專利名稱：：草藥提取物及含有所述草藥提取物的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及選自白芥籽(S/加;^&me")、延胡索塊莖(Coo^a/z'srw6er)、牽牛子(尸/^rZ^z'fifa和呂宋果種子(5^yc/2m'/g"a"/的一或多種草藥提取物，以及含有所述草藥提取物的用于治療和預(yù)防胃腸活動(dòng)紊亂的組合物。
背景技術(shù)：
：功能性消化不良并不是病理性或生化器質(zhì)性損傷，而是伴隨有上腹部區(qū)域持續(xù)不適或疼痛的功能性癥狀。從醫(yī)學(xué)上講，這意味著與限于上腹部的持續(xù)的和反復(fù)的不適或疼痛相關(guān)的各種癥狀。特別地，非潰瘍性消化不良(一種功能性消化不良)包括了消化系統(tǒng)的全部癥狀包括餐后厭膩、厭食、腹脹、早飽感、噯氣、上腹部不適或疼痛、胃灼熱、惡心、嘔吐、胃返流、燒心等等。其病理生理學(xué)目前尚不明確(Panganamamulaetal"尸imcrtowa/(2Voww/c勿Z^s/e/w/a，CurrentTreatmentOptionsinGastroenterology,5，pp.153-160,2002)。功能性消化不良是基于沒有明顯的器質(zhì)性損傷的各種消化不良癥狀而診斷，因此治療并不簡(jiǎn)單而且大多數(shù)癥狀會(huì)在受飲食和應(yīng)激嚴(yán)重影響的改善和惡化之間交替出現(xiàn)。這些病理學(xué)機(jī)制共同作用從而顯示一或通常多種癥狀。典型的功能性消化不良治療包括促運(yùn)動(dòng)藥物，例如多潘立酮、甲氧氯普胺、左舒必利(levosulpride)、莫沙必利、伊托必利和紅霉素。因?yàn)槲缸茻岷蜐兪枪δ苄韵涣嫉牡湫桶Y狀，因此可以將胃酸抑制劑和抗酸劑用于治療，但卻包括通常具有臨時(shí)功效的H2拮抗藥物(VincenzoStanghellinietal"DelayedGastricEmptyinginFunctionalDyspepsia,CurrentTreatmentOptionsinGastroenterology,7，259-264，2004)。由于血清素(5-羥色胺，5-HT)在胃腸蠕動(dòng)中起主要作用，而且80%的血清素存在于胃腸道中，尤其是95%的血清素都分布在小腸的腸內(nèi)分泌細(xì)胞中，所以最近新的促運(yùn)動(dòng)藥物的開發(fā)集中于5-羥色胺能調(diào)節(jié)藥物。用于5-HT相關(guān)受體的特異性激動(dòng)藥物和拮抗藥物正在開發(fā)過程中；且因?yàn)?-HT4激動(dòng)劑能促進(jìn)促運(yùn)動(dòng)功能并伴隨增強(qiáng)的胃收縮力和推進(jìn)壓力，其也處于用于治療功能性消化不良以及便秘的藥物的開發(fā)過程之中。5-HT3拮抗劑能夠有效地抑制嘔吐并減輕內(nèi)臟高敏性，5-HTlp激動(dòng)劑則由于其在胃底的放松機(jī)制而正被開發(fā)用于治療功能性消化不良(Robinspiller，Seroto"ergic附odw/加V7gybr/w"c"o""/gosfra/她W"a/tfoeose，JClinPharmacol,M，pp.11-20，2002)。特別地，5-HT3受體拮抗劑，格拉司瓊，能夠減輕腸易激綜合征患者體內(nèi)的直腸敏感性，雖然昂丹司瓊對(duì)腸易激綜合征患者無效但卻能夠在脂肪進(jìn)入健康人體十二指腸時(shí)降低由擴(kuò)張導(dǎo)致的嘔吐和胃敏感性。西蘭司瓊能夠改善胃腸道敏感性調(diào)節(jié)以及消化道對(duì)胃擴(kuò)張的適應(yīng)性，阻斷與蠕動(dòng)相關(guān)的可興奮5-HT3受體，并增加空腸液體吸收。然而，雖然托烷司瓊、昂丹司瓊和大多數(shù)其他的5-HT3受體拮抗劑能改善大鼠中的胃腸道禁食遲發(fā)癥狀(gastrointestinalfastingdelaysymptom),{1這一效果在包括人類的其他物種中卻并非是結(jié)論性的。西沙必利是可有效用于治療功能性消化不良的促運(yùn)動(dòng)藥物之一，是5-HT4受體激動(dòng)劑和5-HT3受體拮抗劑，并被公認(rèn)為與其他藥物相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著效果。西沙必利的應(yīng)答率是50-82%，高于安慰劑27-53%的應(yīng)答率，且當(dāng)給藥4-8周時(shí)，有報(bào)道表明其在超過70%的病例中是有效的。還有報(bào)道指出西沙必利對(duì)腸易激綜合征的伴發(fā)疾病也有效，并能夠改善那些對(duì)使用左旋舒必利和多潘立酮的多巴胺拮抗劑的治療無應(yīng)答的患者的癥狀。當(dāng)其在1993年被批準(zhǔn)為治療胃-食管反流疾病的藥物之后，其導(dǎo)致了年收入為400億的市場(chǎng)(國際市場(chǎng):13億美元)，但其銷售卻在2000年7月被禁止。另一方面，另一種血清素受體5-HTlB/D激動(dòng)劑，triptan，在用于因胃腸道運(yùn)動(dòng)和敏感性胃-腸而產(chǎn)生的偏頭痛的劑量下是有效的。據(jù)報(bào)道，舒馬普坦能夠延緩胃內(nèi)容物的排空>但其效果己知能夠改善上腹部癥狀，因?yàn)槠淠軌蚋纳莆傅椎恼{(diào)節(jié)并能夠在實(shí)際的功能性消化不良患者中減輕胃腸道擴(kuò)張反應(yīng)。5-HT4受體激動(dòng)劑，是一種新近采用的用于功能性消化不良治療的促運(yùn)動(dòng)藥物，其能夠在不增加胃底張力的情況下改善癥狀。西沙必利，一種5-HT4受體激動(dòng)劑，能夠有效地促進(jìn)胃排空，且對(duì)于十二指腸或胃內(nèi)壓波長(zhǎng)(>6cm)，識(shí)別胃擴(kuò)張的閾值不僅在患者中也同樣在健康人體中有所增加。5-HT4受體激動(dòng)劑藥物包括替加色羅和普盧卡必利，但它們?nèi)蕴幱谂R床研究階段并且是下消化道系統(tǒng)中的耙向病癥(FraserRJ，Postprandialantropyloroduodenalmotilityandgastricemptyingingastroparesis-effectsofcisapride,Gwf，35(2),p.172-8，1994;TalleyNJ，Newandemergingtreatmentsforirritablebowelsyndromeandfunctionaldyspepsia,ExpeWOpinEmergDrugs,7(1),p.91-8,2002)。同時(shí)，白芥籽的韓國芥子(Koreanmustard)是十字花科的芥菜的成熟種子，其含有白白芥籽苷、白白芥籽堿和脂肪油，并可有效地祛痰和刺激皮膚(TheKoreanPharmacopoediaVPart2pp453-454)。延胡索塊莖是三裂延胡索和罌粟科的其他塊莖類植物，其含有小蘗堿、l-坎那定、前托品和1-四氫黃連堿，并具有止痛、鎮(zhèn)靜、止痙攣、止嘔吐和ACTH分泌過多的作用(TheKoreanPharmacopoediaVPart2pp664)。牽牛子是旋花科裂葉牽牛的種子，含有大約11%的脂肪油和2%的牽牛子甙，牽牛子甙是一種樹脂狀糖苷，已知具有易于通便、利尿和殺蟲的效果(TheKoreanPharmacopoediaVPart2pp651)。呂宋果種子是馬錢科呂宋果的種子，含有番木鱉堿、番木鱉次堿、α-可魯比因、β-可魯比因和番木鱉苷(Loganine)，并具有刺激CNS、健胃、抗真菌、抗炎和鎮(zhèn)痛作用(OrientalHerb(galenicals)StandardAnnotation,pp175,TheKoreanPharmacopoediaVPart2pp633-634)。然而，這些草藥已被用作與其他各種草藥混合的東方藥物，因此還沒有關(guān)于其特異性的促運(yùn)動(dòng)作用機(jī)制的報(bào)道。在這樣的背景下，為了鑒定對(duì)功能性消化不良和腸易激綜合征具有治療和預(yù)防效果的促運(yùn)動(dòng)草藥，本發(fā)明人進(jìn)行了用于5-HT3和5-HT5受體(對(duì)應(yīng)于促運(yùn)動(dòng)觸發(fā)點(diǎn))的激活檢測(cè)，并鑒定了激活所述受體的候選的草藥。據(jù)此，通過動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)已找到了用于功能性消化不良的適當(dāng)?shù)牟菟幪崛∥?。本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的草藥提取物是5-HT3拮抗劑，其能夠促進(jìn)止嘔吐和胃排空，并抑制內(nèi)臟高敏性；其也是5-HT4受體激動(dòng)劑，對(duì)伴隨有便秘和慢性結(jié)腸炎的腸易激綜合征顯示出促運(yùn)動(dòng)和治療效果。通過確認(rèn)所述草藥單獨(dú)或組合都能夠?qū)δ苄韵涣己湍c易激綜合征具有治療效果這一事實(shí)使得本發(fā)明得以完成
