液體，接著在室溫(RT)下固化A3白色至灰白色粉末A4白色粉末A5白色粉末A6白色至淺灰白色A7白色至淺灰白色A8白色粉末A9澄清液體，在室溫(RT)下固化A10白色粉末28<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>實驗C-70。C保溫(用水)將裝有化合物I和賦形劑(充分混合)和水或裝有賦形劑和水的有蓋小瓶放入70。C烤箱過6小時。所檢驗的小瓶中各組分的重量詳見下表9。表9.<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>在約70°C6小時后，取出小瓶并記錄目測結果。各樣品的目測結果概述于下表10。表IO.樣品目測結果CI白色粉末混懸液C2白色混懸液C3白色混懸液C4澄清液體(凝膠狀)C5澄清液體(凝^皎狀)根據(jù)實驗A、B和C的觀察結果，選擇濕潤劑泊洛沙姆用于進一步研究顏色穩(wěn)定性。按照下面的實施例2所述，詳細地研究了含有泊洛沙姆或一種不同的濕潤劑-十二烷基^5危酸鈉的配方。實施例2-評價含有化合物I和泊洛沙姆或十二烷基琉酸鈉的配方的顏色穩(wěn)定性的研究制備含有化合物I和泊洛沙姆或SLS的各種配方(按照表3詳細列舉的配方A和配方B為例子)的膠嚢劑并在50°C、60。C或7(TC的進風溫度下評價其顏色穩(wěn)定性。簡而言之，在使用含有化合物I和3%泊洛沙姆、8%泊洛沙姆或1.5%SLS的配方制備膠嚢劑期間得到樣品。在不同時間點(2分鐘=在流化床中混合后的初始樣品；20分鐘=在添加全部造粒溶液后得到的樣品；30分鐘-干燥失重(LOD)《4%;100分鐘、150分鐘和220分鐘=在LOD達到^4。/。且繼續(xù)干燥后取得的樣品)，將樣品放入琥珀色玻璃瓶中。各樣品通過30目篩手工過篩，將篩過的樣品放入獨立的白色塑料天平盤中并目視評價顏色描述。該實驗結果概述于下表11。31表ll.配方潤濕劑進風溫度2分鐘20分鐘30分鐘100分鐘150分鐘220分鐘A8%泊洛沙姆60°C++++++++++++++A8%泊洛沙姆50。C+++++++++++B1.5%SLS70°C+++++N/AA3%泊洛沙姆70。CN/A+N/A++++N/AN/A尺度0=白色+=淺灰白色++=灰白色+++=淺黃色++++=黃色發(fā)現(xiàn)含SLS的化合物I的膠嚢劑比含有泊洛沙姆的膠嚢劑的顏色穩(wěn)定性更高。具體地講，SLS配方在最初2分鐘混合后變?yōu)闇\灰白色并在以后的時間點在70。C進風溫度下維持顏色穩(wěn)定。相比之下，泊洛沙姆配方在后面的干燥時間點(IOO、150、220min)在所有進風溫度下由淺黃色變?yōu)辄S色。實施例3-證明配方l、2和3的溶出曲線的研究將分別在表l、2和4所列的配方1、2和3的10mg膠嚢劑的顆粒等分試樣放入膠嚢(不含額外膠嚢填充物)中并根據(jù)以下詳述的方法來測定其溶出曲線。配方1和配方2所用的溶出試驗裝置為裝有900mL溶出介質(zhì)的USPII裝置槳式攪拌器，該溶出介質(zhì)是由pH7.4磷酸鈉緩沖液緩沖的0.2%SLS溶液組成。在37。C土0.5。C進行溶出試驗。通過在測試溫度下在設定在75RPM的槳葉速度下穩(wěn)定溶出介質(zhì)來進行測試。將膠嚢劑放入溶出介質(zhì)32中，同時啟動槳葉。定期采集溶出介質(zhì)的等分試樣樣品，并通過紫外光譜法在293nm處分析一個膠嚢的化合物I含量并且通過紫外光譜法在293nm處和HPLC在293nm處分析兩個膠嚢(即在以下加入后時間點通過紫外光譜法來分析15分鐘、30分鐘、45分鐘和60分鐘；并且在以下加入后時間點通過HPLC來分析5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘和60分鐘)的化合物I含量。根據(jù)在293nm處的紫外和/或HPLC測定，求出溶出介質(zhì)所含的化合物I總量并將其報告為溶于溶出介質(zhì)的膠嚢中初始所含的化合物I總量的百分比。按照配方1或配方2制備的膠嚢劑的代表性樣品的溶出數(shù)據(jù)見下表12。具體地講，通過紫外光譜法在293nm處分析配方1的12個膠嚢劑和配方2的12個膠嚢劑，同時通過HPLC在293nm處分析配方2的6個膠嚢劑。同樣，配方1和配方2膠嚢劑的溶出曲線以圖表形式示例于圖1。