發(fā)明內(nèi)容技術(shù)問題本發(fā)明的目的是提供草藥提取物；以及含有所述草藥提取物作為活性成分，用于預(yù)防和治療胃腸道活動(dòng)紊亂的組合物。技術(shù)方案本發(fā)明提供了白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的一或多種草藥提取物。如果所述草藥提取物未經(jīng)其他詞語或短語修飾的話，在本發(fā)明中，"草藥提取物"指草藥提取物和/或草藥提取物的混合物。以下，將對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地解釋。本發(fā)明提供了白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的草藥提取物同樣，本發(fā)明還提供了白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子中的兩種或更多種草藥提取物的混合物。本發(fā)明的混合物包括白芥籽和延胡索塊莖的草藥提取物的混合物。優(yōu)選地，所述混合物中白芥籽草藥提取物:延胡索塊莖草藥提取物的混合比例為從1:1到10:1的重量比(w/w)。本發(fā)明的混合物包括白芥籽和牽牛子的草藥提取物的混合物。優(yōu)選地，所述混合物中白芥籽草藥提取物:牽牛子草藥提取物的混合比例為從1:1到30:1的重量比(w/w)。本發(fā)明的混合物包括延胡索塊莖和牽牛子的草藥提取物的混合物。優(yōu)選地，所述混合物中延胡索塊莖草藥提取物:牽牛子草藥提取物的混合比例為從1:1到10:1的重量比(w/w)。本發(fā)明的混合物包括延胡索塊莖和呂宋果種子的草藥提取物的混合物。優(yōu)選地，所述混合物中延胡索塊莖草藥提取物呂宋果種子草藥提取物的混合比例為從3:1到1:3的重量比(w/w)。本發(fā)明的混合物包括牽牛子和呂宋果種子的草藥提取物的混合物。優(yōu)選地，所述混合物中牽牛子草藥提取物呂宋果種子草藥提取物的混合比例為從1:1到1:10的重量比(w/w)。本發(fā)明的混合物包括白芥籽、延胡索塊莖和牽牛子的草藥提取物的混合物。優(yōu)選地，所述混合物中白芥籽草藥提取物:延胡索塊莖草藥提取物牽牛子草藥提取物的混合比例為(130):(110):1的重量比(w/w)。本發(fā)明的混合物包括白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的草藥提取物的混合物。優(yōu)選地，所述混合物中白芥籽草藥提取物:延胡索塊莖草藥提取物呂宋果種子草藥提取物:牽牛子草藥提取物的混合比例為(1~30):(1~10):1:(1~10)的重量比(w/w)。本發(fā)明的草藥還包括本領(lǐng)域所已知的可用于預(yù)防和治療如本發(fā)明中特別說明的相同病癥的同屬草藥。本發(fā)明還提供了本發(fā)明的草藥提取物的制備方法，其特征在于將選自白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的草藥通過水、C1C4的低級(jí)醇或其混合物進(jìn)行提取。優(yōu)選地，將所選擇的草藥于45~75°C提取1-5次，65~80小時(shí)。本發(fā)明還提供了選自白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的一或多種提取物、可溶于極性溶劑的提取物、以及可溶于非極性溶劑的提取物的制備方法，該方法包括用水、C1C4的低級(jí)醇或其混合物對(duì)選自白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的一或多種草藥進(jìn)行提取，過濾并濃縮以獲得草藥提取物的第一個(gè)步驟；順序用己烷、氯仿和乙酸乙酯處理第一個(gè)步驟的草藥提取物，從而收集可溶于非極性溶劑中的提取物的第二個(gè)步驟；以及用水、甲醇、丁醇或其混合物處理第二個(gè)步驟的可溶于非極性溶劑中的提取物，從而獲得可溶于極性溶劑中的草藥提取物的第三個(gè)步驟。本發(fā)明的提取物包括提取物、可溶于極性溶劑的提取物、或可溶于非極性溶劑中的提取物。所述提取物可通過選自水、C1C4的低級(jí)醇、或其混合物(優(yōu)選乙醇)的溶劑進(jìn)行提取。而且，可通過選自水、甲醇、丁醇或其混合物(優(yōu)選丁醇)的溶劑對(duì)可溶于極性溶劑的提取物進(jìn)行提取?？墒褂眠x自己烷、氯仿和乙酸乙酯的溶劑對(duì)可溶于非極性溶劑的提取物進(jìn)行提取。在本發(fā)明中，可通過以下方法獲得選自白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的一或多種草藥提取物。首先，在將白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子進(jìn)行洗滌和干燥之后，用磨對(duì)所述干燥草藥進(jìn)行研磨從而獲得碾碎的草藥，然后通過研磨機(jī)將碾碎的草藥研磨成粉末。將干燥的草藥或粉末放入1-25倍(優(yōu)選5-15倍)干燥的草藥或粉末重量的量的水、低級(jí)醇(例如乙醇或甲醇(優(yōu)選乙醇))或其混合物中。然后對(duì)其進(jìn)行水熱提取、冷沉淀提取、回流-冷卻提取、或超聲波提取(優(yōu)選使用水熱提取于20100°C(優(yōu)選45~75°C)提取1-5次，約1-100小時(shí)(優(yōu)選65-80小時(shí)))、真空過濾、冷凍干燥以獲得來自白芥籽的草藥提取物、來自延胡索塊莖的草藥提取物、來自牽牛子的草藥提取物、以及來自呂宋果種子的草藥提取物。將來自白芥籽的草藥提取物、來自延胡索塊莖的草藥提取物、來自牽牛子的草藥提取物、以及來自呂宋果種子的草藥提取物的每一種提取物都懸浮于水中，并以氯仿、乙酸乙酯和丁醇的順序使用溶劑進(jìn)行提取以獲得本發(fā)明的可溶于極性溶劑的提取物和可溶于非極性溶劑的提取物。特別地，通過這樣的方法獲得本發(fā)明的可溶于極性溶劑的提取物和可溶于非極性溶劑的提取物，所述方法包括將選自白芥籽草藥提取物、延胡索塊莖草藥提取物、牽牛子草藥提取物以及呂宋果種子草藥提取物(通過水熱提取獲得的提取物)的每一種草藥提取物加入己烷以獲得可溶于己烷的提取物和可溶于水的提取物的第一個(gè)步驟；通過氯仿提取第一個(gè)步驟中所獲得的可溶于水的提取物以獲得可溶于氯仿的提取物和可溶于水的提取物的第二個(gè)步驟；通過乙酸乙酯提取第二個(gè)步驟中所獲得的可溶于水的提取物以獲得可溶于乙酸乙酯的提取物和可溶于水的提取物的第三個(gè)步驟；以及通過丁醇提取第三個(gè)步驟中所獲得的可溶于水的提取物以獲得可溶于丁醇的提取物和可溶于水的提取物的第四個(gè)步驟。本發(fā)明提供了用于預(yù)防和治療胃腸道活動(dòng)紊亂的組合物，其包含作為活性成分的本發(fā)明的草藥提取物，以及藥物可接受的載體、稀釋劑或填充劑。本發(fā)明的組合物含有占所述組合物總重量0.01-80%的提取物(優(yōu)選1-50%(w/w))。在本發(fā)明的組合物的制備過程中，需要向本發(fā)明的草藥提取物中加入或從中取出一些元素，且混合比率可以改變。在本發(fā)明中，胃腸道活動(dòng)紊亂被表征為由5-HT3受體和/或5-HT4受體拮抗性作用的過興奮引起的疾病。在本發(fā)明中，胃腸道活動(dòng)紊亂包括功能性消化不良(例如早飽、疼痛、上腹部疼痛、飽感的假象、燒心、惡心和嘔吐)、潰瘍性消化不良、非潰瘍性消化不良、反流性食管炎、胃能動(dòng)性麻痹、便秘、腸易激綜合征、過敏性結(jié)腸炎、糖尿病型胃腸道活動(dòng)紊亂、源自化療的胃腸道活動(dòng)紊亂、以及源自消化道活動(dòng)紊亂的腸閉鎖和源自胃腸道活動(dòng)紊亂的強(qiáng)直性肌營養(yǎng)不良。易激性結(jié)腸炎包括一般性結(jié)腸炎、伴隨有便秘或腹瀉的易激性結(jié)腸炎。包括所述草藥提取物的本發(fā)明的組合物還可包括適當(dāng)?shù)妮d體、賦形劑和稀釋劑?？砂ㄓ诒景l(fā)明的組合物中的載體、賦形劑和稀釋劑包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚糖醇、麥芽糖醇、淀粉、阿拉伯橡膠、藻酸鹽、明膠、磷酸鈣、硅酸鈣、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚乙烯吡咯垸酮、水、羥苯甲酯、羥苯丙酯(prophylhydroxybenzoate)、滑石、硬脂酸鎂或礦物油。本發(fā)明所述組合物還可被制成口服藥物(例如粉末、顆粒、片劑、膠囊、懸浮液、乳劑、糖漿和氣溶膠)、外用藥、或栓劑或無菌注射溶液。特別地，當(dāng)制成藥物時(shí)，也可以加入稀釋劑或賦形劑，例如常用的引發(fā)劑、膨脹劑、粘合劑、保濕劑、崩解劑或去污劑。用于口服施用的固體制品包括片劑、丸劑、粉末、顆粒、膠囊等。所述草藥組合物可與至少一或多種賦形劑(例如淀粉、碳酸鈣、蔗糖、乳糖或明膠)相混合?？墒褂玫牟粌H有簡(jiǎn)單的賦形劑還可包括潤滑劑(例如硬脂酸鎂或滑石)。對(duì)于液體口服制品而言，可使用懸浮液、內(nèi)容劑(contentsagent)、乳劑和糖漿，但通常使用的簡(jiǎn)單稀釋劑(例如水和液體石蠟)以及各種賦形劑(例如保濕劑、甜味劑、芳香劑或防腐劑)也可使用。非口服施用制品包括無菌水懸液、非水溶劑、懸浮液、乳劑、凍干制品、以及栓劑。對(duì)于非水溶劑和懸浮液而言，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄欖油)、或可注射酯(例如油酸乙酯)。對(duì)栓劑的基質(zhì)而言，可以使用witepsol、聚乙二醇、吐溫61(tween61)、可可脂、月桂精、甘油明膠等。本發(fā)明還提供了將本發(fā)明的草藥提取物用于治療和預(yù)防胃腸道活動(dòng)紊亂的用途。此外，本發(fā)明提供了通過對(duì)哺乳動(dòng)物(包括人類)施用有效劑量的本發(fā)明的草藥提取物的藥物組合物來治療胃腸道活動(dòng)紊亂的方法。包括所述草藥提取物的本發(fā)明的組合物的施用劑量可根據(jù)患者的年齡、性別或體重變化。然而，一般地，所述提取物的干燥粉末可以單劑或多劑，以0.01-10g/Kg(優(yōu)選5g/Kg/天)的量進(jìn)行施用。所述劑量可根據(jù)施用途徑、疾病的嚴(yán)重程度、性別、體重、年齡、健康狀況、飲食、施用時(shí)間和方法、以及排泄率進(jìn)行調(diào)節(jié)。因此，以上劑量并不限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的藥物組合物可通過多種途徑施用給哺乳動(dòng)物例如大鼠、小鼠、?；蛉恕＠?，其可口服施用、通過直腸、或通過靜脈、肌肉、皮下、子宮、硬膜或側(cè)腦室內(nèi)注射。由于幾乎沒有毒性或副作用，本發(fā)明的草藥提取物可為預(yù)防目的安全地長(zhǎng)期使用。為了確認(rèn)所述草藥提取物的促運(yùn)動(dòng)和抗消化不良功效，本發(fā)明人檢測(cè)了它們對(duì)5-HT3和5-HT4的受體的親和力、拮抗作用和激動(dòng)作用，并證實(shí)了其選擇性和顯著的功效。同樣，為了鑒定所述草藥提取物的合適的比例，利用多種功能性消化不良病理學(xué)，在動(dòng)物模型上進(jìn)行各種體內(nèi)試驗(yàn)，并確證了所述提取物的顯著效果。為了預(yù)防和改善胃腸道活動(dòng)紊亂，本發(fā)明提供了具有一或多種選自韓國芥子、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子提取物，以及營養(yǎng)學(xué)所允許食品添加劑的健康功能性食品。用于本發(fā)明的健康功能性食品具有基于功能性和在人上的安全性新修訂的2002健康功能食品法案的韓國FDA通告2004-12中所列的健康功能食品成分的特征。本發(fā)明還提供了用于預(yù)防和改善胃腸道活動(dòng)紊亂的含有兩種或更多種選自白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子提取物，以及營養(yǎng)學(xué)上可接受的添加劑的保健食品。本發(fā)明提供了用于預(yù)防和改善腸胃道活動(dòng)紊亂的保健食品，其含有白芥籽草藥提取物、延胡索塊莖草藥提取物和牽牛子草藥提取物的混合物，以及營養(yǎng)學(xué)上可接受的添加劑。優(yōu)選地，在所述混合物中，白芥籽草藥提取物:延胡索塊莖草藥提取物:牽牛子草藥提取物的混合比例為(130):(110):1的重量比(w/w)。本發(fā)明提供了用于預(yù)防和改善腸胃道活動(dòng)紊亂的保健食品，其含有白芥籽草藥提取物、延胡索塊莖草藥提取物、牽牛子草藥提取物和呂宋果種子草藥提取物的混合物，以及營養(yǎng)學(xué)上可接受的添加劑。優(yōu)選地，在所述混合物中，白芥籽草藥提取物:延胡索塊莖草藥提取物呂宋果種子草藥提取物牽牛子草藥提取物呂宋果種子的混合比例為(卜30):(卜10):1:(110)的重量比(w/w)。本發(fā)明提供了用于預(yù)防和改善腸胃道活動(dòng)紊亂的保健食品，其含有白芥籽草藥提取物和延胡索塊莖草藥提取物的混合物，以及營養(yǎng)學(xué)上可接受的添加劑。優(yōu)選地，在所述混合物中，白芥籽草藥提取物:延胡索塊莖草藥提取物的混合比例為1:1到10:1的重量比(wAv)。本發(fā)明提供了用于預(yù)防和改善腸胃道活動(dòng)紊亂的保健食品，其含有白芥籽草藥提取物和牽牛子草藥提取物的混合物，以及營養(yǎng)學(xué)上可接受的添加劑。優(yōu)選地，在所述混合物中，白芥籽草藥提取物:牽牛子草藥提取物的混合比例為1:1到30:1的重量比(w/w)。本發(fā)明提供了用于預(yù)防和改善腸胃道活動(dòng)紊亂的保健食品，其含有延胡索塊莖草藥提取物和牽牛子草藥提取物的混合物，以及營養(yǎng)學(xué)上可接受的添加劑。優(yōu)選地，在所述混合物中，延胡索塊莖草藥提取物:牽牛子草藥提取物的混合比例為1:1到10:1的重量比(w/w)。本發(fā)明提供了用于預(yù)防和改善腸胃道活動(dòng)紊亂的保健食品，其含有延胡索塊莖草藥提取物和呂宋果種子草藥提取物的混合物，以及營養(yǎng)學(xué)上可接受的添加劑。優(yōu)選地，在所述混合物中，延胡索塊莖草藥提取物:呂宋果種子草藥提取物的混合比例為3:1到1:3的重量比(w/w)。本發(fā)明提供了用于預(yù)防和改善腸胃道活動(dòng)紊亂的保健食品，其含有牽牛子草藥提取物和呂宋果種子草藥提取物的混合物，以及營養(yǎng)學(xué)上可接受的添加劑。優(yōu)選地，在所述混合物中，牽牛子草藥提取物呂宋果種子草藥提取物的混合比例為1:1到1:10的重量比(wAv)。另一方面，包括本發(fā)明的草藥提取物的組合物還可以藥物、食品、以及飲料的多種形式進(jìn)行使用以實(shí)施其促運(yùn)動(dòng)效果。