配方3所用溶出試驗裝置為裝有900mL溶出介質(zhì)的USPII裝置槳式攪拌器，該溶出介質(zhì)是由pH6.8磷酸鈉緩沖液緩沖的0.5%SLS溶液組成。在37°C±0.5。C進行溶出試驗。通過在測試溫度下在設定于75RPM的槳葉速度下穩(wěn)定溶出介質(zhì)來進行測試。將膠嚢放入溶出介質(zhì)中，同時啟動槳葉。定期采集溶出介質(zhì)的等分試樣樣品并通過HPLC在293nm處分析化合物I含量(即在以下加入后時間點5、15、30、45和60分鐘)。根據(jù)HPLC測定求出溶出介質(zhì)所含的化合物I總量并將其報告為溶于溶出介質(zhì)的膠嚢中初始所含的化合物I總量的百分比。12個配方3膠嚢劑的代表性樣品的溶出數(shù)據(jù)見下表12。同樣，配方3膠嚢劑的溶出曲線以圖表形式示例于圖1。33<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>300jug非格司亭(人G-CSF)組合)或200mg化合物I(ii)對禁食或進食受試者單劑量口服給予30mg化合物I(iii)多劑量口服給予10mg、30mg或50mg化合物I單劑量口服給予10mg、50mg、100mg、150mg(與或不與300嗎非格司亭組合)或200mg化合物I后的平均血漿濃度見圖2A(對數(shù)-線性曲線圖)和圖2B(線性-線性曲線圖)。值得注意的是，給予150mg化合物I后再給予300)ug非格司亭并不改變化合物I的藥代動力學曲線。另夕卜，在食物-效應和多劑量研究中觀測到類似的藥代動力學曲線(數(shù)據(jù)未顯示)。也就是說，在一些受試者中，在給藥后4小時內(nèi)觀測到血漿濃度-時間曲線中的多個峰值，而且在給藥后12小時和24小時處具有微小但一致的峰值。同樣，單劑量口服給予10、50、100、150(與或不與300pg非格司亭組合)或200mg化合物I后的平均藥代動力學參數(shù)概述于下表13。另外，對進食和禁食條件下的健康受試者單劑量口服給予30mg化合物I后的平均藥代動力學參數(shù)也概述于下表13。表13.劑量CmaxTmaxTf化合物I(ng/mL)(hr)(hr)(mg)平均值CV(%)中位值范圍平均值CV(%)1073.83510.5-3143550153270.750.5-44635100261340.750.5-43813150364190.750.5-26439150292290.750.5-25838(+非格司亭)200416500.6250.5-1524330(禁食)14770.750.5-4402730(進食)1224620.5-632.32935劑量AUC(tf)AUC(l)t'/2化合物I(ng.hr/mL)(ng.hr/mL)(hr)(mg)平均值CV(%)平均值CV(%)平均值CV(%)1016212NAaNCNAaNC5066519768b1615.8b31100827238782411.82915015342316412116.7431501325311378291337(+非格司亭)20017315518085311.33330(禁食)48428563e2320.8C4030(進食)48925572d2322.9d49NA-無資料；M^未能算出(iK3)。a:在該組所有受試者中均未能檢測到末期消除相。b:n=4。c:n=10。d:n=7。對進食和禁食條件下的健康受試者單劑量口服給予30mg化合物I后的化合物I的相對生物利用度概述于下表14。表14.化合物I平均值平均值估計比率a90%置信區(qū)間(mg)CmaxAUC(tf)(%)(ng/ml)(ng.hr/ml)30(禁食)14748482.960-11530(進食)12248910292-113a:在進食條件下相對于禁食條件下的處理組的log轉換平均值的百分率。以上數(shù)據(jù)表明，食物對化合物I的Cmax或AUC(tf)值沒有臨床上有意義的影響。在進食條件相對于禁食條件下接受化合物I的受試者的置信區(qū)間滿足AUC(tf)而非Cmax的80°/。至125%生物等效性標36準。接受化合物I和食物的受試者的平均Cmax值比僅接受化合物I的受試者的平均Cmax值低17%。然而，這種差異并無臨床意義。對健康受試者多劑量口服給予10、30或50mg化合物I后的平均藥代動力學參數(shù)概述于下表15。