本發(fā)明的草藥提取物可加入各種食品，例如飲料、口香糖、茶、維生素復(fù)合物以及健康補(bǔ)充食品中，并可以丸劑、粉末、顆粒、浸劑(inflision)、片劑、膠囊或飲料的形式進(jìn)行使用。在用于本發(fā)明的健康食品組合物的食品或飲料中，所述草藥提取物的劑量一般占食品總重量的0.01-15%，優(yōu)選0.1-10%。對(duì)健康飲料組合物而言，在100ml中可加入0.1-30g，優(yōu)選0.2-58的草藥提取物。對(duì)健康飲料組合物而言，只有草藥提取物是具有特定比率的必需成分，而對(duì)液體成分則沒有特定的限制。類似于常規(guī)的飲料，還可以加入各種調(diào)味劑和天然碳水化合物。上面提及的天然碳水化合物的例子可以是單糖、雙糖(如葡萄糖和果糖)、多糖(如麥芽糖和蔗糖)、總糖(generalsugar)(如糊精和環(huán)糊精)、以及糖醇(如木糖醇、山梨醇以及赤蘚糖醇)。除了上述的調(diào)味劑，可使用天然調(diào)味劑(奇異果甜蛋白、甜菊提取物(即，新蛇菊甙A(rebaudiosidA)、甘草皂苷)和合成調(diào)味劑(即糖、阿斯巴甜)。對(duì)上述的天然碳水化合物組合物而言，通常每100ml可使用l-20g，優(yōu)選5-12g。除以上所述，本發(fā)明的組合物還可含有各種營養(yǎng)素、維生素、礦物質(zhì)(電解質(zhì))、合成和天然調(diào)味劑、色素、膨脹劑(例如奶酪、巧克力)、果膠酸和果膠酸鹽、褐藻酸和藻酸鹽、有機(jī)酸、保護(hù)性膠體增稠劑、pH調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、甘油、醇、以及用于碳酸飲料的碳酸化劑等。此外，本發(fā)明的組合物可含有果肉以制成天然果汁、果汁飲料和植物飲料。這些成分可單獨(dú)或組合使用。這些添加劑的比例并不是關(guān)鍵的，但通常所使用的比率為本發(fā)明的組合物重量0-20%。有益效果本發(fā)明的提取物或其混合物可用作用于預(yù)防和治療胃腸道活動(dòng)紊亂的藥物組合物以及健康功能食品以通過HT3受體拮抗作用和/或HT4受體激動(dòng)作用促進(jìn)胃腸活動(dòng)。圖1所示為使用H2S04對(duì)白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的乙醇提取物進(jìn)行薄層液相色譜(TLC)的分析結(jié)果的示意圖。圖2所示為使用KMn04對(duì)白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的乙醇提取物進(jìn)行薄層液相色譜(TLC)的分析結(jié)果的示意圖。圖3所示為說明5-HT3受體激動(dòng)劑的多種活性的示意圖。具體實(shí)施例方式通過以下實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例更詳細(xì)地對(duì)本發(fā)明進(jìn)行解釋。以下實(shí)施例旨在對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步闡明，而非以任何方式對(duì)本發(fā)明范圍進(jìn)行限制。r.t在本發(fā)明中指室溫。實(shí)施例1本發(fā)明草藥提取物的制備1-1白芥籽的提取物的制備白芥籽購自kyungdong市場(chǎng)的中藥材店，洗滌去雜，干燥待用于試驗(yàn)。用磨研磨干燥的草藥，將20g碾碎的白芥籽放入()0/。、15°/。、30%、50%、70%、85%和96%的乙醇-水(160ml)中并在室溫?cái)嚢?2小時(shí)。然后，將所得混合物進(jìn)行提取、過濾、于55~65°C低壓濃縮、并冷凍干燥以獲得白芥籽的提取物(1.04~3.1g)(表l:作為溶劑的白芥籽的提取物的產(chǎn)率)。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>1-2延胡索塊莖的提取物的制備延胡索塊莖購自Kyimg-dong市場(chǎng)的中藥材店，水洗去雜，干燥待用于試驗(yàn)。用磨研磨干燥的草藥，將20g碾碎的延胡索塊莖放入0。/。、15%、30%、50%、70%、85%和96%的乙醇-水(160ml)中并在室溫下攪拌72小時(shí)。然后，使用與實(shí)施例1-1中相同的方法對(duì)所得混合物進(jìn)行提取、過濾、于55~65°C低壓濃縮、并進(jìn)行冷凍干燥以獲得延胡索塊莖的提取物(0.36~2.94g)(表2:作為溶劑的延胡索塊莖的提取物的產(chǎn)率)。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>1-3牽牛子的提取物的制備牽牛子購自Kyung-dong市場(chǎng)的中藥材店，水洗去雜，干燥待用于試驗(yàn)中。用磨研磨干燥草藥，將20g碾碎的牽牛子放入0。/。、15%、30%、50%、70%、85%和96%的乙醇-水(160ml)中并在室溫下攪拌72小時(shí)。然后，使用與實(shí)施例1-1中相同的方法對(duì)所得混合物進(jìn)行提取、過濾、于5565。C低壓濃縮、并進(jìn)行冷凍干燥以獲得牽牛子的提取物(0.92~3.85g)(表3:作為溶劑的牽牛子的提取物的產(chǎn)率)。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>1-4及Ayc/z"os/g"ari/Se/wew的提取物的制備iSfryc/zmw/gw"/購自Kyung國dong市場(chǎng)的中藥材店，水洗去雜，干燥待用于試驗(yàn)中。用磨研磨干燥的草藥，將20g碾碎的S^yc/^os/g"a"z'5"ewew放入0。/。、15%、30%、50%、70%、85%和96%的乙醇-水(160ml)中并在室溫下攪拌72小時(shí)。然后，使用與實(shí)施例1-1中相同的方法對(duì)所得混合物進(jìn)行提取、過濾、于55~65°C低壓濃縮、并進(jìn)行冷凍干燥以獲得S^yc/z"(w/g"a"/Seme"的提取物(0.59~5.41g)(表3:作為溶劑種類的5^yc/wms/gwa^'的提取物的產(chǎn)率)。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>實(shí)施例2可溶于極性溶劑的提取物和可溶于非極性溶劑的提取物2-1可溶于己烷的提取物的制備將來自實(shí)施例1的10g50%乙醇提取物分別溶解于100ml蒸餾水和80ml甲醇中，放入分液漏斗，劇烈混合以分離出水層和己烷層。向水層再加入180ml己垸，進(jìn)行混合和分離從而獲得可溶于己垸的提取物和不溶于己垸的提取物。2-2可溶于氯仿的提取物的制備將不溶于己烷的提取物(水層)與160ml氯仿混合從而分離出氯仿層和水層。然后，將水層中加入160ml氯仿中，并進(jìn)行混合從而獲得可溶于氯仿的提取物和不溶于氯仿的提取物。2-3可溶于乙酸乙酯的提取物的制備將不溶于氯仿的提取物(水層)與140ml乙酸乙酯混合從而分離出乙酸乙酯層和水層。然后，將水層加入140ml乙酸乙酯中，并進(jìn)行混合從而獲得可溶于乙酸乙酯的提取物和不溶于乙酸乙酯的提取物。2-4溶于丁醇的提取物的制備將不溶于乙酸乙酯的提取物(水層)與40ml丁醇混合從而分離出丁醇層和水層。然后，將水層加入20ml丁醇中，并進(jìn)行混合從而獲得到可溶于丁醇的提取物和不溶于丁醇的提取物。將可溶于己烷、氯仿、乙酸乙酯和丁醇的提取物和不溶于己垸、氯仿、乙酸乙酯和丁醇的提取物在低壓下濃縮，然后冷凍干燥從而獲得可溶于己垸的提取物(0.2~0.4g)、可溶于氯仿的提取物(0.1~0.3g)、可溶于乙酸乙酯的提取物(0.3~0.6g)、可溶于丁醇的提取物(0.8~1.6g)、以及可溶于水的提取物(1.5~3.0g)。結(jié)果如表5中所示(可溶于極性溶劑和非極性溶劑的各種草藥提取物的產(chǎn)率)。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>".t指室溫。實(shí)施例3本發(fā)明的草藥提取物的混合物的制備3-1白芥籽、延胡索塊莖和牽牛子的提取物的混合物的制備將實(shí)施例1中所得50%乙醇提取物按照白芥籽提取物:延胡索塊莖提取物:牽牛子提取物為30:10:1、30:3:1、10:10:1、10:3:1、10:1:1、3:3:1和3:1:1的重量比(w/w)的比例混合以制備3-l-A、3陽1-B、3-l陽C、3-l國D、3-l-E、3-l-F和3-l-G的碾碎混合物。3-2白芥籽和延胡索塊莖的提取物的混合物的制備將實(shí)施例1中所得50%乙醇提取物按白芥籽提取物與延胡索塊莖提取物為10:1、3:1和1:1的重量比(w/w)的比例混合以制備3-2-A、3-2-B、3-2-C的碾碎混合物。3-3白芥籽和牽牛子的提取物的混合物的制備將實(shí)施例1中所得50%乙醇提取物按白芥籽提取物與牽牛子提取物為30:1、10:1和3:1的重量比(w/w)的比例混合以制備3-3-A、3-3-B、3-3-C的碾碎混合物。3-4延胡索塊莖和牽牛子的提取物的混合物的制備將實(shí)施例1中所得50%乙醇提取物按延胡索塊莖提取物與牽牛子提取物為10:1、3:1和1:1的重量比(w/w)的比例混合以制備3-4-A、3-4-B、3-4-C的碾碎混合物。3-5延胡索塊莖和呂宋果種子提取物的混合物的制備將實(shí)施例1中所得50%乙醇提取物按延胡索塊莖提取物與呂宋果種子提取物為3:1、1:1和1:3的重量比(w/w)的比例混合以制備3-5-A、3-5-B、3-5-C的碾碎混合物。3-6牽牛子和呂宋果種子提取物的混合物的制備將實(shí)施例1中所得50%乙醇提取物按牽牛子提取物與呂宋果種子提取物為1:1、1:3和1:10的重量比(w/w)的比例混合以制備3-6匿A、3-6-B、3-6-C的碾碎混合物。3-7白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的提取物的混合物的制備將實(shí)施例1中所得50%乙醇提取物按白芥籽提取物:延胡索塊莖提取物:牽牛子提取物呂宋果種子提取物為30:10:1:10、30:10:1:3、30:3:1:10、30:3:1:3、10:3:1:3、10:10:1:10、10:10:1:3、10:3:1:10和3:3:1:3的重量比(w/w)的比例混合以制備3國7陽A、3-7-B、3-7-C、3-7國D、3-7-E、3-7-F、3-7-G、3-7-H和3-7-1的碾碎混合物。<實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1>對(duì)實(shí)施例1中的提取物進(jìn)行5-HT3受體結(jié)合測(cè)定本發(fā)明進(jìn)行了針對(duì)于人源5-HT3受體的結(jié)合測(cè)定從而選擇對(duì)5-HT3受體具有親和力的草藥提取物[NagakuraYetal,，Pharmacologypropertiesofanovelgastrointestinalprokineticsbenzamideselectiveforhuman-5-HT4receptorversushuman5-HT3receptor.尸/2a/7w"/&seorc/z,39(5),pp.375-382，1999;Miyakeetal"Molecularcloningofhuman5-hydroxytamine3receptor:heterogeneityindistributionandflmctionamongspecies.Mo/./V^nwaco/ogy,pp.407-416,1995]。1-1白芥籽的提取物將SEQIDNO.1的5-HT3受體基因(HTR03A0000，UMRcDNAResourceCenter)轉(zhuǎn)染入Cos-7細(xì)胞以制備發(fā)育受體的細(xì)胞膜。將所述膜(蛋白:2(V^)接種至96孔板，然后向板中加入同位素標(biāo)記的配體和白芥籽的提取物，并混合。在將所述板在25。C孵育40分鐘后，通過卩放射性測(cè)量裝置(頂部計(jì)數(shù)器)測(cè)量所述板的放射活性。通過下述的數(shù)學(xué)式1計(jì)算抑制率。數(shù)學(xué)式l抑制率(％)=100-[(搜索底物CPM-非特異性結(jié)合CPM)/(總CPM-非特異性結(jié)合CPM)x100](^CPM:每分鐘計(jì)數(shù))如表6所示，來自50~96%的乙醇-水的白芥籽提取物表現(xiàn)出對(duì)5-HT3受體最強(qiáng)的親和力。來自于50%乙醇-水的白芥籽提取物的50%抑制濃度(IC50)為79.2pg/ml(表7)。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表9<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2>對(duì)實(shí)施例1中的提取物的5-HT4受體結(jié)合測(cè)定本發(fā)明進(jìn)行了針對(duì)人源5-HT4受體的結(jié)合測(cè)定以選擇對(duì)5-HT4受體具有親和力的草藥提取物[NagakuraYetal.，Pharmacologypropertiesofanovelgastrointestinalprokineticsbenzamideselectiveforhuman-5-HT4receptorversushuman5-HT3receptor.尸/7a7-wa./asea;r/z，39(5),pp.375-382,1999;WyngaertIVetal.，Cloningandexpressionofahumanserotonin5-HT4receptorcDNA.J7Vewrac/ze/m^7.69(5),pp.1810-1819，1997],2-1延胡索塊莖的提取物將SEQID2的5-HT4受體基因(HTR0400000，UMRcDNAResourceCenter)轉(zhuǎn)染入Cos-7細(xì)胞制備作為發(fā)育受體的細(xì)胞膜。將所述膜(蛋白:20pg)接種于96孔板，然后向板中加入同位素標(biāo)記的配體和延胡索塊莖的提取物，并混合。將所述板于25。C孵育40分鐘后，通過p放射性測(cè)量裝置(頂部計(jì)數(shù)器)測(cè)量所述板的放射活性。通過下述的數(shù)學(xué)式2計(jì)算抑制率。數(shù)學(xué)式2抑制率(％)=100-[(搜索底物CPM-非特異性結(jié)合CPM)/(總CPM-非特異性結(jié)合CPM)xlOO]^CPM:每分鐘計(jì)數(shù))如表10和11中所示，來自50~96%的乙醇-水的延胡索塊莖的提取物顯示出對(duì)5-HT4受體最強(qiáng)的親和力。來自50%乙醇-水的延胡索塊莖的提取物的50%抑制濃度(IC5o)為43.4pg/ml。表10<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>2-2牽牛子的提取物通過使用與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1相同的方法測(cè)定牽牛子的提取物對(duì)5-HT3受體的親和力。所得結(jié)果如表12和13所示。如表12和13中所示，來自50~96%的乙醇-水的牽牛子的提取物顯示出對(duì)5-HT4受體最強(qiáng)的親和力。來自50%的乙醇-水的牽牛子的提取物的50%抑制濃度(IC5。)是65.6}ig/ml。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>表13<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例3>對(duì)實(shí)施例2中的可溶于極性溶劑和非極性溶劑的提取物的5-HT3受體和5-HT4受體結(jié)合測(cè)定3-1白芥籽和呂宋果種子通過針對(duì)人源5-HT3受體的結(jié)合測(cè)定測(cè)量實(shí)施例2中從己烷、氯仿、乙酸乙酯和水提取的提取物對(duì)5-HT3受體的親和力。