表15.劑量天CmaxTmaxAUC(0-24hr)化合物I數(shù)(ng/mL)(hr)(ng.hr/ml)(mg)平均值CV(%)中位值范圍平均值CV(%)10176470,50.5-21372530173310.50.5-1.53972450239240.750.5-268120101478.1420.50.5-11562830159240.50.5-0.754142650279300.50.5-0.7582528劑量天t'/2R化合物I數(shù)(hr)(mg)平均值CV(%)平均值CV(%)101NCNCNANA30NCNCNANA50NCNCNANA1014NCNC1.14930NCNC1.05135013.8a461.2117NA二無資料；NC二未能算出(n〈3)。A:n=7。來自這些研究的數(shù)據(jù)表明，化合物I被快速吸收。中位Tmax值的范圍為給藥后0.5-2小時。平均末期消除？/2的范圍在11.3-22.9小時。無法測得某些受試者的末期消除相，這主要是因為生物分析測定的第二吸收峰和定量極限。根據(jù)累積比率，平均有效半衰期范圍在376.94-11.0小時并且可更有效地反映化合物I的分配。平均表觀總身體清除率(CL/F)值的范圍為55.9-138L/hr。平均表觀分布體積(Vd/F)值的范圍為1469-2205L。Cmax和AUC以劑量相關而非劑量成比例方式由10mg增至200mg。全身暴露的變異性為低至中等；對于Cmax和AUC而言，變異系數(shù)范圍分別為19%至50%和12%至55%。多劑量給予化合物I后，在第ll天達到穩(wěn)態(tài)；化合物ICmin值在第11天至第14天類似。在第14天，觀測到血漿中化合物I的少量蓄積至無蓄積；平均蓄積比(R)值范圍為1.05-1.21(參見表15)。實施例5-證明配方2和配方3的相對生物利用度的臨床研究設計該項臨床研究以證明配方2和配方3的相對生物利用度。該研究以圖表形式示例于圖3，是在健康男性及女性受試者中進行的兩部分、隨機、標簽公開的交叉研究。部分1包括兩個時期，其中16名受試者如下所述地全部交叉分配到處理A和處理B中。處理A:單劑量的配方3，10mg膠嚢劑(精細顆粒)處理B:單劑量的配方2，10mg膠嚢劑每次處理是以單劑量在4個不同場合來給藥，每次給藥之間有一個96小時的消除期。因此，每個處理期為期4天。每個受試者在第一天上午接受處理A或處理B。也就是說，一個10mg配方3膠嚢劑(處理A)或配方2膠嚢劑(處理B)以單一口服劑量形式和240ml水一起給予。在給藥前(O小時)以及給藥后0.5小時、1小時、2小時、4小時、6小時、8小時、12小時、24小時、48小時、72小時和96小時采集系列血樣，用于化合物I的藥代動力學評價。值得注意的是，第1部分第1期96小時樣品作為第1部分第2期的給藥前樣品。測定所采集的各血樣中化合物I的血漿濃度。接著進行示例性測定以確定化合物I的血漿濃度。簡而言之，通過吸取500^iL相應的各血漿樣品和25|iLIS工作溶液(0.100ng/mL)來制備校正標準品、QC樣品、研究樣品和零標準品(含有IS的空白)。通過將525iiL對照血漿移至稀釋管來制備對照空白(不含IS的血漿)。所有樣品都用200pL含有0.1%乙酸溶液的10mM乙酸銨進行稀釋。用1.0mL曱醇預洗滌萃取柱體(WaterOasis,1m)并在3000rpm離心3分鐘，然后加入1.0mL含有0.1%乙酸的10mM乙酸銨。再在3000rpm下離心3分鐘。用1.0mL含有0.1%乙酸的10mM乙酸銨洗滌。在2000rpm下離心5分鐘。用1.0mL去離子水洗滌各柱體并在2000rpm下離心5分鐘。用1.0mL曱醇等分試樣從柱體上洗脫化合物。在40。C輕柔氣流中蒸發(fā)洗脫液至干。在96孔測定板中用0.3mL的50:50(v:v。/。)曱醇:水溶液重配殘余物。將10-40|LiL等分試樣注入LC-MS/MS系統(tǒng)中用于分析。將5-10pL等分試樣注入LC-MS/MS系統(tǒng)中用于分析。HPLC系統(tǒng)使用4.6x50mm(5|um粒徑)Luna苯基-己基柱，按照梯度步驟程序使用流速為1.0mL/min的流動相A(0.1°/。甲酸的水溶液)和流動相B(0.1°/。曱酸的乙腈溶液)，從大量基質(zhì)組分中分離分析物和IS。