實(shí)驗(yàn)方法與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-1的相同，得自極性溶劑和非極性溶劑的提取物濃度如表14所示。如表14所示，得自氯仿的提取物(級(jí)份)是最有效的。表14<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>3-2延胡索塊莖和牽牛子比較實(shí)施例2中提取自己垸、氯仿、乙酸乙酯和水的提取物對(duì)5-HT4受體的親和力。實(shí)驗(yàn)方法與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-1的相同。如表15所示，得自氯仿的提取物(級(jí)份)是最有效的。表15<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例4>使用豚鼠結(jié)腸研究實(shí)施例1的提取物對(duì)5-HT3受體的拮抗效應(yīng)通過使用豚鼠結(jié)腸和得自50%乙醇的實(shí)施例1的提取物進(jìn)行器官浴槽實(shí)驗(yàn)以測(cè)量所述提取物對(duì)5-HT3受體的拮抗效應(yīng)(BriejerMetal.，Theinvitropharmacologicalprofileofprucalopride，anovelenterokineticcompound./ow"<a/<尸/zorwaco/ogy423,pp.71-83,2001)。在C02窒息之后進(jìn)行剖腹術(shù)以摘除豚鼠的結(jié)腸。固定具有平行的兩個(gè)U型夾(stirrup)的所摘除的結(jié)腸。在使用提取物進(jìn)行處理之前，將所述結(jié)腸穩(wěn)定至少30分鐘，逐漸地，所述結(jié)腸的張力變?yōu)閘g(在上樣之前所述張力為O.Og)。對(duì)于所述提取物的應(yīng)答而言，向結(jié)腸中加入乙酰甲膽堿(3,)從而誘導(dǎo)結(jié)腸收縮。將結(jié)腸穩(wěn)定15分鐘，用提取物進(jìn)行處理使每個(gè)樣本都具有相同的濃度，培養(yǎng)15分鐘。用0.1^M血清素(5-HT)進(jìn)行處理之后，檢測(cè)結(jié)腸的收縮，然后將所述結(jié)腸洗凈，重復(fù)使用所述提取物進(jìn)行處理從而制備樣本和0.3nM的血清素(5-HT)。重復(fù)使用所述方法以0.1、0.3、1、3、10和30一血清素(5-HT3)進(jìn)行處理之后，所述樣本的抑制效果如下表16中所示。得自50%的乙醇-水的牽牛子提取物的ICso的值為27.8pg/ml，得自50%的乙醇-水的延胡索塊莖提取物的所述值為76.5pg/ml，得自50%的乙醇-水的呂宋果種子提取物的所述值為138.7pg/ml。表16<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table><實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例5>使用Wister雄性大鼠的食管部分研究實(shí)施例1提取物對(duì)5-HT4受體的激動(dòng)效應(yīng)通過對(duì)Wister雄性大鼠的食管部分和得自50%乙醇的實(shí)施例1的提于5-HT4受體的激動(dòng)效應(yīng)。測(cè)量方法公開于BriejerM等人的文件中。(Theinvitropharmacologicalprofileofprucalopride,anovelenterokineticcompound.五wra/eaw/ow"a/o/尸/2a/7waco/ogv423,pp.71-83'，2001;SondaSetal"Synthesisandpharmacologicalpropertiesofbenzamidederivativesasselectiveserotonin4receptoragonists._S/oorgaw/cc&AfWc/wa/CAew&^y,12，pp.2737-2747，2004)。在C02窒息之后進(jìn)行剖腹術(shù)以摘除SD大鼠的食管。將具有平行的兩個(gè)U型夾的所摘除的結(jié)腸固定。在使用提取物進(jìn)行處理之前將所述結(jié)腸穩(wěn)定至少60分鐘，逐漸地，所述食管在早期的30分鐘的張力變?yōu)閘g(在上樣之前所述張力為O.Og)。對(duì)于所述提取物的應(yīng)答而言，向食管加入卡巴膽堿(3,)從而誘導(dǎo)收縮，并穩(wěn)定所述食管，然后用O.l、0.3、1、3、10和30pM血清素(5-HT)進(jìn)行處理從而將在該時(shí)間的最大松弛力設(shè)定為100%。將食管洗凈之后，以15分鐘間隔更換溶液進(jìn)行穩(wěn)定1小時(shí)。然后，用卡巴膽堿(3nM)處理所述食管從而誘導(dǎo)收縮，并進(jìn)行穩(wěn)定。用3、10、30、100、300ng/ml的提取物處理后，測(cè)量食管的收縮效果。此時(shí)，在經(jīng)過GR13808(30nM)處理之后，只對(duì)那些顯示對(duì)食管具有收縮效果的提取物進(jìn)行處理，并測(cè)定所述提取物對(duì)5-HT4受體的激動(dòng)效應(yīng)。所得結(jié)果如下表17中所示。得自50。/。的乙醇-水的延胡索塊莖提取物的EC50(中間有效濃度)的值為12.1pg/ml，得自50%的乙醇-水的牽牛子提取物的所述值為67.4pg/ml，得自50%的乙醇-水的呂宋果種子提取物的所述值為38.8|ag/ml。表17<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例6>本發(fā)明的提取物的胃排空延遲效應(yīng)的確認(rèn)通過使用胃排空延遲模型測(cè)量實(shí)施例1中得自50%的乙醇-水的提取物和實(shí)施例3中的混合物的胃排空延遲效應(yīng)(OzakiAandSukamotoetal.，Improvementofcisplatin國inducedemesisanddelayedgastricemptyingbyKB-R6933,anovel5-HT3receptorantagonist.Gewera///zarmaco/ogy,^2，pp.283-288,1999)。將200~250g的雄性SD大鼠在供給標(biāo)準(zhǔn)食物和水，于22-24°C和60~80RH%(相對(duì)濕度％)的條件下詞養(yǎng)一周。根據(jù)重量將所述大鼠分開，饑餓24小時(shí)。將每種提取物溶解于生理鹽溶液固定劑量或羥丙基甲基纖維素(HPMC，3%)，并將所述溶液口服施用于所述大鼠。60分鐘后，向所述大鼠的腹腔施用10mg/kg的順鉑(在50°C溶解于生理鹽溶液并在施用時(shí)冷卻到37°C)。向每只大鼠口服施用1.5ml半固體檢測(cè)餐(含有1.5。/。MC的0.05n/。酚紅溶液)。1530分鐘之后，處死大鼠移除胃，測(cè)定胃中殘留的酚紅的量。將胃和內(nèi)容物在100ml的0.1NNaOH溶液中溶解20秒，然后在室溫下放置l小時(shí)。將5ml勻漿轉(zhuǎn)移至試管中。然后，向所述試管中加入0.5ml三氯乙酸(20%)用于蛋白質(zhì)沉淀，將所述試管以2500xg離心20分鐘。再加入作為平衡液的2ml的0.5NNaOH溶液，在560nm測(cè)定吸光度(ABS56。nm)。根據(jù)以下數(shù)學(xué)式3計(jì)算胃排空率。數(shù)學(xué)式3胃排空(%)=[1-(B/A)]X100A:在施用酚紅后立刻從胃中回收的酚紅的總量B:在施用酚紅后殘留在胃中的酚紅的量關(guān)于所述提取物及其混合物的胃排空延遲效應(yīng)的結(jié)果如下表18和19中所示。每種提取物都顯示出胃排空延遲效應(yīng)(表1S)，所述提取物的混合物也顯示出胃排空延遲效應(yīng)(表19)。特別地，延胡索塊莖和牽牛子提取物的混合物，以及延胡索塊莖和呂宋果種子提取物的混合物最有效。