SCH527123和IS的保留時間為約1.2分鐘。使用配備有TurbolonSpray電離源的API4000三節(jié)四極LC-MS/MS系統(tǒng)來才企測分析物和IS。使用無房室分析，使用化合物I的血漿濃度推導出下列藥代動力學參數(shù)Cmax、Tmax和AUC(tf)以測定配方2和配方3的相對生物利用度。部分2包括兩個時期，其中16名受試者如下所述地全部交叉分配到處理C或處理D中。處理C:單劑量的配方3，10mg膠嚢劑(精細顆粒)處理D:單劑量的配方3，10mg膠嚢劑(粗顆粒)盡管部分1處理A和部分2處理C采用了相同配方，但參與部分2的受試者和參與部分1的受試者不同。39每次處理是以單劑量在4個不同場合來給藥，每次給藥之間有一個96小時的消除期。因此，每個處理期為期4天。每個受試者在第一天上午接受單一劑量的處理C或處理D。也就是說，一個10mg配方3精細顆粒膠嚢劑(處理C)或配方3粗顆粒膠嚢劑(處理D)以單一口服劑量形式和240ml水一起給予。在給藥前(O小時)以及給藥后0.5小時、l小時、2小時、4小時、6小時、8小時、12小時、24小時、48小時、72小時和96小時采集系列血樣，用于化合物I的藥代動力學評價。第2部分第1期96小時樣品作為第2部分第2期的給藥前樣品。測定所采集的各血樣中化合物I的血漿濃度。使用無房室分析，使用化合物I的血漿濃度推導出下列藥代動力學參數(shù)Cmax、Tmax和AUC(tf)以測定配方34青細顆粒和配方3粗顆粒的相對生物利用度。本發(fā)明人相信配方2提供和配方3相當?shù)纳锢枚?。另外，本發(fā)明人相信含有配方3精細顆粒的膠嚢劑提供和含有配方3粗顆粒的膠嚢劑至少相當?shù)纳锢枚?。實施?-證明化合物I在中度至嚴重COPD患者中的作用的臨床研究設計該項臨床研究以證明使用配方2或配方3膠嚢劑的化合物I在中度至嚴重COPD患者中的作用。該研究以圖表形式示例于圖4,是在中度至嚴重COPD患者中進行的雙盲、安慰劑對照、隨機、兩部分研究。部分1是雙盲、安慰劑對照、隨機、劑量升高的研究，其由招募于3個群組的4個處理組組成(圖4A)。各群組的處理期為期12周。目標樣品大小為每群組30名受試者，其中化合物I和安慰劑的比率為2:1，如下表15所示。40表15.群組安慰劑化合物I3mg10mg30mg11020--210-20-310--20使用配方2膠嚢劑的化合物I的三個劑量水平(即3mg、10mg和30mg)與安慰劑相比的安全性和耐受性是根據(jù)不良事件，即痰嗜中性粒細胞計數(shù)和外周血嗜中性粒細胞(PBN)計數(shù)的絕對數(shù)量和百分比自基線的變化。在完成對部分1群組1-3的安全性分析后，如下所述地進行部分2。部分2為雙盲、安慰劑對照、隨機、平行組的研究，其由招募為1個群組的4個處理組組成(圖4B)。群組4的處理期為期12周。目標樣品大小為每群組125名受試者，如下表16所示。表16.群組安慰劑化合物I3mg10mg30mg4125125125125如同部分1一樣，使用配方3膠嚢劑的化合物I的三個劑量水平(即3、10和30mg)與安慰劑相比的安全性及耐受性是根據(jù)不良事件，即痰嗜中性粒細胞計數(shù)和PBN計數(shù)的絕對數(shù)量和百分比自基線的變化。另外，這些劑量水平的有效性是^f艮據(jù)以下標準°支氣管擴張藥使用前第1秒用力呼氣量(forcedexpiratoryvolume,FEV1)自基線的變化以及痰產(chǎn)生、咳嗽和呼吸困難評分(SCDS)的個體癥狀總和的每日上午/下午自基線的變化，兩者均為12周處理期的縱向平均值。在每次就診或時間間隔期，支氣管擴張藥使用后FEV1、用力肺活量(forcedvitalcapacity,FVC)—半時(FEF25%-75%)41的用力呼氣流量、功能性余氣量(ftinctionalresidualcapacity,FRC)、COPD惡化、個體癥狀評分、SCDS和個體以及總體SaintGeorge呼吸問巻調(diào)查(SaintGeorge'sRespiratoryQuestionnaire,SGRQ)領域自基線的變化。對來自集中研究群體的安全性數(shù)據(jù)制表，并且包括不良事件、實驗室結果(包括PBN計數(shù))和肺功能測試結果。功效分析僅根據(jù)從部分2群組4收集的數(shù)據(jù)，其中所測量的主要功效參數(shù)為FEV1自基線的變化和SCDS自基線的變化，這兩者均作為12周處理期的縱向平均值來測定。根據(jù)方差分析(ANOVA)混合效應縱向模型的4刀步分析得出對所有連續(xù)功效參數(shù)自基線的變化的處理效應的評價。固定效應為處理(4個水平)和時間。隨機效應為各受試者的截距和斜率隨時間的變化。初步分析是4艮據(jù)高劑量和安慰劑的兩個比較(每個對應于各功效參數(shù))。應用用于兩個輔助一次參數(shù)(coprimaryparameter)的多重性調(diào)節(jié)的Hochberg方法以確保參數(shù)中的總錯誤率不超過4.9%。為了保護對于劑量的總錯誤率為4.9%,應用階降程序。具體地講，如果對于Hochberg調(diào)節(jié)下的兩個一次參數(shù)中僅一個而言，高劑量顯著優(yōu)于安慰劑，則對于在01=4.9%處的該相同端點將中等劑量與安慰劑比較，且如果中等劑量顯著優(yōu)于安慰劑，則對于在01=4.9%處的該相同端點將低劑量與安慰劑比較。另一方面，如果對于兩個主要端點而言高劑量都顯著優(yōu)于安慰劑，則對于Hochberg調(diào)節(jié)下的兩個主要端點將中等劑量與安慰劑比較。最終，來自中等劑量至低劑量的階降程序類似于上述關于高劑量至中等劑量階降程序的情況。根據(jù)得自這些模型的評價來確定各化合物I劑量組和安慰劑組之間的差異的置信區(qū)間(CI)。在每次就診/每周時間間隔以及處理端點(接著進行最后觀測)處作出評價。就診/時間間隔分析模型引出因處理造成的變異來源。評價受試者惡化的比例(通過Cochran-Mantel-Haenszel模型來分42析)，并且如果觀測到足夠數(shù)目的事件，則可得出最初惡化發(fā)生的時間(通過時序檢驗(logranktest)來分析，該測試包括在模型中處理)和每名受試者每年的惡化率(通過Wilcoxon秩和檢驗(Wilcoxonrank-sumtest)來分析)。注意到所有分析均根據(jù)具有基線和至少一些基線后數(shù)據(jù)的所有隨機受試者。由于受試者在研究中心接受其第一劑量并且每日收集日數(shù)據(jù)，因此期望極少有(如果有的話)受試者不包括在分析中；具有部分缺失數(shù)據(jù)的受試者尤其包括在分析中。對初級模型的選擇(縱向分析)確保這些具有部分數(shù)據(jù)的受試者可得到分析。對一次參數(shù)進行支持性分析以評價缺失數(shù)據(jù)的潛在影響。本發(fā)明人相信化合物I能減少痰嗜中性粒細胞和外周血嗜中性粒細胞，因而改善中度至嚴重COPD患者的癥狀、肺功能、生活質(zhì)量和痰的產(chǎn)生。因此，化合物I適用于預防或延緩COPD發(fā)展和由此引起的肺功能退化。實施例7-證明化合物I在嚴重嗜中性粒細胞性哮喘患者中的作用的臨床研究設計該項臨床研究以證明使用配方3膠嚢劑的化合物I在嚴重嗜中性粒細胞性哞喘患者中的作用。該研究以圖表形式示例于圖5，是在嚴重嗜中性粒細胞性哞喘患者中進行的隨機、雙盲、安慰劑對照研咒。該項研究依據(jù)適應性設計以評價以下三個目標步驟l:活性驗證(POA)，證明化合物I可減少嚴重嗜中性粒細胞性哞喘患者的痰嗜中性粒細胞。步驟2:概念驗證(POC)，證明化合物I可有效減少嚴重哮喘患者的哞喘惡化數(shù)目。步驟3:劑量-范圍探測器(DRF)，測定根據(jù)譯喘惡化減少的劑量反應。43該項研究的步驟1和步驟2招募大約140名受試者，用30mg化合物I或安慰劑來處理這些受試者共12周。在大約60名受試者已完成2周處理后，評價藥物的安全性和化合物I的POA。痰嗜中性粒細胞的臨床顯著變化(即，與安慰劑相比，經(jīng)化合物I處理2周后自基線減少25%)證明POA(步驟1)。在大約140名受試者已完成12周處理后，評價化合物I的安全性和POC(功效)。與安慰劑相比，化合物I造成的譯喘惡化減少的趨勢證明POC(步驟2)。開始進行研究的DRF階段(步驟3)，其中持續(xù)30mg化合物I和安慰劑處理組中的受試者，同時引入兩個額外劑量組。根據(jù)對30mg化合物I處理組中受試者的評價，將以下三個每日一次(QD)劑量中的兩個選出作為兩個額外劑量組3mg、10mg或50mg化合物I。