1)所述提取物的胃排空延遲效應(yīng)表18<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>在上表中，'正常，代表沒有順鉑和本發(fā)明的提取物的正常組，'對(duì)照，代表具有生理鹽溶液的陽性對(duì)照組。2)提取物混合物的胃排空延遲效應(yīng)表19<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>在上表中，'正常，代表沒有順鉑和本發(fā)明的提取物的正常組，'對(duì)照'代表具有生理鹽溶液的陽性對(duì)照組。<實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例7>本發(fā)明的提取物的半固體胃排空延遲效應(yīng)的確認(rèn)通過使用半固體胃排空模型測(cè)定實(shí)施例1中得自50%的乙醇-水的提取物和實(shí)施例3中的混合物的半固體胃排空效應(yīng)(CalatayudS，Garcia-ZaragozaE，HernandezC,QuintanaE，F(xiàn)elipoV，EspluguesJV,BarrachinaMD.DownregulationofnNOSandsynthesisofPGsassociatedwithendotoxin墨induceddelayingastricemptying.AmJPhysiolGastrointestLiverPhysiol.2002Dec;283(6):Gl360-7)。將200~250g的雄性SD大鼠在供給標(biāo)準(zhǔn)食物和水，于22-24°C和60~80RH%(相對(duì)濕度％)的條件下飼養(yǎng)一周。根據(jù)重量將所述大鼠分開，饑餓24小時(shí)。在饑餓期間，供給飲水，但在實(shí)驗(yàn)前3小時(shí)停止供給。將每種提取物溶解于生理鹽溶液固定劑量或羥丙基甲基纖維素(HPMC，3%)，并將所述溶液口服施用給所述大鼠。45分鐘后，向每只大鼠口服施用2ml半固體檢測(cè)餐(含有1.5%MC的0.05%的酚紅溶液)，所述檢測(cè)餐通過壓碎溶解于水中的動(dòng)物飼料制得。35分鐘之后，處死大鼠移除胃，對(duì)具有半固體檢測(cè)餐的胃稱重。根據(jù)以下的數(shù)學(xué)式4計(jì)算胃排空率。數(shù)學(xué)式4胃排空(％)=[l-(殘留在胃中的半固體餐重/殘留于0小時(shí)的胃中的半固體餐重)]xioo("殘留于o小時(shí)的胃中的半固體餐重"是從在其施用后立即從所述胃獲得的殘留的半固體餐測(cè)定)關(guān)于所述提取物及它們的混合物的胃排空延遲效應(yīng)的結(jié)果可見于下表20和21。每種提取物都顯示出胃排空延遲效應(yīng)(表20)，且所述提取物的混合物顯示出比所述提取物更有效的胃排空延遲效應(yīng)(表21)。特別地，延胡索塊莖和牽牛子提取物的混合物，以及延胡索塊莖和呂宋果種子提取物的混合物是最有效的。1)所述提取物的半固體胃排空效應(yīng)表20<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>在上表中，'對(duì)照'指用施用生理鹽溶液而非所述提取物的對(duì)照組2)提取物混合物半固體胃排空效應(yīng)表21<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>在上表中，'對(duì)照'指施用生理鹽溶液而非所述提取物的對(duì)照組。<實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例8>本發(fā)明的提取物的上胃腸道活動(dòng)效果的確認(rèn)測(cè)量實(shí)施例1中得自50%的乙醇-水的提取物和實(shí)施例3中的混合物的上胃腸道活動(dòng)效果。將220~230g的雄性SD大鼠在供給標(biāo)準(zhǔn)食物和水，于22-24°C和6080RH%(相對(duì)濕度％)的條件下飼養(yǎng)一周。根據(jù)重量將所述大鼠分開，饑餓24小時(shí)。為了抑制上胃腸道活動(dòng)效果，向所述大鼠的腹腔施用lmg/kg的阿托品(在50。C溶解于生理鹽溶液并在施用時(shí)冷卻到37°C)。然后，將每種提取物的固定劑量溶解于生理鹽溶液或羥丙基甲基纖維素(HPMC，3%)，并將所述溶液口服施用給所述大鼠。l小時(shí)后，向每只大鼠施用lml異硫氰酸熒光素標(biāo)記的葡聚糖(FITC)(在生理鹽溶液中將5mMFITC溶液稀釋10倍)。15分鐘之后，對(duì)大鼠進(jìn)行尸體解剖。將來自portiopyoricaventriculi至闌尾的小腸等切為10段。將所述組織浸泡于lml生理鹽溶液中，然后放置于冰箱中。l天后，檢測(cè)每等份溶液的熒光。使用數(shù)學(xué)式5可從所檢測(cè)值獲得在所述小腸中異硫氰酸熒光素標(biāo)記的葡聚糖的分配比例，且胃腸道的運(yùn)動(dòng)也在異硫氰酸熒光素標(biāo)記的葡聚糖分配的幾何中心。同時(shí)，將胃分離并稱重從而測(cè)量胄排空。數(shù)學(xué)式51)每段的熒光分?jǐn)?shù)-(每段的熒光z總體)xioo2)幾何中心-p(每段的熒光分?jǐn)?shù)x段數(shù))]noo每種草藥提取物及其混合物對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的效果如下表22(本發(fā)明的提取物的胃腸運(yùn)動(dòng)延遲效應(yīng))和表23(在本發(fā)明的提取物的胃腸運(yùn)動(dòng)效果的延遲模型中的胃排空效應(yīng))中所示?？梢源_認(rèn)草藥提取物的混合物比草藥提取物更有效。表22<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>在上表中，'對(duì)照，指用生理鹽溶液而非所述提取物處理的陽性對(duì)照組。表23<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>在上表中，'對(duì)照'指用生理鹽水而非所述提取物處理的陽性對(duì)照組。以下制備實(shí)施例中含有選自本發(fā)明的白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的一或多種提取物。但是，所述制備實(shí)施例僅旨在以具體的方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行解釋，而非旨在以任意的方式對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行制備實(shí)施例l注射劑型的制備實(shí)施例1的提取物焦亞硫酸鈉羥苯甲酯羥苯丙酯注射用蒸餾水100mg3.0mg0.8mg0.1mg通過本領(lǐng)域己知的方法將所述成分混合并制成2ml的總體積,述混合物填充入2ml劑量的安瓿，滅菌從而制成注射劑形。制備實(shí)施例2注射劑型的制備實(shí)施例2的提取物焦亞硫酸鈉羥苯甲酯羥苯丙酯注射用蒸餾水10~30mg3.0mg0.8mg0.1mg通過本領(lǐng)域已知的方法將所述成分混合并制成2ml的總體積,述混合物填充入2ml劑量的安瓿，滅菌從而制成注射劑形。制備實(shí)施例3注射劑型的制備實(shí)施例3的提取物焦亞硫酸鈉羥苯甲酯羥苯丙酯注射用蒸餾水100~300mg3.0mg0.8mg0.1mg通過本領(lǐng)域己知的方法將所述成分混合并制成2ml的總體積<述混合物填充入2ml劑量的安瓿，滅菌從而制成注射劑形。所將所將所將制備實(shí)施例4片劑的制備實(shí)施例1的提取物100~300mg乳糖lOOmg淀粉lOOmg硬脂酸鎂將所述成分混合并根據(jù)本領(lǐng)域已知的片劑制備方法制成片劑。制備實(shí)施例5片劑的制備實(shí)施例2的提取物10~30mg乳糖100mg淀粉lOOmg硬脂酸鎂將所述成分混合并根據(jù)本領(lǐng)域已知的片劑制備方法制成片劑。