在DRF中，在大約30名受試者已完成2周處理后評價安全性。變量包括對痰嗜中性粒細胞、PBN、不良事件(AE)和其它安全性數(shù)據(jù)的影響。新處理組的每一組招募約90名受試者，30mg化合物I和安慰劑組招募20名受試者。主要功效端點主要功效端點是在12周處理期期間的哮喘惡化狀況("是，，表示存在惡化，"否"表示不存在)。輕度哮喘惡化定義為滿足下列標準中的至少一個°連續(xù)兩天，根據(jù)24小時日數(shù)據(jù)。任何因哮喘引起的夜間覺醒。。低于基線20。/?；蚋偷那宄孔畲蠛魵饬髁?Momingpeakexpiratoryflow,PEF)(2周測試期期間的平均AMPEF)。。所需拯救藥物療法涉及在24小時內(nèi)使用兩種或兩種以上(基線以上)吸入劑(按照測試期期間所用的平均24小時所需拯救藥物療法建立基線值)。嚴重譯喘惡化定義為滿足下列標準中的至少一個°任何在支氣管擴張藥使用后FEV1下降20°/。(自基線)的研究就診。。需要住院或急診室就診的惡化。。需要使用或增加全身性類固醇類藥物療法變化。次要功效端點次要功效端點為每日AM/PM哮喘癥狀、FEV1、PEF、總體生活質(zhì)量(QOL)、痰嗜中性粒細胞的減少和最初惡化發(fā)生的時間自基線的變化。統(tǒng)計學方法用于痰嗜中性粒細胞自基線的變化的統(tǒng)計學模型是以治療為因子的單側方差分析(ANOVA)。95%置信區(qū)間是根據(jù)ANOVA的最小均方。哮喘惡化狀況的主要功效變量所用的統(tǒng)計學分析是根據(jù)卡方檢驗。另外，使用時序檢驗分析最初哮喘惡化發(fā)生的時間。在a-0.10時，雙尾檢驗POA。在01=0.05時，雙尾檢驗DRF。使用階降方法首先與安慰劑比較最高劑量的化合物I，如果顯著的話，則比較中等劑量，并且最終如果兩者都顯著，則比較最低劑量。本發(fā)明人相信化合物I在嚴重嗜中性粒細胞性哮喘患者者中使嗜喘惡化減少，因而改善每日AM/PM哮喘癥狀、FEV1、PEF、總體生活質(zhì)量和痰的產(chǎn)生以及最初惡化發(fā)生的時間。因此，化合物I適用于治療嗜中性粒細胞性譯喘。實施例8-證明化合物I在嚴重銀屑病患者中的作用的臨床研究設計該項臨床研究以證明使用配方2膠嚢劑的化合物I在嚴重銀屑病患者中的作用。該項研究以圖表形式說明于圖6A,是經(jīng)設計而在中度至嚴重銀屑病患者中進行的前瞻性、隨機、雙盲、安慰劑對照、平行組的研究。在部分1中，對21名受試者按照2:1比率隨機給予每日一次50mg化合物I或匹配安慰劑。各處理都給予28天。在12名患者已完成給藥后，如圖6B所示對研究進程作出判定。在中間或最后分析時，如果^50%接受化合物I的患者的PASI降低50%，而在安慰劑組中無患者PASI降低50。/。，則開始研究的部分2。在部分2中，對15名受試者按照2:2:1比率或1:1:1比率隨機給予每日一次的兩個劑量的化合物I中的一個(均小于50mg)或匹配安慰劑。所選化合物I的劑量水平是根據(jù)部分1的安全性和活性結果。臨床評價在篩選、基線和第1、8、15、29、36和57天時，測定各患者的臨床銀屑病活性(PASI和醫(yī)師全面評價)。藥效評價在基線和第29天時，對處理組中的每一組進行以下評價園4艮屑病斑塊的免疫組織化學，其用于對CD66bCD50、組織蛋白酶G和CD3+、CD4+、CD8+白細胞進行染色麗測定在銀屑病斑塊和外周血中Gro-a、IL-8和CXCR2的mRNA表達畫包括Gro畫a和IL-8的血漿趨化因子濃度■血液孩i陣列分析藥代動力學評價在各門診患者就診期間獲得血液樣品并測定化合物I的血漿濃度。評價化合物I的最低濃度(Cmin)以驗證受試者順應性。接著進行檢驗化合物I的血漿濃度的示例性測定。簡而言之，將200pL相應的各血漿樣品和25nL調(diào)查樣品(IS)工作液(0.500|ig/mLIS的空白血漿)移至稀釋管中，制備校正標準品、質(zhì)量對照樣品、研究樣品和零標準品(含有IS的空白)。將225對照血漿移至稀釋管中，制備對照空白(不含IS的血漿)。所有樣品都用200liL含0.1。/。乙酸溶液的10mM乙酸銨來稀釋。制備之后，將樣品上樣到％孔VarianPolarisC184是取板上，該板已先后添加450曱醇和450^L含0.1。/。乙酸的10mM乙酸銨。接著用450liL含O.P/。乙酸的10mM乙酸銨和450曱醇/水(5:95，46體積比)洗滌SPE板。用兩份100nL曱醇/水的等分試樣(5(h50，體積比)將分析物和IS自SPE板洗脫至96孔測定板中。將10-40pL等分試樣注入LC-MS/MS系統(tǒng)進行分析。HPLC系統(tǒng)采用4.6x50mm(5pm粒徑)Phenomenex苯基己基柱，該柱用梯度分步程序使用流速為1.00mL/min的流動相A(0.1%曱酸的水溶液)和流動相B(0.1%甲酸的乙腈溶液)，從大量基質(zhì)組分中分離分析物和IS?；衔颕和IS的保留時間約為1.6分鐘。使用配備有TurbolonSpray電離源的API4000三節(jié)四極LC-MS/MS系統(tǒng)來檢測分析物和IS。安全性評價在規(guī)定時間獲得用于臨床實驗室測試、生命體征和ECG的血液樣品，進行安全性評價。在就診日檢測和詢問受試者可能發(fā)生的不良事件(AE)。另外，受試者在其日志卡上記錄門診日期間AE的發(fā)生。功效分析主要功效端點定義為在28天的處理結束的PASI以及PGA自基線降低^50%的反應。使用描述性統(tǒng)計學，按照處理組列出并概述以下詳述的次要端點的數(shù)據(jù)。具體地講，。在對嗜中性粒細胞(CD50、組織蛋白酶G)和T淋巴細胞(CD3+、CD4+、CD8+)的亞群分析中，在第28日相對于銀屑病斑塊細胞量的基線的降低百分數(shù)。在銀屑病斑塊和外周血中Gro-ot、IL-8和CXCR2的mRNA表達自基線的變化。包括Gro-a和IL-8的血漿趨化因子濃度自基線的變化安全性分析使用描述性統(tǒng)計學概述臨床安全性實驗、生命體征和ECG。按照處理組對不良事件制表。—按照天數(shù)和時間對各處理組的ECG進行描述性概述。列出所有其它安全性參數(shù)。本發(fā)明人相信化合物I在嚴重銀屑病患者中使PASI降低。因此，化合物I適用于治療銀屑病。本發(fā)明在范圍上并不受限于本文中所述的具體實施方案。實際47上，本領域技術人員根據(jù)先前描述將會理解除本文所述內(nèi)容之外的本發(fā)明的各種修改。這樣的修改落入所附權利要求書的范圍內(nèi)。本文引用了各種出版物，其公開內(nèi)容通過引用全部結合到本文中。權利要求1.一種組合物，其包含化合物I或其藥學上可接受的鹽和至少一種藥學上可接受的賦形劑，當在37℃±0.5℃下使用槳葉速度設定在75RPM的USPII槳式攪拌器裝置測試時，所述組合物提供在5分鐘內(nèi)釋放至少約83％的化合物I，其中所述裝置裝有900mL由pH6.8磷酸鈉緩沖液緩沖的0.5％十二烷基硫酸鈉溶液組成的溶出介質(zhì)。2.權利要求1的組合物，其提供在15分鐘內(nèi)釋放至少約99%的化合物I。3.權利要求1的組合物，其中至少一種藥學上可接受的賦形劑是一種或多種濕潤劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑或者一種或多種崩解劑。4.權利要求1的組合物，其中至少一種藥學上可接受的賦形劑是一種或多種濕潤劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑和一種或多種崩解劑。5.權利要求l的組合物，其中將化合物I、一種或多種濕潤劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑和一種或多種崩解劑在流化床上混合后所獲得的第一樣品的顏色，與在70。C的進風溫度下干燥失重達到^4%并且在70。C的進風溫度下繼續(xù)干燥至少80分鐘后所獲得的第二樣品的顏色進行比較而評價所述組合物顏色穩(wěn)定性。6.權利要求3的組合物，其中一種或多種濕潤劑的含量以重量計約為0.1-8%。7.權利要求3的組合物，其中一種或多種濕潤劑是十二烷基硫酸鈉，且十二烷基^5危酸鈉與化合物I的比例為約1:10。8.權利要求3的組合物，其中一種或多種濕潤劑是十二烷基硫酸鈉，其含量范圍以重量計為約0.1%至約5%，任選以重量計為約0.1°/0至約2%，任選以重量計為約1.5%。9.一種組合物，其包含化合物I或其藥學上可接受的鹽和至少一種藥學上可接受的賦形劑，當在37°C士0.5。