制備實(shí)施例6片劑的制備實(shí)施例3的提取物100~1000mg乳糖100mg淀粉100mg硬脂酸鎂適量將所述成分混合并根據(jù)本領(lǐng)域已知的片劑制備方法制成片劑。制備實(shí)施例7膠囊的制備實(shí)施例1的提取物100300mg乳糖50mg淀粉50mg滑石2mg將所述成分混合并根據(jù)本領(lǐng)域已知的膠囊制備方法填充入明膠膠^從而制成膠囊。制備實(shí)施例8膠囊的制備實(shí)施例2的提取物乳糖淀粉滑石硬脂酸鎂10~30mg50mg50mg2mg將所述成分混合并根據(jù)本領(lǐng)域已知的膠囊制備方法填充入明膠膠〗從而制成膠囊。制備實(shí)施例9膠囊的制備實(shí)施例3的提取物乳糖淀粉滑石硬脂酸鎂100~1000mg50mg50mg2mg將所述成分混合并根據(jù)本領(lǐng)域已知的膠囊制備方法填充入明膠膠^從而制成膠囊。制備實(shí)施例10液體制劑的制備實(shí)施例1的提取物糖異構(gòu)化糖檸檬香料純化水100~300mg20g20g使得所述液體制劑的總體積為100ml的:根據(jù)本領(lǐng)域已知的液體制劑制備方法將所述成分混合，填充入100ml棕色瓶中，滅菌從而制備成液體制劑。制備實(shí)施例11液體制劑的制備實(shí)施例2的提取物10~30mg糖20g異構(gòu)化糖20g檸檬香料適量純化水使得所述液體制劑的總體積為100ml的量根據(jù)本領(lǐng)域已知的液體制劑制備方法將所述成分混合，填充入100ml棕色瓶中，滅菌從而制備成液體制劑。制備實(shí)施例12液體制劑的制備實(shí)施例3的提取物100~1000mg糖20g異構(gòu)化糖20g檸檬香料適量純化水使得所述液體制劑的總體積為100ml的量根據(jù)本領(lǐng)域已知的液體制劑制備方法將所述成分混合，填充入100ml棕色瓶中，滅菌從而制備成液體制劑。工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的述提取物或其混合物可用作用于預(yù)防和治療胃腸道活動(dòng)紊亂的藥物組合物;并且由于其HT3受體拮抗作用和/或HT4受體激動(dòng)作用，其還能夠促進(jìn)胃腸道活動(dòng)而用作健康功能性食品。權(quán)利要求1.白芥籽(SinapisSemen)、延胡索塊莖(CorydalisTuber)、牽牛子(PharbitidisSeed)和呂宋果種子(StrychniIgnatiiSemen)的草藥提取物。2.權(quán)利要求1的草藥提取物，其中所述草藥提取物從水、C1C4的低級(jí)醇、或其混合溶劑提取。3.權(quán)利要求l的草藥提取物，其中所述草藥提取物從選自己垸、氯仿、乙酸乙酯和水的非極性溶劑提取。4.權(quán)利要求1的草藥提取物，其中所述草藥提取物是白芥籽和延胡索塊莖的草藥提取物的混合物。5.權(quán)利要求4的草藥提取物，其中所述混合物具有的白芥籽的草藥提取物:延胡索塊莖的草藥提取物的混合比例為從1:1到10:1的重量比(w/w)。6.權(quán)利要求1的草藥提取物，其中所述草藥提取物是白芥籽和牽牛子的草藥提取物的混合物。7.權(quán)利要求6的草藥提取物，其中所述混合物具有的白芥籽的草藥提取物:牽牛子的草藥提取物的混合比例為從1:1到30:1(w/w)。8.權(quán)利要求1的草藥提取物，其中所述草藥提取物是延胡索塊莖和牽牛子的草藥提取物的混合物。9.權(quán)利要求8的草藥提取物，其中所述混合物具有的延胡索塊莖的草藥提取物:牽牛子的草藥提取物的混合比例為從1:1到10:1(w/w)。10.權(quán)利要求1的草藥提取物，其中所述草藥提取物是延胡索塊莖和呂宋果種子的草藥提取物的混合物。11.權(quán)利要求IO的草藥提取物，其中所述混合物具有的延胡索塊莖的草藥提取物呂宋果種子的草藥提取物的混合比例為從3:1到1:3(w/w)o12.權(quán)利要求1的草藥提取物，其中所述草藥提取物是牽牛子和呂宋果種子的草藥提取物的混合物。13.權(quán)利要求12的草藥提取物，其中所述混合物具有的牽牛子的草藥提取物呂宋果種子的草藥提取物的混合比例為從1:1到1:10(W/W)<514.權(quán)利要求1的草藥提取物，其中所述草藥提取物是白芥籽、延胡索塊莖和牽牛子的草藥提取物的混合物。15.權(quán)利要求14的草藥提取物，其中所述混合物具有的白芥籽的草藥提取物延胡索塊莖的草藥提取物:牽牛子的草藥提取物的混合比例為(1~30):(1~10):1(w/w)。16.權(quán)利要求1的草藥提取物，其中所述草藥提取物是白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的草藥提取物的混合物。17.權(quán)利要求16的草藥提取物，其中所述混合物具有的白芥籽的草藥提取物延胡索塊莖的草藥提取物呂宋果種子的草藥提取物:牽牛子的草藥提取物的混合比例為(l~30):(l~10):l:(l~10)(w/w)。18.用于預(yù)防和治療胃腸道活動(dòng)紊亂的組合物，其中所述組合物含有權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)的草藥提取物作為活性成分。19.權(quán)利要求18的組合物，其中所述胃腸道活動(dòng)紊亂是源自5-HT3受體和/或5-HT4受體拮抗作用的過興奮的紊亂。20.權(quán)利要求19的組合物，其中所述胃腸道活動(dòng)紊亂選自功能性消化不良例如早飽、疼痛、上腹部疼痛、飽感的假象、燒心、惡心和嘔吐；潰瘍性消化不良、非潰瘍性消化不良；反流性食管炎、胃能動(dòng)性麻痹；便秘；腸易激綜合征；過敏性結(jié)腸炎；糖尿病型胃腸道活動(dòng)紊亂；源自化療的胃腸道活動(dòng)紊亂；以及源自消化道活動(dòng)紊亂的腸閉鎖和源自胃腸道紊亂的強(qiáng)直性肌營養(yǎng)不良。21.用于預(yù)防和改善胃腸道活動(dòng)紊亂的保健食品，其含有權(quán)利要求1-17的草藥提取物作為活性成分。22.權(quán)利要求21的保健食品，其中所述食品是粉末、顆粒、片劑、膠囊、糖漿或飲料。23.用于制備權(quán)利要求1的草藥提取物的方法，其包括將選自白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的一或多種草藥用水、C1C4的低級(jí)醇或其混合物于45~75°C提取1-5次，6580小時(shí)。24.用于制備選自白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的一或多種提取物、可溶于極性溶劑的提取物、以及可溶于非極性溶劑的提取物的方法，該方法包括用水、低級(jí)醇或其混合物對(duì)選自白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的一或多種草藥進(jìn)行提取，過濾并濃縮以獲得草藥提取物的第一個(gè)步驟；順序用己烷、氯仿和乙酸乙酯處理第一個(gè)歩驟的草藥提取物，從而收集可溶于非極性溶劑中的提取物的第二個(gè)步驟；以及用水、甲醇、丁醇或其混合物處理第二個(gè)步驟的可溶于非極性溶劑中的提取物，從而獲得可溶于極性溶劑中的草藥提取物的第三個(gè)步驟。全文摘要本發(fā)明涉及白芥籽、延胡索塊莖、牽牛子和呂宋果種子的草藥提取物，以及含有所述草藥提取物的用于治療和預(yù)防胃腸活動(dòng)紊亂的組合物。通過HT₃受體拮抗和/或HT₄受體激動(dòng)，本發(fā)明的提取物具有促進(jìn)胃腸活動(dòng)的顯著效果。文檔編號(hào)A61P1/00GK101394859SQ200780007077公開日2009年3月25日申請(qǐng)日期2007年2月27日優(yōu)先權(quán)日2006年2月28日發(fā)明者劉武姬,孫晉法,孫美苑,崔祥珍,曹宗煥,李在杰,李太鎬,白南濬,金舜會(huì),陳美琳申請(qǐng)人:東亞制藥株式會(huì)社