C下使用槳葉速度設定在75RPM下的USPII槳式攪拌器測試時，所述組合物提供在15分鐘內(nèi)釋放至少約92%的化合物I,其中所述槳式攪拌器裝有900mL由pH7.4磷酸鈉緩沖液緩沖的0.2%十二烷基硫酸鈉溶液組成的溶出介質(zhì)。10.權利要求9的組合物，其提供在30分鐘內(nèi)釋放至少約96°/。的化合物I。11.權利要求9的組合物，其中至少一種藥學上可接受的賦形劑是一種或多種濕潤劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑或者一種或多種崩解劑。12.權利要求9的組合物，其中至少一種藥學上可接受的賦形劑是一種或多種濕潤劑、一種或多種粘合劑、一種或多種稀釋劑和一種或多種崩解劑。13.權利要求ll的組合物，其中一種或多種濕潤劑是泊洛沙姆，且泊洛沙姆與化合物I的比例介于約0.3:1至約1.2:1之間，任選約1.2:1。14.權利要求3或11的組合物，其中一種或多種粘合劑的含量以重量計為約0.1%至約20%。15.權利要求3或11的組合物，其中一種或多種粘合劑是聚維酮，且聚維酮與化合物I的比例介于約0.18:1至約1.8:1之間，任選約0.66:1。16.權利要求3或11的組合物，其中一種或多種粘合劑是聚維酮，其含量以重量計為約0.3%至約5%,任選以重量計為約2%至約3%。17.權利要求3或11的組合物，其中一種或多種稀釋劑的含量以重量計約10%至約90%。18.權利要求17的組合物，其中一種或多種稀釋劑是微晶纖維素和乳糖。19.權利要求3或11的組合物，其中一種或多種崩解劑的含量以重量計為約2%至約30%。20.權利要求19的組合物，其中一種或多種崩解劑是交聚維酮。21.權利要求3或11的組合物，其還包含一種或多種助流劑。22.權利要求21的組合物，其中一種或多種助流劑的含量以重量計為約0.1%至約5%。23.權利要求21的組合物，其中一種或多種助流劑是二氧化硅。24.權利要求3或11的組合物，其還包含一種或多種潤滑劑。25.權利要求24的組合物，其中一種或多種潤滑劑的含量以重量計為約0.2%至約5%。26.權利要求1或9的組合物，其中至少一種藥學上可接受的賦形劑是濕潤劑、粘合劑、稀釋劑或崩解劑、或其兩種或更多種的任意組合。27.—種組合物，其包含下列組分<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>28.權利要求27的組合物，其還包含下列組分:<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>29.權利要求27的組合物，其還包含下列組分:<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>硬脂酸鎂1.130.權利要求1或9的組合物，在單次口服給予人體30mg化合物I后，所述組合物表現(xiàn)出化合物I的平均AUC介于約484ng.hr/ml至約489ng.hr/ml之間。31.權利要求1或9的組合物，在單次口服給予人體30mg化合物I后，所述組合物表現(xiàn)出化合物I的平均Cmax介于約122ng/ml至約147ng/ml之間。32.權利要求1或9的組合物，在口服給予人體后，所述組合物表現(xiàn)出化合物I的中值Tmax介于約0.5小時至約2小時之間。33.—種包含治療有效量的化合物I或其藥學上可接受的鹽的組合物在制備用于治療患者的炎性疾病的藥物中的用途，其中治療有效量的化合物I或其藥學上可接受的鹽為每天約3mg至約200mg，任選每天約3mg至約50mg。34.權利要求33的用途，其中治療有效量的化合物I或其藥學上可接受的鹽以含有約3mg、約10mg或約30mg化合物I或其藥學上可接受的鹽的單位劑型經(jīng)口服給予。35.權利要求1或9的組合物在制備用于治療炎性疾病的藥物中的用途，其中所述炎性疾病選自急性炎性疼痛、關節(jié)炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、銀屑病和啤喘。全文摘要本發(fā)明提供基于CXCR2或CXCR1與CXCR2兩者的選擇性拮抗劑的組合物以及藥盒和方法，用于治療炎性疾病。文檔編號A61K47/20GK101500544SQ200780029517公開日2009年8月5日申請日期2007年6月12日優(yōu)先權日2006年6月12日發(fā)明者J·D·艾克曼,J·H·柯申請人:先靈公司